一种阿昔替尼杂质及其制备方法

技术领域

本发明属于药物化学的技术领域，具体涉及阿昔替尼杂质及其制备方法。

背景技术

阿昔替尼(Axitinib)2012年1月27日FDA批准上市，用于其它系统治疗无效的晚期肾癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)。由美国辉瑞(Pfizer)公司开发，商品名Inlyta。与Pfizer的另一抗癌药物舒尼替尼(Sunitinib)类似，阿昔替尼也是多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可以抑制血管内皮细胞生长因子受体(Vascular Endothelial GrowthFactorReceptor，VEGFR)VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,血小板衍生生长因子受体(Platelet-derivedgrowth factor receptor,PDGFR)和c-KIT。

阿昔替尼化学名称为6-[2-(甲基氨甲酰基)苯基硫烷基]-3-E-[2-(吡啶-2-基)乙烯基]吲唑；分子式为C

现有文献报道了多种制备阿昔替尼的工艺路线，但由于反应步骤较多，涉及的反应类型较多，多存在产生或引入杂质过多的问题。因此控制杂质的引入及有效去除或降低杂质含量成为制备阿昔替尼原料药需要着重解决的问题。

新药研究和开发过程中，药物的质量是衡量药物品质的一个重要标准，药物的质量标准对药物有效成分的纯度和杂质的限度都有较为严格的规定，一般而言，超过0.1％的药物杂质应通过选择性方法来鉴定并定量。对于药物研发人员来说，开发高效的杂质合成路线定向合成工艺中所产生的杂质，以便获得杂质对照品，保证每批原料药质量检测工作的开展(如，杂质HPLC定位、杂质含量测定等)也是十分重要的工作。

因此，针对阿昔替尼制备过程中可能引入或产生的杂质问题，不断分析研究制备过程中的杂质，以保证产品中的杂质种类或含量控制在安全标准之内仍然是目前需要解决的问题。研究确定阿昔替尼杂质及其制备方法，提供合格的对照品，能够对阿昔替尼的质量控制起到积极的作用。

发明内容

本发明提供了一种阿昔替尼杂质Y及其制备方法，所述制备方法反应条件温和、产品收率高、纯度高。同时本发明提供了一种阿昔替尼杂质Y的分析检测方法。

本发明的具体技术内容如下：

一种阿昔替尼杂质Y，所述杂质化学名称为6,6'-二碘-1,1'-双(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H,1'H-3,3'-联吲唑,其具有式1所示化学结构，其为阿昔替尼中间体(E)-6-碘-3-(2-(吡啶-2-基)乙烯基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(式2所示)制备过程中产生的杂质。

一种阿昔替尼杂质Y的制备方法，具体包括如下步骤：

步骤1：3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑与六甲基二锡烷反应得得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑；

步骤2：6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑与3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑反应得到6,6'-二碘-1,1'-双(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H,1'H-3,3'-联吲唑，即杂质Y。

优选地，步骤1所述的反应在催化剂的参与下进行，催化剂选自氯化钯、醋酸钯、四(三苯基膦)钯、(PPh3)

优选地，步骤1所述的3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑与催化剂的摩尔比为1：0.01～0.1。

优选地，步骤1所述的反应在有机溶剂A中进行，有机溶剂A选自甲苯、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺。

优选地，步骤2所述的反应在催化剂的参与下进行，所述的催化剂为氯化钯、醋酸钯、四(三苯基膦)钯、(PPh

优选地，步骤2所述的反应在有机溶剂B中进行，所述的有机溶剂B选自四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、甲苯、N-甲基吡咯烷酮。

进一步优选地，一种阿昔替尼杂质Y的制备方法，具体包括如下步骤：

步骤1：将3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑、六甲基二锡烷和催化剂，加入有机溶剂A中，氮气保护下加热回流，将所得悬浮液过滤，减压蒸馏除去溶剂，得到油状物，经柱层析纯化得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑；

步骤2：将6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑、3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑和催化剂加入有机溶剂B中，加热回流，将所得悬浮液过滤，减压蒸馏除去溶剂，得到产物6,6'-二碘-1,1'-双(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H,1'H-3,3'-联吲唑即杂质Y。

优选地，步骤1所述的3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑与六甲基二锡烷的摩尔比为1：1～2；优选为1：1～1.5；最优选为1：1.1。

优选地，步骤1所述的催化剂选自氯化钯、醋酸钯、四(三苯基膦)钯、(PPh

优选地，步骤1所述的3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑与催化剂的摩尔比为1：0.01～0.1；优选为1：0.02～0.05。

优选地，步骤1所述的有机溶剂A选自甲苯、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺。

优选地，步骤1所述的3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑与有机溶剂A的质量体积比为1：5～50g/ml；优选为1：10～20g/ml；更优选为1：10～15g/ml。

优选地，步骤1所述的加热回流的时间为8～16h；优选为8～12h。

优选地，步骤1所述的柱层析纯化的洗脱液为乙酸乙酯与石油醚的混合液，其中乙酸乙酯与石油醚的体积比为1：2～10。

优选地，步骤2中所述的6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑与3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑的摩尔比为1：1～1.5；优选为1：1～1.2。

优选地，步骤2中所述的催化剂为氯化钯、醋酸钯、四(三苯基膦)钯、(PPh

优选地，步骤2中所述的催化剂选用单一催化剂时，6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑与催化剂的摩尔比为1：0.01～0.1；优选为1：0.02～0.05。

优选地，步骤2中所述的催化剂为(PPh

优选地，步骤2中所述的有机溶剂B选自四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、甲苯、N-甲基吡咯烷酮。

优选地，步骤2中所述的6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑与有机溶剂B的质量体积比为1：5～30g/ml，优选为1：10～20g/ml。

优选地，步骤2中所述的加热回流的时间为5～24h；优选为10～15h。

优选地，步骤2中所述的产物6,6'-二碘-1,1'-双(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H,1'H-3,3'-联吲唑可以通过柱层析纯化过程进一步纯化，具体包括一次制备和二次制备过程。

进一步优选地，所述的一次制备过程包括如下步骤：

样品：取粗品加入二氯甲烷和乙腈的混合溶液，超声溶解，过滤；

填料：HP-Silica；

流速：50～80ml/min；

波长：230nm；

柱温：20～30℃；

流动相：A：二氯甲烷，B：乙腈；

洗脱梯度：

进一步优选地，所述的二次制备过程条件为：

样品：一次制备接出液蒸干后，加入乙腈和水溶解，过滤；

填料：Unisil-C4；

流速：50～80ml/min；

波长：230nm；

柱温：20～30℃；

流动相：A：纯化水，B：乙腈；

洗脱梯度：

另一方面，本发明提供一种阿昔替尼杂质Y的分析检测方法，具体检测条件包括：

色谱柱：C18色谱柱；检测波长：200～260nm；流速：1.0～5.0ml/min；柱温：10℃～30.0℃；流动相A为0.01％～0.1％氨水，流动相B为乙腈；梯度洗脱：

进一步优选地，所述检测条件包括：

色谱柱：C18色谱柱(4.6×150mm,3μm)；检测波长：230nm；流速：1.0～5.0ml/min；柱温：20℃～30.0℃；流动相A为0.01％～0.1％氨水，流动相B为乙腈；梯度洗脱：

与现有技术相比，本发明取得的技术效果是：

本发明提供了阿昔替尼杂质Y及其制备方法，所述杂质为阿昔替尼制备过程中产生，该杂质的确证结构及纯品可以为阿昔替尼的质量研究及控制提供对照品，有助于完善阿昔替尼原料药或其制剂的质量标准；本发明也提供了阿昔替尼杂质Y的分析检测方法，为制备和检测阿昔替尼杂质Y提供了可供选择的方法。

附图说明

图1阿昔替尼杂质Y粗品HPLC谱图。

图2阿昔替尼杂质Y一次制备色谱图。

图3阿昔替尼杂质Y一次制备接出液HPLC谱图。

图4阿昔替尼杂质Y二次制备色谱图。

图5阿昔替尼杂质Y二次制备接出液HPLC谱图。

图6阿昔替尼杂质Y高分辨质谱图。

图7阿昔替尼杂质Y核磁共振

图8阿昔替尼杂质Y核磁共振

具体实施方式

下面通过实施例来进一步说明本发明，应该正确理解的是：本发明的实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。

实施例1目标产物制备

将3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(30mmol，13.6g)，六甲基二锡烷(10.8g，33mmol)，(PPh

将所得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑(15mmol，9.2g)，3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(15mmol，6.8g)，(PPh

实施例2目标产物制备

将3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(30mmol，13.6g)，六甲基二锡烷(14.7g，45mmol)，(PPh

将所得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑(12.9mmol，8.0g)，3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(15.5mmol，7.0g)，(PPh

实施例3目标产物制备

将3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(30mmol，13.6g)，六甲基二锡烷(19.6g，60mmol)，(PPh

将所得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑(11.2mmol，7.0g)，3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(16.8mmol，7.6g)，(PPh

实施例4目标产物制备

将3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(30mmol，13.6g)，六甲基二锡烷(29.5g，90mmol)，(PPh

将所得6-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3-(三甲基锡烷基)-1H-吲唑(9.6mmol，6g)，3,6-二碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(19.2mmol，8.7g)，醋酸钯(1.92mmol，431mg)、THF(180mL)加入反应瓶中，氮气保护下回流12h；用硅藻土垫过滤深色悬浮液，减压蒸馏除去溶剂，得到6,6'-二碘-1,1'-双(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H,1'H-3,3'-联吲唑4.4g，摩尔收率：33％，HPLC纯度：47.0％。

实施例5

一次制备过程：

(1)样品制备：取阿昔替尼杂质Y粗品(HPLC:49％)1g，加入二氯甲烷(200ml)和乙腈(200ml)中溶解，过滤；

(2)进样洗脱：进样量10ml；填料：Sepax-HP-Silica；流速：60ml/min；波长：230nm；柱温：30℃；流动相：A：二氯甲烷，B：乙腈；按照如下梯度洗脱：

(3)收集检测：收集5.6min峰对应的洗脱液为一次制备接出液，制备过程色谱见图2；取样检测HPLC:76.84％，结果见图3。

二次制备过程：

(1)样品制备：一次制备接出液蒸干后，加入80％乙腈水溶液(200ml)重新溶解，过滤；

(2)进样洗脱：进样量50ml，填料：纳微-Unisil-C4；流速：60ml/min；波长：230nm；柱温：30℃；流动相：A：纯化水，B：乙腈；按照如下梯度洗脱：

(3)收集检测：收集17.9min峰对应的洗脱液，制备过程色谱图见图4；取样检测HPLC:98.92％，结果见图5。

阿昔替尼杂质Y结构确证检测：

MS-ESI m/z:655.0(M+H)

1

13