治疗普拉德-威利综合征的方法

本申请是申请日为2015年9月14日、发明名称为“治疗普拉德-威利综合征的方法”的中国专利申请No.201580049147.2的分案申请。

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求于2014年9月19日提交的美国临时申请号62/052,957的优先权，所述申请的公开内容整体结合在本文中。

技术领域

本公开涉及治疗普拉德-威利综合征(Prader-Willi Syndrome)的方法以及相关组合物。

背景技术

普拉德-威利综合征(PWS)是大约在每16,000名新生儿中发生一例的遗传病症。这种罕见的复杂且多系统的遗传病症由染色体15q11-q13上父系遗传的印记基因的表达缺失导致，所述缺失可以通过三种主要机制发生：父源性微缺失、母源性单亲二体性和印记缺陷。

PWS的过程和自然历史一般被描述为由两个不同的临床阶段组成，尽管当前的知识表明这些比最初认为的更微妙。第一阶段在新生儿和婴儿期早期期间发生，并且特征在于不同程度的张力减退(hypotonia)、哭泣无力、差的吮吸反射、喂食困难(发育停滞)、发育迟滞、温度不稳定和未发育的性器官(性腺功能减退(hypogonadism))。在该第一阶段中运动和语言发育迟滞也是明显的。新生儿症状通常在9-25个月的年龄时改善，同时肌肉张力改善，儿童变得更活泼，并且具有更适合的食欲。

PWS的第二阶段(2-4岁开始)特征在于更快的体重增加、摄食过量的发病和恶化和继续的生长和发育迟滞。此外，在摄食过量出现时，观察到一系列单独的和明显负性的适应不良或问题行为。这些适应不良(问题)行为包括发脾气(temper tantrums)、易怒(irritability)、固执(stubbornness)、重复和强迫行为(repetitive and compulsivebehaviors)和攻击性(aggression)。需要外部食物限制和监督。另外，患有PWS的个体面临威胁生命的肥胖症的风险。一旦寻找食物的行为随之产生，父母通常将会实施食物安全、降低的热量摄入、和对餐食和围绕食品准入的持续监督。即使在监督的情况下，许多患有PWS的人在获得食物方面非常擅长和聪明。作为威胁生命的病况的肥胖症以及同时并且经常的严重适应不良行为困难，对于患有该综合征的个体及其家庭来说是核心的挑战性问题。

发明内容

本公开是基于意外发现，即选择性催产素受体激动剂可以在治疗普拉德-威利综合征方面有效。

在一个方面中，本公开特征在于一种治疗普拉德-威利综合征的方法，所述方法包括向需要其的患者施用有效量的包含选择性催产素受体激动剂或其药用盐的组合物。

根据说明书和权利要求，其他特征、目标和优点将会是显而易见的。

具体实施方式

本公开总体涉及治疗普拉德-威利综合征的方法，所述方法包括向需要其的患者施用有效量的含有选择性催产素受体激动剂或其药用盐的组合物。术语“选择性催产素受体激动剂”是指这样的化合物，所述化合物对人催产素(hOT)受体的激动剂活性比对人血管加压素受体(例如，人V2(hV2)受体)更大并且与催产素相比具有更高的选择性。如在本文中提及的，激动剂活性表示为EC

在一些实施方案中，选择性催产素受体激动剂可以是式(I)的化合物：

其中W和X中的每一个独立地是CH

术语“烷基”是指饱和的、直链或支链烃部分，如-CH

取代基部分可以是，例如，卤素(氟、氯或溴)原子、烷基、环烷基、羟基(OH)、烷氧基(O-烷基)、烷硫基(-S-烷基)、烷基羟基(-烷基-OH)、叠氮化物(-N

在一些实施方案中，参看式(I)，当C是4-羟基脯氨酸时，A可以是在苯环上被卤素或C

在一些实施方案中，参看式(I)，当A是在苯环上被C

在一些实施方案中，参看式(I)，当A是在苯环上被卤素取代的苯丙氨酸时，B或D可以是在α-碳上被C

在一些实施方案中，式(I)中的A可以是4-卤代苯丙氨酸，例如，Cpa(4-氯苯丙氨酸)；4-溴苯丙氨酸。在一些实施方案中，A可以是在侧链上被5或6元杂芳环取代的丙氨酸，例如，Ala(2-Fur)(2-呋喃基丙氨酸)；Ala(3-Fur)(3-呋喃基丙氨酸)；2-Thi(2-噻吩基丙氨酸)；3-Thi(3-噻吩基丙氨酸)；2-或3-吡咯基丙氨酸；2-、3-或4-吡啶基丙氨酸；2-、4-或5-咪唑基丙氨酸；2-、4-或5-噻唑基丙氨酸；和2-或5-噻二唑基；或5-四唑基。在一些实施方案中，A可以是酪氨酸或A可以是在苯环的4位被C

在一些实施方案中，式(I)中的B可以是异亮氨酸，或者是被C

在一些实施方案中，式(I)中的C可以是任选地在脯氨酸环的4位被羟基、C

在一些实施方案中，式(1)中的D可以是亮氨酸、Hol(高亮氨酸)、异亮氨酸和被C

在一些实施方案中，式(I)中的E可以是甘氨酸或AzGly(氮杂甘氨酸)。

式(I)的化合物的子集是这样的化合物，其中W是CH

式(I)的某些示例性化合物包括：

在一些实施方案中，选择性催产素受体激动剂是式(II)的化合物：

其中n是0、1或2；p是0、1、2、3、4、5或6；R

式(II)中基团的取代基部分可以选自氟(F)、氯(Cl)和溴(Br)原子以及烷基、羟基(OH)、烷氧基(O-烷基)和烷硫基(S-烷基)。

在一些实施方案中，当式(II)中的R

式(II)的某些示例性化合物包括：

例如，在WO 2011/035330和WO 2009/122285中已经描述了式(I)和(II)的其他示例性化合物，其通过引用结合在本文中。

本公开还特征在于药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的上述选择性催产素受体激动剂(例如，式(I)和(II)的化合物)中的至少一种(例如，两种以上)或其药用盐作为活性成分，以及至少一种药用佐剂、稀释剂或载体。药用盐的实例包括酸加成盐，例如通过与下列各项反应形成的盐：氢卤酸(如盐酸)、无机酸(如硫酸、磷酸和硝酸)，以及脂族酸、脂环族酸、芳族酸或杂环磺酸或羧酸(如甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、丙酮酸、对羟基苯甲酸、双羟萘酸(embonic acid)、甲磺酸、乙磺酸、羟基乙磺酸、卤代苯磺酸、三氟乙酸、三氟甲磺酸、甲苯磺酸和萘磺酸)。

式(I)和(II)的化合物是可商购的或者可以通过本领域中已知的方法制备，如在WO 2011/035330和WO 2009/122285中描述的那些，其通过引用结合在本文中。

本文所述的药物组合物可以任选地包括至少一种另外的选自下列各项的添加剂：崩解剂、粘合剂、润滑剂、调味剂、防腐剂、着色剂及其任意混合物。这样的和其他添加剂的实例可以发现于“药物赋形剂手册(Handbook of Pharmaceutical Excipients)”；A.H.Kibbe编，第3版，美国药学协会(American Pharmaceutical Association)，USA，以及药物出版社(Pharmaceutical Press)，UK，2000。

本文所述的药物组合物可以适用于口服、静脉内、肌内、局部、腹膜内、经鼻、口腔、眼内、耳内、舌下或皮下施用或者适用于经由呼吸道施用(例如，以气雾剂或空气悬浮细粉的形式)。在一些实施方案中，组合物可以是片剂、胶囊剂、粉剂、微粒剂、颗粒剂、糖浆剂、混悬剂、溶液、经皮贴剂或栓剂的形式。

在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以含有溶解于水溶液中的选择性催产素受体激动剂。例如，所述组合物可以包含氯化钠水溶液(例如，含有0.9重量％的氯化钠)以充当稀释剂。

此外，本公开涉及如以上概述的选择性催产素受体激动剂用于治疗普拉德-威利综合征或者用于制造用于治疗普拉德-威利综合征的药物的用途。此外，本公开涉及如以上概述的选择性催产素受体激动剂在用于治疗普拉德-威利综合征的药物中或者在制造用于治疗普拉德-威利综合征的药物中的用途。

本公开还提供用于治疗普拉德-威利综合征(或用于在治疗普拉德-威利综合征中使用)的包含选择性催产素受体激动剂或其药用盐的组合物。普拉德-威利综合征的治疗可以是减少摄食过量的治疗和/或减少强迫行为的治疗。

选择性催产素受体激动剂是这样的化合物，所述化合物对人催产素(hOT)受体的激动剂活性比对人血管加压素受体(例如，人V2(hV2)受体)更高并且与催产素相比具有更高选择性。激动剂活性和选择性可以通过在WO2009/122285(PCT/IB2009/005351)中给出的方法测量。在这种方法中，在转录报告基因测定中通过将hOT受体表达DNA与含有调节萤火虫荧光素酶表达的细胞内钙响应型启动子元件的报告DNA一起瞬时转染至中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系中来确定化合物对hOT受体的激动剂活性。关于对这种测定的进一步指导，参见Boss,V.,Talpade,D.J.,Murphy,T.J.J.Biol.Chem.1996年5月3日；271(18),10429-10432。细胞被暴露于每剂量稀释10倍的化合物的连续稀释液达5小时，接着溶解细胞，测定荧光素酶活性，并且借助非线性回归确定化合物效力和EC

在一些实例中，选择性催产素受体激动剂具有至少50(例如，至少100、至少200、至少244、至少300、至少500、至少1,000、至少2,000、至少3,000、至少5,000、至少10,000、至少20,000或至少30,000)的hV2/hOT选择比。

选择性催产素受体激动剂可以是式(I)的化合物：

其中

W和X中的每一个独立地是CH

A是选自由下列各项组成的组的氨基酸：在侧链上被5或6元杂芳环取代的丙氨酸；酪氨酸；和在苯环上被卤素、C

B是选自由下列各项组成的组的氨基酸：异亮氨酸；和在α-碳上被C

C是选自由下列各项组成的组的氨基酸：任选地在侧链上被羟基、C

D是选自由下列各项组成的组的氨基酸：亮氨酸；高亮氨酸；异亮氨酸；和在α-碳上被C

E是选自由下列各项组成的组的氨基酸：甘氨酸和氮杂甘氨酸。

在一些实例中，W是CH

选择性催产素受体激动剂可以是式(II)的化合物：

其中

n是0、1或2；

p是0、1、2、3、4、5或6；

R

R

R

R

W和X中的每一个独立地是CH

烷基是C

芳基是未取代或取代的苯基；并且

环烷基是C

组合物可以用于通过鼻内施用的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。组合物可以用于每天施用三次，例如其中每次施用递送约1mg至约10mg选择性催产素受体激动剂，和/或其中每次施用在餐前进行。

组合物可以用于其中治疗包括施用约0.5mg至约30mg的选择性催产素受体激动剂的每日剂量的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中治疗包括施用约5.76mg至约28.8mg的选择性催产素受体激动剂的每日剂量的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中治疗包括施用约10mg至约28.8mg的选择性催产素受体激动剂的每日剂量的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中治疗包括施用约28.8mg卡贝缩宫素的每日剂量的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中组合物包含水溶液并且将选择性催产素受体激动剂溶解在所述水溶液中的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中组合物包含氯化钠水溶液的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

组合物可以用于其中水溶液包含约0.9重量％的氯化钠的用途(用于治疗普拉德-威利综合征)。

本文所述的选择性催产素受体激动剂的典型剂量可以在大范围内变化并且将会取决于多种因素如每个患者的个体需求和给药途径。示例性的每日剂量可以是至少约0.5mg(例如，至少约1mg、至少约5mg、至少约5.76mg、至少约10mg或至少约15mg)和/或至多约30mg(例如，至多约28.8mg、至多约25mg、至多约20mg或至多约15mg)的选择性催产素受体激动剂(例如，卡贝缩宫素)。技术人员或医师可以考虑与此剂量范围和实际实施相关的变化从而适应于手边的情况。

在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以作为鼻内剂型(例如，鼻喷雾)施用。在这样的实施方案中，组合物可以以单剂量或分开的剂量例如1、2或3个子剂量(例如，喷鼻(puffs))递送至一个或两个鼻孔。例如，组合物可以通过将鼻腔喷雾的三次喷鼻递送至两个鼻孔中来施用，以使得每个鼻孔在每次喷鼻中接受含1.6mg选择性催产素受体激动剂(例如，卡贝缩宫素)的剂量。在这样的实例中，每次施用将总计9.6mg的选择性催产素受体激动剂递送至患者。在一些实施方案中，组合物的每次施用可以向患者递送至少约1mg(例如，至少约2mg、至少约3mg、至少约4mg或至少约5mg)和/或至多约10mg(例如，至多约9mg、至多约8mg、至多约7mg或至多约6mg)的选择性催产素受体激动剂。

在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以每天施用一次。在一些实施方案中，药物组合物可以每天施用多于一次(例如，每天两次、每天三次或每天四次)。

在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以在餐前施用。在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以与食物一起施用或不与食物一起施用。

本文中引用的所有出版物(例如，专利、专利申请公布和文章)的内容通过整体引用结合于此。

以下实施例是说明性的而并非意欲是限制的。

方法

在具有PWS的遗传学确认诊断和基于Miller等人，2011(Am J Med Genet A,155A(5):1040-1049)中描述的标准的记载的营养阶段3的10至18岁年龄之间的患有PWS的受试者中，进行前瞻性、双盲、安慰剂对照、平行试验。试验包括筛查阶段、14天治疗阶段和后续阶段。受试者，连同其父母/看护者，需要在试验过程期间访问研究场所4次并且参加2次电话评估。以下列出试验日程。

·访问1：筛查阶段(第-7天到第0天)

·访问2：基线第一天现场给药(第1天)

·访问3：第2天现场给药(第2天)

·电话评估(第8±1天)

·访问4：治疗终止访问(第15天)

·后续电话(第19±3天)

遵循适当的知情许可操作，受试者经历筛查评价以在随机化之前确定资格。在随机化之后，在所选择的访问时进行功效测量和其他评估，包括身体检查、生命体征和用于临床实验室和药代动力学评价的血液样品的收集。在整个试验中，针对不良事件密切监测受试者。

在研究场所的第一次给药之前，关于鼻腔喷雾装置的正确使用和研究性药物产品(investigational medicinal product，IMP)在家递送的方法对父母/护理者进行培训。指导父母/护理者在餐前在以下间隔内给每个鼻孔施用3次不明IMP鼻内喷雾泵入，每天3次：

上午剂量：上午06:00-上午09:00

中午剂量：上午11:00-下午1:00

晚上剂量：下午4:30-下午6:00

在研究场所的现场工作人员的观察下，在访问2(第1天)和访问3(第2天)进行初始IMP给药，以确保正确的施用技术。

受试者数量

将具有PWS的遗传学确认诊断和记载的营养阶段3PWS标准(基于Miller等人，2011)的38名10-18岁的受试者随机化。36名受试者完成了研究。

所选择的用于入选/排除的标准

1.10-18岁的男性或女性(二者均入选)。

2.PWS的遗传学确认诊断。

3.基于Miller等人，2011(Am J Med Genet A,155A(5):1040-1049)的营养阶段3PWS标准。

4.在筛查(访问1)时大于13的普拉德-威利综合征中摄食过量问卷-响应(Hyperphagia in Prader-Willi Syndrome Questionnaire-Responsiveness，HPWSQ-R)评分。

1.已知的不同于PWS的认知损伤(cognitive impairment)的遗传、激素或染色体原因。

2.当前活跃精神病症状的存在。

3.任何心血管病症、癫痫、频繁偏头痛或严重哮喘的存在。

4.有资格的医疗保健提供者作出的自闭症谱系障碍的先前诊断。

5.在筛查1年内的鼻或窦手术(访问1)。

6.慢性鼻窦炎(sinusitis)-多于3次/年。

7.可能会影响鼻内药物沉积的其他鼻部疾病。

8.在筛查时血清钠<135mmol/L(访问1)。

药物产品

在该试验中使用的IMP是卡贝缩宫素鼻内喷雾和安慰剂鼻内喷雾。

通过在0.9％无菌氯化钠溶液中溶解160卡贝缩宫素来制备卡贝缩宫素鼻内喷雾。具体地，将预先称重的卡贝缩宫素粉末用氯化钠溶液重构并且随后转移至鼻腔喷雾装置。每次喷雾泵驱动递送50μL体积的含有1.6mg卡贝缩宫素的溶液。每个剂量由在每个鼻孔中3次喷雾泵驱动组成以递送总计9.6mg卡贝缩宫素。卡贝缩宫素的每日剂量是28.8mg。

通过将0.9％无菌氯化钠溶液转移至鼻腔喷雾装置来制备安慰剂鼻内喷雾。每次喷雾泵驱动递送50μL体积的溶液。每个剂量由在每个鼻孔中3次喷雾泵驱动组成。

终点

主要终点

在该试验中测量的主要终点是在由父母/看护者完成的普拉德-威利综合征中摄食过量问卷-响应(HPWSQ-R)中从访问2到访问4的总分的变化。

次要终点

该试验的次要终点是：

1.在访问4的治疗之后临床总体印象-改善(CGI-I)。

2.针对以下测量从访问2到访问4的变化：

·HPWSQ-R摄食过量行为、驱动和严重程度域(severity domain)评分。

·由临床医师完成的普拉德-威利综合征中摄食过量问卷-响应(HPWSQ-R-C)总分。

·HPWSQ-R-C摄食过量行为、驱动、和严重程度域评分。

3.针对以下测量从访问1到访问4的变化：

·儿童的耶鲁-布朗强迫症量表(Yale-Brown Obsessive Compulsive Scale，CY-BOCS)评分。

·Reiss Profile的食物域。

4.卡贝缩宫素的种群PK/PD关系。

安全性终点：

该试验的安全性终点是：

·不良事件的频率、严重程度和严重性。

·生命体征的临床显著变化。

·在身体和实验室评估(例如，身体检查，包括聚焦鼻部检查(focused nasalexamination)和鼻部刺激)期间的临床显著发现。

统计方法

以治疗和场所作为固定影响并且以在访问2(基线)的HPWSQ-R总分作为协变量，使用协方差模型的分析来分析主要终点。使用末次观测值结转(last observation carriedforward)法将在电话评估(第8±1天)期间的HPWSQ-R总分的非缺失值结转，以推导在访问4的HPWSQ-R总分的缺失值。通过从自卡贝缩宫素组中基线的平均变化减去自安慰剂中基线的平均变化，计算在安慰剂和卡贝缩宫素之间的总分的治疗组差异。如果治疗差异的90％单侧置信区间的上限小于零，则得到在10％显著水平的边界统计学显著差异。使用与主要终点相似的模型分析次要终点。

在试验中使用的测量

普拉德-威利综合征中摄食过量问卷-响应(HPWSQ-R)

在该试验中使用的HPWSQ-R改编自普拉德-威利综合征中摄食过量问卷(HPWSQ)，即最初由Elisabeth Dykens(Vanderbilt)开发的作为检查PWS中摄食过量的心理、发育和神经生物学性的综合工具的基于通知者的测量(Dykens等人，Obesity.2007；15:1816-26)。HPWSQ-R代表来自最初HPWSQ的全部11个项目并且结构化为包括1周的调取(recall)阶段。HPWSQ-R被设计为用于重复测量以评价在干预之后的摄食过量严重程度的变化。HPWSQ-R在访问1、2和4期间以及在试验第8天由父母/看护者(HPWSQ-R)和临床医师(HPWSQ-R-C)完成。

临床总体印象(CGI)

CGI评定量表是患有精神病症、神经病症或行为障碍的受试者的治疗研究中的症状严重程度、治疗反应和治疗功效的常用量度。CGI是综合的临床医师确定的概要量度，其考虑了所有可用信息，包括了解受试者病史、心理社会情况、症状、行为、和症状对受试者发挥功能的能力的影响。CGI测量3个要素：1)疾病的严重程度、2)总体改善、和3)功效指数(受试者基线情况与当前治疗益处与副作用严重程度的比率的比较)。

CGI尺度是在试验开始时的疾病严重程度的7点临床医师评定(CGI-S；1＝正常、完全没有患病，7＝患病最严重的患者)，并且是在试验期间和结束时的患者病况的改善的7点临床医师评定(CGI-I；1＝自基线非常大的改善，7＝自基线非常大的变差)。(Busner和Targum，Psychiatry(Edgmont)4:28-37.2007)。在访问1期间完成CGI-S量表，并且在访问4期间和在试验的第8天完成CGI-I量表。

儿童的耶鲁-布朗强迫症量表(CY-BOCS)

CY-BOCS是在儿科强迫症(OCD)中的具体症状和症状严重程度的临床医师评定的、半结构化的清单。其包括2个主要要素：症状清单和严重程度量表。概括10个严重程度项目以产生强迫思维(Obsessions)严重程度评分(5项)、强迫行为(Compulsions)严重程度评分(5项)和总分(全部10个严重程度项目的总分)。在心理测量学研究中以报告的治疗敏感性充分研究了CY-BOCS。例如，在Scahill等人，J Am Acad Child Adolesc Psychiatry,36:844-52,1997中，更详细地描述了CY-BOCS。

在访问1和4以及在试验的第8天完成了CY-BOCS。

Reiss Profile的食物域

Reiss Profile的食物域由属于寻找食物的行为的7个问题组成，并且描述于，例如Dykens等人，Am.J.Mental Retardation,1999,104(2):158-169。在访问1和4以及试验的第8天完成了Reiss Profile的食物域。

结果

以上临床试验的结果总结在以下表1中。

表1功效总结

*负值表示用卡贝缩宫素治疗的患者的结果中相对于安慰剂的改善。

如在表1中所示，如在HPWSQ-R、HPWSQ-R-C、CGI、CY-BOCS、和Reiss Profile的食物域评分的第15天结果中证实的，用卡贝缩宫素治疗的患者表现出相对于安慰剂治疗的患者的统计学显著的改善(P<0.05)。

其他实施方案在以下权利要求的范围内。