氮杂环丁烷衍生物，其制法与医药上的用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及氮杂环丁烷衍生物及其制备方法和用途。

背景技术

BRCA1和BRCA2编码DNA损伤修复所需的蛋白。这些基因中的遗传突变与乳腺癌和卵巢癌发生的同源重组缺陷有关。大约11-16%的三阴性乳腺癌（TNBC）患者和10-15%的卵巢癌患者具有有害的BRCA1或BRCA2突变。生殖系BRCA1/2突变的流行率和临床意义促使体细胞BRCA1/2基因突变患者使用PARP抑制剂，但同源重组缺陷型肿瘤患者对这些药物产生耐药性。DNA聚合酶θ（Polθ）在同源重组缺陷型肿瘤中高度成瘾（addictive），它限制RAD51-单链DNA组装并促进微同源性介导的末端连接。因此，Polθ可能通过拮抗HR和促进PARP依赖性双链断裂DNA修复来引导DNA修复。这些机制支持Polθ作为单独或与PARP抑制剂联合治疗BRCA1/2突变癌症的新靶点。

此外，Polθ还具有逆转录RNA并促进以RNA为模板的DNA修复功能。Polθ在正常组织中的几乎不表达，但在多种肿瘤类型（如乳腺癌、卵巢癌、头颈部鳞状细胞癌HNSCC和肺癌）中高表达。同时，在这些瘤种中，又普遍存在同源重组修复缺陷（HRD）；因此，Polθ抑制剂在这些瘤种中存在着应用的理论基础。

专利文献WO2022026565A1中公开了使用如下式（I）和式（II）化合物来治疗BRCA1/2缺失的疾病，例如癌症。

。

然而，如何开发出更多样化的治疗与BRCA1/2缺失相关的疾病产品，是现阶段癌症研究领域的一大难点。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供如下式I所示的化合物，其互变异构体、立体异构体、或药学上可接受的盐：

。

其中，R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

在一些实施方案中，式I选自如下式Ia所示的结构：

。

其中，R

在一些实施方案中，式I选自如下式Ib所示的结构：

。

其中，R

在一些优选的实施方案中，式Ia中，R

在一些优选的实施方案中，式Ib中，R

在一些具体的实施方案中，所述化合物选自如下：

。

本发明还提供如上式I所示化合物的制备方法，包括如下步骤：

。

其中，R

化合物I-1与化合物I-2反应得到式I所示化合物。

在一个实施方案中，式Ia所示化合物通过如下方法制备：化合物Ia-1与化合物Ia-2反应得到式Ia所示化合物：

。

其中，R

在一个实施方案中，式Ib所示化合物通过如下方法制备：化合物Ib-1与化合物Ib-2反应得到式Ib所示化合物：

。

其中，R

本发明还提供如上式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、或药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗BRCA1/2缺失的疾病的药物中的用途。

根据本发明的实施方案，所述BRCA1/2缺失的疾病为癌症。

根据本发明的实施方案，所述癌症为BRCA基因表达的减少或突变、BRCA基因的缺失，或BRCA蛋白功能的降低相关的癌症。

根据本发明的实施方案，所述癌症为晚期实体瘤。

根据本发明的实施方案，所述晚期实体瘤包括食管鳞癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈部鳞状细胞癌、黑色素瘤、肺癌或膀胱癌等。

本发明还提供一种药物组合物，其包括如上所述式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体、或药学上可接受的盐。

根据本发明的实施方案，所述药物组合物用于预防和/或治疗BRCA1/2缺失的疾病。

有益效果

本发明提供了式I所示的化合物，其对于BRCA1/2缺失的疾病例如癌症具有良好的治疗效果。具体地，式I所示化合物的四元环上引入了基团-C

术语定义和说明

除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。

在本文中，术语“包括”、“包含”和/或“含有”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。

在本文中，在描述一个/种、两个/种或更多个/种时，“更多个/种”应当是指大于2的情形，例如表示大于等于3的整数情形，例如3、4、5、6、7、8、9或10个/种。

在本文中，术语“任选(的/地)”表示所述特征存在或不存在这两种情形，这意味着随后所描述的事件可以但不必然发生，因此包括该事件发生或不发生的两类情形。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着该烷基可以但不必然存在，因此包括被烷基取代的杂环基团和没有被烷基取代的杂环基团的情形。

本申请通式中“R

在本文中，术语“卤素”表示氟、氯、溴和/或碘。

术语“C

术语“C

术语“C

术语“-C

在本文中，“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

具体实施方式

下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。

除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。

实施例1 化合物1的合成（对照化合物）

。

步骤一：将化合物1-1（220 mg, 1.00 mmol）和(2S)-氮杂环丁烷-2-甲酸甲酯（181.4 mg, 1.20 mmol）溶于N,N-二甲基甲酰胺（1.5 mL）中，向反应体系中加入N,N-二异丙基乙基胺（386.7 mg, 2.99 mmol），室温搅拌30分钟。加入饱和氯化铵溶液（3 mL）淬灭反应，乙酸乙酯萃取（2×5 mL）。合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。粗品经硅胶柱层析纯化得到中间体1-2。LCMS: 300.1 [M+H]

步骤二：将中间体1-2（214 mg, 0.72 mmol）溶于甲醇（3 mL），加入氢氧化锂（12.6M, 1 mL），室温搅拌30分钟。加入饱和氯化铵溶液（10 mL）淬灭反应，乙酸乙酯萃取（2×10mL）。合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。粗品经硅胶柱层析纯化得到中间体1-3。LCMS: 286.1 [M+H]

步骤三：将中间体1-3（80 mg, 0.28 mmol）溶于吡啶（2.5 mL），加入T3P（50%乙酸乙酯溶液，535 mg, 1.68 mmol）和3-氯-4-氟-N-甲基苯胺（53.71 mg, 0.34 mmol），室温搅拌1.5小时。加水淬灭，乙酸乙酯萃取。合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。粗品经硅胶柱层析纯化得到化合物1。LCMS: 427.1 [M+H]

实施例2 化合物2的合成

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TBDPS：叔丁基二苯基硅烷基

步骤一：将化合物1-1（456.04 mg, 2.067 mmol）和化合物2-1（800 mg, 1.880mmol）溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入N,N-二异丙基乙基胺（0.93 mL, 5.639 mmol），加热至50℃反应1小时。将反应液浓缩后，粗品经硅胶柱层析分离纯化得到中间体2-2（576 mg,45%）。LCMS: 610.3 [M+H]

步骤二：将中间体2-2（576 mg, 0.945 mmol）溶于二氯甲烷（10 mL）中，加入三氟乙酸（5 mL），室温搅拌3小时。加入二氯甲烷稀释，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤后浓缩滤液，粗品经制备薄层色谱分离纯化得到中间体2-3（253 mg, 44%）。LCMS: 554.2 [M+H]

步骤三：将中间体2-3（230 mg, 0.415 mmol）溶于乙腈（3 mL），0℃下分批加入1-氯-N,N,2-三甲基丙烯胺（111.02 mg, 0.831 mmol），室温反应0.5小时。反应液浓缩后得到中间体2-4，直接用于下一步反应；

步骤四：将化合物2-5（67.48 mg, 0.415 mmol）溶于乙腈（2 mL），加入二甲氨基吡啶（0.17 mL, 1.245 mmol），0℃下分批加入酰氯中间体2-4（237.42 mg, 0.415 mmol），室温反应0.5小时。反应液浓缩后得到中间体2-6，直接用于下一步反应；

步骤五：将中间体2-6（172 mg, 0.246 mmol）溶于四氢呋喃（2 mL），分批加入四丁基氟化铵（192.96 mg, 0.738 mmol），室温搅拌0.5小时。加入二氯甲烷稀释，水洗，饱和食盐水洗涤。有机相浓缩，粗品经制备薄层色谱分离纯化得到化合物2。LCMS: 460.1 [M+H]

参照实施例1和2的全部或部分合成方法选择相应的原料制备并表征了如下表1中的化合物：

表1

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测试例1

聚合酶测定 (PicoGreen dsDNA assay) 实验步骤：使用Echo将Source板中的液体转移100 nL至384反应板中。转移5 μL 3CL POLQ-C工作液至384反应板中，1000 rpm离心1分钟，25℃孵育10分钟。转移5 μL 底物(dNTP&dsDNA)工作液至384反应板中，1000 rpm离心1分钟，25℃孵育60分钟。转移5 μL PicoGreen工作液至384反应板中，1000 rpm离心1分钟，25℃孵育90分钟。 用CLARIOstar Plus读取Ex:485 nmEm:520 nm的FI信号值，并计算IC

测试结果如下表2所示：

表2

由上述结果可知，本发明四元环上含-C

测试例2

DLD-1

表3

由表3的数据可以看出，本发明化合物相对于对照化合物（化合物1）活性具有明显优势。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。