一种AM真菌培养基质、AM真菌菌剂及AM真菌的培养方法

技术领域

本发明涉及一种寡营养活体微生物培养基质、及其培养方法和所制备的菌剂。

背景技术

丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhizal，AM)真菌是土壤微生态系统中同时具有植物根系及微生物特性的互惠共生体，广泛分布于土壤中。AM真菌能够显著提高寄主植物对营养元素的吸收，增强植物防御相关酶(苯丙氨酸解氨酶、β-1,3葡聚糖酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶、几丁质酶等)活性，从而促进植株生长，增强植物的抗病性及抗逆性等。AM真菌在维持生态系统多样性以及微生态系统稳定性等方面也具有重要的作用。

然而，由于AM真菌是一种寡营养活体微生物，无法在人工培养基中进行纯培养，只能以AM真菌与宿主植物形成共生关系的方式进行扩繁，通常以紫花苜蓿、三叶草或高粱为宿主植物，扩繁周期通常在120天。目前AM真菌扩繁所用的基质通常(最佳)为无菌土、沙子和蛭石(5:2:3，v/v/v)，扩繁约120天后获得含有AM真菌孢子(>100个/g)、菌丝及宿主植物菌根的根际沙土混合物，即AM真菌菌剂。现有方法虽然可对AM真菌成功进行扩繁，但扩繁周期较长；而且，此方法所获得的AM真菌菌剂中含有大量沙子，如果在农田中长期并大面积使用现有该类AM真菌菌剂，存在造成农田土壤沙漠化的风险，严重破坏生态环境，这限制了AM真菌菌剂在农田中的大面积推广与应用。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有AM真菌菌剂若在农田中长期并大面积使用导致农田土壤沙漠化、严重破坏生态环境的问题，而提供的一种AM真菌培养基质、AM真菌菌剂及AM真菌的培养方法。

本发明AM真菌培养基质由无菌土、秸秆和蛭石混合而成。

进一步，AM真菌培养基质中无菌土、秸秆与蛭石的体积比为6:3:1。

进一步，所述的秸秆粒径为2mm±0.2mm。

本发明AM真菌菌剂包括AM真菌孢子、AM真菌菌丝、AM真菌培养宿主植物菌根及根际间的AM真菌培养基质；

其中所述的AM真菌培养基质为上述的AM真菌培养基质。

进一步，所述的AM真菌培养宿主植物为紫花苜蓿、三叶草或高粱。

进一步，所述的AM真菌为根内根孢囊霉。

本发明AM真菌的培养方法为：将AM真菌的繁殖体接种于活体AM真菌培养宿主植物生长的AM真菌培养基质中，扩繁培养90±5天；

其中，所述的AM真菌培养基质为上述的AM真菌培养基质。

进一步，所述的AM真菌培养宿主植物为紫花苜蓿、三叶草或高粱。

进一步，所述的AM真菌为根内根孢囊霉。

进一步，所述的AM真菌繁殖体为AM真菌的孢子、菌丝、泡囊、菌根根段或侵染土壤。

本发明AM真菌培养基质中不包含沙子，在农田中长期并大面积使用也不会产生农田土壤沙漠化、严重破坏生态环境的情况出现。本发明还可以充分利用农田每年产生的大量秸秆，实现秸秆还田及资源化利用，解决了大量秸秆无法二次利用、大面积焚烧污染环境的问题。

本发明还将AM真菌的培养周期大幅度的缩短了约30天，而且提升了所培养AM真菌菌剂中AM真菌孢子密度，加速了AM真菌菌剂的田间应用。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

实施例1

将根内根孢囊霉菌剂接种于活体紫花苜蓿生长的AM真菌培养基质中，扩繁培养90天；

其中，所述的AM真菌培养基质由无菌土、秸秆和蛭石混合而成，其中无菌土、秸秆与蛭石的体积比为6:3:1；所述秸秆粒径为2mm±0.2mm；所述秸秆为玉米秸秆；根内根孢囊霉菌剂的接种量为每粒紫花苜蓿种子接种1g。接种的根内根孢囊霉菌剂的孢子密度为>50个/g。

实施例2

将根内根孢囊霉菌剂接种于活体三叶草生长的AM真菌培养基质中，扩繁培养90天；

其中，所述的AM真菌培养基质由无菌土、秸秆和蛭石混合而成，其中无菌土、秸秆与蛭石的体积比为6:3:1；所述秸秆粒径为2mm±0.2mm；所述秸秆为水稻秸秆；根内根孢囊霉菌剂的接种量为每粒三叶草种子接种1g。接种的根内根孢囊霉菌剂的孢子密度为>50个/g。

实施例3

将根内根孢囊霉菌剂接种于活体紫花苜蓿生长的现有AM真菌培养基质中，扩繁培养120天；

其中，所述的现有AM真菌培养基质由无菌土、沙子和蛭石混合而成，其中无菌土、沙子与蛭石的体积比为5:2:3；根内根孢囊霉菌剂的接种量为每粒紫花苜蓿种子接种1g。接种的根内根孢囊霉菌剂的孢子密度为>50个/g。

实施例1～3均采用AM真菌培养宿主植物各自对应的生长管理方法，接种的根内根孢囊霉菌剂相同。

扩繁培养后进行检测，实施例1和2获得的AM真菌菌剂中根内根孢囊霉孢子的数量均>160个/g，而实施例3获得的AM真菌菌剂中根内根孢囊霉孢子的数量不足110个/g。本发明不仅可大幅缩短AM真菌扩繁培养时间，还能够显著提高AM真菌菌剂中AM真菌孢子的密度。此外，本发明还可以充分利用农田每年产生的大量秸秆，实现秸秆还田及资源化利用，解决了大量秸秆无法二次利用、大面积焚烧污染环境的问题。