包含瑞博西尼和安森司群的组合

本申请提供了瑞博西尼(ribociclib)和安森司群(amcenestrant)的组合，含有这样的组合的药物组合物，以及这样的组合和药物组合物的治疗用途、特别是用于治疗癌症的治疗用途。

雌激素受体α(ESR1)在大多数乳腺肿瘤中表达，使得它们能够对雌激素的促有丝分裂作用有反应。

安森司群(化合物6-(2,4-二氯苯基)-5-[4-[(3S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基]氧基苯基]-8,9-二氢-7H-苯并[7]轮烯-2-甲酸的INN名称(也凭其实验室代码SAR439859而已知))是一种选择性雌激素受体降解剂(SERD)，其是雌激素受体拮抗剂并且加速雌激素受体的蛋白酶体降解。此化合物公开在专利申请WO 2017/140669中：

瑞博西尼(INN名称)或7-环戊基-N,N-二甲基-2-[[5-(1-哌嗪基)-2-吡啶基]氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺是一种具有下式的CDK4/6抑制剂：

呈琥珀酸盐形式(与丁二酸形成的盐)的瑞博西尼是一种市售药物(商品名

被建议与以下组合：

-芳香酶抑制剂，以用于治疗患有激素受体(HR)阳性、人表皮生长因子受体2(HER2)阴性的晚期或转移性乳腺癌的绝经前/围绝经期或绝经后女性，作为基于内分泌的初始疗法；或

-氟维司群，以用于治疗患有HR阳性、HER2阴性的晚期或转移性乳腺癌的绝经后女性，作为基于内分泌的初始疗法或在进行内分泌疗法疾病进展后。

一直需要发现新的抗肿瘤治疗。现在，本申请表明，安森司群与瑞博西尼的组合是良好耐受的，展示出显著的抗肿瘤功效，并且诱导肿瘤停滞，与单独的每种活性成分相比具有协同作用。

本申请提供了包含安森司群和瑞博西尼的组合。

在本申请提供的组合中，安森司群不仅可以以两性离子(即，具有酸性基团和碱性基团的总体上中性的分子)的形式存在，而且还可以以与酸或碱的加成盐的形式存在。此类加成盐可以用于以上组合。此外，瑞博西尼可以以盐、更特别是药学上可接受的盐、特别是琥珀酸盐的形式存在。因此，本申请提供了包含安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐的组合。

在一个实施方案中，安森司群或其药学上可接受的盐与瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐的组合显示出治疗协同作用。如果与单独的组合的任一种活性剂的累积效果相比所述组合的治疗效果更优，则所述组合展示出治疗协同作用。

在另一个实施方案中，口服施用安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请还提供了用作药剂的包含安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐的组合。

本申请还提供了包含安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐以及至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

所述赋形剂选自本领域技术人员已知的惯用赋形剂。更具体地，所述赋形剂选自呈任何形式(液体溶液、分散液或悬浮液、片剂、胶囊等)的可用于口服施用的那些。

在另一个实施方案中，可以同时、分开或在一段时间内间隔(顺序施用)施用安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。因此，本申请提供的组合和药物组合物不仅限于通过单一单位剂量的成分的物理缔合获得的组合和药物组合物，而且还限于允许分开施用的那些，所述分开施用可以是同时的或在一段时间内顺序的(也称为“间隔的”或“分散的”)。

本申请还提供了药物试剂盒，所述药物试剂盒包含：

(i)第一药物组合物，所述第一药物组合物包含安森司群或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂；

(ii)第二药物组合物，所述第二药物组合物包含瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐和至少一种药学上可接受的赋形剂；

其中所述第一药物组合物和所述第二药物组合物在分开的区室中并且旨在独立地施用，每种相对于另一种的施用是同时的或在一段时间内间隔的(顺序的)。

在以上所述的组合、药物组合物和药物试剂盒中，安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐有利地以有效剂量存在，所述有效剂量考虑到所治疗的病理和它所施用的患者的情况而被适应性调整。具体地，对于瑞博西尼，根据KISQALI标签成人患者的推荐剂量是600mg(表示为瑞博西尼游离碱形式)，每天一次，口服服用。

本申请还提供了用于治疗癌症的包含安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐的组合以及如以上所述的药物组合物和试剂盒。

本申请还提供了用于通过与瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐共施用来治疗癌症的安森司群或其药学上可接受的盐。

本申请还提供了用于通过与安森司群或其药学上可接受的盐共施用来治疗癌症的瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请将共施用理解为向有需要的患者施用活性成分，所述施用是相对于每种活性成分分开的、同时的或在一段时间内间隔的(顺序的)。

在一些实施方案中，以治疗有效量施用安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。“治疗有效量”意指，当向患者施用以治疗疾病时，活性成分或活性成分组合的足以影响对于所述疾病的这样的治疗的量。“治疗有效量”将取决于疾病及其严重程度和待治疗的受试者的年龄、体重等而变化。

在一些实施方案中，以显示出治疗协同作用的量施用安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

在另一个实施方案中，所述癌症是激素依赖性癌症。

在另一个实施方案中，所述癌症是雌激素受体依赖性癌症，具体地，所述癌症是雌激素受体α依赖性癌症。

本申请还提供了治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的安森司群或其药学上可接受的盐和治疗有效量的瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请还提供了治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用如以上所述的药物组合物或药物试剂盒。

本申请还提供了治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用如以上所述的组合。

本申请还提供了治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的方法，所述方法包括向有需要的受试者共施用安森司群或其药学上可接受的盐和瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。在所述方法中，将安森司群或其药学上可接受的盐与瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐分开、同时或在一段时间内间隔施用。

本申请还提供了治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的方法，所述方法包括向有需要的受试者共施用瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐和安森司群或其药学上可接受的盐。在所述方法中，将瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐与安森司群或其药学上可接受盐分开、同时或在一段时间内间隔施用。

本申请还提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的安森司群或其药学上可接受的盐与治疗有效量的瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐的组合。

本申请还提供了治疗正在进行用化合物安森司群或其药学上可接受的盐的疗法的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请还提供了治疗正在进行用化合物安森司群或其药学上可接受的盐的稳定治疗的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请还提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的化合物瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐，其中所述患者也正在进行用安森司群或其药学上可接受的盐的疗法。

在以上所述的方法的一个实施方案中，所述受试者是哺乳动物。在另一个实施方案中，所述受试者是人。

本申请还提供了用于制造可用于治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的药剂的组合，所述组合包含安森司群或其药学上可接受盐和瑞博西尼、瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐。

本申请还提供了安森司群或其药学上可接受的盐在制造可用于通过与瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐共施用来治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的药剂中的用途。

本申请还提供了瑞博西尼或其药学上可接受的盐诸如瑞博西尼琥珀酸盐在制造可用于通过与安森司群或其药学上可接受盐共施用来治疗以上指示的病理病症、特别是乳腺癌的药剂中的用途。

本申请还提供了制品、包装或施用单元，所述制品、包装或施用单元包含：

-包装材料；

-以上所定义的组合、药物组合物或药物试剂盒；以及

-在所述包装材料内所含的标签或包装插页，指示向患者施用所述组合、药物组合物或药物试剂盒以治疗癌症。

以下实施例示出了用安森司群、瑞博西尼琥珀酸盐及其组合对抗小鼠的乳腺癌细胞系异种移植物获得的药理学结果。

安森司群与瑞博西尼的组合对抗雌性裸小鼠的皮下乳腺癌细胞系异种移植物的

在本发明研究中，在治疗22天后研究了安森司群与瑞博西尼琥珀酸盐(在下文的实验部分中，为简洁起见仅称为“瑞博西尼”)的组合对抗雌性裸小鼠的皮下MCF7-Y537S人乳腺癌细胞系异种移植物的抗肿瘤功效。

治疗组包括单独的20mg/kg的安森司群、单独的100mg/kg的瑞博西尼(基于瑞博西尼游离碱形式表示的重量)、以及以相同剂量和方案的安森司群和瑞博西尼的组合。

在22天中，口服给药安森司群每天两次(BID)，并且口服给药瑞博西尼每天一次(QD)。通过肿瘤体积测量来评价抗肿瘤功效。

1：

1-1：

雌性BALB/c裸小鼠获自Shanghai Sino-British SIPPR/BK Laboratory AnimalCo.,LTD(中国上海)。在研究入组前，允许使动物适应新环境至少四天。在治疗开始时，小鼠是6至8周龄，并且称重在18与24克之间。根据实验动物护理评估和认证协会(Associationfor Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care，AAALAC)的指导在由WuXi AppTec的机构动物护理和使用委员会(Institutional Animal Care and UseCommittee，IACUC)批准的指南中所概述的条件下饲养这些动物。

亲本MCF7细胞获自美国典型培养物保藏中心(American Type CultureCollection)(

当MCF7-Y537S肿瘤建立时，将肿瘤作为瘤株(tumor stock)保留用于片段植入。使肿瘤通过皮下片段组织移植连续繁殖。将片段肿瘤组织皮下植入到雌性裸小鼠的右侧腹中。在此实验中分配二十八只小鼠。

在水中的40％ SBE-β-CD(磺基丁基醚β-环糊精)(pH 3)中配制瑞博西尼(制造商：Sanofi；批号：VAC.DLE20.41.1；琥珀酸盐)。

用于口服施用的安森司群和瑞博西尼的剂量体积：10ml/kg。

剂量：在以上体积中，20mg/kg的安森司群和100mg/kg的瑞博西尼。

在本申请中瑞博西尼的浓度是基于其游离碱形式表示的。

1-2：

将实验所需的动物(加额外的动物)合并，并且为其植入MCF7-Y537S肿瘤片段组织。在第0天(植入后20天)，将小鼠合并，并且随机分配到治疗组和对照组(每组7只小鼠)，其中每组的中值肿瘤体积是173mm

将剂量以mg/kg表示，并且基于每只动物的每天的体重。将媒介物治疗的动物用作对照。每天检查小鼠的不良临床反应。每天对单只小鼠称重直至实验结束。当观察到病态或体重减轻≥20％时，将对小鼠实施安乐死。每周两次用卡尺测量肿瘤直至最终处死。当肿瘤尺寸达到大约2000mm

毒性终点：

对于单只小鼠在连续3天内产生15％体重减轻、在1天内产生20％体重减轻、或产生10％或更多的药物相关死亡的剂量被认为是过度毒性剂量，除非在某些情况下，体重减轻或动物死亡可以被认为是非药物相关的。例子包括动物处理问题(如强饲失误)、肿瘤模型相关问题(如可以在对照或媒介物治疗的组中观察到的导致体重减轻的肿瘤诱导的恶病质)和过度的肿瘤溃疡。具有非药物相关的死亡或显著体重减轻的小鼠不被认为是毒性的，并且被排除在统计学分析之外。动物体重包括肿瘤重量。

功效终点：

主要功效终点包括通过治疗组与对照组之间的肿瘤体积相对于基线的变化的中值比率(ΔT/ΔC)总结的肿瘤体积相对于基线的变化。通过从指定观察日的肿瘤体积中减去第一次治疗那天(筹划(staging)日)的肿瘤体积，计算每个治疗(T)组和对照(C)组在每天每只动物的肿瘤体积变化。计算治疗组的中值ΔT，并且计算对照组的中值ΔC。计算比率ΔT/ΔC，并且将其以百分比表示：

ΔT/ΔC≤40％被认为是有治疗活性的，ΔT/ΔC＝0％被认为是肿瘤停滞，并且ΔT/ΔC<0％被认为是肿瘤消退(非常有活性)。ΔT/ΔC>40％被认为是无治疗活性的。

将肿瘤消退百分比定义为与研究开始时的体积相比，在指定观察日在治疗组中肿瘤体积减小的％(百分比)。在特定的时间点(t)并且对于每只动物，使用以下公式计算消退百分比：

然后通过取针对组中每只动物计算的单个％消退值的中值来计算在给定日所述组的中值消退百分比。通过计算ΔT/ΔC时的那天确定计算日，除非中值消退百分比不代表所述组的活性。在这种情况下，通过中值消退百分比最大时的第一天确定计算日。

1-3：

对肿瘤体积相对于基线的变化进行用治疗和天数(重复)因素的双因素方差分析(ANOVA)。接下来是通过Bonferroni-Holm多重性校正的对比分析，以将所有的治疗组与对照组进行比较，以及从第0天至第22天在每天将所述组合与以所述组合中所涉及的剂量的每种单一药剂进行比较。

在附图中，表示出了每个测量日的每组的中值和中值绝对偏差(MAD)。

在表格中，报告了每个测量日的每组的中值和归一化MAD(nMAD＝1.4826*MAD)。

通过从指定观察日的肿瘤体积中减去第一次治疗那天(第0天)的肿瘤体积，计算每只动物和每天的肿瘤体积相对于基线的变化。

使用SAS 9.2版软件进行所有的统计学分析。概率小于5％(p<0.05)被认为是显著的。

2：

持续22天的20mg/kg BID的安森司群、100mg/kg QD的瑞博西尼、以及以所述剂量和方案的安森司群和瑞博西尼的组合是良好耐受的，并且在研究中未观察到显著的体重减轻。

剂量为20mg/kg BID持续22天的安森司群对肿瘤生长没有统计学上显著的抗肿瘤作用，其中第22天的ΔT/ΔC值为47％(p＝0.9411)。剂量为100mg/kg QD持续22天的瑞博西尼没有诱导统计学上显著的抗肿瘤功效，其中第22天的ΔT/ΔC值为40％(p＝0.9411)。当以与针对安森司群的BID和针对瑞博西尼的QD相同的给药方案将20mg/kg的安森司群与100mg/kg的瑞博西尼组合时，组合治疗展示出统计学上显著的抗肿瘤功效(肿瘤停滞)，其中第22天的ΔT/ΔC值为10％(p<0.0001)。统计学分析表明，在第22天，当与单独的安森司群或瑞博西尼相比时，所述组合的效果是显著不同的(p<0.0001或0.0012)。

详细的结果示于下表1至表3以及图1和图2中。

附图说明：

-图1：安森司群与瑞博西尼的组合对抗裸小鼠的皮下人乳腺癌细胞系MCF7-Y537S异种移植物的抗肿瘤活性：肿瘤体积演变。曲线代表每组在每天的中值+或-MAD(中值绝对偏差)。

-图2：安森司群与瑞博西尼的组合对抗裸小鼠的皮下人乳腺癌细胞系MCF7-Y537S异种移植物的抗肿瘤活性：在第22天肿瘤体积相对于基线的变化。点代表第22天单个肿瘤体积相对于基线的变化；条对应于中值。

从此实验中，我们得出以下结论：在裸小鼠的MCF7-Y537S人乳腺癌细胞系异种移植物模型中，20mg/kg每天两次的安森司群与100mg/kg每天一次的CDK4/6抑制剂瑞博西尼的组合诱导了显著的抗肿瘤功效，所述抗肿瘤功效优于单独的单一药剂，并且诱导了肿瘤生长抑制和肿瘤停滞。

表1：安森司群(SAR439859)与瑞博西尼的组合对抗裸小鼠的皮下MCF7-Y537S人乳腺癌异种移植物的功效。PO：口服

*统计学分析没有显示出显著差异性(p＝0.9411)

表2：安森司群(SAR439859)与瑞博西尼的组合对抗裸小鼠的皮下人乳腺癌细胞系MCF7-Y537S异种移植物模型的功效。在每天，每个组与对照组的比较。

表3：安森司群(SAR439859)与瑞博西尼的组合对抗裸小鼠的皮下人乳腺癌细胞系MCF7-Y537S异种移植物模型的功效。每天安森司群20mg/kg和瑞博西尼100mg/kg作为单一药剂与组合的比较。