因子XIIa抑制剂

技术领域

本发明涉及化合物和使用该化合物的治疗(或预防)方法。本发明还涉及生产本发明化合物的工艺和方法。本发明的化合物是因子XII(例如因子XIIa)的调节剂。特别地，化合物是因子XIIa的抑制剂并且可用作抗凝剂。

背景技术

心血管疾病是发达国家的主要死亡原因，每年在全世界影响数百万人。该疾病通常是由动脉壁的动脉粥样硬化引起的，动脉粥样硬化发展多年并且其特征是内皮发炎、内皮下脂质沉积、巨噬细胞浸润和斑块发育。在疾病的急性期，动脉粥样硬化斑块变得不稳定并破裂，引发血栓形成。阻塞血管并由此剥夺组织的氧气的血栓(血凝块)的发展构成导致发病和死亡的主要沉淀事件。血凝块形成是由血小板的活化和聚集引发的。血小板栓塞通过凝血的激活和纤维蛋白网络的形成而巩固。由血栓导致的动脉闭塞导致下游组织死亡，并且取决于其发生位置而与心肌梗塞、中风或跛行的发展有关。

静脉循环中的血栓形成具有不同的病因学，因为它不依赖于动脉粥样硬化，而是由于固定化引起的循环停滞而触发，并且通常与自然产生的凝血抑制剂(例如抗凝血酶、蛋白C和S)缺乏症以及外科手术有关。静脉血栓形成通常发生在腿或臂(深静脉血栓形成，DVT)中，并可能导致栓子(血栓碎片)阻塞下游的小血管，尤其是在肺部中(肺栓塞，PE)。DVT的其它起因包括癌症、肾病综合征、抗磷脂综合征和心力衰竭。

血栓形成是一种非常严重的疾病并且仅在英国，每年因静脉血栓和动脉血栓形成而导致的死亡人数分别高达25,000和200,000例。2010年1月，英国国家卫生与临床卓越研究所(UK National Institute for Health and Clinical Excellence)(NICE)发布了新指南，以加强对入院患者中血栓形成的早期迹象的筛查。

当前用于治疗或预防血栓形成的药物靶向血小板或凝血。通常，抗血小板药物用于预防动脉疾病，而抗凝剂用于在患有心房颤动、DVT和PE的患者中预防中风。与当前抗凝剂使用相关的最大临床问题是出血风险。取决于患者组和抗凝的选择，在抗凝治疗中，多达1至3％的患者经历大出血或15-18％的患者经历轻微出血。

华法林和肝素(包括其所有衍生物)是最常用的抗凝药物。华法林是最早批准的长期口服抗凝剂，需要通过凝血酶原时间(PT)凝血测定法进行定期监测以确定最佳剂量，这给医疗保健系统和患者生活质量带来了沉重负担。华法林是非特异性的并且靶向几种凝固酶，而皮下或静脉内注射给药的肝素则根据其分子量靶向活化的因子X(FXa)和/或凝血酶。此外，靶向凝血酶或FXa的已上市或正在开发的新型口服抗凝剂(NOAC)也具有与肝素和华法林相当的重大出血风险，但颅内出血除外，这种情况下NOAC的结果优于华法林。然而，与低分子量肝素和包含华法林的维生素K拮抗剂相比，NOAC增加胃肠道出血(New OralAnticoagulants Increase Risk for Gastrointestinal Bleeding:A SystematicReview and Meta-analysis Holster IL,Valkhoff VE,Kuipers EJ,Tjwa ETGastroenterology.2013年7月；145(1):105-112。

因此，临床上对与出血无关联的新型抗凝剂的需求尚未得到满足。60多年来，这个目标一直是该领域的愿望。但是，一直认为抗凝会导致不可避免的出血风险，因为认为血栓形成的相关机制与止血的相关机制相同。

因子XII(FXII)在50年前被确定为血液凝固内在途径中的凝血蛋白，因为FXII缺陷型患者的体外表面活化凝血时间显著延长。然而，一系列研究令人信服地表明，FXII在正常止血中没有作用。过去十年的证据已经确定，FXII对于体内血栓形成至关重要(Renne T,Pozgajova M,Gruner S,Schuh K,Pauer HU,Burfeind P,Gailani D,NieswandtB.Defective thrombus formation in mice lacking coagulation factor XII.J ExpMed 2005；202:271-281；Kleinschnitz C,Stoll G,Bendszus M,Schuh K,Pauer HU,Burfeind P,Renne C,Gailani D,Nieswandt B,Renne T.Targeting coagulation factorXII provides protection from pathological thrombosis in cerebral ischemiawithout interfering with hemostasis.J Exp Med 2006；203:513-518；Renne T,Nieswandt B,Gailani D.The intrinsic pathway of coagulation is essential forthrombus stability in mice.Blood Cells Mol Dis 2006；36:148-151；Hagedorn I,Schmidbauer S,Pleines I,Kleinschnitz C,Kronthaler U,Stoll G,Dickneite G,Nieswandt B.Factor XIIa inhibitor recombinant human albumin Infestin-4abolishes occlusive arterial thrombus formation without affectingbleeding.Circulation 2010；121:1510-1517以及Matafonov A,Leung PY,Gailani AE,Grach SL,Puy C,Cheng Q,Sun MF,McCarty OJ,Tucker EI,Kataoka H,RennéT,MorrisseyJH,Gruber A,Gailani D.Factor XII inhibition reduces thrombus formation in aprimate thrombosis model.Blood.2014；13；123(11):1739-46)。FXII的独特特性在于，其缺乏不会引起出血，这与所有其它凝血因子的缺乏不同。因此，FXIIa是用于发现具有极大改善安全性的潜力的抗凝剂的极具吸引力的目标。

最近的研究通过证明涉及FXII的血栓形成的新机制挑战了止血和血栓形成领域的教条。这些研究提供了明确的证据，证明FXII对于血栓发展是必需的，而在止血中不起作用。当受到胶原蛋白和肾上腺素输注的挑战时，FXII缺陷型小鼠受到显著的保护而避免血栓形成，同时显示手术或夹尾过程中出血时间没有延长。在暴露于FeCl3的肠系膜小动脉中和机械损伤后主动脉中也观察到类似的对抗血栓形成的保护作用。在这些模型中注入人类FXII恢复了血栓的发展。通过对FXII的功能以及直到最近仍主导本领域的由FXIIa激活的接触凝血途径的作用的争论，说明了这些发现的突破性性质。FXII缺乏不会导致出血而所有其它凝血蛋白酶的缺乏均会导致出血的事实加剧了这一争论，这导致人们相信生理凝血不需要FXII并且FXII激活是一种体外现象。

但是，最近的研究表明，FXII被带负电的表面和活化的血小板的表面激活(Zakharova et al,PLoS One.2015年2月17日；10(2):e0116665)。这些体内和体外研究表明，FXII在血栓形成中起着迄今尚未被认识的作用。FXIIa的产生通过增强的凝血酶生成、纤维蛋白沉积和对纤维蛋白结构的直接血栓前期作用来稳定血栓。该机制似乎在正常止血中不起作用，因为FXII缺乏在人类和小鼠的表型上都是沉默的，这使得FXII成为开发新型抗凝剂以治疗血栓形成的理想靶标。

已在多种不同的体内血栓形成模型中显示出FXII缺乏在减少血栓形成方面的有效性。除上述模型外，还已在通过颈动脉结扎诱发血栓形成的鼠模型以及继发于大脑中动脉短暂闭塞的脑微血管血栓形成的小鼠模型中证实了FXII在血栓形成中的作用。通过输注人类FXII，FXII缺陷型小鼠中的脑梗塞大小明显减少并恢复到大梗塞。FXII的抑制也已被证明可以降低静脉血栓形成的风险。一项研究表明，从蜱唾液腺中分离出的接触激活的Kunitz型抑制剂(Ir-CPI)有效地减少了由血管结扎诱导的静脉血栓形成的小鼠和大鼠模型中的血栓形成。这种抑制蛋白在通过输注胶原蛋白和肾上腺素诱导的小鼠模型中以及在背侧皮肤小动脉血栓形成的小鼠模型中也有效降低了PE。再次，在用Ir-CPI治疗的动物中，对出血时间没有影响。用H-D-Pro-Phe-Arg-氯甲基酮(PCK)抑制FXIIa也示出保护免于血栓形成。这些研究为抑制FXIIa在血栓形成的治疗中有效提供了概念的临床前证据。

最近，Magnus Larsson et al.,“A Factor XIIa Inhibitory AntibodyProvides Thromboprotection in Extracorporeal Circulation Without IncreasingBleeding Risk”Sci Transl Med 6,222ra17(2014)证明重组的完全人类抗体3F7结合到FXIIa酶促口袋中。在小鼠和兔子中，3F7干扰FXIIa介导的凝血，消除血流下形成的血栓，并阻断了实验性血栓形成。在兔子体内，3F7像肝素一样有效地提供血栓保护，但是与肝素不同的是，3F7治疗不会损害止血能力且不会增加伤口出血。Larsson得出结论，靶向FXIIa在旁路系统中是一种安全的血栓保护模式，并且提供了不会并发过量出血的与临床相关的抗凝策略。

达比加群(dabigatran，达比加群酯)、阿哌沙班和利伐沙班分别获准短期用作口服FXa/凝血酶抑制剂。达比加群是3-({2-[(4-氨咪甲基-苯基氨基)-甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羰基}-吡啶-2-基氨基)-丙酸(3-({2-[(4-carbamimidoyl-phenylamino)-methyl]-1-methyl-1H-benzoimidazole-5-carbonyl}-pyridin-2-yl-amino)-propionicacid，3-({2-[(4-氨基甲酰亚胺基-苯基氨基)-甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羰基}-吡啶-2-基氨基)-丙酸，3-({2-[(4-甲脒基-苯基氨基)-甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羰基}-吡啶-2-基氨基)-丙酸)。

达比加群也被批准用于在患有心房颤动(AF)的患者中长期预防中风并且描述于美国专利号6,087,380中。

利伐沙班是(S)-5-氯-N-{[2-氧代-3-[4-(3-氧代吗啉-4-基)苯基]噁唑烷-5-基]甲基}噻吩-2-羧酰胺。

利伐沙班也被批准用于在患有非瓣膜性AF的患者中降低中风风险。在保护AF患者免于中风和非CNS全身性栓塞方面，利伐沙班已显示出每日一次利伐沙班优于华法林。与华法林相比，利伐沙班还显示出相当的重大和非重大临床相关出血，以及显著降低的颅内出血发生率。利伐沙班在美国专利号7,157,456中描述。

阿哌沙班也是因子Xa抑制剂，被批准用于在患有非瓣膜性心房颤动的患者中预防中风和全身性栓塞。

阿哌沙班是1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-[4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基]-4,5-二氢吡唑[5,4-c]吡啶-3-羧酰胺。

美国专利号6,413,980中描述了阿哌沙班。

依度沙班是N′-(5-氯吡啶-2-基)-N

依度沙班是另一种因子Xa抑制剂，被批准用于在患有非瓣膜性心房颤动的患者中预防中风和全身性栓塞并且用于治疗深静脉血栓形成。美国专利号7,365,205中描述了依度沙班。

贝曲沙班是N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(N,N-二甲基氨咪甲基)苯甲酰胺]-5-甲氧基苯甲酰胺：

贝曲沙班是因子Xa抑制剂，被批准用于在患有中度至重度行动不便的患者中预防静脉血栓栓塞。美国专利号US 6,376,515中描述了贝曲沙班。

最近对主要制药公司的心血管管道的调查尚未发现正在开发的任何口服FXIIa抑制剂。Infestin-4是CSL Behring生产的靶向FXIIa的生物制剂，并且在FeCl3-诱导的小鼠和兔子血栓形成模型中显示出功效。靶向FXII(a)的其它抗体方法也已显示出体内功效。然而，如果infestin-4或抗体方法成功，则它们需要静脉内给药，这使得它们不太适用于长期抗凝。

由于FXII缺乏症在人类中是无症状的，与引起出血的其它凝血因子缺乏症以及缺乏或抑制FXII的活性显示出抗凝作用不相同，选择性FXIIa抑制剂具有降低与目前可用的抗凝疗法相关的出血风险的潜力。

本发明的各方面的目的是至少部分地减轻与现有技术有关的问题。

本发明某些实施方式的目的是提供抑制FXII活性(特别是FXIIa活性，例如FXIIa的丝氨酸蛋白酶活性)的化合物。

本发明某些实施方式的目的是提供具有与口服生物利用度的潜力一致的理化性质和药代动力学性质的化合物。

本发明某些实施方式的目的是提供相对于现有技术化合物和现有疗法表现出降低的细胞毒性或增加的溶解性的化合物。

本发明某些实施方式的另一目的是提供在剂量给药后具有方便的药代动力学特征和合适的作用持续时间的化合物。本发明某些实施方式进一步的目的是提供化合物，其中吸收后药物的一个或多个代谢片段是GRAS(通常被认为是安全的)。

本发明的某些实施方式满足了上述目的中的一些或全部。

发明内容

根据本发明，提供了根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

Z为N或CR

X为键、-C(O)NH-、-C(O)O-或-C(O)-；

L选自：键、-O-、-C(O)O-、-NR

Ar选自具有1、2或3个选自O、N或S中的杂原子的取代或未取代的5至10元杂芳基，或者取代或未取代的6至10元芳基，其中当被取代时，杂芳基或芳基被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、C

m选自0、1、2或3；

n选自0、1、2、3或4；

o选自1或2；

R

其中当被取代时，R

R

其中R

R

(a)H或C

(b)R

(c)当R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

根据本发明，提供了根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

Z为N或CR

X为键、-C(O)NH-、-C(O)O-或-C(O)-；

L选自：键、-O-、-C(O)O-、-NR

Ar选自具有1、2或3个选自O、N或S中的杂原子的取代或未取代的9至10元双环杂芳族环体系(优选9元)，其中，当被取代时，双环杂芳族环体系被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、C

m选自0、1、2或3；

n选自0、1、2、3或4；

o选自1或2；

R

其中当被取代时，R

R

其中R

R

(a)H或C

(b)R

(c)当R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

在其中R

在其中R

根据式(I)的化合物可以是式(Ia)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

Y选自：

R

其中，当由R

R

m选自1、2或3。

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，Y选自：

在多个实施方式中，R

(a)H或C

(b)R

根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以单独或组合具有以下基团定义：

其中

Z为N或CH；

X为键或-C(O)-；

L选自：键、-O-或-C(O)O-；

Ar选自具有1、2或3个选自O、N或S中的杂原子的取代或未取代的5至10元杂芳基、或取代或未取代的6元芳基，其中当被取代时，杂芳基或芳基被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、C

m选自1、2或3；

n选自0、1或2；

o选自1或2；

R

其中，当被取代时，R

R

其中，R

R

(a)H或C

(b)R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以单独或组合具有以下基团定义：

其中

Z为N或CH；

X为键或-C(O)-；

L选自：键、-O-或-C(O)O-；

Ar选自具有1、2或3个选自O、N或S中的杂原子的取代或未取代的9至10元双环杂芳族环体系(优选9元)，其中，当被取代时，双环杂芳族环体系被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、C

m选自1、2或3；

n选自0、1或2；

o选自1或2；

R

其中当被取代时，R

R

其中，R

R

(a)H或C

(b)R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

在多个实施方式中，Z为N或CH。

在多个实施方式中，Y选自：

在多个实施方式中，m为2或3。替代地，m为1或2。

在多个实施方式中，X为键或-C(O)-。

在一个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(IIa)或(IIb)的化合物：

在式(IIa)的多个实施方式中，X为键。

因此，在多个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(III)的化合物：

在式(IIb)的多个实施方式中，m为1或2。在式(IIb)的多个实施方式中，X为键、-C(O)NH-或-C(O)-，优选X为-C(O)-。

在多个实施方式中，R

因此，在多个实施方式中，式(I)的化合物可以是根据式(IV)的化合物：

在多个实施方式中，o为1。在多个实施方式中，R

在优选的实施方式中，o为1且R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，式(I)的化合物可以是根据式(VIa)或(VIb)的化合物：

在式(VIa)化合物的多个实施方式中，R

在式(VIb)化合物的多个实施方式中，R

在多个实施方式中，式(I)的化合物可以是根据式(VIIa)或(VIIb)的化合物：

在式(VIIa)化合物的多个实施方式中，R

在式(VIIb)化合物的多个实施方式中，R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(VIIIa)或(VIIIb)的化合物：

在多个实施方式中，Ar选自苯基、6元杂芳基或9至10元双环杂芳族环体系(优选9元)，其中Ar未被取代或被C

在多个实施方式中，Ar选自9至10元双环杂芳族环体系(优选9元)，其中Ar未被取代或被C

R

在多个实施方式中，Ar选自苯基、吡啶基、苯并三唑、咪唑并吡啶、吡啶并呋喃、吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并吡唑、吡啶并氮杂噻吩、苯并噁唑、苯并咪二唑、喹啉和异喹啉，其中Ar未被取代或被甲基、氯、-OMe、-NH

在多个实施方式中，Ar选自苯并三唑、咪唑并吡啶、吡啶并呋喃、吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并吡唑、吡啶并氮杂噻吩、苯并噁唑、苯并咪二唑、喹啉和异喹啉，其中Ar未被取代或被甲基、氯、-OMe、-NH

在多个实施方式中，Ar选自苯基、吡啶基、苯并三唑、咪唑并吡啶、吡啶并呋喃、吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并吡唑、吡啶并氮杂噻吩、苯并咪唑、苯并噁唑，其中Ar未被取代或被甲基、氯、-OMe、-NH

在多个实施方式中，Ar选自苯并三唑、咪唑并吡啶、吡啶并呋喃、吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并吡唑、吡啶并氮杂噻吩、苯并噁唑，其中Ar未被取代或被甲基、氯、-OMe、-NH

在多个实施方式中，Ar选自苯基和吡啶基以及：

在多个实施方式中，Ar选自苯基和吡啶基以及：

在多个实施方式中，Ar未被取代或是未取代的苯基。

在优选的实施方式中，Ar是苯基、吡啶基、吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并三唑、苯并咪唑、苯并噁唑或N-甲基苯并三唑。

在优选的实施方式中，Ar为吡咯并吡啶、氮杂吲哚、苯并三唑或N-甲基苯并三唑。

在优选的实施方式中，Ar为：

在多个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(IXa)或(IXb)的化合物：

在式(IXa)化合物的多个实施方式中，R

在式(IXb)化合物的多个实施方式中，R

在多个实施方式中，L选自：键、-NR

R

在多个实施方式中，L选自：键、-C(O)O-和-O-。在多个实施方式中，L为-C(O)O-。

在多个实施方式中，n为0、1、2或3。在多个实施方式中，n为0或1。在多个实施方式中，n不为0。

R

在多个实施方式中，-L-(CR

在多个实施方式中，-L-(CR

R

R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，R

其中，任何上述环状基团是未取代的或被1、2或3选自以下的基团取代：Cl、Br、F、CF

在多个实施方式中，R

其中任何上述环状基团是未取代的或被1、2或3个选自以下的基团取代：Cl、Br、F、CF

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，R

在多个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(Xa)或(Xb)的化合物：

在多个实施方式中，式(I)的化合物是根据式(XIa)或(XIb)的化合物：

在多个实施方式中，R

R

R

优选地，R

优选地，R

在多个实施方式中，式(I)的化合物选自：

在多个实施方式中，式(I)的化合物可以选自：

本发明更优选的化合物的Ki小于0.2μM(有关确定Ki的测试方法的公开，请参见实施例和合成章节中的因子XIIa抑制的确定)。次优选化合物在测试方法中采用的浓度下测量的Ki值大于100μM。在多个实施方式中，Ki值大于100μM的化合物不构成本发明的一部分。因此，在某些实施方式中，本发明化合物不是Ki值大于100μM的化合物。同样地，在多个实施方式中，本发明的化合物是Ki小于100μM的化合物。正下方示出了Ki值大于100μM的某些次优选化合物。在某些实施方式中，本发明的化合物不是选自下列的化合物：

对于技术人员将显而易见的是，本发明的化合物含有许多立体中心。本发明涵盖本发明所有可能的立体异构体，无论是单一的立体异构形式还是其混合物的形式。优选的立体异构体是在哌啶(Y为CH)/哌嗪(Y为N)环的2位上的S对映异构体。例如：

-NR

因此，在一个实施方式中，本发明的化合物是在哌啶/哌嗪的2位具有S构型且在-NR

在一个实施方式中，取代在诸如式(IIa)化合物的吡咯烷4位上的-(CR

在一个实施方式中，R

在本发明的一个方面，提供了用作药物的本发明的化合物。

根据另一方面，本发明提供了一种药物制剂，其包含本发明的化合物和药学上可接受的赋形剂。

在一个实施方式中，药物组合物可以是包含另外的药物活性剂的组合产物。

在本发明的优选方面，化合物是选择性FXIIa抑制剂。术语“选择性FXIIa抑制剂”是指相对于凝血酶和FXa选择性地抑制FXIIa的化合物。通常，本发明的化合物对FXIIa的选择性超过凝血酶至少>10倍，优选至少>100倍。

根据本发明的另一方面，提供了用于在预防和/或治疗由因子XIIa调节的疾病中使用的本发明的化合物。通过调节因子XIIa可预防和/或可治疗的疾病通常是通过抑制因子XIIa可预防和/或可治疗的疾病。因此，本发明的化合物可用于预防和/或治疗通过抑制因子XIIa可治疗的疾病。

本发明的化合物可用于治疗或预防选自以下的疾病(condition，病情，状况)或作为联合疗法用于治疗或预防选自以下的疾病：血栓形成，深静脉血栓形成，再灌注损伤(也称为缺血再灌注损伤)，经导管主动脉瓣置换(TAVR)(也称为经导管主动脉瓣植入(TAVI))，复杂的左侧消融(肺静脉隔离；VT消融)，脊髓或硬膜外麻醉，腰椎诊断穿刺，胸外科手术，腹部外科手术，大型骨科手术，肝活检，经尿道前列腺切除术，肾脏活检，肾功能不全，肝病，心房颤动和慢性肾脏疾病内窥镜活检的患者，前列腺或膀胱活检，用于室上性心动过速的电生理研究或射频导管消融(包括经由单次经中隔穿刺术(trans-septal puncture)进行左侧消融)，血管造影，起搏器或植入式心脏复律除颤器(ICD)植入(除非复杂的解剖学背景，例如先天性心脏病)，机械瓣膜植入，假体瓣膜植入，心肌梗塞，心绞痛(包括不稳定型心绞痛)，血管成形术或主动脉冠状动脉分流术(aortocoronary bypass)后的再闭塞和再狭窄，中风，心房颤动以降低其中风风险的患者，短暂性脑缺血发作，周围动脉阻塞性病症，深静脉血栓形成，肺栓塞，深静脉微血管疾病，需要体外膜氧合(ECMO)的患者，需要体外循环如冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者，弥散性血管内凝血(DIC)，动脉粥样硬化，关节炎，癌症患者中的血栓形成，沉默性脑缺血，中风，神经创伤性病症，神经炎性病症，包括与人造表面接触的医疗程序(包括肾透析)，抑制FXIIa可能有益的其它疾病诸如阿尔茨海默氏病、血管性痴呆、黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、脑卒中脑水肿、水肿的其它起因、遗传性血管性水肿或获得性血管性水肿。

通过抑制因子XIIa可预防和/或可治疗的疾病可以是与血液增稠、凝血或血凝块形成有关的疾病，例如疾病可以是血栓形成。

在本发明的多个实施方式中，提供化合物用于预防和/或治疗或者作为联合疗法治疗与高出血风险、低出血风险或血栓栓塞性病症相关的疾病。

在本发明的多个实施方式中，提供化合物用于预防和/或治疗或者作为联合疗法治疗与高出血风险有关的疾病。

在本发明的多个实施方式中，提供化合物用于预防和/或治疗或者作为联合疗法治疗与低出血风险有关的疾病。

在本发明的多个实施方式中，提供化合物用于预防和/或治疗或者作为联合疗法治疗与血栓栓塞性病症有关的疾病。

在本发明的多个实施方式中，本发明的化合物用作与高出血风险有关疾病的预防和/或治疗的一部分，其中治疗选自复杂的左侧消融(肺静脉隔离；VT消融)、脊髓或硬膜外麻醉、腰椎诊断穿刺、胸外科手术、腹部外科手术、大型骨科手术、肝活检、肝病、经尿道前列腺切除术、肾脏活检、或肾功能不全。

在本发明的多个实施方式中，本发明的化合物用作与低出血风险有关疾病的预防和/或治疗的一部分，其中治疗选自内窥镜活检、前列腺或膀胱活检、用于室上性心动过速的电生理研究或射频导管消融(包括经由单次经中隔穿刺术进行左侧消融)、血管造影、起搏器或植入式心脏复律除颤器(ICD)植入(除非复杂的解剖学背景，例如先天性心脏病)、机械瓣膜植入或假体瓣膜植入。

在一个实施方式中，本发明化合物用于避免或减轻现有抗凝疗法(如达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、华法林、依度沙班和贝曲沙班)的禁忌症。

在本发明的一个方面，提供了本发明的化合物用于避免或减轻现有抗凝疗法(诸如达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、华法林、依度沙班和贝曲沙班)的禁忌症的用途。

在一个实施方式中，本发明的化合物用于减轻使用利伐沙班的疗法的禁忌症；其中禁忌症可包括：估计肾小球滤过率(eGFR)小于15mL/分钟/1.73m

在一个实施方式中，本发明的化合物用于减轻使用阿哌沙班的疗法的禁忌症；其中禁忌症可包括：肌酐清除率(CrCl)小于15mL/min或eGFR<15mL/分钟/1.73m

在一个实施方式中，本发明的化合物用于减轻使用依度沙班的疗法的禁忌症；其中禁忌症包括：与华法林相比，因缺血性中风的风险增加而未在CrCl>95mL/分钟的NVAF患者中使用依度沙班。

在一个实施方式中，本发明的化合物用于减轻使用达比加群的疗法的禁忌症；其中禁忌症包括：心房颤动预防中风(预防与非瓣膜性心房颤动相关的中风和全身性栓塞)，肾损害CrCl<15mL/min或透析，DVT或PE治疗(适用于已接受肠胃外抗凝剂治疗5-10天的患者中的深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE))CrCl≤30mL/min或透析，DVT或PE预防(适用于髋关节置换术后预防深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE))，达比加群禁忌去纤核苷酸、米非司酮和人类凝血酶原复合物浓缩物，达比加群不得与以下物质一起使用：抗凝血酶α、抗凝血酶iii、阿哌沙班、卡马西平、达肝素、地塞米松、阿霉素、阿霉素脂质体、决奈达隆、依度沙班、依诺肝素、磺达肝素、磷苯妥英钠、肝素、酮康唑、来普鲁丁、奈法唑酮、苯巴比妥、苯妥英、普里米酮、利福平、圣约翰草、替诺福韦df、替拉那韦、长春碱和华法林。

在一个实施方式中，本发明的化合物用于减轻使用达比加群的疗法的禁忌症；其中禁忌症包括：肾损害(CrCl<15mL/min)，血液透析，过敏症，活动性病理性出血，受损的止血，机械或假体心脏瓣膜，血栓栓塞事件(例如瓣膜血栓形成、中风、TIA、MI)，大量大出血(主要是术后心包积液，需要干预以改善血液动力学)，在分娩过程中出血风险增加，活动性出血用抗凝药，择期手术，或侵入性程序，中风风险增加的患者，与抗血小板药、华法林、肝素、纤维蛋白溶解疗法和长期NSAID或阿司匹林合用时出血风险增加，先天性或获得性凝血障碍，溃疡性GI疾病和其它胃炎样症状，最近的出血，最近的脑、脊髓或眼科手术，接受神经麻醉(脊髓/硬膜外麻醉)的患者，有发生可能导致长期或永久性麻痹的硬膜外或脊髓血肿的风险而正接受脊髓穿刺的患者，与P-gp诱导剂和抑制剂、P-gp诱导剂(例如利福平)或其任何组合共同给药。

在一个实施方式中，本发明化合物用于减轻使用贝曲沙班的疗法的禁忌症；其中禁忌症包括：服用P-gp抑制剂的患者，严重肾损伤的患者，肝损伤患者，内在凝血异常的患者，假体心脏瓣膜患者，与影响止血的药物共同给药(从而增加出血风险)，与阿司匹林共同给药，与其它抗血小板药共同给药，与其它抗凝剂共同给药，与肝素共同给药，与溶栓剂共同给药，与选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)共同给药，与血清素-去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)共同给药，和与非甾体类抗炎药(NSAID)共同给药。

在一个实施方式中，本发明的化合物可用作抗凝剂，用于预防和/或治疗血栓栓塞性病症；其中病症是下列之一：心肌梗塞，心绞痛(包括不稳定型心绞痛)，血管成形术或主动脉冠状动脉分流术后的再闭塞和再狭窄，中风，心房颤动以降低其中风风险的患者，患有心房颤动和慢性肾脏疾病的患者，短暂性脑缺血发作，周围动脉阻塞性病症，再灌注损伤(也称为缺血再灌注损伤)，经导管主动脉瓣置换(TAVR)(也称为经导管主动脉瓣植入(TAVI))，肺栓塞，深静脉微血管疾病或需要体外膜氧合(ECMO)的患者。

在一个实施方式中，根据本发明的化合物可以适合于预防和/或治疗弥散性血管内凝血(DIC)。

在一个实施方式中，本发明的化合物适用于预防和/或治疗动脉粥样硬化和关节炎，并且另外地还适用于预防和/或治疗癌症患者中的血栓形成。

在一个实施方式中，本发明的化合物用于在预防和/或治疗血栓形成的方法中使用。

在本发明的一个方面，本文所公开的化合物可以用作抗凝剂。

在本发明的一个方面，提供了一种预防血栓形成或深静脉血栓形成、预防和/或治疗选自以下疾病的方法：血栓形成，复杂的左侧消融(肺静脉隔离；VT消融)，脊髓或硬膜外麻醉，腰椎诊断穿刺，胸外科手术，腹部外科手术，大型骨科手术，肝活检，经尿道前列腺切除术，肾脏活检，肾功能不全，肝病，内窥镜活检，前列腺或膀胱活检，用于室上性心动过速的电生理研究或射频导管消融(包括经由单次经中隔穿刺术进行左侧消融)，血管造影，起搏器或植入式心脏复律除颤器(ICD)植入(除非复杂的解剖学背景，例如先天性心脏病)，机械瓣膜植入，假体瓣膜植入，再灌注损伤(也称为缺血再灌注损伤)，经导管主动脉瓣置换(TAVR)(也称为经导管主动脉瓣植入(TAVI))，心肌梗塞，心绞痛(包括不稳定型心绞痛)，血管成形术或主动脉冠状动脉分流术后的再闭塞和再狭窄，中风，心房颤动以降低其中风风险的患者，患有心房颤动和慢性肾脏疾病的患者，短暂性脑缺血发作，周围动脉阻塞性病症，深静脉血栓形成，肺栓塞，深静脉微血管疾病，需要体外膜氧合(ECMO)的患者，需要体外循环如冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者，弥散性血管内凝血(DIC)，动脉粥样硬化，关节炎，癌症患者中的血栓形成，沉默性脑缺血，中风，神经创伤性病症，神经炎性病症，包括与人造表面接触的医疗程序(包括肾透析)，抑制FXIIa可能有益的其它疾病诸如阿尔茨海默氏病、血管性痴呆、黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、脑卒中脑水肿、水肿的其它起因、遗传性血管性水肿或获得性血管性水肿，其中，所述方法包含给予治疗有效量的本发明化合物或者给予治疗有效量的本发明化合物作为联合疗法。

在本发明的一个方面，提供了一种预防凝血的方法，其中所述方法包含给予治疗有效量的本发明的化合物。

在本发明的一个方面，提供了一种预防和/或治疗血栓形成的方法，其中所述方法包括给予治疗有效量的本发明化合物。

在本发明的一个方面，提供了本发明化合物在制备药物中的用途，该药物用于预防和/或治疗通过抑制因子XII(任选地因子XIIa)可治疗的疾病，例如该疾病可以是血栓形成。

在本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，其中组合物包含本发明的化合物和药学上可接受的赋形剂。

在一个实施方式中，该药物组合物可以是包含另外的药物活性剂的组合产物。另外的药物活性剂可以是本文其它地方公开的药物活性剂。

本发明的化合物可用于预防和/或治疗上述公开的任何疾病。可替代地，本发明的化合物可以在预防和/或治疗以上公开的疾病中用作联合疗法。可替代地，本发明的化合物可以在以上公开的疾病的预防和/或治疗中用作联合疗法。其中，本发明的化合物可以与另一本领域已知用于所述疾病的疗法组合使用。例如，FXII(a)抑制剂可与抗血小板疗法组合使用，目的是与单独使用抗血小板疗法相比，提供增强的抗血栓形成功效而不会增加出血风险。另外，FXII(a)抑制剂很可能会与其它治疗组合使用。

本发明还考虑了以下编号项：

(1)一种根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

Z为N或CR

X为键、-C(O)NH-、-C(O)O-或-C(O)-；

L选自：键、-O-、-C(O)O-、-NR

Ar选自具有1、2或3个选自O、N或S中的杂原子的取代或未取代的5至10元杂芳基、或取代或未取代的6至10元芳基，其中当被取代时，杂芳基或芳基被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、C

m选自0、1、2或3；

n选自0、1、2、3或4；

选自1或2；

R

其中当被取代时，R

R

其中，R

R

H或C

R

当R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

(2)根据项1的化合物，其中化合物是式(Ia)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

Y选自：

R

其中，当由R

R

m选自1、2或3。

(3)根据项2的化合物，其中Y选自：

(4)根据任一前述项的化合物，其中Z为N或CH。

(5)根据任一前述项的化合物，其中X为键或-C(O)-。

(6)根据任一前述项的化合物，其中L选自键、-O-或-C(O)O-。

(7)根据任一前述项的化合物，其中R

(8)根据任一前述项的化合物，其中R

(9)根据任一前述项的化合物，其中第13页第19和20行。先前非正式提交的修改也是高，任一前述项的化合物，其中R

(10)根据任一前述项的化合物，其中第13页第19和20行。先前非正式提交的修改也是高，任一前述项的化合物，其中R

(11)根据任一前述项的化合物，其中第13页第19和20行。先前非正式提交的修改也是高，任一前述项的化合物，其中R

(12)根据任一前述项的化合物，其中R

(13)根据任一前述项的化合物，其中R

(14)根据任一前述项的化合物，其中R

(15)根据任一前述项的化合物，其中Ar选自苯基、6元杂芳基或9至10元双环杂芳族环体系(优选9元)，其中Ar未被取代或被以下取代：C

(16)根据任一前述项的化合物，其中R

(17)根据项15的化合物，其中Ar选自苯基、吡啶基、苯并三唑、咪唑并吡啶、吡啶并呋喃、氮杂吲哚、苯并吡唑、吡啶并氮杂噻吩、苯并咪唑、苯并噁唑，其中Ar未被取代或被甲基、氯、-OMe、-NH

(18)根据项15或项17的化合物，其中Ar选自：

(19)根据项15的化合物，其中Ar为氮杂吲哚、苯并三唑或N-甲基苯并三唑。

(20)根据任一前述项的化合物，其中L选自：键、-NR

(21)根据任一前述项的化合物，其中R

(22)根据任一前述项的化合物，其中n为0或1。

(23)根据任一前述项的化合物，其中R

(24)根据任一前述项的化合物，其中-L-(CR

(25)根据任一前述项的化合物，其中R

(26)根据任一前述项的化合物，其中R

(27)根据任一前述项的化合物，其中R

(28)根据任一前述项的化合物，其中R

(29)根据任一前述项的化合物，其中R

(30)根据项31的化合物，其中R

(31)根据项29或项30的化合物，其中R

(32)根据项1的化合物，其中化合物选自：

(33)根据任一前述项的化合物，用作药物。

(34)一种药物制剂，包含项1至32中任一项的化合物和药学上可接受的赋形剂。

(35)根据项34的药物组合物，其中组合物可以是包含另外的药物活性剂的组合产物。

(36)根据项1至32中任一项的化合物，用于治疗由因子XIIa调节的疾病。

(37)根据项1至32中任一项的化合物，用于治疗和/或预防选自以下的疾病，或作为联合疗法用于治疗或预防选自以下的疾病：血栓形成，复杂的左侧消融(肺静脉隔离；VT消融)，脊髓或硬膜外麻醉，腰椎诊断穿刺，胸外科手术，腹部外科手术，大型骨科手术，肝活检，经尿道前列腺切除术，肾脏活检，肾功能不全，肝病，内窥镜活检，前列腺或膀胱活检，用于室上性心动过速的电生理研究或射频导管消融(包括经由单次经中隔穿刺术进行左侧消融)，血管造影，起搏器或植入式心脏复律除颤器(ICD)植入(除非复杂的解剖学背景，例如先天性心脏病)，机械瓣膜植入，假体瓣膜植入，再灌注损伤(也称为缺血再灌注损伤)，经导管主动脉瓣置换(TAVR)(也称为经导管主动脉瓣植入(TAVI))，心肌梗塞，心绞痛(包括不稳定型心绞痛)，血管成形术或主动脉冠状动脉分流术后的再闭塞和再狭窄，中风，心房颤动以降低其中风风险的患者，患有心房颤动和慢性肾脏疾病的患者，短暂性脑缺血发作，周围动脉阻塞性病症，深静脉血栓形成，肺栓塞，深静脉微血管疾病，需要体外膜氧合(ECMO)的患者，需要体外循环如冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者，弥散性血管内凝血(DIC)，动脉粥样硬化，关节炎，癌症患者中的血栓形成，沉默性脑缺血，中风，神经创伤性病症，神经炎性病症，包括与人造表面接触的医疗程序(包括肾透析)，抑制FXIIa可能有益的其它疾病诸如阿尔茨海默氏病、血管性痴呆、黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、脑卒中脑水肿、水肿的其它起因、遗传性血管性水肿或获得性血管性水肿。

(38)根据项1至32中任一项的化合物，其中通过抑制因子XIIa可预防和/或可治疗的疾病是与血液增稠、凝血或血凝块形成有关的疾病，例如该疾病可以是血栓形成。

(39)根据项1至32中任一项的化合物，用于预防和/或治疗与高出血风险、低出血风险或血栓栓塞性病症相关的疾病。

(40)根据项1至32中任一项的化合物，用于避免或减轻现有抗凝疗法，诸如达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、华法林、依度沙班和贝曲沙班的禁忌症。

(41)根据项1至32中任一项的化合物用于避免或减轻诸如达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、华法林、依度沙班和贝曲沙班的现有抗凝疗法的禁忌症的用途。

(42)根据项1至32中任一项的化合物，用作抗凝剂。

(43)一种用于预防和/或治疗选自以下的疾病的方法：血栓形成，深静脉血栓形成，复杂的左侧消融(肺静脉隔离；VT消融)，脊髓或硬膜外麻醉，腰椎诊断穿刺，胸外科手术，腹部外科手术，大型骨科手术，肝活检，肝病，经尿道前列腺切除术，肾脏活检，肾功能不全，内窥镜活检,前列腺或膀胱活检，用于室上性心动过速的电生理研究或射频导管消融(包括经由单次经中隔穿刺术进行左侧消融)，血管造影，起搏器或植入式心脏复律除颤器(ICD)植入(除非复杂的解剖学背景，例如先天性心脏病)，机械瓣膜植入，假体瓣膜植入，再灌注损伤(也称为缺血再灌注损伤)，经导管主动脉瓣置换(TAVR)(也称为经导管主动脉瓣植入(TAVI))，心肌梗塞，心绞痛(包括不稳定型心绞痛)，血管成形术或主动脉冠状动脉分流术后的再闭塞和再狭窄，中风，心房颤动以降低其中风风险的患者，患有心房颤动和慢性肾脏疾病的患者，短暂性脑缺血发作，周围动脉阻塞性病症，深静脉血栓形成，肺栓塞，深静脉微血管疾病，需要体外膜氧合(ECMO)的患者，需要体外循环诸如冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者，弥散性血管内凝血(DIC)，动脉粥样硬化，关节炎，癌症患者中的血栓形成，沉默性脑缺血，中风，神经创伤性病症，神经炎性病症，包括与人造表面接触的医疗程序(包括肾透析)，抑制FXIIa可能有益的其它疾病诸如阿尔茨海默氏病、血管性痴呆、黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、脑卒中脑水肿，水肿的其它起因，遗传性血管性水肿或获得性血管性水肿，其中，所述方法包含给予治疗有效量的项1至32的化合物或者作为联合疗法给予治疗有效量的项1至32的化合物。

(44)一种预防凝血的方法，其中所述方法包含给予治疗有效量的项1至32中任一项的化合物。

(45)一种治疗血栓形成的方法，其中所述方法包含给予治疗有效量的项1至32中任一项的化合物。

(46)项1至32中任一项的化合物在制备用于治疗通过抑制因子XII可治疗的疾病的药物中的用途。

(47)一种药物组合物，其中组合物包含项1至32中任一项的化合物和药学上可接受的赋形剂。

附图说明

在下文中，将参考附图进一步描述本发明的实施方式，其中：

图1显示了在股静脉氯化铁诱导的血栓形成模型中使用标准剂量静脉内给药的化合物M00834的抗凝功效。相对于在60分钟时间点仅给予载体的小鼠，计算了血块形成的抑制百分比。每组至少采用4只小鼠。

具体实施方式

下面给出的是在本申请中使用的术语的定义。如技术人员将理解的，本文中未定义的任何术语均具有正常含义。

术语“卤代”是指元素周期表第17族卤素中的一种。特别地，该术语是指氟、氯、溴和碘。优选地，该术语是指溴或碘。

术语“烷基”是指直链或支链的烃链。例如，术语“C

术语“烷氧基”是指通过氧与分子连接的烷基。例如，术语“C

术语“卤代烷基”是指被至少一个卤素原子取代的烃链，所述卤素原子在每次出现时独立地选自例如氟、氯、溴和碘。例如，术语“C

术语“烯基”是指含有至少一个双键的支链或直链烃链。例如，术语“C

术语“炔基”是指含有至少一个三键的支链或直链烃链。例如，术语“C

术语“杂烷基”是指含有至少一个选自N、O和S中的杂原子的支链或直链烃链，所述杂原子位于链中的任何碳之间或在链的端部。例如，术语“C

术语“碳环”是指饱和或不饱和的含碳环体系。“碳环”体系可以是单环或稠合多环环体系，例如双环或三环。“碳环”部分可以含有3至14个碳原子，例如在单环体系中含有3至8个碳原子和在多环体系中含有7至14个碳原子。“碳环”包括环烷基部分、环烯基部分、芳基环体系和包括芳族部分的稠合环体系。

术语“杂环”是指含有至少一个选自N、O或S中的杂原子的饱和或不饱和环体系。“杂环”体系可包含1、2、3或4个杂原子，例如1或2个杂原子。“杂环”体系可以是单环或稠合多环环体系，例如双环或三环。“杂环”部分可含有3至14个碳原子，例如在单环体系中含有3至8个碳原子和在多环体系中含有7至14个碳原子。“杂环”涵盖杂环烷基部分、杂环烯基部分和杂芳族部分。例如，杂环基可以是：环氧乙烷，氮丙啶，氮杂环丁烷，氧杂环丁烷，四氢呋喃，吡咯烷，咪唑烷，琥珀酰亚胺，吡唑烷，噁唑烷，异噁唑烷，噻唑烷，异噻唑烷，哌啶，吗啉，硫代吗啉，哌嗪和四氢吡喃。

术语环烷基是指饱和烃环体系。例如，“C

术语“C

术语“杂环烷基”是指在环内含有碳原子和选自N、O和S中的至少一个杂原子的饱和烃环体系。例如，可以有1、2或3个杂原子，可选地为1或2个杂原子。“杂环烷基”可通过任何碳原子或杂原子键合至分子的其余部分。“杂环烷基”可以与分子的其余部分具有一个或多个键，例如一个或两个键：这些键可以通过环中的任何原子。例如，“杂环烷基”可以是“C

术语“杂环烯基”是指非芳香族的不饱和烃环体系，其在环内含有碳原子和选自N、O和S的至少一个杂原子。例如，可以有1、2或3个杂原子，任选地1或2个杂原子。“杂环烯基”可通过任何碳原子或杂原子键合至分子的其余部分。“杂环烯基”可以与分子的其余部分具有一个或多个键，例如一个或两个键：这些键可以通过环中的任何原子。例如，“杂环烯基”可以是“C

当应用于取代基时，术语“芳族”整体上是指单环或多环体系，其在该环内或环体系内的共轭π体系中具有4n+2个电子，其中所有对该共轭π体系起作用的原子都在同一平面上。

术语“芳基”是指芳族烃环体系。该环体系在一个环中的共轭π体系中具有4n+2个电子，其中所有对共轭π体系起作用的原子都在同一平面上。例如，“芳基”可以是苯基和萘基。芳基体系本身可以被其它基团取代。术语“芳基”还包括不完全芳族的双环或三环体系，但在环体系中含有芳族环，例如茚满或四氢化萘。

术语“杂芳基”是指在单个环内或在稠合环体系内具有选自O、N和S中的至少一个杂原子的芳族烃环体系。所述环或环体系在共轭π体系中具有4n+2个电子，其中所有对共轭π体系起作用的原子都在同一平面上。例如，“杂芳基”可以是咪唑、噻吩基、呋喃、噻蒽、吡咯、苯并咪唑、吡唑、吡嗪、吡啶、嘧啶和吲哚。术语“杂芳基”还包括不完全为芳族但含有芳族环的双环或三环体系。杂原子在环体系内可以存在于芳族环或非芳族环中。例如，杂芳基还涵盖色烯、色满、吲哚啉、四氢喹啉。

本文中的术语“卤素”包括指代F、Cl、Br和I。卤素可以是Br。卤素以是I。

以

以实线和虚线绘制的键表示(在化学上可能的情况下)可以为单键或双键的键。例如，下面绘制的键可以是单键或双键。

当一个部分被取代时，在化学上可能且与原子价要求一致的情况下，可以在该部分上的任何点被取代。该部分可以被一个或多个取代基取代，例如1、2、3或4个取代基；任选地，一个基团上有1个或2个取代基。当存在两个或更多个取代基时，这些取代基可以相同或不同。取代基可以选自：OH、NHR、脒基、胍基、羟基胍基、甲脒基、异硫脲基、脲基、巯基、C(O)H、酰基、酰氧基、羧基、磺基、氨磺酰基、氨基甲酰基、氰基、偶氮、硝基、卤素、C

取代基仅存在于在化学上可能的位置，本领域技术人员不费吹灰之力即能够(从实验上或理论上)决定哪些取代在化学上是可能的而哪些不是。

邻位、间位和对位取代是本领域众所周知的术语。为了毫无疑问，“邻位”取代是这样的取代模式，其中相邻的碳具有取代基，无论是否是简单的基团，例如以下示例中的氟基团，还是分子的其它部分，如以

“间位”取代是这样的取代模式，其中两个取代基在彼此分隔一个碳的碳上，即在被取代的碳之间具有单个碳原子。换言之，在远离具有另一取代基的原子的第二个原子上具有取代基。例如，以下基团是间位取代的。

“对位”取代是这样的取代模式，其中两个取代基在彼此分隔两个碳的碳上，即在被取代的碳之间存在两个碳原子。换言之，在远离具有另一取代基的原子的第三个原子上具有取代基。例如，以下基团是对位取代的。

“酰基”是指例如从有机酸除去羟基而衍生的有机基团，例如具有式R-C(O)-的基团，其中R可以选自H、C

在整个说明书中，化合物的公开还包括其药学上可接受的盐、溶剂化物和立体异构体。当化合物具有立体中心时，本发明考虑了(R)和(S)立体异构体，本申请完成了立体异构体的同等混合物或外消旋混合物。当本发明的化合物具有两个或更多个立体中心时，考虑了(R)和(S)立体异构体的任何组合。(R)和(S)立体异构体的组合可产生非对映异构体混合物或单一非对映异构体。本发明的化合物可以以单一的立体异构体形式存在，或者可以是立体异构体的混合物，例如外消旋混合物和其它对映异构体混合物，以及非对映异构体混合物。如果混合物是对映体的混合物，则对映体过量可以是以上公开的任何对映体。当化合物为单一立体异构体时，该化合物仍可含有其它非对映异构体或对映异构体作为杂质。因此，单一立体异构体不一定具有100％的对映体过量(e.e.)或非对映体过量(d.e.)，但可以具有约至少85％、至少60％或更少的e.e.或d.e.。例如，e.e.或d.e.可以为90％或更高，90％或更高，80％或更高，70％或更高，60％或更高，50％或更高，40％或更高，30％或更高，20％或更高，或10％或更高。

本发明考虑了本发明化合物的药学上可接受的盐。这些可以包括化合物的酸加成盐和碱盐。这些可以是化合物的酸加成盐和碱盐。另外，本发明考虑了化合物的溶剂化物。这些可以是化合物的水合物或其它溶剂化物形式。

合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。例子包括乙酸盐，天冬氨酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，碳酸氢盐/碳酸盐，硫酸氢盐/硫酸盐，硼酸盐，樟脑磺酸盐，柠檬酸盐，乙二磺酸盐，乙磺酸盐，甲酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，葡糖酸盐，葡萄糖醛酸盐，六氟磷酸盐，海苯酸盐，盐酸盐/氯化物，氢溴酸盐/溴化物，氢碘酸盐/碘化物，羟乙基磺酸盐，乳酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，丙二酸盐，甲磺酸盐，甲基硫酸盐，萘甲酸盐，1,5-萘二磺酸盐，2-萘甲酸盐，烟酸盐，硝酸盐，乳清酸盐，草酸盐，棕榈酸盐，双羟萘酸盐，磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐，蔗糖盐，硬脂酸盐，琥珀酸盐，酒石酸盐，甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。

合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。例子包括铝盐，精氨酸盐，苄星青霉素盐，钙盐，胆碱盐，二乙胺盐，二乙醇胺盐，甘氨酸盐，赖氨酸盐，镁盐，葡甲胺盐，乙醇胺盐，钾盐，钠盐，氨丁三醇盐和锌盐。还可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。对于合适的盐的综述，参见Stahl和Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use”(Wiley-VCH,Weinheim,德国,2002)。

式(I)化合物的药学上可接受的盐可以通过以下三种方式中的一种或多种来制备：

(i)通过使本发明的化合物与所需的酸或碱反应；

(ii)通过从本发明化合物的合适前体中除去酸或碱不稳定的保护基，或通过使用所需的酸或碱将合适的环状前体(例如内酯或内酰胺)开环；或

(iii)通过与适当的酸或碱反应或者通过适当的离子交换柱将本发明化合物的一种盐转变为另一种盐。

所有这三种反应通常在溶液中进行。所得的盐可以沉淀出来并通过过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂进行回收。所得盐中的电离度可以从完全电离到几乎未电离。

本发明的化合物可以以非溶剂化物和溶剂化物形式存在。术语‘溶剂化物’在本文中用来描述分子复合物，其包含本发明的化合物和化学计量量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子，例如乙醇。当所述溶剂是水时，使用术语‘水合物’。

本发明的范围包括复合物如包合物，药物-主体包合复合物，其中与上述溶剂化物相反，药物和主体以化学计量或非化学计量的量存在。还包括含有两种或更多种有机和/或无机组分的药物复合物，它们的量可以是化学计量的或非化学计量的。得到的复合物可以是离子化的，部分离子化的，或非离子化的。对于此类复合物的综述，参见Haleblian的JPharm Sci,64(8),1269-1288(1975年8月)。

在下文中，对任何式的化合物的所有引用包括对其盐、溶剂化物和复合物以及对其盐的溶剂化物和复合物的引用。

本发明的化合物包括如本文定义的许多式的化合物，包括其所有多晶型物和晶体习性，下文定义的其前药及异构体(包括光学、几何和互变异构体)以及同位素标记的本发明化合物。

本发明还包括所有药学上可接受的同位素标记的本发明化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数、但原子质量或质量数不同于自然界中最常见的原子质量或质量数的原子替换。

适用于包含在本发明化合物中的同位素的实例包括氢的同位素，诸如

某些同位素标记的化合物，例如掺有放射性同位素的化合物，可用于药物和/或底物组织分布研究。考虑到易于掺入和现成的检测手段，放射性同位素氚(即

用更重的同位素氘(即

在纯化之前，根据所使用的合成程序，本发明的化合物可以对映异构体的混合物形式存在。可以通过本领域已知的常规技术分离对映异构体。因此，本发明涵盖了单个对映异构体及其混合物。

对于制备本发明化合物的方法的某些步骤，可能有必要保护不希望反应的潜在反应性官能团，并由此裂解所述保护基团。在这种情况下，可以使用任何相容的保护基。特别地，可以使用诸如T.W.GREENE(Protective Groups in Organic Synthesis,A.Wiley-lnterscience Publication,1981)或P.J.Kocienski(Protecting groups,Georg ThiemeVerlag,1994)描述的保护和脱保护方法。所有上述反应和前述方法中使用的新型原料的制备都是常规的，并且适用于其性能或制备的试剂和反应条件以及分离所需产物的程序，对于参考文献先例及本文实施例和制备方法的本领域技术人员来说是众所周知的。

另外，本发明化合物及制备其的中间体可根据各种众所周知的方法纯化，诸如例如结晶或色谱。

一种或多种本发明的化合物可以与一种或多种药物试剂组合，所述药物试剂为例如抗炎剂、抗纤维化剂、化学治疗剂、抗癌剂、免疫抑制剂、抗肿瘤疫苗、细胞因子疗法或酪氨酸激酶抑制剂，以用于治疗由抑制ROCK调节的疾病，例如纤维化疾病、自身免疫、炎性纤维化病、炎性病、中枢神经体系病症或癌症。

这种组合治疗可以通过同时、顺序或分开给药治疗的各个组分来实现。此类组合产物采用处于上文所述治疗有效剂量范围内的本发明的化合物以及批准剂量范围内的其它药物活性剂。

本发明的化合物可以单独地或与其它药物活性剂(例如特别是对于治疗和/或预防上述疾病有效的药剂)组合地体内给药。适合的组合由本发明的化合物与可通过示例且优选提及的下列一种或多种活性物质组成：降脂剂，特别是HMG-CoA-(3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A)-还原酶抑制剂；冠状动脉疗法/血管扩张药，特别是ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂；AII(血管紧张素II)受体拮抗剂；β-肾上腺素受体拮抗剂；α-1-肾上腺素受体拮抗剂；利尿剂；钙通道阻滞剂；引起环鸟苷单磷酸(cOMP)增加的物质，诸如例如可溶性鸟苷酸环化酶的刺激剂；纤溶酶原激活物(溶栓剂/纤溶剂)和增加血栓溶解/纤维蛋白溶解的化合物，诸如纤溶酶原激活物抑制剂的抑制剂(PAI抑制剂)或凝血酶激活的纤溶抑制剂(TAFI)的抑制剂；具有抗凝活性的物质(抗凝剂)；抑制血小板聚集的物质(血小板聚集抑制剂、凝血细胞聚体抑制剂)；和纤维蛋白原受体拮抗剂(糖蛋白IIb/IIIa拮抗剂)。

本发明的化合物在癌症的治疗中可以是有利的，因为癌症患者具有血栓前状态并且可能需要抗凝剂。这通常必须与出血风险进行平衡，因此，本文所述的化合物由于降低的出血风险而在癌症患者中提供了更安全的抗凝剂。为了治疗癌症，本发明的化合物可以与已知的癌症治疗疗法联合给药。

本发明的化合物可以以单晶形式存在或以晶体混合物的形式存在，或者它们可以是无定形的。因此，拟用于药物用途的本发明的化合物可以以结晶或无定形产品形式给药。通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥或喷雾干燥或蒸发干燥等方法，它们可以例如以固体塞、粉末或膜的形式获得。微波或射频干燥可用于此目的。

对于上述本发明的化合物，给药剂量当然将随所用化合物、给药方式、所需治疗和所指示的病症而变化。例如，如果口服给药本发明的化合物，那么本发明化合物的日剂量可以在0.01微克/千克体重(μg/kg)至100毫克/千克体重(mg/kg)的范围内。

本发明的化合物或其药学上可接受的盐可以单独使用，但通常以药物组合物的形式给药，在药物组合物中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的佐剂、稀释剂或载体相联合。例如，“Pharmaceuticals-The Science of Dosage Form Designs”,M.E.Aulton,Churchill Livingstone,1988中描述了选择和制备合适药物制剂的常规程序。

取决于本发明化合物的给药方式，用于给药本发明化合物的药物组合物可优选地包含0.05至99％w(重量百分比)本发明的化合物，更优选0.05至80％w本发明的化合物，还更优选0.10至70％w本发明的化合物且甚至更优选0.10至50％w本发明的化合物，所有重量百分比均基于总组合物。

药物组合物可以以例如霜剂、凝胶剂、洗剂、溶液剂、混悬剂的形式局部(例如向皮肤)给药，或者例如以片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂的形式全身给药(例如通过口服给药)；或以注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或输注)用无菌溶液、混悬液或乳剂形式进行肠胃外给药；通过栓剂形式的直肠给药；或以气雾剂形式吸入。

对于口服给药，本发明的化合物可以与佐剂或载体混合，例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇；淀粉，例如马铃薯淀粉、玉米淀粉或支链淀粉；纤维素衍生物；粘合剂，例如明胶或聚乙烯吡咯烷酮；和/或润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等，然后压成片剂。如果需要包衣片剂，则如上所述制备的核可以用浓糖溶液包衣，所述糖溶液可以含有例如阿拉伯胶、明胶、滑石粉和二氧化钛。可替代地，可用溶于易挥发有机溶剂的合适聚合物将片剂包衣。

为了制备软明胶胶囊，可以将本发明的化合物与例如植物油或聚乙二醇混合。硬明胶胶囊可含有使用上述片剂赋形剂的化合物的颗粒。也可以将本发明化合物的液体或半固体制剂填充到硬明胶胶囊中。用于口服应用的液体制剂可以是糖浆或混悬剂的形式，例如含有本发明化合物的溶液，其余量为糖以及乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物。任选地，此类液体制剂可含有着色剂、调味剂、甜味剂(诸如糖精)、防腐剂和/或羧甲基纤维素作为增稠剂或本领域技术人员已知的其它赋形剂。

对于静脉内(肠胃外)给药，本发明的化合物可以以无菌水或油溶液的形式给药。

根据众所周知的医学原理，根据本发明化合物的用于治疗目的的剂量大小将根据疾病的性质和严重程度、动物或患者的年龄和性别以及给药途径而自然变化。

预期本发明化合物的剂量水平、剂量频率和治疗持续时间会根据制剂和患者的临床适应症、年龄和合并症的医学状况而改变。用本发明化合物治疗的标准持续时间可以是任何时间长度。例如，治疗持续时间可以是数天，数周，数月或数年。治疗可以是无限期的。对于大多数临床适应症，治疗可持续一到七个月。如果出现反复感染或与血液供应不足的组织或植入材料(包括骨骼/关节、呼吸道、心内膜和牙齿组织)相关的感染，则可能有必要将治疗持续时间延长至超过七个月。

实施例及合成

1H-NMR：在Bruker DRX 400MHz或Jeol ECS 400MHz光谱仪上获得光谱。在294K(除非另有说明)测量光谱并且参考TMS(0.0ppm)、DMSO-d6(2.50ppm)、CDCl3(7.26ppm)报告化学位移(δ-值)，单位为百万分率(ppm)。偶合常数(J)以赫兹(Hz)为单位，光谱分裂图样指定为单峰(s)、双重峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q)、多重峰或更多重叠信号(m)、宽信号(br)；溶剂在括号中给出。

缩略语

在实施例和说明书的其它部分中使用以下缩略语。

ABCN：偶氮二环己烷甲腈；Boc：叔丁氧羰基；Cbz：碳苄氧基；DavePhos：2-二环己基膦基-2′-(N,N-二甲氨基)联苯；dba：三(二亚苄基丙酮)；DBU：1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯；DCE：1,2-二氯乙烷；DCM：二氯甲烷；DIAD：偶氮二羧酸二异丙酯；二氧六环：1,4-二氧六环；DIPEA：二异丙基乙胺；DMA：二甲基乙酰胺；DMAP：4-(二甲氨基)吡啶；DMF：N,N-二甲基甲酰胺；DMS：二甲基硫；DMSO：二甲基亚砜；Dppf：1,1'-双(二苯基膦)二茂铁；dtbpf：([1,1′-双(二叔丁基膦)二茂铁]；EtOAc：乙酸乙酯；Fmoc：9-芴基甲氧基羰基；h：小时；HATU：2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐；HBTU：(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐；HPLC：高效液相色谱；MIDA：N-甲基亚氨基二乙酸；min：分钟；LCMS：液相色谱-质谱；MS：质谱；Ms：甲磺酰基；Pet-醚：石油醚(沸点60-80℃)；quant.：定量的(转化)；Rt：保留时间；RT：室温；SCX：强阳离子交换；TEA：三乙胺；TFA：三氟乙酸；THF：四氢呋喃；TsCl：对甲苯磺酰氯；XPhos：2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯；XantPhos：4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽。

分析方法

使用反相分析HPLC-MS使用下面列出的参数进行产物和中间体的分析。

HPLC分析方法：

AnalpH2_MeOH_4min：Phenomenex Luna C18(2)3μm，50x4.6mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH+0.1％甲酸；45℃；％B：0.0min 5％，1.0min 37.5％，3.0min 95％，3.5min 95％，3.51min 5％，4.0min 5％；2.25mL/min。

AnalpH2_50-95MeOH_4min：Phenomenex Luna C18(2)3μm，50x4.6mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH+0.1％甲酸；45℃；％B：0.0min 50％，1.5min 95％，3.5min 95％，3.51min5％，4.0min 5％；2.25mL/min。

AnalpH9_MeOH_4min：Phenomenex Luna C18(2)3μm，50x4.6mm；A＝水pH 9(碳酸氢铵10mM)；B＝MeOH+0.1％甲酸；45℃；％B：0.0min 5％，1.0min 37.5％，3.0min 95％，3.5min 95％，3.51 5％，4.0min 5％；2.25mL/min。

AnalpH2_MeOH_QC_V1：Phenomenex Gemini NX C18 5μm，150x4.6mm；A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH+0.1％甲酸；40℃；％B：0.0min 5％，0.5min，5％，7.5min 95％，10.0min95％，10.1min 5％，13.0min 5％；1.5mL/min。

AnalpH9_MeOH_QC_V1：Phenomenex Gemini NX C18 5μm，150x4.6mm；A＝水+pH 9(碳酸氢铵10mM)；B＝MeOH；40℃；％B：0.0min 5％，0.50min 5％，7.5min 95％，10.0min95％，10.1min 5％，13.0min 5％；1.5mL/min。

Agilent_MeCN_HPLC_3min：Phenomenex Luna C18，50x2mm：A＝水+0.1％甲酸；B＝MeCN+0.1％甲酸；5-95％B 0-3min；1mL/min。

UPLC分析方法

AnalpH2_MeCN_UPLC_3.8min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um,2.1x50mm，A＝水+0.05％甲酸；B：乙腈+0.05％甲酸；35℃；％B：0.0min 10％，0.5min 10％，1min 35％，1.5min 45％，2.3min 90％，3.2min 90％，3.8min 10％；0.55mL/min。

AnalpH2_MeCN_UPLC_4.0min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um，2.1x50mm，A＝水+0.05％甲酸；B：乙腈+0.05％甲酸；35℃；％B：0.0min 10％，0.5min 10％，1min 35％，1.5min 45％，2.3min 90％，3.2min 90％，3.6min 10％，4.0min 10％；0.55mL/min。

AnalpH2_MeCN_UPLC_4.2min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um，2.1x50mm，A＝水+0.05％甲酸；B：乙腈+0.05％甲酸；40℃；％A：0.0min 95％，0.3min 95％，2min 5％，3.5min5％，3.6min 95％，4.2min 95％；0.6mL/min。

AnalpH2_MeCN_UPLC_5.0min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um，2.1x50mm，A＝水+0.05％甲酸；B：乙腈+0.05％甲酸；40℃；％A：0.0min 50％，3.0min 90％，5.0min 90％，5.1min 50％；0.4mL/min。

AnalpH2_MeCN_UPLC_6.1min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um，2.1x100mm，A＝水+0.05％甲酸；B：乙腈+0.05％甲酸；40℃；％A：0.0min 60％，2.0min 90％，6.0min 90％，6.1min 60％；0.3mL/min。

AnalpH9_MeCN_UPLC_10min：Acquity UPLC BEH C-18 1.7um，2.1x 50mm，A＝5mM乙酸铵在水中；B：乙腈；40℃；％B：0.0min 3％，1.0min 3％，7.0min 100％，7.5min 100％，9.0min 3％，10min 3％；0.5mL/min。

Thermo_MeOH_UHPLC_1.2min：Phenomenex Kinetex,2.6uM，50x2.1mm，A＝水+0.1％甲酸；B＝MeOH+0.1％甲酸；2-95％B 0-1.0min；1.3mL/min。

通用方法

通用方法1(GM1)：酰胺偶联

在室温下将羧酸(1.0eq)、胺(1.0-1.5eq)、N,N-二异丙基乙胺或三乙胺(1.5-5.0eq)和偶联剂诸如HBTU(2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐)、HATU(1-[双(二甲氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓-3-氧化六氟磷酸盐)、HCTU(O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(1.0-1.5eq)或TBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基铵四氟硼酸盐在无水溶剂(诸如DMF、DCM或MeCN)中的混合物搅拌1-72h。使用以下方法之一分离和纯化产物：

a)水与饱和NaCl溶液的混合物稀释反应混合物并且用EtOAc萃取。用Na

b)真空除去溶剂，将残余物溶于EtOAc，并且用NaHCO

c)用水或饱和NaCl水溶液稀释反应，并且用DCM萃取。用MgSO

d)将反应在冰浴中冷却，用水稀释，并用EtOAc萃取。依次使用NaHCO3

通用方法2(GM2)：Boc脱保护

方法Boc脱保护2A：在DCM:TFA混合物(比例为10:1至1:1)中将Boc-保护的胺搅拌1-18h。

方法Boc脱保护2B：将Boc-保护的胺溶解于EtOAc或DCM中，并且加入4M在二氧六环中的HCl或1M在Et

方法Boc脱保护2C：使处于DCM中的粗Boc-保护的胺穿过MP-TsOH柱体，用MeOH洗涤(至多5个柱体积)并且使用2M NH

真空浓缩反应混合物(或含有产物的级分：方法2C)，得到粗物质，其作为粗品直接使用，或通过以下方法之一纯化：

a)SCX-2，然后进行制备型HPLC

b)通过添加1M在MeOH中的NH

c)用0.5N HCl

d)反相色谱

e)添加水和饱和NaHCO

f)制备型HPLC，任选地之后进行SCX-2。

g)SCX-2，任选地之后添加4M在二氧六环中的HCl，并且除去溶剂，得到HCl盐。

通用方法3(GM3)：氢化

通用方法3A(使用H

在反应过程中可以任选地添加另外的等分的Pd/C。

通用方法3B(使用甲酸铵氢化)：将烯烃(1eq)溶解于EtOH中并且加入Pd/C(0.5eq)和NH

在反应的过程中可以任选地添加另外的等分的Pd/C和/或NH

通用方法3C(使用H-立方体氢化)：将烯烃溶解在质子溶剂中，并通过H型立方体反应器(Pd/C柱体)，典型条件：30℃，20巴，1mL/min。真空蒸去溶剂，该物质未经进一步纯化而直接使用。

通用方法4(GM4)：酯水解

方法酯水解4A：将酯(1.0eq)溶解于MeOH或1,4-二氧六环中，加入1M LiOH(1-2eq)并且在室温下搅拌1-64h。

任选地，在反应过程中可以添加另外的当量的1M LiOH(水溶液)。

方法酯水解4B：将酯(1.0eq)溶解于1:1:1的1M NaOH/MeOH/THF的溶液中并且在室温下搅拌1-18h。

方法酯水解4C：将酯(1.0eq)溶解于10M在MeOH中的NaOH(5eq)中，并且在60℃下搅拌1-18h。

真空除去溶剂，并使用以下方法之一分离出产物：

a)粗产物直接使用而无需进一步纯化。

b)用水稀释并且酸化至pH4，然后使用EtOAc或DCM萃取。有机萃取物用MgSO

c)将粗产物溶于水中，用EtOAc或DCM洗涤水层。用1M HCl酸化水层，并将产物萃取到EtOAc或DCM中。干燥(MgSO

d)添加2N HCl，调节至pH 7。真空蒸去溶剂，并将残余物溶于DCM中。将溶液过滤，减压浓缩滤液，并真空干燥得到的固体残余物。

通用方法5(GM5)：Fmoc脱保护

在室温下将Fmoc-保护的胺在哌啶与DCM或DMF的10:1混合物中搅拌1-18h。减压除去溶剂，并且残留物未经进一步纯化而直接使用，或者通过柱色谱法或制备型HPLC纯化。

通用方法6(GM6)：使用NaBH

方法NaBH

通用方法7(GM7)：使用氯甲酸酯形成氨基甲酸酯

在N

通用方法8(GM8)–酰胺与T3P偶联

在0℃下，向搅拌的酸(1.0-1.1eq，取决于酸或胺是否是限制性试剂)、胺(1.0-1.1eq，取决于酸或胺是否是限制性试剂)和Et

a)柱色谱法

b)SCX-2，之后添加4M在二氧六环中的HCl，并且除去溶剂得到HCl盐。

通用方法9(GM9)–使用三光气形成氨基甲酸酯

在N

通用方法10(GM10)：磺酰胺的形成

在N

通用方法11(GM11)：交叉偶联反应

向胺(1.0eq)在DCM和DMF(4:1溶剂比)中的溶液中加入硼酸(5.0eq)、Et

通用方案

合成RgA：

C-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲胺

步骤-1：(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

在0℃下，向搅拌的1-甲基-1H-苯并三唑-5-甲腈(12g,38mmol)的干燥甲醇(300mL)溶液加入Boc

步骤-2：(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲胺盐酸盐

在0℃下，向HCl的1,4-二氧六环溶液(12mL,4M)中加入(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(10g,74.1mmol)，并且搅拌4h。过滤收集固体，用乙醚洗涤并干燥，得到(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲胺盐酸盐(6.07g,82％)，为白色固体。

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：1.35min,m/z 163[M+H]

合成6-氨基甲基-苯并[d]异噁唑-3-基胺：

将3-氨基-1,2-苯并噁唑-6-甲腈(225mg,1.41mmol)溶解于THF(10mL)中并且逐滴加入BH

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：1.20min,m/z 164[M+H]

合成(4-氨基甲基-苄基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯：

步骤1：将1-(N-boc-氨基甲基)-4-(氨基甲基)苯(3.80g,16.1mmol)溶解于DCM(100mL)和DIPEA(5.0mL,29mmol)中，随后加入FmocCl(5.0g,19mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时，此后出现沉淀。加入水(100mL)，将沉淀物过滤并干燥，得到[4-(叔丁氧羰基氨基-甲基)-苄基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(6.32g,86％)，为白色固体。

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：3.52min,m/z 481.3[M+H]

步骤2：将[4-(叔丁氧羰基氨基-甲基)-苄基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(6.32g,13.2mmol)悬浮于二氧六环(50mL)中并且缓慢地加入HCl溶液(4M在二氧六环中，20mL)。在室温下将反应混合物搅拌过夜，然后加入另一等分4M在二氧六环中的HCl(10mL)，并且在室温下再将混合物搅拌2小时。用异己烷(150mL)稀释反应混合物，过滤收集产物并且真空干燥，得到(4-氨基甲基-苄基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(4.0g,73％)，为灰白色固体。

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：2.32min,m/z 359.3[M+H]

合成4-(氨基甲基)吡啶-2-胺

步骤1：在-5℃下，历经20分钟，向2-氨基-4-氰基吡啶(0.50g,4.2mmol)、NiCl

Agilent_MeCN_HPLC_3min LCMS：R

步骤2：将N-[(2-氨基吡啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(400mg,1.79mmol)在沸甲醇(2mL)中的溶液冷却至30℃。加入4M在1,4-二氧六环中的HCl(4.5mL)并且将反应放置3h。倾析出1-4-二氧六环并且用乙醚(4x 0.75mL)研磨得到的奶油状固体。在高真空下干燥得到的浅黄色固体，得到4-(氨基甲基)吡啶-2-胺二盐酸盐，收率96％(370mg)。

Agilent_MeCN_HPLC_3min LCMS：R

4-(氨基甲基)-6-甲基吡啶-2-胺：

步骤1：依照通用方法6A，由2-氨基-6-甲基吡啶-4-甲腈(90mg)合成N-[(2-氨基-6-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯，收率33％(52mg)。

Agilent_MeCN_HPLC_3min LCMS：R

步骤2：依照通用方法2B，使用4M在1,4-二氧六环中的HCl，由N-[(2-氨基-6-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(160mg)合成4-(氨基甲基)-6-甲基吡啶-2-胺，得到72mg，44％。

合成RgD

合成(R)-2-叔丁氧羰基氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸：

步骤1：将Boc-D-Glu-OBzl(1.00mg,2.96mmol)溶解于DCM(20mL)中并且加入HBTU(1.12g,2.96mmol)和DIPEA(1.53mL,8.88mmol)。加入吡咯烷(0.25mL,2.96mmol)并且将混合物在室温下搅拌1h。用水(20mL)稀释反应混合物并且用DCM(2x 40mL)萃取。干燥(MgSO

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：3.14min,m/z 391[M+H]+

步骤2：将(R)-2-叔丁氧羰基氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸苄基酯(1.25g,2.96mmol)溶解于EtOH(20mL)中，置于N

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：2.56min,m/z 323[M+Na]+

合成(R)-2-二甲氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸

步骤1：按照通用方法1c，使用HATU和DIPEA在DCM中使Boc-D-Glu-OBzl(2.0g,5.9mmol)与吡咯烷(0.60mL,7.1mmol)酰胺偶联。使用柱色谱法(Biotage,25g SNAP,20-80％EtOAc/异己烷)纯化产物，得到(R)-2-叔丁氧羰基氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸苄基酯，为无色油状物，将其直接用于后续反应中。

ANALPH2_MEOH_4min,Rt：3.04min,m/z 391.5[M+H]+

步骤2：使用通用方法2A进行(R)-2-叔丁氧羰基氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸苄基酯的Boc脱保护1.5h，随后通过SCX-2纯化，随后在真空下干燥，得到(R)-2-氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸苄基酯(1.4g,经历2个步骤为82％)。

ANALPH2_MEOH_4min,Rt：1.68min,m/z 291.3[M+H]+

步骤3：将甲醛(37％在水中,1mL)、乙酸(0.5mL)和NaBH

ANALPH2_MEOH_4min,Rt：2.99min,m/z 319.4[M+H]+

步骤4：使用通用方法3A将(R)-2-二甲氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸苄基酯的氢化进行36小时。在真空下干燥产物，得到(R)-2-二甲氨基-5-氧代-5-吡咯烷-1-基-戊酸(1.1g,100％)，为白色固体。

ANALPH2_MEOH_4min,Rt：0.75min,m/z 229.3[M+H]+

合成(2R)-2-(二甲氨基)-4-苯丁酸

步骤1：将D-高苯丙氨酸(448mg,2.50mmol)和多聚甲醛(675mg,22.5mmol)在2,2,2-三氟乙醇(12.5mL)中的溶液加热至65℃并且历经5min逐滴加入NaBH

Agilent_MeCN_HPLC_3min LCMS：R

通用方案1

遵循通用方案1的路线合成的化合物：

(S)-4-((R)-2-氨基-4-苯基-丁酰基)-3-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酰基]-哌嗪-1-羧酸苄基酯M05098

步骤1：将(S)-N-1-Boc-4-Cbz-2-哌嗪羧酸(150mg,0.41mmol)、(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲胺盐酸盐(82mg,0.41mmol)和HATU(234mg,0.61mmol)溶解于DMF(2mL)中。加入Et

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：3.00min,m/z 509.3[M+H]

步骤2：将(S)-2-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酰基]-哌嗪-1,4-二羧酸4-苄基酯1-叔丁酯(111mg,0.22mmol)溶解于DCM(2mL)中并且加入TFA(2mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过SCX-2柱体(10g)使用0.5M NH

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：1.80min,m/z 409.3[M+H]

步骤3：(S)-3-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酰基]-哌嗪-1-羧酸苄基酯(75mg,0.18mmol)、Boc-D-高苯丙氨酸(51mg,0.18mmol)和HATU(464mg,1.22mg)溶解于DMF中。加入Et

AnalpH2_MeOH_4MIN：Rt：3.36min,m/z 670.47[M+H]

步骤4：将(S)-4-((R)-2-叔丁氧羰基氨基-4-苯基-丁酰基)-3-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酰基]-哌嗪-1-羧酸苄基酯(48.3mmol,0.072mmol)溶解于DCM(2mL)并且加入TFA(2mL)。在室温下将反应混合物搅拌1小时，然后真空浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到(S)-4-((R)-2-氨基-4-苯基-丁酰基)-3-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基甲基)-氨基甲酰基]-哌嗪-1-羧酸苄基酯(21.3mg,49％)，为白色固体。

ANALPH9_MEOH_QC_v1,Rt：7.45min,m/z 570.3[M+H]+

ANALPH2_MEOH_QC_v1,Rt：5.59min,m/z 570.3[M+H]+

通过类似方法制备了下列化合物：

通用方案2

遵循通用方案2的路线合成的化合物：

方案：哌嗪胺的后期脱保护

方案：后期磺酰胺的形成

使用上述通用方法合成了以下化合物。

下表显示了本发明考虑的其它化合物。

通用测试方法

已经使用以下用于筛选FXIIa和其它蛋白酶活性的测定协议在体外确定了本发明化合物的活性。在纯化体系中进行这些测定中的每一项，该纯化体系采用在微孔板孔中使用生色测定。通过酰胺键将模拟天然蛋白质底物的生色肽底物连接至生色基团。在蛋白水解酶的催化下，从肽中释放出对硝基苯胺(pNA)；吸光度增加并且可以在405nm处监测吸光度。

将所有化合物溶解于100％(v/v)DMSO中至10mM的储液浓度，各测定中所用化合物的最高浓度为500μM。在50mM Tris 137mM NaCl pH 7.4中，DMSO的最终浓度为5％(v/v)。在未添加测试化合物的情况下，采用5％DMSO的最终浓度。

因子XIIa抑制的确定

使用生色底物S-2302(Chromogenix)测量因子XIIa活性。将各种浓度的化合物与10nM FXIIa一起温育，并且在50mM Tris,137mM NaCl,pH 7.4中在37℃下温育10分钟，然后加入最终浓度为450μM的S-2302生色底物。在37℃下每12秒监测一次405nm的动力学读数，总共持续3个小时。确定初始速率的梯度并用于计算IC

K

下表1中示出了以上述方式获得的K

选择性的确定

为了确定测试化合物的选择性，测定了这些测试化合物对其它丝氨酸蛋白酶(包括FXa和凝血酶)的抑制活性。基本上是在37℃将浓度逐渐升高的化合物与每种酶一起温育10分钟：FXa(5nM)和凝血酶(5nM)，之后分别与适当的生色底物S2765(350μM)和GPR(250μM)在50mM Tris,137mM NaCl,pH 7.4中温育。生色底物S2765来自Chromogenix且GPR来自Bachem。在37℃下每12秒监测一次405nm的动力学读数，总共持续3个小时。确定初始速率的梯度并将其用于计算IC

K

其中[底物]表示测定中所用底物的浓度，并且Km是每种酶用其自身底物所测定的确定值。该化学系列的化合物表现出竞争性抑制作用。

下表1还示出了对凝血酶和FXa的倍数选择性。该倍数选择性表明对FXIIa的抑制作用优先于FXa和凝血酶。已经基于倍数选择性值对本发明的化合物对FXIIa相比于凝血酶的倍数选择性进行了分类，所述分类为“+”、“++”和“+++”。类别“+”是指倍数选择性值小于10。类别“++”是指倍数选择性值为10到100。类别“+++”是指倍数选择性值大于100。“-”表示未进行测试。类别“NA”表示在测试浓度和测定极限内未显示任何活性的化合物。

已经基于倍数选择性值对本发明的化合物对FXIIa相比于FXa的倍数选择性进行了分类，所述分类为“o”、“oo”和“ooo”。类别“o”是指倍数选择性值小于10。类别“oo”是指倍数选择性值为10到100。类别“ooo”是指倍数选择性值大于100。“-”表示未进行测试。类别“NA”表示在测试浓度和测定极限内未显示任何活性的化合物。

体内抗凝功效的确定

试剂

AlexaFluor488缀合物纤维蛋白原购自Invitrogen(Paisley,UK)。

动物

所有实验均使用体重在20至30g之间的C57BL/6雄性小鼠。所有程序均经谢菲尔德大学伦理委员会(University of Sheffield ethics committee)批准，并根据英国1985年内政部动物(科学程序)法案(Home Office Animals(Scientific Procedures)Act)执行。

实时评估体内纤维蛋白形成的活体显微镜检查

使用配有明场和荧光显微镜并配有水浸物镜(40/0.80W)的立式显微镜(Nikoneclipse E600-FN,Nikon UK,泰晤士河畔金斯顿,英国)，显微观察了在氯化铁(FeCl

通过腹腔注射125mg/kg氯胺酮盐酸盐(Ketaset；Willows Francis Veterinary,Crawley,UK)、12.5mg/kg赛拉嗪盐酸盐(Bayer Suffolk,UK)和0.025mg/kg硫酸阿托品(phoenix Pharmaceuticals Ltd,UK)将小鼠麻醉。进行了气管插管(以辅助呼吸)和颈动脉插管(用于维持麻醉和药物施用)并且暴露出股静脉。经由颈动脉给药100μlAlexaFluor488缀合物纤维蛋白原(2mg/ml)和100μl化合物(稀释于10％DMSO和90％盐水中，共100μl)或载体(10％DMSO在盐水中，共100μl)，5min后，将饱和了10％(v/v)FeCl

采用Slidebook成像软件(5.0版；Intelligent Imaging Innovations,3i,Denver,USA)拍摄实时Alexa488nm(绿色通道)图像，每隔一定时间监测体内血栓形成1h。在暴露于FeCl

数据分析采用Slidebook以实时确定纤维蛋白凝块形成。

使用Slidebook图像分析软件分析血栓形成的实时图像，方法是在血栓区域之外设置背景区域，并在整个损伤区域上测量高于背景的Alexa680nm信号强度。通过这种方式为绿色通道设置单独的背景强度，允许在每个时间帧上选择两个探头仅显示高于背景的信号的像素。然后，将所得选择的像素或“蒙版”区域(定义为用于数据分析的区域)确定为FITC 488nm的像素信号强度(涵盖信号强度和面积)。Slidebook软件可以自动计算代表不同时间点的每个图像文件的背景，因此可以在每个时间点进行背景扣除。通过量化FITC488nm通道中(在每个时间点)高于背景的像素强度并将蒙版像素表达为总像素面积来确定血栓面积。建立背景区域时，背景中的所有时间帧都将以电影的形式运行，以确保选择为背景的区域在实验期间未出现任何凝块生长。确定氯化铁损伤之前的背景信号，并从氯化铁损伤后的读数中扣除。这对于使用Slidebook进行的分析非常重要，因为在每个时间帧都使用同一背景区域来确定信号。生成的数据反映了每个像素的面积强度，并且随着在相同图像/时间帧内进行背景扣除，该数据可准确评估具有强度的FITC面积。将数据绘制为相对荧光单位(RFU)随时间的变化。

相对于仅给药载体的小鼠计算了第60分钟时间点的血块形成的抑制百分比。结果如图1所示。

表1

在本说明书的整个描述和权利要求中，词语“包含”和“含有”及其变型均表示“包括但不限于”，并且它们无意(且不)排除其它部分、添加剂、组分、整数或步骤。在本说明书的整个描述和权利要求中，除非上下文另有要求，否则单数涵盖复数。特别地，在使用不定冠词的情况下，本说明书应理解为包括多数以及单数，除非上下文另外要求。

结合本发明的特定方面、实施方式或实施例描述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团应理解为可适用于本文所述的任何其它方面、实施方式或实施例，除非与其不相容。本说明书(包括任何所附权利要求、摘要和附图)中公开的所有特征和/或如此公开的任何方法或工艺的所有步骤可以以任意组合进行组合，但其中此类特征和/或步骤的至少一些相互排斥的组合除外。本发明不限于任何前述实施方式的细节。本发明扩展至本说明书(包括任何所附权利要求、摘要和附图)中公开的特征的任何新的一个或任何新的组合，或扩展至如此公开的任何方法或工艺的步骤的任何新的一个或任何新的组合。

将读者的注意力引向与本说明书同时或在本说明书之前提交的与本申请有关且与本说明书一起公开以供公众查阅的所有文章和文献，并且所有此类文章和文献的内容均通过引用并入本文。