一种黄瓜育苗基质

技术领域

本发明属于育苗基质技术领域，具体涉及一种黄瓜育苗基质。

背景技术

黄瓜是我国重要的经济作物，全国各地均有栽培。随着黄瓜栽培面积的扩大和栽培方式的多样化，病害问题日趋复杂和严重，黄瓜受侵染的病害种类多，危害大。黄瓜枯萎病是由尖镰孢菌黄瓜专化型侵染引起的发生在黄瓜上的病害。黄瓜枯萎病发生在黄瓜的整个生长期，特别是在开花期与结果期。同一地块连作3年，发病率可高达70％，产量损失10％～50％，甚至绝收。

目前黄瓜枯萎病的防治一般采用甲霜恶霉灵、吡喹酮等化学农药以及复合木霉菌等微生物菌剂。农药、化肥的使用，虽然大幅度提高了农作物产量，满足了对农产品数量的要求，但同时带来农副产品有害物质超标、质量下降、生态破坏和环境污染等问题，严重影响了食物安全和人类自身健康。而复合木霉菌等微生物菌剂的防治效果又不稳定。

现有技术中关于生防菌剂用于黄瓜等蔬菜作物的生物防治相关报道较多，具体涉及枯萎病防治的生防菌剂也已经公开很多，但是现有技术中涉及的生防菌剂组成成分复杂，施用方式繁琐，主要通过浸种、灌根、喷洒等方式施用；因此，现有技术中的生防菌剂施用后受外界环境影响较大，比如：土壤环境、大气环境、降雨量的多少等等，造成生防菌剂防治效果不稳定，并且由于在作物种植过程中生防菌剂的多次施用，增加了劳动成本，提高了作物的种植成本。

中国专利文献CN102726454A(申请号：201210245752.5)公开了一种用于枯萎病的生物防治剂及其制备和使用方法，该生物防治剂中含有绿色木霉菌、黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌；该发明涉及生物防治剂中微生物种类繁多，施用方式繁琐，需要种植前浸种、种植时罐根、种植后植株喷洒，需要多次施用，增加了劳动成本。

中国专利文献CN102010825A(申请号：201010277116.1)公开了一种防治黄瓜枯萎病的微生物复合菌剂及其制备方法，所述微生物复合菌剂由沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌、植物乳杆菌和酿酒酵母组成；该发明涉及的微生物复合菌剂组成菌种繁多，施用方法：种苗处理：浸种、蘸根、育苗时浇苗床；大田应用：随基肥施入耕作层土壤、定植时随定植水施用、浇根，整个作物种植过程的施用次数过多，施用方式繁琐。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种黄瓜育苗基质。

本发明涉及的黄瓜育苗基质通过穴盘育苗可以有效起到壮苗的作用，而且可以有效隔离有害病菌减少苗期感染的概率。提高了菌株的功能发挥，增强所育种苗的质量，并提高黄瓜移植后的抗病性和产量。

本发明的技术方案如下：

一种黄瓜育苗基质，所述育苗基质包括以下质量组分：草炭20～30份、蛭石10～20份、珍珠岩5～10份、腐熟物料20～40份、复合微生物菌剂5～15份；

其中所述腐熟物料的原料包括以下质量组分：木薯渣10～30份、蘑菇渣15～20份和玉米秸秆30～50份；

其中所述复合微生物菌剂包括以下质量组分：黄赭色链霉菌10～30份、里氏木霉20-30份和短小芽孢杆菌10-20份。

根据本发明优选的，上述黄瓜育苗基质包括以下质量组分：草炭30份、蛭石15份、珍珠岩5份、腐熟物料30份、复合微生物菌剂10份。

根据本发明优选的，所述腐熟物料的原料组分木薯渣、蘑菇渣和玉米秸秆的质量比为20：20：40。

根据本发明优选的，所述黄赭色链霉菌、里氏木霉和短小芽孢杆菌的质量比为10:20:20。

根据本发明优选的，所述黄赭色链霉的菌种编号为ACCC40127、里氏木霉的菌种编号为ACCC32254、短小芽孢杆菌的菌种编号为ACCC01660，所述菌种均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

上述黄瓜育苗基质的制备方法，包括步骤如下：

(1)取木薯渣、蘑菇渣、玉米秸秆粉粹成0.5～1cm的颗粒，加入质量分数为2％～5％的腐熟剂混合均匀，加入水至含水量为60～70％，通风条件下堆肥发酵15～20天，每2-3天翻堆一次，得到腐熟物料。

(2)将黄赭色链霉菌接种于改良高氏一号固体培养基，在30～35℃条件下培养48～72h，加入无菌水调整孢子浓度到10

(3)将里氏木霉接种于PDA固体培养基，在30～35℃条件下固体培养40～60h，加入无菌水调整孢子浓度到10

(4)将短小芽孢杆菌接种于LB液体培养基，在30～37℃条件下，150～180r/min培养24～36h，制得液体种子，将制得的液体种子按照接种量体积分数5％～10％接种于液体发酵培养基C中，调控pH值至6.0～7.5、通气比为1:(0.5～1)、转速150～200转/分，在30～35℃培养24～36h，制得含有短小芽孢杆菌有效活菌数40～70亿/g的液体菌剂C；

(5)将液体菌剂A、液体菌剂B和液体菌剂C混合均匀，制得复合微生物菌剂；

(6)将草炭、蛭石、珍珠岩、腐熟物料混合均匀灭菌，再加入复合微生物菌剂晾干制得黄瓜育苗基质。

根据本发明优选的，所述步骤(1)中的质量组分如下木薯渣10～30份、蘑菇渣15～20份和玉米秸秆30～50份。

进一步优选的，所述步骤(1)中，按质量组分计木薯渣20份、蘑菇渣20份、玉米秸秆40份。

根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体培养基A的每升质量组分如下：

马铃薯粉10～30g，豆饼粉5～10g，葡萄糖5～10g，甘油2～5g，磷酸二氢钾0.5～1g，MgSO

根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体培养基B的每升质量组分如下：

马铃薯粉10～20g，麸皮粉5～10g，玉米面10～20g，稻壳粉5～10g，过磷酸钙1～1.5g，余量水，pH 6.5～7.5。

根据本发明优选的，所述步骤(4)中的液体培养基C的每升质量组分如下：

玉米粉10～15g，葡萄糖5～10g，芝麻油渣5～10g，鱼粉10～15g，氯化钠5～10g，硫酸镁0.1～0.25g，硫酸锰0.1～0.25g，硝酸钾1～2g，硫酸亚铁0.1～0.2g，碳酸钙0.5～1g，余量水，pH 6.0～7.5。

根据本发明优选的，所述步骤(5)中，按质量份计将液体菌剂A 10～30份、液体菌剂B 20～30份和液体菌剂C10～20份混合均匀，制得复合微生物菌剂。

进一步优选的，所述步骤(5)中，按质量份计将液体菌剂A 10份、液体菌剂B 20份和液体菌剂C 20份混合均匀，制得复合微生物菌剂。

根据本发明优选的，所述步骤(6)中，按质量份计将草炭20～30份、蛭石10～20份、珍珠岩5～10份、腐熟物料20～40份混合均匀灭菌，再加入复合微生物菌剂5～15份自然晾干制得黄瓜育苗基质。

进一步优选的，所述步骤(6)中，按质量份计草炭30份、蛭石15份、珍珠岩5份、腐熟物料30份、复合微生物菌剂10份。

根据本发明优选的，上述方法中，所述黄赭色链霉的菌种编号为ACCC40127、里氏木霉的菌种编号为ACCC32254、短小芽孢杆菌的菌种编号为ACCC01660，所述菌种均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

上述黄瓜育苗基质在黄瓜育苗、防治黄瓜枯萎病和/或黄瓜种植中的应用。

上述改良高氏一号固体培养基、PDA固体培养基和LB液体培养基均为本领域常用培养基，改良高氏一号固体培养基组分如下：

硝酸钾1g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠0.5g，可溶性淀粉20g，琼脂15g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装灭菌；

PDA固体培养基组分如下：

马铃薯汁1000ml，葡萄糖20g，琼脂20g，溶化后分装灭菌。

LB液体培养基组分如下：

酵母膏5g，蛋白胨10g，NaCl 10g，加蒸馏水至1000ml，用NaOH和HCl调节pH7.0～7.2，分装灭菌。

有益效果

本发明涉及的黄瓜育苗基质可以有效防治黄瓜枯萎病，且效果稳定，同时还可以刺激作物生长，有效改善黄瓜的品质，增加了种植户的经济收益。

具体实施方法

下面结合实施例对本发明做进一步阐述，但本发明所保护的范围不限于此。

实施例中未详加说明的内容均按本领域现有技术。

微生物材料来源

实施例中所述黄赭色链霉菌(Streptomyces silaceus)ACCC40127、黄赭色链霉菌(Streptomyces silaceus)ACCC40021、里氏木霉(Trichoderma reesei)ACCC32254、里氏木霉(Trichoderma reesei)ACCC30150、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)ACCC10121和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)ACCC01660均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

腐熟剂为德州市元和农业科技开发有限公司销售的元和有机物料腐熟剂。

实施例1

黄瓜育苗基质的制备方法，步骤如下：

(1)取质量份木薯渣20份、蘑菇渣20份和玉米秸秆40份粉粹成0.5～1cm的颗粒，加入质量分数为3％的腐熟剂混合均匀，加入水使含水量为65％，通风条件下按堆宽2米，堆高1.6米堆肥发酵18天，每三天翻堆一次，物料温度无明显变化，颜色呈黑褐色，得到腐熟物料。

(2)将黄赭色链霉菌ACCC40127接种于改良高氏一号固体培养基，在33℃条件下培养48h，加入无菌水调整孢子浓度到10

(3)将里氏木霉ACCC32254接种于PDA固体培养基，在30℃条件下固体培养48h，加入无菌水调整孢子浓度到10

(4)将短小芽孢杆菌ACCC01660接种于LB液体培养基，在37℃条件下，170r/min经摇瓶培养24h，制得液体种子，将制得的液体种子按照体积分数5％的接种量接种于液体发酵培养基C中，调控pH值至7.5、通气比为1:0.75、转速180转/分，在35℃培养26h，制得含有短小芽孢杆菌ACCC01660有效活菌数50亿/g的液体菌剂C；

(5)按质量份计，取10份步骤(2)制得的液体菌剂A、20份步骤(3)制得的液体菌剂B、20份步骤(4)制得的液体菌剂C进行混合，制得复合微生物菌剂；

(6)按质量份计，取30份草炭、15份蛭石、5份珍珠岩、30份腐熟物料混合均匀灭菌，再加入10份复合微生物菌剂自然晾干制得黄瓜育苗基质。

所述步骤(2)中液体培养基A的每升质量组分如下：

马铃薯粉10g，豆饼粉10g，葡萄糖10g，甘油5g，磷酸二氢钾0.5g，MgSO

所述步骤(3)中液体培养基B的每升质量组分如下：

马铃薯粉20g，麸皮粉5g，玉米面10g，稻壳粉5g，过磷酸钙1g，余量水，pH7.0。

所述步骤(4)中液体培养基C的每升质量组分如下：

玉米粉15g，葡萄糖5g，芝麻油渣10g，鱼粉10g，氯化钠5g，硫酸镁0.1g，硫酸锰0.25g，硝酸钾2g，硫酸亚铁0.1g，碳酸钙1g，余量水，调整pH值7.5。

实施例2

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(1)按质量份取木薯渣10份、蘑菇渣15份和玉米秸秆30份进行粉碎。

实施例3

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(1)按质量份取木薯渣20份、蘑菇渣20份和玉米秸秆30份进行粉碎。

实施例4

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(1)按质量份取木薯渣20份、蘑菇渣20份和玉米秸秆50份进行粉碎。

实施例5

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(5)按质量份取液体菌剂A 20份、液体菌剂B 20份、液体菌剂C 20份进行混合。

实施例6

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(5)按质量份取液体菌剂A 30份、液体菌剂B 20份、液体菌剂C 20份进行混合。

实施例7

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(5)按质量份取液体菌剂A 30份、液体菌剂B 30份、液体菌剂C 20份进行混合。

实施例8

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(6)按质量份取草炭20份、蛭石10份、珍珠岩5份、腐熟物料20份混合均匀灭菌，再加入复合微生物菌剂5份自然晾干制得黄瓜育苗基质。

实施例9

采用如实施例1所述的方法，不同之处在于，步骤(6)按质量份取草炭30份、蛭石20份、珍珠岩10份、腐熟物料40份混合均匀灭菌，再加入复合微生物菌剂15份自然晾干制得黄瓜育苗基质。

对比例1

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加黄赭色链霉菌ACCC40127。

对比例2

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加里氏木霉ACCC32254。

对比例3

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加短小芽孢杆菌ACCC01660。

对比例4

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加黄赭色链霉菌ACCC40127而是添加同样方法制备的，有效活菌数相同的黄赭色链霉菌ACCC40021。

对比例5

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加里氏木霉ACCC32254而是添加同样方法制备的，有效活菌数相同的里氏木霉ACCC30150。

对比例6

与实施例1不同之处在于所述复合微生物菌剂中不添加加短小芽孢杆菌ACCC01660而是添加同样方法制备的，有效活菌数相同的短小芽孢杆菌ACCC10121。

对比例7

与实施例1不同之处在于所述黄瓜育苗基质中不添加腐熟物料。

对比例8

与实施例1不同之处在于所述黄瓜育苗基质中不添加复合微生物菌剂。

应用例

将实施例1-9与对比例1-8制备的黄瓜育苗基质在山东寿光黄瓜枯萎病较为严重的蔬菜大棚进行效果验证，分别应用种植黄瓜、丝瓜和豇豆。用黄瓜育苗基质穴盘育苗以普通育苗基质(草炭50份：蛭石20份：炉灰渣50份：珍珠岩20份)做空白组对照。育苗35天后随机选取1000棵黄瓜对形态学指标进行统计，育苗35天后进行移栽，随机选取5点，每点80m

表1 黄瓜、丝瓜和豇豆抗枯萎病效果分析表

表2 黄瓜形态学指标分析表

表3 黄瓜产量分析表

由上述实验结果可以看出，本发明涉及的黄瓜育苗基质对黄瓜枯萎病防治效果优良，有效降低了黄瓜枯萎病的发病率，并且具有一定的生根壮苗作用；本发明涉及的黄瓜育苗基质对防治黄瓜枯萎病的作用最显著，具有一定的特异性，对防治丝瓜枯萎病的作用效果一般，对豇豆枯萎病的作用效果几乎没有，可能是因为引起黄瓜枯萎病的病原菌与引起丝瓜枯萎病及豇豆枯萎病的病原菌不同；也有可能是因为本发明涉及育苗基质的活性成分在不同植物根部的富集代谢情况不同所产生的效果不同；也有可能是因为本发明涉及育苗基质对不同植物的生根壮苗能力的不同造成植物抗病能力的差异。

由表1使用效果的发病率可以看出，并不是简单的微生物组成种类越多，所起的作用效果越好，而是需要特定组合的微生物种类组成才可以产生一定的协同作用。而且符合微生物菌剂和腐熟物料的比例不同起到的效果也不同，只有特定的比例才能发挥更好的效果。