一类作为AKR1C3抑制剂的化合物及其制备方法与用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一类作为AKR1C3抑制剂的化合物及其制备方法与用途。

背景技术

醛酮还原酶(Aldo-Keto Reductases,AKRs)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate,NAD(P)(H))依赖性的氧化还原酶超家族，是一类主要存在于胞浆中的单体可溶性蛋白，分子量约为34～37kDa。该氧化还原酶超家族包含16个家族，由151个家族成员组成。由于它们能够在尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronosyltransferases,UGT)和硫转移酶(sulfotransferase,SULT)的催化下，通过形成共轭醇的方式来还原羰基，因此AKR属于Ⅰ相代谢酶。AKR家族成员在体内催化的氧化还原反应的底物范围广泛，包括：内源性底物(如类固醇、糖醛、活性脂醛、酮前列腺素、神经甾体、胆汁酸和视网膜)和外源性物质(药物和化学致癌物)。因为可催化底物的广泛性，AKR酶在激素代谢合成、氧化应激反应的调控、药物激活与失活、致癌物解毒等生命活动中均发挥重要作用。

AKR1C酶(Aldo-keto reductase family 1member C)，即醛酮还原酶家族第1族C亚家族，包括AKR1C1，AKR1C2，AKR1C3和AKR1C4四种亚型。这四种酶以NAD(P)(H)为辅因子，把醛和酮还原为相应的伯醇和仲醇。AKR1C酶表现出不同组织分布和立体化学底物偏好，在类固醇激素的合成与灭活作用中发挥关键作用。它们立体定向性地催化甾体底物3-、17-和20-位羰基还原成相应的3α或3β，17β和20α-OH激素配体，以此来调节高活性与低活性类固醇含量比，控制差异表达的靶组织中激素受体对配体的摄取，从而参与控制雄激素、雌激素和孕激素受体的配体占据和反式激活，起到分子开关的作用。AKR1C酶对于维持体内活性物质的代谢平衡具有重要作用，过表达的AKR1C酶异常激活相关信号途径，促使细胞异常增殖，可促进肿瘤生长和侵袭，加重癌症的临床症状。

AKR1C3也被称为5型17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-hydroxysteroiddehydrogenase,17β-HSD)，主要作为17-酮还原酶发挥调节激素活性的作用。具有激素调节功能的AKR1C3直接或间接地催化强效雄激素睾酮和5α-二氢睾酮(5α-dihydrotestosterone,5α-DHT)以及强效雌激素17β-雌二醇的生成，这种将低效激素局部转化为高效激素的作用将导致核受体激活和雄(雌)激素受体被占据，从而调节相关信号通路。研究表明，AKR1C3异常表达使得功效型激素强化，导致体内激素代谢紊乱，促进肿瘤进程。多功能的AKR1C3还能作为前列腺素F酶(prostaglandin F synthase,PGF)，以非激素依赖的方式在细胞增殖和分化中发挥调节作用。AKR1C3催化前列腺素H

因此，AKR1C3是一个治疗激素依赖型癌症(如前列腺癌、乳腺癌、子宫内膜癌)和激素非依赖性癌症(如急性髓系白血病、鳞状细胞癌)的潜在靶标。

发明内容

发明目的：本发明目的之一在于提供一种如通式(I)的作为AKR1C3抑制剂的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，

R

R

R

R

Z

Z

X

n

n

在某些优选的实施方式中，

R

R

R

X

n

n

在某些进一步优选的实施方式中，

R

R

Z

Z

X

在某些进一步优选的实施方式中，

R

R

R

Z

Z

X

在某些进一步优选的实施方式中，

R

R

R

Z

Z

X

在某些进一步优选的实施方式中，

R

R

R

Z

Z

X

本发明通式I的化合物优选以下化合物：

/>

本发明涉及的上述通式I化合物还可以以其盐的形式存在，它们在体内转化为通式I化合物。例如，在本发明的范围内，按照本领域已知的工艺，将本发明化合物转化为药学上可接受的盐的形式，并且以盐形式使用它们。

在一些优选的实施方式中，所述药学上可接受的盐包括但不限于通式I化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、硫酸、磷酸、枸橼酸、氢溴酸、醋酸、三氟乙酸、丙酮酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、富马酸、水杨酸或苯基乙酸；还包括通式I化合物与无机碱形成的酸式盐或由碱性胺制成的有机盐。

本发明的另一目的是提供如通式I的作为AKR1C3抑制剂的化合物的制备方法，包括以下步骤：

上述合成路线中R

以苯并环酮衍生物1为起始原料，与盐酸羟胺生成中间体肟2，中间体肟2进行贝克曼重排扩环生成内酰胺中间体3，中间体3进行傅克酰基化生成重要中间体溴代物4，中间体溴代物4与嘧啶酮类衍生物5进行亲核取代反应，得到通式I化合物。

本发明通式I化合物可以用上述或类似上述的制备方法制备得到，根据取代基的不同和取代基位置的不同选用相应的起始原料即可。本领域技术人员应当认识到，上述路线有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容，除非另有规定，变量如同通式I中提及的一样定义。

本发明制备方法的一种优选地实施方式是：

以苯并环酮衍生物1为起始原料，在回流条件下，与盐酸羟胺生成中间体肟2，再以PPA为溶剂，125℃氮气保护的条件下，进行贝克曼重排扩环生成内酰胺中间体3，在冰浴和回流条件下，以不同类型的酰溴为酰基化试剂、AlCl

本发明另一目的在于提供一种药物组合物，所述药物组合物包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或辅料。

本发明的药物组合物可以采用各种已知的方式施用，例如口服、胃肠外施用、通过吸入喷雾施用或经由植入的贮库施用。本发明的药物组合物可单独给药也可与其他药物联合用药。口服组合物可以是任何口服可接受的剂型，包含但不限于片剂、胶囊剂、乳剂以及混悬剂、分散物和溶液。常用的药学上可接受的载体或辅料包括稳定剂、稀释剂、表面活性剂、润滑剂、抗氧化剂、粘合剂、着色剂、填充剂、乳化剂等。

无菌可注射组合物可按照本领域已知的技术使用适合的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。可以使用的药学上可接受的载体和溶剂包括水、甘露醇、氯化钠溶液等。

可以改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以获得对特定患者、组合物和施用方式而言可以有效实现所需治疗响应、对患者无毒的活性成分的量。所选择的的剂量水平取决于多种因素，包括所用的具体的本发明的化合物或其盐的活性、施用途径、施用时间、所用的具体组合物的排泄速率、治疗的持续时间、与所用的具体组合物组合使用的其它药物、化合物和/或材料、所治疗的患者的年龄、性别、体重、一般健康状况和既往病史以及医学领域中公知的类似因素。

本发明另一目的在于提供通式I的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的用途。

有益效果：

本发明以7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮)作为先导化合物进行结构的优化，合成了一类如通式I的嘧啶酮类AKR1C3抑制剂。该类化合物具有明显的AKR1C3抑制活性，能够制备通过抑制醛酮还原酶AKR1C3来治疗和/或预防疾病的药物，尤其是制备预防和/或治疗肿瘤的药物，为临床应用提供了可靠途径。

具体实施方式

下面结合具体实施例描述本发明通式I化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便地制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易地进行。

本发明具体实施例中使用的起始原料、反应试剂等均为市售。本发明可以采用本领域常用的成盐方法制备成盐的形式，例如：室温下，将化合物溶于盐酸乙醇中进行反应，生成盐酸盐；或者向其中加入苯磺酸进行反应生成苯磺酸盐。

本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10

实施例中反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)。

实施例中产品纯度采用HPLC检测。

实施例采用的合成路线如下：

实施例1

7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮的(化合物1)合成

/>

(1)(E)-3,4-二氢萘-1(2H)-酮肟(中间体2a)的合成

将1-四氢萘酮1a(665μL，5mmol)溶于甲醇50mL中，室温下加入盐酸羟胺(521mg，7.5mmol)。随后称取氢氧化钠固体(248mg，7.5mmol)，配制50％氢氧化钠水溶液并加入反应液中，随后加热至65℃回流6h。TLC监测反应(展开剂PE：EA＝10：1，v/v)，原料消失，反应结束。减压浓缩除去甲醇，室温下加足量水，析出淡黄色固体，抽滤收集滤饼，经柱层析(PE：EA＝20：1，v/v)纯化得白色固体即(E)-3,4-二氢萘-1(2H)-酮肟2a(719.7mg，产率89.3％)。

1

(2)1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体3a)的合成

取10g多聚磷酸于50mL的茄形瓶中，氮气保护下升温到125℃。随后，将酮肟中间体2a(1.00g，6.20mmol)加入反应瓶中，搅拌5～10分钟。TLC监测反应(展开剂PE：EA＝2：1，v/v)，原料消失，反应结束。趁热将反应液倒入准备好的冰水中，析出白色固体，超声至多聚磷酸完全溶解。抽滤收集滤饼，经柱层析(PE：EA＝5：1，v/v)纯化得白色固体即1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮3a(785.6mg，产率78.6％)。

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(3)7-(2-溴乙酰)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体4a)的合成

氮气保护下，将中间体3a(806.0mg，5mmol)溶于二硫化碳(4ml)中，冰浴下加入无水三氯化铝(3.33g，25mmol)，5分钟后，滴加溴乙酰溴(651μL，7.5mmol)，冰浴下反应1小时后升温至46℃回流48小时。TLC监测反应(展开剂PE：EA＝2：1，v/v)，原料消失，反应结束。将反应瓶中的反应液和反应生成的黑色油状物缓慢倒入冰水中，析出淡棕色固体，超声助溶。抽滤收集滤饼，经柱层析(PE：EA＝4：1，v/v)纯化得白色至浅黄色固体即7-(2-溴乙酰)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮4a(1.1g，产率74.8％)。

1

(4)7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物1)的合成

将起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a(85.1mg，0.5mmol)溶于6mL N,N-二甲基甲酰胺，加入无水碳酸钾(103.6mg，0.75mmol)，室温搅拌5分钟，随后分批加入溴代中间体4a(141.1mg，0.5mmol)。5分钟后TLC监测反应(展开剂DCM：MeOH＝20：1，v/v)。原料消失，反应结束。将反应液加入冰水中，-4℃储存过夜，析出黄色固体。抽滤收集滤饼，经柱层析(DCM：MeOH＝40：1，v/v)纯化得浅白色固体即7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(85.1mg，产率45.8％，纯度97.54％)。熔点220～222℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例2

5-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)二氢吲哚-2-酮(化合物2)的合成

(1)5-(2-溴乙酰基)二氢吲哚-2-酮(中间体4f)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为2-吲哚酮，得白色固体，即为中间体4f。产率为85.9％。

(2)5-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)二氢吲哚-2-酮(化合物2)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4f，得淡黄色固体，即为5-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)二氢吲哚-2-酮(化合物2)，产率为46.6％，纯度96.04％。熔点230～232℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例3

6-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(化合物3)的合成

(1)6-(2-溴乙酰)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(中间体4g)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为3,4-二氢-2(1H)-喹啉酮，得白色固体，即为中间体4g。产率为82.8％。

(2)6-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(化合物3)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4g，得淡黄色固体，即为6-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(化合物3)，产率为48.1％，纯度98.29％。熔点231～233℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例4

8-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮(化合物4)的合成

(1)(E)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环烯-5-酮肟(中间体2b)的合成

参考实施例1中间体2a的合成方法，将起始原料1a替换为1-苯并环庚酮，得白色固体，即为中间体2b。产率为86.6％。

(2)3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮(中间体3b)的合成

参考实施例1中间体3a的合成方法，将中间体2a替换为中间体2b，得白色固体，即为中间体3b。产率为81.3％。

(3)8-(2-溴乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑啉-2(1H)-酮(中间体4b)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为中间体3b，得白色固体，即为中间体4b。产率为79.9％。

(4)8-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮(化合物4)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4b，得白色固体，即为8-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮(化合物4)，产率为74.3％，纯度96.23％。熔点200～202℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例5

8-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物5)的合成

(1)(E)-7-甲基-3,4-二氢萘-1(2H)-酮肟(中间体2c)的合成

参考实施例1中间体2a的合成方法，将起始原料1a替换为7-甲基-3,4-二氢-2H-1-萘酮为起始原料，得白色固体，即为中间体2c。产率为87.8％。

(2)8-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体3c)的合成

参考实施例1中间体3a的合成方法，将中间体2a替换为中间体2c，得白色固体，即为中间体3c。产率为76.8％。

(3)7-(2-溴乙酰)-8-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体4c)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为中间体3c，得白色固体，即为中间体4c。产率为76.3％。

(4)8-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物5)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4c，得淡黄色固体，即为8-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为46.7％，纯度99.85％。熔点204～206℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例6

3-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物6)的合成

(1)(E)-2-甲基-3,4-二氢萘-1(2H)-酮肟(中间体2d)的合成

参考实施例1中间体2a的合成方法，将起始原料1a替换为2-甲基-3,4-二氢萘-1(2H)-酮为起始原料。得白色固体，即为中间体2d。产率为76.2％。

(2)3-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体3d)的合成

参考实施例1中间体3a的合成方法，将中间体2a替换为中间体2d，得白色固体，即为中间体3d。产率为72.1％。

(3)7-(2-溴乙酰)-3-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体4d)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为中间体3d，得白色固体，即为中间体4d。产率为64.1％。

(4)3-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物6)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4d，得淡黄色固体，即为3-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为45.1％，纯度99.77％。熔点200～202℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例7

5-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物7)的合成

(1)(E)-4-甲基-3,4-二氢萘-1(2H)-酮肟(中间体2e)的合成

参考实施例1中间体2a的合成方法，将起始原料1a替换为4-甲基-3,4-二氢-2H-1-萘酮为起始原料。得白色固体，即为中间体2e。产率为76.2％。

(2)5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体3e)的合成

参考实施例1中间体3a的合成方法，将中间体2a替换为中间体2e，得白色固体，即为中间体3e。产率为79.5％。

(3)7-(2-溴乙酰)-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体4e)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，将中间体3a替换为中间体3e，得白色固体，即为中间体4e。产率为77.4％。

(4)5-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物7)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4e，得淡黄色固体，即为5-甲基-7-(2-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为52.9％，纯度96.88％。熔点210～211℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例8

7-(2-((6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物8)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为2-硫脲嘧啶，得白色固体，即为7-(2-((6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为21.1％，纯度96.57％。熔点220～222℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例9

7-(2-((6-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物9)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为2-巯基-4-羟基-6-甲基嘧啶，得淡黄色固体，即为7-(2-((6-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为37.1％，纯度96.00％。熔点247～248℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例10

7-(2-((5-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物10)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为4-羟基-2-巯基-5-甲基嘧啶，得淡黄色固体，即为7-(2-((5-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为34.7％，纯度95.08％。熔点218～220℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例11

7-(2-((5-甲氧基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物11)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为5-甲氧基-2-硫代-2,3-二氢嘧啶-4(1H)-酮，得淡黄色固体，即为7-(2-((5-甲氧基-4-氧代-1,2,3,4-四氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为38.2％，纯度96.77％。熔点240～242℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例12

7-(2-((6-氧代-4-(三氟甲基)-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物12)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为4-羟基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-硫醇，得淡黄色固体，即为7-(2-((6-氧代-4-(三氟甲基)-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为40.3％，纯度96.08％。熔点262～264℃。

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HR-MS(m/z)：C

实施例13

7-(3-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)丙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物13)的合成

(1)7-(3-溴丙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(中间体4j)的合成

参考实施例1中间体4a的合成方法，以中间体3a和3-氯丙酰氯为原料，得白色固体，即为中间体4j。产率为80.1％。

(2)7-(3-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)丙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物13)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的中间体4a替换为中间体4j，得白色固体，即为7-(3-((6-氧代-4-丙基-1,6-二氢嘧啶-2-基)硫代)丙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为33.7％，纯度95.11％。熔点253～256℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例14

7-(2-((6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)氧基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物14)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为尿嘧啶，得淡黄色固体，即为7-(2-((6-氧代-1,6-二氢嘧啶-2-基)氧基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为25.5％，纯度95.81％。熔点276～278℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例15

7-(2-(嘧啶-2-基硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物15)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为2-巯基嘧啶，得白色固体，即为7-(2-(嘧啶-2-基硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为56.8％，纯度99.35％。熔点178～179℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例16

7-(2-(吡啶-2-基硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物16)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a替换为吡啶-2(1H)-硫酮，得白色固体，即为7-(2-(吡啶-2-基硫基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮，产率为47.6％，纯度96.97％。熔点176～178℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例17

8-(2-(嘧啶-2-基硫基)乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮(化合物17)的合成

参考实施例1的合成方法，将实施例1中的起始原料6-丙基-2-硫脲嘧啶5a和中间体4a替换为2-巯基嘧啶和中间体4b(参见实施例5)，得白色固体，即为8-(2-(嘧啶-2-基硫基)乙酰基)-3,4,5,6-四氢苯并[b]偶氮唑-2(1H)-酮，产率为67.6％，纯度98.58％。熔点200～202℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例18

7-(2-(嘧啶-2-基磺酰基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(化合物18)的合成

将化合物15(实施例15制备得到)(150.0mg，0.48mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，室温下加入间氯过氧苯甲酸(247.8mg，1.44mmol)，搅拌6小时。TLC监测反应(展开剂DCM：MeOH＝30：1，v/v)。原料消失，反应结束。加入饱和硫代硫酸钠水溶液(2.5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(2.5mL)，搅拌1小时。随后分离有机层，水层用二氯甲烷萃取3次后合并有机相。减压浓缩，并经柱层析(展开剂DCM：MeOH＝50：1，v/v)纯化得白色固体，即为7-(2-(嘧啶-2-基磺酰基)乙酰基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[b]氮杂-2-酮(85.1mg，产率49.5％，纯度：97.43％)。熔点265～266℃。

1

13

HR-MS(m/z)：C

实施例19生物活性测定

下面是本发明化合物醛酮还原酶抑制实验及结果：

药品与试剂：实施例1～19中制得的化合物、AKR1C蛋白(从E.coli BL21(DE3)中自提，质粒由德泰生物有限公司提供)、底物(S)-(+)-1,2,3,4-四氢-1-萘酚(大赛璐药物手性技术有限公司)、氧化型辅酶II自由酸(上海源叶生物科技有限公司)

仪器：THERMO Varioskan Flash全波长多功能酶标仪。

实验方法：

(1)磷酸缓冲液(PBS)(pH 7.0)的配制：将2.19g的十二水合磷酸氢二钠和6.84g的二水合磷酸二氢钠溶于450mL的纯水中，超声至固体全部溶解。用稀盐酸和稀氢氧化钠溶液调节pH至7.0后，定容至500mL，4℃储存。

(2)100mM的(S)-1,2,3,4-四氢萘酚母液配制：将22.23mg底物(S)-1,2,3,4-四氢萘酚溶于1.5mL的PBS缓冲液中，配置成100mM的母液，涡旋至完全溶解，储存于-20℃冰箱备用。每次测试前，按AKR1C1-AKR1C4的Km值，配制不同亚型的最适底物浓度，标记为S1、S2、S3和S4。其中，AKR1C1 Km＝5μM，AKR1C2 Km＝54.75μM，AKR1C3 Km＝225.5μM，AKR1C4 Km＝61.79μM。

(3)2mM的氧化型辅酶II自由酸NADP

(4)最适底物与NADP

(5)AKR1C1-AKR1C4的配制：选择对底物有最大响应的蛋白浓度进行稀释，标记为E1，E2，E3和E4。将提取的AKR1C1稀释200倍，标记为E1；AKR1C2稀释128倍，标记为E2；AKR1C3稀释160倍，标记为E3；AKR1C4稀释96倍，标记为E4。

(6)化合物溶液梯度稀释：待测化合物现配现用。用二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)将待测化合物配置成100mM的母液，PBS用于化合物的逐级稀释：10

(7)加样：每孔200μL体系。共设置8个实验组，每组3个复孔。化合物设置10

化合物1～19对AKR1C1、AKR1C2、AKR1C3和AKR1C4的抑制活性结果见表1，对AKR1C1、AKR1C2和AKR1C4的抑制选择性见表2：

表1目标化合物对AKR1C1、AKR1C2、AKR1C3和AKR1C4的抑制活性

*所有数据均为三次平行实验结果的平均值，形式为Mean±S.E.M

表2目标化合物对AKR1C1、AKR1C2和AKR1C4的抑制选择性

c

从活性测试总体结果上看，化合物1～19对AKR1C3均具有一定的抑制活性和选择性，缩环和苯并氮杂-2-酮上引入甲基的衍生物对AKR1C3的抑制能力和选择性均降低，扩环衍生物保留对AKR1C3的抑制但其选择性明显降低，R

如上所述，尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明，但其不得解释为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下，可对其在形式上和细节上作出各种变化。