用于提高注意功能和判断功能的组合物

相关申请的参考

本申请享有作为在先的日本申请的特愿2018-132907(申请日：2018年7月13日)的优先权，其全部公开内容通过引用作为本说明书的一部分。

技术领域

本发明涉及用于提高注意功能和判断功能的组合物。

背景技术

从年轻人到老年人，广泛的世代都需要脑功能的维持、提高、改善。随着年龄的增加、疲劳，脑功能下降，构成认知功能的注意力、判断力也下降。特别是，由于认为疲劳所引起的注意力、判断力的下降会导致智力劳动的生产率下降，因此，通过致力于注意功能、判断功能等的改善，可期待智力劳动的生产率提高。

迄今为止，已经进行了对各种各样的脑功能而言使功能提高的物质的探索。已知：在食品原料中，例如绿原酸类会改善注意控制功能和执行功能(专利文献1)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2018-39797号公报

发明内容

本发明的目的在于提供用于注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善的组合物。

本发明人此次对摄取了乳蛋白酶解产物的受试者实施了言语流畅性试验和斯特鲁普试验(Stroop Test)，并对注意功能和判断功能进行了验证，结果发现，注意功能和判断功能提高。本发明人还对上述受试者进行了基于疲劳VAS检查等的分层分析，并对容易疲劳的受试者的注意功能和判断功能进行了验证，结果发现，这些受试者的注意功能和判断功能更显著地提高。本发明是基于这些见解的发明。

根据本发明，可提供以下的发明。

[1]一种用于提高、维持和/或改善注意功能和/或判断功能的组合物(以下，有时称为“本发明的组合物”)以及注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善剂(以下，有时称为“本发明的用剂”)，其含有乳蛋白酶解产物作为有效成分。

[2]如上述[1]所述的组合物以及用剂，其中，乳蛋白酶解产物为乳清蛋白酶解产物。

[3]如上述[1]或[2]所述的组合物以及用剂，其中，乳蛋白酶解产物包含具有GTWY(序列号1)的氨基酸序列的肽和具有WY的氨基酸序列的肽。

[4]如上述[1]～[3]中任一项所述的组合物以及用剂，其用于使容易因智力工作而疲劳的对象摄取。

[5]如上述[1]～[4]中任一项所述的组合物以及用剂，其中，智力工作是需要注意力和/或专注力的工作。

[6]如上述[1]～[5]中任一项所述的组合物以及用剂，其用于使在日常生活中疲劳的对象或容易疲劳的对象摄取。

[7]如上述[1]～[6]中任一项所述的组合物以及用剂，其中，使人按照每天0.01～100g(以固体成分换算)来摄取乳蛋白酶解产物。

[8]如上述[1]～[7]中任一项所述的组合物以及用剂，其为食品的形态。

[9]一种注意功能和/或判断功能的提高、维持或改善方法，其包括如下步骤：使有需要的对象摄取有效量的乳蛋白酶解产物或含有所述所述有效量的乳蛋白酶解产物的组合物、或者对有需要的对象给药有效量的乳蛋白酶解产物或含有所述有效量的乳蛋白酶解产物的组合物。

[10]乳蛋白酶解产物或含有所述乳蛋白酶解产物的组合物在制造注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善剂中的应用、作为注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善剂的应用、或者用于注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善的应用。

[11]一种乳蛋白酶解产物，其用于注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善。

本发明的组合物以及用剂中作为有效成分的乳蛋白分解物是以有长年食用经验的乳清蛋白为代表的乳蛋白的酶解产物。因此，本发明的组合物以及用剂在如下方面是有利的：可以用作发挥注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善的功能性食品，并且可以用作对包括人的哺乳类而言安全的功能性食品。

具体实施方式

作为本发明的组合物以及用剂的有效成分的乳蛋白酶解产物(以下有时称为“本发明的乳蛋白分解物”)，只要是乳蛋白的酶解产物，就没有特别限定。作为乳蛋白，可以使用全脂乳、奶粉、酪蛋白或乳清，优选乳清。在此，“乳清”也称为乳清、乳浆或whey，是指从乳中除去乳脂成分、酪蛋白等后的水溶液。乳清由β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白等构成。本发明中使用的乳清的来源动植物没有限制，但优选使用牛乳来源的乳清。本发明的乳蛋白分解物优选为乳清蛋白酶解产物(以下有时简称为“乳清分解物”)。

本发明的组合物以及用剂可以单独使用本发明的乳蛋白分解物，或者也可以与其它成分混合使用。本发明的组合物以及用剂中的本发明的乳蛋白分解物的含量(以固体成分换算)可以根据其目的、用途、形态、剂型、症状、年龄等任意地确定，本发明不受这些限定，例如，可以设定成相对于总量为0.001～99质量％(优选0.01～95质量％)。在本发明中，本发明的用剂可以包含本发明的乳蛋白分解物，本发明的组合物可以含有本发明的乳蛋白分解物和其它成分。

本发明的乳蛋白分解物(特别是乳清分解物)可以优选使用包含具有GTWY(序列号1)的氨基酸序列的肽和具有WY的氨基酸序列的肽(以下有时称为“本发明的肽”)的物质。在此，“具有氨基酸序列的肽”是指由该氨基酸序列指定了序列的肽。

本发明的乳蛋白分解物(特别是乳清分解物)中的四肽GTWY的含量(以固体成分换算)例如为0.01～1质量％(优选为0.05～0.5质量％)，二肽WY的含量(以固体成分换算)例如为0.005～0.5质量％(优选为0.01～0.1质量％)。

本发明的组合物以及用剂中的本发明的肽的含量(以固体成分换算)可以根据其目的、用途、形态、剂型、症状、体重等任意地确定，本发明不受这些限定，例如，可以设定成相对于总量为0.00001～50质量％(优选0.0001～10质量％)。

本发明的乳蛋白分解物(特别是本发明的含有肽的乳蛋白分解物)的制造方法是公知的，例如可以按照国际公开公报第2017/086303号的记载而制造。或者，也可以使用市售的乳清分解物(例如，HW-3(雪印梅格牛奶公司制造))作为本发明的乳蛋白分解物。

本发明的含有肽的乳蛋白分解物例如可以通过使含有蛋白酶的酶制剂作用于原料蛋白质而制造。

在使用乳清蛋白作为原料的情况下，对于被供于酶促反应的乳清蛋白的浓度，只要蛋白质能够溶解则没有特别限制，但是，虽然只要蛋白质能够溶解则没有特别限制，但从抑制凝胶化、凝集、节省浓缩的劳力和时间的观点考虑，优选设定为1～30w/v％，更优选设定为1～20w/v％，进一步优选设定为5～15w/v％。

在原料蛋白质为乳清或乳浆这样的水溶液的情况下，直接、或者浓缩或稀释后供于酶促反应即可，可以根据需要进行pH调节等。原料蛋白质为粉体等固形物的情况下，只要酶促反应进行，则可以使其溶解在任意的水系溶剂中，但考虑到作为食品的用途，优选使其溶解在水或食品添加剂等级的缓冲液中。为了使反应液的pH不因酶促反应中产生的氨基酸而发生变化，优选使用缓冲液。缓冲液的种类是任意的，考虑到之后的用途、风味/味道/矿物质的量来确定即可，但优选能够将反应液的pH维持在4～9、优选维持在5～8、更优选维持在7～8的组成。最优选的是磷酸钾缓冲液。缓冲液的浓度只要是能够得到缓冲效果的范围则可以是任意的，但考虑到风味/味道/矿物质的量，可以设定为0.01～0.5M，优选为0.05～0.2M，更优选为约0.1M。

酶只要是含有蛋白酶的酶制剂则可以任意使用，但优选含有中性蛋白酶的酶制剂，可以使用1种或将2种以上组合使用。酶制剂可以使用例如来自枯草芽孢杆菌、米曲霉、蜂蜜曲霉等微生物的酶制剂，其中优选来自米曲霉的酶制剂和来自蜂蜜曲霉的酶制剂，更优选来自蜂蜜曲霉的酶制剂。

在本发明中可以使用市售的酶制剂，例如可以从天野酶公司、新日本化学工业公司、DSM公司、丹尼斯科公司、诺维信公司、HBI公司等获得酶制剂。酶制剂的添加量是任意的，但考虑到适度的水解反应速度和成本，例如可以设定为0.01～5w/v％，优选设定为0.05～4w/v％，更优选设定为0.1～0.5w/v％。

可以以使原料蛋白质的水解充分、且能保持酶分解物的品质的方式设定酶促反应温度和酶促反应时间。即，酶促反应温度例如可以设定为30～70℃，优选为40～70℃，更优选为45～65℃。另外，酶促反应时间可以设定为1～12小时，优选为2～10小时，更优选为4～5小时。需要说明的是，反应温度和反应时间可以在确认本发明的肽的生成量的同时适当地进行调节。

酶促反应也可以在升高温度的同时进行。例如，可以在用4～10小时从30℃升高至75℃的同时进行反应。优选可以在用5～8小时从35℃升高至75℃的同时进行反应，更优选可以在用6～8小时从35℃升高至75℃的同时进行反应。升温速度是任意的，但优选延长在45℃到55℃之间的保持时间(5～7小时)，然后迅速上升至60℃，然后在60℃到75℃之间较长地保持(例如1～3小时)。最优选如下方法：在50℃时投入酶，保持5～7小时，然后以任意速度升温，在60～65℃或65～75℃的目标温度下保持1～3小时。

反应时，从反应效率的观点考虑，优选对反应液进行搅拌。为了使底物与酶良好地接触，液体搅拌速度越快越好，但太快时反应液有可能飞散，因此，例如可以设定为100～500rpm，优选为200～400rpm，更优选为约250rpm。

优选在得到所期望的肽后对反应液施加酶促反应停止步骤。在酶促反应停止步骤中，可以采用使反应液达到高温、或添加螯合剂而改变酶的化学结构的方法、或者通过膜处理除去酶的方法。优选的方法是利用高温的失活处理。该方法可以通过在80～90℃下保持5～30分钟、优选在80～90℃下保持20～30分钟来实施。另外，在后述的浓缩步骤中达到高温的情况下，可以兼作浓缩步骤来进行。

经过了酶促反应步骤和酶促反应停止步骤的反应液(乳蛋白分解物)可以进一步施加杀菌步骤。作为杀菌步骤，例如可以列举后述的膜处理步骤、高温杀菌步骤。加热杀菌步骤也可以兼作酶促反应停止步骤，从简化制造步骤的观点考虑是有利的。

经过了酶促反应步骤和酶促反应停止步骤的反应液(乳蛋白分解物)可以进一步施加纯化步骤。作为纯化步骤，例如可以列举膜处理步骤，优选的膜处理是超滤。作为超滤的分级分子量，优选为3～100kDa，更优选为5～50kDa。实施纯化步骤时，与没有实施的情况相比，从能够改善肽组合物的风味的观点考虑是有利的。另外，纯化步骤也可以兼作酶促反应停止步骤和杀菌步骤，从简化制造步骤的观点考虑也是有利的。

从保管和运送的观点考虑，经过了酶促反应步骤和酶促反应停止步骤的反应液(乳蛋白分解物)可以进一步施加浓缩步骤。浓缩步骤可以选择任意的方法，但优选利用减压浓缩、冷冻干燥和喷雾干燥(Spray dry)、基于膜处理的浓缩(例如使用反渗透膜的方法)的方法，更优选冷冻干燥和喷雾干燥。从大量且有效地实施浓缩观点考虑，特别优选喷雾干燥。

本发明的肽的含量的测定可以通过液相色谱串联质谱法(LC/MS/MS)来实施。本领域技术人员可以容易地设定其条件，在测定时使用LC/MS/MS测定用纯度的肽作为标准肽自不必说，例如，可以使用SIGMA ALDRICH公司制造的AQUA肽。

本发明的组合物以及用剂用于注意功能的提高、维持和/或改善。在此，“注意功能”是指有意识地或者有意地将精神能量集中在一个对象或复杂体验的一个组成部分上、排除其它情感或思考内容的功能，主要具有集中功能/选择功能(专注于某个刺激的功能)、维持功能(维持一定时间的注意力强度的功能)、控制功能(为了达到目的而选择信息或同时注意两个刺激的功能)(日本高级脑功能障碍学会编，标准注意力检查法/标准意志检查法，新兴医学出版社(2008年))。即，“注意功能”也可以说是只将意识转向实现目标所需的刺激或者将意识分配给两个以上的刺激并将其维持一定时间的功能。

本发明的组合物以及用剂还用于判断功能的提高、维持和/或改善。在此，“判断功能”是指改变行为、优化对陌生状况的应对的高级功能，与“执行功能”同义。“判断功能”在制定将来的计划或自发改变行为或抵抗诱惑时很重要(Sam J.G et al.，CurrentBiology，18(3)，110-114(2008))。在“判断功能”中，信息的更新、课题规则的转移(思考的灵活性)、反应的抑制作为主要的因素存在(Miyake A.et al.，Cognitive Psychology，41(1)，49-100(2000))。众所周知，“判断功能”还包括“工作记忆(working memory)”、“思考的灵活性(flexibility)”、“计划(Planning)”(John R Hodges“《臨床家のための高次脳機能のみかた(用于临床医生的高级脑功能的见解)》”，新兴医学出版社，2011年，p24-26，ISBN978-4-88002-4，Wiebe SA.et al，Dev Psychol.2008Mar；44(2)：575-87)。即，“判断功能”也可以说是人类为了进行有计划的活动而灵活地判断事物或抑制不必要的行动的功能。

本发明的组合物以及用剂可以使容易因智力工作而疲劳的对象摄取。在此，智力工作可以是需要注意力和/或专注力的智力工作。本发明的组合物以及用剂还可以使在日常生活中疲劳的对象或容易疲劳的对象摄取。

本发明的组合物以及用剂的作为提高、维持和/或改善的目标的注意功能和判断功能与脑神经疾病所损害的脑功能不同。即，本发明的组合物以及用剂可以使例如没有患痴呆、精神分裂症、阿尔茨海默病、帕金森病、肌肉萎缩性侧索硬化症等脑神经疾病的对象、未诊断为上述脑神经疾病患者或未诊断为具有上述风险的对象摄取，即，本发明的组合物以及用剂可以用于健康的对象。

在本发明中，“功能的提高”包括例如使该功能与现状相比提高。另外，“功能的维持”包括例如预防该功能的降低。此外，“功能的改善”包括例如使暂时下降的该功能、有下降迹象的症状恢复。在本发明中，“功能的提高、维持和/或改善”以包括该功能的增强、抑制该功能的降低的含义使用。

本发明的组合物以及用剂可以以药物(例如药物组合物)、准药物(医薬部外品)、食品、饲料(包含宠物食品)等形态提供，可以根据下述的记载实施。

本发明的组合物以及用剂可以对人和非人动物经口给药。作为口服剂，可以列举颗粒剂、散剂、片剂(包括糖衣片)、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、乳剂、悬浮剂。这些制剂可以通过本领域通常进行的方法使用药学上允许的载体进行制剂化。作为药学上允许的载体，可以列举赋形剂、粘合剂、稀释剂、添加剂、香料、缓冲剂、增稠剂、着色剂、稳定剂、乳化剂、分散剂、助悬剂、防腐剂等。

将本发明的乳蛋白分解物以食品的形式提供的情况下，可以将其直接以食品的形式提供，或者将其包含在食品中提供。例如，在将本发明的乳蛋白分解物以食品的形式提供的情况下，可以将乳清分解物等乳蛋白的酶解产物等直接以食品的形式提供，或者将其包含在食品中提供。这样提供的食品是含有有效量的本发明的乳蛋白分解物的食品。在本说明书中，“含有有效量”的本发明的乳蛋白分解物是指在摄取各个食品的通常食用的量的情况下能够摄取后述范围内的本发明的乳蛋白分解物的含量。另外，“食品”以包含健康食品、功能性食品、营养辅助食品、保健功能食品(例如特定保健用食品、营养功能食品、功能声称食品)、特别用途食品(例如幼儿用食品、孕产妇用食品、病人用食品)以及补充剂的含义使用。需要说明的是，使除人以外的动物摄取本发明的乳蛋白分解物的情况下，本发明中所谓的食品作为饲料使用。

本发明的乳蛋白分解物具有如上所述的注意功能和判断功能的提高、维持和改善效果，因此可以包含在日常摄取的食品中，或者可以作为补充剂提供。即，本发明的组合物以及用剂可以以食品的形态提供。这种情况下，本发明的组合物以及用剂可以以预先规定了每餐摄取的量的单元包装形态来提供。作为每餐的单元包装形态，例如可以列举用袋、包装、罐、瓶等来规定一定量的形态。为了更好地发挥出本发明的组合物以及用剂的各种作用，可以按照后述的本发明的注意功能和/或判断功能的每天的摄取量来确定每餐的摄取量。本发明的食品可以在包装上显示与摄取量相关的说明事项，或者也可以与记载说明事项的文件等一起提供。

单元包装形态的预先规定的每餐的摄取量可以是每天的有效摄取量，也可以是将每天的有效摄取量分为2次或2次以上(优选2次或3次)后的摄取量。因此，在本发明的组合物以及用剂的单元包装形态中，可以以后述的人每天的摄取量含有本发明的乳蛋白分解物，或者以后述的人每天的摄取量的二分之一到六分之一的量含有本发明的乳蛋白分解物。为了便于摄取，本发明的组合物以及用剂优选以每餐的摄取量为每天的有效摄取量的“每餐的单元包装形态”来提供。

“食品”的形态没有特别限制，例如可以是饮料的形态、半液体或凝胶状的形态，也可以是固体或粉末状的形态。另外，作为“补充剂”，可以列举通过在本发明的乳蛋白分解物中加入赋形剂、粘合剂等并捏合、然后进行压片而制造的片剂或封入胶囊等中而得到的胶囊剂。

本发明提供的食品只要含有本发明的乳蛋白分解物，就没有特别限制，例如可以例示：清凉饮料水、碳酸饮料、含果汁的饮料、含蔬菜汁的饮料、含果汁和蔬菜汁的饮料、牛奶等牲畜奶、豆乳、乳饮料、乳酸菌饮料、饮料型酸奶、饮料型或棒型的果冻、咖啡、可可、茶饮料、营养饮料、能量饮料、运动饮料、矿泉水、近水(near water)、无酒精的啤酒味饮料等非酒精饮料；饭类、面类、面包类和意大利面类等含碳水化合物的饮料食品；奶酪类、硬型或软型的酸奶、由牲畜奶和其它油脂原料制成的鲜奶油、冰淇淋等乳制品；饼干、蛋糕、巧克力等西式点心类、馒头或羊羹等日式点心类、柠檬水等的片型点心(清凉点心)、糖果类、口香糖类、果冻或布丁等冷点心或冰点心、零食点心等各种点心类；威士忌、波旁威士忌、烈酒、利口酒、葡萄酒、果酒、日本酒、中国酒、烧酒、啤酒、酒精度数为1％以下的非酒精啤酒、发泡酒、其他杂酒、白酒等酒精饮料；使用了鸡蛋的加工品、鱼贝类或畜肉(包含肝等内脏)的加工品(包含珍馐)、味噌汤等汤类等的加工食品、味噌、酱油、混合食品粉(ふりかけ)、其他调料等调味料、浓厚流食(濃厚流動食)等流食等。需要说明的是，矿泉水包含发泡矿泉水和非发泡矿泉水中的任意一种。另外，本发明提供的食品包含食品制造原料和食品添加剂中的任意一者。

作为茶饮料，包含发酵茶、半发酵茶和不发酵茶中的任意一种，例如可以列举红茶、绿茶、大麦茶、玄米茶、煎茶、玉露茶、焙茶、乌龙茶、姜茶、普洱茶、路易波士茶、玫瑰茶、菊花茶、银杏叶茶、花草茶(例如薄荷茶和茉莉花茶)。

作为含果汁的饮料、含果汁和蔬菜汁的饮料中使用的水果，例如可以列举苹果、桔子、葡萄、香蕉、梨、桃子、芒果、巴西莓、蓝莓和梅子。另外，作为含蔬菜汁的饮料、含果汁和蔬菜汁的饮料中使用的蔬菜，例如可以列举西红柿、胡萝卜、芹菜、南瓜、黄瓜和西瓜。

本发明的乳蛋白分解物是人以食品形式长年摄取的乳蛋白的分解物等中含有的成分，因此毒性也低，可以安全地用于需要其的哺乳动物(例如人、小鼠、大鼠、兔子、狗、猫、牛、马、猪、猴子、海豚、海狮等)。本发明的乳蛋白分解物和本发明的肽的摄取量或给药量可以根据接受者的性别、年龄和体重、症状、给药时间、剂型、给药途径以及组合的药剂等来确定。以注意功能和判断功能的提高、维持和改善为目的的本发明的乳蛋白分解物的成人每天的摄取量和给药量(以固体成分换算)例如为0.01～100g(优选为0.1～10g)。以注意功能和判断功能的提高、维持和改善为目的的本发明的肽的成人每天的摄取量和给药量(以固体成分换算)例如为0.01～100mg(优选为0.1～10mg)。

本发明的乳蛋白分解物例如优选在期待注意功能和判断功能的提高等的日期之前开始摄取，其开始时期可以是上述期待日期的3天前(优选5天前，更优选10天前)。本发明的乳蛋白分解物还优选在例如期待注意功能和判断功能的提高等的日期之前尽可能长的期间进行摄取，从该观点考虑可以确定摄取的结束时期，例如可以设定为上述期待日期的3天前、2天前、1天前或当天。

本发明的乳蛋白分解物的摄取期间可以设定为将按照上述1天的量的摄取进行至少2天(优选3天，更优选5天，特别优选10天)。另外，本发明的乳蛋白分解物的摄取间隔可以设定为将按照上述1天的量的摄取3天进行1次、2天进行1次或1天进行1次。

关于本发明乳蛋白分解物和本发明的肽的上述摄取量、摄取时机、摄取期间和摄取间隔，在以非治疗目的和治疗目的中任意一种目的使用本发明的乳蛋白分解物和本发明的肽的情况下也适用，在治疗目的的情况下，摄取可以理解为给药。

本发明的组合物以及用剂以及食品上可以添加具有注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善效果的标记。在这种情况下，为了使消费者容易理解，可以在本发明的组合物以及用剂以及食品上添加以下的一部分或全部标记。需要说明的是，不言而喻的是，在本发明中，“注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善”以包含以下的标记的含义使用。

·对于想要提高工作中的注意力的人

·对于想要提高工作中的专注力的人

·对于容易发呆的人

·对于粗心犯错多的人

·对于容易分心的人

·对于不能同时进行多项工作的人

·对于不能持续集中精力的人

·对于容易混乱的人

·对于转眼忘事的人

·对于不善于灵活思考的人

·对于不善于设定并执行计划的人

·对于容易因脑力劳动而疲劳的人

·对于容易感到大脑疲劳的人

·对于在日常生活中容易疲劳的人

·对于想要智慧且积极的人生的人

·对于想要保持头聪明的头脑的人

·对于想要维持清醒的头脑的人

·自觉脑衰退并容易感到脑疲劳的人的维持注意力和专注力的功能

·自觉脑衰退并在需要注意力和专注力的工作中容易感到疲劳的人的维持注意力和专注力的功能

·自觉脑衰退并平时容易感到疲劳的人的维持注意力和专注力的功能

根据本发明的另一方面，可提供一种注意功能和/或判断功能的提高、维持或改善方法，其包括如下步骤：使有需要的对象摄取有效量的本发明的乳蛋白酶解产物或含有所述有效量的乳蛋白酶解产物的组合物、或者对有需要的对象给药有效量的本发明的乳蛋白酶解产物或含有所述有效量的乳蛋白酶解产物的组合物。本发明的方法可以根据关于本发明的组合物以及用剂的记载来实施。

根据本发明的另一方面，可提供本发明的乳蛋白酶解产物在制造注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善剂中的应用。根据本发明的另一方面，可提供本发明的乳蛋白酶解产物作为注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善剂的应用。根据本发明的另一方面，可提供本发明的乳蛋白酶解产物用于注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善的应用。本发明的应用可以根据关于本发明的组合物以及用剂的记载来实施。

根据本发明的另一方面，可提供一种乳蛋白酶解产物，其用于注意功能和/或判断功能的提高、维持和/或改善。上述乳蛋白酶解产物可以根据关于本发明的组合物以及用剂的记载来实施。

本发明的方法和本发明的应用可以在包含人的哺乳类中应用，旨在治疗性应用和非治疗性应用中的任意一种。在本说明书中，“非治疗性”是指不包括对人进行手术、治疗或诊断的行为(即，对人的医疗行为)，具体而言，不包括医生或接受医生指示的人对人进行手术、治疗或诊断的方法。

实施例

基于以下例子对本发明更具体地进行说明，但是本发明不限于这些例子。

例1：含有乳清分解物的片剂的制备以及四肽GTWY和二肽WY的含量的测定

(1)片剂的制备

将乳清分解物(HW-3，雪印梅格牛奶公司制造)、赋形剂和粘合剂混合并捏合，然后进行压片，由此制造含有乳清分解物的片剂(210mg/片)。1片片剂中的乳清分解物的含量为168mg。上述乳清分解物(HW-3)是使含有蛋白酶的酶制剂作用于乳清蛋白、然后进行膜处理除去未分解物并使其干燥而得到的产品，如后所述，其含有四肽GTWY和二肽WY。

(2)分析样品的制备

在研钵中将上述(1)中制备的100片片剂(约21g)充分磨碎，称量20mg，加入1mL灭菌水使其充分悬浮。将悬浮液离心分离(15000rpm，室温，3分钟)，利用超滤过滤器(10kDa)过滤所得到的500μL上清，将滤液稀释1000倍后作为测定样品。

(3)分析方法

利用LC/MS/MS法在下述分析条件下对上述(2)中得到的测定样品中的四肽GTWY和二肽WY的浓度进行定量。需要说明的是，利用以AQUA肽(Sigma Aldrich公司制造)作为标准样品的校准曲线法计算出测定样品的GTWY浓度。

<分析条件>

质量分析装置：4000Q TRAP(AB Sciex公司制造)

HPLC装置：Agilent 1200系列(安捷伦科技公司制造)

柱：TSK gel ODS-100V 3μm 2.0mm I.D.X150mm(东曹公司制造)

柱温：70℃

流动相A：0.1％甲酸水溶液

流动相B：0.1％甲酸乙腈溶液

梯度条件：应用了表1所示的梯度条件。

表1

流量：0.2mL/分钟

样品进样量：2μL

电离法：ESI(正离子检测模式)

气帘气：40psi

雾化器气体：50psi

干燥气体：80psi

干燥气体温度：600℃

碰撞气体：氮气

电离电压：5000V

<四肽GTWY的分析条件>

设定质量数(m/z)/碰撞能量(eV)：526.4→159.2/47，526.4→368.3/23

DP电压(V)：36

<二肽WY的分析条件>

设定质量数(m/z)/碰撞能量(eV)：368.2→351.1/19，368.2→159.2/33

DP电压(V)：51

(4)分析结果

确认了1片含有乳清分解物的片剂(210mg)中含有0.27mg(0.129质量％)的四肽GTWY、含有0.11mg(0.052质量％)的二肽WY。

例2：乳清分解物的注意功能增强效果和判断功能增强效果的确认

(1)试验的概要

在例2中，实施了验证乳清分解物对注意功能和判断功能产生的效果的试验。本试验是以安慰剂作为对照的随机双盲平行组间比较试验。试验期间为12周，试验期间使其摄取试验食品或对照食品。具体而言，让自觉健忘或差错多的45岁以上且64岁以下的没有痴呆的健康男女各自摄取作为试验食品的“含有乳清分解物的片剂”、作为对照食品的“不含乳清分解物的片剂”，确认乳清分解物的注意功能和判断功能的效果。

(2)受试者

在事前检查中，将被医生判断为健康的人随机分配给试验食品组(50名)和对照食品组(51名)。分析对象为试验食品组48名(男性17名，女性31名)、对照食品组50名(男性17名，女性33名)，分析对象的年龄(平均值±标准偏差)为试验食品组52.3±4.3岁、对照食品组51.8±5.2岁。受试者在试验期间继续过与试验期间之前同样的生活。

(3)受试食品

在试验期间(12周)，对于试验食品组而言，每天将6片试验食品一天一次地与水或温水一起摄取，对于对照食品组而言，每天将6片对照食品一天一次地与水或温水一起摄取。作为试验食品，使用例1(1)中制造的“含有乳清分解物的片剂”(1片片剂(210mg)中含有168mg乳清分解物)。另外，作为对照食品，使用除了配合168mg麦芽糊精代替乳清分解物以外以与例1(1)同样的方法制造的不含乳清分解物的片剂。

(4)测定

a测定项目

测定项目为以下的4项。

·言语流畅性试验

·斯特鲁普试验

·疲劳视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale)检查(在本说明书中有时称为“疲劳VAS检查”)。

·心境状态量表第二版(Profile of Mood States 2nd Edition)(在本说明书中有时称为“POMS2检查”)

b测定时期

言语流畅性试验、斯特鲁普试验和POMS2检查如表2所示在试验食品摄取开始前、摄取开始后6周时、摄取开始后12周时在受试者来院时各实施一次。需要说明的是，试验当日为试验开始的30分钟之前摄取。另外，疲劳VAS检查在上述来院时的言语流畅性试验和斯特鲁普试验的实施前和实施后各实施1次(共2次)

表2

c测定方法

(i)言语流畅性试验

使受试者尽可能多地口头列举“以‘あ’开头的词语”和“动物的名称”这两项。对1分钟内列举的各项的单词数进行评价。言语流畅性试验的执行要求从自己的词汇中搜索合适的单词的能力，作为判断功能(执行功能)的指标使用(JOHN R HODGES《用于临床医生的高级脑功能的见解》，新兴医学出版社，135-137页，2011年)。

(ii)斯特鲁普试验

让受试者尽可能快地朗读出“用与文字表示的含义不同的颜色印刷的文字串的文字的含义”或者“用与文字表示的含义不同的颜色印刷的文字串的文字的颜色”。对朗读时的错误数进行评价。斯特鲁普课题的执行要求抑制典型错误反应的能力，作为注意功能、判断功能(执行功能)的指标使用(山内俊雄、鹿岛晴雄、青木省三《精神和心理功能评价手册》，中山书店，133-135页，2015年)。

(iii)疲劳VAS检查

疲劳VAS检查根据日本疲劳学会制定的疲劳VAS检查方法实施。在左端设定为“完全感觉不到疲劳的最佳感觉”、右端设定为“累得什么都做不了的最坏感觉”的100mm的直线上，用×标记示出受试者感觉到的当前时刻的疲劳。对从左端到×标记为止的距离进行评价。

(iv)POMS2检查

使受试者回答关于所感觉到的过去一周的心情状态的共计35个问题。针对每项，将该回答以“愤怒-敌意”、“混乱-困惑”、“抑郁-沮丧”、“疲劳-乏力”、“紧张-不安”、“生机勃勃-有活力”、“友好”这7个尺度来计算，对过去一周的心情状态进行评价。各尺度的分数用T得分(以近似于世代平均为50、标准偏差为10的正态分布的方式进行转换后的值)进行评价。

(5)评价和分析

进行了以所有分析对象为对象的分析(整体分析)、以及只以疲劳VAS检查和POMS2检查中被评价为疲劳度较大的人为对象的分析(分层分析)。

a数值的评价方法

在言语流畅性试验和斯特鲁普试验中得到各测定时刻的实测值，将从摄取开始后的实测值中减去对应的摄取开始前的实测值后得到的值作为变化量。关于两组的实测值和变化量，使用两样本t检验进行评价。另外，关于各组的相对于摄取开始前的变化，使用单样本t检验对实测值进行评价。

b分层分析的方法

(i)言语流畅性试验和斯特鲁普试验的实施前和实施后的疲劳VAS的变化量大于20mm的人的分层分析

由于实施需要注意力的言语流畅性试验和斯特鲁普试验这两个试验，受试者产生了精神上的负担，但其程度根据受试者而不同。因此，参考将疲劳VAS的值大于20mm的人定义为“高疲劳组”的报告(Rat，A.C.et.a1.Factors associated with fatigue in earlyarthritis：results from a multicenter national French cohort study.ArthritisCare Res.，64(7)，1061-9(2012))，抽取试验食品摄取开始前的言语流畅性试验和斯特鲁普试验的实施前后的疲劳VAS的变化量大于20mm的人作为“在需要注意力、专注力的智力工作中容易疲劳的人”来进行分层分析。

(ii)POMS2检查的“疲劳-乏力”尺度为50以上的人的分层分析POMS2检查的分数设定为世代平均达到50。因此，抽取“疲劳-乏力”尺度为50以上的受试者作为“日常生活中疲劳高的人”来进行分层分析。

(6)结果

a整体分析

(i)言语流畅性试验

结果如表3所示。

表3

*：p＜0.05

**：p＜0.01(与摄取开始前的组内比较)

在言语流畅性试验的实测值、相对于摄取开始前的变化量(以下有时简称为“变化量”)中任一者中均未观察到试验食品组与对照食品组的显著的组间差异，但是，在“以‘あ’开头的词语”中，试验食品组的摄取开始后12周的变化量(增加量)与对照食品组相比较大，观察到相对于对照食品组而言显著的倾向(p＝0.094)。另外，在“动物的名称”中，仅在试验食品组中，摄取开始后6周的实测值相对于摄取开始前显著地增加(p＜0.05)。以上的结果显示出了乳清分解物的摄取使判断功能(执行功能)提高的可能性。

(ii)斯特鲁普试验

结果如表4所示。

表4

在斯特鲁普试验中，没有观察到试验食品组与对照食品组的显著的组间差异，但是，在朗读“文字的含义”的试验中，试验食品组的摄取开始后6周的实测值比对照食品组小，另外，试验食品组的摄取开始后6周和摄取开始后12周的变化量(增加量)比对照食品组小。以上的结果显示出了乳清分解物的摄取使注意功能、判断功能(执行功能)提高的可能性。

b分层分析

(i)疲劳VAS的变化量大于20mm的人的分层分析

关于言语流畅性试验和斯特鲁普试验中的变化量，对言语流畅性试验和斯特鲁普试验的实施前后的疲劳VAS的变化量大于20mm的人进行分层分析。分析对象在试验食品组中为19名(男性6名、女性13名)，在对照食品组中为21名(男性6名、女性15名)。

结果如表5所示。

表5

*：p＜0.05

**：p＜0.01(与摄取开始前的组内比较)

#：p＜0.05(各时间点的组间比较)

在言语流畅性试验的“以‘あ’开头的词语”中，试验食品组的摄取开始后6周的变化量(增加量)显著大于对照食品组(p＜0.05)。另外，仅试验食品组的摄取开始后6周和摄取开始后12周的实测值相对于摄取开始前显著地增加(p＜0.01)。在言语流畅性试验的“动物的名称”中，仅在试验食品组中的摄取开始后6周的实测值相对于摄取开始前显著地增加(p＜0.05)。在斯特鲁普试验的朗读“文字的含义”的试验中，试验食品组的摄取开始后6周的变化量(减少量)显著大于对照食品组(p＜0.05)。根据以上的结果确认了：乳清分解物的摄取提高了“需要注意力、专注力的智力工作中容易疲劳的受试者”的注意功能、判断功能(执行功能)。

(ii)POMS2的“疲劳-乏力”尺度为50以上的人的分层分析关于言语流畅性试验和斯特鲁普试验中的变化量，对POMS2的“疲劳-乏力”尺度为50以上的人进行分层分析。分析对象在试验食品组中为12名(男性4名、女性8名)，在对照食品组中为13名(男性4名、女性9名)。

结果如表6所示。

表6

*：p＜0.05

**：p＜0.01(与摄取开始前的组内比较)

#：p＜0.05(各时间点的组间比较)

在言语流畅性试验的“以‘あ’开头的词语”中，试验食品组的摄取开始后6周的变化量(增加量)显著大于对照食品组(p＜0.05)。另外，仅试验食品组的摄取开始后6周的实测值相对于摄取开始前显著地增加(p＜0.01)。在言语流畅性试验的“动物的名称”中，观察到试验食品组的摄取开始后6周的变化量(增加量)比对照食品组大的倾向(p＝0.072)。在斯特鲁普试验中，没有观察到试验食品组与对照食品组的显著的组间差异，但是，在朗读“文字的含义”的试验中，试验食品组的摄取开始后6周的变化量(减少量)大于对照食品组。根据以上的结果确认了：乳清分解物的摄取提高了“日常生活中疲劳高的受试者”的注意功能、判断功能(执行功能)。

根据以上的结果，通过摄取含有乳清分解物的片剂，自觉健忘或差错多的受试者的言语流畅性试验和斯特鲁普试验的成绩提高，因此可以说乳清分解物提高了注意功能、判断功能(执行功能)。另外，使用了疲劳VAS检查、POMS2检查的分层分析的结果显示，乳清分解物的摄取对需要注意力的智力工作中容易疲劳的受试者和日常生活中疲劳高的受试者更显著地提高了注意功能、判断功能。

序列表

<110> 麒麟控股株式会社

<120> 用于提高注意功能和判断功能的组合物

<130> 191065PX

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 乳清分解产生的四肽

<400> 1

Gly Thr Trp Tyr

1