异蛇麻素类化合物及其应用、药物组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其是涉及一种作为雄激素受体激动剂的异蛇麻素类化合物及其应用、药物组合物。

背景技术

雄激素是负责雄性生殖系统和第二性征的发育和调节的主要性激素。雄激素也在蛋白质合成、凝血、脂质平衡、胃肠道功能、认知、神经系统功能、免疫反应和心脏疾病中发挥作用。雄激素的生物学活性主要通过核受体雄激素受体(AR)介导。雄激素受体是重要的核受体超家族成员，能够与靶基因启动子区域的雄激素应答元件(ARE)结合，调控靶基因DNA转录，从而调控靶基因表达水平，在机体生长发育和代谢过程中发挥重要的作用。

当机体雄激素水平失调，雄激素受体激活紊乱时，可导致生殖系统疾病、免疫功能失调、代谢性疾病、前列腺癌、神经退行性疾病、脱发及皮肤病等。因此，雄激素类化合物是重要的一类药物。

异蛇麻素(isoxanthohumol，又称异黄腐醇、异黄腐酸)存在于苦参等中药材中，为性质相对温和的天然产物小分子化合物。异蛇麻素具有良好的药用价值，例如，异蛇麻素能抑制肿瘤动物肺转移灶的发展，异蛇麻素对疱疹病毒(HSV1和HSV2)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)具有抗病毒活性。异蛇麻素因具有功效显著、毒副作用小等特点，逐渐被应用于中成药制剂、保健品和化妆品等行业。现有技术中并没有异蛇麻素及其类似物是否可以作为雄激素受体激动剂的相关报导。

发明内容

基于此，有必要提供一种可以作为雄激素受体激动剂的异蛇麻素类化合物。

此外，还有必要提供一种包括上述异蛇麻素类化合物的药物组合物以及异蛇麻素类化合物的应用。

一种作为雄激素受体激动剂的异蛇麻素类化合物，所述异蛇麻素类化合物的化学式如下：

其中，-R为-H、-CH

在一个实施例中，所述异蛇麻素类化合物为异蛇麻素，所述异蛇麻素的化学式如下：

在一个实施例中，所述异蛇麻素类化合物的有效作用浓度为0.25μM～2μM。

一种药物组合物，包括上述的异蛇麻素类化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其溶剂化物或其前药。

在一个实施例中，所述药物组合物用于预防和治疗神经退行性疾病、心脑血管疾病、自身免疫性疾病、生殖系统疾病、皮肤病、脱发、癌症以及用于避孕。

一种上述的异蛇麻素类化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其溶剂化物或其前药，在药物领域、保健食品领域和化妆品领域的应用。

结合说明书实施例部分的内容，这种异蛇麻素类化合物对雄激素受体报告基因具有增强表达作用，此外结合图1，通过分子对接计算方法验证了异蛇麻素类化合物与雄激素受体具有很强的亲和力，从而说明异蛇麻素类化合物可作为雄激素受体的激动剂。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

其中：

图1为异蛇麻素类化合物与雄激素受体间的成键形式图。

图2为实施例1中异蛇麻素类化合物对HEK-293T表达雄激素报告基因的影响图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明公开了一种作为雄激素受体激动剂的异蛇麻素类化合物，所述异蛇麻素类化合物的化学式如下：

其中，-R为-H、-CH

具体来说，异蛇麻素类化合物存在于苦参等中药材中，为性质相对温和的天然产物小分子化合物。

结合说明书实施例部分的内容，这种异蛇麻素类化合物对雄激素受体报告基因具有增强表达作用。

为研究天然产物小分子化合物的雄激素活性，本发明通过分子对接软件分析雄激素受体与天然产物小分子化合物之间结合的构象，并进一步分析了小分子与雄激素受体相互作用的构象。

图1显示异蛇麻素类化合物与雄激素受体的关键氨基酸残基Asn705形成氢键，说明其能与雄激素受体通过氢键相互作用结合。

需要说明的是，氢键是指氢原子与电负性大、半径小的原子X以一种特殊的分子间作用力结合形成X-H形式的化学键。

由此，结合实施例部分的数据以及分子对接计算方法验证了天然产物小分子化合物与雄激素受体具有很强的亲和力，从而说明天然产物小分子化合物可作为雄激素受体的激动剂。

具体来说，本实施方式中，作为雄激素受体激动剂的异蛇麻素类化合物为异蛇麻素(isoxanthohumol，又称异黄腐醇、异黄腐酸，CAS编号：521-48-2)，异蛇麻素的化学式如下：

优选的，异蛇麻素类化合物的有效作用浓度为0.25μM～2μM。

本发明还公开了一实施方式的药物组合物，包括上述的异蛇麻素类化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其溶剂化物或其前药。

当机体雄激素水平下降，雄激素受体不能正常激活时，容易出现神经退行性疾病、心脑血管疾病、自身免疫性疾病、生殖系统疾病、皮肤病、脱发、癌症以及不孕等疾病或问题。

基于此，可以作为雄激素受体的激动剂的异蛇麻素类化合物在理论上可以用于预防和治疗上述相关的疾病。

具体来说，药物组合物用于预防和治疗神经退行性疾病、心脑血管疾病、自身免疫性疾病、生殖系统疾病、皮肤病、脱发、癌症以及用于避孕。

本发明还公开了一实施方式的上述的异蛇麻素类化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其溶剂化物或其前药，在药物领域、保健食品领域和化妆品领域的应用。

以下为具体实施例。具体实施例中，HEK-293T细胞购于中科院细胞库，胎牛血清为中国杭州四季青生物股份有限公司产品，质粒pcDNA3.1-AR(由金维智公司合成，插入如SEQID NO.1所示序列，质粒pGL3-ARE-Luc(由金维智公司合成，插入如SEQ ID NO.2所示序列)，荧光素酶报告基因试剂盒(碧云天，货号RG006)。

实施例1

异蛇麻素对293T细胞报告基因的影响试验

(1)活性炭处理四季清胎牛血清：

1)在装有100mL胎牛血清的烧杯中加入1g活性炭，置于56℃水浴条件下持续搅拌2小时后，超速离心机17000rpm离心20min；

2)将上清液收集在一个新的烧杯中，加入1g活性炭，置于37℃水浴条件下持续搅拌2小时后，超速离心机17000rpm离心20min；

3)将上清液收集在一个新的烧杯中，加入1g活性炭，置于4℃冰浴条件下持续搅拌3小时后，超速离心机在17000rpm离心30min；

4)最后将收集到的上清液用0.22μm的无菌滤膜过滤，并分装保存于-80℃冰箱备用。

(2)异蛇麻素对293T细胞雄激素报告基因的测定：

将质粒pcDNA3.1-AR和质粒pGL3-ARE-Luc转染至HEK-293T细胞中，pcDNA3.1-AR质粒可表达雄激素受体AR，pGL3-ARE-Luc为报告基因元件，AR激活后可结合ARE反应元件，启动下游荧光素酶Luciferase(Luc)基因表达。

然后分别使用不同浓度的异蛇麻素(isoxanthohumol)以及20nM睾酮(Testosterone)(作为阳性对照)加入培养基(RPMI1640培养基加入10％活性炭处理后的血清)中，培养细胞24小时后，裂解细胞，使用荧光素酶报告基因试剂盒测量报告基因活性，并用酶标仪检测化学发光强度，并测定每孔样品蛋白浓度，将化学发光强度除以蛋白浓度，并除以溶剂对照组(Control)数值得到图2。

由图2可以看出，异蛇麻素对雄激素受体报告基因具有明显的增强表达作用。

具体来说，异蛇麻素的有效作用浓度为0.25μM～2μM，其最大激活效果明显超过20nM睾酮(testosterone)。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对申请专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。