一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，具体为一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法。

背景技术

核桃仁皮是核桃仁表面的一层薄膜，约占整个核桃仁质量的10％，核桃仁皮中存在大量苦味物质，极易影响产品的口感，因此常被当做废弃物处理，不仅造成了极大的资源浪费，也给环境带来很大压力。国外许多研究已经证明，核桃仁中对人体有益的多酚类物质主要集中在种皮部分，且核桃的功效与多酚类物质有直接关系，例如抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抑菌、降血糖、降血脂、保护心血管、抗衰老、提高免疫力、保护大脑和神经系统等，因此对核桃仁皮中多酚的研究具有重大意义，为此，我们提出一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法，所述一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法包括以下步骤：

步骤一：摘取新鲜核桃去除坏果，表面清洗后，通过去壳机将核桃除去外壳，得到核桃分心木和带内皮的核桃仁，通过筛机将核桃分心木和带内皮的核桃仁筛选出，将带内皮的核桃仁置于温水中浸泡三十分钟，再使用高压水反复冲击使内皮从核桃仁上分离下来，将分离下来的核桃仁皮均匀的铺设在晾干架上，通过烘干机将核桃仁皮烘干，再通过粉碎机将烘干后的核桃仁皮粉碎成大小均匀的碎块；

步骤二：将步骤一中烘干后并粉碎的核桃仁皮杀菌后均匀的加入混合桶内，再向桶内加入发酵菌液，其中核桃仁皮与发酵菌液的配比按重量为：核桃仁皮60份、酵母粉10份、碳酸钙5份、发酵菌液20、复合菌种10份、氯化钠4份、硝酸钠2份、氯化钾1份、微量元素5份、水35份，再核桃仁皮与发酵菌液混合过程中，需要通过搅拌设备均匀搅拌；

步骤三：将步骤二中得到的核桃仁皮与发酵菌液的混合物静置24小时，并且再静置过程中加入30％碱液，使得核桃仁皮与发酵菌液的混合液PH值降至4.5～5.0；

步骤四：将步骤三中静置后的核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内，将发酵罐内闭厌氧后，通过控温设备保持发酵罐内的温度持续为 35℃～45℃，并每12小时向发酵罐内加入纯净水，发酵周期为10～15天；

步骤五：通过过滤设备将步骤四中得到的核桃仁皮与发酵菌液的发酵物进行汁渣分离，并且根据发酵温度、发酵时间和菌种接种量三组数据，其中发酵温度分别为30℃、35℃、40℃和45℃四个阶段，发酵时间分别为5天、 10天和15天三个阶段，菌种接种量分别为1kg、2kg和5kg三个表面，根据三组条件中选取最不同阶段的发酵物；

步骤六：将步骤五中核桃仁皮与发酵菌液的发酵物中分离出的发酵液加入混合桶内，同时像混合桶内加入纯净水，发酵液与纯净水的比例按体积为1： 0.3，加沉淀剂于试液中，有沉淀生成，核桃仁皮中的痕量元素随之共沉淀析出，滤出沉淀，并用小体积溶剂溶解，使痕量物质富集，从而使发酵后核桃仁皮中的多酚含量得到富集。

步骤七：将步骤四中根据三组条件中选取步骤五最不同阶段的发酵菌种，并标记发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量，得到的数据为：

1：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升8.71％；

2：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.43％；

3：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升11.45％；

4：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升13.45％；

5：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升15.72％；

6：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升23.14％；

7：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升18.88％；

8：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升22.84％；

9：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.47％；

10：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升20.47％；

11：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.55％；

12：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升28.15％；

13：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升7.81％；

14：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.24％；

15：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升15.77％；

16：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升11.75％；

17：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升17.55％；

18：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升24.35％；

19：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升22.12％；

20：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升28.77％；

21：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升39.91％；

22：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升25.15％；

23：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升37.55％；

24：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％；

25：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升3.47％；

26：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升8.15％；

27：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升13.47％；

28：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升10.47％；

29：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升13.75％；

30：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升19.25％；

31：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升17.55％；

32：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升25.37％；

33：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.74％；

34：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升16.17％；

35：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.38％；

36：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升32.98％；

其中最优工艺为：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％。

步骤八：将步骤七中发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量实施案例中，选出最优工艺下的发酵菌种提取出，并筛选出发酵菌种中活性最强、多酚含量最高的发酵菌种。

优选的，所述步骤一中核桃仁皮粉碎后的颗粒粒径小于等于1.0cm。

优选的，所述步骤二中的杀菌条件为于温度55～65℃下杀菌15～30分钟或于75～85℃下高温瞬时杀菌4～12s。

优选的，所述步骤二中的发酵菌液可为纤维素55％～75％、木质素15％～ 20％、矿物质15％、动物粉7％、有机酸8％和处理后的污水本身经混合发酵过滤而成。

优选的，所述步骤二中微量元素可为：维生素Bl、维生素B2，维生素B6、维生素B12、维生素K、烟酸、烟酸胺、泛酸钙，叶酸、生物素、叶绿素中的一种或几种的组合。

优选的，所述步骤二中复合菌种可为：放线菌、芽孢杆菌、哈次木霉菌、酵母菌、乳酸菌、固氮菌、解磷菌、解钾菌中的任意一种或几种组成。

优选的，所述步骤四中核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内需堆积成高度为50cm～80cm的堆快，并覆盖上发酵布完全包裹。

优选的，所述步骤四中核桃仁皮与发酵菌液的混合物在发酵罐内发酵过程中，当发酵堆内温度降为25℃左右时就可开沟，让发酵堆却并干燥，拿去每隔4-7天开一次沟，交叉开沟。

优选的，所述步骤五中待汁渣分离的核桃仁皮与发酵菌液的发酵物含水分质量百分比含量为18～22％。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)核桃仁皮是核桃仁表面的一层薄膜，约占整个核桃仁质量的10％，由于核桃仁皮中存在大量苦味物质，极易影响产品的口感，因此常被当做废弃物处理，不仅造成了极大的资源浪费，也给环境带来很大压力，本发明通过堆核桃仁皮的开发再利用，节约了大量的生产成本，减少资源浪费。

(2)国外许多研究已经证明，核桃仁中对人体有益的多酚类物质主要集中在种皮部分，且核桃的功效与多酚类物质有直接关系，本发明通过堆核桃仁皮进行生物发酵及生物富集法，使得核桃仁皮中的多酚含量得到富集，便于生产利用。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种技术方案：一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法，一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法包括以下步骤：

步骤一：摘取新鲜核桃去除坏果，表面清洗后，通过去壳机将核桃除去外壳，得到核桃分心木和带内皮的核桃仁，通过筛机将核桃分心木和带内皮的核桃仁筛选出，将带内皮的核桃仁置于温水中浸泡三十分钟，再使用高压水反复冲击使内皮从核桃仁上分离下来，将分离下来的核桃仁皮均匀的铺设在晾干架上，通过烘干机将核桃仁皮烘干，再通过粉碎机将烘干后的核桃仁皮粉碎成大小均匀的碎块；

步骤二：将步骤一中烘干后并粉碎的核桃仁皮杀菌后均匀的加入混合桶内，再向桶内加入发酵菌液，其中核桃仁皮与发酵菌液的配比按重量为：核桃仁皮60份、酵母粉10份、碳酸钙5份、发酵菌液20、复合菌种10份、氯化钠4份、硝酸钠2份、氯化钾1份、微量元素5份、水35份，再核桃仁皮与发酵菌液混合过程中，需要通过搅拌设备均匀搅拌；

步骤三：将步骤二中得到的核桃仁皮与发酵菌液的混合物静置24小时，并且再静置过程中加入30％碱液，使得核桃仁皮与发酵菌液的混合液PH值降至4.5～5.0；

步骤四：将步骤三中静置后的核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内，将发酵罐内闭厌氧后，通过控温设备保持发酵罐内的温度持续为 35℃～45℃，并每12小时向发酵罐内加入纯净水，发酵周期为10～15天；

步骤五：通过过滤设备将步骤四中得到的核桃仁皮与发酵菌液的发酵物进行汁渣分离，并且根据发酵温度、发酵时间和菌种接种量三组数据，其中发酵温度分别为30℃、35℃、40℃和45℃四个阶段，发酵时间分别为5天、 10天和15天三个阶段，菌种接种量分别为1kg、2kg和5kg三个表面，根据三组条件中选取最不同阶段的发酵物；

步骤六：将步骤五中核桃仁皮与发酵菌液的发酵物中分离出的发酵液加入混合桶内，同时像混合桶内加入纯净水，发酵液与纯净水的比例按体积为1： 0.3，加沉淀剂于试液中，有沉淀生成，核桃仁皮中的痕量元素随之共沉淀析出，滤出沉淀，并用小体积溶剂溶解，使痕量物质富集，从而使发酵后核桃仁皮中的多酚含量得到富集。

步骤七：将步骤四中根据三组条件中选取步骤五最不同阶段的发酵菌种，并标记发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量，得到的数据为：

1：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升8.71％；

2：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.43％；

3：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升11.45％；

4：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升13.45％；

5：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升15.72％；

6：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升23.14％；

7：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升18.88％；

8：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升22.84％；

9：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.47％；

10：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升20.47％；

11：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.55％；

12：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升28.15％；

13：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升7.81％；

14：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.24％；

15：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升15.77％；

16：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升11.75％；

17：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升17.55％；

18：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升24.35％；

19：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升22.12％；

20：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升28.77％；

21：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升39.91％；

22：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升25.15％；

23：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升37.55％；

24：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％；

25：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升3.47％；

26：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升8.15％；

27：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升13.47％；

28：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升10.47％；

29：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升13.75％；

30：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升19.25％；

31：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升17.55％；

32：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升25.37％；

33：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.74％；

34：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升16.17％；

35：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.38％；

36：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升32.98％；

其中最优工艺为：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％。

步骤八：将步骤七中发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量实施案例中，选出最优工艺下的发酵菌种提取出，并筛选出发酵菌种中活性最强、多酚含量最高的发酵菌种。

优选的，步骤一中核桃仁皮粉碎后的颗粒粒径小于等于1.0cm。

优选的，步骤二中的杀菌条件为于温度55～65℃下杀菌15～30分钟或于 75～85℃下高温瞬时杀菌4～12s。

优选的，步骤二中的发酵菌液可为纤维素55％～75％、木质素15％～20％、矿物质15％、动物粉7％、有机酸8％和处理后的污水本身经混合发酵过滤而成。

优选的，步骤二中微量元素可为：维生素Bl、维生素B2，维生素B6、维生素B12、维生素K、烟酸、烟酸胺、泛酸钙，叶酸、生物素、叶绿素中的一种或几种的组合。

优选的，步骤二中复合菌种可为：放线菌、芽孢杆菌、哈次木霉菌、酵母菌、乳酸菌、固氮菌、解磷菌、解钾菌中的任意一种或几种组成。

优选的，步骤四中核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内需堆积成高度为50cm～80cm的堆快，并覆盖上发酵布完全包裹。

优选的，步骤四中核桃仁皮与发酵菌液的混合物在发酵罐内发酵过程中，当发酵堆内温度降为25℃左右时就可开沟，让发酵堆却并干燥，拿去每隔4-7 天开一次沟，交叉开沟。

优选的，步骤五中待汁渣分离的核桃仁皮与发酵菌液的发酵物含水分质量百分比含量为18～22％。

实施例一：

一种富集核桃仁皮中的活性成分生物发酵方法包括以下步骤：

步骤一：摘取新鲜核桃去除坏果，表面清洗后，通过去壳机将核桃除去外壳，得到核桃分心木和带内皮的核桃仁，通过筛机将核桃分心木和带内皮的核桃仁筛选出，将带内皮的核桃仁置于温水中浸泡三十分钟，再使用高压水反复冲击使内皮从核桃仁上分离下来，将分离下来的核桃仁皮均匀的铺设在晾干架上，通过烘干机将核桃仁皮烘干，再通过粉碎机将烘干后的核桃仁皮粉碎成大小均匀的碎块，核桃仁皮粉碎后的颗粒粒径小于等于1.0cm；

步骤二：将步骤一中烘干后并粉碎的核桃仁皮杀菌后均匀的加入混合桶内，杀菌条件为于温度55～65℃下杀菌15～30分钟或于75～85℃下高温瞬时杀菌4～12s，再向桶内加入发酵菌液，其中核桃仁皮与发酵菌液的配比按重量为：核桃仁皮60份、酵母粉10份、碳酸钙5份、发酵菌液20、复合菌种10份、氯化钠4份、硝酸钠2份、氯化钾1份、微量元素5份、水35份，再核桃仁皮与发酵菌液混合过程中，需要通过搅拌设备均匀搅拌，其中发酵菌液可为纤维素55％～75％、木质素15％～20％、矿物质15％、动物粉7％、有机酸8％和处理后的污水本身经混合发酵过滤而成，微量元素可为：维生素Bl、维生素B2，维生素B6、维生素B12、维生素K、烟酸、烟酸胺、泛酸钙，叶酸、生物素、叶绿素中的一种或几种的组合，复合菌种可为：放线菌、芽孢杆菌、哈次木霉菌、酵母菌、乳酸菌、固氮菌、解磷菌、解钾菌中的任意一种或几种组成；

步骤三：将步骤二中得到的核桃仁皮与发酵菌液的混合物静置24小时，并且再静置过程中加入30％碱液，使得核桃仁皮与发酵菌液的混合液PH值降至4.5～5.0；

步骤四：将步骤三中静置后的核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内，核桃仁皮与发酵菌液的混合物均匀平摊在发酵罐内需堆积成高度为50cm～80cm的堆快，并覆盖上发酵布完全包裹，将发酵罐内闭厌氧后，通过控温设备保持发酵罐内的温度持续为35℃～45℃，并每12小时向发酵罐内加入纯净水，发酵周期为10～15天，核桃仁皮与发酵菌液的混合物在发酵罐内发酵过程中，当发酵堆内温度降为25℃左右时就可开沟，让发酵堆却并干燥，拿去每隔4-7天开一次沟，交叉开沟；

步骤五：通过过滤设备将步骤四中得到的核桃仁皮与发酵菌液的发酵物进行汁渣分离，并且根据发酵温度、发酵时间和菌种接种量三组数据，其中发酵温度分别为30℃、35℃、40℃和45℃四个阶段，发酵时间分别为5天、 10天和15天三个阶段，菌种接种量分别为1kg、2kg和5kg三个表面，根据三组条件中选取最不同阶段的发酵物，核桃仁皮与发酵菌液的发酵物含水分质量百分比含量为18～22％；

步骤六：将步骤五中核桃仁皮与发酵菌液的发酵物中分离出的发酵液加入混合桶内，同时像混合桶内加入纯净水，发酵液与纯净水的比例按体积为1： 0.3，加沉淀剂于试液中，有沉淀生成，核桃仁皮中的痕量元素随之共沉淀析出，滤出沉淀，并用小体积溶剂溶解，使痕量物质富集，从而使发酵后核桃仁皮中的多酚含量得到富集。

步骤七：将步骤四中根据三组条件中选取步骤五最不同阶段的发酵菌种，并标记发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量，得到的数据为：

1：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升8.71％；

2：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.43％；

3：使用1kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升11.45％；

4：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升13.45％；

5：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升15.72％；

6：使用1kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升23.14％；

7：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升18.88％；

8：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升22.84％；

9：使用1kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.47％；

10：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升20.47％；

11：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.55％；

12：使用1kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升28.15％；

13：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升7.81％；

14：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升9.24％；

15：使用2kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升15.77％；

16：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升11.75％；

17：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升17.55％；

18：使用2kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升24.35％；

19：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升22.12％；

20：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升28.77％；

21：使用2kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升39.91％；

22：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升25.15％；

23：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升37.55％；

24：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％；

25：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵5天，多酚富集含量提升3.47％；

26：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵10天，多酚富集含量提升8.15％；

27：使用5kg发酵菌种在30℃下发酵15天，多酚富集含量提升13.47％；

28：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵5天，多酚富集含量提升10.47％；

29：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵10天，多酚富集含量提升13.75％；

30：使用5kg发酵菌种在35℃下发酵15天，多酚富集含量提升19.25％；

31：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵5天，多酚富集含量提升17.55％；

32：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵10天，多酚富集含量提升25.37％；

33：使用5kg发酵菌种在40℃下发酵15天，多酚富集含量提升33.74％；

34：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵5天，多酚富集含量提升16.17％；

35：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵10天，多酚富集含量提升24.38％；

36：使用5kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升32.98％；

其中最优工艺为：使用2kg发酵菌种在45℃下发酵15天，多酚富集含量提升48.37％。

步骤八：将步骤七中发酵菌种在不同条件下的多酚富集含量实施案例中，选出最优工艺下的发酵菌种提取出，并筛选出发酵菌种中活性最强、多酚含量最高的发酵菌种。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。