2,6-二异丙基苯酚类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种2,6-二异丙基苯酚类化合物及其制备方法和用途，属于医药化学领域。

背景技术

全身麻醉药（general anesthetics）简称全麻药，是一类能抑制中枢神经系统功能并可逆性引起意识、感觉、反射消失以及骨骼肌松弛的药物，主要用于外科手术前麻醉。目前临床上使用的全麻药多是与中枢神经系统的GABA

目前，手术引起的神经损伤相关并发症仍是麻醉医生面临的巨大挑战，脑卒中是公认的围术期最严重的并发症之一，具有较高的病死率和致残率。脑卒中是一种急性起病，进展迅速并且持续在24小时以上的局限性或弥漫性脑组织和脑功能损伤的疾病。围手术期脑卒中常被定义为发生在手术当天至术后30天内的脑卒中，以缺血性脑卒中为主。其发生率与手术类型及复杂程度有关，在心血管或神经外科手术中其发生率较高。目前临床对于缺血性脑卒中的治疗策略主要是溶栓治疗，但溶栓的时间窗窄，患者易错过黄金治疗期，继而形成永久性的缺血病灶。麻醉药作为手术过程中必不可少的药物，其神经保护作用一直备受关注。研究表明，麻醉药物的神经保护涉及多种机制：(1)调节多种细胞因子如IL-1β、TNF-α、MMP-9 的水平，降低炎症反应。 (2) 抑制线粒体功能障碍引起的氧化应激和细胞凋亡。(3)调节GABA受体以抑制兴奋传递，抑制钙离子通道开放以减轻神经元损伤。因此，开发具有麻醉作用的神经保护药物，对于降低缺血性脑卒中并发症的发生率和死亡率具有重要意义。

发明内容

本发明提供了一种结构新颖的2,6-二异丙基苯酚类化合物及其制备方法和应用，以便为诱导麻醉、治疗缺血性脑卒中提供更优的药物选择。

结构通式A所示的化合物，式中烯键为反式结构；R

式A所示化合物，R

本发明化合物可选自但不限于：

本发明提供了一种制备上述化合物的方法，其特征在于方法包括：

可选的，步骤（Ⅰ）包括：化合物1a与六亚甲基四胺溶于三氟乙酸或醋酸中，反应0.5～2小时得到化合物1b，反应温度在60℃～90℃。进一步优选的，步骤（Ⅰ）反应时间为0.5～1小时，反应温度为60℃～80℃。

可选的，步骤（Ⅱ）包括：化合物1b与丙二酸、哌啶溶于吡啶，反应1～4小时得到化合物1，反应温度在20℃～100℃ 。进一步优选的，反应时间为0.5～3小时，反应温度为60℃～100℃。

可选的，步骤（Ⅳ）包括：化合物2与二异丁基氢化铝溶于四氢呋喃、乙醚、二氧六环中的一种，反应0.5～3小时得到化合物3，反应温度为-40℃～-20℃。进一步优选的，反应时间为0.01～0.5小时。

可选的，步骤（Ⅴ）包括：化合物1b与强碱和氯甲基甲醚溶于四氢呋喃或二氯甲烷，反应8～24小时得到化合物4a，反应温度为0℃～50℃。进一步优选的，步骤（Ⅴ）的反应时间为10～18小时，反应温度为20℃～40℃。

可选的，步骤（Ⅵ）包括：三苯基磷与2-溴乙基甲基醚溶于甲苯、乙苯、二乙苯中的一种，反应12～24小时得到化合物4b，反应温度为20℃～100℃。

本发明还提供了上述化合物在制备诱导麻醉药物、治疗缺血性脑卒中药物中的应用。

本发明提供了一种药物，它是由上述治疗有效量的化合物加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。

可选的，所述药物可被制成注射剂、亚微乳、片剂、胶囊剂、雾化剂等剂型，其中所述剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备，使用时经静脉、口服或肺部吸入给药。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明，但应理解本发明的范围非仅限于这些实施例的范围。

实施例1 化合物1的制备

取化合物1a(10.0g，56.18 mmol)，六亚甲基四胺（8.65g，61.80mmol）溶于35mL三氟乙酸中，升温至80℃，加热30分钟，冷却至37℃后加入300mL水搅拌，用10NNaOH溶液调pH到5左右，用乙酸乙酯（3×100mL）萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，浓缩得到粗产品，粗产品硅胶柱层(PE/EA:10/1)纯化得3.98g黄色固体（中间体1b），产率：34.4%，用于下一步反应。

将上述制备得到的中间体1b（3.98g，19.32mmol），丙二酸（3.33g，31.99mmol）溶于20mL吡啶中，加入哌啶（0.50g，0.53mL，5.82mmol），升温至80℃，加热3小时，冷却至37℃后加入20mL浓盐酸调pH到2~3，然后加入100mL水，用乙酸乙酯（3×50mL）萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥后，浓缩得到3.85g的化合物1，为黄色固体，产率：80.4%。

实施例2 化合物2的制备

将上述制备得到的化合物1（3.85g，15.52mmol）溶于30mL甲醇中，缓慢滴加浓硫酸（4.56g，2.49mL，46.51mmol），升温至65℃，加热1.5小时，浓缩除去部分甲醇，冷却至37℃后加入50mL水，用乙酸乙酯（2×50mL）萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，浓缩得到3.09g的化合物2，为棕黄色固体，产率：75.9%。

实施例3 化合物3的制备

将上述制备得到的化合物2（2.00g，7.63mmol）溶于20mL无水四氢呋喃中，降温至-50℃，氮气保护下滴加二异丁基氢化铝（3.79g，17.79mL，26.68mmol），-20℃反应1小时,缓慢滴加少量3mL甲醇和3mL水萃灭反应，加入100mL水，用浓盐酸调pH到1~2，用乙酸乙酯(3×50mL）萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥后，浓缩得到粗产品，粗产品经柱层析(PE/EA:20/1)纯化得到1.53g的化合物3，为橙黄色固体，产率：86.0%。

实施例4 化合物4的制备

取化合物1b（2.00g，9.70mmol）和氢化钠（0.35g，14.55mmol）溶于20mL无水四氢呋喃中，降温至0℃，氮气保护下缓慢滴加氯甲基甲醚（0.94g，0.88mL，11.64mmol），升温至37℃，反应12小时，加入200mL水，用乙酸乙酯（3×50mL）萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后，浓缩得到粗产品，粗产品经柱层析(PE/EA:60/1)纯化得到1.69g淡黄色油状液体（中间体4a），产率：74.4%，用于下一步反应。

取2-溴乙基甲基醚（2.00g，14.49mmol）和三苯基磷（3.80g，14.49mmol）溶于20mL甲苯中，升温至100℃，反应12小时后降温至37℃析出结晶，过滤并用石油醚（2×20mL）洗涤滤饼，干燥得4.07g白色固体(2-甲氧基乙基)三苯基溴化磷（化合物4b），产率70.3%，用于下一步反应。

将上述化合物4a（1.50g，6.41mmol）、叔丁醇钾（2.88g，25.64mmol）、四丁基溴化铵（0.10g，0.31mmol）溶于25mL的无水二甲基甲酰胺中，氮气保护下缓慢滴加上述化合物4b（3.86g，9.62mmol）,升温至90℃，反应4小时，降温至37℃后加入250mL水，用乙酸乙酯（3×50mL）萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩得到粗产品，粗产品柱层析(PE/EA:40/1)纯化得到1.26g黄色油状液体（中间体4c），产率：71.0%，用于下一步反应。

将上述化合物4c（1.00g，3.62mmol）溶于10mL二氯甲烷中，加入10mL三氟乙酸，37℃反应12小时，加入100mL水后用二氯甲烷（3×50mL）萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩得到粗产品，粗产品柱层析(PE/EA:20/1)纯化得到0.72g的化合物4，为黄色油状液体，产率71.0%。

实施例5 本发明化合物诱导小鼠全身麻醉的作用。

1. 试剂与材料

SPF级成年雄性KM小鼠，体重25～30g，待测化合物溶液（用10%的DMSO、20% SolutolHS15、70%生理盐水配制，浓度为50mg/mL）,空白溶剂，丙泊酚注射液（10mg/mL）。

2. 动物分组

供试小鼠随机分为15组，分别为生理盐水组、空白溶剂组、阳性对照组、化合物1低剂量组、化合物1中剂量组、化合物1高剂量组、化合物2低剂量组、化合物2中剂量组、化合物2高剂量组、化合物3低剂量组、化合物3中剂量组、化合物3高剂量组、化合物4低剂量组、化合物4中剂量组、化合物4高剂量组，每组10只。每组均采用腹腔注射的方式给药。

3. 评价方法与结果

以小鼠翻正反射消失作为进入麻醉状态的判定指标，以麻醉诱导时间和麻醉持续时间为指标评价麻醉效果，实验结果见表1。

由表1可见，本发明化合物1~4与对照药物丙泊酚均可产生明显的全身麻醉作用，可用于诱导麻醉。

实施例6 本发明化合物对MCAO模型大鼠缺血再灌注损伤的神经保护作用。

1. 试剂与材料

SPF级成年雄性SD大鼠，体重200～240g，待测化合物溶液（用10%的DMSO、20%的solutolHS15、70%的生理盐水配制，浓度为25mg/mL），丁苯酞注射液（25mg/mL），空白溶剂。

2. 动物分组

供试大鼠随机分为14组，分别为假手术组、空白溶剂组、阳性对照组、化合物1低剂量组、化合物1中剂量组、化合物1高剂量组、化合物2低剂量组、化合物2中剂量组、化合物2高剂量组、化合物3低剂量组、化合物3中剂量组、化合物3高剂量组、化合物4低剂量组、化合物4中剂量组、化合物4高剂量组，每组10只。假手术组不给药，其余每组均采用腹腔注射的方式给药。

3. 评价方法与结果。

3.1MCAO模型建立

采用改良线栓法制作MCAO模型，具体操作参见文献（孙宇等.中国比较医学杂志，2008，18: 8~10）。神经功能评分标准参照Zea Longa评分，评分为1～3分者入组。术后2h，由露出皮肤的栓线尾部将栓线柔和抽出进行血流再灌注，与此同时按给药方案尾静脉注射药物溶液或空白溶剂，假手术组除不插入栓线外其余步骤同上。

3.2神经功能行为学评分

神经功能评分于再灌注24小时后进行，参考Zea Longa 5级进行评分。

0分:无神经功能缺损；1分:前肢弯曲，病灶对侧前爪不能完全伸展；2分:向病灶对侧自发性旋转；3分:站立不稳，向病灶对侧倾倒；4分:无自发性行走且出现意识丧失；0分和4分（即造模不成功）大鼠予以排除，不用于后续实验。

3.3脑梗死体积测定

神经功能评分后，每组随机取6只大鼠，断头取脑，放入液氮固定5～7s，取出置于模具内，去除嗅球、小脑和低位脑干后，冠状切四刀，得到五片，然后迅速将脑片置于含有2%TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）染液的磷酸盐缓冲液中，37°C避光温孵30min，每5min轻微晃动容器，经染色后正常脑组织呈玫瑰红色，脑梗死组织呈白色，且界限分明。拍照并用利用Image J软件计算脑切片的梗死体积以及脑总体积。脑梗死体积百分比即为梗死体积占脑总体积的百分比，结果见表2。

与模型组比较，化合物1~4的低、中、高剂量组和阳性药物丁苯酞均可显著改善大鼠神经功能评分，减少脑梗死体积比。综上，本发明化合物可用于治疗缺血性脑卒中。