稠环类SHP2磷酸酶抑制剂的制备及其应用

技术领域

本发明属于药物合成领域，具体涉及一种新型稠环类SHP2磷酸酶抑制剂及其制备方法与用途。

背景技术

本发明通常涉及新的稠环类化合物及其制备方法以及作为SHP2磷酸酶抑制剂(例如用于治疗癌症)的用途。

SHP2是由PTPN11基因编码的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，含有两个N-末端Src同源2(SH2)结构域，蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)结构域和序列不良的C-末端。X射线晶体学研究表明，SHP2通过使用N-末端SH2结构域阻断对PTP结构域上的催化位点的接近来抑制其自身的磷酸酶活性。已经证明双磷酸酪氨酰蛋白或肽(例如IRS-1)与SHP2的SH2结构域结合，破坏N-末端SH2-PTP域相互作用。该结合允许底物进入催化位点并激活磷酸酶。

SHP2被RTK募集以诱导细胞信号传导，并参与多个细胞内致癌信号传导级联反应，例如Jak/STAT，PI3K/AKT，RAS/Raf/MAPK，PD-1/PD-L1，以及mTOR途径。其中将胞外信号传导到核内的关键GTP酶RAS，被SHP2调节(衔接子/支架蛋白中的酪氨酸去磷酸化)成为活化状态的GTP结合模式发挥致癌作用；另一方面，在获得性耐药中SHP2对RAS信号激活促进了信号通路的代偿性激活(如MEK的负反馈调节激活RTK，活化SHP2从而激活下游通路)，在这种情况下，对SHP2的抑制作用可以消除RAS/Raf/ERK途径的重新激活，并代表一种潜在的治疗策略，作为一种新的解决RTK耐药问题的策略。

而且，PTPN11中导致SHP2过度活化的种系或体细胞突变已在多种病理生理状态中被鉴定：发育障碍Noonan综合征，血液系统恶性肿瘤包括青少年髓单核细胞白血病，骨髓增生异常综合征，B细胞急性淋巴细胞白血病和急性髓性白血病和低频实体瘤。因此，对于发展治疗各种疾病的新疗法而言，SHP2这一最新高吸引力靶点之一。

已经公开的SHP2靶点的相关研究的专利申请有；WO2015107494A1、WO2015107495A1、WO2017211303A1、WO2018057884A1、WO2018136265A1、WO2019167000A1、WO2020033828A1、WO2020063760A1、WO2020081848A1、WO2020247643A1等。目前已有多个SHP-2抑制剂进入临床研究阶段，如Novartis公司开发的TNO-155，Revolution Medicine公司开发的RMC-4630，以及北京加科思的JAB-3068都已经进入临床I期研究阶段。但还没有一款开发上市的SHP-2抑制剂用于治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、胃癌、肺癌及其结肠癌。因此迫切需要开发一类成药性好的SHP-2抑制剂药物。

发明内容

一种具有通式(I)所示的化合物、其立体异构体、可药用的盐、多晶型物或异构体，其中通式(I)所示的化合物结构如下：

其中，

每个L

每个L

每个X

每个R

每个X

每个Ar

每个Ar

每个R

每个R

每个R

每个X

每个X

每个R

每个R

每个R

每个R

每个R

每个R

R

R

R

R

R

R

R

R

R

每个a、b、c、d在每次出现时独立地选自0、1；

在一些实施方式中，上面所述的(I)的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，每个

并每个

每个R

在一些实施方式中，上面所述的(I)的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，

在一些实施方式中，其中，Ar

每个Ar

每个R

每个R

每个R

进一步优选地，每个Ar

在一些实施方式中，式(I)所述的化合物或者其异构体、溶剂合物或其前体，或它们的药学上可接受的盐选自以下化合物、其异构体、溶剂合物或其前体，或它们的药学上可接受的盐：

/>

本公开的另一方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的通式(Ⅱ)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式、或可药用的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂，本公开中治疗有效量的剂量可选0.1-2000mg。

本公开还涉及一种制备所述药物组合物的方法，其包括将通式(Ⅱ)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、对映异构体、阻转异构体或其混合物形式、或其可药用的盐，或通式所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相混合。

本公开进一步涉及通式(Ⅱ)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用盐或包含其的药物组合物在制备SHP2抑制剂中的用途。

本公开进一步涉及通式(II)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体，非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备由SHP2活性介导的疾病或病症的用途。

本公开进一步涉及通式(I)所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在作为SHP2抑制剂在制备用于预防和/或治疗肿瘤或癌症的药物中的用途。

本公开一步涉及通式(I)所示的化合物，或其互变异构体，内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制预防或者治疗努南综合征、豹皮综合征、幼年性骨髓单核细胞白血病、神经母细胞瘤、黑素瘤、急性骨性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、结肠癌、头癌、胰腺癌、头和颈鳞状细胞癌、胃癌、肝癌、间变性大细胞淋巴瘤和成胶质细胞瘤药物中的用途。

本公开进一步涉及通式()所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体，对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其用作药物。

本公开还涉及通式()所示的化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐或包含其的药物组合物，其作为SHP2抑制剂。

本公开还涉及通式()所示的化合物或其互变异构体、内消旋体外消旋体、对映异构体、非对映异构体，阻转异构体或其混合物形式或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其作为SHP2抑制剂用于预防和/或治疗肿瘤或癌症。

本公开还涉及一种治疗预防和/或治疗肿瘤或癌症的方法，其包括向需要其的患者施用治疗有效剂量的作为SHP2抑制剂的通式所示的化合物，或其互变异构体内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、阻转异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，或包含其的药物组合物，含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂糖锭剂，锭剂、水或油悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或剂可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分:甜味剂，娇味剂，着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂，片剂含有活性成分和用于混合的适制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂，造粒剂、崩解剂，粘合剂，和润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。

也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂或其中活性成分与水溶性载体或油溶媒混合的软明胶胶囊提供口服制剂。

水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂，分散剂或湿润剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油，或矿物油配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氢化保存这些组合物。

本公开的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式油相可以是植物油，或矿物油或其混合物适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，乳剂也可以含有甜味剂、娇味剂、防腐剂和抗氧剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂本公开的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中，或者，最好按可保持本公开化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置这种装置的实例是Deltec CADD-plus.TM.5400型静脉注射泵。

本公开的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混液，无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注叶溶液或混悬液，此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质，为此目的，使用任何调和固定油此外，脂肪酸也可以制备注射剂。

可按用于直肠的栓剂形式给予本公开化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定以下因素所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食，给药时间给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式，通式化合物(Ⅱ)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

某些化学术语

除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语。

具有下述含义在本文中使用的表示方式“C

“烷基”指含有1至20个碳原子，例如1至18个碳原子、1至12个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。烷基的非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基和2-乙基丁基。所述烷基可以是取代的或未取代的。

“烯基”指含有至少一个碳碳双键和通常2至20个碳原子例如2至8个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。烯基的非限制性实例包括乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基、1，4-戊二烯基和1，4-丁二烯基。所述烯基可以是取代的或未取代的。

“炔基”指含有至少一个碳碳三键和通常2至20个碳原子，例如2至8个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。炔基的非限制性实例包括乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基。所述炔基可以是取代的或未取代的。

“环烷基”指含有3至14个碳环原子的饱和环形烃基取代基。环烷基可以是单碳环，通常含有3至7个碳环原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。环烷基可选择地可以是稠合到一起的双或三环、如十氢萘基、所述环烷基可以是取代的或未取代的。

“杂环基”、“杂环烷基”、“杂环”是指稳定的3-18元单价非芳香环，包括2-12个碳原子，1-6个选自氮、氧和硫的杂原子。除非另作说明，杂环基基团可以是单环、双环、三环或四环系统，其可能包含稠环、螺环或桥环系统，杂环基上的氮、碳或硫可选择性的被氧化，氮原子可选择性的被季铵化，杂环基可以部分或完全饱和。杂环基可以通过环上的碳原子或杂原子与分子的其余部分通过一个单键连接。包含稠环的杂环基中可以包含一个或多个芳环或杂芳环，只要与分子的其余部分连接的是非芳香环上的原子。为了本申请，杂环基优选的是一个稳定的4-11元单价非芳香单环或二环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子，更优选的是一个稳定的4-8元单价非芳香单环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子。杂环基的非限制性实例包括氮杂环庚烷基、氮杂环丁基、十氢异喹啉基、二氢呋喃基、二氢吲哚基、二氧戊烷基、1，1-二氧-硫代吗啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、异噻唑烷基、异恶唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、恶嗪基、哌嗪基、哌啶基、4-哌啶酮基、吡喃基、吡唑烷基、吡咯烷基、喹嗪基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等。

“螺杂环基”指5至20元，单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)

“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)

“芳基”或“芳香基”指含有6至14个碳原子的芳香族单环或稠合多环基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基，更优选为苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上、其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。

“杂芳基”或“杂芳香基”是指5-16元环状系统，其包含1-15个碳原子，优选的1-10个碳原子，1-4个选自氮，氧和硫的杂原子，至少一个芳香环。除非另作说明，杂芳基可以是单环、双环、三环或四环系统，其可能包含稠环或桥环系统，只要与分子其它部分的连接点为芳环原子，杂芳环上的氮原子、碳原子和硫原子可以透择性的被氧化，氮原子可选择性的被季铵化。为了本发明，杂芳基优选的为稳定的4-11元单芳香环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子，更优选的为稳定的5-8元单芳香环，其包含1-3个选自选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的非限定性实例包括吖啶基、氮杂卓基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、苯并二氧芑基、苯并二恶茂基、苯并呋喃酮基、苯并呋喃基、苯并萘并呋喃基、苯并吡喃酮基、苯并吡喃基、苯并吡唑基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、呋喃基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、恶唑基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、奎宁基、四唑基，噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三嗪基，三唑基等。本申请中，杂芳基优选为5-8元杂芳基，其包含1-3选自选自氮、氧和硫的杂原子，更优选为吡啶基、嘧啶基、噻唑基。所述杂芳基可以是取代的或未取代的。

“卤素”指氟、氯、溴或碘。

“羟基”指-OH，“氨基”指-NH

本文单独或作为其它成分的一部分使用的术语“杂原子”或“杂”是指除碳和氢之外的原子，杂原子独立地选自氧、氮、硫、磷、硅、硒和锡，但不限于这些原子，在出现两个或更多杂原子的实施方案中，所述两个或更多杂原子可彼此相同，或者所述两个或更多杂原子中的一些或全部此不同。

本文单独或组合使用的术语“稠”或“稠环”是指两个或更多个环共享一个或更多个键的环状结构。

本文单独或组合使用的术语“螺”或“螺环”是指两个或更多个环共享一个或更多个原子的环状结构。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“取代的”指基团中的一个或多个原子，较佳为5个、更佳为1～3个原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基处在它们的可能的化学位置本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离的胺基或羟基与具有不饱和(如烯烃)键的碳原子结合时可能是不稳定的。所述取代基包括但不限于羟基、胺基、卤素、氰基、C

“药物组合物”指含有一种或多种本文所述的化合物或其可药用的盐或前药以及其他分例如可药用的载体和赋形剂的组合物。药物组合物的目的是促对生物体的给药、利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“异构体”指具有相同分子式但其原子结合的性质或顺序或其原子的空间排列不同的化合物称为“异构体”、其原子空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。立体异构体包括光学异构体、几何异构体和构象异构体。本发明的化合物可以以光学异构体形式存在。根据手性碳原子周围取代基的构型，这些光学异构体是“R”或“S”构型。光学异构体包括对映异构体和非对映异构体、制备和分离光学异构体的方法是本领域中已知的。

本发明的化合物也可以存在几何异构体。本发明考虑由碳-碳双键、碳-氮双键、环烷基或杂环基团周的取代基的分布所产生的各种几何异构体和其混合物。碳-碳双键或碳-氮键周围的取代基指定为Z或E构型、环烷基或杂环周围的取代基指定为顺式或反式构型。

本发明的化合物还可能显示互变异构现象，例如酮-烯醇互变异构。

应该理解，本发明包括任何互变异构或立体异构形式和其混合物、并且不仅限于化合物的命名或化学结式中所使用的任何一个互变异构或立体异构形式。

“同位素”是在本发明化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。适合并入本发明化合物中的同位素的实例是氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯，分别例如但不限于

“前药”是指本发明的化合物可以以前药的形式给予。前药是指在活体内的生理条件下例如通过氧化、还原、水解等(它们各自利用酶或在没有酶参与下进行)转化成本发明的生物活性化合物的衍生物。前药的实例是下述化合物：其中本发明的化合物中的胺基被酰化、烷基化或磷酸化，例如二十烷酰基胺基、丙胺酰胺基、新戊酰氧基甲基胺基、或其中羟基被酰化、烷基化、磷酸化或转化成硼酸盐，例如乙酰氧基、棕榈酰氧基、新戊酰氧基、琥珀酰氧基、富马酰氧基、丙胺酰氧基、或其中羧基被酯化或酰胺化，或其中巯基与选择性地向靶和/或向细胞的胞质溶胶递送药物的载体分子，例如肽形成二硫桥键、这些化合物可以由本发明的化合物根据公知方法制备。

“可药用的盐”或者“药学上可接受的”是指由可药用的碱或酸，包括无机碱或酸和有机碱或酸制成的。在本发明的化合物含有一个或多个酸性或碱性基团的情况下，本发明还包含它们相应的可药用盐。因此，含有酸性基团的本发明的化合物可以以盐形式存在并可根据本发明使用，例如作为碱金属盐、碱土金属盐或作为铵盐。这样的盐的更确切实例包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或与胺或有机胺，例如伯胺、仲胺、叔胺、环胺等，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、乙醇胺、二环己胺、乙二胺、嘌呤、哌嗪、哌啶、胆碱和咖啡因等特别优选的有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因的盐。含有碱性基团的本发明的化合物可以盐形式存在并可根据本发明以它们与无机或有机酸的加成的形式使用。合适的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、特戊酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、胺基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸和本领域技术人员已知的其它酸。如果本发明的化合物在分子中同时含有酸性和碱性基团，本发明除所提到的盐形式外还包括内盐或内铵盐。各盐通过本领域技术人员已知的常规方法获得，例如通过在溶剂或分散剂中使这些与有机或无机酸或碱接触或通过与其它盐阴离子交换或阳离子交换。

因此，在本申请中当提及“化合物”、“本发明化合物”或“本发明所化合物”时，包括所有所述化合物形式、例如其前药、稳定同位素衍生物、可药用的盐、异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异体及其混合物。

在本文中、术语“肿瘤”包括良性肿瘤和恶性肿瘤(例如癌症)。

在本文中，术语“癌症”包括Bruton's酪氨酸激酶参与其发生的各种恶性肿瘤、包括但不限于非小细胞肺癌、食管癌、黑色素瘤、横纹肌肉榴、细胞癌、多发性骨髓瘤、乳腺癌卵巢癌、子宫膜癌、宫颈癌、胃癌、结癌、膀胱癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌和肝癌(例如肝细胞癌)，更具体为肝癌、胃癌和膀胱癌。

本文所使用术语“有效量”、“治疗有效量”或“药学有效量”是指服用后足以在某种程度上缓解所治疗的疾病或病症的一个或多个症状的至少一种药剂或化合物的量。其结果可以为迹象、症状或病因的消减和/或缓解或生物系统的任何其它所需变化。例如，用于治疗的“有效量”是在临床上提供显著的病症缓解效果所需的包含本文公开化合物的组合物的量。可使用诸如剂量递增试验的技术测定适合于任意个体病例中的有效量。

本发明使用的术语“多晶型物”或“多晶型(现象)”是指本发明的化合物具有多种晶型格形态，本发明的一些化合物可能有一个以上的晶体形式，本发明涵盖所有的多品型态或其混合物。

本发明化合物的中间体化合物及其多品形物也在本发明的范围内。

结晶经常产生本发明化合物的溶剂化物，本文所用术语“溶剂化物”是指由一个或多个本发明化合物分子和一个或多个溶剂分子组合成的合体。

溶剂可以是水，这种情况下，溶剂化物是水合物。另外还可以是有机溶剂。因此，本发明化合物可作为水合物存在，包括一水合物、二水合物、半水合物、三水合物、四水合物等，以及相应的溶剂化形态。本发明化合物可以是真溶剂化物，但在其它一些情况下，本发明化合物也可能只是偶然保留了水或水跟一些其它溶剂的混合物本发明化合物可在一种溶剂中反应或在一种溶剂中沉淀或结晶。本发明化合物的溶剂化物也包括在本发明的范围内。

本文所用的跟制剂，组合物或成分相关的术语“可接受的”是指对治疗主体的总体健康没有持续的有害影响。

本文所用术语“药学上可接受的”是指不影响本发明化合物的生物活性或性质的物质(如载体或稀释剂)，并且相对无毒，即该物质可施用于个体而不造成不良的生物反应或以不良方式与组合物中包含的任意组分相互作用。

“药学上可接受的载体”包括但不限于已经被相关政府行政部门批准的可以被用于人类和驯养动物的佐剂、载体、赋形剂、助剂、脱臭剂、稀释剂、保鲜剂、染料/着色剂、风味增强剂、表面活性剂和润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂等渗剂、溶剂、或乳化剂。

文所用术语“主体”、“患者”、“对象”或“个体”是指患有疾病、紊乱或病症等的个体，包括哺乳动物和非哺乳动物，哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物纲的任何成员：人，非人的灵长类动物(例如黑猩猩和其它猿类和猴)；家畜，例如牛，马、绵羊，山羊，猪；家养动物，例如兔，狗和猫；实验室动物，包括啮齿类动物，如大鼠、小鼠和豚鼠等。非人哺乳动物的实例包括但不限于鸟类和鱼类等。在本文提供的一个有关方法和组合物的实施方案中，所述哺乳动物为人。

本文所用术语“治疗”是指对哺乳动物特别是人类的相关疾病病症的治疗，包括

(i)预防哺乳动物，特别是之前已经暴露在某个疾病或病症下但尚未被诊断患有该疾病或病症的哺乳动物，产生相应的疾病或病症；

(ii)抑制疾病或病症，即，控制其发展；

(iii)缓解疾病或病症，即，使疾病或病症消退缓；

(iv)缓解疾病或病症引起的症状。

本文所用术语“疾病”和“病症”可以互相替代，也可以是不同意思，因为某些特定疾病或病症还没有已知的致病因子(所以发病原因尚不清楚)，所以还不能被认作疾病而只能被看做不想要的状况或综合症，所述综合症或多或少有一些具体症状已经被临床研究人员证实。

本文所用术语“服用”、“施用”、“给药”等是指能够将化合物或组合物递送到进行生物作用的所需位点的方法这些方法。包括但不限于口服途径、经十二指肠途径、胃肠外注射(包括静脉内、皮下、腹膜内、肌内、动脉内注射或输注)、局部给药和经直肠给药。在优选的实施方案中，本文讨论的化合物和组合物通过口服施用。

具体实施方法

本发明还提供制备所述化合物的方法。本发明通式(I)所述化合物的制备，可通过以下示例性方法和实施例完成，但这些方法和实施例不应以任何方式被认为是对本发明范围的限制。也可地本领域技术人员所知的合成技术合成本发明所述的化合物，或者综合使用本领域已知方法和本发明所述的方法。每步应所得的产物用本领域已知的分离技术得到，包括但不限于萃取、过滤、蒸馏、结晶、色谱分离等。合成所需要的起始原料和化学试剂可以根据文献(reaxys)常规合成或购买。

除非另有说明，温度是摄氏温度。试剂购自Chemblocks Inc、Astatech Inc或麦克林等商业供应商，并且这些试剂可直接使用无需进一步纯化，除非另有说明。

除非另有说明，下列反应在室温、无水溶剂中、氮气或气的正压下或使用干燥管进行；玻璃器皿烘干和/或加热干燥。

除非另有说明，柱色谱纯化使用青岛海洋化工厂的200-300目硅胶；制备薄层色谱使用烟台市化学工业研究所生产的薄层色谱硅胶预制板(HSGF254)；MS的测定用ThernoLCD Fleet型(ESI)液相色谱-质谱联用仪。

核磁数据(1H NMR)使用BrukerAvance-400MHz或Varian Oxford-400Hz核磁仪，核磁数据使用的溶剂有CDCl

中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备

将化合物1-茚酮(2.64g，20mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺30mL中，室温下加入NaH(2.40g，60mmol，60％)，搅拌反应30分钟。加入N-BOC-N,N-双(2-溴甲基)胺(7.28g，22mmol)，升温至50℃搅拌反应12小时。冷却至室温，反应液用水淬灭，乙酸乙酯萃取。所得有机相再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到化合物1-氧代-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.11g，产率35％)。LC/MS(ESI):m/z＝202.1[M+H]

将化合物1-氧代-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(1.0g，3.32mmol)和(R)-叔丁基亚磺酰胺(1.21g，10.0mmol)溶于四氢呋喃10mL中，加入钛酸乙酯(4.87mL，23.23mmol)，升温至65℃搅拌反应48小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯和水，搅拌15分钟，所得固体过滤除去。分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，得到粗产物(R,E)-1-(叔丁基亚磺酰亚胺)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯，直接用于下一步。

将化合物(R,E)-1-(叔丁基亚磺酰亚胺)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(1.21g，3mmol)溶于四氢呋喃15mL中，降温至-45℃。加入硼氢化钠(0.17g，4.5mmol)，自然回到室温搅拌反应18小时。加冰水淬灭，二氯甲烷萃取。所得有机相再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到化合物(S,R)-1-(叔丁基亚磺酰胺)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(485mg，产率40％)。

将化合物(S,R)-1-(叔丁基亚磺酰胺)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(485mg，1.19mmol)溶于二氯甲烷1mL中，加入三氟乙酸1mL，搅拌反应1小时。反应液减压浓缩。残余物通过反向制备柱纯化，得到化合物(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(229mg，产率95％)。LC/MS(ESI):m/z＝203.1[M+H]

中间体(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺的制备

用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶-5-酮)得到化合物(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺。LC/MS(ESI):m/z＝204.1[M+H]

中间体(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺的制备

用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为6,7-二氢-5H-环戊烷并[c]吡啶-5-酮)得到化合物(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺。LC/MS(ESI):m/z＝204.1[M+H]

中间体(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺的制备

用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为5H-环戊烷并[c]吡啶-7(6H)-酮)得到化合物(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺。LC/MS(ESI):m/z＝204.1[M+H]

中间体(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺的制备

用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为5H-环戊烷并[b]吡啶-7(6H)-酮)得到化合物(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺。LC/MS(ESI):m/z＝204.1[M+H]

中间体(R)-1-(4-甲基哌啶-4-基)乙胺的制备

用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为4-乙酰基-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯)得到化合物(S)-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺。LC/MS(ESI):m/z＝143.1[M+H]

中间体(4-甲基哌啶-4-基)甲胺的制备

将化合物1-BOC-4-甲酰基-4-甲基哌啶(0.68g，3mmol)和醋酸铵(1.21g，30.0mmol)溶于甲醇10mL中，加入氰基硼氢化钠(0.25g，4mmol)，室温搅拌反应1小时。加入氯仿稀释，用3N氢氧化钠溶液和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，得到化合物4-(氨甲基)-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(513mg，产率75％)。LC/MS(ESI):m/z＝129.1[M+H]

将化合物4-(氨甲基)-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(456mg，2mmol)溶于甲醇1mL中，加入HCl的1,4-二氧六环溶液(1mL，4M)，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩。残余物通过反向制备柱纯化，得到化合物(4-甲基哌啶-4-基)甲胺(240mg，产率93％)。LC/MS(ESI):m/z＝129.1[M+H]

中间体(S)-4,6-二氢螺环[环戊烷并[b]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备

在五氧化二磷(25.4g，179.0mmol)的甲磺酸100mL悬浮液中，加入3-(1,3-噻唑-4-基)丙酸(5.0g，32.0mmol)，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，残余物通过柱层析纯化，得到化合物4H-环戊烷并[b]噻唑-6(5H)-酮(1.2g，产率27％)。LC/MS(ESI):m/z＝140.0[M+H]

后续步骤用与中间体(S)-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-胺相似的制备方法(原料换为4H-环戊烷并[b]噻唑-6(5H)-酮)得到化合物(S)-4,6-二氢螺环[环戊烷并[b]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺。LC/MS(ESI):m/z＝210.1[M+H]

中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯(1.15g，5mmol)溶于无水1,4-二氧六环25mL中，加入2,3-二氯苯基异氰酸酯(1.13g,6mmol)，三乙胺(101mg，1mmol)。搅拌下90℃反应48小时。冷却至室温，反应液减压蒸干，残余物通过柱层析纯化，得到中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.5g，产率78％)。LC/MS(ESI):m/z＝384.9[M+H]

中间体7-氯-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为3-氨基-5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯)得到化合物7-氯-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝342.9[M+H]

中间体7-氯-3-(2,3-二氯苯基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-氨基-6-氯烟酸甲酯)得到化合物7-氯-3-(2,3-二氯苯基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝342.0[M+H]

中间体7-氯-3-(7-氯苯并[d]噻唑-6-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为3-氨基-5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯和7-氯苯并[d]噻唑-6-胺)得到化合物7-氯-3-(7-氯苯并[d]噻唑-6-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝366.0[M+H]

7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物2-硝基-3-氯-4-氨基吡啶(0.87g，5mmol)溶于无水二氯甲烷25mL中，加入三乙胺(1.52g，15mmol)。冰水浴下，分批次加入三光气(1.48g，5mmol)，自然回到室温反应2小时，加水淬灭，二氯甲烷萃取。所得有机相再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压蒸干。得到粗品2-硝基-3-氯-4-异氰酸酯吡啶，直接用于下一步。

用与中间体7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-硝基-3-氯-4-异氰酸酯吡啶)得到化合物7-溴-3-(2-硝基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝396.9[M+H]

将化合物7-溴-3-(2-硝基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.19g，3mmol)溶于甲醇15mL中，置换氢气3次，加入兰尼镍(119mg)。氢气环境下室温搅拌反应12小时。反应液过滤，减压蒸干，得到中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(1.05g，产率95％)。LC/MS(ESI):m/z＝367.0[M+H]

中间体3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-氯喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(中间体换为3-氨基-5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯)得到化合物3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-氯喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝325.0[M+H]

中间体3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-氯吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(中间体换为2-氨基-6-氯烟酸甲酯)得到化合物3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-氯吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝324.0[M+H]

中间体7-氯-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物2,3-二氯吡啶-4-胺(1.63g，10mmol)溶于环丙胺20mL中，微波下加热到120℃反应30分钟。冷却至室温，反应液减压蒸干，残余物通过柱层析纯化，得到中间体3-氯-N

将化合物3-氯-N

将化合物3-氨基-5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(0.94g，5mmol)溶于无水1,4-二氧六环20mL中，加入3-氯-N-环丙基-4-异氰酸酯吡啶-2-二胺(0.84g,4mmol)，三乙胺(101mg，1mmol)。搅拌下90℃反应72小时。冷却至室温，反应液减压蒸干，残余物通过柱层析纯化，得到中间体7-氯-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.5g，产率69％)。LC/MS(ESI):m/z＝365.0[M+H]

中间体7-氯-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(中间体换为2-氨基-6-氯烟酸甲酯)得到化合物7-氯-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝364.0[M+H]

中间体N-(3-氨基-2-氯苯)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

将化合物甲烷三羧酸三乙酯(9.28g，40mmol)和2-氨基吡啶(1.88g，20mmol)溶解于二甲苯70mL，加热至120℃搅拌反应24小时。冷却到室温，过滤，滤饼用甲醇洗3次，干燥得到化合物2-羟基-4-氧代-吡啶[1,2-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯(1.16g，产率25％)。LC/MS(ESI):m/z＝235.1[M+H]

氮气保护下，将化合物2-羟基-4-氧代-吡啶[1,2-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯(936mg，4mmol)溶解于甲醇10mL，然后加入钯碳(80mg)，氢气置换3次，室温下搅拌反应2小时。过滤，减压浓缩得到化合物2-羟基-4-氧代-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯(904mg，产率95％)。LC/MS(ESI):m/z＝239.1[M+H]

将化合物2-氯苯-1,3-二胺(542mg，3.8mmol)和2-羟基-4-氧代-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯(904mg，3.8mmol)溶解于氯苯20mL，加热至回流搅拌反应3小时。冷却到室温，过滤，干燥得到化合物N-(3-氨基-2-氯苯)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺(661mg，产率52％)。LC/MS(ESI):m/z＝335.1[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝516.1[M+H]

中间体N-(3-(7-溴-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[3,2-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物N-(3-(7-溴-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[3,2-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝559.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝515.1[M+H]

中间体N-(3-(7-溴-2,4-二氧杂-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝558.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备

向氯化亚砜10mL中加入1-甲基吡唑-3-甲酸(630mg，5mmol)，回流搅拌2小时，减压浓缩，得到酰氯，向酰氯中加入二氯甲烷15mL，吡啶(593mg，7.5mmol)，2-氯苯-1,3-二胺(357mg，2.5mmol)，4-二甲氨基吡啶(153mg，1.25mmol)，室温搅拌反应2小时。加水淬灭，二氯甲烷萃取，所得有机相再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压蒸干。残余物通过柱层析纯化得到化合物N-(3-氨基-2-氯苯)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(520mg，产率83％)。LC/MS(ESI):m/z＝251.1[M+H]

后续二步用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法(原料换为N-(3-氨基-2-氯苯)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝432.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为1-甲基吡唑-4-甲酸)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-dioxo-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝432.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)苯甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为苯甲酸)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)苯甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝428.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)吡嗪-2-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为2-甲酸吡嗪)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)吡嗪-2-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝430.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)吡啶-2-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为2-甲酸吡啶)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)吡啶-2-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝429.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)嘧啶-4-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为4-嘧啶甲酸)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)嘧啶-4-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝430.0[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吲哚-7-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为1-甲基-7-吲哚甲酸)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吲哚-7-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝481.1[M+H]

中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酰胺的制备

用与中间体N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺相似的制备方法(原料换为1-甲基-7-吲唑甲酸)得到化合物N-(2-氯-3-(7-氯-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)苯基)-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酰胺。LC/MS(ESI):m/z＝482.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物4-溴嘧啶(4.97g，31.25mmol)溶于甲苯80mL中，加入六正丁基二锡(18.05g，31.25mmol)，四三苯基膦钯(1.79g，1.56mmol)，升温至120℃搅拌反应6小时。冷却至室温，反应液减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到化合物4-(三丁基锡烷基)嘧啶(3.23g，产率28％)。

将化合物4-(三丁基锡烷基)嘧啶(1.85g，5mmol)溶于二甲苯40mL中，加入化合物2-氯-3碘苯胺(1.27g，5mmol)，四三苯基膦钯(289mg，0.25mmol)，升温至120℃搅拌反应3小时。冷却至室温，反应液减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到化合物2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯胺(0.67g，产率65％)。LC/MS(ESI):m/z＝206.0[M+H]

后续二步用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝387.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(吡啶-3-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为3-溴吡啶)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(吡啶-3-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝386.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-溴吡嗪)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝387.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为3-溴-1-甲基吡咯)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝389.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物4-溴嘧啶(1.59g，10mmol)溶于甲苯15mL中，加入叔丁醇钠(1.15g，12mmol)，4,5-双二苯基麟-9,9-二甲基氧杂蒽(60mg)，氮气置换3次，加入三(二亚苄基茚丙酮)二钯(85mg)，搅拌下回流反应3小时。冷却至室温，反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。所得有机相再用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到化合物2-氯-N

后续二步用与中间体7-溴-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮前二步相似的制备方法得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝402.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(吡啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-溴吡啶)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(吡啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝401.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-溴吡嗪)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝402.0[M+H]

中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与中间体7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮相似的制备方法(原料换为2-溴嘧啶)得到化合物7-氯-3-(2-氯-3-(嘧啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮。LC/MS(ESI):m/z＝402.0[M+H]

实施例1

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

将化合物7-溴-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(772mg，2mmol)溶于甲苯8mL中，加入(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷二盐酸盐(584mg，2.4mmol)，碳酸铯(1.95g，6.0mmol)，双(二亚芐基丙酮)钯(12mg，0.02mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(19mg，0.04mmol)。置换氮气3次，搅拌下90℃反应6小时。冷却至室温，反应液过硅胶短柱，乙酸乙酯淋洗，减压蒸干。残余物通过柱层析纯化，得到目标产物1(494mg，产率52％)。

实施例2

(S)-7-(4-氨基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物2(415mg，产率45％)。LC/MS(ESI):m/z＝461.1[M+H]

实施例3

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(4-氨基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物3(222mg，产率25％)。

实施例4

(S)-7-(1-氨基-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物4(548mg，产率54％)。

实施例5

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物5(498mg，产率49％)。

实施例6

(S)-7-(7-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物6(437mg，产率43％)。LC/MS(ESI):m/z＝508.1[M+H]

实施例7

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物7(528mg，产率52％)。LC/MS(ESI):m/z＝508.1[M+H]

实施例8

(S)-7-(7-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物8(416mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝508.1[M+H]

实施例9

(R)-7-(4-(1-氨乙基)-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物9(394mg，产率44％)。LC/MS(ESI):m/z＝449.1[M+H]

实施例10

7-(4-(氨乙基)-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物10(328mg，产率38％)。

实施例11

7-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物11(361mg，产率43％)。

实施例12

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

/>

用与实施例1相似的方法得到化合物12(485mg，产率51％)。LC/MS(ESI):m/z＝477.1[M+H]

实施例13

(S)-7-(1-氨基-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物13(436mg，产率43％)。

实施例14

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物14(395mg，产率39％)。LC/MS(ESI):m/z＝510.1[M+H]

实施例15

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物15(506mg，产率50％)。LC/MS(ESI):m/z＝510.1[M+H]

实施例16

(S)-7-(7-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物16(425mg，产率42％)。LC/MS(ESI):m/z＝510.1[M+H]

实施例17

3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物17(222mg，产率29％)。

实施例18

(S)-7-(1-氨基-1,3-二氢螺环[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物18(222mg，产率21％)。LC/MS(ESI):m/z＝491.2[M+H]

实施例19

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物19(244mg，产率23％)。LC/MS(ESI):m/z＝492.2[M+H]

实施例20

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物20(202mg，产率19％)。

实施例21

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(7-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物21(266mg，产率25％)。LC/MS(ESI):m/z＝492.2[M+H]

实施例22

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(7-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物22(223mg，产率21％)。LC/MS(ESI):m/z＝492.2[M+H]

实施例23

3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物23(280mg，产率26％)。

实施例24

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)-喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物24(356mg，产率31％)。LC/MS(ESI):m/z＝532.2[M+H]

实施例25

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物25(443mg，产率43％)。LC/MS(ESI):m/z＝477.1[M+H]

实施例26

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物26(560mg，产率51％)。

实施例27

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物27(265mg，产率25％)。LC/MS(ESI):m/z＝491.2[M+H]

实施例28

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(3-氯-2-(环丙氨基)吡啶-4-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物28(344mg，产率30％)。LC/MS(ESI):m/z＝531.2[M+H]

实施例29

(S)-7-(6-氨基-4,6-二氢螺环[环戊烷并[b]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-3-(2,3-二氯苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物29(457mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝516.1[M+H]

实施例30

(S)-7-(5-氨基-5,7-二氢螺环[环戊烷并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-3-(7-氯苯并[d]噻唑-6-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物30(449mg，产率39％)。LC/MS(ESI):m/z＝533.1[M+H]

实施例30

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(7-氯苯并[d]噻唑-6-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物31(367mg，产率34％)。

实施例32

(S)-3-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)-7-(6-氨基-4,6-二氢螺环[环戊烷并[b]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物32(247mg，产率23％)。LC/MS(ESI):m/z＝498.1[M+H]

实施例33

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

/>

用与实施例1相似的方法得到化合物33(448mg，产率32％)。

实施例34

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[3,2-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物34(406mg，产率29％)。LC/MS(ESI):m/z＝649.2[M+H]

实施例35

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物35(574mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝649.2[M+H]

实施例36

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喹唑啉-3(4H)-基)-2-氯苯基)-2-羟基-4-氧杂-6,7,8,9-四氢-4H-吡啶[1,2-a]嘧啶-3-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物36(531mg，产率38％)。LC/MS(ESI):m/z＝648.2[M+H]

实施例37

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-1-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物37(586mg，产率48％)。

实施例38

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物38(525mg，产率43％)。LC/MS(ESI):m/z＝566.2[M+H]

实施例39

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)苯甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物39(448mg，产率37％)。LC/MS(ESI):m/z＝562.2[M+H]

实施例40

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)吡嗪-2-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物40(499mg，产率41％)。

实施例41

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)吡啶-2-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物41(558mg，产率46％)。LC/MS(ESI):m/z＝563.2[M+H]

实施例42

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)嘧啶-4-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物42(389mg，产率32％)。LC/MS(ESI):m/z＝564.2[M+H]

实施例43

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-1-甲基-1H-吲哚-7-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物43(477mg，产率36％)。LC/MS(ESI):m/z＝615.2[M+H]

实施例44

N-(3-(7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,4-二氧杂-1,2-二氢喋啶-3(4H)-基)-2-氯苯基)-1-甲基-1H-吲唑-7-甲酰胺的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物44(545mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝616.2[M+H]

实施例45

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物45(371mg，产率33％)。

实施例46

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(吡啶-3-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物46(460mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝520.2[M+H]

实施例47

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物47(483mg，产率43％)。LC/MS(ESI):m/z＝521.2[M+H]

实施例48

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物48(327mg，产率29％)。LC/MS(ESI):m/z＝523.2[M+H]

实施例49

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(嘧啶-4-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物49(347mg，产率30％)。

实施例50

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(吡啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物50(311mg，产率27％)。LC/MS(ESI):m/z＝535.2[M+H]

实施例51

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(吡嗪-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

用与实施例1相似的方法得到化合物51(405mg，产率35％)。LC/MS(ESI):m/z＝536.2[M+H]

实施例52

7-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(2-氯-3-(嘧啶-2-氨基)苯基)喋啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备

/>

用与实施例1相似的方法得到化合物52(474mg，产率41％)。LC/MS(ESI):m/z＝536.2[M+H]

实施例53生物活性测试

以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。

SHP2变构抑制实验

化合物对SHP-2激酶活性抑制作用的测定

本测试的目的是测量化合物对SHP-2全长蛋白变构活性的抑制能力。实验仪器：离心机(5810R)购自Eppendorf公司，移液器购自Eppendor域Rainin公司，酶标仪购自美国BioTek公司，型号为SynergyHl全功能酶标仪。

实验方法：使用Homogeneous Full Length SHP-2Assay Kit(BPS Bioscience,#79330)进行体外SHP-2活性检测。首先在96孔低吸附微孔板(NUNC,#267342)中加入18μL的Master Mix，即在终浓度为1×的反应缓冲液中包含0.5剛的SHP-2activating Peptide和5mM的DTT,离心后再加入每孔5皿的待测化合物/DMSO(终DMSO含量为1％,V/V,将待测化合物在DMSO中溶解成ImM,进行三倍系列稀释，10个浓度，反应体系终浓度范围从1μM至0.05nM),将SHP-2在1X的反应缓冲液中稀释至终浓度为0.06nM后，加入反应微孔板中，每孔2μL，在反应板上设置全活性对照(化合物只加DMSO)和全抑制对照(不加SHP-2)离心后在室温下孵育该反应混合物60分钟。

孵育结束后，加入每孔25μL的Substrate solution,包含终浓度为10μM的Substrate和5mM的DTT,离心后室温继续孵育30分钟。反应结束后，在Synergy Hl全功能酶标仪(Biotek)酶标仪上设置激发波长340nm，发射波长455nM,增益值75进行读数。

实验数据处理方法：

根据全活性对照和全抑制对照作为Max和Min的数值，通过反应板上阳性对照孔(DMSO对照孔)和阴性对照孔(不添加激酶)计算使用化合物处理的孔的百分比抑制比率数据{％抑制率＝100-[(测试化合物-Min平均值)/(Max平均值-Min平均值)]X100}。使用GraphPad prism拟合百分比抑制率和十点浓度数据至4参数非线性逻辑公式计算出测试化合物的IC50值。

实验结论：

通过以上方案得出本发明所示的实施例化合物在SHP-2激酶活性试验中显示出如下表1的生物活性。其中“A”表示IC

表1化合物抑制SHP2的IC