蒽类化合物、其制备方法和医药用途

本发明涉及医药技术领域，具体具有抗肿瘤活性的类蒽类化合物、其药学上可接受的盐及其制备方法和用途。

随着分子生物学技术的发展和对发病机制从细胞、分子水平的进一步认识，以肿瘤发生发展信号通路中的关键酶为靶点，发现高效、低毒的抗癌药物已成为重要的研究方向。肿瘤的分子靶向治疗不同于传统的肿瘤治疗方法，它是建立在肿瘤分子生物学研究的基础上，对肿瘤生长的关键通路采用小分子化合物阻断其关键酶，从而达到阻断肿瘤细胞生长的作用。

CN102378574A公开了如式B所示的偶氮蒽衍生物及其调节胰高血糖素样肽-1受体的用途：

本申请发明人研究了此类蒽类化合物的降解过程，发现它们在适宜的酸性环境下容易降解，其降解产物通常更稳定。CN102378574A指出这些偶氮蒽衍生物具有调节胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体的作用。有必要进一步对这类化合物的降解产物进行活性研究，发现其潜在的医药用途。

发明内容

在一个方面，本发明提供如式A所示的蒽类化合物：

及其药学上可接受的盐，

其中：

X独立的选自氧、氢、氮；

R

R

L选自–(CH

Y

Y

R

在一些实施方案中，每个X独立地为氧。

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，L选自–(CH

在一些实施方案中，Y

在一些实施方案中，当每个X独立地为O，R

在一些实施方案中，Y

在一些实施方案中，Y

在一些实施方案中，R

本发明进一步提供如下式I所示的化合物：(2S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸，及其药学上可接受的盐：

本发明还提供制备如式I所示的化合物(2S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸的方法，该方法包括以下步骤：

a)将式II所示的化合物经水解生成式III的化合物，其具体反应如下：

以及

b)将化合物III反应制得式I的化合物，其具体反应如下：

在一些实施方案中，步骤a与b在相应的溶剂中反应；所述溶剂独立 地选自四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、二氧六环、丙酮、二氯甲烷、乙腈、甲醇或乙醇中的至少一种。

在一些实施方案中，步骤a中的式II的化合物与酸性试剂发生水解反应；所述酸性试剂选自三氟化硼、三氯化硼、三氯化铝或三氧化硫中的一种，优选三氯化硼。

在一些实施方案中，步骤b的反应是在碱水中进行的。

在一些实施方案中，步骤a所述的反应经过后处理步骤再投入下一步反应；所述后处理步骤选自稀释、过滤、pH调节、洗涤、萃取、浓缩、结晶、干燥中的一种或多种；所述后处理步骤可按需进行一次或多次。

在一些实施方案中，步骤a的后处理方式为：在制得式I的化合物后，经pH调节、分液、2-甲基四氢呋喃萃取、浓缩获得化合物I粗品。

本发明所述的药学上可接受的盐包括酸加成盐及碱盐。

本发明提供的化合物及其药学上可接受的盐可以是以手性形态存在的，即S构型或R构型。本发明提供的化合物及其药学上可接受的盐可以是以非手性形态存在的。本发明所表述的化合物，当以其中一种构型例举结构时，也表示公开了其另一种构型或非手性形式的结构。

可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如胺基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成胺基甲酸盐)。

本发明所述的化合物包括化合物的立体异构体。本发明所述的立体异构体是指当如式I所示的化合物存在不对称碳原子时，会产生对映异构体；当化合物存在碳碳双键或环状结构时，会产生顺反异构体；当化合物存在酮或肟时，会产生互变异构体；作为一种具体的实施方式，本发明所述的立体异构体包括但不限于：对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想 所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。

本发明所述的药学上可接受的盐可呈非溶剂化及溶剂化形式存在。

本发明提供的化合物及其药学上可接受的盐在治疗中可以单独使用或与至少一种其他治疗剂组合使用。

在另一方面，本发明提供药物组合物，其含有式A所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或两种以上其他治疗活性成分。

在另一方面，本发明提供药物制剂，其含有式A所示的化合物或其药学上可接受的盐，及一种或两种以上药用载体。所述药物制剂为临床上可接受的任一种制剂剂型。

本发明提供的化合物及其药学上可接受的盐可以组成固体剂型，如胶囊、片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、颗粒剂、粉末剂、软膏剂、乳膏剂、滴剂等；本发明提供的化合物及其药学上可接受的盐可以是液体剂型，如酏剂、糖浆剂、乳剂、分散剂、悬浮剂、溶液剂、喷雾剂等。

本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或药用稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂。

在另一方面，本发明还提供药物组合物，其含有(2S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的辅料、载体、赋形剂。

本发明式的I化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。

本发明式I的化合物或含有它的药物组合物的给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。

本发明式I的化合物或含有它的药物组合物可以制成普通制剂，也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

本发明人发现，式I的化合物具有抗肿瘤活性，能够抑制例如宫颈癌细胞的生长。

因此，在另一方面，本发明提供如式A所示的化合物及其药学上可接受的盐在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

在又一方面，本发明提供式I的化合物及其药学上可接受的盐用于制备抗肿瘤药物的应用。

在一些实施方案中，所述肿瘤是恶性肿瘤，包括但不限于乳腺癌、宫颈癌、直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤或神经胶母细胞瘤。

在又一方面，本发明还提供治疗疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给药治疗有效量的如式A、优选式I所示的化合物及其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述疾病是肿瘤，特别是恶性肿瘤，包括但不限于乳腺癌、宫颈癌、直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、卵巢癌、膀胱癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、腹膜肿瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤和神经胶母细胞瘤。

用于质量控制的方法

CN102378574A公开了偶氮蒽衍生物(S)-2-{[(3S,8S)-3-[4-(3,4-二氯-苄基氧基)-苯基]-7-((S)-1-苯基-丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-羰基]-氨基}-3-[4-(2,3-二甲基-吡啶-4-基)-苯基]-丙酸的游离碱(以下简称“OAD2”)，及其二盐酸盐(S)-2-{[(3S,8S)-3-[4-(3,4-二氯-苄基氧基)-苯基]-7-((S)-1-苯基-丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-羰基]-氨基}-3-[4-(2,3-二甲基-吡啶-4-基)-苯基]-丙酸·2HCl(以下简称“OAD2·2HCl”)。它们具有调节GLP-1受体的作用，具有治疗2-型糖尿病的潜力。OAD2和OAD2·2HCl的结构如下：

本发明的研究人员发现，在OAD2·2HCl制备过程中，由于成盐过程的酸性较强，以及干燥过程受温度影响，容易导致醚键断裂而产生上文所述的式I的化合物。在逐步放大过程中，研究人员发现随着批量增大，式I的化合物有增加的趋势，而在此前OAD2·2HCl的小试生产中并未出现这种趋势。所述式I的化合物可以作为参比化合物用于OAD2·2HCl以及含有OAD2·2HCl的药物组合物或制剂的质量控制。

在一个方面，本发明提供用于样品的质量控制的方法，其中所述样品是与本文所述的式A、式A1或式I的化合物相关的原料、包含所述原料的药物组合物或制剂，所述方法包括：以相应的式A、式A1或式I的化合物作为参比化合物，并测定所述参比化合物在所述样品中的水平。

在一些实施方案中，所述方法还任选地包括将所测定的参比化合物的水平与所述参比化合物在所述样品中的期望水平比较。

所述与式A、式A1或式I的化合物相关的原料意指这样的化合物，其能够通过降解形成所述式A、式A1或式I的化合物。

在一些实施方案中，所述参比化合物是所述式A的化合物。在一些实施方案中，所述参比化合物是所述式A1的化合物。在一些优选的实施方案中，所述参比化合物是所述式I的化合物。

在一些实施方案中，所述样品是与所述式I的化合物相关的原料，优选OAD2，优选OAD2·2HCl。在一些实施方案中，所述样品是包含OAD2或优选OAD2·2HCl的药物组合物或制剂。

在一些优选的实施方案中，本发明提供用于样品的质量控制的方法，所述样品是OAD2、OAD2·2HCl、或者含有OAD2或OAD2·2HCl的药物组合物或制剂，所述方法包括：以所述式I的化合物作为参比化合物，并测定所述样品中所述参比化合物的水平。在一些实施方案中，所述方法还任选地包括将所测定的所述参比化合物的水平与所述参比化合物在所述样品中的期望水平比较。在一些这样的实施方案中，以所述式I的化合物与 OAD2或优选OAD2·2HCl的总重量计，所述式I的化合物的期望水平是低于1.0％，例如低于0.9％，或低于0.8％，或低于0.7％，或低于0.6％，或低于0.5％，或低于0.4％，或低于0.3％，或低于0.2％，或低于0.1％，或低于0.09％，或低于0.08％，或低于0.07％，或低于0.06％，或低于0.05％，或低于0.04％，或低于0.03％，或低于0.02％，或低于0.01％。在另一些实施方案中，在含有OAD2或优选OAD2·2HCl的药物组合物或制剂中，以所述药物组合物或制剂的总重量计，所述式I的化合物的期望水平是低于1.0％，或低于0.9％，或低于0.8％，或低于0.7％，或低于0.6％，或低于0.5％，或低于0.4％，或低于0.3％，或低于0.2％，或优选低于0.1％，或低于0.09％，或低于0.08％，或低于0.07％，或低于0.06％，或低于0.05％，或低于0.04％，或低于0.03％，或低于0.02％，或低于0.01％。

用于测定参比化合物的水平的方法可以是本领域惯常使用的方法，例如高效液相色谱法(HPLC)。

定义

本发明所表述的化合物，是依据化学结构式命名的。如果表示同一化合物时化合物的命名与化学结构式不符，则以化学结构式为准。

本发明中，除有另外说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义。然而，为了更好地理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本发明所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员通常理解的含义不同时，以本发明所提供的术语的定义和解释为准。

除非另有说明，术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。

除非另有说明，术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。

除非另有说明，术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。

除非另有说明，“(+)”表示右旋，“(-)”表示左旋，“(±)”表示外消旋。

除非另有说明，用楔形实线键

可以通过手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)- 和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本公开的某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如胺基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成胺基甲酸盐)。

本文中的术语“药学上可接受的”是指针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

本文中的术语“药学上可接受的盐”是指本公开的化合物的盐，由本公开的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐等。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、碳酸氢根、磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。

本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱性基团的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。

本文中的术语“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但 不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。

本文中的术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。

本文中的术语“任选地被取代”意指“被取代”和“未被取代”两种情形。

本文中的术语“卤素”意指氟、氯、溴和碘。

本文中的术语“C

本文中的术语“C

图1：化合物I的MS图。

图2：化合物I的H-NMR图。

本发明的蒽类化合物可以用作参比化合物，用于与之相关的原料、包含所述原料的药物组合物或制剂的质量控制。令人惊讶的是，尽管它们的来源化合物具有调节GLP-1受体的活性并且因此可以用于治疗2型糖尿病，但是本发明的蒽类化合物具有非常不同的抗肿瘤活性，具有用作抗肿瘤药物的潜力。

以下将结合实施例或实验例更详细地解释本发明，本发明的实施例或实验例仅用于说明本发明的技术方案，并非限定本发明的实质和范围。

本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常为常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明来源的试剂，通常为通过商业途径可购得的常规试剂。

本发明所使用的式II化合物(S)-2-((3S,8S)-3-(4-((3,4-二氯苄基)氧基)苯 基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)丙酸甲酯可参照CN102378574A所述的方法制备。

实施例1：(2S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸的制备

步骤a：

在1000毫升反应瓶中加入30克(S)-2-((3S,8S)-3-(4-((3,4-二氯苄基)氧基)苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)丙酸甲酯(34.48mmol)和350毫升二氯甲烷，搅拌溶解，氮气保护，降温至0℃。缓慢加入150毫升1mol/L三氯化硼的二氯甲烷溶液，加入完成后保持0℃反应18小时。加入150毫升二氯甲烷和500毫升5％碳酸氢钠溶液，搅拌30分钟，分液。水相用250毫升二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，30℃下减压浓缩得到30克(S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((3S,8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸甲酯粗品，直接用于下一步反应。

步骤b：

在500毫升反应瓶中加入30克(S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((3S,8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸甲酯粗品和150毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌溶解。加入6克氢氧化钠的75毫升水溶液，室温搅拌反应18小时。终止反应后用1N稀盐酸调节pH＝3-4。分液，水相用100毫升*2的2-甲基四氢呋喃萃取，合并有机相，减压浓缩得到12克(2S)-3-(4-(2,3-二甲基吡啶-4-基)苯基)-2-((8S)-3-(4-羟基苯基)-7-((S)-1-苯基丙基)-2,3,6,7,8,9-六氢-[1,4]二噁英并[2,3-g]异喹啉-8-甲酰胺基)丙酸。

实施例2：式I化合物的检测

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的；NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位计；NMR的测定是用Bruker DMX-500核磁仪，测定溶剂为氘代吡啶，内标为四甲基硅烷(TMS)。MS的测定用BrukerEsquire 3000plus质谱仪。质谱(MS)：检测方法：Bruker Esquire 3000plus质谱仪；ESI源；正离子检测。

结果如下：

MS图谱：HRMS(ESI)C

1

实施例3：式I化合物的生物活性评价

测试仪器及试剂

MTT法考察式I化合物的抗肿瘤活性

称取MTT(sigma)0.5克，溶于100ml的磷酸盐缓冲液(PBS)中，用0.22μm滤膜过滤除去溶液里的细菌，放置于4℃避光保存即可，在配制和保存过程中，容器用铝箔纸包好，加入MTT溶液过程中尽量做到避光处理。

实验方法：

1.收集对数期的Hela细胞(来自ATCC)，调整细胞悬浮液浓度，将细胞接种于96孔平底板中，每孔加入100μl，使细胞密度约为1000-3000个/孔(边缘孔均用无菌PBS填充)，在5％CO

2.弃去原培养基，加入200μl已配制的含有不同浓度的式I化合物及空白对照的培养基(式I化合物的浓度梯度为2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L；所有培养基中均含千分之一的二甲基亚砜)，设3-4个复孔。

3.5％CO

4.弃去原培养基，每孔加入200μl不含化合物及二甲基亚砜的培养基和20μl已配制好的MTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT溶液)，继续孵育4小时后，终止培养。

5.小心吸去孔内培养液，每孔加入150μl二甲基亚砜，置于摇床上低速摇匀10分钟，使结晶物充分溶解，在酶标仪(BioTek,Synergy H1)上在OD490nm处测量各孔的吸光值。

实验分析：以药物的不同浓度及对细胞株的细胞活力(OD

实验结果：式I化合物对宫颈癌细胞株的半数抑制浓度(IC

实施例4：式I化合物作为OAD2·2HCl样品的参比化合物的检测

试药与试剂：乙腈(HPLC)、甲醇(HPLC)、三氟乙酸(HPLC)、纯化水

仪器与用具：电子分析天平、液相色谱仪、酰胺基十六烷基硅胶柱、量瓶、烧杯

色谱柱：酰胺基十六烷基硅胶柱(Supleco Ascentis Express RP-Amide，3.0*150mm，2.7um)

检测波长：280nm

流速：0.425ml/min

进样量：2μl

稀释剂：0.05％三氟乙酸水溶液-0.05％三氟乙酸乙腈溶液(40:60)

流动相A：0.05％三氟乙酸水溶液

流动相B：0.05％三氟乙酸乙腈溶液：0.05％三氟乙酸甲醇溶液＝1:2(V/V)

洗脱梯度如下：

测定法：

取适量OAD2·2HCl置于量瓶中，加稀释剂(0.05％三氟乙酸乙腈溶液：0.05％三氟乙酸水溶液＝60:40(V/V))溶解，稀释成约0.5mg/ml的溶液，摇匀。

取适量式I化合物置于量瓶中，加稀释剂(0.05％三氟乙酸乙腈溶液：0.05％三氟乙酸水溶液＝60:40(V/V))溶解，稀释成约0.5mg/ml的溶液，摇匀。

分别精密量取上述配制的溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果：

式I化合物的保留时间为3.567，OAD2·2HCl的保留时间为22.059，相对保留时间为：0.161。

除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。