用于治疗TDP-43蛋白病的组合物和方法

关于序列表的声明

与本申请相关的序列表以文本格式提供，代替纸质副本，并在特此以引用的方式并入本说明书。包含序列表的文本文件的名称是630264_403WO_SEQUENCE_LISTING.txt。该文本文件为243KB，创建于2022年4月5日，并通过EFS-Web以电子方式提交。

背景技术

神经退行性疾病肌萎缩性侧索硬化(ALS)和额颞叶痴呆(FTD)的标志性病理学特征是脑和脊髓中的神经元的细胞核中RNA结合蛋白TDP-43的耗竭。由TARDBP编码的TDP-43是一种丰富的、普遍表达的RNA结合蛋白，通常定位于细胞核。其在包括RNA转录、选择性剪接和RNA转运在内的基本RNA加工活动中发挥作用(1)。TDP-43可以结合成千上万的前信使RNA/mRNA靶标(2,3)。其他方面正常的成人神经系统的TDP-43的减少改变了超过1,500个RNA的剪接或表达水平，包括含长内含子的转录物(2)。TDP-43的主要剪接调节功能是在剪接期间阻止包含隐蔽外显子(4–7)。与正常的保守外显子不同，这些隐蔽外显子潜伏在内含子中，通常被排除在成熟mRNA之外。当细胞中的TDP-43被耗竭时，这些隐蔽外显子被拼接成信使RNA，通常引入读框移位和提前终止或甚至无义介导的mRNA衰减。然而，对疾病至关重要的隐蔽剪接事件仍有待鉴定。因此，需要受TDP-43调控且也在TDP-43蛋白病的发病机理中起作用的隐蔽剪接靶标作为治疗靶标的发现。

发明内容

在一个方面，本公开提供了一种减少细胞中的UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达的方法，其包括施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中：(a)UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子；并且(b)UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸。

在另一个方面，本公开提供了一种减少细胞中的磷酸化TAR-DNA结合蛋白-43(TDP-43)的方法，其包括施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中：(a)UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子；并且(b)UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸。

在另一个方面，本公开提供了一种治疗受试者的TAR-DNA结合蛋白-43(TDP-43)蛋白病的方法，其包括向受试者施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中：(a)UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子；并且(b)UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸。

在另一个方面，本公开提供了一种治疗已被鉴定为具有在内含子20-21中的UNC13A基因突变的受试者的方法，其包括向受试者施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中：(a)UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子；并且(b)UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸。

在实施方案中，隐蔽外显子包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的碱基序列。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸，其与以下序列互补：(a)具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端；或(b)具有SEQID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸，其与以下序列互补：(a)具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端；或(b)具有SEQID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括反义寡核苷酸，其与以下序列互补：(a)编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；(b)编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；(c)编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或(d)编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。

在实施方案中，编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成；或者编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域包SEQ ID NO:299含或由其组成。

在实施方案中，反义寡核苷酸具有15-40个碱基。在实施方案中，反义寡核苷酸具有20-30个碱基。在实施方案中，反义寡核苷酸具有18-25个碱基。在实施方案中，反义寡核苷酸具有18-22个碱基。

在实施方案中，反义寡核苷酸的碱基序列与SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640中的任一者具有至少80％、85％、90％或95％同一性。在实施方案中，反义寡核苷酸具有包含SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640中的任一者或由其组成的碱基序列。在实施方案中，反义寡核苷酸具有包含SEQ ID NO:423-432、439-443、491-498、502-507和513-514中的任一者或由其组成的碱基序列。

在实施方案中，反义寡核苷酸：(a)具有与SEQ ID NO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(b)具有与SEQ ID NO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(c)具有与SEQ ID NO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(d)具有与SEQ ID NO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；或者(e)具有与SEQ ID NO:654互补的18-21个碱基。

在实施方案中，反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括2’OMe反义寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基反义寡核苷酸、硫代磷酸酯反义寡核苷酸或LNA反义寡核苷酸。

本公开还提供了一种药物组合物，其包含反义寡核苷酸和药学上可接受的赋形剂，所述反义寡核苷酸具有15-40个碱基并且包含与SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640中的任一者具有至少80％同一性的碱基序列。

本公开还提供了一种药物组合物，其包含反义寡核苷酸和药学上可接受的赋形剂，所述反义寡核苷酸具有：(a)与SEQ ID NO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(b)与SEQ ID NO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(c)与SEQ ID NO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；(d)与SEQ ID NO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基；或(e)与SEQ ID NO:654互补的18-21个碱基。

在另一个方面，本公开提供了一种经修饰的反义寡核苷酸，其具有15-40个碱基并且包含与SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640中的任一者具有至少80％同一性的碱基序列。

在另一个方面，本公开提供了一种经修饰的反义寡核苷酸，其具有15-40个碱基，其中碱基序列与以下序列互补：(a)具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端；或(b)具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端。

本公开还提供了试剂盒，其包含本公开的UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸。

附图简要说明

图1A-1J.TDP-43的细胞核耗竭导致UNC13A RNA中包含隐蔽外显子，并降低UNC13A蛋白的表达。图1A：对从7名FTD/FTD-ALS患者的额叶皮质分离的TDP-43阳性和TDP-43阴性神经元细胞核产生的RNA测序结果进行剪接分析。FACS，荧光活化细胞分选。图1B：由MAJIQ(P(ΔΨ>0.1)>0.95)(ΔΨ，两种条件之间局部剪接变异的变化)和LeafCutter(P<0.05)鉴定的65个选择性剪接基因。图1C：UNC13A(hg38)中外显子20和外显子21之间的RNA测序比对的可视化。如(图1A)中所述产生文库。CE，隐蔽外显子。图1D：TDP-43的iCLIP表明TDP-43与内含子20-21结合。内含子20-21中经常被TDP-43结合的区域的实例。TDP-43结合基序(UG)n以橙色突出显示。图1E和图1H：RT-qPCR证实了在SH-SY5Y细胞(对于每种条件进行5次独立的细胞培养实验)(图1E)和3个独立的诱导运动神经元(iMN)(对于每种iMN进行4次独立的细胞培养实验)(图1H)中在TDP-43耗竭后UNC13A mRNA中包含隐蔽外显子。示出了跨越隐蔽外显子相关区域的引物的位置。使用RPLP0来使qRT-PCR归一化。(双侧Welch双样品t检验(two sided-Welch Two Sample t-test)，*P<0.05，**P<0.01，P<0.001，***P<0.0001；平均值±s.e.m.)。图1F和图1I：用混杂shRNA或TDP-43shRNA(n＝3)处理的SH-SY5Y细胞(图1F)和iMN(图1I)中UNC13A蛋白和TDP-43的免疫印迹。GAPDH用作加载对照。图1G：(图1F)中印迹的定量(双侧Welch双样品t检验，*P<0.05，**P<0.01)。图1J：RT-qPCR(n＝5)分析证实了在来源于人iPS细胞的神经元中在TDP-43耗竭后包含UNC13A隐蔽外显子(3个独立的细胞培养实验)。使用RPLP0和GAPDH来使qRT-PCR归一化(双侧Welch双样品t检验；***P<0.001，***P<0.0001；平均值±s.e.m.)。

图2A-2D.人TDP-43蛋白病中包含UNC13A隐蔽外显子。图2A：UNC13A隐蔽外显子表达水平在FTLD-TDP患者的额叶皮质中显著增加。顶部示出了用于隐蔽外显子检测的qRT-PCR引物对。GAPDH和RPLP0用于使qRT-PCR归一化(双侧Mann-Whitney检验，****P<0.0001；误差条表示95％的置信区间)。图2B：在NYGC ALS联合群组中神经病理学证实的FTLD-TDP患者的近50％额叶皮质组织和颞叶皮质组织中检测到UNC13A隐蔽外显子。在来自健康对照、FTLD-FUS、FTLD-TAU和ALS-SOD1患者的组织中，隐蔽外显子也明显缺失。图2C：UNC13A隐蔽外显子信号与梅奥诊所脑库(Mayo Clinic brain bank)中的FTLD-TDP患者额叶皮质的磷酸化TDP-43水平正相关(Spearman的ρ＝0.572，p值<0.0001)。数据点根据患者报告的基因突变进行着色。图2D：UNC13A隐蔽外显子信号和磷酸化TDP-43水平之间的Spearman相关性。以绿色着色的行表示每个基因突变组内的相关性。以蓝色着色的行显示每个疾病组内的相关性。

图3A-3B.UNC13A隐蔽剪接是人脑中与细胞核TDP-43缺失相关的病理特征。图3A：BaseScope

图4A-4J.当TDP-43为功能失调的时，与ALS/FTD易感性相关的风险单体型增强了隐蔽外显子包含。图4A：示出UNC13A中与ALS/FTD相关的SNP的LocusZoom图。选择最显著的GWAS命中(rs12608932)作为参考。其他SNP基于其与欧洲群体中rs12608932的连锁平衡水平进行着色。内含子20-21(黑色三角形)中的两个SNP(rs12608932和rs12973192)处于强连锁不平衡状态。图4B：在UNC13A剪接变体中，rs12973192处风险等位基因(G)的包含率较高(双侧配对t检验，**P＝0.0094)。简单线性回归模型(图4C)和多元回归模型(图4D)都示出了UNC13A隐蔽外显子的丰度和风险等位基因的数量之间的强相关性。残差的正态性通过Shapiro-Wilk正态性检验进行检验(p值＝0.2604)。图4D：使用rs12973192处的风险等位基因的数量、TDP-43磷酸化水平、性别、报告的基因突变作为预测变量的多元回归分析的汇总结果。以同一颜色着色的行表示同一变量内的因子。残差的正态性通过Shapiro-Wilk正态性检验进行检验(p值＝0.1751)。图4E：rs 56041637相对于两个已知GWAS命中和UNC13A隐蔽外显子的位置的图。图4F：UNC13A隐蔽外显子小基因报告基因构建体的设计和用于RT-PCR的引物对的位置。GFP和mCherry的转录由双向启动子(蓝色)控制。黑色三角形表示基因变体的位置，如(E)所示。图4G：在WT和TDP-43-/-HEK293T细胞中评估小基因的剪接。HEK293T细胞不内源性表达UNC13A。每个条带表示的PCR产物标记在每个凝胶的左侧。除了包含隐蔽外显子(b)以外，一些剪接变体还包含更长版本的隐蔽外显子(c)(图5)或隐蔽外显子上游的完整内含子(d)。携带风险等位基因的小基因显示典型剪接产物(a)几乎完全丧失且选择性剪接产物增加。图4H：在表达不同UNC13A小基因报告基因的HeLa细胞中，siRNA(和环己酰亚胺(CHX)处理)对TDP-43的耗竭导致包含隐蔽外显子，这可以通过过量表达TDP-43蛋白(GFP-TDP-43)而不是通过RNA结合缺陷型突变体TDP-43(GFP-TDP-43-5FL)来拯救。图4I：FTLD-TDP患者的存活曲线基于他们携带的风险单体型的数量(0、1或2)来分层。风险单体型为杂合和纯合的患者在疾病发作后的存活时间较短(n＝205，梅奥诊所脑库)(得分(对数秩)检验，p值＝0.01)。虚线表示每种基因型的中位存活率。使用对基因突变、性别和发病年龄进行调整的Cox多变量分析将风险单体型的影响建模为加性模型。底部示出了风险表。分析的汇总结果在图15A中。图4J：UNC13A蛋白表达水平如何在携带UNC13A风险单体型并表现出TDP-43病理学的患者中最显著降低的模型。

图5A-5D.使用MAJIQ的剪接分析证明在UNC13A的外显子20和外显子21之间包含隐蔽外显子。图5A和5B：TDP-43的耗竭在内含子20-21中引入两个选择性3'剪接受体：一个受体在chr19:17642591(ΔΨ＝0.05184)处，并且另一个受体在chr19:17642541(ΔΨ＝0.48865)处。图5C和5D：在chr19:17642414(ΔΨ＝0.772)处也引入选择性5'剪接供体。由于观察到chr19:17642541 3'剪接受体的高得多的使用率(图5B)，由该3'剪接受体和选择性5'剪接供体定义的128bp隐蔽外显子(图5C)成为焦点。图5A和5C是显示在UNC13A的外显子20和外显子21之间包含隐蔽外显子(CE)的拼接图。图5B和5D：是分别对应于图5A和5C的小提琴图。(图5B和5D)中的每个小提琴表示拼接图中颜色匹配接合处的预期相对包含(PSI或Ψ)的后验概率分布。每个小提琴的尾部表示第10百分位和第90百分位。方框表示四分位范围，中间的线表示中位数。白色圆圈表示预期的PSI(E[ψ])。两种条件之间每个接合处的相对包含水平的变化称为ΔΨ或ΔPSI(12)。

图6A-6D.UNC13A的内含子20-21在大多数灵长类动物中是保守的。UCSC(39)基因组浏览器(http://genome.ucsc.edu)上的灵长类动物多序列比对和保护跟踪包括20种哺乳动物，其中17种是灵长类动物。图6A：UNC13A的外显子20和外显子21在哺乳动物中非常保守。然而，内含子20-21(图6B)、隐蔽外显子(图6C)和隐蔽外显子上游的剪接受体位点(图6C)以及隐蔽外显子下游的剪接供体位点(图6D)仅在灵长类动物中是保守的。

图7A-7B.诱导运动神经元(iMN)中TDP-43的耗竭导致UNC13A中包含隐蔽外显子。图7A：RT-PCR证实了在三个独立的iMN中在TDP-43耗竭后含有隐蔽外显子的UNC13A mRNA亚型的表达(对于每种iMN和条件进行4次独立的细胞培养实验)。除了含有隐蔽外显子的剪接变体以外，还检测到包含更长版本的隐蔽外显子(图5A)和隐蔽外显子上游的完整内含子(图4G)。每个条带表示的PCR产物标记在每个凝胶的左侧。所用PCR引物对的位置示出在每个凝胶图像的顶部。图7B：跨越隐蔽外显子和外显子21接合处的PCR引物对证实隐蔽外显子包含仅在TDP-43敲低时出现。

图8.在梅奥诊所脑库的大多数FTLD-TDP患者的额叶皮质中，总UNC13A转录物没有显著变化。在没有报告基因突变的FTD患者和有GRN突变的FTD患者中观察到总UNC13A转录物的降低。这可能是由于目前尚不清楚的特定病理。顶部示出了用于检测的qRT-PCR引物对。使用GAPDH和RPLP0来使qRT-PCR归一化(双侧Mann-Whitney检验，ns：P>0.05；**P<0.01；****P<0.0001：误差条表示95％的置信区间)。

图9.在ALS/FTLD、ALS-TDP和ALS/AD患者的疾病相关组织中也可以检测到UNC13A隐蔽外显子。这些患者的诊断未得到神经病理学确认。因此，尚不清楚这些患者是否存在TDP-43错误定位。ALS患者基于他们是否携带SOD1突变(ALS-SOD1对比ALS-TDP)来进行分类。ALS-AD是指患有疑似阿尔茨海默病的ALS患者。ALS-FTLD是指同时患有FTD和ALS的患者。

图10A-10H.UNC13A隐蔽外显子信号和总UNC13A信号与梅奥诊所脑库中的FTLD-TDP患者额叶皮质的磷酸化TDP-43水平相关。图10A：UNC13A隐蔽外显子信号与梅奥诊所脑库中的FTLD-TDP患者额叶皮质的磷酸化TDP-43水平正相关(Spearman的ρ＝0.572，p值<0.0001)。数据点根据患者的疾病类型进行着色。图10B和10C：总UNC13A信号与相同样品中的磷酸化TDP-43水平负相关。数据点分别根据患者报告的基因突变(图10B)和疾病类型(图10C)进行着色。图10D：总UNC13A信号和磷酸化TDP-43水平之间的Spearman相关性。以绿色着色的行示出了每个基因突变组之间的相关性。以蓝色着色的行示出了每个疾病组内的相关性。图10E-10H：使用未转换数据作为输入的散点图。图10E-10F：隐蔽外显子信号对比磷酸化TDP-43水平。图10G-10H：总UNC13A信号对比磷酸化TDP-42水平。qRT-PCR引物对示出在每个图的顶部。

图11A-11E.UNC13A隐蔽剪接与人脑中细胞核TDP-43的丧失相关。图11A：靶向选择性剪接的UNC13A转录物的UNC13A e20/CE BaseScope

图12A-12C.rs12973192处的基因型影响隐蔽外显子包含的水平。图12A：UNC13A的外显子20和外显子21之间的RNA-seq比对的可视化。RNA-seq文库由TDP-43阴性神经元细胞核产生，如图1A所述。图12B：除SRR8571945以外，在rs12973192处杂合(C/G)或纯合(G/G)的样品具有隐蔽外显子的较高相对包含率(ψ)。图12C：TDP-43耗竭的iMN和SRR8571950神经元细胞核中UNC13A剪接变体中C和G等位基因的百分比。对每个重复进行精确的二项式检验，以检验观察到的百分比差异是否不同于在两个等位基因同等地包含在隐蔽外显子中时所预期的差异。

图13A-13F.UNC13A隐蔽外显子的丰度与风险等位基因的数量相关。使用未转化数据的简单线性回归模型(图13A)和多元回归模型(图13B)示出了UNC13A隐蔽外显子的丰度和风险等位基因的数量之间的强相关性。图13B：使用风险等位基因数、TDP-43磷酸化水平、性别、报告的基因突变作为预测变量的多元回归分析的汇总结果。以同一颜色着色的行表示同一变量内的因子。图13C和13E：简单线性回归模型和图13D和13F：多元回归模型(使用转化的数据(图13A和13D)和未转化的数据(13E和13F))显示总UNC13A mRNA转录物的丰度与患者携带者中rs12971392处的风险等位基因的数量不显著相关。这可能是来自不受TDP-43病理学影响的神经元的UNC13A表达的结果，如图3B和图11D中所示。残差的正态性通过Shapiro-Wilk正态性检验进行测试，并且结果示出在每个图的底部。每个图的顶部示出了用于检测的qPCR引物对。

图14.rs56041637和rs62121687与UNC13A的内含子20-21中的两个GWAS命中处于强连锁不平衡状态。使用在来自297名欧洲血统的ALS患者的全基因组测序数据中鉴定的基因变体(2020年7月，Answer ALS)，我们在内含子20-21中寻找在之前的GWAS中没有出现的其他基因变体。沿着热点图的轴是297名患者中显示变异的所有位点。每个图块表示卡方检验中Bonferroni调整的p值。小于0.05的p值显示为黄色，其他显示为蓝色或灰色。蓝色和红色区块分别突出了rs 12608932和rs12973192与内含子20-21中其他基因变体的关联性。两者共有的重要关联性用黑色圈出。发现另外两个SNP rs56041637(与rs12608932的Bonferroni调整的p值<0.0001，与rs12973192的Bonferroni调整的p值<0.0001)和rs62121687(与rs12608932的Bonferroni调整的p值<0.0001，与rs12973192的Bonferroni调整的p值<0.0001)与两者在LD中。然而，由于rs62121687包含在GWAS中并且其p值为0.0186585(36)，因此将其排除在进一步分析之外。

图15A-15E.UNC13A风险单体型减少FTLD-TDP患者的存活时间。图15A：加性模型的Cox多变量分析(针对基因突变、性别和发病年龄进行调整)的汇总结果。图15B和15D：根据显性模型(图15B)和隐性模型(图15C)以及它们相应的风险表，FTLD-TDP患者(n＝205，梅奥诊所脑库)的存活曲线。显性模型(图15C)和隐性模型(图15D)的Cox多变量分析(针对基因突变、性别和发病年龄进行调整)的汇总结果。显性模型(图15B和15C)和隐性模型(图15D和15E)都显示风险单体型的存在会降低FTLD-TDP患者的存活率。虚线表示每种基因型的中位存活率。使用计分检验计算对数秩p值。以绿色着色的行表示一个变量内的因子。

图16A-16F.在C9ORF72六核苷酸重复扩增携带者和GRN突变携带者中，UNC13A风险单体型对存活率的影响更显著。图16A、16C和16E：根据加性模型(图16A)、显性模型(图16C)和隐性模型(图16E)以及其相应风险表，携带C9ORF72或GRN突变的FTLD-TDP患者的存活曲线(n＝80，梅奥诊所脑库)。加性模型(图16B)、显性模型(图16D)和隐性模型(图16F)的Cox多变量分析(针对基因突变、性别和发病年龄进行调整)的汇总结果。当我们仅包括具有与TDP-43病理学相关的突变的FTLD-ALS患者时，加性模型(图16A和16B)和显性模型(图16C和16D)都表明风险单体型对存活时间的影响变得更显著。虽然两组的存活分布没有显著差异(对数秩p值＝0.3)，但风险单体型的数量仍然是强有力的预后因素(p值＝0.03800)。虚线表示每种基因型的中位存活率。使用计分检验计算对数秩p值。

图17示出了UNC13A基因组区域，其包含外显子20、隐蔽外显子#1(128bp)和外显子21。

图18示出了参考转录物的STMN2外显子结构和含有隐蔽外显子2a(顶部)和外显子2a序列(底部)的剪接变体。

图19A-19D示出用UNC13A特异性2’MOE反义寡核苷酸处理后运动神经元中的UNC13A mRNA水平，如通过qPCR测量的。图19A-19B示出使用对UNC13A隐蔽外显子包含具有特异性的引物/探针的qPCR结果。图19C-19D示出了使用对参考UNC13A具有特异性的引物/探针的qPCR结果。

具体实施方式

在更详细地阐述本公开之前，提供本文使用的某些术语的定义可能有助于理解本公开。在本公开中阐述了另外的定义。

在本说明书中，任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围都应理解为包括所述范围内的任何整数的值，并且当合适时，包括其分数(例如整数的十分之一和百分之一)或子范围，除非另有说明。

除非另有说明，否则如本文所用，术语“约”是指所示范围、数值或结构的±20％。

应该理解，如本文所用，术语“一个/种(a/an)”是指“一个/种或多个/种”列举的组件。替代词(例如“或”)的使用应理解为表示替代物中的一种、两种或其任何组合。

如本文所用，术语“包括”、“具有”和“包含”是同义使用的，这些术语及其变型旨在被解释为非限制性的。

“任选的”或“任选地”是指随后描述的元素、组分、事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括该元素、组分、事件或情况发生的情况和它们不发生的情况。

如本文所用，“核酸”或“核酸分子”或“多核苷酸”是指任何脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、寡核苷酸、例如通过聚合酶链式反应(PCR)或通过体外翻译产生的分子以及通过连接、断裂、核酸内切酶作用、核酸外切酶作用或机械作用(例如剪切)中的任何一种产生的分子。核酸可以由多种单体组成，这些单体是天然存在的核苷酸(诸如脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸)、天然存在的核苷酸的类似物(例如天然存在的核苷酸的α-对映体形式)或两者的组合。经修饰的核苷酸可以具有糖部分或嘧啶或嘌呤碱基部分的修饰或置换(例如，吗啉代核苷酸)。多核苷酸的核酸单体可以通过磷酸二酯键或此类键的类似物连接。磷酸二酯键的类似物包括硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酯、硫代苯胺磷酸酯(hosphoroanilothioate)、苯胺磷酸酯(phosphoranilidate)、磷酰胺(phosphoramidate)等。核酸分子可以是单链或双链的。

如本文所用，如本文所用的“蛋白质”或“多肽”是指由通过肽键共价连接的氨基酸残基组成的化合物。术语“蛋白质”可以与术语“多肽”同义，或者还可以指两个或更多个多肽的复合物。在某些实施方案中，多肽可以是片段。如本文所用,“片段”是指缺少一个或多个在参考序列中发现的氨基酸的多肽。片段可以包含在参考序列中发现的结合结构域、抗原或表位。参考5多肽的片段可以具有参考序列的氨基酸序列的至少约20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多的氨基酸。

术语“分离的”意指材料、复合物、化合物或分子从其原始环境(例如，如果它是天然存在的，则是自然环境)中移出。例如，存在于活体动物中的天然存在的多核苷酸或多肽不是分离的，但从天然系统中一些或所有共存材料分离的相同多核苷酸或多肽是分离的。此类核酸可以是载体的一部分和/或此类核酸或多肽可以是组合物(例如细胞裂解物)的一部分，并且仍然是分离的，因为此类载体或组合物不是核酸或多肽的天然环境的一部分。术语“基因”是指参与产生多肽链的DNA片段；它包括编码区“前导和尾部”之前和之后的区域以及如果存在的话在各个编码片段(外显子)之间的插入序列(内含子)。

如本文所用，术语“重组的”或“基因工程化的”是指已经通过人为干预进行基因修饰的细胞、微生物、核酸分子、多肽或载体。例如，重组多核苷酸通过人或机器引入外源或异源核酸分子来修饰，或是指已经通过人或机器干预而改变，使得内源核酸分子或基因的表达被控制、去调节或为组成型的细胞或微生物。人产生的基因改变可包括例如引入编码一种或多种蛋白质或酶的核酸分子(可包括表达控制元件，诸如启动子)的修饰，或其他核酸分子的添加、缺失、取代，或对细胞遗传物质或编码产物的其他功能破坏或添加。示例性人或机器引入的修饰包括来自参考或亲本分子的异源或同源多肽的编码区或其功能片段中的修饰。

“野生型”基因或基因产物是在群体中最常观察到的，因此被任意设计为基因的“正常”或“参考”或“野生型”形式。

如本文所用，“突变”分别是指与参考或野生型核酸分子或多肽分子相比，核酸分子或多肽分子的序列变化。突变可导致几种不同类型的序列变化，包括核苷酸或氨基酸的取代、插入或缺失。

“保守取代”是指不显著影响或改变特定蛋白质的结合特性的氨基酸取代。通常，保守取代是指如下取代，其中取代的氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基替换。保守取代包括在以下组之一中发现的取代：第1组：丙氨酸(Ala或A)、甘氨酸(Gly或G)、丝氨酸(Ser或S)、苏氨酸(Thr或T)；第2组：天冬氨酸(Asp或D)、谷氨酸(Glu或Z)；第3组：天冬酰胺(Asn或N)、谷氨酰胺(Gln或Q)；第4组：精氨酸(Arg或R)、赖氨酸(Lys或K)、组氨酸(His或H)；第5组：异亮氨酸(Ile或I)、亮氨酸(Leu或L)、甲硫氨酸(Met或M)、缬氨酸(Val或V)；第6组：苯丙氨酸(Phe或F)、酪氨酸(Tyr或Y)、色氨酸(Trp或W)。另外地或替代地，氨基酸可以通过相似的功能、化学结构或组成(例如酸性、碱性、脂族、芳族或含硫)被分组为保守取代组。例如，为了取代的目的，脂族分组可以包括Gly、Ala、Val、Leu和Ile。其他保守取代组包括：含硫：Met和半胱氨酸(Cys或C)；酸性：Asp、Glu、Asn和Gln；小的脂族、非极性或弱极性残基：Ala、Ser、Thr、Pro和Gly；极性、带负电荷的残基及其酰胺：Asp、Asn、Glu和Gln；极性、带正电荷的残基：His、Arg和Lys；大的脂族非极性残基：Met、Leu、Ile、Val和Cys；以及大的芳族残基：Phe、Tyr和Trp。其他信息可以在Creighton(1984)Proteins,W.H.Freeman and Company中找到。

如本文所用，术语“表达”是指基于核酸分子(诸如基因)的编码序列而产生多肽的过程。该过程可以包括转录、转录后控制、转录后修饰、翻译、翻译后控制、翻译后修饰或其任何组合。

如本文所用，“序列同一性”是指在比对序列并引入缺口(如果必要的话)以获得最大百分比的序列同一性之后，一个序列中与另一个参考多核苷酸(多肽)序列中的核苷酸(氨基酸残基)相同的核苷酸(氨基酸残基)的百分比，并且不将任何保守取代视为序列同一性的一部分。可以使用Altschul等人.(1997)"Gapped BLAST and PSI-BLAST:anewgeneration of protein database search programs",Nucleic Acids Res.25:3389-3402定义的NCBI BLAST2.0软件来生成序列同一性百分比值，其中参数设置为默认值。

如本文所用，“UNC13A”是指在中枢和神经肌肉突触中发现的调节神经递质、肽和激素释放的突触前蛋白质。UNC13A参考或野生型mRNA转录物含有编码1,703个氨基酸的蛋白质的44个外显子。在实施方案中，NCBI参考序列NP_001073890.2(SEQ ID NO:11)是野生型或参考UNC13A蛋白的实例。在实施方案中，NCBI参考序列NM_001080421.3(SEQ ID NO:1)是野生型或参考UNC13A mRNA转录物的实例。在实施方案中，UNC13A包括所有形式的UNC13A，包括野生型、剪接同种型、变体、突变体、天然构象、错误折叠和翻译后修饰形式。在实施方案中，UNC13A不包括UNC13A隐蔽外显子剪接变体。

如本文所用，术语“预加工的mRNA”或“前mRNA”或“前体mRNA”是指从DNA模板转录合成并且没有经过加工(例如剪接、添加5'帽和添加3'polyA尾)以变成成熟mRNA的初级转录物。成熟mRNA能够被核糖体翻译成蛋白质。

如本文所用，术语“隐蔽外显子”或“假外显子”是指野生型前mRNA中不存在或检测不到使用，但在变体同种型中选择的外显子，隐蔽外显子可能由于产生新的剪接位点或去除剪接阻遏物的现有结合位点的突变而产生。隐蔽外显子也可以从转座元件(例如Alu元件)中出现。

如本文所用，“UNC13A隐蔽外显子剪接变体”是指mRNA或由所述mRNA编码的蛋白质，其包含外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子。隐蔽外显子从UNC13A基因的内含子20-21获得。在实施方案中，隐蔽外显子具有SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的核苷酸序列。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体可具有编码SEQ ID NO:8的蛋白质序列的SEQ ID NO:7的核苷酸序列，或编码SEQ ID NO:10的蛋白质序列的SEQ ID NO:9的核苷酸序列。

如本文所用，“反式活化反应元件DNA结合蛋白43”或“TAR-DNA结合蛋白-43”或“TDP-43”是指由TARDBP编码的通常414个氨基酸残基的蛋白质。在实施方案中，野生型TDP43氨基酸序列由Uniprot登录号Q13148(SEQ ID NO:378)提供。在实施方案中，TDP43包括所有形式的TDP-43，包括野生型、剪接同种型、变体、突变体、天然构象、错误折叠和翻译后修饰(例如，泛素化、磷酸化、乙酰化、类泛素化(sumoylated)或切割成C末端片段)的蛋白质。

如本文所用，“TAR-DNA结合蛋白-43蛋白病”或“TDP-43蛋白病”是指一种神经退行性疾病，其特征在于受试者的脑和/或脊髓中TDP-43阳性蛋白包含物的沉积。过度磷酸化、泛素化、切割形式的TDP-43的细胞质包含是疾病的病理特征，所述疾病包括但不限于肌萎缩性侧索硬化(ALS)、额颞叶变性(FTLD)、原发性侧索硬化(PLS)、进行性肌萎缩(PMA)、面部发作感觉和运动神经元病(FOSMN)、海马硬化(HS)、边缘系统为主的年龄相关性TDP-43脑病(LATE)、脑年龄相关性TDP-43伴硬化(CARTS)、关岛帕金森-痴呆综合征(Guam Parkinson-dementia complex，G-PDC)、Guan ALS(G-ALS)、多系统蛋白病(MSP)、佩里病(Perrydisease)、阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)和慢性创伤性脑病(CTE)。

术语“互补的”和“互补性”是指由碱基配对规则相关的多核苷酸(即，核苷酸序列)。例如，序列“A-G-T”与序列“T-C-A”是互补的。互补性可以是“部分的”，其中仅一些核酸的碱基根据碱基配对规则匹配，或者核酸之间可以存在“完全的”或“全部的”互补性。核酸链之间的互补程度对核酸链之间杂交的效率和强度具有显著影响。尽管通常需要完美互补性，但是一些实施方案可以包括一个或多个但优选6、5、4、3、2或1个相对于靶核酸(例如RNA)的错配。包括寡聚物内任何位置处的变化。在某些实施方案中，寡聚物末端附近的序列变化通常比内部变化更优选，并且如果存在的话，通常在5'和/或3'末端的约6、5、4、3、2或1个核苷酸内。

术语“反义寡聚物”或“反义化合物”或“反义寡核苷酸”或“寡核苷酸”可互换使用，并且是指由DNA、RNA或两者构成的短单链多核苷酸(例如10-50个亚基)，其通过沃森-克里克碱基配对与核酸(通常是RNA)中的靶序列杂交，以在靶序列内形成核酸:寡聚物异源双链体。反义寡核苷酸可包含未修饰的核苷酸或可含有经修饰的核苷酸、非天然核苷酸或类似物核苷酸，诸如吗啉代、硫代磷酸酯、肽核酸、LNA、2'-O-Me RNA、2'F-RNA、2'-O-MOE-RNA、2'F-ANA或其任何组合。

这种反义寡聚物可被设计成阻断或抑制mRNA的翻译或抑制天然的前mRNA剪接加工，或诱导靶向mRNA的降解，并且可以被认为是“针对”或“靶向”与其杂交的靶序列。在实施方案中，靶序列是围绕或包括mRNA的AUG起始密码子、预加工mRNA的3'或5'剪接位点或分支点的区域。靶序列可以是在外显子内或内含子内或其组合内。剪接位点的靶序列可以包括在预加工mRNA中正常剪接受体接合处下游1至约25个碱基对处具有5'端的mRNA序列。剪接位点的示例性靶序列是包括剪接位点或完全包含在外显子编码序列内或跨越剪接受体或供体位点的预加工mRNA的任何区域。当寡聚物以上述方式靶向靶标的核酸时，所述寡聚物更一般地被称为是“靶向”生物学相关靶标，诸如在本公开中，编码UNC13A蛋白的人UNC13A基因前mRNA。示例性靶向序列包括表2-5中列出的那些。

术语“寡核苷酸类似物”是指具有以下的寡核苷酸：(i)经修饰的主链结构，例如除了天然寡核苷酸和多核苷酸中发现的标准磷酸二酯键以外的主链，和(ii)任选地经修饰的糖部分，例如除了核糖或脱氧核糖部分以外的吗啉代部分。寡核苷酸类似物支持能够通过沃森-克里克碱基配对与标准多核苷酸碱基形成氢键的碱基，其中类似物主链以允许在寡核苷酸类似物分子和标准多核苷酸中的碱基(例如，单链RNA或单链DNA)之间以序列特异性方式形成氢键的方式呈现碱基。示例性类似物是具有基本上不带电的含磷主链的类似物。

寡核苷酸的“亚基”是指包含嘌呤或嘧啶碱基配对部分的一个核苷酸(或核苷酸类似物)单位。该术语可以是指具有或不具有连接的亚基间键的核苷酸单位，尽管当提及“带电荷的亚基”时，电荷通常位于亚基间键内(例如，磷酸或硫代磷酸键或阳离子键)。

嘌呤或嘧啶碱基配对部分，在本文中也简称为“核碱基”、“碱基(base)”或“碱基(bases)”，可以是腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶或肌苷。还包括碱基，诸如吡啶-4-酮、吡啶-2-酮、苯基、假尿嘧啶、2,4,6-三115甲氧基苯、3-甲基尿嘧啶、二氢尿苷、萘基、氨基苯基、5-烷基胞苷(例如5-甲基胞苷)、5-烷基尿苷(例如胸苷)、5-卤尿苷(例如5-溴尿苷)或6-氮杂嘧啶或6-烷基嘧啶(例如6-甲基尿苷)、丙炔、辫苷(quesosine)、2-硫代尿苷、4-硫代尿苷、怀丁苷、怀丁氧苷(wybutoxosine)、4-乙酰基胞苷(acetyltidine)、5-(羰基羟基甲基)尿苷、5′-羧基甲基氨基甲基-2-硫代尿苷、5-羰基甲基氨基甲基尿苷、β-D-半乳糖基辫苷、1-甲基腺苷、1-甲基肌苷、2,2-二甲基鸟苷、3-甲基胞苷、2-甲基腺苷、2-甲基鸟苷、N6-甲基腺苷、7-甲基鸟苷、5-甲氧基氨基甲基-2-硫代尿苷、5-甲基氨基甲基尿苷、5-甲基羰基乙基尿苷、5-甲基氧基尿苷、5-甲基-2-硫代尿苷、2-甲基硫代-N6-异戊烯基腺苷、β-D-甘露糖基辫苷、尿苷-5-氧基乙酸、2-硫代胞苷、苏氨酸衍生物和其他碱基(Burgin等人,1996,Biochemistry,35:14090；Uhlman和Peyman,同上)。在这方面,“经修饰的碱基”意指除腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)和尿嘧啶(U)以外的核苷酸碱基，如上所述；此类碱基可以用于反义分子的任何位置。本领域技术人员将理解，根据寡聚物的用途，Ts和Us是可互换的。例如，对于其他反义化学物质，诸如更像RNA的2’-O-甲基反义寡核苷酸，T碱基可以显示为U。

术语“靶向序列”是寡聚物或寡聚物类似物中与RNA基因组中的“靶序列”互补(此外，意味着基本上互补)的序列。反义寡聚物的整个序列或仅一部分可以与靶序列互补。例如，在具有20-30个碱基的寡聚物中，约6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28或29个碱基可以是与靶区域互补的靶向序列。通常，靶向序列由寡聚物中的连续碱基形成，但是也可以由不连续序列形成，所述不连续序列当放置在一起时，例如从寡聚物的反向端，构成跨越靶序列的序列。

“靶向序列”可以与靶序列“接近”或“基本上”互补，并且仍对本公开的目的起作用，即，仍是“互补的”。优选地，本公开中使用的寡聚物类似物化合物与靶序列在10个核苷酸中最多具有一个错配，优选地在20个核苷酸中最多具有一个错配。或者，所用的反义寡聚物与如本文指定的示例性靶向序列具有至少90％序列同一性，优选至少95％序列同一性。

“氨基酸亚基”或“氨基酸残基”可以是指α-氨基酸残基(-CO-CHR-NH-)或β-氨基酸残基或其他氨基酸残基(例如，–CO-(CH

术语“天然存在的氨基酸”是指存在于自然界中发现的蛋白质中的氨基酸，例如在蛋白质生物合成期间利用的20(L)-氨基酸以及其他氨基酸，例如4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链素、异锁链素、高半胱氨酸、瓜氨酸和鸟氨酸。术语“非天然氨基酸”是指不存在于自然界中发现的蛋白质中的氨基酸，实例包括β-丙氨酸(β-Ala)、6-氨基己酸(Ahx)和6-氨基戊酸。“非天然氨基酸”的其他实例包括但不限于(D)-氨基酸、正亮氨酸、正缬氨酸、对氟苯丙氨酸、乙硫氨酸等，它们是本领域技术人员已知的。

术语“靶序列”是指寡核苷酸或反义试剂所针对的靶RNA的一部分，即寡核苷酸将通过互补序列的沃森-克里克碱基配对与之杂交的序列。在实施方案中，靶序列可以是包括内含子和外显子靶序列的前mRNA的连续区域。在实施方案中，靶序列将仅由内含子或外显子序列组成。

当杂交以反平行构型发生时，靶序列和靶向序列被描述为彼此“互补”。靶向序列可以与靶序列“接近”或“基本上”互补，并且仍对本公开的目的起作用，即它仍可以是功能上“互补的”。在某些实施方案中，寡核苷酸可以与靶序列在10个核苷酸中最多具有一个错配，优选在20个核苷酸中最多具有一个错配。或者，寡核苷酸可以与本文所述的示例性反义靶向序列具有至少90％序列同一性，优选至少95％序列同一性。

如果寡核苷酸在生理条件下与靶标“特异性杂交”，则所述寡聚物与靶多核苷酸“特异性杂交”，其中Tm基本上大于45℃，优选地至少50℃，并且通常为60℃-80℃或更高。这种杂交优选对应于严格杂交条件。在给定的离子强度和pH下，Tm是50％靶序列与互补多核苷酸杂交的温度。同样，这种杂交可以在反义寡聚物与靶序列“接近”或“基本”互补的情况下发生，也可以在精确互补的情况下发生。

“核酸酶抗性”寡聚分子(寡聚物)是指以下分子，其主链以非杂交或杂交形式基本上抵抗核酸酶切割；通过体内常见的细胞外和细胞内核酸酶；也就是说，在正常核酸酶条件下，寡聚物在寡聚物暴露的体内几乎没有显示出核酸酶切割。

“有效量”或“治疗有效量”是指以单剂量或一系列剂量的一部分的形式向哺乳动物受试者施用的治疗剂(诸如UNC13A隐蔽剪接变体抑制剂)的量，其可有效产生所需的治疗效果。对于反义寡核苷酸，这种效果通常是通过抑制所选靶序列的翻译或天然剪接加工而产生的。靶向UNC13A隐蔽外显子剪接变体mRNA的“有效量”也涉及有效调节UNC13A隐蔽外显子剪接变体蛋白的表达的量。

术语“抑制”或“抑制剂”是指相对于(1)对照、内源或参考靶标或途径，或(2)靶标或途径的缺乏，直接或间接改变、干扰、减少、下调、阻断、抑制、消除或降解靶基因、靶蛋白或信号传导途径的表达、量或活性，其中所述改变、干扰、减少、下调、阻断、抑制、消除或降解在统计学、生物学或临床上是显著的。术语“抑制”或“抑制剂”包括例如通过染色体编辑实现的基因“敲除”和基因“敲低”方法。

例如,“UNC13A隐蔽外显子剪接变体抑制剂”可以与未处理UNC13A隐蔽外显子剪接变体相比通过降低UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达或促进其降解来阻断、灭活、降低或最小化UNC13A隐蔽外显子剪接变体活性或降低活性约20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多。

对个体或细胞的“治疗”是作为改变个体或细胞中疾病或病理的自然进程的手段而提供的任何类型的干预。治疗包括但不限于施用例如药物组合物，并且可以预防性地进行，或者在病理事件开始或与病原体接触后进行。治疗包括对与炎症相关的疾病或疾患的症状或病理学的任何期望效果，以及本文所述的其他效果。

还包括“预防性”治疗，其可涉及降低所治疗的疾病或疾患的进展速度，延迟该疾病或疾患的发作，或降低其发作的严重性。“治疗”或“预防”不一定表示疾病或疾患或其相关症状的完全根除、治愈或预防。

以下部分提供了其他定义。

UNC13A隐蔽外显子剪接变体

在一方面，本公开提供了新型UNC13A隐蔽剪接变体，其包含外显子20和21之间的隐蔽外显子。这些隐蔽外显子不存在于神经元细胞核的野生型UNC13A中，也不存在于任何已知的UNC13A同种型中。隐蔽外显子从UNC13A基因(SEQ ID NO:4)的内含子20-21获得。TDP-43的耗竭在内含子20-21中引入两个选择性3'剪接受体，一个受体在chr19:17642591(ΔΨ＝0.05184)处，并且另一个受体在chr19:17642541(ΔΨ＝0.48865)处。在chr19:17642414(ΔΨ＝0.772)处也引入一个选择性5'剪接供体。比chr19:17642591 3'剪接受体更频繁用的chr19:17642541 3'剪接受体以及选择性5'剪接供体产生具有如SEQ ID NO:5中所示的核苷酸序列的128bp隐蔽外显子(“隐蔽外显子#1”)。UNC13A隐蔽外显子#1变体包含如SEQ ID NO:7中所示的核苷酸序列，其编码包含如SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的蛋白质。chr19:17642591 3'剪接受体和选择性5'剪接供体产生具有如SEQ IDNo:6中所示的核苷酸序列的179bp隐蔽外显子(“隐蔽外显子#2”)。UNC13A隐蔽外显子#2变体包含如SEQID NO:9中所示的核苷酸序列，其编码包含如SEQ ID NO:10中所示的氨基酸序列的蛋白质。

与正常对照组相比，在额颞叶变性伴TDP-43包含(FTLD-TDP)患者的额叶皮质中，UNC13A隐蔽外显子#1剪接变体的表达水平显著增加。在ALS患者的疾病相关组织中也检测到UNC13A隐蔽外显子#1剪接变体。在实施方案中，UNC13A隐蔽剪接变体#1或UNC13A隐蔽剪接变体#2的表达可用作鉴定患有TDP-43蛋白病(例如FTLD或ALS)的受试者的生物标志物。

一旦TDP-43从细胞核中耗竭并积聚在细胞质中，它就会被磷酸化。过度磷酸化的TDP43(pTDP-43)是TDP-43蛋白病病理学的关键特征。UNC13A隐蔽外显子#1剪接变体与FTD/ALS患者的磷酸化TDP-43水平密切相关。在实施方案中，UNC13A隐蔽剪接变体#1或UNC13A隐蔽剪接变体#2的表达可用作受试者中磷酸化TDP-43水平的生物标志物。

UNC13A的内含子20-21中的几个基因突变已被鉴定为在TDP-43耗竭时促进UNC13A隐蔽外显子包含。此类基因突变的实例包括rs12608932(hg38 chr19:17.641,880A→C)、rs12973192(hg38 chr19:17,642,430C→G)、rs56041637(hg38 chr19:17,642,033-17,642,056CATC 0-2重复→3-5CATC重复)和rs62121687(hg38 chr19:17,642,351C→A)。此外，增加隐蔽外显子包含的UNC13A基因突变与FT D-ALS患者存活率下降相关。在实施方案中，受试者中UNC13A的内含子20-21中基因突变的鉴定可用作UNC13A隐蔽外显子包含的生物标志物。在实施方案中，对患有TDP-43蛋白病(例如，FTD、AL S)的受试者中UNC13A的内含子20-21中的基因突变的鉴定可用作存活率降低的生物标志物。

表1：UNC13A序列

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂

本公开还提供了UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其可用于本文所述的研究和治疗方法。在实施方案中，相对于全长UNC13A或其其他变体(即不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体，诸如SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6)，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性结合UNC13A隐蔽外显子剪接变体，或降低或抑制其表达或活性。在实施方案中，相对于全长UNC13A或其其他变体，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性结合UNC13A隐蔽外显子剪接变体#1、UNC13A隐蔽外显子剪接变体#2或UNC13A隐蔽外显子剪接变体#1和UNC13A隐蔽外显子剪接变体#2两者，或降低或抑制其活性。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂特异性靶向内含子20-21的隐蔽外显子，例如SEQ IDNO:5或SEQ ID NO:6，或由其编码的肽区域。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂表现出全长UNC13A或与UNC13A隐蔽外显子剪接变体相比不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体的约90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％或5％或更少的活性。

UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括但不限于抑制性核酸(例如，RNA干扰剂、反义寡核苷酸)、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶和适体。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括小分子。小分子是质量小于2000道尔顿的化合物。小分子的分子量优选小于1000道尔顿，更优选小于600道尔顿，例如化合物小于500道尔顿、小于400道尔顿、小于300道尔顿、小于200道尔顿或小于100道尔顿。

小分子可以是有机的或无机的。示例性有机小分子包括但不限于脂肪烃、醇、醛、酮、有机酸、酯、单糖和二糖、芳香烃、氨基酸和脂类。示例性无机小分子包括微量矿物质、离子、自由基和代谢物。或者，小分子可以被合成工程化为由片段、或小部分、或更长氨基酸链组成，以填充酶的结合口袋。通常小分子小于一千道尔顿。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括抗体或其结合片段。术语“抗体”是指包含通过二硫键相互连接的至少两条重链(H)和两条轻链(L)的完整抗体，以及完整抗体的具有或保留结合由完整抗体识别的抗原靶分子的能力的任何抗原结合部分或片段，例如scFv、Fab或Fab'2片段。因此，术语“抗体”在本文中以最广泛的意义使用，并且包括多克隆抗体和单克隆抗体，包括完整抗体及其功能性(抗原结合)抗体片段，包括片段抗原结合(Fab)片段、F(ab')2片段、Fab'片段、Fv片段、重组IgG(rIgG)片段、单链抗体片段(包括单链可变片段(scFv))和单结构域抗体(例如sdAb、sdFv、纳米抗体)。该术语包括基因工程化和/或其他修饰形式的免疫球蛋白，诸如胞内抗体、肽体(peptibody)、嵌合抗体、完全人抗体、人源化抗体和异源缀合抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、双抗体、三抗体、四抗体、串联双scFv和串联三scFv。除非另有说明，否则术语“抗体”应理解为包括其功能性抗体片段。该术语还包括完整或全长抗体，包括任何类别或亚类的抗体，包括IgG及其亚类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgM、IgE、IgA和IgD。

单克隆抗体或其抗原结合部分可以是非人类的、嵌合的、人源化的或人的。免疫球蛋白的结构和功能在例如HHarlow等人编,Antibodies:A Laboratory Manual,第14章(Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor,1988)中综述。

术语“VL”和“VH”分别是指来自抗体轻链和抗体重链的可变结合区。可变结合区包含被称为“互补决定区”(CDR)和“框架区”(FR)的离散的、明确的亚区。术语“互补决定区”和“CDR”与“高变区”或“HVR”同义，并且是指抗体可变区内的氨基酸序列，它们通常一起赋予抗体的抗原特异性和/或结合亲和力，其中连续的CDR(即CDR1和CDR 2、CDR2和CDR3)在一级氨基酸序列中被框架区彼此分开。每个可变区中存在三个CDR(HCDR 1、HCDR2、HCDR3；LCDR1、LCD R2、LCDR3；也分别称为CDRH和CDRL)。在实施方案中，抗体VH包含如下四个FR和三个CDR：FR1-HCDR1-FR2-HCDR2-FR3-HCDR3-FR4；抗体VL包含如下四个FR和三个CDR：FR1-LCDR1-FR2-LCDR2-FR3-LCDR3-FR4。通常，VH和VL通过它们各自的CD R一起形成抗原结合位点。

CDR和框架区的编号可以根据任何已知的方法或方案来确定，例如Kabat、Chothia、EU、IMGT和AHo编号方案(参见例如Kabat等人,"Sequences of Proteins ofImmunological Interest,USDept.Health and Human Services,Public Health ServiceNational Institutes of Health,1991,第5版；Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))；Lefranc等人,Dev.Comp.Immunol.27:55,2003；Honegger和Plückthun,J.Mol.Bio.309:657-670(2001))。可以使用抗原受体编号和受体分类(ANARCI)软件工具(2016,Bioinformatics 15:298-300)对等同的残基位置进行注释，并对不同的分子进行比较。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抗体或其抗原结合片段结合由SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6编码的肽。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。“抑制性核酸”是指具有与靶基因或mRNA转录物互补的序列并且能够降低靶基因或mRNA转录物的表达的短的单链或双链核酸分子。表达降低可以通过多种方法实现，包括阻断转录或翻译(例如空间位阻)、降解靶mRNA转录物、阻断前mRNA剪接位点、阻断mRNA加工(例如封端、聚腺苷酸化)。抑制性核酸可以是单链或双链的。抑制性核酸可以由DNA、RNA或两者组成。抑制性核酸可含有未修饰的核苷酸或可含有经修饰的核苷酸、非天然核苷酸或类似物核苷酸。抑制性核酸包括但不限于反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)和内切核糖核酸酶制备的siRNA(esiRNA)。

如本文所用，术语“siRNA”或“短干扰RNA”是指短的双链多核苷酸序列(例如17-30亚基)，其介导动物中序列特异性转录后基因沉默、翻译抑制、转录抑制或表观遗传RNAi的过程(Zamore等人,Cell101:25-33,2000；Fire等人,Nature 391:806,1998；Hamilton等人,Science 286:950-951,1999；Lin等人,Nature 402:128-129,1999；Sharp,Genes Dev.13:139-141,1999；以及Strauss,Science 286:886,1999)。

在实施方案中，siRNA包含具有相同核苷数量的第一条链和第二条链；然而，第一条链和第二条链是偏移的，使得第一条链和第二条链上的两个末端核苷是突出的。在实施方案中，两个突出的核苷是胸苷残基。siRNA的反义(或引导)链包含至少部分与靶RNA互补的区域。在实施方案中，siRNA的反义链和靶RNA之间存在100％互补性。在siRNA反义链具有部分互补性的实施方案中，互补性必须足以使siRNA或其切割产物指导序列特异性沉默，诸如通过靶RNA的RNAi切割。在一些实施方案中，siRNA的反义链相对于靶RNA包含一个或多个，诸如10、8、6、5、4、3、2个或更少的错配。错配在末端区域是最能容忍的，如果存在的话，优选地在一个或多个末端区域，例如5'或3'末端的6、5、4或3个核苷酸内。siRNA的有义(或随从)链仅需要与反义链充分互补，以保持分子RNA诱导的沉默复合物(RISC)的总体双链特征。

在实施方案中，siRNA可以被修饰或包括核苷类似物。siRNA的单链区域可以被修饰或包括核苷类似物，例如发夹结构的一个或多个不成对区域或连接两个互补区的区域。在实施方案中，siRNA可被修饰以稳定siRNA的3'-末端、5'-末端或两者。例如，修饰可以稳定siRNA，防止其被核酸外切酶降解，或者有利于反义链进入RNA诱导的沉默复合物(RISC)。在实施方案中，siRNA的每条链的长度可以等于或小于30、25、24、23、22、21或20个核苷酸。在其他实施方案中，每条链的长度为至少19个核苷酸。例如，每条链的长度可以是21至25个核苷酸，使得siRNA具有至少17、18、19、29、21、22、23、24或25个核苷酸对的双链区，以及一个或多个2-3个核苷酸的突出端，例如一个或两个3'端的突出端。

内切核糖核酸酶制备的siRNA(esiRNA)是由内切核糖核酸酶诸如RNA酶III或dicer切割长双链RNA产生的siRNA。esiRNA产物是靶向相同mRNA序列的siRNA的异源混合物。

如本文所用，术语“miRNA”或“微小RNA”是指约20-22个核苷酸的小的非编码RNA，其由称为pri-miRNA的较长RNA发夹环前体结构产生。pri-miRNA经过两步切割过程形成微小RNA双链体，并整合到RISC中。miRNA引导链和靶RNA之间的互补性水平决定了采用哪种沉默机制。与RNA靶序列(通常在3'-UTR中)完全互补或广泛互补结合的miRNA通过RNA介导的干扰(RNAi)途径诱导靶的切割。与靶RNA的互补性有限的miRNA在翻译水平上抑制靶基因的表达。

如本文所用，术语“shRNA”或“短发夹状RNA”是指由短环(4-11nt)连接的双链结构形成的两个互补(19-22bp)RNA序列。shRNA通常由引入到细胞中的载体编码，并且shRNA在胞质溶胶中被Dicer加工成siRNA双链体，所述双链体被整合到RISC复合物中，其中引导链和RNA靶之间的互补性介导RNA靶特异性切割和降解。

如本文所用，术语“核酶”是指能够位点特异性切割靶mRNA的催化活性RNA分子。在某些实施方案中，核酶是Varkud卫星核酶、发夹核酶、锤头核酶或丁型肝炎核酶。

在实施方案中，本公开的反义寡核苷酸靶向内含子20-21和/或外显子20或外显子21中的相邻序列。可以使用剪接转换反义寡核苷酸纠正异常剪接。剪接转换反义寡核苷酸通过在剪接位点处或附近杂交来阻断异常剪接位点，从而防止被细胞剪接机制识别。在实施方案中，剪接转换反义寡核苷酸被修饰为对核酸酶有抗性，并且所得靶核酸:寡核苷酸异源双链体不被RNA酶H切割剪接转换反义寡核苷酸可以包含当与RNA或核苷酸化学混合物配对时不形成RNA酶H底物，从而避免连续DNA样碱基运行的核苷酸。因此，在实施方案中，剪接转换反义寡核苷酸可以修饰UNC13A剪接，而不改变UNC13AmRNA转录物的丰度。

在实施方案中，反义寡核苷酸与以下互补：编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。在实施方案中，编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成。在实施方案中，编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成。在实施方案中，编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成。在实施方案中，编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:299或由其组成。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基，例如约15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40个碱基的长度。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与表2-7中的任一序列(例如，SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640)具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的碱基序列。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸包含表2-5中的任一序列(例如，SEQ ID NO:13-90、92-219、221-298、300-377和423-640)或由其组成。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸包含SEQ ID NO:423-432、439-443、491-498、502-507和513-514中所示的任一序列或由其组成。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:650互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:651互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:652互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:653互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:654互补的18-21个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:654互补的18、19、20或21个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。经修饰的反义寡核苷酸可以包含至少一个主链修饰、核碱基修饰、2’-核糖取代或桥接核酸，经修饰的寡核苷酸化学性质的实例包括但不限于磷酰胺吗啉代寡核苷酸和磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸(PMO)、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸包含2’O-Me修饰的核苷酸和硫代磷酸酯键。

在一些实施方案中，本文提供的组合物可组装成药物或研究试剂盒，以促进其在治疗或研究用途中的使用。试剂盒可包括一个或多个容器，所述容器包含：(a)本文所述的UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸；和(b)使用说明书。在一些实施方案中，试剂盒组分(a)可以是适用于特定用途和施用方式的药物制剂和剂量。例如，试剂盒组分(a)可以存在于单位剂量或多剂量容器，例如密封的安瓿或小瓶中。试剂盒的组分可能需要在使用前混合一种或多种组分，或者可以以预混合状态下制备。试剂盒的组分可以是液体或固体形式，可能需要添加溶剂或进一步稀释。试剂盒的组分可以是无菌的。说明书可以是书面或电子形式，并且可以与试剂盒相关联(例如，书面插页、CD、DVD)或通过互联网或基于网络的通信提供。试剂盒可以在冷藏或冷冻温度下运输和储存。

药物组合物

在一些方面，本公开提供了药物组合物，其包含如本文所述的UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂和药学上可接受的载体。如本文所用，术语“药学上可接受的”是指那些化合物、材料、组合物和/或剂型在合理的医学判断范围内适合用于与细胞和/或组织接触，而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比相称。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的材料、组合物或载体，诸如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或包封材料，其参与在患者体内或向患者运送或转运本发明中有用的化合物，以使其可实现其预期功能。每种载体必须在与制剂的其他成分相容并且对接触的细胞或组织无害的意义上是“可接受的”。可包含在用于实施本发明的药物组合物中的其他成分是本领域已知的，并描述于例如Remington'sPharmaceutical Sciences(Genaro编,Mack Publishing Co.,1985,Easton,PA)中，所述文献以引用方式并入本文。

如医学领域众所周知的，任何一个患者的剂量取决于许多因素，包括患者的体型、体重、体表面积、年龄、达到治疗效果所需的UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂的水平、UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂的稳定性、所治疗的具体疾病、疾病阶段、性别、施用时间和途径、一般健康状况以及同时施用的其他药物。

药物组合物可以按照医学领域技术人员确定的适于待治疗(或预防)的疾病或疾患的方式施用。组合物施用的合适剂量和合适的持续时间和频率将由以下因素决定，诸如患者的健康状况、患者的体型(即体重、质量或身体面积)、患者疾病的类型和严重性、活性成分的具体形式和施用方法。一般而言，合适的剂量和治疗方案以足以提供治疗和/或预防益处(诸如本文所述，包括改善的临床结果，诸如更频繁的完全或部分缓解、或更长的无病存活期和/或总存活期、或症状严重性的减轻)的量提供组合物。对于预防性用途，剂量应足以预防疾病或病症相关的疾病、延迟与疾病或病症相关的疾病的发作或减轻其严重性。根据本文所述的方法施用的组合物的预防益处可通过进行临床前(包括体外和体内动物研究)和临床研究，并通过适当的统计学、生物学和临床方法和技术分析从中获得的数据来确定，所有这些方法和技术可由本领域技术人员容易地实施。

组合物(例如药物组合物)可以通过任何途径施用，包括肠内(例如口服)、胃肠外、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、软膜下、脑实质内、纹状体内、颅内、脑池内、脑内、脑室内(intracerebral ventricular)、眼内、脑室内(intraventricular)、腰髓内、皮下、经皮、皮间(interdermal)、直肠、阴道内、腹膜内、局部(通过粉末、软膏、乳膏和/或滴剂)、粘膜、经鼻、经颊、舌下；通过气管内滴注、支气管滴注和/或吸入；和/或作为口腔喷雾剂、鼻喷雾剂和/或气雾剂。一般来说，最合适的施用途径将取决于多种因素，包括剂的性质(例如，其在胃肠道环境中的稳定性)和/或受试者的状况。在一些实施方案中，将组合物直接注射到受试者的CNS中。在一些实施方案中，向CNS中直接注射是脑内注射、实质内注射、鞘内注射、软膜下注射或其任何组合。在一些实施方案中，向CNS中直接注射是向受试者的脑脊液(CSF)中直接注射，任选地其中直接注射是脑池内注射、脑室内注射和/或腰髓内注射。

使用UNC13A隐蔽剪接变体抑制剂的方法

本公开提供了将本文公开的UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂用于各种研究和治疗用途的方法。在一个方面，本公开提供了一种减少细胞中的UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达的方法，其包括施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子。在实施方案中，相对于全长UNC13A(野生型)或其其他变体(即不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体，诸如SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6)，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性抑制UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达或活性。

在实施方案中，隐蔽外显子从UNC13A基因的内含子20-21获得。在实施方案中，隐蔽外显子包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的多核苷酸序列。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶或适体。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。抑制性核酸可以是反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)或esiRNA。在实施方案中，抑制性核酸包括与以下互补的反义寡核苷酸：编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。在实施方案中，外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成。在实施方案中，外显子21剪接受体位点包含SEQ ID NO:299或由其组成。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基的长度，优选地约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基的长度。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与表2(例如，SEQ IDNO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID NOS:523-640)中列出的任一序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％同一性的碱基序列。在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有包含表2(例如，SEQ ID NO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ IDNO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID No:523-640)中列出的任一序列或由其组成的碱基序列。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:650互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:651互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:652互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:653互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:654互补的18-21个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:654互补的18、19、20或21个碱基。在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括磷酰胺吗啉代寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟-修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环-DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)或其任何组合。

在实施方案中，细胞在受试者内。如本文所用,“患者”或“受试者”包括动物，诸如人、牛、马、绵羊、羔羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠。动物可以是哺乳动物，例如非灵长类动物和灵长类动物(例如猴子和人)。在实施方案中，患者是人，例如人类婴儿、儿童、青少年或成人。

在实施方案中，受试者已被鉴定为具有在内含子20-21中的UNC13A基因突变。在实施方案中，UNC13基因突变包括rs12608932(hg38 chr19:17.641,880A→C)、rs12973192(hg38 chr19:17,642,430C→G)、rs56041637(hg38 chr19:17,642,033-17,642,056 0-2CATC重复→3-5CATC重复)和rs62121687(hg38 chr19:17,642,351C→A)或其任何组合。

在另一个方面，本公开提供了一种减少细胞中的磷酸化TAR-DNA结合蛋白-43(TDP-43)的方法，其包括施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子。

在实施方案中，相对于全长UNC13A(野生型)或其其他变体(即不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体，诸如SEQ ID NO:5或SEQ IDNO:6)，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性抑制UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达或活性。

在实施方案中，隐蔽外显子从UNC13A基因的内含子20-21获得。在实施方案中，隐蔽外显子包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的多核苷酸序列。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶或适体。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。抑制性核酸可以是反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)或esiRNA。在实施方案中，抑制性核酸包括与以下互补的反义寡核苷酸：编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。在实施方案中，外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成。在实施方案中，外显子21剪接受体位点包含SEQ ID NO:299或由其组成。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基的长度，优选地约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基的长度。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与表2(例如，SEQ IDNO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID NOS:523-640)中列出的任一序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％同一性的碱基序列。在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有包含表2(例如，SEQ ID NO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID No:523-640)中列出的任一序列或由其组成的碱基序列。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:650互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:651互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:652互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:653互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:654互补的18-21个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:654互补的18、19、20或21个碱基。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括磷酰胺吗啉代寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟-修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环-DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)或其任何组合。

在实施方案中，细胞在受试者内。在实施方案中，受试者已被鉴定为具有在内含子20-21中的UNC13A基因突变。在实施方案中，UNC13基因突变包括rs12608932(hg38 chr19:17.641,880A→C)、rs12973192(hg38 chr19:17,642,430C→G)、rs56041637(hg38chr19:17,642,033-17,642,056 0-2CATC重复→3-5CATC重复)和rs62121687(hg38 chr19:17,642,351C→A)或其任何组合。

在另一个方面，本公开提供了一种治疗受试者的TAR-DNA结合蛋白-43(TDP-43)蛋白病的方法，其包括向受试者施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子；

在实施方案中，相对于全长UNC13A(野生型)或其其他变体(即不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体，诸如SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6)，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性抑制UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达或活性。

在实施方案中，隐蔽外显子从UNC13A基因的内含子20-21获得。在实施方案中，隐蔽外显子包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的多核苷酸序列。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶或适体。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。抑制性核酸可以是反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)或esiRNA。在实施方案中，抑制性核酸包括与以下互补的反义寡核苷酸：编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。在实施方案中，外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成。在实施方案中，外显子21剪接受体位点包含SEQ ID NO:299或由其组成。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基的长度，优选地约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基的长度。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与表2(例如，SEQ IDNO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID NOS:523-640)中列出的任一序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％同一性的碱基序列。在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有包含表2(例如，SEQ ID NO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)和表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID No:523-640)中列出的任一序列或由其组成的碱基序列。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:650互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:651互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:652互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:653互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:654互补的18-21个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:654互补的18、19、20或21个碱基。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括磷酰胺吗啉代寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟-修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环-DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)或其任何组合。

在实施方案中，细胞在受试者内。在实施方案中，受试者已被鉴定为具有在内含子20-21中的UNC13A基因突变。在实施方案中，UNC13基因突变包括rs12608932(hg38 chr19:17.641,880A→C)、rs12973192(hg38 chr19:17,642,430C→G)、rs56041637(hg38chr19:17,642,033-17,642,056 0-2CATC重复→3-5CATC重复)和rs62121687(hg38 chr19:17,642,351C→A)或其任何组合。

在实施方案中，TDP-43蛋白病包括肌萎缩性侧索硬化(ALS)、额颞叶变性(FTLD)、原发性侧索硬化(PLS)、进行性肌萎缩(PMA)、面部发作感觉和运动神经元病(FOSMN)、海马硬化(HS)、边缘系统为主的年龄相关性TDP-43脑病(LATE)、脑年龄相关性TDP-43伴硬化(CARTS)、关岛帕金森-痴呆综合征(G-PDC)、Guan ALS(G-ALS)、多系统蛋白病(MSP)、佩里病、阿尔茨海默病(AD)和慢性创伤性脑病(CTE)或其任何组合。

在另一个方面，本公开提供了一种治疗已被鉴定为具有在内含子20-21中的UNC13A基因突变的受试者的方法，其包括向受试者施用UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂，其中UNC13A隐蔽外显子剪接变体包含UNC13A隐蔽外显子剪接变体成熟mRNA转录物的外显子20和外显子21之间的隐蔽外显子。在实施方案中，UNC13基因突变包括rs12608932(hg38 chr19:17.641,880A→C)、rs12973192(hg38 chr19:17,642,430C→G)、rs56041637(hg38 chr19:17,642,033-17,642,056 0-2CATC重复→3-5CATC重复)和rs62121687(hg38chr19:17,642,351C→A)或其任何组合。

在实施方案中，受试者具有降低的TDP-43表达。在实施方案中，受试者表现出降低的细胞核TDP-43。

在实施方案中，相对于全长UNC13A(野生型)或其其他变体(即不含内含子20-21的隐蔽外显子的变体，诸如SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6)，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性抑制UNC13A隐蔽外显子剪接变体的表达或活性。

在实施方案中，隐蔽外显子从UNC13A基因的内含子20-21获得。在实施方案中，隐蔽外显子包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的多核苷酸序列。在实施方案中，UNC13隐蔽外显子剪接变体包含SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶或适体。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。抑制性核酸可以是反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)或esiRNA。在实施方案中，抑制性核酸包括与以下互补的反义寡核苷酸：编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子20剪接供体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接受体位点区域；编码UNC13A的预加工mRNA中的隐蔽外显子剪接供体位点区域；或编码UNC13A的预加工mRNA中的外显子21剪接受体位点区域。在实施方案中，外显子20剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:12或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接受体位点区域包含SEQ ID NO:91或由其组成。在实施方案中，隐蔽外显子剪接供体位点区域包含SEQ ID NO:220或由其组成。在实施方案中，外显子21剪接受体位点包含SEQ ID NO:299或由其组成。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:641中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:642中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:643中所示序列的隐蔽外显子的5'端互补的序列。在实施方案中，抑制性核酸(例如反义寡核苷酸)包含与具有SEQ ID NO:644中所示序列的隐蔽外显子的3'端互补的序列。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基的长度，优选地约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基的长度。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与表2(例如，SEQ IDNO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID NOS:523-640)中列出的任一序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％同一性的碱基序列。在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有包含表2(例如，SEQ ID NO:13-90)、表3(SEQ ID NO:92-219)、表4(SEQ ID NO:221-298)、表5(SEQ ID NO:300-377)、表7B(SEQ ID NO:423-522)和表8B(SEQ ID No:523-640)中列出的任一序列或由其组成的碱基序列。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:650互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:650互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:651互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:651互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:652互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:652互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:653互补的18-30个碱基、18-25个碱基或18-22个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:653互补的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个碱基。

在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ IDNO:654互补的18-21个碱基。在实施方案中，UNC13A隐蔽外显子剪接变体特异性反义寡核苷酸具有与SEQ ID NO:654互补的18、19、20或21个碱基。

在实施方案中，UNC13隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括磷酰胺吗啉代寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟-修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环-DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)或其任何组合。

在实施方案中，受试者患有TDP-43蛋白病。在实施方案中，TDP-43蛋白病包括肌萎缩性侧索硬化(ALS)、额颞叶变性(FTLD)、原发性侧索硬化(PLS)、进行性肌萎缩(PMA)、面部发作感觉和运动神经元病(FOSMN)、海马硬化(HS)、边缘系统为主的年龄相关性TDP-43脑病(LATE)、脑年龄相关性TDP-43伴硬化(CARTS)、关岛帕金森-痴呆综合征(G-PDC)、Guan ALS(G-ALS)、多系统蛋白病(MSP)、佩里病、阿尔茨海默病(AD)和慢性创伤性脑病(CTE)或其组合。

在实施方案中，本公开的治疗方法减少、预防TDP-43蛋白病的一种或多种特征性症状或减缓其发展或进展。TDP-43蛋白病特征性症状的实例包括运动功能障碍、认知功能障碍、情绪/行为功能障碍、瘫痪、颤抖、不稳定、强直、抽搐、肌无力、肌肉痉挛、肌肉僵硬、肌肉萎缩、吞咽困难、呼吸困难、言语和语言困难(例如，口齿不清)、运动缓慢、行走困难、痴呆、抑郁、焦虑或其任何组合。

在实施方案中，本公开的治疗方法包括施用UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂作为单一疗法或其与一种或多种额外疗法的组合用于治疗TDP-43蛋白病。组合疗法可以意指在一种或多种额外治疗的同时、之前、之后向受试者施用本公开的组合物(例如，反义寡核苷酸)。组合疗法的同时施用可能意味着本公开的组合物(例如，反义寡核苷酸)和额外疗法被配制成以相同剂型施用或以分开剂型施用。

在实施方案中，可与本公开的UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂组合使用的一种或多种疗法包括：靶向神经退行性疾病相关基因或转录物(例如，C9ORF72)的抑制性核酸或反义寡核苷酸、靶向神经退行性疾病相关基因(例如，C9ORF72)的基因编辑剂(例如，基于CRISPR、TALEN、ZFN的系统)、降低氧化应激的剂诸如自由基清除剂(例如，Radicava(依达拉奉(edaravone))、溴隐亭)；抗谷氨酸剂(例如利鲁唑(Riluzole)、托吡酯、拉莫三嗪、右美沙芬、加巴喷丁和AMPA受体拮抗剂(例如他仑帕奈(Talampanel)))；抗凋亡剂(例如米诺环素、苯丁酸钠和阿瑞洛莫(Arimoclomol))；抗炎药(例如神经节苷脂、塞来昔布、环孢霉素、尼美舒利、硫唑嘌呤、环磷酰胺、血浆除去法、醋酸格拉替雷(Glatiramer acetate)和沙利度胺)；β-内酰胺类抗生素(青霉素及其衍生物、头孢曲松和头孢菌素)；多巴胺激动剂(普拉克索(Pramipexole)、右旋普拉克索(Dexpramipexole))；和神经营养因子(例如，IGF-1、GDNF、BDNF、CTNF、VEGF、Colivelin、扎利罗登(Xaliproden)、促甲状腺素释放激素和ADNF)。

在实施方案中，本公开的UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂与靶向C9ORF72的额外疗法组合施用。在一些实施方案中，靶向C9ORF72的额外疗法包括靶向C9ORF72转录物的抑制性核酸、C9OR F72特异性反义寡核苷酸或C9ORF72特异性基因编辑剂。C9ORF72特异性疗法的实例描述于美国专利号9,963,699(反义寡核苷酸)；PCT公布号WO2019/032612(反义寡核苷酸)；美国专利号10,221,414(反义寡核苷酸)；美国专利号10,407,678(反义寡核苷酸)；美国专利号9,963,699(反义寡核苷酸)；美国专利公布US2019/0316126(抑制性核酸)；美国专利公开号2019/0167815(基因编辑)；PCT公布号WO2017/109757(基因编辑)，所述专利各自以引用方式整体并入。

在实施方案中，本公开的治疗方法，包括治疗TDP-43蛋白病诸如ALS或FTD，可以与STMN2隐蔽剪接变体特异性抑制剂组合使用。STMN2编码称为抑微管装配蛋白(Stathmin)-2的微管稳定性调节因子，是当TDP-43从神经元中耗竭时表达最显著减少的基因。抑微管装配蛋白-2基因被注释为含有5个组成型外显子，外加提出的在外显子4和5之间的替代性外显子(参见表10)。STMN2携带内含子1中所含有的隐蔽外显子(外显子2a)，其通常被排除在成熟STMN2 mRNA之外(参见图18)。STMN2的第一个内含子(表10)含有TDP-43结合位点。当TDP-43丢失或其功能受损时，外显子2a被整合到成熟mRNA中。外显子2a携带终止密码子和多聚腺苷酸化信号(图18)，导致STMN2 mRNA截短和抑微管装配蛋白-2减少8倍。异常剪接和抑微管装配蛋白-2水平降低似乎是散发性和家族性ALS病例(除了具有SOD1突变的病例)和FTLD-TDP的主要特征。

表10：STMN2转录序列和内含子1序列

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

在实施方案中，相对于全长STMN2(野生型)或其其他变体(即不含内含子1中所含的隐蔽外显子2a的变体)，STMN2隐蔽外显子剪接变体特异性抑制剂选择性抑制STMN2隐蔽外显子剪接变体的表达或活性。

在实施方案中，STMN2隐蔽外显子从STMN2基因的内含子1获得。在实施方案中，隐蔽外显子2a包含图19所示的红色序列。

在实施方案中，STMN2隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸、肽、抗体、结合蛋白、小分子、核酶或适体。

在实施方案中，STMN2隐蔽剪接变体特异性抑制剂靶向隐蔽外显子2a。

在实施方案中，STMN2隐蔽剪接变体特异性抑制剂包括抑制性核酸。抑制性核酸可以是反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、双链RNA(dsRNA)或esiRNA。在实施方案中，抑制性核酸包括与以下互补的反义寡核苷酸：编码STMN2的预加工mRNA中的外显子1剪接供体位点区域；编码STMN2的预加工mRNA中的隐蔽外显子2a剪接受体位点区域。

在实施方案中，STMN2隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸具有约15-40个碱基的长度，优选长度为约18-30个碱基、18-25个碱基、18-22个碱基或20-30个碱基。

在实施方案中，STMN2隐蔽剪接变体特异性反义寡核苷酸是经修饰的反义寡核苷酸。在实施方案中，经修饰的反义寡核苷酸包括磷酰胺吗啉代寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡核苷酸、硫代磷酸酯修饰的寡核苷酸、2’O-甲基(2’O-Me)修饰的寡核苷酸、肽核酸(PNA)、锁核酸(LNA)、二硫代磷酸酯寡核苷酸、2’O-甲氧基乙基(2’-MOE)修饰的寡核苷酸、2’-氟-修饰的寡核苷酸、2'O,4'C-亚乙基桥接的核酸(ENA)、三环-DNA、三环-DNA硫代磷酸酯核苷酸、受限制的乙基桥接的核酸、2'-O-[2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基]修饰的寡核苷酸、吗啉代寡核苷酸和肽缀合的磷酰胺吗啉代寡核苷酸(PPMO)或其任何组合。

本公开的UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂可通过任何途径向受试者施用，所述途径包括肠内(例如，口服)、肠胃外、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、软膜下、脑实质内、纹状体内、颅内、脑池内、脑内、脑室内(intracerebral ventricular)、眼内、脑室内(intraventricular)、腰髓内、皮下、经皮、皮间、直肠、阴道内、腹膜内、局部(如通过粉剂、软膏、乳膏和/或滴剂)、粘膜、经鼻、经颊、舌下；通过气管内滴注、支气管滴注和/或吸入；和/或作为口服喷雾剂、鼻喷雾剂和/或气雾剂。优选地，例如通过鞘内、软膜下、脑实质内、纹状体内、颅内、脑池内、脑内、脑室内(intracerebral ventricular)、眼内、脑室内(intraventricular)、腰髓内施用或其任何组合，向受试者的CNS直接施用本公开的UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂(例如反义寡核苷酸)。

在实施方案中，与尚未与UNC13A隐蔽剪接变体特异性抑制剂接触的细胞中的UNC13A隐蔽剪接变体的表达水平相比，本公开的方法将细胞中的UNC13A隐蔽剪接变体表达或活性降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或更多。在一些实施方案中，与尚未与抑制性核酸接触的细胞中的UNC13A隐蔽剪接变体的表达水平相比，本公开的方法将细胞中的UNC13A隐蔽剪接变体表达或活性降低10-20％、10-30％、10-40％、10-50％、10-60％、10-70％、10-80％、10-90％、10-95％、20-30％、20-40％、20-50％、20-60％、20-70％、20-80％、20-90％、20-95％、20-100％、30-40％、30-50％、30-60％、30-70％、30-80％、30-90％、30-95％、30-100％、40-50％、40-60％、40-70％、40-80％、40-90％、40-95％、40-100％、50-60％、50-70％、50-80％、50-90％、50-95％、50-100％、60-70％、60-80％、60-90％、60-95％、60-100％、70-80％、70-90％、70-95％、70-100％、80-90％、80-95％、80-100％、90-95％、90-100％。

在实施方案中，与未治疗受试者的CNS中的UNC13A隐蔽剪接变体的表达水平相比，本公开的方法将受试者CNS中的UNC13A隐蔽剪接变体表达或活性降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或更多。在一些实施方案中，与未治疗受试者的CNS中的UNC13A隐蔽剪接变体的表达水平相比，本公开的方法将受试者CNS中的UNC13A隐蔽剪接变体表达或活性降低10-20％、10-30％、10-40％、10-50％、10-60％、10-70％、10-80％、10-90％、10-95％、20-30％、20-40％、20-50％、20-60％、20-70％、20-80％、20-90％、20-95％、20-100％、30-40％、30-50％、30-60％、30-70％、30-80％、30-90％、30-95％、30-100％、40-50％、40-60％、40-70％、40-80％、40-90％、40-95％、40-100％、50-60％、50-70％、50-80％、50-90％、50-95％、50-100％、60-70％、60-80％、60-90％、60-95％、60-100％、70-80％、70-90％、70-95％、70-100％、80-90％、80-95％、80-100％、90-95％、90-100％。

实施例

实施例1：TDP-43抑制FTD/ALS基因UNC13A中的隐蔽外显子包含

材料和方法

RNA-Seq比对和剪接分析

用于RNA-Seq比对和剪接分析的详细流水线v2.0.1可在https://github.com/emc2cube/Bioinformatics/sh_RNAseq.sh上获得。FASTQ文件作为GSE126543从基因表达综合(GEO)数据库下载。使用trimmo matic(0.39)(ILLUMINACLIP:TruSeq3-PE.fa:2:30:10LEADING:3TRAILING:3SLIDINGWINDOW:4:15MINLEN:36)去除FASTQ文件中的适体。然后使用FastQC(v0.11.9)评估所得文件的质量。然后使用STAR v2.7.3a将RNA-Seq读段绘制到人(hg38)上。

剪接分析

MAJIQ：使用MAJIQ(2.2)和VOILA(12)分析选择性剪接事件。简言之，MAJIQ使用独特作图的跨越接合处的读段，使用以下参数“majiq build-c config--min-intronic-cov1--simplify”，通过使用补充有从头检测的接合处的UCSC转录组注释(82版)来构建转录物的剪接图。在此，从头是指不在UCSC转录组注释中，但在RNA-Seq数据中有足够的证据(-min-intron-cov 1)的接合处。在基因剪接图中鉴定了不同的局部剪接变异(LSV)，并且MAJIQ量化器(majiq psi)评估了每个RNA-Seq样品中每个LSV中每个接合处的分数，表示为剪接的百分比(PSI或ψ)。在两种条件下(TDP-43阳性神经元细胞核对比TDP-43阴性神经元细胞核)每个接合处的PSI的变化(ΔPSI或ΔΨ)通过使用命令“majiq deltapsi”来计算。基因剪接图、PSI的后验分布和ΔPSI使用VOILA可视化。

LeafCutter(commit 249fc26 on https://github.com/davidaknowle s/leafcutter)：使用如前所述的已比对的RNA-Seq读段，使用filter_cs.py以默认设置从比对(bam)文件中提取跨越外显子-外显子接合处和每个外显子中至少6np的图谱的读段。使用leafcutter_cluster.py中的默认设置进行内含子聚类。在两种情况(TDP-43阳性神经元细胞核对比TDP-43阴性神经元核)之间内含子的差异切除使用leafcutter_ds.R计算。

细胞培养

使SH-SY5Y(ATCC)细胞在37℃、5％ CO2下在补充有Glutamax(ThermoScientific)、10％胎牛血清和10％青霉素-链霉素的DMEM/F12培养基中生长。对于shRNA处理，在第0天铺种细胞，在第2天用shRNA转导，随后在第3天更新培养基，并在第6天收获用于读出(RT-qPCR，免疫印迹)。如(37)中所述产生HEK293T TDP-43敲除细胞和亲代HEK-293T细胞。将细胞在37℃、5％ CO2下在补充有10％胎牛血清(Invitrogen 16000-044)、1％青霉素–链霉素、2mM L-谷氨酰胺(Gemini Biosciences)、1x MEM非必需氨基酸溶液(Gibco)的DMEM培养基(Gibco 10564011)中培养。

免疫印迹

将SH-SY5Y细胞和iPSC来源的运动神经元(iPSCs-MN)如上所述进行转染和处理，之后裂解。在补充有蛋白酶抑制剂混合物(Thermo Fisher 78429)和磷酸酶抑制剂(ThermoFisher 78426)的冰冷的RIPA缓冲液(Sigma-Aldrich R0278)中裂解细胞。在4℃下在台式离心机上以最大速度将裂解物沉淀15分钟后，进行二辛可宁酸(Invitrogen 23225)测定，以确定蛋白质浓度。将每个样品的60μg(SH-SY5Y)和30μg(iPSCs-MN)蛋白质在70℃下在含有2.5％2-巯基乙醇(Sigma-Aldrich)的LDS样品缓冲液(Invitrogen NP0008)中变性10分钟。将这些样品加载到4–12％ Bis–Tris凝胶(Thermo Fisher NP0335BOX)上进行凝胶电泳，然后使用湿转移法(Bio-Rad Mini Trans-Blot电泳池170-3930)在100V下转移到0.45-μm硝酸纤维素膜(Bio-Rad 162-0115)上持续2h。将膜在Odyssey封闭缓冲液(LiCOr 927-40010)中封闭1小时，然后在室温下在含有针对UNC13A(1:500,Proteintech 55053-1-AP)、TDP-43(1:1,000,Abnova H00023435-M01)或GAPDH(Cell Signaling Technologies5174S)的抗体的封闭缓冲液中孵育过夜。随后将膜在含有HRP缀合的抗小鼠IgG(H+L)(1:2000，Fisher 62-6520)或HRP缀合的抗兔IgG(H+L)(1:2000，Life Technologies 31462)的封闭缓冲液中孵育一小时。使用ECL Prime试剂盒(Invitrogen)进行印迹显影，使用ChemiDox XRS+系统(BIO-RAD)对印迹进行成像。使用Fiji对条带的强度进行量化，然后以相应对照作归一化。

用于检测UNC13A剪接变体的RNA提取、cDNA合成和RT-qPCR/RT-PCR

按照制造商的说明书使用RNeasy Micro试剂盒(Qiagen)提取总RNA，使裂解物穿过QIAshredder柱(Qiagen)以使产量最大化。通过Nanodrop(Thermo Scientific)定量RNA，使用75ng用SuperScript IV VILO Master Mix(Thermo Scientific)合成cDNA。使用PowerTrack SYBR Green Master Mix(Thermo Scientific)在20ul反应中用6ng cDNA输入运行qPCR，在QuantStudio 6Flex上使用标准循环参数读出(95℃持续2分钟，95℃持续15秒/60℃持续60秒的40个循环)，然后进行标准解离(95℃以1.6℃/秒持续15秒，60℃以1.6℃/秒持续60秒，95℃以0.075℃/秒持续15秒)。ΔΔCt用RPLP0作为管家并以相关shScramble作为参考计算；大于40的测量的Ct值被设置为40用于可视化。使用以下引物对：

使用NEBNext Ultra IIQ5 Master Mix(New England Biolabs)在100ul反应中用15ng cDNA输入进行RT-PCR，使所得产物在1.5％TAE凝胶上可视化。使用以下引物对：

shRNA克隆、慢病毒包装和细胞转导

shRNA序列来源于Broad GPP门户网站(TDP-43：AGATCTTAAGACTGGTCATTC(SEQ IDNO:391)，乱序：GATATCGCTTCTACTAGTAAG(SEQ ID NO:392))。为了克隆，合成互补寡核苷酸以产生4nt突出端，退火，并连接到pRSITCH(Tet诱导型U6)或pRSI16(组成型U6)(Cellecta)中。将连接物转化到Stbl3化学感受态细胞(Thermo Scientific)中，并在30℃下生长。使用Maxiprep柱(Promega)进行大规模质粒生产，将纯化的质粒用作用第二代包装质粒psPAX2和pMD2.G(Cellecta)进行慢病毒包装的输入，在Lenti-X 293T细胞(Takara)中用Lipofectamine 2000(Invitrogen)转导。在转染后48和72小时收集病毒上清液，并使用Lenti-X浓缩器(Takara)浓缩。通过在相关细胞系中进行系列稀释并通过流式细胞术读出BFP+％来确定病毒滴度，稀释度达到最小80％ BFP+细胞，选择用于实验。

变体验证

通过从UNC13A外显子19到外显子21的PCR扩增建立iPSC来源的运动神经元细胞中的变体(UNC13A_19_21FWD 5’-3’＝CAACCTGGACAAGCGAACTG(SEQ ID NO:387)，UNC13A_19_21RVS 5’-3’＝GGGCTGTCTCATCGTAGTAAAC(SEQ ID NO:388))。使用Wizard SV凝胶和PCR净化柱(Promega)对所得产物进行纯化，并提交用于进行Sanger和NGS(扩增子EZ)(Genewiz)。

iPSC维持和分化为运动神经元(iPSC-MN)

iPSC系从公共生物库(GM 25256-Corriell Institute；NDS00262，NDS00209-NINDS)获得并维持在matrigel(Corning)上的mTeSR1培养基(StemCell Technologies)中。根据制造商的说明书，使用ReLeSR(StemCell Technologies)每天喂养iPSC并每4-7天分离一次。iPSC向运动神经元的分化如前所述进行(41)。简言之，将iPSC解离并置于超低粘附烧瓶(Corning)中，以在含有DMEMF12/神经元基础培养基(Thermo Fisher)、N2补充物(ThermoFisher)和B-27补充物-无异种成分(Thermo Fisher)的培养基中形成3D球体。添加小分子以诱导球状体的神经元祖细胞模式(LDN193189、SB-431542、Chir99021)，随后进行运动神经元诱导(RA、SAG、DAPT)。14天后，用木瓜蛋白酶和DNA酶(沃星顿生化公司)分离神经元球状体，并铺种在聚-D-赖氨酸/层粘连蛋白涂覆的板上含有神经营养因子(BDNF、GDNF、CNTF；R&D Systems)的神经元基础培养基(Thermo Fisher)中。对于病毒转导，将神经元培养物与含有shScramble或shTDP-43的慢病毒颗粒的培养基一起孵育18小时。通过RFP表达评估超过90％的感染效率。转导后7天，分析神经元培养物的RNA和蛋白质。

用于检测UNC13A剪接变体的人iPSC神经元

互补cDNA可从CRISPRi-i

用于检测UNC13A剪接变体的死后脑组织

来自FTLD-TDP患者和认知正常对照个体的死后脑组织从梅奥诊所佛罗里达脑库(Mayo Clinic Florida Brain Bank)获得。由训练有素的神经科医师和神经病理学医师分别根据神经学和病理学检查独立确定诊断。所有参与者或授权家庭成员都提供了书面知情同意书，并且所有协议都经过了梅奥诊所机构审查委员会和伦理委员会的批准。从来自内侧额叶皮质的500ng RNA(RIN≥7.0)中获得的互补DNA(cDNA)可从先前的研究，以及来自相同样品的匹配pTDP-43数据中获得(42)。遵循标准方案，使用SYBR GreenER qPCR SuperMix(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)对所有样品一式三份进行定量实时PCR(RT-qPCR)。用于检测UNC13A剪接变体的引物对是UNC 13A_CE FWD 5’-3’＝TGGATGGAGAGATGGAACCT(SEQID NO:379)，UNC13A_CE RVS 5’-3’＝GGGCTGTCTCATCGTAGTAAAC(SEQ ID NO:380)。在QuantStudio

UNC13A剪接变体的定量

从NCBI基因表达综合(GEO)数据库(GSE137810、GSE124439、GSE116622和GSE153960)下载由NYGC ALS联合群组生产的RNA-Seq数据。使用按照(10)中所述分类的1658个可用的质量控制样品。如前所述预加工读段并与人(hg38)比对后，使用RSEM(v1.3.2)估计全长UNC13A的表达。来自所有个体的所有组织样品的UNC13A的平均TPM平均为10.5。使用命令“MarkDuplicates REMOVE_DUPLI CATES＝true CREATE_INDEX＝true”使用来自Picard Tools(2.23.0)的MarkDuplicates去除PCR重复。使用bedtools(2.27.1)使用命令“bedtools intersect-split”对跨越“外显子19-外显子20”接合处、“外显子20-CE”接合处、“CE-外显子21”接合处或“外显子20-外显子21”接合处的读段进行定量。因为UNC13A在死后组织中表达水平相对较低并且组织具有异质性，可能不是所有组织都具有足够的可检测的UNC13A来检测剪接变体。由于UNC13A含有超过40个外显子，并且mRNA转录物的RNA-Seq覆盖率通常不是均匀分布的(43)，因此检查了跨越“外显子19-外显子20”接合处的读段，其包括在典型同种型和剪接变体中，并且在映射到“外显子19-外显子20”接合处和“外显子20-外显子21”接合处的读段的数量之间存在很强的相关性(Pearson’s r＝0.99)。观察到具有跨越“外显子20-CE”接合处或“CE-外显子21”接合处的至少2个读段的样品具有至少UNC13A TPM＝1.55或跨越“外显子19-外显子20”接合处的20个读段。因此，选择具有TPM≥1.55或映射到“外显子19-外显子20”接合处的至少20个读段的1151个样品作为适用于UNC13A剪接变体分析的样品。

人死后脑中rs12608932和rs12973192SNP基因型的测定

根据制造商的说明书，使用Wizard基因组DNA纯化试剂盒(Promega)从人额叶皮质提取基因组DNA(gDNA)。使用由引物对和对每个SNP具有特异性的VIC/FAM标记的探针组成的商业预混合物(目录号4351379，rs12608932的测定ID“43881386_10”和rs12973192的测定ID“11514504_10”，Thermo Fisher Scientific)，每个测定对20ng gDNA进行TaqMan SNP基因分型测定，并根据制造商的说明书在QuantStudio

剪接报告基因分析

在计算机上设计小基因构建体，通过GeneScript合成，并亚克隆到具有GFP剪接对照的载体中。将HEK293T TDP-43敲除细胞和亲本HEK-293T细胞接种到标准P12组织培养板中(1.6×10

pTBUNC13A小基因构建体的生成

使用以下引物从人基因组DNA扩增含有人UNC13A隐蔽外显子序列和隐蔽外显子上游(内含子19末端的50bp、整个外显子20、隐蔽外显子上游的整个内含子20序列)和下游(约300bp内含子20)的核苷酸侧翼序列的pTB UNC13A小基因构建体：FWD 5’-3’＝AGGTCATATGCACTGCTATAGTGGGAAGTTC(SEQ ID NO:411)和RVS 5’-3’＝CTTACATATGTAATAACTCAACCACACTTCCATC SEQ ID NO:412)；并亚克隆到pTB载体的NdeI位点中。注意先前使用类似的方法研究其他TDP-43靶的TDP-43剪接调控(44)。

使用pTB小基因和TDP-43过表达构建体拯救UNC13A剪接

使HeLa细胞在Opti-MEM I减少血清培养基、GlutaMAX补充物(Gibco)加10％胎牛血清(Sigma)和1％青霉素/链霉素(Gibco)中生长。对于双转染和敲低实验，首先在无血清培养基中并使用Lipofectamine 2000，遵循制造商的说明书(Invitrogen)，用1.0μg ofpTB UNC13A小基因构建体和1.0μg以下质粒之一转染细胞：GFP、GFP-TDP-43或GFP-TDP-435FL(先前已描述了表达GFP-标记的TDP-43蛋白的构建体(40,44)。转染后四小时，将培养基用含有siLentfect(Bio-Rad)和siRNA复合物(AllStars Neg)的完全培养基替换。遵循制造商的方案，对照siRNA或针对TARDBP 3’UTR的siRNA，其为在TDP-43过表达构建体中不包含的区域)(Qiagen)。在收获细胞前六小时，添加终浓度为100μg/ml的环己酰亚胺(Sigma)。然后收获细胞，并遵循制造商的说明书，使用TRIzol试剂(Zymo Research)提取RNA。使用具有RNA抑制剂的高容量cDNA逆转录试剂盒(Applied Biosystems)将约1μg RNA转化为cDNA。使用SYBR GreenER qPCR SuperMix(Invitrogen)使用QuantStudio7

使用以下引物对：

在死后脑样品中的原位杂交UNC13A隐蔽外显子分析

患者和诊断性神经病理学评估

用于本研究的死后脑组织样品从加州大学旧金山分校(University ofCalifornia San Francisco，UCSF)神经退行性疾病脑库获得。表6提供了人口统计学、临床和神经病理学信息。根据《赫尔辛基宣言(Declaration of Helsinki)》并遵循UCSF人类研究委员会批准的程序，从受试者或其代理决策者处获得脑捐献的同意书。将脑新鲜切成1cm厚的冠状厚片，并将替代性切片在10％中性缓冲福尔马林中固定72h。将来自内侧额叶极的块从固定的冠状厚片中解剖出来，在分级蔗糖溶液中冷冻保护，冷冻，并如前所述切成50μm厚的切片(45)。如前所述进行临床和神经病理学诊断(44)。基于临床和神经病理学评估选择受试者。所选患者的主要临床诊断为行为变异型额颞叶痴呆(bvFTD)，伴或不伴肌萎缩性侧索硬化(ALS)/运动神经元疾病(MND)，以及2)神经病理学诊断为B型额颞叶变性(FTLD)-TDP。如果受试者具有已知的致病突变、死后间隔≥24h、阿尔茨海默病神经病理学变化>低、Thal淀粉样阶段>2、Braak神经原纤维缠结阶段>4、CERAD神经炎性斑块密度>稀疏和Lewy小体病>脑干为主，则排除受试者(45)。

表6：死后脑组织样品

原位杂交(ISH)和免疫荧光

为了检测单个RNA分子，使用BaseScope Red测定试剂盒(ACDBIO,USA)。将来自每个受试者的一个50μm厚的固定冷冻组织切片用于染色。在适当时在无RNA酶条件下进行实验。使用靶向所关注转录物UNC13A的探针，该探针对mRNA(外显子20/21接合处)或含有剪接靶的隐蔽外显子(外显子20/隐蔽外显子接合处)具有特异性。还包括阳性(智人PPIB)和阴性(大肠杆菌DapB)对照探针。原位杂交基于BaseScope Red测定试剂盒的供应商规格来进行。简言之，将冷冻组织切片在PBS中洗涤，并在4℃下置于LED生长灯(HTG Supply，LED-6B240)室中48h，以淬灭组织自发荧光。在PBS中快速冲洗切片，并阻断内源过氧化物酶活性。将切片转移到载玻片上并干燥过夜。对载玻片进行靶检索和蛋白酶处理，然后进行ISH。用TSA Plus-Cy3(Akoya Biosciences)检测探针，并用针对TDP-43(兔多克隆抗体，Proteintech，RRID:AB_615042)和NeuN(豚鼠多克隆抗体，Synaptic systems)的抗体进行免疫荧光染色，并用DAPI(Life Technologies)对细胞核进行复染。

图像采集和分析

使用具有63x油浸物镜(1.4NA)的Leica SP8共焦显微镜捕获z-栈图像。对于RNA探针，在最初采集期间基于PPIB和DAPB信号建立图像捕获设置，并在UNC13A探针和受试者中保持不变。基于病例之间的染色强度差异，修改TDP-43和NeuN图像采集设置。对于每种情况，跨越第2-3皮质层捕获6个不重叠的Z-堆栈图像。使用ImageJ中的“分析颗粒”插件对UNC13A隐蔽外显子的RNA点进行定量。简言之，使用相似的参数对所有图像的亮度进行调整，并转换为最大强度Z投影，对图像的自动阈值(模态间)进行调整，并对点进行计数(大小：6-无穷大，圆形度–0-1)。

连锁不平衡分析

2020年7月，从Answer ALS下载由GATK HaplotypeCallers生成的重新校准的VCF文件。将VCFtools(0.1.16)用于筛选内含子20-21中的位点。使用BCFtools(1.8)合并过滤的VCF文件。由于存在含有超过2个等位基因的位点，通过使用命令“vcftools--geno-chisq--min-alleles 2--max-alleles 8”(4.0.0)，使用卡方统计来测试基因型独立性。

统计学方法

使用存活(3.1.12)R软件包中的coxph函数比较存活曲线，所述软件包拟合多变量Cox比例风险模型，所述模型含有性别、报告的基因突变和发病年龄，并进行评分(对数秩)检验。效应大小被报告为风险比。使用cox.zph()函数测试比例风险假设。使用suvminer(v.0.4.8)R软件包中的ggsurvplot()绘制存活曲线。

在过滤掉所有不具有隐蔽外显子信号的样品(n＝4)后，进行隐蔽外显子信号和TDP-43磷酸化水平或风险单体型数量之间的相关性分析。使用lmerTest R软件包(3.1.3)分析线性混合效应模型。

使用R(版本4.0.0)或Prism 8(GraphPad)进行统计学分析，它们也用于生成图表。

结果

为了发现由TDP-43(也可能在疾病发病机理中发挥作用)调节的隐蔽剪接靶标，利用了最近生成的RNA测序(RNA-seq)数据集(11)。为了确定与细胞核中TDP-43的损失相关的变化，Liu等人聪明地意识到，他们可以使用荧光活化细胞分选(FACS)来富集含有或不含有TDP-43的神经元细胞核，然后进行RNA-seq来比较TDP-43阳性和TDP-43阴性神经元细胞核之间的转录组，这些细胞核来自FTD/ALS患者死后大脑的7个冷冻新皮质。鉴定了大量有趣的差异表达基因(11)。本研究以不同的方式重新分析了这些数据——不像Liu等人那样寻找差异表达基因，而是寻找受TDP-43损失影响的新型选择性剪接事件。使用两条流水线MAJIQ(12)和LeafCutter(13)进行剪接分析，旨在检测新型剪接事件(图1A)。每个RNA-seq文库含有约50M个长度为125bp的配对端读段，更大的读段长度和覆盖率有助于发现由TDP-43损失引起的剪接变化。用MAJIQ和152与LeafCutter(P<0.05)鉴定197个选择性剪接事件(P(ΔΨ>0.1)>0.95)(ΔΨ，两个条件之间局部剪接变异的变化；P：概率)。两次分析之间共有65个选择性剪接基因(图1B)，可能是因为每个工具使用不同的转录变异定义和不同的标准来控制假阳性。值得注意的是，通过两种工具鉴定的选择性剪接基因为STMN2和POLDIP3，这两种基因都被广泛验证为真正的TDP-43剪接靶标(8–10,14)。

出乎意料地，发现UNC13A是TDP-43从核中缺失的神经元中最显著的选择性剪接基因之一(图1B和图5A-5D)。TDP-43的耗竭导致在典型外显子20和21之间包含128bp隐蔽外显子#1(hg38；chr19:17642414-17642541)(图1C和1D)或在外显子20和21之间包含###bp隐蔽外显子#2(hg38；chr19:17642414-17642591)。由于观察到chr19:17642541 3’剪接受体的较高使用率，研究的焦点在于128bp隐蔽外显子#1。在下文中，在该实施例中，如果没有指定，提到的隐蔽外显子是指128bp的隐蔽外显子#1。该新的外显子被称为CE#1(隐蔽外显子)，在野生型神经元细胞核中不存在(图1C)，并且不存在于UNC13A的任何已知人同种型中(15)。此外，对SH-SY5Y细胞中TDP-43的紫外交联和免疫沉淀(iCLIP)数据的分析(3)提供了TDP-43直接结合携带该隐蔽外显子的内含子的证据(图1D)。通过直接测序证实了128bp隐蔽外显子序列插入到成熟转录物中。UNC13A的内含子20-21和CE序列在大多数灵长类动物中是保守的(图6A和6B)，但在小鼠中不是保守的，类似于STMN2以及TDP-43的其他隐蔽剪接靶标(4,8,9)。总之，这些结果表明，TDP-43的功能是抑制UNC13AmRNA转录物中隐蔽外显子的包含。

为了测试TDP-43是否直接调节该UNC13A隐蔽剪接事件，使用强力霉素诱导的shRNA来降低SH-SY5Y细胞中的TDP-43水平。使用定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测隐蔽外显子包含，其存在于TDP-43耗竭的细胞中(通过用shTARDBP处理)，但不存在于对照shRNA处理的细胞中(图1E)。随着隐蔽外显子水平的增加，在TDP-43耗竭时典型UNC13A转录物的水平相应降低(图1E)。通过免疫印迹，还观察到TDP-43耗竭细胞中UNC13A蛋白的显著减少(图1F、1G)。TDP-43水平在诱导性运动神经元(iMN)(图1H、1I；图7A和7B)和源自人iPS细胞的兴奋性神经元(I

UNC13A属于最初在秀丽隐杆线虫(C.elegans)中发现的基因家族，这是基于在这些基因中具有突变(16)的动物表现出的不协调(unc)运动，这是由于神经递质释放的缺陷。UNC13A编码在神经系统中表达的大的多结构域蛋白，在神经系统中，它定位于神经肌肉接合处，并在囊泡启动步骤中发挥重要作用，之后进行突触囊泡融合(17–20)。体外研究表明，TDP-43耗竭时的隐蔽外显子剪接事件导致UNC13A表达显著降低(图1F)。缺乏Unc13a(也称为Munc13-1)的小鼠表现出脊髓运动神经元的形态学缺陷和神经肌肉接合处的功能缺陷。这些数据表明TDP-43的耗竭导致UNC13A功能丧失(21)。

为了将这种对UNC13A隐蔽外显子包含的分析扩展到更大的患者样品集合，首先分析了来自梅奥诊所脑库的一系列115个额叶皮质脑样品，并且发现与健康对照相比，FTLD-TDP患者中的UNC13A隐蔽外显子(CE)水平显著增加(图2A)。还观察到一些亚型的FTD患者的额叶皮质中总UNC13A转录物的降低(图8)。接下来，分析来自纽约基因组中心(New YorkGenome Center，NYGC)的脑样品。在对相对高质量的数据(方法)进行过滤后，该数据集包括来自413个个体的1151个样品(每个个体多于一个组织)的RNA-seq数据，其中330个是ALS或FTD患者。因为Liu等人的FACS分析(11)表明，TDP-43损失的病理性神经元细胞核仅占所有神经元细胞核的约7％并且占所有皮质细胞的不到2％(11)，所以预期剪接分析算法将难以检测从大量RNA测序生成的RNA-seq数据中的差异剪接基因。为了克服这个问题，特别寻找跨越外显子20-CE和CE-外显子21接合处的读数。由于由批量测序生成的噪声，如果跨越至少一个外显子-外显子接合处有两个以上的读段，则UNC13A剪接变体被评分为存在。鉴定符合上述标准的来自49名患者的63份样品。值得注意的是，UNC13A剪接变体在由神经病理学证实的FTLD-TDP患者捐献的近50％的额叶皮质和颞叶皮质组织中被检测到。在一些ALS患者中也检测到剪接变体，这些ALS患者的病理学尚未得到证实(图9)。值得注意的是，UNC13ACE未在来自FTLD-FUS(n＝9)、FTLD-TAU(n＝18)和ALS-SOD1(n＝22)患者的任何样品中观察到，也未在任何对照样品(n＝197)中观察到。因此，UNC13A隐蔽外显子包含是TDP-43蛋白病的强大而特异的病理学方面(图2B)。

一旦TDP-43从细胞核中耗竭并积聚在细胞质中，它就会被磷酸化。过度磷酸化TDP-43(pTDP-43)是病理学的关键特征(22)。为了确定pTDP-43水平和UNC13A隐蔽外显子包含之间的关系，对来自梅奥诊所脑库的一组86名FTD患者进行了分析，从额叶皮质获得这些患者的RNA-seq和pTDP-43水平。在所有疾病亚型的患者中发现了较高pTDP-43水平和较高UNC13A隐蔽外显子包含水平之间的显著关联(Spearman的ρ＝0.564，P<0.0001)(图3C和3D，以及图10A；使用未转换数据的图：图10E和10F)。总UNC13A转录物的水平也与pTDP-43水平负相关(图10B、10C、10G和10H)。因此，UNC13A隐蔽外显子包含和降低的全长转录水平似乎是多发性TDP-43蛋白病的一个共同特征，并与TDP-43病理学的负荷密切相关。

为了在单细胞灵敏度下以空间分辨率可视化UNC13A CE，设计了定制BaseScope

UNC13A是ALS和FTD-ALS的顶级GWAS命中之一，在多项研究中重复(23–28)。UNC13A中的SNP与散发性ALS(24)和散发性FTD伴TDP-43病理学(23)的风险增加相关。除了增加对ALS的易感性以外，UNC13A中的SNP也与ALS患者的较短存活期相关(29–32)。但是UNC13A的基因变异增加ALS和FTD风险的机制尚不清楚。值得注意的是，两个最显著相关的SNPrs12608932(A>C)和rs12973192(C>G)，都位于我们发现携带隐蔽外显子的同一内含子中，rs12973192正好位于隐蔽外显子本身(图4A)。这立即表明了一个假设，即这些SNP(或由这些SNP标记的附近的其他基因变异)可能使UNC13A在TDP-43耗竭时更容易受到隐蔽外显子包含的影响。为了检验这一假设，分析了跨越内含子20-21的支持包含隐蔽外显子的RNA-seq读段的百分比(图12A和12B)。在初始剪接分析中包括的7个来自TDP-43耗竭的神经元细胞核的RNA-Seq文库中，3名患者中对于rs12973192处风险等位基因为纯合(G/G)的2名患者和为杂合(C/G)的一名患者显示几乎每个映射于内含子20-21的UNC13A mRNA中都包含隐蔽外显子。相比之下，对于参考等位基因(C/C)为纯合的患者显示包含隐蔽外显子少得多。另一种直接评估UNC13A风险等位基因对隐蔽外显子包含的影响的方式是测量来自对于风险等位基因为杂合的个体的RNA中潜在的等位基因不平衡。换言之，从作为保护性等位基因的风险等位基因中产生的具有隐蔽外显子包含的RNA数量相等吗？还是更多来自风险等位基因？用于检测在TDP-43敲低后隐蔽外显子包含的两个iMN系(图1G，iMN1和iMN2)在rs12973192处是杂合的(C/G)。对跨越隐蔽外显子的RT-PCR产物进行测序，并分析这两个样品的等位基因分布，以及来自原始RNA-seq数据集的一个患者样品(图1A)，其在rs12973192处是杂合的(C/G)(图12B)。在剪接变体中发现了C和G等位基因百分比之间的显著差异，其中风险等位基因的包含率更高(p值＝0.01，双侧配对t检验；图4B和图12C)。鉴于风险等位基因对隐蔽外显子包含的影响的证据，通过对梅奥诊所脑库数据集中的FTD-TDP患者(n＝86)在rs12973192和rs12608932处的UNC13A风险等位基因进行基因分型来扩展分析。排除了一名在rs12973192处对于参考等位基因(C/C)为纯合的但在rs12608932处为杂合(A/C)的患者。其余患者(n＝85)在两个基因座上具有完全相同数量的风险等位基因。首先将隐蔽外显子包含的水平(来自额叶皮质的RNA-seq)和rs12973192处的风险等位基因数量之间的相关性建模为简单的线性回归，这是在风险等位基因数量和UNC13A隐蔽外显子包含的丰度之间的强相关性(P＝0.0136)(图4C)。在多元线性回归模型(调整的R

GWAS SNP通常不会导致该性状，而是“标记”其他邻近的基因变异(33)。因此，人类遗传学的主要挑战是从GWAS命中到识别增加疾病风险的致病基因变异(34)。使用ALS GWAS结果的线性混合模型分析(36)生成的LocusZoom(35)图(图4A)表明，UNC13A上最强的关联信号确实是在两个前导SNP(rs12973192和rs12608932)周围的区域中。为了寻找也可能通过影响隐蔽外显子包含而导致疾病风险，但不包括在原始GWAS中的内含子20-21中的其他基因变体，分析了ALS患者的全基因组测序数据(Answer ALS)中鉴定的基因变体。该数据集包括297名欧洲血统的ALS患者。通过寻找内含子20-21中与rs12608932和rs12973192都处于连锁不平衡的其他基因座来寻找可以被这两个SNP标记的新的基因变体。发现一个符合这些标准，rs56041637(与rs12608932的FDR-校正的P-值<0.0001，与rs12973192的P-值<0.0001)(图14)。rs56041637是CATC重复插入。在患者数据集中，观察到对于在rs12608932和rs12973192处的风险等位基因为纯合的患者倾向于在rs56041637处具有3至5个CATC重复；对于在rs12608932和rs12973192处的参考等位基因为纯合的患者倾向于在rs56041637处具有较短(0至2)重复。因此，除了两个前导GWAS SNP(rs12608932和rs12973192)，现在另一个rs56041637被命名为，当TDP-43从细胞核中耗竭时，通过使UNC13A更容易受到隐蔽外显子包含影响而潜在地增加疾病风险。

为了直接测试UNC13A中的这三种变体(它们是FTD/ALS风险单体型的一部分)是否在TDP-43耗竭后增加隐蔽外显子包含，我们合成了含有风险单体型或保护性单体型的小基因报告基因构建体(图4F)。该报告分子使用双向报告分子共表达全长EGFP和被UNC13A内含子20-21中断的mCherry构建体，该构建体具有参考序列(对照)或rs12608932(C)、rs56041637((CATC)4)和rs12973192(G)处的ALS/FTD风险等位基因。用每种小基因报告基因构建体转染不内源性表达UNC13A的WT和TDP-43缺陷型HEK-293T细胞(37)。使用RT-PCR，发现两个版本的内含子20-21在WT细胞中都被有效地剪接出来(图4G，泳道1-4)。然而，在TDP43-/-细胞中，完全切除内含子20-21的剪接产物降低。相反，含有隐蔽外显子、隐蔽外显子的较长变体(隐蔽外显子#2)(图5A)或CE和内含子20-CE两者(图4G，泳道5-6)的剪接产物。引人注目的是，在用内含子携带风险单体型的小基因构建体转染的TDP-43–/–细胞中，完整内含子20-21剪接降低甚至更大，同时隐蔽剪接产物增加(图4G，泳道7-8)。不依赖于TDP-43的剪接报告基因的表达和剪接机制的效率由不依赖于TDP-43的EGFP的表达水平显示。还测试了不同的小基因报告基因构建体，该构建体具有嵌入在CFTR基因背景中的UNC13A内含子。在用该构建体转染的HeLa细胞中TDP-43的敲低导致了错误剪接缺陷。证明了TDP-43在调节这种剪接事件中的直接作用，表达WT TDP-43(但不是具有五个突变为亮氨酸(5FL)的苯丙氨酸残基的RNA结合缺陷型突变体版本)挽救了错误剪接(图4H)。总之，这两种测定提供了直接的功能证据，即1)TDP-43调节UNC13A内含子20-21的剪接，和2)当TDP-43为功能失调的时，与ALS和FTD易感性相关的基因变体增强了隐蔽外显子包含。

为了确定这些SNP是否影响梅奥诊所脑库中FTD-ALS患者(n＝205)的存活，评估了风险单体型与疾病发作后的存活时间的相关性。使用Cox多变量分析调整已知影响存活的其他因素(基因突变、性别、发病年龄)，在加性模型下，风险单体型与存活时间相关(对数秩p值＝0.01)((图4I)。个体携带的风险单体型数量是强有力的预后因素(风险比(HR)＝1.733，p值＝0.00717)(图15A)。在显性模型(对数秩p值＝0.05，图15B和15C)和隐性模型(对数秩p值＝0.02，图15D和15E)下，该关联仍显著，表明携带风险单体型会减少患者疾病发作后的存活时间。当仅包括携带C9ORF72六核苷酸重复扩增或GRN突变的患者时，效果更显著(图16A-16F)。因此，UNC13A中增加隐蔽外显子包含的基因变体与患者存活率降低相关。

在此，发现TDP-43调节FTD/ALS基因UNC13A中的隐蔽剪接事件。与疾病风险相关的最重要的基因变体，包括我在此提名的一个新的变体，就位于具有携带隐蔽外显子本身的内含子中。来自携带这些SNP的FTLD-TDP患者的脑样品比来自不含风险等位基因的FTLD-TDP患者的样品表现出更多的UNC13A隐蔽外显子包含。这些风险等位基因似乎不足以引起隐蔽外显子包含，因为我们没有在来自健康对照样品(例如GTEx)的RNA-seq数据中检测到它们。相反，在UNC13A中的风险等位基因是真正的基因风险因子或修饰因子，并且隐蔽剪接事件是TDP-43损失依赖性的。这样，UNC13A风险等位基因被认为是一种阿喀琉斯之踵(Achilles’heel)，潜伏在表面之下，直到TDP-43开始功能失调才引发问题(图4J)。预期不会观察到UNC13A编码区的严重功能缺失突变，因为这些突变会导致早期致死，如在小鼠中。促进隐蔽外显子包含的SNP本身似乎是无害的，只有当TDP-43功能受损(例如，突变或细胞核耗竭)时才变得有害。在真正的FTD-ALS风险基因中发现一种新型TDP-43依赖性隐蔽剪接事件，为验证UNC13A作为ALS和FTD的生物标志物和治疗靶标开辟了许多新的方向。仍然难以理解为什么TDP-43病理与ALS或FTD或FTD/ALS或甚至其他年龄相关性神经病理学变化相关联(38)。TDP-43功能失调相关性隐蔽剪接在人脑的不同区域和神经元情形中发挥作用。很容易推测，除了STMN2和现在的UNC13A以外，可能还有其他重要的隐蔽外显子剪接事件(以及增加或减少对某些事件易感性的基因变异)的疾病亚型特异性组合，这些事件造成TDP-43功能失调临床表现的异质性。

实施例2：使用反义寡核苷酸抑制UNC13A隐蔽外显子剪接变体

合成靶向UNC13A转录物的反义寡核苷酸(ASO)(表2-5)，并通过脂质转染或裸(自由)摄取递送至培养的iPSC来源的运动神经元(MN)。将iMN在ASO存在下培养2-3天，随后引入递送乱序或TDP-43靶向shRNA的慢病毒。慢病毒感染后再培养细胞另外4-5天，然后分离mRNA和蛋白质。将mRNA逆转录成cDNA，用对UNC13A隐蔽外显子包含具有特异性的引物/探针进行qPCR，此外还用靶向正确剪接的(WT)UNC13A和管家基因的引物/探针进行。通过蛋白质印迹处理蛋白水解物用于UNC13A检测。

表2：靶向UNC13A的外显子20剪接供体区域的反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

/>

表3：靶向UNC13A的隐蔽外显子剪接受体区域的反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

表4：靶向UNC13A的隐蔽外显子剪接供体区域的反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

表5：靶向UNC13A的外显子21剪接受体区域的反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

实施例3：反义寡核苷酸筛选

反义寡核苷酸(ASO)被设计成靶向UNC13A转录物的隐蔽外显子(表7A)。表7B的ASO1-45(SEQ ID NO:423-467)是18mer，以3个核苷酸间距平铺在含有剪接受体区(SEQ ID NO:641)的隐蔽外显子的5'端。表7B的ASO 121-142(SEQ ID NO:468-489)是18mer，以1个核苷酸间距平铺在隐蔽外显子的5'端。表7B中的ASO 248-280(SEQ ID NO:490-522)是18mer，以3个核苷酸间距平铺在含有剪接供体区(SEQ ID NO:642)的隐蔽外显子的3'端。ASO的基因组坐标如下所示：隐蔽外显子的5'端：chr19:17,642,491-17,642,641；隐蔽外显子的3'端：chr19:17,642,363-17,642,470。合成了具有靶向UNC13A转录物的隐蔽外显子的2’MOE修饰的ASO(表7B)，并通过自由摄取以3mM的浓度递送至培养的iPSC来源的运动神经元(MN)。将运动神经元在UNC13A特异性ASO以及三种非靶向ASO存在下培养两天，随后引入递送乱序或TDP-43靶向shRNA的慢病毒。慢病毒感染后，将细胞再培养七天，然后分离mRNA。将mRNA逆转录成cDNA，并用对UNC13A隐蔽外显子包含具有特异性的引物/探针进行qPCR(图19A-19B)，此外还用靶向正确剪接的UNC13A的引物/探针进行(图19C-19D)。鉴定了活性ASO减少隐蔽外显子包含同时增加总UNC13ARNA水平的区域(5'剪接受体区域中的ASO：ASO 1-10和17-21对应于SEQ ID NO:423-432和439-443；3'剪接供体区中的ASO：分别对应于SEQ ID NO:491-498、502-507和513-514的ASO 249-256、260-265和271-272。21mer ASO被设计成进一步平铺这些区域(表8B)。表8B中的ASO 306-354(SEQ ID NO:523-571)是21聚体，以1个核苷酸间距平铺在隐蔽外显子(SEQ ID NO:643)的5'端。表8B中的ASO 355-423(SEQ ID NO:572-640)是21mer，以1个核苷酸间距平铺在隐蔽外显子(SEQ ID NO:644)的3'端。

表7A：UNC13A隐蔽外显子靶向区域

表7B：靶向UNC13A隐蔽外显子的18mer反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

/>

表8A：UNC13A隐蔽外显子靶向区域

表8B：间隔1bp的靶向UNC13A的21mer反义寡核苷酸

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

表9：活性18mer ASO靶向的隐蔽外显子亚区，减少了隐蔽外显子包含，同时增加了总UNC13A RNA水平

参考文献

1.C.Lagier-Tourenne，M.Polymenidou，D.W.Cleveland，TDP-43and FUS/TLS：Emerging roles in RNA processing and neurodegeneration.Hum.Mol.Genet.(2010)，doi：10.1093/hmg/ddq137.

2.M.Polymenidou，C.Lagier-Tourenne，K.R.Hutt，S.C.Huelga，J.Moran，T.YLiang，S.C.Ling，E.Sun，E.Wancewicz，C.Mazur，H.Kordasiewicz，Y.Sedaghat，J.P.Donohue，L.Shiue，C.F.Bennett，G.W.Yeo，D.W.Cleveland，Long pre-mRNA depletionand RNA missplicing contribute to neuronal vulnerability from loss of TDP-43.Nat.Neurosci.(2011)，doi：10.1038/nn.2779.

3.J.R.Tollervey，T.Curk，B.Rogelj，M.Briese，M.Cereda，M.Kayikci，J.

4.J.P.Ling，O.Pletnikova，J.C.Troncoso，P.C.Wong，TDP-43repression ofnonconserved cryptic exons is compromised in ALS-FTD.Science(80-.).(2015)，doi：10.1126/science.aab0983.

5.A.Donde，M.Sun，J.P.Ling，K.E.Braunstein，B.Pang，X.Wen，X.Cheng，L.Chen，P.C.Wong，Splicing repression is a major function of TDP-43in motorneurons.Acta Neuropathol.(2019)，doi：10.1007/s00401-019-02042-8.

6.M.Sun，W.Bell，K.D.LaClair，J.P.Ling，H.Han，Y.Kageyama，O.Pletnikova，J.C.Troncoso，P.C.Wong，L.L.Chen，Cryptic exon incorporation occurs inAlzheimer’s brain lacking TDP-43inclusion but exhibitingnuclear clearance ofTDP-43.Acta Neuropathol.(2017)，doi：10.1007/s00401-017-1701-2.

7.Y.H.Jeong，J.P.Ling，S.Z.Lin，A.N.Donde，K.E.Braunstein，E.Maiounie，B.J.Traynor，K.D.LaClair，T.E.Lloyd，P.C.Wong，Tdp-43cryptic exons are highlyvariable between cell types.Mol.Neurodegener.(2017)，doi：10.1186/s13024-016-0144-x.

8.J.R.Klim，L.A.Williams，F.Limone，I.Guerra San Juan，B.N.Davis-Dusenbery，D.A.Mordes，A.Burberry，M.J.Steinbaugh，K.K.Gamage，R.Kirchner，R.Moccia，S.H.Cassel，K.Chen，B.J.Wainger，C.J.Woolf，KEggan，ALS-implicatedprotein TDP-43 sustains levels of STMN2，a mediator of motOr neuron growth andrepair.Nat.Neurosci.(2019)，doi：10.1038/s41593-018-0300-4.

9.Z.Melamed，J.López-Erauskin，M.W.Baughn，O.Zhang，K.Drenner，Y.Sun，F.Freyermuth，M.A.McMahon，M.S.Beccari，J.W.Artates，T.Ohkubo，M.Rodriguez，N.Lin，D.Wu，C.F.Bennett，F.Rigo，S.Da Cruz，J.Ravits，C.Lagier-Tourenne，D.W.Cleveland，Premature polyadenylation-mediated loss of stathmin-2is a hallmark of TDP-43-dependent neurodegeneration.Nat.Neurosci.(2019)，doi：10.1038/s41593-018-0293-z.

10.M.Prudencio，J.Humphrey，S.Pickles，A.L.Brown，S.E.Hill，J.M.Kachergus，J.Shi，M.G.Heckman，M.R.Spiegel，C.Cook，Y.Song，M.Yue，L.M.Daughrity，Y.Carlomagno，K.Jansen-West，C.F.de Castro，M.DeTure，S.Koga，Y.C.Wang，P.Sivakumar，C.Bodo，A.Candalija，K.Talbot，B.T.Selvaraj，K.Burr，S.Chandran，J.Newcombe，T.Lashley，I.Hubbard，D.Caralano，D.Kim，N.Propp，S.Fennessey，D.Fagegaltier，H.Phatnani，M.Secrier，E.M.C.Fisher，B.Oskarsson，M.van Blitterswijk，R.Rademakers，N.R.Graff-Radford，B.F.Boeve，D.S.Knopman，R.C.Petersen，K.A.Josephs，E.Aubrey Thompson，T.Raj，M.Ward，D.W.Dickson，T.F.Gendron，P.Fratta，L.Petrucelli，Truncatedstathmin-2 is a marker of TDP-43 pathology in frontotemporaldementia.J.Clin.Invest.(2020)，doi：10.1172/JCI139741.

11.E.Y.Liu，J.Russ，C.P.Cali，J.M.Phan，A.Amlie-Wolf，E.B.Lee，Loss ofNuclear TDP-43 Is Associated with Decondensation of LINERetrotransposons.Cell Rep.(2019)，doi：10.1016/j.celrep.2019.04.003.

12.J.Vaquero-Garcia，A.Barrera，M.RGazzara，J.Gonzalez-Vallinas，N.F.Lahens，J.B.Hogenesch，K.W.Lynch，Y.Barash，A new view of transcriptomecomplexity and regulation through the lens of local splicing variations.Elife(2016)，doi：10.7554/eLife.11752.

13.Y.I.Li，D.A.Knowles，J.Humphrey，A.N.Barbeira，S.P.Dickinson，H.K.Im，J.K.Pritchard，Annotation-free quantification of RNA splicing usingLeafCutter.Nat.Genet.(2018)，doi：10.1038/s41588-017-0004-9.

14.A.Shiga，T.Ishihara，A.Miyashita，M.Kuwabara，T.Kato，N.Watanabe，A.Yamahira，C.Kondo，A.Yokoseki，M.Takahashi，R.Kuwano，A.Kakita，M.Nishizawa，H.Takahashi，O.Onodera，Alteration of POLDIP3 splicingassociated with loss offunction of TDP-43 in tissues affected with ALS.PLoSOne(2012)，doi：10.1371/journal.pone.0043120.

15.L.J.Carithers，K.Ardlie，M.Barcus，P.A.Branton，A.Britton，S.A.Buia，C.C.Compton，D.S.Deluca，J.Peter-Demchok，E.T.Gelfand，P.Guan，G.E.Korzeniewski，N.C.Lockhart，C.A.Rabiner，A.K.Rao，K.L.Robinson，N.V.Roche，S.J.Sawyer，A V.Segrè，C.E.Shive，A.M.Smith，L.H.Sobin，A.H.Undale，K.M.Valentino，J.Vaught，T.R.Young，H.M.Moore，L.Barker，M.Basile，A.Battle，J.Boyer，D.Bradbury，J.P.Bridge，A.Brown，R.Burges，C.Choi，D.Colantuoni，N.Cox，E.T.Dermitzakis，L.K.Derr，M.J.Dinsmore，K.Erickson，J.Fleming，T.Flutre，B.A.Foster，E.R.Gamazon，G.Getz，B.M.Gillard，R.Guigó，K.W.Hambright，P.Hariharan，R.Hasz，H.K.Im，S.Jewell，E.Karasik，M.Kellis，P.Kheradpour，S.Koester，D.Koller，A.Konkashbaev，T.Lappalainen，R.Little，J.Liu，E.Lo，J.T.Lonsdale，C.Lu，D.G.MacArthur，HMagazine，J.B.Maller，Y.Marcus，D.C.Mash，M.I.McCarthy，J.McLean，B.Mestichelli，M.Miklos，J.Monlong，M.Mosavel，M.T.Moser，S.Mostafavi，D.L.Nicolae，J.Pritchard，L.Qi，K.Ramsey，M.A.Rivas，B.E.Robles，D.CRohrer，M.Salvatore，M.Sammeth，J.Seleski，S.Shad，L.A.Siminoff，M.Stephens，J.Struewing，T.Sullivan，S.Sullivan，J.Syron，D.Tabor，M.Taherian，J.Tejada，G.F.Temple，J.A.Thomas，A.W.Thomson，D.Tidwell，H.M.Traino，Z.Tu，D.R.Valley，S.Volpi，G.D.Walters，L.D.Ward，X.Wen，W.Winckler，S.Wu，J.Zhu，A.Abdallah，A.Addington，J.M.Anderson，P.K.Bender，M.Cosentino，N.Diaz-Mayoral，T.Engel，F.Garci，A.Green，T.Hammond，K.Jaffe，J.Keen，M.Kennedy，P.Kigonya，B.Lander，S.Nampally，C.Ny，J.Robb，V.Santhanum，N.Sharopova，S.Singh，C.Soria，A.Sturcke，S.Sukari，E.J.Thomson，M.Tomaszewski，C.Trowbridge，F.Udoye，D.Vanscoy，N.Vatanian，E.L.Wilder，P.Williams，A Novel Approach to High-Quality Postmortem TissueProcurement：The GTEx Project.Biopreserv.Biobank.(2015)，doi：10.1089/bio.2015.0032.

16.S.Brenner，The genetics of Caenorhabditis elegans.Genetics(1974)，doi：10.1093/genetics/77.1.71.

17.N.Lipstein，N.M.Verhoeven-Duif，F.E.Michelassi，N.Calloway，P.M.VanHasselt，K.Pienkowska，G.Van Haaften，M.M.Van Haelst，R.Van Empelen，I.Cuppen，H.C.Van Teeseling，A.M.V.Evelein，J.A.Vorstman，S.Thoms，O.Jahn，K.J.Duran，G.R.Monroe，T.A.Ryan，H.Taschenberger，J.S.Dittman，J.S.Rhee，G.Visser，J.J.Jans，N.Brose，Synaptic UNC13A protein variant causes increasedneurotransmission and dyskinetic movement disorder.J.Clin.Invest.(2017)，doi：10.1172/JCI90259.

18.L.Deng，P.S.Kaeser，W.Xu，T.C.Südhof，RIM proteins activate vesiclepriming by reversing autoinhibitory homodimerization of munc13.Neuron (2011)，doi：10.1016/j.neuron.2011.01.005.

19.I.Augustin，C.Rosenmund，T.C.Südhof，N.Brose，Munc13-1 is essentialfor fusion competence of glutamatergic synaptic vesicles.Nature(1999)，doi：10.1038/22768.

20.M.A.

21.F.Varoqueaux，M.S.Sons，J.J.Plomp，N.Brose，Aberrant Morphology andResidual Transmitter Release at the Munc13-Deficient Mouse NeuromuscularSynapse.Mol.Cell.Biol.(2005)，doi：10.1128/mcb.25.14.5973-5984.2005.

22.M.Hasegawa，T.Arai，T.Nonaka，F.Kametani，M.Yoshida，Y.Hashizume，T.G.Beach，E.Buratti，F.Baralle，M.Morita，I.Nakano，T.Oda，K.Tsuchiya，H.Akiyama，Phosphorylated TDP-43 in frontotemporal lobar degeneration and amyotrophiclateral sclerosis.Ann.Neurol.(2008)，doi：10.1002/ana.21425.

23.F.P.Diekstra，V.M.Van Deerlin，J.C.Van Swieten，A.Al-Chalabi，A.C.Ludolph，J.H.Weishaupt，O.Hardiman，J.E.Landers，R.H.Brown，M.A.Van Es，R.J.Pasterkamp，M.Koppers，P.M.Andersen，K.Estrada，F.Rivadeneira，A.Hofman，A.G.Uitterlinden，P.Van Damme，J.Melki，V.Meininger，A.Shatunov，C.E.Shaw，P.N.Leigh，P.J.Shaw，K.E.Morrison，I.Fogh，A.Chiò，B.J.Traynor，D.Czell，M.Weber，P.Heutink，P.I.W.De Bakker，V.Silani，W.Robberecht，L.H.Van Den Berg，J.H.Veldink，C9orf72 and UNC13A are shared risk loci for amyotrophic lateral sclerosis andfrontotemporal dementia：A genome-wide meta-analysis.Ann.Neurol.(2014)，doi：10.1002/ana.24198.

24.M.A.Van Es，J.H.Veldink，C.G.J.Saris，H.M.Blauw，P.W.J.Van Vught，A.Birve，R.Lemmens，H.J.Schelhaas，E.J.N.Groen，M.H.B.Huisman，A.J.Van Der Kooi，M.De Visser，C.Dahlberg，K.Estrada，F.Rivadeneira，A.Hofman，M.J.Zwarts，P.T.C.VanDoormaal，D.Rujescu，E.Strengman，I.Giegling，P.Muglia，B.Tomik，A.Slowik，A.G.Uitterlinden，C.Hendrich，S.Waibel，T.Meyer，A.C.Ludolph，J.D.Glass，S.Purcell，S.Cichon，M.M.

25.A.Nicolas，K.Kenna，A.E.Renton，N.Ticozzi，F.Faghri，R.Chia，J.A.Dominov，B.J.Kenna，M.A.Nalls，P.Keagle，A.M.Rivera，W.van Rheenen，N.A.Murphy，J.J.F.A.van Vugt，J.T.Geiger，R.van der Spek，H.A.Pliner，Shankaracharya，B.N.Smith，G.Marangi，S.D.Topp，Y.Abramzon，A.S.Gkazi，J.D.Eicher，A Kenna，F.O.Logullo，I.Simone，G.Logroscino，F.Salvi，I.Bartolomei，G.Borghero，M.R.Murru，E.Costantino，C.Pani，R.Puddu，C.Caredda，V.Piras，S.Tranquilli，S.Cuccu，D.Corongiu，M.Melis，A.Milia，F.Marrosu，M.G.Marrosu，G.Floris，A.Cannas，M.Capasso，C.Caponnetto，G.Mancardi，P.Origone，P.Mandich，F.L.Conforti，S.Cavallaro，G.Mora，K.Marinou，R.Sideri，S.Penco，L.Mosca，C.Lunetta，G.L.Pinter，M.Corbo，N.Riva，P.Carrera，P.Volanti，J.Mandrioli，N.Fini，A.Fasano，L.Tremolizzo，A.Arosio，C.Ferrarese，F.Trojsi，G.Tedeschi，M.R.Monsurrò，G.Piccirillo，C.Femiano，A.Ticca，E.Ortu，V.La Bella，R.Spataro，T.Colletti，M.Sabatelli，M.Zollino，A.Conte，M.Luigetti，S.Lattante，M.Santarelli，A.Petrucci，M.Pugliatti，A.Pirisi，L.D.Parish，P.Occhineri，F.Giannini，S.Battistini，C.Ricci，M.Benigni，T.B.Cau，D.Loi，A.Calvo，C.Moglia，M.Brunetti，M.Barberis，G.Restagno，F.Casale，G.Marrali，G.Fuda，I.Ossola，S.Cammarosano，A.Canosa，A.Ilardi，U.Manera，M.Grassano，R.Tanel，F.Pisano，.L.Mazzini，S.Messina，S.D’Alfonso，L.Corrado，L.Ferrucci，M.B.Harms，D.B.Goldstein，N.A.Shneider，S.Goutman，Z.Simmons，T.M.Miller，S.Chandran，S.Pal，G.Manousakis，S.Appel，E.Simpson，L.Wang，R.H.Baloh，S.Gibson，R.S.Bedlack，D.Lacomis，D.Sareen，A.Sherman，L.Bruijn，M.Penny，C.de A.M.Moreno，S.Kamalakaran，A.S.Allen，B.E.Boone，R.Brown，J.P.Carnlli，A.Chesi，W.K.Chung，E.T.Cirulli，G.M.Cooper，J.Couthouis，A.G.Day-Williams，P.A.Dion，A.D.Gitler，J.Glass，Y.Han，T.Harris，S.D.Hayes，A.L.Jones，J.Keebler，B.J.Krueger，B.N.Lasseigne，S.E.Levy，Y.F.Lu，T.Maniatis，D.McKenna-Yasek，R.M.Myers，S.Petrovski，S.M.Pulst，A.R.Raphael，J.Ravits，Z.Ren，G.A.Rouleau，P.C.Sapp，K.B.Sims，J.F.Staropoli，L.L.Waite，Q.Wang，J.R.Wimbish，W.W.Xin，H.Phatnani，J.Kwan，J.R.Broach，X.Arcila-Londono，E.B.Lee，V.M Van Deerlin，E.Fraenkel，L.W.Ostrow，F.Baas，N.Zaitlen，J.D.Berry，A.Malaspina，P.Fratta，G.A.Cox，L.M.Thompson，S.Finkbeiner，E.Dardiotis，E.Hornstein，D.J.MacGowan，T.Heiman-Patterson，M.G.Hammell，N.A.Patsopoulos，J.Dubnau，A.Nath，R.L.Musunuri，U.S.Evani，A.Abhyankar，M.C.Zody，J.Kaye，S.Wyman，A.LeNail，L.Lima，J.D.Rothstein，C.N.Svendsen，J.Van Eyk，N.J.Maragakis，S.J.Kolb，M.Cudkowicz，E.Baxi，M.Benatar，J.P.Taylor，G.Wu，E.Rampersaud，J.Wuu，R.Rademakers，S.Züchner，R.Schule，J.McCauley，S.Hussain，A.Cooley，M.Wallace，C.Clayman，R.Barohn，J.Statland，A.Swenson，C.Jackson，J.Trivedi，S.Khan，J.Katz，L.Jenkins，T.Burns，K.Gwathmey，J.Caress，C.McMillan，L.Elman，E.Pioro，J.Heckmann，Y.So，D.Walk，S.Maiser，J.Zhang，V.Silani，C.Gellera，A.Ratti，F.Taroni，G.Lauria，F.Verde，I.Fogh，C.Tiloca，G.P.Comi，G.Sorarù，C.Cereda，F.De Marchi，S.Corti，M.Ceroni，G.Siciliano，M.Filosto，M Inghilleri，S.Peverelli，C.Colombrita，B.Poletti，L.Maderna，R.Del Bo，S.Gagliardi，G.Querin，C.Bertolin，V.Pensato，B.Castellotti，W.Camu，K.Mouzat，S.Lumbroso，P.Corcia，V.Meininger，G.Besson，E.Lagrange，P.Clavelou，N.Guy，P.Couratier，P.Vourch，V.Danel，E.Bernard，G.Lemasson，H.Laaksovirta，L.Myllykangas，L.Jansson，M.Valori，J.Ealing，H.Hamdalla，S.Rollinson，S.Picketing-Brown，R.W.Orrell，K.C.Sidle，J.Hardy，A.B.Singleton，J.O.Johnson，S.Arepalli，M.Polak，S.Asress，S.Al-Sarraj，A.King，C.Troakes，C.Vance，J.de Belleroche，A.L.M.A.ten Asbroek，J.L.

26.K.Placek，G.M.Baer，L.Elman，L.McCluskey，L.Hennessy，P.M.Ferraro，E.B.Lee，V.M.Y.Lee，J.Q.Trojanowski，V.M.Van Deerlin，M.Grossman，D.J.Irwin，C.TMcMillan，UNC13A polymorphism contributes to frontotemporal disease insporadic amyotrophic lateral sclerosis.Neurobiol.Aging(2019)，doi：10.1016/j.neurobiolaging.2018.09.031.

27.C.Pottier，Y.Ren，R.B.Perkerson，M.Baker，G.D.Jenkins，M.vanBlitterswijk，M.DeJesus-Hemandez，J.G.J.van Rooij，M.E.Murray，E.Christopher，S.K.McDonnell，Z.Fogarty，A.Batzler，S.Tian，C.T.Vicente，B.Matchett，A.M.Karydas，G.Y.R.Hsiung，H.Seelaar，M.O.Mol，E.C.Finger，C.Graff，L.

28.M.van Blitterswijk，B.Mullen，A.Wojtas，M.G.Heckman，N.N.Diehl，M.C.Baker，M.DeJesus-Hernandez，P.H.Brown，M.E.Murray，G.Y.R.Hsiung，H.Stewart，A.M.Karydas，E.Finger，A.Kertesz，E.H.Bigio，S.Weintraub，M.Mesulam，K.J.Hatanpaa，C.L.White，M.Neumann，M.J.Strong，T.G.Beach，Z.K.Wszolek，C.Lippa，R.Caselli，L.Petrucelli，K.A.Josephs，J.E.Parisi，D.S.Knopman，R.C.Petersen，I.R.Mackenzie，W.W.Seeley，L.T.Grinberg，B.L.Miller，K B.Boylan，N.R.Graff-Radford，B.F.Boeve，D.W.Dickson，RRademakers，Genetic modifiers in carriers of repeat expansions inthe C9ORF72gene.Mol.Neurodegener.(2014)，doi：10.1186/1750-1326-9-38.

29.J.M.Vidal-Taboada，A.Lopez-Lopez，M.Salvado，L.Lorenzo，C.Garcia，N.Mahy，M.J.Rodríguez，J.Gamez，UNC13A confers risk for sporadic ALS andinfluences survival in a Spanish cohort，J.Neurol.(2015)，doi：10.1007/s00415-015-7843-z.

30.B.Yang，H.Jiang，F.Wang，S.Li，C.Wu，J.Bao，Y.Zhu，Z.Xu，B.Liu，H.Ren，X.Yang，UNC 13 A variant rs12608932 is associated with increased risk ofamyotrophic lateral sclerosis and reduced patient survival：a meta-analysis.Neurol.Sci.(2019)，doi：10.1007/s10072-019-03951-y.

31.H.H.G.Tan，H.J.Westeneng，H.K.van der Burgh，M A.van Es，L.A.Bakker，K.van Veenhuijzen，K.R.van Eijk，R.P.A.van Eijk，J.H.Veldink，L.H.van den Berg，The Distinct Traits of the UNC 13A Polymorphism in Amyotrophic LateralSclerosis.Ann.Neurol.(2020)，doi：10.1002/ana.25841.

32.F.P.Diekstra，P.W.J.van Vught，W.van Rheenen，M.Koppers，R.J.Pasterkamp，M.A.van Es，H.J.Schelhaas，M.de Visser，W.Robberecht，P.Van Damme，P.M.Andersen，L.H van den Berg，J.H.Veldink，UNC 13A is a modifier of survivalin amyotrophic lateral sclerosis.Neurobiol.Aging(2012)，doi：10.1016/j.neurobiolaging.2011.10.029.

33.D.J.Schaid，W.Chen，N.B.Larson，From genome-wide associations tocandidate causal variants by statistical fine-mapping Nat.Rev.Genet.(2018)，，doi：10.1038/s41576-018-0016-z.

34.M.D.Gallagher，A.S.Chen-Plotkin，The Post-GWAS Era：From Associationto Function.Am.J.Hum.Genet.(2018)，，doi：10.1016/j.ajhg.2018.04.002.

35.R.J.Pruim，R.P.Welch，S.Sanna，T.M.Teslovich，P.S.Chines，T.P.Gliedt，M.Boehnke，G.R.Abecasis，C.J.Willer，D.Frishman，in Bioinformatics(2011).

36.W.Van Rheenen，A.Shatunov，A.M.Dekker，R.L.McLaughlin，F.P.Diekstra，S.L.Pulit，R.A.A.Van Der Spek，U.

37.H B.Schmidt，A.Barreau，R.Rohatgi，Phase separation-deficientTDP43remains functional in splicing.Nat.Commun.(2019)，doi：10.1038/s41467-019-12740-2.

38.P.T.Nelson，D.W.Dickson，J.Q.Trojanowski，C.R.Jack，P.A.Boyle，K.Arfanakis，R.Rademakers，I.Alafuzoff，J.Attems，C.Brayne，I.T.S.Coyle-Gilchrist，H.C.Chui，D.W.Fardo，M.E.Flanagan，G.Halliday，S.R.K.Hokkanen，S.Hunter，G.A.Jicha，Y.Katsumata，C.H.Kawas，C.D.Keene，G.G.Kovacs，W.A.Kukull，A.I.Levey，N.Makkinejad，T.J.Montine，S.Murayama，M.E.Murray，S.Nag，R.A.Rissman，W.W.Seeley，R.A.Sperling，C.L.White，L.Yu，J.A.Schneider，Limbic-predominant age-related TDP-43encephalopathy(LATE)：Consensus working group report.Brain.142(2019)，pp.1503-1527.

39.W.J.Kent，C.W.Sugnet，T.S.Furey，K.M.Roskin，T.H.Pringle，A.M.Zahler，a.D.Haussler，The Human Genome Browser at UCSC.Genome Res.(2002)，doi：10.1101/gr.229102.

40.Zhang，Y.J.et al.Aberrant cleavage of TDP-43enhances aggregationand cellular toxicity.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(2009)doi：10.1073/pnas.0900688106.

41.Maury，Y.et al.Combinatorial analysis of developmental cuesefficiently converts human pluripotent stem cells into multiple neuronalsubtypes.Nat.Biotechnol.(2015)doi：10.1038/nbt.3049.

42.Prudencio，M.et al.Repetitive element transcripts are elevated inthe brain of C9orf72 ALS/FTLD patients.Hum.Mol.Genet.26，3421-3431(2017).

43.Hansen，K.D.，Brenner，S.E.&Dudoit，S.Biases in Illumina transcriptomesequencing caused by random hexamer priming.Nucleic Acids Res.(2010)doi：10.1093/nar/gkq224.

44.Prudencio，M.et al.Misregulation of human sortilin splicing leadsto the generation of a nonfunctional progranulin receptor.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(2012)doi：10.1073/pnas.1211577110.

45.Nana，A.L.et al.Neurons selectively targeted in frontotemporaldementia reveal early stage TDP-43 pathobiology.Acta Neuropathol.(2019)doi：10.1007/s00401-018-1942-8.

上文和附录A中描述的各种实施方案可以组合起来以提供其他实施方案。本说明书中引用的和/或申请数据表中列出的所有美国专利、美国专利申请公布、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利出版物，包括但不限于2021年4月6日提交的美国临时专利申请号63/171,522和2022年2月22日提交的美国临时专利申请号63/312,808，均以引用的方式整体并入本文如果需要采用各种专利、申请和出版物的概念来提供其他实施方案，可以修改实施方案的方面。

可以根据以上详细描述对实施方案进行这些和其他改变。通常，在所附权利要求书中，所用术语不应被解释为将权利要求限制于说明书和权利要求中公开的具体实施方案，而是应该被解释为包括所有可能的实施方案以及此类权利要求被授权的等同物的全部范围。因此，权利要求不受本公开的限制。

序列表

<110>梅兹治疗公司(Maze Therapeutics, Inc.)

<120>用于治疗TDP-43蛋白病的组合物和方法

<130>630264.403WO

<150>US 63/171,522

<151>2021-04-06

<150>US 63/312,808

<151>2022-02-22

<160>654

<170>PatentIn version 3.5

<210>1

<211>9985

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(9985)

<223>UNC13A参考mRNA NM_001080421.3

<400>1

gcccccggtg ctgaaccaag atggccggtg gcggccgggc cccggcgtga gccaagcgcg60

ggctgcagcc gggagatgcc ccagcccagc ggccgctgag cccgacccga cagagccggc 120

ccggccgcct ccggcccacc tgcgagctcg gagacatgtc tctgctttgc gttggagtca 180

aaaaagccaa gtttgatggt gcccaagaga aattcaacac gtacgtgacc ctgaaagtgc 240

agaatgtcaa gagcacgacc atcgcggtgc ggggcagcca gcccagctgg gagcaggatt 300

tcatgttcga gattaaccgt ctggatttgg gactgacggt ggaggtgtgg aataagggtc 360

tcatctggga cacaatggtg ggcactgtgt ggatcccact gaggaccatc cgccagtcca 420

atgaggaggg ccctggagag tggctgacgc tggactccca ggtcatcatg gcagacagtg 480

agatctgtgg caccaaggac cccaccttcc accgcatcct cctggacacg cgctttgagc 540

tacccttaga cattcctgaa gaggaggctc gctactgggc caagaagctg gagcagctca 600

atgctatgcg ggaccaggat gaatattcgt tccaagatga gcaagacaag cctctgcctg 660

tccccagcaa ccagtgctgc aactggaatt attttggctg gggtgagcag cacaacgatg 720

accccgacag tgcagtggat gatcgtgaca gtgactaccg cagtgaaacg agcaacagca 780

tcccgccgcc ctattatact acgtcacaac ccaacgcctc agtccaccaa tattctgttc 840

gcccaccacc cctgggctcc cgggagtcct acagtgactc catgcacagt tacgaggagt 900

tctctgagcc acaagccctc agccccacgg gtagcagccg ctatgcctct tccggggagc 960

tgagccaggg aagctctcag ctgagcgagg acttcgaccc tgacgagcac agcctgcagg1020

gctccgacat ggaggatgag cgggaccggg actcctacca ctcctgccac agctcggtca1080

gctaccacaa agactcgcct cgctgggacc aggatgagga agagctggag gaggacctgg1140

aggacttcct ggaggaggag gagctgcctg aagatgagga ggagctggag gaggaggagg1200

aggaggtgcc tgacgatttg ggcagctatg cccagcgtga agacgtagct gtggctgagc1260

ccaaagactt caaacgcatc agcctcccgc cagctgcccc agggaaggag gacaaggccc1320

cagtggcacc caccgaggcc cccgacatgg ccaaggtggc ccccaagcca gccacgcccg1380

acaaggtgcc tgcagctgag cagatccctg aggctgagcc acccaaggac gaggagagtt1440

tcaggccgag agaggatgag gaaggccagg aggggcagga ctccatgtcc agggccaagg1500

ccaactggct gcgtgccttc aacaaggtgc ggatgcagct gcaggaggcc cggggagaag1560

gagagatgtc taaatcccta tggttcaaag gcggcccagg gggcggtctc atcatcatcg1620

acagcatgcc agacatccgc aagaggaaac ctatcccact cgtgagcgac ttggccatgt1680

ccctggtcca gtccaggaaa gcgggcatca cctcggcctt ggcctccagc acgttgaaca1740

acgaggagct gaaaaaccac gtttacaaga agaccctgca agccttaatc taccccatct1800

cgtgcacgac gccacacaac ttcgaagtgt ggacggccac cacgcccacc tactgctacg1860

agtgcgaggg gctgctgtgg ggcatcgcga ggcagggcat gcgctgcacc gagtgcggtg1920

tcaagtgcca cgagaagtgc caggacctgc tcaacgccga ctgcctgcag cgggctgcgg1980

agaagagctc caagcacggg gcggaggacc ggacacagaa catcatcatg gtgctcaagg2040

accgcatgaa gatccgggag cgcaacaagc ccgagatctt cgagctcatc caggagatct2100

tcgcggtgac caagacggcg cacacgcagc agatgaaggc ggtcaagcag agcgtgctgg2160

acggcacgtc caagtggtcc gccaagatca gcatcaccgt ggtctgcgcc cagggcttgc2220

aggcaaagga caagacagga tccagtgacc cctatgtcac cgtccaggtc gggaagacca2280

agaaacggac aaaaaccatc tatgggaacc tcaacccggt gtgggaggag aatttccact2340

ttgaatgtca caattcctcc gaccgcatca aggtgcgcgt ctgggacgag gatgacgaca2400

tcaaatcccg cgtgaaacag aggttcaaga gggaatctga cgatttcctg gggcagacga2460

tcattgaggt gcggacgctc agcggcgaga tggacgtgtg gtacaacctg gacaagcgaa2520

ctgacaaatc tgccgtgtcg ggtgccatcc ggctccacat cagtgtggag atcaaaggcg2580

aggagaaggt ggccccgtac catgtccagt acacctgtct gcatgagaac ctgttccact2640

tcgtgaccga cgtgcagaac aatggggtcg tgaagatccc agatgccaag ggtgacgatg2700

cctggaaggt ttactacgat gagacagccc aggagattgt ggacgagttt gccatgcgct2760

acggcgtcga gtccatctac caagccatga cccactttgc ctgcctctcc tccaagtata2820

tgtgcccagg ggtgcctgcc gtcatgagca ccctgctcgc caacatcaat gcctactacg2880

cacacaccac cgcctccacc aacgtgtctg cctccgaccg cttcgccgcc tccaactttg2940

ggaaagagcg cttcgtgaaa ctcctggacc agctgcataa ctccctgcgg attgacctct3000

ccatgtaccg gaataacttc ccagccagca gcccggagag actccaggac ctcaaatcca3060

ctgtggacct tctcaccagc atcaccttct ttcggatgaa ggtacaagaa ctccagagcc3120

cgccccgagc cagccaggtg gtaaaggact gtgtgaaagc ctgccttaat tctacctacg3180

agtacatctt caataactgc catgaactgt acagccggga gtaccagaca gacccggcca3240

agaaggggga agttctccca gaggaacagg ggcccagcat caagaacctc gacttctggt3300

ccaagctgat taccctcata gtgtccatca ttgaggaaga caagaattcc tacactccct3360

gcctcaacca gtttccccag gagctgaatg tgggtaaaat cagcgctgaa gtgatgtgga3420

atctgtttgc ccaagacatg aagtacgcca tggaggagca cgacaagcat cgtctatgca3480

agagtgccga ctacatgaac ctccacttca aggtgaaatg gctctacaat gagtatgtga3540

cggaacttcc cgccttcaag gaccgcgtgc ctgagtaccc tgcatggttt gaacccttcg3600

tcatccagtg gctggatgag aatgaggagg tgtcccggga tttcctgcac ggtgccctgg3660

agcgagacaa gaaggatggg ttccagcaga cctcagagca tgccctattc tcctgctccg3720

tggtggatgt tttctcccaa ctcaaccaga gctttgaaat catcaagaaa ctcgagtgtc3780

ccgaccctca gatcgtgggg cactacatga ggcgctttgc caagaccatc agtaatgtgc3840

tcctccagta tgcagacatc atctccaagg actttgcctc ctactgctcc aaggagaagg3900

agaaagtgcc ctgcattctc atgaataaca ctcaacagct acgagttcag ctggagaaga3960

tgttcgaagc catgggagga aaggagctgg atgctgaagc cagtgacatc ctgaaggagc4020

ttcaggtgaa actcaataac gtcttggatg agctcagccg ggtgtttgct accagcttcc4080

agccgcacat tgaagagtgt gtcaaacaga tgggtgacat ccttagccag gttaagggca4140

caggcaatgt gccagccagt gcctgcagca gcgtggccca ggacgcggac aatgtgttgc4200

agcccatcat ggacctgctg gacagcaacc tgaccctctt tgccaaaatc tgtgagaaga4260

ctgtgctgaa gcgagtgctg aaggagctgt ggaagctggt tatgaacacc atggagaaaa4320

ccatcgtcct gccgcccctc actgaccaga cgatgatcgg gaacctcttg agaaaacatg4380

gcaagggatt agaaaagggc agggtgaaat tgccaagcca ctcagacgga acccagatga4440

tcttcaatgc agccaaggag ctgggtcagc tgtccaaact caaggatcac atggtacgag4500

aagaagccaa gagcttgacc ccaaagcagt gcgcggttgt tgagttggcc ctggacacca4560

tcaagcaata tttccacgcg ggtggcgtgg gcctcaagaa gaccttcctg gagaagagcc4620

cggacctgca atccttgcgc tatgccctgt cgctctacac gcaggccacc gacctgctaa4680

tcaagacctt tgtacagacg caatcggccc agggcttggg tgtagaagac cctgtgggtg4740

aagtctctgt ccatgttgag ctgttcactc atccaggaac tggggaacac aaggtcacag4800

tgaaagtggt ggctgccaat gacctcaagt ggcagacttc tggcatcttc cggccgttca4860

tcgaggtcaa catcattggg ccccagctca gcgacaagaa acgcaagttt gcgaccaaat4920

ccaagaacaa tagctgggct cccaagtaca atgagagctt ccagttcacg ctgagcgccg4980

acgcgggtcc cgagtgctat gagctgcagg tgtgcgtcaa ggactactgc ttcgcgcgcg5040

aggaccgcac ggtggggctg gccgtgctgc agctgcgtga gctggcccag cgcgggagcg5100

ccgcctgctg gctgccgctc ggccgccgca tccacatgga cgacacgggc ctcacggtgc5160

tgcgaatcct ctcgcagcgc agcaacgacg aggtggccaa ggagttcgtg aagctcaagt5220

cggacacgcg ctccgccgag gagggcggtg ccgcgcctgc gccttagcgc gggcggtcgg5280

ccgagcggca ctgcgcctgc gcggagggcg ctgggcgggg agggacgggg cttgcgcctt5340

ggtgggacct ccccaggggc ggggctcggg gggctccacg ccaagggtgg gctgcgccta5400

cgcccttgac tcagctttcc cttttgggga attaggaatg gaggatgccc cgccctctcg5460

ggaggccacg cccaagggcg cgacgaagga aggagccaca tccccaactt gaggccacgc5520

ccccagcacc tagggggcat tttgagctgg gatgggggaa acctcgtccc tatggaggag5580

gccacatccc ggggctctgg taccgggagg caccacctca tgtcccctgg aaaagccata5640

agatgggacc cagacccctg ggaccccaga ccaattgcca agtatggaaa tctcagctcc5700

ctcgaggggg ggccctgggc aaggggtagg gctctctgga gcgcccctct aggtggcctg5760

gggactggag ggaccaggat gctggttgga gggccccgga ataccggagt ccctttagat5820

atttgtgcaa aaaataaatg gggggagggg ggaggatggg atttcaaaag cacatgcgcc5880

cttgggcgcc caaaccctgg gggccgaggg gacggctctg gttccccacg ctgcccctac5940

ttccctttgg gagtttgcct ctccctctcc cccaacaaac ccagtcctca tatcatagag6000

ttcaacacac ccatttgaca gatggcaaaa ctgaggctta aagagctgct tgagacttgg6060

ccaaggttcc aggtgccata ccctctgtgc ccctccctta ggcctgtgtg ccccatggaa6120

gggtgggctg agatcgggat gacctgacac agctccctat tgctgctaat tccccctcgg6180

cctcctccaa ggggtgggaa ttccaggcca agacccctac ttcgcctttc cttctccggc6240

tgccaagcag gacctttgcc ctcagccctt tctcctggga tctccatggg ggatgccatg6300

agggcctccc accacaaaag agaatttggg atcccctggt cccaggtttc tccatccctt6360

cttccttttc cagaattttc caaataggaa agaacagaag gagaccagaa actctagggg6420

ggagaaagag aatgagagaa agagaatgag agagagagaa acacaaacac agtgacacag6480

tgagagctta gtctccaaga gcctattcat tgattcaaac acccaagcca caggatacct6540

cagatggccc tcttgccagc tggaagctct ttctccaatg agcaaagtta cagtgacctg6600

gctggagtta cctggtgcac ataggacctt aggggaaagt tcagcgtgga ctacacttgc6660

tctgggatct gcttttccac atgtgtgtat ggcacgcctt tttctgctgg attgggaagg6720

acaagatttt gctgtgctag ggagaaatga aaacggggtg agctgagtag ctgggtttct6780

ggaggataga acatcagatg gggaggcttt ccgaggtgaa gaatgagagg gaaccactta6840

ctagagagaa aagagctcca ggcctgggga acagcacgtg cgaaggccag gagagaagaa6900

ctgttgaaac aacgagaagg gtggcacggc tggagctgag ccagcaaggg ggatcgtgag6960

gagccttggg gttggggaga tctgcagaag catcagacca ggcagggcct cgtacgcagt7020

cctgaggagt tttactttta ttctaagaca gttggggagc tccaggagct gttttaagtt7080

ggggagagac tggattccag cctgcaaaag ctgttttgtg aagactaaaa ccagtgagga7140

gaggtggagg tgctttgggg acactgaaat ggattcttgg aaagattctg aaggctgtgt7200

tgaaaagaca cctatagctg tggggacatg actataatcc cagcatttgg ggagaccgag7260

gctggcagat cacttaaggt caggagtttg agaccagcct ggccaacatg gcgaaacccc7320

atctctgcta aaaatacaaa aattagctgg gtgcagtggt gcatgcctgt agtcccagct7380

actcaggaga ctgaggcggg agaattgttt gaaccctgga ggcagaggtt gtagtgagtc7440

gtgatcacac aactgcactc cagcctgggc aacagaacaa tactccattc cctcccctct7500

accccaccaa aaaaaaaaaa aaatcctgcc cttagatgag ctctagggct gctgagtaca7560

gttgtcccag ttgcacagtg cccaagggtt tggcattgct aagaaggcca cgtgcaaatc7620

ctagatattg agtgttgtat gtttgtgacg ttggtttccc gacatgtgaa tggcccaagt7680

gtctggaaga agtggcgcca ctttctaatt tgcttggaga tgttgcatgt cccttaaatt7740

cagacaggtg caggtaactg gaggttctga accaaaggtt aaaatgcaaa ttctcataca7800

gggttgggaa gttgtagcca gggataagct tatgtgactg ttatatggac tgaggagcag7860

atgtgaattt cgaaccatga catggctgag ggtaggggtc gggtggatgg atgattcagg7920

gttgtaaccc atagagccca aaggggaagt gatctgtgac ctggggtgag ggtgatctgg7980

aagatttttg gatggctgga aagaaatggg gaagtcgagc tgcctgagag agccaagtta8040

tttcccaaaa gattccttag gagtctttct gttcaagacc tccgtgtgtg tgtgtgtgtg8100

tttagggttc cccagcaatg gcccaggcat gtgaaggaaa caagcttctt cagggaatat8160

ttgttgaatg agttttcctg actcccaggc tagaactgtt tttgcaattt ccaccctctt8220

ttctttcccc cagagaactc ctattcgtcc ttcaaaaccc atcacggaaa cccctcttgg8280

agaaaaccct ccttccttcc cctcaggact ttcccagcca ccgtctctcc tccagtccag8340

cctgatgcca tgggactggg ggtttctctg tccagctctg tttctcccag actggggtct8400

gaggactctc aggaccccca actttaccta gcacaggctg ggcacaagtg ggtgacaggg8460

agtctacgcc tagtggaatt atgtattggg gcagggtcag tgtgagaata cacatccgca8520

tgcatgtctg tccatgtctg tccgtaccaa ccttcccctt ccacacggac ctgggcacat8580

aggaggtgtc tgagcctgac acatgggaca gagagtggac atggctgaga cacggacaga8640

gaaaagacaa ggagtccagg gggctgaaag ccttttgaaa tcaggaagtt cctgtattgg8700

cagaacaaag cccagagagg agcagggctt tcctcaacgc cacccagcaa gtggacacag8760

agcccggcct tggatgacac ctccagggtt ctgaaccctg gacctcgctt tatgcaagga8820

gctggcccca catttccatg aatcggggaa acagcacaag aaggttggcc tgtggcaggg8880

caagggttaa aggggtgaca ttgagggatg cctcagagtc aaagtcccct gaccaagagg8940

aatagagtag aaaacacaga gacagagggt gagatcacgc cccgatgagg acggagagag9000

acagagatgg agagagacat agaggtggaa atatacagag aaagataaat gcagagacca9060

aggcagggag tgtcggggga agtaaagagg gtgtcctgaa gaaagaagga tctgttcact9120

cttaccagtc tgtcctcgaa tgatttgcat aaaatgagga ggtgcctgtc cacaccccca9180

attcctctct caggccccag agcctgagac ctcaccatgc ccccatcaga gatgcaaaaa9240

actaaacacc caactagaaa tccttgggac ctctctcggc tgggatctca gagcctttct9300

gtcccctacc cctaccccat gtgctgtcga ttttgcagat ggggacaacc tggggcctcc9360

cggaactctg ccaccctggg gaagttgggg gagggcctta gtcccggatc acaaccccgt9420

ctgctcccca gaatcctttc ctaagaatcg ttgaggacca aagttgtctt tgctgacacg9480

tgttgctttt ctctttgcct tttattgttt cagagaaaaa tcaagttgac tgtgtcaagt9540

aacaccccac cccttacccc cgtccagcca tagtggctct ctggagacac aggtcacagg9600

cggagggtcc cctgatcatc cccaaccaca cagccagggg gacttgaccc ctgtccaccc9660

ctgtctcgtg ctccctcaga cccccacaaa ccggccaagc agtccgggga ggcttcccct9720

ccacacaact cttagcatgt gattgcagat gtgaaatcaa aacgttgttt gttttttgtt9780

ttgttttgat tctaccccgt cggtccagtg tctgcacaga cgccttcatt tctctgtaaa9840

tatgtgactt ggaacaaatg tttaacacaa acgagaagtg gtcatgaatg catggtgttg9900

agatgttttg cactattctg actttttggt ctctgtaaaa atattttatt aacagcagac9960

attaaaaaaa gaaaaaccac acaca9985

<210>2

<211>116

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(116)

<223>外显子20

<400>2

acaagcgaac tgacaaatct gccgtgtcgg gtgccatccg gctccacatc agtgtggaga60

tcaaaggcga ggagaaggtg gccccgtacc atgtccagta cacctgtctg catgag 116

<210>3

<211>164

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(164)

<223>外显子21

<400>3

aacctgttcc acttcgtgac cgacgtgcag aacaatgggg tcgtgaagat cccagatgcc60

aagggtgacg atgcctggaa ggtttactac gatgagacag cccaggagat tgtggacgag 120

tttgccatgc gctacggcgt cgagtccatc taccaagcca tgac164

<210>4

<211>1288

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1288)

<223>内含子20-21

<400>4

gtgagggtca ttgctcggcc cctcccatgc cacttccact caccattcct gcctgcccag60

ctcttcctct ttctggccac accatccaca ctctcctggc cctctgagac tgcccgccat 120

gccattccct ttacctggaa aactcctccc tatccatcaa agtccagatt cagggtcacc 180

tcctctggga agcccacctt ggcctccagg ttgactctca ctactcatca tcaggttctt 240

ccttctattc cagccctaac cactcaggat tgggccgttt gtgtctgggt atgtctcttc 300

cagctgcctg ggtttcctgg aaagaactct tatccccagg aactagtttg ttgaataaat 360

gctggtgaat gaatgaatga ttgaacagat gaatgagtga tgagtagata aaaggatgga 420

tggagagatg ggtgagtaca tggatggata gatggatgag ttggtgggta gattcgtggc 480

tagatggatg atggatggat ggacagatgg atggatatat gattgaacta ttgaaagtat 540

agatgtatgg atgggtgaat ttgggggtaa ttgttagatg atggatgagt atagatgaat 600

gatggatgga taacttgatg agtggataga tagattgctg gatagatgat tgactgggtg 660

gatagatgaa atgttggatg agcagattaa gttgtattgg atgggatgga tggaagtgtg 720

gttgagttat tagaaggaag attgagtaga taggtgaatt tgttgatagt cagatgggta 780

gataggtaga tggatggatg gatggatgga tgtataggca gatggacaaa tggatgaatg 840

ggtgggtgga tgaatggaag gatgtgtggt tgaactattg caagtattga taattgggtt 900

cataatttct gaatatttag atggatggtt gtgagtggct ggtggacaga cgaaaaatgg 960

atggttggat aaattgatgg gtggatggat ggttggttgt atgaaagaat gaatgattgg1020

gtaggtggat taagttgcgg atcaatgtat gggatggatg aatggatgga tggatggatg1080

tgtggttgaa ttactgaaag gttggaagag tggatgggtg aaatttgggg tagttagatg1140

ggtgggtgtg tggatggata aaagagtaga tgaatgaatt aatgaataaa caggcagatg1200

gatgatgtaa gctgccccag accctgggac ctctgacccc cggcgacccc ttgcactctc1260

catgacactt tctctcccat ggtggcag 1288

<210>5

<211>128

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(128)

<223>隐蔽外显子1

<400>5

ctgcctgggt ttcctggaaa gaactcttat ccccaggaac tagtttgttg aataaatgct60

ggtgaatgaa tgaatgattg aacagatgaa tgagtgatga gtagataaaa ggatggatgg 120

agagatgg128

<210>6

<211>179

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(179)

<223>隐蔽外显子2

<400>6

ccctaaccac tcaggattgg gccgtttgtg tctgggtatg tctcttccag ctgcctgggt60

ttcctggaaa gaactcttat ccccaggaac tagtttgttg aataaatgct ggtgaatgaa 120

tgaatgattg aacagatgaa tgagtgatga gtagataaaa ggatggatgg agagatggg179

<210>7

<211>10113

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(10113)

<223>隐蔽外显子剪接变体1

<400>7

gcccccggtg ctgaaccaag atggccggtg gcggccgggc cccggcgtga gccaagcgcg60

ggctgcagcc gggagatgcc ccagcccagc ggccgctgag cccgacccga cagagccggc 120

ccggccgcct ccggcccacc tgcgagctcg gagacatgtc tctgctttgc gttggagtca 180

aaaaagccaa gtttgatggt gcccaagaga aattcaacac gtacgtgacc ctgaaagtgc 240

agaatgtcaa gagcacgacc atcgcggtgc ggggcagcca gcccagctgg gagcaggatt 300

tcatgttcga gattaaccgt ctggatttgg gactgacggt ggaggtgtgg aataagggtc 360

tcatctggga cacaatggtg ggcactgtgt ggatcccact gaggaccatc cgccagtcca 420

atgaggaggg ccctggagag tggctgacgc tggactccca ggtcatcatg gcagacagtg 480

agatctgtgg caccaaggac cccaccttcc accgcatcct cctggacacg cgctttgagc 540

tacccttaga cattcctgaa gaggaggctc gctactgggc caagaagctg gagcagctca 600

atgctatgcg ggaccaggat gaatattcgt tccaagatga gcaagacaag cctctgcctg 660

tccccagcaa ccagtgctgc aactggaatt attttggctg gggtgagcag cacaacgatg 720

accccgacag tgcagtggat gatcgtgaca gtgactaccg cagtgaaacg agcaacagca 780

tcccgccgcc ctattatact acgtcacaac ccaacgcctc agtccaccaa tattctgttc 840

gcccaccacc cctgggctcc cgggagtcct acagtgactc catgcacagt tacgaggagt 900

tctctgagcc acaagccctc agccccacgg gtagcagccg ctatgcctct tccggggagc 960

tgagccaggg aagctctcag ctgagcgagg acttcgaccc tgacgagcac agcctgcagg1020

gctccgacat ggaggatgag cgggaccggg actcctacca ctcctgccac agctcggtca1080

gctaccacaa agactcgcct cgctgggacc aggatgagga agagctggag gaggacctgg1140

aggacttcct ggaggaggag gagctgcctg aagatgagga ggagctggag gaggaggagg1200

aggaggtgcc tgacgatttg ggcagctatg cccagcgtga agacgtagct gtggctgagc1260

ccaaagactt caaacgcatc agcctcccgc cagctgcccc agggaaggag gacaaggccc1320

cagtggcacc caccgaggcc cccgacatgg ccaaggtggc ccccaagcca gccacgcccg1380

acaaggtgcc tgcagctgag cagatccctg aggctgagcc acccaaggac gaggagagtt1440

tcaggccgag agaggatgag gaaggccagg aggggcagga ctccatgtcc agggccaagg1500

ccaactggct gcgtgccttc aacaaggtgc ggatgcagct gcaggaggcc cggggagaag1560

gagagatgtc taaatcccta tggttcaaag gcggcccagg gggcggtctc atcatcatcg1620

acagcatgcc agacatccgc aagaggaaac ctatcccact cgtgagcgac ttggccatgt1680

ccctggtcca gtccaggaaa gcgggcatca cctcggcctt ggcctccagc acgttgaaca1740

acgaggagct gaaaaaccac gtttacaaga agaccctgca agccttaatc taccccatct1800

cgtgcacgac gccacacaac ttcgaagtgt ggacggccac cacgcccacc tactgctacg1860

agtgcgaggg gctgctgtgg ggcatcgcga ggcagggcat gcgctgcacc gagtgcggtg1920

tcaagtgcca cgagaagtgc caggacctgc tcaacgccga ctgcctgcag cgggctgcgg1980

agaagagctc caagcacggg gcggaggacc ggacacagaa catcatcatg gtgctcaagg2040

accgcatgaa gatccgggag cgcaacaagc ccgagatctt cgagctcatc caggagatct2100

tcgcggtgac caagacggcg cacacgcagc agatgaaggc ggtcaagcag agcgtgctgg2160

acggcacgtc caagtggtcc gccaagatca gcatcaccgt ggtctgcgcc cagggcttgc2220

aggcaaagga caagacagga tccagtgacc cctatgtcac cgtccaggtc gggaagacca2280

agaaacggac aaaaaccatc tatgggaacc tcaacccggt gtgggaggag aatttccact2340

ttgaatgtca caattcctcc gaccgcatca aggtgcgcgt ctgggacgag gatgacgaca2400

tcaaatcccg cgtgaaacag aggttcaaga gggaatctga cgatttcctg gggcagacga2460

tcattgaggt gcggacgctc agcggcgaga tggacgtgtg gtacaacctg gacaagcgaa2520

ctgacaaatc tgccgtgtcg ggtgccatcc ggctccacat cagtgtggag atcaaaggcg2580

aggagaaggt ggccccgtac catgtccagt acacctgtct gcatgagctg cctgggtttc2640

ctggaaagaa ctcttatccc caggaactag tttgttgaat aaatgctggt gaatgaatga2700

atgattgaac agatgaatga gtgatgagta gataaaagga tggatggaga gatggaacct2760

gttccacttc gtgaccgacg tgcagaacaa tggggtcgtg aagatcccag atgccaaggg2820

tgacgatgcc tggaaggttt actacgatga gacagcccag gagattgtgg acgagtttgc2880

catgcgctac ggcgtcgagt ccatctacca agccatgacc cactttgcct gcctctcctc2940

caagtatatg tgcccagggg tgcctgccgt catgagcacc ctgctcgcca acatcaatgc3000

ctactacgca cacaccaccg cctccaccaa cgtgtctgcc tccgaccgct tcgccgcctc3060

caactttggg aaagagcgct tcgtgaaact cctggaccag ctgcataact ccctgcggat3120

tgacctctcc atgtaccgga ataacttccc agccagcagc ccggagagac tccaggacct3180

caaatccact gtggaccttc tcaccagcat caccttcttt cggatgaagg tacaagaact3240

ccagagcccg ccccgagcca gccaggtggt aaaggactgt gtgaaagcct gccttaattc3300

tacctacgag tacatcttca ataactgcca tgaactgtac agccgggagt accagacaga3360

cccggccaag aagggggaag ttctcccaga ggaacagggg cccagcatca agaacctcga3420

cttctggtcc aagctgatta ccctcatagt gtccatcatt gaggaagaca agaattccta3480

cactccctgc ctcaaccagt ttccccagga gctgaatgtg ggtaaaatca gcgctgaagt3540

gatgtggaat ctgtttgccc aagacatgaa gtacgccatg gaggagcacg acaagcatcg3600

tctatgcaag agtgccgact acatgaacct ccacttcaag gtgaaatggc tctacaatga3660

gtatgtgacg gaacttcccg ccttcaagga ccgcgtgcct gagtaccctg catggtttga3720

acccttcgtc atccagtggc tggatgagaa tgaggaggtg tcccgggatt tcctgcacgg3780

tgccctggag cgagacaaga aggatgggtt ccagcagacc tcagagcatg ccctattctc3840

ctgctccgtg gtggatgttt tctcccaact caaccagagc tttgaaatca tcaagaaact3900

cgagtgtccc gaccctcaga tcgtggggca ctacatgagg cgctttgcca agaccatcag3960

taatgtgctc ctccagtatg cagacatcat ctccaaggac tttgcctcct actgctccaa4020

ggagaaggag aaagtgccct gcattctcat gaataacact caacagctac gagttcagct4080

ggagaagatg ttcgaagcca tgggaggaaa ggagctggat gctgaagcca gtgacatcct4140

gaaggagctt caggtgaaac tcaataacgt cttggatgag ctcagccggg tgtttgctac4200

cagcttccag ccgcacattg aagagtgtgt caaacagatg ggtgacatcc ttagccaggt4260

taagggcaca ggcaatgtgc cagccagtgc ctgcagcagc gtggcccagg acgcggacaa4320

tgtgttgcag cccatcatgg acctgctgga cagcaacctg accctctttg ccaaaatctg4380

tgagaagact gtgctgaagc gagtgctgaa ggagctgtgg aagctggtta tgaacaccat4440

ggagaaaacc atcgtcctgc cgcccctcac tgaccagacg atgatcggga acctcttgag4500

aaaacatggc aagggattag aaaagggcag ggtgaaattg ccaagccact cagacggaac4560

ccagatgatc ttcaatgcag ccaaggagct gggtcagctg tccaaactca aggatcacat4620

ggtacgagaa gaagccaaga gcttgacccc aaagcagtgc gcggttgttg agttggccct4680

ggacaccatc aagcaatatt tccacgcggg tggcgtgggc ctcaagaaga ccttcctgga4740

gaagagcccg gacctgcaat ccttgcgcta tgccctgtcg ctctacacgc aggccaccga4800

cctgctaatc aagacctttg tacagacgca atcggcccag ggcttgggtg tagaagaccc4860

tgtgggtgaa gtctctgtcc atgttgagct gttcactcat ccaggaactg gggaacacaa4920

ggtcacagtg aaagtggtgg ctgccaatga cctcaagtgg cagacttctg gcatcttccg4980

gccgttcatc gaggtcaaca tcattgggcc ccagctcagc gacaagaaac gcaagtttgc5040

gaccaaatcc aagaacaata gctgggctcc caagtacaat gagagcttcc agttcacgct5100

gagcgccgac gcgggtcccg agtgctatga gctgcaggtg tgcgtcaagg actactgctt5160

cgcgcgcgag gaccgcacgg tggggctggc cgtgctgcag ctgcgtgagc tggcccagcg5220

cgggagcgcc gcctgctggc tgccgctcgg ccgccgcatc cacatggacg acacgggcct5280

cacggtgctg cgaatcctct cgcagcgcag caacgacgag gtggccaagg agttcgtgaa5340

gctcaagtcg gacacgcgct ccgccgagga gggcggtgcc gcgcctgcgc cttagcgcgg5400

gcggtcggcc gagcggcact gcgcctgcgc ggagggcgct gggcggggag ggacggggct5460

tgcgccttgg tgggacctcc ccaggggcgg ggctcggggg gctccacgcc aagggtgggc5520

tgcgcctacg cccttgactc agctttccct tttggggaat taggaatgga ggatgccccg5580

ccctctcggg aggccacgcc caagggcgcg acgaaggaag gagccacatc cccaacttga5640

ggccacgccc ccagcaccta gggggcattt tgagctggga tgggggaaac ctcgtcccta5700

tggaggaggc cacatcccgg ggctctggta ccgggaggca ccacctcatg tcccctggaa5760

aagccataag atgggaccca gacccctggg accccagacc aattgccaag tatggaaatc5820

tcagctccct cgaggggggg ccctgggcaa ggggtagggc tctctggagc gcccctctag5880

gtggcctggg gactggaggg accaggatgc tggttggagg gccccggaat accggagtcc5940

ctttagatat ttgtgcaaaa aataaatggg gggagggggg aggatgggat ttcaaaagca6000

catgcgccct tgggcgccca aaccctgggg gccgagggga cggctctggt tccccacgct6060

gcccctactt ccctttggga gtttgcctct ccctctcccc caacaaaccc agtcctcata6120

tcatagagtt caacacaccc atttgacaga tggcaaaact gaggcttaaa gagctgcttg6180

agacttggcc aaggttccag gtgccatacc ctctgtgccc ctcccttagg cctgtgtgcc6240

ccatggaagg gtgggctgag atcgggatga cctgacacag ctccctattg ctgctaattc6300

cccctcggcc tcctccaagg ggtgggaatt ccaggccaag acccctactt cgcctttcct6360

tctccggctg ccaagcagga cctttgccct cagccctttc tcctgggatc tccatggggg6420

atgccatgag ggcctcccac cacaaaagag aatttgggat cccctggtcc caggtttctc6480

catcccttct tccttttcca gaattttcca aataggaaag aacagaagga gaccagaaac6540

tctagggggg agaaagagaa tgagagaaag agaatgagag agagagaaac acaaacacag6600

tgacacagtg agagcttagt ctccaagagc ctattcattg attcaaacac ccaagccaca6660

ggatacctca gatggccctc ttgccagctg gaagctcttt ctccaatgag caaagttaca6720

gtgacctggc tggagttacc tggtgcacat aggaccttag gggaaagttc agcgtggact6780

acacttgctc tgggatctgc ttttccacat gtgtgtatgg cacgcctttt tctgctggat6840

tgggaaggac aagattttgc tgtgctaggg agaaatgaaa acggggtgag ctgagtagct6900

gggtttctgg aggatagaac atcagatggg gaggctttcc gaggtgaaga atgagaggga6960

accacttact agagagaaaa gagctccagg cctggggaac agcacgtgcg aaggccagga7020

gagaagaact gttgaaacaa cgagaagggt ggcacggctg gagctgagcc agcaaggggg7080

atcgtgagga gccttggggt tggggagatc tgcagaagca tcagaccagg cagggcctcg7140

tacgcagtcc tgaggagttt tacttttatt ctaagacagt tggggagctc caggagctgt7200

tttaagttgg ggagagactg gattccagcc tgcaaaagct gttttgtgaa gactaaaacc7260

agtgaggaga ggtggaggtg ctttggggac actgaaatgg attcttggaa agattctgaa7320

ggctgtgttg aaaagacacc tatagctgtg gggacatgac tataatccca gcatttgggg7380

agaccgaggc tggcagatca cttaaggtca ggagtttgag accagcctgg ccaacatggc7440

gaaaccccat ctctgctaaa aatacaaaaa ttagctgggt gcagtggtgc atgcctgtag7500

tcccagctac tcaggagact gaggcgggag aattgtttga accctggagg cagaggttgt7560

agtgagtcgt gatcacacaa ctgcactcca gcctgggcaa cagaacaata ctccattccc7620

tcccctctac cccaccaaaa aaaaaaaaaa atcctgccct tagatgagct ctagggctgc7680

tgagtacagt tgtcccagtt gcacagtgcc caagggtttg gcattgctaa gaaggccacg7740

tgcaaatcct agatattgag tgttgtatgt ttgtgacgtt ggtttcccga catgtgaatg7800

gcccaagtgt ctggaagaag tggcgccact ttctaatttg cttggagatg ttgcatgtcc7860

cttaaattca gacaggtgca ggtaactgga ggttctgaac caaaggttaa aatgcaaatt7920

ctcatacagg gttgggaagt tgtagccagg gataagctta tgtgactgtt atatggactg7980

aggagcagat gtgaatttcg aaccatgaca tggctgaggg taggggtcgg gtggatggat8040

gattcagggt tgtaacccat agagcccaaa ggggaagtga tctgtgacct ggggtgaggg8100

tgatctggaa gatttttgga tggctggaaa gaaatgggga agtcgagctg cctgagagag8160

ccaagttatt tcccaaaaga ttccttagga gtctttctgt tcaagacctc cgtgtgtgtg8220

tgtgtgtgtt tagggttccc cagcaatggc ccaggcatgt gaaggaaaca agcttcttca8280

gggaatattt gttgaatgag ttttcctgac tcccaggcta gaactgtttt tgcaatttcc8340

accctctttt ctttccccca gagaactcct attcgtcctt caaaacccat cacggaaacc8400

cctcttggag aaaaccctcc ttccttcccc tcaggacttt cccagccacc gtctctcctc8460

cagtccagcc tgatgccatg ggactggggg tttctctgtc cagctctgtt tctcccagac8520

tggggtctga ggactctcag gacccccaac tttacctagc acaggctggg cacaagtggg8580

tgacagggag tctacgccta gtggaattat gtattggggc agggtcagtg tgagaataca8640

catccgcatg catgtctgtc catgtctgtc cgtaccaacc ttccccttcc acacggacct8700

gggcacatag gaggtgtctg agcctgacac atgggacaga gagtggacat ggctgagaca8760

cggacagaga aaagacaagg agtccagggg gctgaaagcc ttttgaaatc aggaagttcc8820

tgtattggca gaacaaagcc cagagaggag cagggctttc ctcaacgcca cccagcaagt8880

ggacacagag cccggccttg gatgacacct ccagggttct gaaccctgga cctcgcttta8940

tgcaaggagc tggccccaca tttccatgaa tcggggaaac agcacaagaa ggttggcctg9000

tggcagggca agggttaaag gggtgacatt gagggatgcc tcagagtcaa agtcccctga9060

ccaagaggaa tagagtagaa aacacagaga cagagggtga gatcacgccc cgatgaggac9120

ggagagagac agagatggag agagacatag aggtggaaat atacagagaa agataaatgc9180

agagaccaag gcagggagtg tcgggggaag taaagagggt gtcctgaaga aagaaggatc9240

tgttcactct taccagtctg tcctcgaatg atttgcataa aatgaggagg tgcctgtcca9300

cacccccaat tcctctctca ggccccagag cctgagacct caccatgccc ccatcagaga9360

tgcaaaaaac taaacaccca actagaaatc cttgggacct ctctcggctg ggatctcaga9420

gcctttctgt cccctacccc taccccatgt gctgtcgatt ttgcagatgg ggacaacctg9480

gggcctcccg gaactctgcc accctgggga agttggggga gggccttagt cccggatcac9540

aaccccgtct gctccccaga atcctttcct aagaatcgtt gaggaccaaa gttgtctttg9600

ctgacacgtg ttgcttttct ctttgccttt tattgtttca gagaaaaatc aagttgactg9660

tgtcaagtaa caccccaccc cttacccccg tccagccata gtggctctct ggagacacag9720

gtcacaggcg gagggtcccc tgatcatccc caaccacaca gccaggggga cttgacccct9780

gtccacccct gtctcgtgct ccctcagacc cccacaaacc ggccaagcag tccggggagg9840

cttcccctcc acacaactct tagcatgtga ttgcagatgt gaaatcaaaa cgttgtttgt9900

tttttgtttt gttttgattc taccccgtcg gtccagtgtc tgcacagacg ccttcatttc9960

tctgtaaata tgtgacttgg aacaaatgtt taacacaaac gagaagtggt catgaatgca 10020

tggtgttgag atgttttgca ctattctgac tttttggtct ctgtaaaaat attttattaa 10080

cagcagacat taaaaaaaga aaaaccacac aca10113

<210>8

<211>840

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>MISC_FEATURE

<222>(1)..(840)

<223>隐蔽外显子剪接变体1

<400>8

Met Ser Leu Leu Cys Val Gly Val Lys Lys Ala Lys Phe Asp Gly Ala

1 5 1015

Gln Glu Lys Phe Asn Thr Tyr Val Thr Leu Lys Val Gln Asn Val Lys

202530

Ser Thr Thr Ile Ala Val Arg Gly Ser Gln Pro Ser Trp Glu Gln Asp

354045

Phe Met Phe Glu Ile Asn Arg Leu Asp Leu Gly Leu Thr Val Glu Val

505560

Trp Asn Lys Gly Leu Ile Trp Asp Thr Met Val Gly Thr Val Trp Ile

65707580

Pro Leu Arg Thr Ile Arg Gln Ser Asn Glu Glu Gly Pro Gly Glu Trp

859095

Leu Thr Leu Asp Ser Gln Val Ile Met Ala Asp Ser Glu Ile Cys Gly

100 105 110

Thr Lys Asp Pro Thr Phe His Arg Ile Leu Leu Asp Thr Arg Phe Glu

115 120 125

Leu Pro Leu Asp Ile Pro Glu Glu Glu Ala Arg Tyr Trp Ala Lys Lys

130 135 140

Leu Glu Gln Leu Asn Ala Met Arg Asp Gln Asp Glu Tyr Ser Phe Gln

145 150 155 160

Asp Glu Gln Asp Lys Pro Leu Pro Val Pro Ser Asn Gln Cys Cys Asn

165 170 175

Trp Asn Tyr Phe Gly Trp Gly Glu Gln His Asn Asp Asp Pro Asp Ser

180 185 190

Ala Val Asp Asp Arg Asp Ser Asp Tyr Arg Ser Glu Thr Ser Asn Ser

195 200 205

Ile Pro Pro Pro Tyr Tyr Thr Thr Ser Gln Pro Asn Ala Ser Val His

210 215 220

Gln Tyr Ser Val Arg Pro Pro Pro Leu Gly Ser Arg Glu Ser Tyr Ser

225 230 235 240

Asp Ser Met His Ser Tyr Glu Glu Phe Ser Glu Pro Gln Ala Leu Ser

245 250 255

Pro Thr Gly Ser Ser Arg Tyr Ala Ser Ser Gly Glu Leu Ser Gln Gly

260 265 270

Ser Ser Gln Leu Ser Glu Asp Phe Asp Pro Asp Glu His Ser Leu Gln

275 280 285

Gly Ser Asp Met Glu Asp Glu Arg Asp Arg Asp Ser Tyr His Ser Cys

290 295 300

His Ser Ser Val Ser Tyr His Lys Asp Ser Pro Arg Trp Asp Gln Asp

305 310 315 320

Glu Glu Glu Leu Glu Glu Asp Leu Glu Asp Phe Leu Glu Glu Glu Glu

325 330 335

Leu Pro Glu Asp Glu Glu Glu Leu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Val Pro

340 345 350

Asp Asp Leu Gly Ser Tyr Ala Gln Arg Glu Asp Val Ala Val Ala Glu

355 360 365

Pro Lys Asp Phe Lys Arg Ile Ser Leu Pro Pro Ala Ala Pro Gly Lys

370 375 380

Glu Asp Lys Ala Pro Val Ala Pro Thr Glu Ala Pro Asp Met Ala Lys

385 390 395 400

Val Ala Pro Lys Pro Ala Thr Pro Asp Lys Val Pro Ala Ala Glu Gln

405 410 415

Ile Pro Glu Ala Glu Pro Pro Lys Asp Glu Glu Ser Phe Arg Pro Arg

420 425 430

Glu Asp Glu Glu Gly Gln Glu Gly Gln Asp Ser Met Ser Arg Ala Lys

435 440 445

Ala Asn Trp Leu Arg Ala Phe Asn Lys Val Arg Met Gln Leu Gln Glu

450 455 460

Ala Arg Gly Glu Gly Glu Met Ser Lys Ser Leu Trp Phe Lys Gly Gly

465 470 475 480

Pro Gly Gly Gly Leu Ile Ile Ile Asp Ser Met Pro Asp Ile Arg Lys

485 490 495

Arg Lys Pro Ile Pro Leu Val Ser Asp Leu Ala Met Ser Leu Val Gln

500 505 510

Ser Arg Lys Ala Gly Ile Thr Ser Ala Leu Ala Ser Ser Thr Leu Asn

515 520 525

Asn Glu Glu Leu Lys Asn His Val Tyr Lys Lys Thr Leu Gln Ala Leu

530 535 540

Ile Tyr Pro Ile Ser Cys Thr Thr Pro His Asn Phe Glu Val Trp Thr

545 550 555 560

Ala Thr Thr Pro Thr Tyr Cys Tyr Glu Cys Glu Gly Leu Leu Trp Gly

565 570 575

Ile Ala Arg Gln Gly Met Arg Cys Thr Glu Cys Gly Val Lys Cys His

580 585 590

Glu Lys Cys Gln Asp Leu Leu Asn Ala Asp Cys Leu Gln Arg Ala Ala

595 600 605

Glu Lys Ser Ser Lys His Gly Ala Glu Asp Arg Thr Gln Asn Ile Ile

610 615 620

Met Val Leu Lys Asp Arg Met Lys Ile Arg Glu Arg Asn Lys Pro Glu

625 630 635 640

Ile Phe Glu Leu Ile Gln Glu Ile Phe Ala Val Thr Lys Thr Ala His

645 650 655

Thr Gln Gln Met Lys Ala Val Lys Gln Ser Val Leu Asp Gly Thr Ser

660 665 670

Lys Trp Ser Ala Lys Ile Ser Ile Thr Val Val Cys Ala Gln Gly Leu

675 680 685

Gln Ala Lys Asp Lys Thr Gly Ser Ser Asp Pro Tyr Val Thr Val Gln

690 695 700

Val Gly Lys Thr Lys Lys Arg Thr Lys Thr Ile Tyr Gly Asn Leu Asn

705 710 715 720

Pro Val Trp Glu Glu Asn Phe His Phe Glu Cys His Asn Ser Ser Asp

725 730 735

Arg Ile Lys Val Arg Val Trp Asp Glu Asp Asp Asp Ile Lys Ser Arg

740 745 750

Val Lys Gln Arg Phe Lys Arg Glu Ser Asp Asp Phe Leu Gly Gln Thr

755 760 765

Ile Ile Glu Val Arg Thr Leu Ser Gly Glu Met Asp Val Trp Tyr Asn

770 775 780

Leu Asp Lys Arg Thr Asp Lys Ser Ala Val Ser Gly Ala Ile Arg Leu

785 790 795 800

His Ile Ser Val Glu Ile Lys Gly Glu Glu Lys Val Ala Pro Tyr His

805 810 815

Val Gln Tyr Thr Cys Leu His Glu Leu Pro Gly Phe Pro Gly Lys Asn

820 825 830

Ser Tyr Pro Gln Glu Leu Val Cys

835 840

<210>9

<211>10164

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(10164)

<223>隐蔽外显子剪接变体2

<400>9

gcccccggtg ctgaaccaag atggccggtg gcggccgggc cccggcgtga gccaagcgcg60

ggctgcagcc gggagatgcc ccagcccagc ggccgctgag cccgacccga cagagccggc 120

ccggccgcct ccggcccacc tgcgagctcg gagacatgtc tctgctttgc gttggagtca 180

aaaaagccaa gtttgatggt gcccaagaga aattcaacac gtacgtgacc ctgaaagtgc 240

agaatgtcaa gagcacgacc atcgcggtgc ggggcagcca gcccagctgg gagcaggatt 300

tcatgttcga gattaaccgt ctggatttgg gactgacggt ggaggtgtgg aataagggtc 360

tcatctggga cacaatggtg ggcactgtgt ggatcccact gaggaccatc cgccagtcca 420

atgaggaggg ccctggagag tggctgacgc tggactccca ggtcatcatg gcagacagtg 480

agatctgtgg caccaaggac cccaccttcc accgcatcct cctggacacg cgctttgagc 540

tacccttaga cattcctgaa gaggaggctc gctactgggc caagaagctg gagcagctca 600

atgctatgcg ggaccaggat gaatattcgt tccaagatga gcaagacaag cctctgcctg 660

tccccagcaa ccagtgctgc aactggaatt attttggctg gggtgagcag cacaacgatg 720

accccgacag tgcagtggat gatcgtgaca gtgactaccg cagtgaaacg agcaacagca 780

tcccgccgcc ctattatact acgtcacaac ccaacgcctc agtccaccaa tattctgttc 840

gcccaccacc cctgggctcc cgggagtcct acagtgactc catgcacagt tacgaggagt 900

tctctgagcc acaagccctc agccccacgg gtagcagccg ctatgcctct tccggggagc 960

tgagccaggg aagctctcag ctgagcgagg acttcgaccc tgacgagcac agcctgcagg1020

gctccgacat ggaggatgag cgggaccggg actcctacca ctcctgccac agctcggtca1080

gctaccacaa agactcgcct cgctgggacc aggatgagga agagctggag gaggacctgg1140

aggacttcct ggaggaggag gagctgcctg aagatgagga ggagctggag gaggaggagg1200

aggaggtgcc tgacgatttg ggcagctatg cccagcgtga agacgtagct gtggctgagc1260

ccaaagactt caaacgcatc agcctcccgc cagctgcccc agggaaggag gacaaggccc1320

cagtggcacc caccgaggcc cccgacatgg ccaaggtggc ccccaagcca gccacgcccg1380

acaaggtgcc tgcagctgag cagatccctg aggctgagcc acccaaggac gaggagagtt1440

tcaggccgag agaggatgag gaaggccagg aggggcagga ctccatgtcc agggccaagg1500

ccaactggct gcgtgccttc aacaaggtgc ggatgcagct gcaggaggcc cggggagaag1560

gagagatgtc taaatcccta tggttcaaag gcggcccagg gggcggtctc atcatcatcg1620

acagcatgcc agacatccgc aagaggaaac ctatcccact cgtgagcgac ttggccatgt1680

ccctggtcca gtccaggaaa gcgggcatca cctcggcctt ggcctccagc acgttgaaca1740

acgaggagct gaaaaaccac gtttacaaga agaccctgca agccttaatc taccccatct1800

cgtgcacgac gccacacaac ttcgaagtgt ggacggccac cacgcccacc tactgctacg1860

agtgcgaggg gctgctgtgg ggcatcgcga ggcagggcat gcgctgcacc gagtgcggtg1920

tcaagtgcca cgagaagtgc caggacctgc tcaacgccga ctgcctgcag cgggctgcgg1980

agaagagctc caagcacggg gcggaggacc ggacacagaa catcatcatg gtgctcaagg2040

accgcatgaa gatccgggag cgcaacaagc ccgagatctt cgagctcatc caggagatct2100

tcgcggtgac caagacggcg cacacgcagc agatgaaggc ggtcaagcag agcgtgctgg2160

acggcacgtc caagtggtcc gccaagatca gcatcaccgt ggtctgcgcc cagggcttgc2220

aggcaaagga caagacagga tccagtgacc cctatgtcac cgtccaggtc gggaagacca2280

agaaacggac aaaaaccatc tatgggaacc tcaacccggt gtgggaggag aatttccact2340

ttgaatgtca caattcctcc gaccgcatca aggtgcgcgt ctgggacgag gatgacgaca2400

tcaaatcccg cgtgaaacag aggttcaaga gggaatctga cgatttcctg gggcagacga2460

tcattgaggt gcggacgctc agcggcgaga tggacgtgtg gtacaacctg gacaagcgaa2520

ctgacaaatc tgccgtgtcg ggtgccatcc ggctccacat cagtgtggag atcaaaggcg2580

aggagaaggt ggccccgtac catgtccagt acacctgtct gcatgagccc taaccactca2640

ggattgggcc gtttgtgtct gggtatgtct cttccagctg cctgggtttc ctggaaagaa2700

ctcttatccc caggaactag tttgttgaat aaatgctggt gaatgaatga atgattgaac2760

agatgaatga gtgatgagta gataaaagga tggatggaga gatgggaacc tgttccactt2820

cgtgaccgac gtgcagaaca atggggtcgt gaagatccca gatgccaagg gtgacgatgc2880

ctggaaggtt tactacgatg agacagccca ggagattgtg gacgagtttg ccatgcgcta2940

cggcgtcgag tccatctacc aagccatgac ccactttgcc tgcctctcct ccaagtatat3000

gtgcccaggg gtgcctgccg tcatgagcac cctgctcgcc aacatcaatg cctactacgc3060

acacaccacc gcctccacca acgtgtctgc ctccgaccgc ttcgccgcct ccaactttgg3120

gaaagagcgc ttcgtgaaac tcctggacca gctgcataac tccctgcgga ttgacctctc3180

catgtaccgg aataacttcc cagccagcag cccggagaga ctccaggacc tcaaatccac3240

tgtggacctt ctcaccagca tcaccttctt tcggatgaag gtacaagaac tccagagccc3300

gccccgagcc agccaggtgg taaaggactg tgtgaaagcc tgccttaatt ctacctacga3360

gtacatcttc aataactgcc atgaactgta cagccgggag taccagacag acccggccaa3420

gaagggggaa gttctcccag aggaacaggg gcccagcatc aagaacctcg acttctggtc3480

caagctgatt accctcatag tgtccatcat tgaggaagac aagaattcct acactccctg3540

cctcaaccag tttccccagg agctgaatgt gggtaaaatc agcgctgaag tgatgtggaa3600

tctgtttgcc caagacatga agtacgccat ggaggagcac gacaagcatc gtctatgcaa3660

gagtgccgac tacatgaacc tccacttcaa ggtgaaatgg ctctacaatg agtatgtgac3720

ggaacttccc gccttcaagg accgcgtgcc tgagtaccct gcatggtttg aacccttcgt3780

catccagtgg ctggatgaga atgaggaggt gtcccgggat ttcctgcacg gtgccctgga3840

gcgagacaag aaggatgggt tccagcagac ctcagagcat gccctattct cctgctccgt3900

ggtggatgtt ttctcccaac tcaaccagag ctttgaaatc atcaagaaac tcgagtgtcc3960

cgaccctcag atcgtggggc actacatgag gcgctttgcc aagaccatca gtaatgtgct4020

cctccagtat gcagacatca tctccaagga ctttgcctcc tactgctcca aggagaagga4080

gaaagtgccc tgcattctca tgaataacac tcaacagcta cgagttcagc tggagaagat4140

gttcgaagcc atgggaggaa aggagctgga tgctgaagcc agtgacatcc tgaaggagct4200

tcaggtgaaa ctcaataacg tcttggatga gctcagccgg gtgtttgcta ccagcttcca4260

gccgcacatt gaagagtgtg tcaaacagat gggtgacatc cttagccagg ttaagggcac4320

aggcaatgtg ccagccagtg cctgcagcag cgtggcccag gacgcggaca atgtgttgca4380

gcccatcatg gacctgctgg acagcaacct gaccctcttt gccaaaatct gtgagaagac4440

tgtgctgaag cgagtgctga aggagctgtg gaagctggtt atgaacacca tggagaaaac4500

catcgtcctg ccgcccctca ctgaccagac gatgatcggg aacctcttga gaaaacatgg4560

caagggatta gaaaagggca gggtgaaatt gccaagccac tcagacggaa cccagatgat4620

cttcaatgca gccaaggagc tgggtcagct gtccaaactc aaggatcaca tggtacgaga4680

agaagccaag agcttgaccc caaagcagtg cgcggttgtt gagttggccc tggacaccat4740

caagcaatat ttccacgcgg gtggcgtggg cctcaagaag accttcctgg agaagagccc4800

ggacctgcaa tccttgcgct atgccctgtc gctctacacg caggccaccg acctgctaat4860

caagaccttt gtacagacgc aatcggccca gggcttgggt gtagaagacc ctgtgggtga4920

agtctctgtc catgttgagc tgttcactca tccaggaact ggggaacaca aggtcacagt4980

gaaagtggtg gctgccaatg acctcaagtg gcagacttct ggcatcttcc ggccgttcat5040

cgaggtcaac atcattgggc cccagctcag cgacaagaaa cgcaagtttg cgaccaaatc5100

caagaacaat agctgggctc ccaagtacaa tgagagcttc cagttcacgc tgagcgccga5160

cgcgggtccc gagtgctatg agctgcaggt gtgcgtcaag gactactgct tcgcgcgcga5220

ggaccgcacg gtggggctgg ccgtgctgca gctgcgtgag ctggcccagc gcgggagcgc5280

cgcctgctgg ctgccgctcg gccgccgcat ccacatggac gacacgggcc tcacggtgct5340

gcgaatcctc tcgcagcgca gcaacgacga ggtggccaag gagttcgtga agctcaagtc5400

ggacacgcgc tccgccgagg agggcggtgc cgcgcctgcg ccttagcgcg ggcggtcggc5460

cgagcggcac tgcgcctgcg cggagggcgc tgggcgggga gggacggggc ttgcgccttg5520

gtgggacctc cccaggggcg gggctcgggg ggctccacgc caagggtggg ctgcgcctac5580

gcccttgact cagctttccc ttttggggaa ttaggaatgg aggatgcccc gccctctcgg5640

gaggccacgc ccaagggcgc gacgaaggaa ggagccacat ccccaacttg aggccacgcc5700

cccagcacct agggggcatt ttgagctggg atgggggaaa cctcgtccct atggaggagg5760

ccacatcccg gggctctggt accgggaggc accacctcat gtcccctgga aaagccataa5820

gatgggaccc agacccctgg gaccccagac caattgccaa gtatggaaat ctcagctccc5880

tcgagggggg gccctgggca aggggtaggg ctctctggag cgcccctcta ggtggcctgg5940

ggactggagg gaccaggatg ctggttggag ggccccggaa taccggagtc cctttagata6000

tttgtgcaaa aaataaatgg ggggaggggg gaggatggga tttcaaaagc acatgcgccc6060

ttgggcgccc aaaccctggg ggccgagggg acggctctgg ttccccacgc tgcccctact6120

tccctttggg agtttgcctc tccctctccc ccaacaaacc cagtcctcat atcatagagt6180

tcaacacacc catttgacag atggcaaaac tgaggcttaa agagctgctt gagacttggc6240

caaggttcca ggtgccatac cctctgtgcc cctcccttag gcctgtgtgc cccatggaag6300

ggtgggctga gatcgggatg acctgacaca gctccctatt gctgctaatt ccccctcggc6360

ctcctccaag gggtgggaat tccaggccaa gacccctact tcgcctttcc ttctccggct6420

gccaagcagg acctttgccc tcagcccttt ctcctgggat ctccatgggg gatgccatga6480

gggcctccca ccacaaaaga gaatttggga tcccctggtc ccaggtttct ccatcccttc6540

ttccttttcc agaattttcc aaataggaaa gaacagaagg agaccagaaa ctctaggggg6600

gagaaagaga atgagagaaa gagaatgaga gagagagaaa cacaaacaca gtgacacagt6660

gagagcttag tctccaagag cctattcatt gattcaaaca cccaagccac aggatacctc6720

agatggccct cttgccagct ggaagctctt tctccaatga gcaaagttac agtgacctgg6780

ctggagttac ctggtgcaca taggacctta ggggaaagtt cagcgtggac tacacttgct6840

ctgggatctg cttttccaca tgtgtgtatg gcacgccttt ttctgctgga ttgggaagga6900

caagattttg ctgtgctagg gagaaatgaa aacggggtga gctgagtagc tgggtttctg6960

gaggatagaa catcagatgg ggaggctttc cgaggtgaag aatgagaggg aaccacttac7020

tagagagaaa agagctccag gcctggggaa cagcacgtgc gaaggccagg agagaagaac7080

tgttgaaaca acgagaaggg tggcacggct ggagctgagc cagcaagggg gatcgtgagg7140

agccttgggg ttggggagat ctgcagaagc atcagaccag gcagggcctc gtacgcagtc7200

ctgaggagtt ttacttttat tctaagacag ttggggagct ccaggagctg ttttaagttg7260

gggagagact ggattccagc ctgcaaaagc tgttttgtga agactaaaac cagtgaggag7320

aggtggaggt gctttgggga cactgaaatg gattcttgga aagattctga aggctgtgtt7380

gaaaagacac ctatagctgt ggggacatga ctataatccc agcatttggg gagaccgagg7440

ctggcagatc acttaaggtc aggagtttga gaccagcctg gccaacatgg cgaaacccca7500

tctctgctaa aaatacaaaa attagctggg tgcagtggtg catgcctgta gtcccagcta7560

ctcaggagac tgaggcggga gaattgtttg aaccctggag gcagaggttg tagtgagtcg7620

tgatcacaca actgcactcc agcctgggca acagaacaat actccattcc ctcccctcta7680

ccccaccaaa aaaaaaaaaa aatcctgccc ttagatgagc tctagggctg ctgagtacag7740

ttgtcccagt tgcacagtgc ccaagggttt ggcattgcta agaaggccac gtgcaaatcc7800

tagatattga gtgttgtatg tttgtgacgt tggtttcccg acatgtgaat ggcccaagtg7860

tctggaagaa gtggcgccac tttctaattt gcttggagat gttgcatgtc ccttaaattc7920

agacaggtgc aggtaactgg aggttctgaa ccaaaggtta aaatgcaaat tctcatacag7980

ggttgggaag ttgtagccag ggataagctt atgtgactgt tatatggact gaggagcaga8040

tgtgaatttc gaaccatgac atggctgagg gtaggggtcg ggtggatgga tgattcaggg8100

ttgtaaccca tagagcccaa aggggaagtg atctgtgacc tggggtgagg gtgatctgga8160

agatttttgg atggctggaa agaaatgggg aagtcgagct gcctgagaga gccaagttat8220

ttcccaaaag attccttagg agtctttctg ttcaagacct ccgtgtgtgt gtgtgtgtgt8280

ttagggttcc ccagcaatgg cccaggcatg tgaaggaaac aagcttcttc agggaatatt8340

tgttgaatga gttttcctga ctcccaggct agaactgttt ttgcaatttc caccctcttt8400

tctttccccc agagaactcc tattcgtcct tcaaaaccca tcacggaaac ccctcttgga8460

gaaaaccctc cttccttccc ctcaggactt tcccagccac cgtctctcct ccagtccagc8520

ctgatgccat gggactgggg gtttctctgt ccagctctgt ttctcccaga ctggggtctg8580

aggactctca ggacccccaa ctttacctag cacaggctgg gcacaagtgg gtgacaggga8640

gtctacgcct agtggaatta tgtattgggg cagggtcagt gtgagaatac acatccgcat8700

gcatgtctgt ccatgtctgt ccgtaccaac cttccccttc cacacggacc tgggcacata8760

ggaggtgtct gagcctgaca catgggacag agagtggaca tggctgagac acggacagag8820

aaaagacaag gagtccaggg ggctgaaagc cttttgaaat caggaagttc ctgtattggc8880

agaacaaagc ccagagagga gcagggcttt cctcaacgcc acccagcaag tggacacaga8940

gcccggcctt ggatgacacc tccagggttc tgaaccctgg acctcgcttt atgcaaggag9000

ctggccccac atttccatga atcggggaaa cagcacaaga aggttggcct gtggcagggc9060

aagggttaaa ggggtgacat tgagggatgc ctcagagtca aagtcccctg accaagagga9120

atagagtaga aaacacagag acagagggtg agatcacgcc ccgatgagga cggagagaga9180

cagagatgga gagagacata gaggtggaaa tatacagaga aagataaatg cagagaccaa9240

ggcagggagt gtcgggggaa gtaaagaggg tgtcctgaag aaagaaggat ctgttcactc9300

ttaccagtct gtcctcgaat gatttgcata aaatgaggag gtgcctgtcc acacccccaa9360

ttcctctctc aggccccaga gcctgagacc tcaccatgcc cccatcagag atgcaaaaaa9420

ctaaacaccc aactagaaat ccttgggacc tctctcggct gggatctcag agcctttctg9480

tcccctaccc ctaccccatg tgctgtcgat tttgcagatg gggacaacct ggggcctccc9540

ggaactctgc caccctgggg aagttggggg agggccttag tcccggatca caaccccgtc9600

tgctccccag aatcctttcc taagaatcgt tgaggaccaa agttgtcttt gctgacacgt9660

gttgcttttc tctttgcctt ttattgtttc agagaaaaat caagttgact gtgtcaagta9720

acaccccacc ccttaccccc gtccagccat agtggctctc tggagacaca ggtcacaggc9780

ggagggtccc ctgatcatcc ccaaccacac agccaggggg acttgacccc tgtccacccc9840

tgtctcgtgc tccctcagac ccccacaaac cggccaagca gtccggggag gcttcccctc9900

cacacaactc ttagcatgtg attgcagatg tgaaatcaaa acgttgtttg ttttttgttt9960

tgttttgatt ctaccccgtc ggtccagtgt ctgcacagac gccttcattt ctctgtaaat 10020

atgtgacttg gaacaaatgt ttaacacaaa cgagaagtgg tcatgaatgc atggtgttga 10080

gatgttttgc actattctga ctttttggtc tctgtaaaaa tattttatta acagcagaca 10140

ttaaaaaaag aaaaaccaca caca10164

<210>10

<211>825

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>MISC_FEATURE

<222>(1)..(825)

<223>隐蔽外显子剪接变体2

<400>10

Met Ser Leu Leu Cys Val Gly Val Lys Lys Ala Lys Phe Asp Gly Ala

1 5 1015

Gln Glu Lys Phe Asn Thr Tyr Val Thr Leu Lys Val Gln Asn Val Lys

202530

Ser Thr Thr Ile Ala Val Arg Gly Ser Gln Pro Ser Trp Glu Gln Asp

354045

Phe Met Phe Glu Ile Asn Arg Leu Asp Leu Gly Leu Thr Val Glu Val

505560

Trp Asn Lys Gly Leu Ile Trp Asp Thr Met Val Gly Thr Val Trp Ile

65707580

Pro Leu Arg Thr Ile Arg Gln Ser Asn Glu Glu Gly Pro Gly Glu Trp

859095

Leu Thr Leu Asp Ser Gln Val Ile Met Ala Asp Ser Glu Ile Cys Gly

100 105 110

Thr Lys Asp Pro Thr Phe His Arg Ile Leu Leu Asp Thr Arg Phe Glu

115 120 125

Leu Pro Leu Asp Ile Pro Glu Glu Glu Ala Arg Tyr Trp Ala Lys Lys

130 135 140

Leu Glu Gln Leu Asn Ala Met Arg Asp Gln Asp Glu Tyr Ser Phe Gln

145 150 155 160

Asp Glu Gln Asp Lys Pro Leu Pro Val Pro Ser Asn Gln Cys Cys Asn

165 170 175

Trp Asn Tyr Phe Gly Trp Gly Glu Gln His Asn Asp Asp Pro Asp Ser

180 185 190

Ala Val Asp Asp Arg Asp Ser Asp Tyr Arg Ser Glu Thr Ser Asn Ser

195 200 205

Ile Pro Pro Pro Tyr Tyr Thr Thr Ser Gln Pro Asn Ala Ser Val His

210 215 220

Gln Tyr Ser Val Arg Pro Pro Pro Leu Gly Ser Arg Glu Ser Tyr Ser

225 230 235 240

Asp Ser Met His Ser Tyr Glu Glu Phe Ser Glu Pro Gln Ala Leu Ser

245 250 255

Pro Thr Gly Ser Ser Arg Tyr Ala Ser Ser Gly Glu Leu Ser Gln Gly

260 265 270

Ser Ser Gln Leu Ser Glu Asp Phe Asp Pro Asp Glu His Ser Leu Gln

275 280 285

Gly Ser Asp Met Glu Asp Glu Arg Asp Arg Asp Ser Tyr His Ser Cys

290 295 300

His Ser Ser Val Ser Tyr His Lys Asp Ser Pro Arg Trp Asp Gln Asp

305 310 315 320

Glu Glu Glu Leu Glu Glu Asp Leu Glu Asp Phe Leu Glu Glu Glu Glu

325 330 335

Leu Pro Glu Asp Glu Glu Glu Leu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Val Pro

340 345 350

Asp Asp Leu Gly Ser Tyr Ala Gln Arg Glu Asp Val Ala Val Ala Glu

355 360 365

Pro Lys Asp Phe Lys Arg Ile Ser Leu Pro Pro Ala Ala Pro Gly Lys

370 375 380

Glu Asp Lys Ala Pro Val Ala Pro Thr Glu Ala Pro Asp Met Ala Lys

385 390 395 400

Val Ala Pro Lys Pro Ala Thr Pro Asp Lys Val Pro Ala Ala Glu Gln

405 410 415

Ile Pro Glu Ala Glu Pro Pro Lys Asp Glu Glu Ser Phe Arg Pro Arg

420 425 430

Glu Asp Glu Glu Gly Gln Glu Gly Gln Asp Ser Met Ser Arg Ala Lys

435 440 445

Ala Asn Trp Leu Arg Ala Phe Asn Lys Val Arg Met Gln Leu Gln Glu

450 455 460

Ala Arg Gly Glu Gly Glu Met Ser Lys Ser Leu Trp Phe Lys Gly Gly

465 470 475 480

Pro Gly Gly Gly Leu Ile Ile Ile Asp Ser Met Pro Asp Ile Arg Lys

485 490 495

Arg Lys Pro Ile Pro Leu Val Ser Asp Leu Ala Met Ser Leu Val Gln

500 505 510

Ser Arg Lys Ala Gly Ile Thr Ser Ala Leu Ala Ser Ser Thr Leu Asn

515 520 525

Asn Glu Glu Leu Lys Asn His Val Tyr Lys Lys Thr Leu Gln Ala Leu

530 535 540

Ile Tyr Pro Ile Ser Cys Thr Thr Pro His Asn Phe Glu Val Trp Thr

545 550 555 560

Ala Thr Thr Pro Thr Tyr Cys Tyr Glu Cys Glu Gly Leu Leu Trp Gly

565 570 575

Ile Ala Arg Gln Gly Met Arg Cys Thr Glu Cys Gly Val Lys Cys His

580 585 590

Glu Lys Cys Gln Asp Leu Leu Asn Ala Asp Cys Leu Gln Arg Ala Ala

595 600 605

Glu Lys Ser Ser Lys His Gly Ala Glu Asp Arg Thr Gln Asn Ile Ile

610 615 620

Met Val Leu Lys Asp Arg Met Lys Ile Arg Glu Arg Asn Lys Pro Glu

625 630 635 640

Ile Phe Glu Leu Ile Gln Glu Ile Phe Ala Val Thr Lys Thr Ala His

645 650 655

Thr Gln Gln Met Lys Ala Val Lys Gln Ser Val Leu Asp Gly Thr Ser

660 665 670

Lys Trp Ser Ala Lys Ile Ser Ile Thr Val Val Cys Ala Gln Gly Leu

675 680 685

Gln Ala Lys Asp Lys Thr Gly Ser Ser Asp Pro Tyr Val Thr Val Gln

690 695 700

Val Gly Lys Thr Lys Lys Arg Thr Lys Thr Ile Tyr Gly Asn Leu Asn

705 710 715 720

Pro Val Trp Glu Glu Asn Phe His Phe Glu Cys His Asn Ser Ser Asp

725 730 735

Arg Ile Lys Val Arg Val Trp Asp Glu Asp Asp Asp Ile Lys Ser Arg

740 745 750

Val Lys Gln Arg Phe Lys Arg Glu Ser Asp Asp Phe Leu Gly Gln Thr

755 760 765

Ile Ile Glu Val Arg Thr Leu Ser Gly Glu Met Asp Val Trp Tyr Asn

770 775 780

Leu Asp Lys Arg Thr Asp Lys Ser Ala Val Ser Gly Ala Ile Arg Leu

785 790 795 800

His Ile Ser Val Glu Ile Lys Gly Glu Glu Lys Val Ala Pro Tyr His

805 810 815

Val Gln Tyr Thr Cys Leu His Glu Pro

820 825

<210>11

<211>1703

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>MISC_FEATURE

<222>(1)..(1703)

<223>UNC13A参考蛋白NP_001073890.2

<400>11

Met Ser Leu Leu Cys Val Gly Val Lys Lys Ala Lys Phe Asp Gly Ala

1 5 1015

Gln Glu Lys Phe Asn Thr Tyr Val Thr Leu Lys Val Gln Asn Val Lys

202530

Ser Thr Thr Ile Ala Val Arg Gly Ser Gln Pro Ser Trp Glu Gln Asp

354045

Phe Met Phe Glu Ile Asn Arg Leu Asp Leu Gly Leu Thr Val Glu Val

505560

Trp Asn Lys Gly Leu Ile Trp Asp Thr Met Val Gly Thr Val Trp Ile

65707580

Pro Leu Arg Thr Ile Arg Gln Ser Asn Glu Glu Gly Pro Gly Glu Trp

859095

Leu Thr Leu Asp Ser Gln Val Ile Met Ala Asp Ser Glu Ile Cys Gly

100 105 110

Thr Lys Asp Pro Thr Phe His Arg Ile Leu Leu Asp Thr Arg Phe Glu

115 120 125

Leu Pro Leu Asp Ile Pro Glu Glu Glu Ala Arg Tyr Trp Ala Lys Lys

130 135 140

Leu Glu Gln Leu Asn Ala Met Arg Asp Gln Asp Glu Tyr Ser Phe Gln

145 150 155 160

Asp Glu Gln Asp Lys Pro Leu Pro Val Pro Ser Asn Gln Cys Cys Asn

165 170 175

Trp Asn Tyr Phe Gly Trp Gly Glu Gln His Asn Asp Asp Pro Asp Ser

180 185 190

Ala Val Asp Asp Arg Asp Ser Asp Tyr Arg Ser Glu Thr Ser Asn Ser

195 200 205

Ile Pro Pro Pro Tyr Tyr Thr Thr Ser Gln Pro Asn Ala Ser Val His

210 215 220

Gln Tyr Ser Val Arg Pro Pro Pro Leu Gly Ser Arg Glu Ser Tyr Ser

225 230 235 240

Asp Ser Met His Ser Tyr Glu Glu Phe Ser Glu Pro Gln Ala Leu Ser

245 250 255

Pro Thr Gly Ser Ser Arg Tyr Ala Ser Ser Gly Glu Leu Ser Gln Gly

260 265 270

Ser Ser Gln Leu Ser Glu Asp Phe Asp Pro Asp Glu His Ser Leu Gln

275 280 285

Gly Ser Asp Met Glu Asp Glu Arg Asp Arg Asp Ser Tyr His Ser Cys

290 295 300

His Ser Ser Val Ser Tyr His Lys Asp Ser Pro Arg Trp Asp Gln Asp

305 310 315 320

Glu Glu Glu Leu Glu Glu Asp Leu Glu Asp Phe Leu Glu Glu Glu Glu

325 330 335

Leu Pro Glu Asp Glu Glu Glu Leu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Val Pro

340 345 350

Asp Asp Leu Gly Ser Tyr Ala Gln Arg Glu Asp Val Ala Val Ala Glu

355 360 365

Pro Lys Asp Phe Lys Arg Ile Ser Leu Pro Pro Ala Ala Pro Gly Lys

370 375 380

Glu Asp Lys Ala Pro Val Ala Pro Thr Glu Ala Pro Asp Met Ala Lys

385 390 395 400

Val Ala Pro Lys Pro Ala Thr Pro Asp Lys Val Pro Ala Ala Glu Gln

405 410 415

Ile Pro Glu Ala Glu Pro Pro Lys Asp Glu Glu Ser Phe Arg Pro Arg

420 425 430

Glu Asp Glu Glu Gly Gln Glu Gly Gln Asp Ser Met Ser Arg Ala Lys

435 440 445

Ala Asn Trp Leu Arg Ala Phe Asn Lys Val Arg Met Gln Leu Gln Glu

450 455 460

Ala Arg Gly Glu Gly Glu Met Ser Lys Ser Leu Trp Phe Lys Gly Gly

465 470 475 480

Pro Gly Gly Gly Leu Ile Ile Ile Asp Ser Met Pro Asp Ile Arg Lys

485 490 495

Arg Lys Pro Ile Pro Leu Val Ser Asp Leu Ala Met Ser Leu Val Gln

500 505 510

Ser Arg Lys Ala Gly Ile Thr Ser Ala Leu Ala Ser Ser Thr Leu Asn

515 520 525

Asn Glu Glu Leu Lys Asn His Val Tyr Lys Lys Thr Leu Gln Ala Leu

530 535 540

Ile Tyr Pro Ile Ser Cys Thr Thr Pro His Asn Phe Glu Val Trp Thr

545 550 555 560

Ala Thr Thr Pro Thr Tyr Cys Tyr Glu Cys Glu Gly Leu Leu Trp Gly

565 570 575

Ile Ala Arg Gln Gly Met Arg Cys Thr Glu Cys Gly Val Lys Cys His

580 585 590

Glu Lys Cys Gln Asp Leu Leu Asn Ala Asp Cys Leu Gln Arg Ala Ala

595 600 605

Glu Lys Ser Ser Lys His Gly Ala Glu Asp Arg Thr Gln Asn Ile Ile

610 615 620

Met Val Leu Lys Asp Arg Met Lys Ile Arg Glu Arg Asn Lys Pro Glu

625 630 635 640

Ile Phe Glu Leu Ile Gln Glu Ile Phe Ala Val Thr Lys Thr Ala His

645 650 655

Thr Gln Gln Met Lys Ala Val Lys Gln Ser Val Leu Asp Gly Thr Ser

660 665 670

Lys Trp Ser Ala Lys Ile Ser Ile Thr Val Val Cys Ala Gln Gly Leu

675 680 685

Gln Ala Lys Asp Lys Thr Gly Ser Ser Asp Pro Tyr Val Thr Val Gln

690 695 700

Val Gly Lys Thr Lys Lys Arg Thr Lys Thr Ile Tyr Gly Asn Leu Asn

705 710 715 720

Pro Val Trp Glu Glu Asn Phe His Phe Glu Cys His Asn Ser Ser Asp

725 730 735

Arg Ile Lys Val Arg Val Trp Asp Glu Asp Asp Asp Ile Lys Ser Arg

740 745 750

Val Lys Gln Arg Phe Lys Arg Glu Ser Asp Asp Phe Leu Gly Gln Thr

755 760 765

Ile Ile Glu Val Arg Thr Leu Ser Gly Glu Met Asp Val Trp Tyr Asn

770 775 780

Leu Asp Lys Arg Thr Asp Lys Ser Ala Val Ser Gly Ala Ile Arg Leu

785 790 795 800

His Ile Ser Val Glu Ile Lys Gly Glu Glu Lys Val Ala Pro Tyr His

805 810 815

Val Gln Tyr Thr Cys Leu His Glu Asn Leu Phe His Phe Val Thr Asp

820 825 830

Val Gln Asn Asn Gly Val Val Lys Ile Pro Asp Ala Lys Gly Asp Asp

835 840 845

Ala Trp Lys Val Tyr Tyr Asp Glu Thr Ala Gln Glu Ile Val Asp Glu

850 855 860

Phe Ala Met Arg Tyr Gly Val Glu Ser Ile Tyr Gln Ala Met Thr His

865 870 875 880

Phe Ala Cys Leu Ser Ser Lys Tyr Met Cys Pro Gly Val Pro Ala Val

885 890 895

Met Ser Thr Leu Leu Ala Asn Ile Asn Ala Tyr Tyr Ala His Thr Thr

900 905 910

Ala Ser Thr Asn Val Ser Ala Ser Asp Arg Phe Ala Ala Ser Asn Phe

915 920 925

Gly Lys Glu Arg Phe Val Lys Leu Leu Asp Gln Leu His Asn Ser Leu

930 935 940

Arg Ile Asp Leu Ser Met Tyr Arg Asn Asn Phe Pro Ala Ser Ser Pro

945 950 955 960

Glu Arg Leu Gln Asp Leu Lys Ser Thr Val Asp Leu Leu Thr Ser Ile

965 970 975

Thr Phe Phe Arg Met Lys Val Gln Glu Leu Gln Ser Pro Pro Arg Ala

980 985 990

Ser Gln Val Val Lys Asp Cys ValLys Ala Cys Leu AsnSer Thr Tyr

995 1000 1005

Glu TyrIle Phe Asn Asn CysHis Glu Leu Tyr SerArg Glu Tyr

1010 1015 1020

Gln ThrAsp Pro Ala Lys LysGly Glu Val Leu ProGlu Glu Gln

1025 1030 1035

Gly ProSer Ile Lys Asn LeuAsp Phe Trp Ser LysLeu Ile Thr

1040 1045 1050

Leu IleVal Ser Ile Ile GluGlu Asp Lys Asn SerTyr Thr Pro

1055 1060 1065

Cys LeuAsn Gln Phe Pro GlnGlu Leu Asn Val GlyLys Ile Ser

1070 1075 1080

Ala GluVal Met Trp Asn LeuPhe Ala Gln Asp MetLys Tyr Ala

1085 1090 1095

Met GluGlu His Asp Lys HisArg Leu Cys Lys SerAla Asp Tyr

1100 1105 1110

Met AsnLeu His Phe Lys ValLys Trp Leu Tyr AsnGlu Tyr Val

1115 1120 1125

Thr GluLeu Pro Ala Phe LysAsp Arg Val Pro GluTyr Pro Ala

1130 1135 1140

Trp PheGlu Pro Phe Val IleGln Trp Leu Asp GluAsn Glu Glu

1145 1150 1155

Val SerArg Asp Phe Leu HisGly Ala Leu Glu ArgAsp Lys Lys

1160 1165 1170

Asp GlyPhe Gln Gln Thr SerGlu His Ala Leu PheSer Cys Ser

1175 1180 1185

Val ValAsp Val Phe Ser GlnLeu Asn Gln Ser PheGlu Ile Ile

1190 1195 1200

Lys LysLeu Glu Cys Pro AspPro Gln Ile Val GlyHis Tyr Met

1205 1210 1215

Arg ArgPhe Ala Lys Thr IleSer Asn Val Leu LeuGln Tyr Ala

1220 1225 1230

Asp IleIle Ser Lys Asp PheAla Ser Tyr Cys SerLys Glu Lys

1235 1240 1245

Glu LysVal Pro Cys Ile LeuMet Asn Asn Thr GlnGln Leu Arg

1250 1255 1260

Val GlnLeu Glu Lys Met PheGlu Ala Met Gly GlyLys Glu Leu

1265 1270 1275

Asp AlaGlu Ala Ser Asp IleLeu Lys Glu Leu GlnVal Lys Leu

1280 1285 1290

Asn AsnVal Leu Asp Glu LeuSer Arg Val Phe AlaThr Ser Phe

1295 1300 1305

Gln ProHis Ile Glu Glu CysVal Lys Gln Met GlyAsp Ile Leu

1310 1315 1320

Ser GlnVal Lys Gly Thr GlyAsn Val Pro Ala SerAla Cys Ser

1325 1330 1335

Ser ValAla Gln Asp Ala AspAsn Val Leu Gln ProIle Met Asp

1340 1345 1350

Leu LeuAsp Ser Asn Leu ThrLeu Phe Ala Lys IleCys Glu Lys

1355 1360 1365

Thr ValLeu Lys Arg Val LeuLys Glu Leu Trp LysLeu Val Met

1370 1375 1380

Asn ThrMet Glu Lys Thr IleVal Leu Pro Pro LeuThr Asp Gln

1385 1390 1395

Thr MetIle Gly Asn Leu LeuArg Lys His Gly LysGly Leu Glu

1400 1405 1410

Lys GlyArg Val Lys Leu ProSer His Ser Asp GlyThr Gln Met

1415 1420 1425

Ile PheAsn Ala Ala Lys GluLeu Gly Gln Leu SerLys Leu Lys

1430 1435 1440

Asp HisMet Val Arg Glu GluAla Lys Ser Leu ThrPro Lys Gln

1445 1450 1455

Cys AlaVal Val Glu Leu AlaLeu Asp Thr Ile LysGln Tyr Phe

1460 1465 1470

His AlaGly Gly Val Gly LeuLys Lys Thr Phe LeuGlu Lys Ser

1475 1480 1485

Pro AspLeu Gln Ser Leu ArgTyr Ala Leu Ser LeuTyr Thr Gln

1490 1495 1500

Ala ThrAsp Leu Leu Ile LysThr Phe Val Gln ThrGln Ser Ala

1505 1510 1515

Gln GlyLeu Gly Val Glu AspPro Val Gly Glu ValSer Val His

1520 1525 1530

Val GluLeu Phe Thr His ProGly Thr Gly Glu HisLys Val Thr

1535 1540 1545

Val LysVal Val Ala Ala AsnAsp Leu Lys Trp GlnThr Ser Gly

1550 1555 1560

Ile PheArg Pro Phe Ile GluVal Asn Ile Ile GlyPro Gln Leu

1565 1570 1575

Ser AspLys Lys Arg Lys PheAla Thr Lys Ser LysAsn Asn Ser

1580 1585 1590

Trp AlaPro Lys Tyr Asn GluSer Phe Gln Phe ThrLeu Ser Ala

1595 1600 1605

Asp AlaGly Pro Glu Cys TyrGlu Leu Gln Val CysVal Lys Asp

1610 1615 1620

Tyr CysPhe Ala Arg Glu AspArg Thr Val Gly LeuAla Val Leu

1625 1630 1635

Gln LeuArg Glu Leu Ala GlnArg Gly Ser Ala AlaCys Trp Leu

1640 1645 1650

Pro LeuGly Arg Arg Ile HisMet Asp Asp Thr GlyLeu Thr Val

1655 1660 1665

Leu ArgIle Leu Ser Gln ArgSer Asn Asp Glu ValAla Lys Glu

1670 1675 1680

Phe ValLys Leu Lys Ser AspThr Arg Ser Ala GluGlu Gly Gly

1685 1690 1695

Ala AlaPro Ala Pro

1700

<210>12

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>外显子20剪接供体，位置chr19:17,642,794-17,642,894

<400>12

gcgaggagaa ggtggccccg taccatgtcc agtacacctg tctgcatgag gtgagggtca60

ttgctcggcc cctcccatgc cacttccact caccattcct g 101

<210>13

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>外显子20剪接供体，反向互补序列

<400>13

caggaatggt gagtggaagt ggcatgggag gggccgagca atgaccctca cctcatgcag60

acaggtgtac tggacatggt acggggccac cttctcctcg c 101

<210>14

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0001

<400>14

caggaatggt gagtggaagt ggcat25

<210>15

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0002

<400>15

aggaatggtg agtggaagtg gcatg25

<210>16

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0003

<400>16

ggaatggtga gtggaagtgg catgg25

<210>17

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0004

<400>17

gaatggtgag tggaagtggc atggg25

<210>18

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0005

<400>18

aatggtgagt ggaagtggca tggga25

<210>19

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0006

<400>19

atggtgagtg gaagtggcat gggag25

<210>20

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0007

<400>20

tggtgagtgg aagtggcatg ggagg25

<210>21

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0008

<400>21

ggtgagtgga agtggcatgg gaggg25

<210>22

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0009

<400>22

gtgagtggaa gtggcatggg agggg25

<210>23

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0010

<400>23

tgagtggaag tggcatggga ggggc25

<210>24

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0011

<400>24

gagtggaagt ggcatgggag gggcc25

<210>25

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0012

<400>25

agtggaagtg gcatgggagg ggccg25

<210>26

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0013

<400>26

gtggaagtgg catgggaggg gccga25

<210>27

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0014

<400>27

tggaagtggc atgggagggg ccgag25

<210>28

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0015

<400>28

ggaagtggca tgggaggggc cgagc25

<210>29

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0016

<400>29

gaagtggcat gggaggggcc gagca25

<210>30

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0017

<400>30

aagtggcatg ggaggggccg agcaa25

<210>31

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0018

<400>31

agtggcatgg gaggggccga gcaat25

<210>32

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0019

<400>32

gtggcatggg aggggccgag caatg25

<210>33

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0020

<400>33

tggcatggga ggggccgagc aatga25

<210>34

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0021

<400>34

ggcatgggag gggccgagca atgac25

<210>35

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0022

<400>35

gcatgggagg ggccgagcaa tgacc25

<210>36

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0023

<400>36

catgggaggg gccgagcaat gaccc25

<210>37

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0024

<400>37

atgggagggg ccgagcaatg accct25

<210>38

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0025

<400>38

tgggaggggc cgagcaatga ccctc25

<210>39

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0026

<400>39

gggaggggcc gagcaatgac cctca25

<210>40

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0027

<400>40

ggaggggccg agcaatgacc ctcac25

<210>41

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0028

<400>41

gaggggccga gcaatgaccc tcacc25

<210>42

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0029

<400>42

aggggccgag caatgaccct cacct25

<210>43

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0030

<400>43

ggggccgagc aatgaccctc acctc25

<210>44

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0031

<400>44

gggccgagca atgaccctca cctca25

<210>45

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0032

<400>45

ggccgagcaa tgaccctcac ctcat25

<210>46

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0033

<400>46

gccgagcaat gaccctcacc tcatg25

<210>47

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0034

<400>47

ccgagcaatg accctcacct catgc25

<210>48

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0035

<400>48

cgagcaatga ccctcacctc atgca25

<210>49

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0036

<400>49

gagcaatgac cctcacctca tgcag25

<210>50

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0037

<400>50

agcaatgacc ctcacctcat gcaga25

<210>51

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0038

<400>51

gcaatgaccc tcacctcatg cagac25

<210>52

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0039

<400>52

caatgaccct cacctcatgc agaca25

<210>53

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0040

<400>53

aatgaccctc acctcatgca gacag25

<210>54

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0041

<400>54

atgaccctca cctcatgcag acagg25

<210>55

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0042

<400>55

tgaccctcac ctcatgcaga caggt25

<210>56

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0043

<400>56

gaccctcacc tcatgcagac aggtg25

<210>57

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0044

<400>57

accctcacct catgcagaca ggtgt25

<210>58

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0045

<400>58

ccctcacctc atgcagacag gtgta25

<210>59

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0046

<400>59

cctcacctca tgcagacagg tgtac25

<210>60

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0047

<400>60

ctcacctcat gcagacaggt gtact25

<210>61

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0048

<400>61

tcacctcatg cagacaggtg tactg25

<210>62

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0049

<400>62

cacctcatgc agacaggtgt actgg25

<210>63

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0050

<400>63

acctcatgca gacaggtgta ctgga25

<210>64

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0051

<400>64

cctcatgcag acaggtgtac tggac25

<210>65

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0052

<400>65

ctcatgcaga caggtgtact ggaca25

<210>66

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0053

<400>66

tcatgcagac aggtgtactg gacat25

<210>67

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0054

<400>67

catgcagaca ggtgtactgg acatg25

<210>68

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0055

<400>68

atgcagacag gtgtactgga catgg25

<210>69

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0056

<400>69

tgcagacagg tgtactggac atggt25

<210>70

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0057

<400>70

gcagacaggt gtactggaca tggta25

<210>71

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0058

<400>71

cagacaggtg tactggacat ggtac25

<210>72

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0059

<400>72

agacaggtgt actggacatg gtacg25

<210>73

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0060

<400>73

gacaggtgta ctggacatgg tacgg25

<210>74

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0061

<400>74

acaggtgtac tggacatggt acggg25

<210>75

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0062

<400>75

caggtgtact ggacatggta cgggg25

<210>76

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0063

<400>76

aggtgtactg gacatggtac ggggc25

<210>77

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0064

<400>77

ggtgtactgg acatggtacg gggcc25

<210>78

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0065

<400>78

gtgtactgga catggtacgg ggcca25

<210>79

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0066

<400>79

tgtactggac atggtacggg gccac25

<210>80

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0067

<400>80

gtactggaca tggtacgggg ccacc25

<210>81

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0068

<400>81

tactggacat ggtacggggc cacct25

<210>82

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0069

<400>82

actggacatg gtacggggcc acctt25

<210>83

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0070

<400>83

ctggacatgg tacggggcca ccttc25

<210>84

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0071

<400>84

tggacatggt acggggccac cttct25

<210>85

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0072

<400>85

ggacatggta cggggccacc ttctc25

<210>86

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0073

<400>86

gacatggtac ggggccacct tctcc25

<210>87

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0074

<400>87

acatggtacg gggccacctt ctcct25

<210>88

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0075

<400>88

catggtacgg ggccaccttc tcctc25

<210>89

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0076

<400>89

atggtacggg gccaccttct cctcg25

<210>90

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0077

<400>90

tggtacgggg ccaccttctc ctcgc25

<210>91

<211>151

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(151)

<223>隐蔽外显子剪接受体，位置

chr19:17,642,491-17,642,641

<400>91

ctccaggttg actctcacta ctcatcatca ggttcttcct tctattccag ccctaaccac60

tcaggattgg gccgtttgtg tctgggtatg tctcttccag ctgcctgggt ttcctggaaa 120

gaactcttat ccccaggaac tagtttgttg a151

<210>92

<211>151

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(151)

<223>隐蔽外显子剪接受体，反向互补序列

<400>92

tcaacaaact agttcctggg gataagagtt ctttccagga aacccaggca gctggaagag60

acatacccag acacaaacgg cccaatcctg agtggttagg gctggaatag aaggaagaac 120

ctgatgatga gtagtgagag tcaacctgga g151

<210>93

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0078

<400>93

tcaacaaact agttcctggg gataa25

<210>94

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0079

<400>94

caacaaacta gttcctgggg ataag25

<210>95

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0080

<400>95

aacaaactag ttcctgggga taaga25

<210>96

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0081

<400>96

acaaactagt tcctggggat aagag25

<210>97

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0082

<400>97

caaactagtt cctggggata agagt25

<210>98

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0083

<400>98

aaactagttc ctggggataa gagtt25

<210>99

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0084

<400>99

aactagttcc tggggataag agttc25

<210>100

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0085

<400>100

actagttcct ggggataaga gttct25

<210>101

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0086

<400>101

ctagttcctg gggataagag ttctt25

<210>102

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0087

<400>102

tagttcctgg ggataagagt tcttt25

<210>103

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0088

<400>103

agttcctggg gataagagtt ctttc25

<210>104

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0089

<400>104

gttcctgggg ataagagttc tttcc25

<210>105

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0090

<400>105

ttcctgggga taagagttct ttcca25

<210>106

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0091

<400>106

tcctggggat aagagttctt tccag25

<210>107

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0092

<400>107

cctggggata agagttcttt ccagg25

<210>108

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0093

<400>108

ctggggataa gagttctttc cagga25

<210>109

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0094

<400>109

tggggataag agttctttcc aggaa25

<210>110

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0095

<400>110

ggggataaga gttctttcca ggaaa25

<210>111

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0096

<400>111

gggataagag ttctttccag gaaac25

<210>112

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0097

<400>112

ggataagagt tctttccagg aaacc25

<210>113

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0098

<400>113

gataagagtt ctttccagga aaccc25

<210>114

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0099

<400>114

ataagagttc tttccaggaa accca25

<210>115

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0100

<400>115

taagagttct ttccaggaaa cccag25

<210>116

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0101

<400>116

aagagttctt tccaggaaac ccagg25

<210>117

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0102

<400>117

agagttcttt ccaggaaacc caggc25

<210>118

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0103

<400>118

gagttctttc caggaaaccc aggca25

<210>119

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0104

<400>119

agttctttcc aggaaaccca ggcag25

<210>120

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0105

<400>120

gttctttcca ggaaacccag gcagc25

<210>121

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0106

<400>121

ttctttccag gaaacccagg cagct25

<210>122

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0107

<400>122

tctttccagg aaacccaggc agctg25

<210>123

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0108

<400>123

ctttccagga aacccaggca gctgg25

<210>124

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0109

<400>124

tttccaggaa acccaggcag ctgga25

<210>125

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0110

<400>125

ttccaggaaa cccaggcagc tggaa25

<210>126

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0111

<400>126

tccaggaaac ccaggcagct ggaag25

<210>127

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0112

<400>127

ccaggaaacc caggcagctg gaaga25

<210>128

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0113

<400>128

caggaaaccc aggcagctgg aagag25

<210>129

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0114

<400>129

aggaaaccca ggcagctgga agaga25

<210>130

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0115

<400>130

ggaaacccag gcagctggaa gagac25

<210>131

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0116

<400>131

gaaacccagg cagctggaag agaca25

<210>132

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0117

<400>132

aaacccaggc agctggaaga gacat25

<210>133

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0118

<400>133

aacccaggca gctggaagag acata25

<210>134

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0119

<400>134

acccaggcag ctggaagaga catac25

<210>135

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0120

<400>135

cccaggcagc tggaagagac atacc25

<210>136

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0121

<400>136

ccaggcagct ggaagagaca taccc25

<210>137

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0122

<400>137

caggcagctg gaagagacat accca25

<210>138

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0123

<400>138

aggcagctgg aagagacata cccag25

<210>139

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0124

<400>139

ggcagctgga agagacatac ccaga25

<210>140

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0125

<400>140

gcagctggaa gagacatacc cagac25

<210>141

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0126

<400>141

cagctggaag agacataccc agaca25

<210>142

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0127

<400>142

agctggaaga gacataccca gacac25

<210>143

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0128

<400>143

gctggaagag acatacccag acaca25

<210>144

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0129

<400>144

ctggaagaga catacccaga cacaa25

<210>145

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0130

<400>145

tggaagagac atacccagac acaaa25

<210>146

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0131

<400>146

ggaagagaca tacccagaca caaac25

<210>147

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0132

<400>147

gaagagacat acccagacac aaacg25

<210>148

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0133

<400>148

aagagacata cccagacaca aacgg25

<210>149

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0134

<400>149

agagacatac ccagacacaa acggc25

<210>150

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0135

<400>150

gagacatacc cagacacaaa cggcc25

<210>151

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0136

<400>151

agacataccc agacacaaac ggccc25

<210>152

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0137

<400>152

gacataccca gacacaaacg gccca25

<210>153

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0138

<400>153

acatacccag acacaaacgg cccaa25

<210>154

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0139

<400>154

catacccaga cacaaacggc ccaat25

<210>155

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0140

<400>155

atacccagac acaaacggcc caatc25

<210>156

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0141

<400>156

tacccagaca caaacggccc aatcc25

<210>157

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0142

<400>157

acccagacac aaacggccca atcct25

<210>158

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0143

<400>158

cccagacaca aacggcccaa tcctg25

<210>159

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0144

<400>159

ccagacacaa acggcccaat cctga25

<210>160

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0145

<400>160

cagacacaaa cggcccaatc ctgag25

<210>161

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0146

<400>161

agacacaaac ggcccaatcc tgagt25

<210>162

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0147

<400>162

gacacaaacg gcccaatcct gagtg25

<210>163

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0148

<400>163

acacaaacgg cccaatcctg agtgg25

<210>164

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0149

<400>164

cacaaacggc ccaatcctga gtggt25

<210>165

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0150

<400>165

acaaacggcc caatcctgag tggtt25

<210>166

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0151

<400>166

caaacggccc aatcctgagt ggtta25

<210>167

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0152

<400>167

aaacggccca atcctgagtg gttag25

<210>168

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0153

<400>168

aacggcccaa tcctgagtgg ttagg25

<210>169

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0154

<400>169

acggcccaat cctgagtggt taggg25

<210>170

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0155

<400>170

cggcccaatc ctgagtggtt agggc25

<210>171

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0156

<400>171

ggcccaatcc tgagtggtta gggct25

<210>172

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0157

<400>172

gcccaatcct gagtggttag ggctg25

<210>173

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0158

<400>173

cccaatcctg agtggttagg gctgg25

<210>174

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0159

<400>174

ccaatcctga gtggttaggg ctgga25

<210>175

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0160

<400>175

caatcctgag tggttagggc tggaa25

<210>176

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0161

<400>176

aatcctgagt ggttagggct ggaat25

<210>177

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0162

<400>177

atcctgagtg gttagggctg gaata25

<210>178

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0163

<400>178

tcctgagtgg ttagggctgg aatag25

<210>179

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0164

<400>179

cctgagtggt tagggctgga ataga25

<210>180

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0165

<400>180

ctgagtggtt agggctggaa tagaa25

<210>181

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0166

<400>181

tgagtggtta gggctggaat agaag25

<210>182

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0167

<400>182

gagtggttag ggctggaata gaagg25

<210>183

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0168

<400>183

agtggttagg gctggaatag aagga25

<210>184

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0169

<400>184

gtggttaggg ctggaataga aggaa25

<210>185

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0170

<400>185

tggttagggc tggaatagaa ggaag25

<210>186

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0171

<400>186

ggttagggct ggaatagaag gaaga25

<210>187

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0172

<400>187

gttagggctg gaatagaagg aagaa25

<210>188

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0173

<400>188

ttagggctgg aatagaagga agaac25

<210>189

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0174

<400>189

tagggctgga atagaaggaa gaacc25

<210>190

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0175

<400>190

agggctggaa tagaaggaag aacct25

<210>191

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0176

<400>191

gggctggaat agaaggaaga acctg25

<210>192

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0177

<400>192

ggctggaata gaaggaagaa cctga25

<210>193

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0178

<400>193

gctggaatag aaggaagaac ctgat25

<210>194

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0179

<400>194

ctggaataga aggaagaacc tgatg25

<210>195

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0180

<400>195

tggaatagaa ggaagaacct gatga25

<210>196

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0181

<400>196

ggaatagaag gaagaacctg atgat25

<210>197

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0182

<400>197

gaatagaagg aagaacctga tgatg25

<210>198

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0183

<400>198

aatagaagga agaacctgat gatga25

<210>199

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0184

<400>199

atagaaggaa gaacctgatg atgag25

<210>200

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0185

<400>200

tagaaggaag aacctgatga tgagt25

<210>201

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0186

<400>201

agaaggaaga acctgatgat gagta25

<210>202

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0187

<400>202

gaaggaagaa cctgatgatg agtag25

<210>203

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0188

<400>203

aaggaagaac ctgatgatga gtagt25

<210>204

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0189

<400>204

aggaagaacc tgatgatgag tagtg25

<210>205

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0190

<400>205

ggaagaacct gatgatgagt agtga25

<210>206

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0191

<400>206

gaagaacctg atgatgagta gtgag25

<210>207

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0192

<400>207

aagaacctga tgatgagtag tgaga25

<210>208

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0193

<400>208

agaacctgat gatgagtagt gagag25

<210>209

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0194

<400>209

gaacctgatg atgagtagtg agagt25

<210>210

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0195

<400>210

aacctgatga tgagtagtga gagtc25

<210>211

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0196

<400>211

acctgatgat gagtagtgag agtca25

<210>212

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0197

<400>212

cctgatgatg agtagtgaga gtcaa25

<210>213

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0198

<400>213

ctgatgatga gtagtgagag tcaac25

<210>214

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0199

<400>214

tgatgatgag tagtgagagt caacc25

<210>215

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0200

<400>215

gatgatgagt agtgagagtc aacct25

<210>216

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0201

<400>216

atgatgagta gtgagagtca acctg25

<210>217

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0202

<400>217

tgatgagtag tgagagtcaa cctgg25

<210>218

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0203

<400>218

gatgagtagt gagagtcaac ctgga25

<210>219

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0204

<400>219

atgagtagtg agagtcaacc tggag25

<210>220

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>隐蔽外显子剪接供体，位置chr19:17,642,363-17,642,463

<400>220

tgaacagatg aatgagtgat gagtagataa aaggatggat ggagagatgg gtgagtacat60

ggatggatag atggatgagt tggtgggtag attcgtggct a 101

<210>221

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>隐蔽外显子剪接供体，反向互补序列

<400>221

tagccacgaa tctacccacc aactcatcca tctatccatc catgtactca cccatctctc60

catccatcct tttatctact catcactcat tcatctgttc a 101

<210>222

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0205

<400>222

tagccacgaa tctacccacc aactc25

<210>223

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0206

<400>223

agccacgaat ctacccacca actca25

<210>224

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0207

<400>224

gccacgaatc tacccaccaa ctcat25

<210>225

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0208

<400>225

ccacgaatct acccaccaac tcatc25

<210>226

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0209

<400>226

cacgaatcta cccaccaact catcc25

<210>227

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0210

<400>227

acgaatctac ccaccaactc atcca25

<210>228

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0211

<400>228

cgaatctacc caccaactca tccat25

<210>229

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0212

<400>229

gaatctaccc accaactcat ccatc25

<210>230

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0213

<400>230

aatctaccca ccaactcatc catct25

<210>231

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0214

<400>231

atctacccac caactcatcc atcta25

<210>232

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0215

<400>232

tctacccacc aactcatcca tctat25

<210>233

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0216

<400>233

ctacccacca actcatccat ctatc25

<210>234

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0217

<400>234

tacccaccaa ctcatccatc tatcc25

<210>235

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0218

<400>235

acccaccaac tcatccatct atcca25

<210>236

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0219

<400>236

cccaccaact catccatcta tccat25

<210>237

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0220

<400>237

ccaccaactc atccatctat ccatc25

<210>238

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0221

<400>238

caccaactca tccatctatc catcc25

<210>239

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0222

<400>239

accaactcat ccatctatcc atcca25

<210>240

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0223

<400>240

ccaactcatc catctatcca tccat25

<210>241

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0224

<400>241

caactcatcc atctatccat ccatg25

<210>242

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0225

<400>242

aactcatcca tctatccatc catgt25

<210>243

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0226

<400>243

actcatccat ctatccatcc atgta25

<210>244

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0227

<400>244

ctcatccatc tatccatcca tgtac25

<210>245

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0228

<400>245

tcatccatct atccatccat gtact25

<210>246

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0229

<400>246

catccatcta tccatccatg tactc25

<210>247

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0230

<400>247

atccatctat ccatccatgt actca25

<210>248

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0231

<400>248

tccatctatc catccatgta ctcac25

<210>249

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0232

<400>249

ccatctatcc atccatgtac tcacc25

<210>250

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0233

<400>250

catctatcca tccatgtact caccc25

<210>251

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0234

<400>251

atctatccat ccatgtactc accca25

<210>252

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0235

<400>252

tctatccatc catgtactca cccat25

<210>253

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0236

<400>253

ctatccatcc atgtactcac ccatc25

<210>254

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0237

<400>254

tatccatcca tgtactcacc catct25

<210>255

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0238

<400>255

atccatccat gtactcaccc atctc25

<210>256

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0239

<400>256

tccatccatg tactcaccca tctct25

<210>257

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0240

<400>257

ccatccatgt actcacccat ctctc25

<210>258

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0241

<400>258

catccatgta ctcacccatc tctcc25

<210>259

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0242

<400>259

atccatgtac tcacccatct ctcca25

<210>260

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0243

<400>260

tccatgtact cacccatctc tccat25

<210>261

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0244

<400>261

ccatgtactc acccatctct ccatc25

<210>262

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0245

<400>262

catgtactca cccatctctc catcc25

<210>263

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0246

<400>263

atgtactcac ccatctctcc atcca25

<210>264

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0247

<400>264

tgtactcacc catctctcca tccat25

<210>265

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0248

<400>265

gtactcaccc atctctccat ccatc25

<210>266

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0249

<400>266

tactcaccca tctctccatc catcc25

<210>267

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0250

<400>267

actcacccat ctctccatcc atcct25

<210>268

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0251

<400>268

ctcacccatc tctccatcca tcctt25

<210>269

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0252

<400>269

tcacccatct ctccatccat ccttt25

<210>270

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0253

<400>270

cacccatctc tccatccatc ctttt25

<210>271

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0254

<400>271

acccatctct ccatccatcc tttta25

<210>272

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0255

<400>272

cccatctctc catccatcct tttat25

<210>273

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0256

<400>273

ccatctctcc atccatcctt ttatc25

<210>274

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0257

<400>274

catctctcca tccatccttt tatct25

<210>275

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0258

<400>275

atctctccat ccatcctttt atcta25

<210>276

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0259

<400>276

tctctccatc catcctttta tctac25

<210>277

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0260

<400>277

ctctccatcc atccttttat ctact25

<210>278

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0261

<400>278

tctccatcca tccttttatc tactc25

<210>279

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0262

<400>279

ctccatccat ccttttatct actca25

<210>280

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0263

<400>280

tccatccatc cttttatcta ctcat25

<210>281

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0264

<400>281

ccatccatcc ttttatctac tcatc25

<210>282

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0265

<400>282

catccatcct tttatctact catca25

<210>283

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0266

<400>283

atccatcctt ttatctactc atcac25

<210>284

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0267

<400>284

tccatccttt tatctactca tcact25

<210>285

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0268

<400>285

ccatcctttt atctactcat cactc25

<210>286

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0269

<400>286

catcctttta tctactcatc actca25

<210>287

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0270

<400>287

atccttttat ctactcatca ctcat25

<210>288

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0271

<400>288

tccttttatc tactcatcac tcatt25

<210>289

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0272

<400>289

ccttttatct actcatcact cattc25

<210>290

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0273

<400>290

cttttatcta ctcatcactc attca25

<210>291

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0274

<400>291

ttttatctac tcatcactca ttcat25

<210>292

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0275

<400>292

tttatctact catcactcat tcatc25

<210>293

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0276

<400>293

ttatctactc atcactcatt catct25

<210>294

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0277

<400>294

tatctactca tcactcattc atctg25

<210>295

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0278

<400>295

atctactcat cactcattca tctgt25

<210>296

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0279

<400>296

tctactcatc actcattcat ctgtt25

<210>297

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0280

<400>297

ctactcatca ctcattcatc tgttc25

<210>298

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0281

<400>298

tactcatcac tcattcatct gttca25

<210>299

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>外显子21 剪接受体，位置chr19:17,641,506-17,641,606

<400>299

cccggcgacc ccttgcactc tccatgacac tttctctccc atggtggcag aacctgttcc60

acttcgtgac cgacgtgcag aacaatgggg tcgtgaagat c 101

<210>300

<211>101

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(101)

<223>外显子21 剪接受体，反向互补序列

<400>300

gatcttcacg accccattgt tctgcacgtc ggtcacgaag tggaacaggt tctgccacca60

tgggagagaa agtgtcatgg agagtgcaag gggtcgccgg g 101

<210>301

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0282

<400>301

gatcttcacg accccattgt tctgc25

<210>302

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0283

<400>302

atcttcacga ccccattgtt ctgca25

<210>303

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0284

<400>303

tcttcacgac cccattgttc tgcac25

<210>304

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0285

<400>304

cttcacgacc ccattgttct gcacg25

<210>305

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0286

<400>305

ttcacgaccc cattgttctg cacgt25

<210>306

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0287

<400>306

tcacgacccc attgttctgc acgtc25

<210>307

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0288

<400>307

cacgacccca ttgttctgca cgtcg25

<210>308

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0289

<400>308

acgaccccat tgttctgcac gtcgg25

<210>309

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0290

<400>309

cgaccccatt gttctgcacg tcggt25

<210>310

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0291

<400>310

gaccccattg ttctgcacgt cggtc25

<210>311

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0292

<400>311

accccattgt tctgcacgtc ggtca25

<210>312

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0293

<400>312

ccccattgtt ctgcacgtcg gtcac25

<210>313

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0294

<400>313

cccattgttc tgcacgtcgg tcacg25

<210>314

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0295

<400>314

ccattgttct gcacgtcggt cacga25

<210>315

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0296

<400>315

cattgttctg cacgtcggtc acgaa25

<210>316

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0297

<400>316

attgttctgc acgtcggtca cgaag25

<210>317

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0298

<400>317

ttgttctgca cgtcggtcac gaagt25

<210>318

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0299

<400>318

tgttctgcac gtcggtcacg aagtg25

<210>319

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0300

<400>319

gttctgcacg tcggtcacga agtgg25

<210>320

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0301

<400>320

ttctgcacgt cggtcacgaa gtgga25

<210>321

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0302

<400>321

tctgcacgtc ggtcacgaag tggaa25

<210>322

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0303

<400>322

ctgcacgtcg gtcacgaagt ggaac25

<210>323

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0304

<400>323

tgcacgtcgg tcacgaagtg gaaca25

<210>324

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0305

<400>324

gcacgtcggt cacgaagtgg aacag25

<210>325

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0306

<400>325

cacgtcggtc acgaagtgga acagg25

<210>326

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0307

<400>326

acgtcggtca cgaagtggaa caggt25

<210>327

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0308

<400>327

cgtcggtcac gaagtggaac aggtt25

<210>328

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0309

<400>328

gtcggtcacg aagtggaaca ggttc25

<210>329

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0310

<400>329

tcggtcacga agtggaacag gttct25

<210>330

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0311

<400>330

cggtcacgaa gtggaacagg ttctg25

<210>331

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0312

<400>331

ggtcacgaag tggaacaggt tctgc25

<210>332

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0313

<400>332

gtcacgaagt ggaacaggtt ctgcc25

<210>333

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0314

<400>333

tcacgaagtg gaacaggttc tgcca25

<210>334

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0315

<400>334

cacgaagtgg aacaggttct gccac25

<210>335

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0316

<400>335

acgaagtgga acaggttctg ccacc25

<210>336

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0317

<400>336

cgaagtggaa caggttctgc cacca25

<210>337

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0318

<400>337

gaagtggaac aggttctgcc accat25

<210>338

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0319

<400>338

aagtggaaca ggttctgcca ccatg25

<210>339

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0320

<400>339

agtggaacag gttctgccac catgg25

<210>340

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0321

<400>340

gtggaacagg ttctgccacc atggg25

<210>341

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0322

<400>341

tggaacaggt tctgccacca tggga25

<210>342

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0323

<400>342

ggaacaggtt ctgccaccat gggag25

<210>343

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0324

<400>343

gaacaggttc tgccaccatg ggaga25

<210>344

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0325

<400>344

aacaggttct gccaccatgg gagag25

<210>345

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0326

<400>345

acaggttctg ccaccatggg agaga25

<210>346

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0327

<400>346

caggttctgc caccatggga gagaa25

<210>347

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0328

<400>347

aggttctgcc accatgggag agaaa25

<210>348

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0329

<400>348

ggttctgcca ccatgggaga gaaag25

<210>349

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0330

<400>349

gttctgccac catgggagag aaagt25

<210>350

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0331

<400>350

ttctgccacc atgggagaga aagtg25

<210>351

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0332

<400>351

tctgccacca tgggagagaa agtgt25

<210>352

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0333

<400>352

ctgccaccat gggagagaaa gtgtc25

<210>353

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0334

<400>353

tgccaccatg ggagagaaag tgtca25

<210>354

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0335

<400>354

gccaccatgg gagagaaagt gtcat25

<210>355

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0336

<400>355

ccaccatggg agagaaagtg tcatg25

<210>356

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0337

<400>356

caccatggga gagaaagtgt catgg25

<210>357

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0338

<400>357

accatgggag agaaagtgtc atgga25

<210>358

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0339

<400>358

ccatgggaga gaaagtgtca tggag25

<210>359

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0340

<400>359

catgggagag aaagtgtcat ggaga25

<210>360

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0341

<400>360

atgggagaga aagtgtcatg gagag25

<210>361

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0342

<400>361

tgggagagaa agtgtcatgg agagt25

<210>362

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0343

<400>362

gggagagaaa gtgtcatgga gagtg25

<210>363

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0344

<400>363

ggagagaaag tgtcatggag agtgc25

<210>364

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0345

<400>364

gagagaaagt gtcatggaga gtgca25

<210>365

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0346

<400>365

agagaaagtg tcatggagag tgcaa25

<210>366

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0347

<400>366

gagaaagtgt catggagagt gcaag25

<210>367

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0348

<400>367

agaaagtgtc atggagagtg caagg25

<210>368

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0349

<400>368

gaaagtgtca tggagagtgc aaggg25

<210>369

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0350

<400>369

aaagtgtcat ggagagtgca agggg25

<210>370

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0351

<400>370

aagtgtcatg gagagtgcaa ggggt25

<210>371

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0352

<400>371

agtgtcatgg agagtgcaag gggtc25

<210>372

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0353

<400>372

gtgtcatgga gagtgcaagg ggtcg25

<210>373

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0354

<400>373

tgtcatggag agtgcaaggg gtcgc25

<210>374

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0355

<400>374

gtcatggaga gtgcaagggg tcgcc25

<210>375

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0356

<400>375

tcatggagag tgcaaggggt cgccg25

<210>376

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0357

<400>376

catggagagt gcaaggggtc gccgg25

<210>377

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_0358

<400>377

atggagagtg caaggggtcg ccggg25

<210>378

<211>414

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>MISC_FEATURE

<222>(1)..(414)

<223>TDP-43

<400>378

Met Ser Glu Tyr Ile Arg Val Thr Glu Asp Glu Asn Asp Glu Pro Ile

1 5 1015

Glu Ile Pro Ser Glu Asp Asp Gly Thr Val Leu Leu Ser Thr Val Thr

202530

Ala Gln Phe Pro Gly Ala Cys Gly Leu Arg Tyr Arg Asn Pro Val Ser

354045

Gln Cys Met Arg Gly Val Arg Leu Val Glu Gly Ile Leu His Ala Pro

505560

Asp Ala Gly Trp Gly Asn Leu Val Tyr Val Val Asn Tyr Pro Lys Asp

65707580

Asn Lys Arg Lys Met Asp Glu Thr Asp Ala Ser Ser Ala Val Lys Val

859095

Lys Arg Ala Val Gln Lys Thr Ser Asp Leu Ile Val Leu Gly Leu Pro

100 105 110

Trp Lys Thr Thr Glu Gln Asp Leu Lys Glu Tyr Phe Ser Thr Phe Gly

115 120 125

Glu Val Leu Met Val Gln Val Lys Lys Asp Leu Lys Thr Gly His Ser

130 135 140

Lys Gly Phe Gly Phe Val Arg Phe Thr Glu Tyr Glu Thr Gln Val Lys

145 150 155 160

Val Met Ser Gln Arg His Met Ile Asp Gly Arg Trp Cys Asp Cys Lys

165 170 175

Leu Pro Asn Ser Lys Gln Ser Gln Asp Glu Pro Leu Arg Ser Arg Lys

180 185 190

Val Phe Val Gly Arg Cys Thr Glu Asp Met Thr Glu Asp Glu Leu Arg

195 200 205

Glu Phe Phe Ser Gln Tyr Gly Asp Val Met Asp Val Phe Ile Pro Lys

210 215 220

Pro Phe Arg Ala Phe Ala Phe Val Thr Phe Ala Asp Asp Gln Ile Ala

225 230 235 240

Gln Ser Leu Cys Gly Glu Asp Leu Ile Ile Lys Gly Ile Ser Val His

245 250 255

Ile Ser Asn Ala Glu Pro Lys His Asn Ser Asn Arg Gln Leu Glu Arg

260 265 270

Ser Gly Arg Phe Gly Gly Asn Pro Gly Gly Phe Gly Asn Gln Gly Gly

275 280 285

Phe Gly Asn Ser Arg Gly Gly Gly Ala Gly Leu Gly Asn Asn Gln Gly

290 295 300

Ser Asn Met Gly Gly Gly Met Asn Phe Gly Ala Phe Ser Ile Asn Pro

305 310 315 320

Ala Met Met Ala Ala Ala Gln Ala Ala Leu Gln Ser Ser Trp Gly Met

325 330 335

Met Gly Met Leu Ala Ser Gln Gln Asn Gln Ser Gly Pro Ser Gly Asn

340 345 350

Asn Gln Asn Gln Gly Asn Met Gln Arg Glu Pro Asn Gln Ala Phe Gly

355 360 365

Ser Gly Asn Asn Ser Tyr Ser Gly Ser Asn Ser Gly Ala Ala Ile Gly

370 375 380

Trp Gly Ser Ala Ser Asn Ala Gly Ser Gly Ser Gly Phe Asn Gly Gly

385 390 395 400

Phe Gly Ser Ser Met Asp Ser Lys Ser Ser Gly Trp Gly Met

405 410

<210>379

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_CE FWD 5'-3'

<400>379

tggatggaga gatggaacct20

<210>380

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_CE RVS 5'-3'

<400>380

gggctgtctc atcgtagtaa ac 22

<210>381

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A FWD 5'-3'

<400>381

ggacgtgtgg tacaacctgg20

<210>382

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A RVS 5'-3'

<400>382

gtgtactgga catggtacgg g21

<210>383

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物TARDBP_1 FWD 5'-3'

<400>383

aattctgcat gccccaga18

<210>384

<211>23

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物TARDBP_1 RVS 5'- 3'

<400>384

gaagcatctg tctcatccat ttt23

<210>385

<211>23

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物RPLP0_1 FWD 5'-3'

<400>385

tctacaaccc tgaagtgctt gat23

<210>386

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物RPLP0_1 RVS 5'-3'

<400>386

caatctgcag acagacactg g21

<210>387

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_19_21 FWD 5'-3'

<400>387

caacctggac aagcgaactg20

<210>388

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_19_21 RVS 5'-3'

<400>388

gggctgtctc atcgtagtaa ac 22

<210>389

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_CE FWD 5'-3'

<400>389

tggatggaga gatggaacct20

<210>390

<211>2314

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(2314)

<223>STMN2转录物，NCBI参考NM_001199214.1序列

<400>390

agctcctagg aagcttcagg gcttaaagct ccactctact tggactgtac tatcaggccc60

ccaaaatggg gggagccgac agggaaggac tgatttccat ttcaaactgc attctggtac 120

tttgtactcc agcaccattg gccgatcaat atttaatgct tggagattct gactctgcgg 180

gagtcatgtc aggggacctt gggagccaat ctgcttgagc ttctgagtga taattattca 240

tgggctcctg cctcttgctc tttctctagc acggtcccac tctgcagact cagtgcctta 300

ttcagtcttc tctctcgctc tctccgctgc tgtagccgga ccctttgcct tcgccactgc 360

tcagcgtctg cacatcccta caatggctaa aacagcaatg gcctacaagg aaaaaatgaa 420

ggagctgtcc atgctgtcac tgatctgctc ttgcttttac ccggaacctc gcaacatcaa 480

catctatact tacgatgata tggaagtgaa gcaaatcaac aaacgtgcct ctggccaggc 540

ttttgagctg atcttgaagc caccatctcc tatctcagaa gccccacgaa ctttagcttc 600

tccaaagaag aaagacctgt ccctggagga gatccagaag aaactggagg ctgcagagga 660

aagaagaaag tctcaggagg cccaggtgct gaaacaattg gcagagaaga gggaacacga 720

gcgagaagtc cttcagaagg ctttggagga gaacaacaac ttcagcaaga tggcggagga 780

aaagctgatc ctgaaaatgg aacaaattaa ggaaaaccgt gaggctaatc tagctgctat 840

tattgaacgt ctgcaggaaa agctggtcaa gtttatttct tctgaactaa aagaatctat 900

agagtctcaa tttctggagc ttcagaggga aggagagaag caatgagagg catgctgcgg 960

aggtgcgcag gaacaaggaa ctccaggttg aactgtctgg ctgaagcaag ggagggtctg1020

gcacgcccca ccaatagtaa atccccctgc ctatattata atggatcatg cgatatcagg1080

atggggaatg tatgacatgg tttaaaaaga actcattata aaaaaaaaaa aacaaaaaaa1140

atcaaaaatt aaaaaaaatc aatgcggtct ctttgcagaa tgttttgctt gatgtttaaa1200

aaataccttg gatcttattt tgtaaatact tacatttttg ttaaaaaata caagtattgc1260

attatgcaag ttatttcata atcttacatg tcctgtaaca ggcttttgat gttgtgtctt1320

tccactcaaa tgaatttgct aggtctgttc tttttgaagc tccccatgtc taactccatt1380

ccaaaagaaa aatgaggtca gtagacagtc tatggtgcta gaaacccacc attgcctaat1440

gacctagaag gctttgttgt ctctgagctt gactaagacc atacctagat cacaggtatt1500

atgactccac atgaaccttc acatttgttc gctcataatc tacttactgc ctaaaaacta1560

caaaaccagg ctaagaaata ccaccagtca tagcatttac ttctgcttct cctggattat1620

gtgctacaaa tgtgctttgg ctttagaaag ggatggatga gaagacagac ctgagaccaa1680

tctgggtaga agcaaaaagt tgaacctttt aaagtgctga acacaaatcc aaattcgaat1740

ggttcaagca gccgtgaaat cgctcttcat aaagtgggct taattctcta gtttaagttc1800

ttttgatgga atgaattaat taatgtgtca ggtggcttat ttgtggatgc catgattgat1860

gatgttcatt ttaagctctt acctatagta caagtacatg atgctactga atatttttcc1920

acttggaaac tgtgagctgg ttgttgcatt aaaacacaca tacaaacaaa atcaaaaaca1980

ctgcggactt tcactcaagc tggtctttct tccccagtgt aaggcaatcc tgcctactaa2040

caacaccaac aacaaaacac tccatctgtg aagctgacgc agttaagggg gctaggcagg2100

gcatttgtgc caactaagaa tcaccagata cccaccataa gtacctatcg cagttttgaa2160

gtcgtttctc cccaactccc aactcctgaa ggttgctgcc tgcatattta ctcttcatta2220

gtgctatttt cctgtatgtc attgtgagca agctgtgatt aataaagaat tggagttctg2280

tgaactaata aaggtttggt ctgttaaaaa aaaa2314

<210>391

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>shRNA TDP-43

<400>391

agatcttaag actggtcatt c21

<210>392

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>shRNA乱序

<400>392

gatatcgctt ctactagtaa g21

<210>393

<211>25587

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(25587)

<223>STMN2内含子1序列

<400>393

gtaaggcact gcgcctcgtt ctccgtcggc tctacctgga gcccacctct cacctcctct60

cttgagctct agaagcattc agagatattt tataaagaaa aagatgttaa tggtaacaca 120

ggaccaggaa ggacagggca gttctggggg aggtgggagg gcagagaaga ggtctatgga 180

aatctaaagc gaagaatttc ttttaaaagg tagaagcggg taagttgccc tcctatgggt 240

agagaattta ttctgtttcc atatttaaaa ttaggactca atcgtgaggg gaggaagcta 300

ccttaactgt ttgccttaaa tgggcttaag ggacattttg gaaagtgctt tataacgacc 360

tttttttttt ttatttcttc tctagtttaa gaagaaaata ggaaaggggt aaagggaagg 420

tgggagaaag gaaaaagaaa attgcaaagt caaagcggtc ccatcccgct gtttgaaaga 480

tgggtggaga cggggggagg ggatggagag aactgggcac attttacggt attgtctcgt 540

cgaagaaacc gctagtcctg gggtgcggtg cagggaggta agacggcggg ggacagggtg 600

ggggtaggac ctccgctcct ttgttttagg gcaagggagg ggaaggagag aggaagtcgc 660

ggagggcgtg gagggcgcgg gtgggcagct gcaggggcgg ggaagcgcgc ggcagggagg 720

ggtggaggga cagcggcttc gaaggcgctg gggtggggtt tctttgtgtg cggaccagcg 780

gtcccggggg gaggcacctg cagcgctggg cgcacaatgc ggacagcccc acccagtgcg 840

gaaccgcgca gccccgcccc cccgcccggt gctgcatctt cattcgaaag ggggtcgggt 900

ggggagcgca gcgtgacacc caggagccca accctgcggg gacagcggcg ccacgccccg 960

cgctccccgc tcccgactcc ccgccgcggc ttccaagaga gacctgacca ctgaccccgc1020

cctccccacg ctggcctcat tgttctgctt ttaagagaga tgggaaaagt gggttaacat1080

ttttcttttc ggaagcaaat tacatagagt gtttagacat agacacagat aaagggttct1140

ttgaagacct ttgatcgttt gcgggaaaag cttctagaac ctagacatgt gtatgtataa1200

taatagagat gacatgaaat cgtatataaa gcaaaagagg tcaaagtctt aagttaagcc1260

acgcgaaatt tccgttttgt gggtcagaca gtgccaaata tcggcaattt cataagctca1320

gagagacaag acagtggaga cacaggatga ccggaaaaga ttctggattc agggccttca1380

tccgcaattg gtcttgtgcc ttgagtgccc acggttctgg cgctcagtgg ccccggggtg1440

aaaaggcagg gtggggcctg gggtcctgtg gcagctggaa gcacgtgtcc cccgggactt1500

ggttgcagga tgcggagaca gggaaagctg ccgaaaggac tccatctgcg cggctccgcc1560

ctgccctacc ctccccgcgg agccggggag acctcaggct ccgagactgg cggggaagag1620

gaatatggga ggggcagttg agctgtatgc agtcctggaa cctctttttt cagccccgca1680

gtccacaacg gcccgagcac cccttgatgt gcgcagaccc ccggcgtggc tctcagcccc1740

agcaccgagc ccctcccagc caagcgggtg gctctgcaga aaagctggct cgagccccgc1800

ccggccacac aaaggcgcgg ccccacccag cccgggcgcg agaccgcaga ggtgaccccc1860

ttcccaggga ttcagggagg gctgtctctt ctcgcccacc cacggtccgc ggagctcggg1920

gctttttttc ccccagccca agccccccgc ccaccctctg ttctctatga ttttccagaa1980

tggagacccc gcgaggggct tctctaaggg agaccctcgc tcctccagcg gggcgcggct2040

cggccccacc cctcccagct gaggcccaga gccgcctacc gctggccggg tgggggcgca2100

cgtggcgact gggtgtgtgg agcgcagcca gccctgcaga gccccgcgcc gcgccctgcg2160

ctcccctccc cggagttggg cgctcgcccc cgcggtgcag ccggggagac cggtttctgc2220

gcagtgtcct gagctacccc cgctttccac aattcgcagt tcactcgcac gtccagaaag2280

gttctgagaa tgggtggtgg gggcgatctc gcctcgcttt ctgcacccct cagaaaggtt2340

tccgctgcag gctagtggct gcaaactcat cgtcatcatc agtattatta tcatttcaaa2400

tcgttgttat tatttaatga ttcagtagcc ttgtttgttc tcatttgttc aaaagggacg2460

tggattgctc ttggttaagg attaaccctt gttgcgttcg ctttgcttcc tcctaattgc2520

cctcatccct ttcccccaca aaaaggtaaa tttgtctcca gttgttcatt ttaagttata2580

aagcaaatat atttttgctt cctgccagga ttatgtatgt tcatgtggct aagatacatg2640

tgcaagtgct tgctaagagc agggtttgtg tgccaacgat tgctggaaaa ttctctgcaa2700

agaattgttt gtggctgcaa tgggtgagaa tacacatata taattgagat gatcttcaac2760

ataaggttat atctataaat atataaatat agtttatgca caaaatttta agttttttcc2820

cctgaaactg ttcttccaac tgctgattct tgatacagcc tcaatcctac acagatacat2880

ggatcgtgaa atggtagccg ccatccaaat aaaaatccca ccccaaatat gacaaacgca2940

agcatccttt ctggccataa tttaactgca tttgcaaatc atgaaaaaaa cactacttct3000

gcagtattaa aataatagat tttgaaatta attccaattt caaagataat taattatcag3060

ggcgagtgct tttttcctga ttcattaaac aattatgtat tcagcatgat tgtaagaggt3120

gcatataata ttccccatta tcttttctaa tgaagtgggc accttctgaa tggatatata3180

agtaactaga aatgaaaagc tgaggatttg gtcagaattt caggataaaa ctgaaagaaa3240

tggcagtagt ttatcaatta atctcatgta tttagtttat accaggtgag taagctgagc3300

ctgcaataaa cactctctgt cccagtgtaa cacgtcgcag gtagctagaa tgataggata3360

aattaataga ccttgtggtg tttgtctatg cacgttaaaa ttctctgaga gaaagtatat3420

tttaaaatga taattaagat tggacatttg tgctattaaa atctacaact ttagtcaaaa3480

ttcacaatgg ttttttttta caataatgtg acttacagat ttgtagtaaa ttattctatt3540

ctaaaagaga aatgagtgtt tttattgtta cagctattac ctcattaata tttttagcaa3600

acttttattt gttgcattga aagcagtttt aattactttg ggtttttatt tttcaaatta3660

ctaatggata gatggtggaa taagcattta atcatttggc acaatatgac ttccatcaaa3720

tagctcattc tcagtgatta aaaaatgcta caagaggcta caatttactc agattcagga3780

aatgtccttt cagagtgcca taaggctgat tcatataata aaatagtttt cttccctata3840

atttaagatc aaatagttac ttagttctgt gaatacctag cagtagctat caaacagaat3900

tttaaagtta aatctgtaca actaacaatg aagtggagga tgaatcgata catattgaat3960

ggaagacttt gtcattgata aattcaggcc atctttagga aaattccgga tttatcaatc4020

accattattt tttacttcaa ctgagtgtga ctgatcacat gctcaggcta ccttggtagc4080

tcattgctca caggaggctg aaaaaagctg gcctccgagc aggaggaagc tcagagcaca4140

aacctaggcc tgggcgtggc cactgggagc tgctgatagc gaaccccagc tcacaccagt4200

ttcttttttg gtcgtgggaa gaaaaacaca tattatcctg ttgtcacaag atctgtgacc4260

ttatatgaaa aaatgctaga attttttcat taaaaaagaa aatactgaac tagccagtga4320

cccagatgtt ttcagaacct agactggttc tgtccattgg aaaacctcgg tgtctgcatt4380

aacttttcac cacactagag ggcaatcatg ttctctaaaa aagcagatga ttgatgtaaa4440

cctagttcca aatattaact gtttaataaa atcttttctt ttaccaggaa cattcaagtg4500

tttattcaat aagctgatgc catgctttac cctagtggat gaacagagct tgtacaattt4560

tcaaggagac aggatgaaat gagtggtcat aatctgaaag tagatacacg ccctggttaa4620

ttattccctg atggttttac ttctcagttt tattacattg ttattataat accatttatg4680

ttacttctga gattttgtag tggataaata gtagaaaaat gtcagtagta atagcaaagt4740

tatttagcag ccgaatattt taatgcttaa aaataaagga ataaattaaa gaaaatcatt4800

gtttacttct tcatcgattg aaatgtgccc cctgttcaga gcacatctga atatcagagt4860

ctccacctgc agagaacatg cagcttagcg agtaaaacag gcaggtatgt gatactgagg4920

aggtgtacca aaaactgact gctgttattt ttcccatctt ctaagtctgt ctttcttttc4980

catttaaaga taccttttta aatctaatcc aatgtgattt caatctagtt ttatcagatt5040

tcaacaatta ttgagcatct ccttgtagtg gttttctgtt tattagaaaa tcgatgttaa5100

ttttaacgaa gtaagaagaa atatataagt ataaactaat tttgggtatc atcaaaagtg5160

gattttttaa atatgcattg atagaattat tttttgatta cattttatgt aattctaatc5220

cagctataaa atatttaata gtgtcatatt actgtgttcc tcaaactttg atgtgcatat5280

gaattacctt tgattttcat taaaatgcaa attctgattc aatacatctg gcttgaggca5340

gacattctgt cttccgaaca agctcccaga tgatgctgat tctgaccact aaacacatca5400

gttttaggga tattaacttg taatatacag gtatccctcc tggtaagctc tggtattatg5460

tcttaacatt tttaaatcta tggtaatctt tacaaaatat tttacttccg aactcatata5520

cctggggatt ttattactct gggaattatg tgttctgccc catcactctc tcttaattgg5580

atttttaaaa ttatattcat attgcaggac tcggcagaag accttcgaga gaaaggtaga5640

aaataagaat ttggctctct gtgtgagcat gtgtgcgtgt gtgcgagaga gagagacaga5700

cagcctgcct aagaagaaat gaatgtgaat gcggcttgtg gcacagttga caaggatgat5760

aaatcaataa tgcaagctta ctatcattta tgaatagcaa tactgaagaa attaaaacaa5820

aagattgctg tctcaatata tcttatattt attatttacc aaattattct aagagtattt5880

cttcctgaat accatgtgag aaaattctta agaatttatt gagtatgact gtatatttga5940

aaagagtgtt ttcttctgct tatctaagcc aataaaggat cttcattatt caattctaac6000

tttctaagga agtcaaccta cagatcagaa agaggatctt caaggaatag catcaaagac6060

atagtcaggt ctcccatgca gtgactggct gaccatgcag ccattaccac ctttctggaa6120

atattatgct gcaaaaatga tacaatacac gaaatatctc aaattaaaaa atataacatt6180

tcccaaatag ggcactaaaa acatgatccc aaataaaact agcttcaggg tttgcagaat6240

atactgttac tcaacacaaa gttggactaa gtctcaaagt tagccattca gttgttgtta6300

acagttcatt tcagggtctc tcagaagctg ggaaactttc catttttgca atttcttgta6360

cattgaagga aaggaagaca cacttaagac agcattacaa aagtaattca tgttttaaat6420

gtttaattct ggcagtcggg cagggctctc tgtataacct catttggaga tgacaaaaat6480

ctaaacttga gggcctcgag ccaataagtc ttcctatttc tttactcaaa cattttcccg6540

caatggtgct ttctttcaac tgtttttctg gtgtattcat aaattccaga ttctctatgg6600

gaagtaactt ttattgattg atttaaccct tgtatagcac atataacatg caaggcattg6660

ttctaagaac tttccacata ttaactgtgt taatcactta ataatcctaa gtaggttcta6720

ttacagatat ggaaactgag gcacagaaag ttgaagtatc ttactcaagg tcacacagtt6780

agtcagatcc agaatttggg cccaggccat ctggcttcgg aatccatctt tcaccgattg6840

ctgctagtct catatctgtt ccatgttaga ggtgagctcc cattgcagag gtcacacctg6900

tgatatcacc attttattta aacagaccag agatggtctt ctcctttctg atcacagact6960

caccttgaag agaaaatact tccaaattga tgcctagttt taatagctta cctggggctt7020

attcaaataa ttgccatgat ttaggctttg ggagaaagag agctatgagg ccgtgtgggt7080

tgtaacgtat gagacacatg gcgttctgca ggctcagcac agcatcgatt tctggtggga7140

acacactctg atgaccagtt ccagaaataa cattgactta atctcctcag tcccatcatg7200

gttagcacat ttcaaaatgc ctccttaact acttccatag gccagagata tttagtttta7260

acattttgtt gaataaaata aatttacaca ttcacattta atataactat tagatgttat7320

ttcaagattc tcttcatatt accatcaaag caggcaggca ggcaggagag aactgtagga7380

aggttttgaa tcccttgtga aacattttta attatctttt aataaaggaa tcaggccctg7440

tcatttgtca aggagacatt tgcagtagta aagcttgtgt ttataatatc catttttatt7500

agtcatgatt aaagataaca tttgtgtaca tttgttctca caaaacactt ttatatgagt7560

gtaaaggtta attaatgcat ttcagccatc attttgctgg tcatgtggaa atatagcttc7620

tttaggaatt gtacttagag taggagccac atattatact ataaaaccat aacaaaaata7680

ttttaagttt gttctcactt gttgttgacc tccagagtaa aatatttaat actctggaaa7740

gttatgggtt tcaaaattta ttttatggca agaaatagat aattacagtt ctcatagagc7800

acatttaaaa taatttattt ttatagggca aaaatattgc ctaggactga atgatttttt7860

tttttttaca aagattgtaa agcaacgcct gcaagagtgc ccatttagca gttattcttc7920

tggaataatt gtattttgga tgttggagtt cgcacattaa ccattagtac aagtacccaa7980

tataacaata gatcatcagg ataataaatc tgtccatctt ttagttgtat gtctttatat8040

caggataaag agaattgagt gaaatttatc taaacctagt cccacaaata cttttacaag8100

agagcatgtt aaagtgtaaa ttaaattttt attagcattc tactctgtct ttggaagttt8160

tttttcctta tgaaatgcag ccataaagtt taacttccat taacaaagct gctcacagta8220

aacctattat aataatagtt tcccagtttg ggcttcctag tgaggagcaa cctaactcac8280

acgaaacaac cccaacttat aatatattga ctgttacaaa actgagacca gaaaatccca8340

tcaagatggt actgttatca tttccagact ctcgggaaga acattaatca tctcaggcac8400

ttttaggata gacttattgc agcctccctg ggaactctgc ttcagaacat aattattttt8460

attaatgcag agttactttt tatttccaac aaaaatatct attgttatta tttaagtctt8520

acagctttat ctgagaaatt ccaattagca cccttctcat aataaatatt caaacacatg8580

aaaaattacc aaagttgttc tagtctttta atgacatatt acatgatcct gcactcttgt8640

cactttaaaa attatctttt tattatattt ctgatgattt ttttcttata tagtttttta8700

aaaggagcag gcaagcatag aagactaaaa aatgttcaaa agaaaaatta aatcgcatga8760

tctatctata tgggaccttg tcatttttag aaaacattca cctgcttcat ccttttgaat8820

cttcatataa tccctctgag atgggcatac tatacaagtt gtcttattta aagattggta8880

aatttaagct caaataattt attcagtggc aagcctcaga ggcagactcg gaacacaggt8940

ctaatatata ttatatatat attataacat ataatatata tattacatat aataaagttg9000

tgtatattat ttacctatca aaatatttat atgtaatata taaatatgtt atatatcatg9060

tatgtgccta tttcatacat atatacacat tcatgcaaaa taaggtttag cactccctcc9120

actgtcctgt aataaaacat gcacagtgag aatagtcata cacgaggcat atttgtcttc9180

agtttaaagt cattgatagt cagtgtcact aactaaagta aaatagattg gagcaccaac9240

tttgttctga agcctgtgcc aggtattatg agaacaaaaa taaaaatgtt cctcaccctt9300

ggtggattta gtcttttgca gaaaaaaaga tcctgtacat gtcagaaagt tcaatagtaa9360

taatggtaat ttataactat aaatggaagt caccatctca caatttcacc atcttaacaa9420

ttttgttaaa ctgccctaca atattacaag atagtacata atgatacact agtaacatca9480

actaggaagt accaagatcc accaaaaggc tgaaaaattt aaatatttaa tgagtccatc9540

aaccaatctg gccagagaat tctttaatta aaatgcttcc caaattttac tgagaatcag9600

cagcgtttga ggagctagcc tccaccccca gaggttctca ctctattagg tctgaagcag9660

gtcccatgga tttgcatttc taacaagctc ccaggtggtg ctgatgaggc tgattcagaa9720

ccacacttgg agtagaccta aaacagcagt gacctgtagg gtccccaagc agcaggccag9780

gacagcatgt gagttacgtc ctctgtggag ctctgcaaca aggcgtcaag aggtcagagt9840

ctaagtcccc atcagctctg cccttctcca ccagtgctgc tggtgctgca tggaaggaag9900

agcccagaag ggattctgag tttcagtctt tactcttgct gacgcacctt ggtcaggtca9960

attttcctgt ttgttcctct aattcagcat ctgtaaaata gccatgtgaa ctgccttgtc 10020

catatcagag ggtctttttc agactcaagg aaaaaaacgt gaaagtgatt agtgtctgtc 10080

aagtagtata taaatgcaag aagttgagtt tttaaattgt cattagatat aaatacccat 10140

gtgcatgcat ttagaatgag taaagaggga acaaggagcg caatcaaaaa ctgcgtcatt 10200

tgctttttga aaaatacttt ctatgtaatg aaaagtgaaa taaaatgtta attgagtccc 10260

tctgacaaca gcatcagacg ttttgcagtt cttgtgatta gaacccacct ggccagccct 10320

tcttcctcct aaagaagagc cttcttcttc ttaaatgaag gttggctcag aagaagcaat 10380

taactcattc aacgttttgt tacagtcaat ccacatccaa cttttcccca actcaatctg 10440

ctttaaggga aggatggtaa gtggtggccc aagatggcaa ccatcaagct tagagaatct 10500

ctagaagcag gggtgtcccc agcaagtaga cactgaaaat atgagagggc tgataagcca 10560

gagataaaac tcagtactta ctttgcttct agtccatgtc tacccctttc ttggcaccac 10620

cttgacacta ccctctgagt ccaccttcct gagatggtac aaactctgct tagacaaagc 10680

agcccatgtc caaaggtgtt agggctcagt ttaaagctgc cttcaaaagt taaaacagaa 10740

gtgtaaagtt ctgtgcaatt aaaaataatc agcttgtctt ggaactcaaa cgaatgtaaa 10800

atcctatgaa aattaaaaag cagtaccaca agttacccca aaagtcctta ggtcagtaac 10860

tgttcctgtt acaggtaaga gagagcatgg attagaggtg ggcgtgggta tccagtggac 10920

atggttttga accatgctcc actactactc actatctgag aattcttaaa tttattaatc 10980

atttctatat tataattttc tcagttatga aatgggaaaa caatacctaa atcacatggt 11040

tgttaagtaa gcaattgatt gttaagcatt tggtcatcaa aaatattaat ccccttccct 11100

gattccctag ataaatgatg aaaatactaa ataaaaataa taaaaattta aagtgaacat 11160

ctcaattctt atactttgtt aatttctaca tgtattacaa atctactaga aattacttgg 11220

aattgaggaa atgattactg cttaataatt ctttgtggta gagggagagt tggtatcata 11280

tttatgagac agcagccaat atagtatatc tcaaaggaaa aaatccattc tacataatgc 11340

cagaatttaa tagttaagca ttttatctag gtcacagcac aataagcaag atggataatt 11400

aaaataaaag tatatttctc ttgcatatat ttctcatttc atgtttccct atcatatttt 11460

atatcttacc ttacttcaaa tacatatata ccttcaataa aactgagcct tcttgcttac 11520

ccaggaagtt tcatcattca gtagaaataa aagatgactt tagaaatatt aaaatacaaa 11580

aatctacact gaggtctttt gaatgcagga aaaagaatta tatcacacac acacgtacac 11640

gcacgcatgc atacacacac acagaacctc tcgttctttc ttaacatctt atcaatccat 11700

cagtttcact cccactccgt atcacctgac tgtgcacaat atctcattgc cacctcccag 11760

tcttctccct gcctggcacc ctcctgctct cctgcttcca ctttaaacac ccttccttca 11820

gctaggtctt ttctttcagg gatcctcccg ttgctttctt atctggatca atttagcctt 11880

cctcttctcc acccattagt ggataagcac gacaaagaca ctagagtcaa ataatacaaa 11940

cagaatatac cttagatgag tatggtgatg aaaaggatat ggatacttag agtttagcac 12000

tattctctca gccactcagg aaagcaacgc ctttacaatc aatagtgttt caggtaccaa 12060

tcaataatct gttattgcta tttttaaaat ctataaggta tcagtaaaat gtaattacta 12120

gagcaacaaa gatatcttgt gaaatcaaat tagtattcat ccagcaactg agtacaaagg 12180

tttaagggag gataactacc aataccaaaa cattttaagc attttgtttt gcctcctaaa 12240

tatcaaatca tgtaaatgtg tggtacataa attaggaatt atatttatga catagctgca 12300

gacatattaa gagaaatatg tgcttatatt tacaagtata gtacagttct ttttcatatt 12360

agatactgtt gatgataatc tgcatataaa aatgctcaat attttttcac atttataagc 12420

cataaaatac agctaataaa atgtgtttct actttctcat aaacatggaa tagtgacaaa 12480

caaggagctt tatatgaaag caccattaca atttaaactc tcacaaggtc ataatatatt 12540

gcactaagca ggagagttca gcttatttaa aaaaaaaaat aaactctaat gaggttctgg 12600

aatgcagagc caaagcataa agatggaaat aaaagaattg catgtcttct gaactgactt 12660

ggttgatgat ttttttaaaa aaggttttgt gtcttctgac ttggttgatg attttttaaa 12720

aaaacgtttt gtggtagaac aaataaggta aatgaaattc agtatttagg atgaaaagtt 12780

tttctaattt caggaacaac attgaagaaa tattgaacta agcagctttg aaagaatcag 12840

attccatttg ttgaaatttt tctgagaatg aattttttta agacagtgta cacagttgca 12900

gtgtgtattg gttatggatt gtggcaagct atattacaac ttacccaaga aataaggagg 12960

ctgggcgtgg tggctcacac ctgtaatccc agcactttgg gtggccgagg cgggcggatc 13020

acgaggtcag gagatcgaga ccatcctggc taacacggtg aaaccccgtc tctactaaaa 13080

gtacaaaaaa ttagccgggt gtggtggcgg gtgcctgtag tcccagctac tcgggaggct 13140

gaggcaggag aatggcgtga atccgggagg gggagtttgc agtgagccga gattgtacca 13200

ctgcactcca gcctgggcga cagagcgaga ctccgtctca aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 13260

aaaagaaaga aagaaagaag gaaaaaagtc acttgaaaag aatactggac tttgtgtcca 13320

gcttgcatag ctgaaaagaa taaaaacctg tccacttaaa ctcattgcaa aaagaagatg 13380

tcactcctac aaatagcaaa gagtcatgaa attattctat ccagaaaagt atacatttca 13440

tccctttgga taaattttag aagtgaacta tgaatacata cggtgaggat agccagctaa 13500

gaagtcaaga aggatttctc aaatttgctg ctcagaaaga tcatactctc cacaaaacaa 13560

ataatagcag gctttccaag tcaaccttga atccagcttt cctttatctt tccttcttgt 13620

gaactttcac tagtttacta tctaacaatg aatttgacga tagccacata ccatcttata 13680

gcaatatttg ttatcatatc ccttgttatt tatcattcac ctgctctgct tgagccagct 13740

acaagtcaca tgtcccacgc actttttcct gtttgatttt ttacagcact ttgagacatg 13800

tctcattatt cctacttgac aggaaagaag ccatggaaag ttgagtgact tgctcctgat 13860

cacaaatgct ggccaaggaa gagtcgagtt tcaaatctaa tgatctttcc actgcactct 13920

agattcctca ttttgaacta tttttttatt ttttgcacta tagacttttt tccacatttt 13980

gaactgtttt ttattttttg cactatagac ttttctctta tacccaacta tattgatgac 14040

ttcttttagg ctagaaactt gtttcactta ctttcccttt cttcagattg ctgcaatatt 14100

ggccaacatg tattgggtac ttactgagtc aagtactgtg attgtgccaa gtatcttata 14160

ggaggattat catcctcatt tttacaggtg agaaaggaaa ggaggtaaag tcacacacag 14220

ccaacaaaaa tggtagcacc aggatttgaa acaaatcagt ctgacccaag ttgactttgt 14280

taaccactgt atgcacagtc ttcttagaca tagtaagagc tctaattgtg tttggtgatt 14340

tgattattat gacaaagtaa gtaagggaag cagggagaat tataagaaat aaggctccac 14400

aacacttggc tatagcaaag ccccttaaaa cttcaaaagg tcacccaaag aataaagatc 14460

aggctgggag cagtggctca cgcctgtaat cccagcactt tgggaggccg aggtgggtgg 14520

atcacctgag ttcaggagtt cgagaccagc ctggacaaca tggtgaaacc ctgtctctac 14580

taaaaataca aaaattagct ggatgtggtg gttgccgcct gtaatcccag ctacttggga 14640

ggctgaggca gggagaatcg cttgaaccca ggaggtggag gttgcagtga gccgagatca 14700

tgccactgca ctccagcctg ggcaacaaga gcaaaaaact ctgactcaaa aaaataaata 14760

aatcaatcaa taaaataaag atcaatttgg agaaattaat gcttattaat aagcaatgtc 14820

ttgcacagca cttcagtttc tcaatacatt acctaactca atccttacaa caacacccta 14880

tccccatttt gtggataaat aaactcatgt tcagaaggtt gaataaatta tctaaggtta 14940

atagttcctg acctagagct caaatcttca gtttctatca tattcttgcc cttaccctgg 15000

ggtagctaac attcactcac tagtattgga gctaaaataa gggagagaac atataaatga 15060

atacaaagga gacattcacc tgccttctct ttctccttac atagagaagg ttgattatct 15120

gctattgtga agtttgcctt ttgaaggata gaaatgagaa gactttctta aattttgcct 15180

ctacgccaag aaattagagt ggtaccacca gtagttccat tttcaaacta tcactgtagc 15240

taaagctatg tggtaagggc caaggaaaag aagtattctt gcacttcaaa atgcactgaa 15300

ataccagtca gtagcataat ataaaggaat ttagtggaga gaagagttga cctcaatctg 15360

gctccaacat ctcggctctt aacccctacc ctacacttgt tcttcatggg gaagctaatt 15420

gggccactgg aagattcagc agctaccatt tgcagctgag ggacagcccc tccctgctta 15480

gcaaccaatg gatatgcatt tatggaacac ctgctaactg cgacacacac tcctatgtat 15540

gagggaaaat acaaaaaatg ttaaaggaga tgccttccct tgccctcagg aaacttaagt 15600

atagttgcaa agaaatgatt agcagcaaac gaaaccatgg agaagtaagg gctaaggtct 15660

gtgaaacaag cctagaaaat aaccttgtcc ttgaaaaaca caaaaagaaa gaaagaaaga 15720

aaagaaactc caaggccctt gtgaaggaaa ccattaagtt tgcttcactt ctgtgtttag 15780

gaagacacaa acccagtctt aatgaacctc aaggccacaa ctactggaga catttaggaa 15840

ttgtcaccac attctaatgt atatatcctc tgtttggccc ttcctattaa tattttgtaa 15900

aatttttgaa gatatgagca atgtttaaaa ccatgaatcc cccttttttt ataagtaata 15960

tttaggctga ataaacaaga gaaaatagga cataaagggg agccaacgtg tgccttcatt 16020

tataatgtat tcccaagttg tgagtttggt ttatcagcaa tttatcatgc caaattccaa 16080

gtcatattta tctatgcaga tcaaacactt gattctattt ttgccttaat ttttttattg 16140

ggtatgttta tgaccaagtc atatggtatt ttctgtgaca gataaaatgc acaggttatt 16200

ccaatctggc tcagccagtc atagcaacat gtagtccttc tcatgtctta agaatgagta 16260

tcaagaattc aaagggagtt ccagatggca tccaaaaagc ttacagttta tgcatcactt 16320

attctaacag tagaaaaaga atatttgaag ccaaaaatag accttgcatg tagcatgtgg 16380

aagagtagaa attgccctga tagttaaaca atttgaaatt caagacatta atttctttat 16440

gaagcatttg tcacatcata ggtaatattt tatgcctatc atatatatac ttattatgaa 16500

atacaaagaa attattcatt ctatctaaga ctttgtatcc tttaccaata tctctccatt 16560

ctcccacctc caccctagcc cctggaaacc acccttctac tctctgcttc tatgagttct 16620

tttttagtga gatcatgcag tatttgtctt tctgttcctg tcttatttca cttgacataa 16680

tgtccttcag gcttatccat gttgtcacaa atgacagaat ttccttctta aggctgaata 16740

gtattccatt gtgtgtatgt agcacatttt ctttattaat tcatttgttg atggatactc 16800

atattgattc catatcttgg gtcttgtgaa taatgatgca gtgaacatag gagtgcagat 16860

atctttttga catactgatt ccactttgat gggatatata cccagtagtg ggactgctgg 16920

atcatctagt agttttattt ttttttattt tttatttttt ttattttgag acagagcctt 16980

gctatgtcgc ccaggctgga gtacagtggt gccatctagg ctcactgcaa tctctgcctc 17040

ctgggttcaa gcaattttcc tgcctcagcc tcctgagtag ctgggattac aggcacgcac 17100

caccatgccc ggctaatttt tgtatgttta gtagagacgg ggtttcacca tgtctcgaac 17160

tcctgtcttc aagtgatccg tccacctcag actcccaaag tgctgcgatt acaggtgtga 17220

gccaccacgc ctggcctagt agttctgttt ttaatttttt gaggagcctc catactgctt 17280

tccataatgg ctctaggaat ttacattcca ccagcagtgc acaaggattg cttttctcca 17340

cattctggct aaccagtctc ctgtcttttt gagaacagac atttcaacac gtgtgagata 17400

atatctcatt gtggttttga tttgcatttc cctgatgatt agtgatcttg tgcctttttt 17460

catataactg ctggacatta atatgccttc ctttgagaac tgtgtataca ggagaaaata 17520

atcacttctc agaggagctt tcatttcaaa atatccggga aaaaaataga aaaaatggaa 17580

aatttatcct agagtaagtt gtcttttata ttttgaccct gtttgtgaca taaactggat 17640

gatacaaaac tggaatgcaa aggctttagg aggattactt acttacttgt atattgcttt 17700

aggttgtttg cagaaaatta tactaattga agttcaggct atgatgtgat aaaatctatg 17760

tcaggagatg agtctacatg caaagtttga ggaagtgaca tttgagtttc aaaacaaaaa 17820

agcaattttc aatgtcatat ctaggttaac ccaaaagatt tctttcaccc tatttagctg 17880

cctctaagat ggatgctgag gataattaca ctgtagaaca ataggacgat gcttcacact 17940

cacctcacag gctctgttat tcccacatac tgccagagat actccaaaat aaaatcactg 18000

caacatcagg cagttataaa cctcaacggt attattttct atttatatac agtatatttt 18060

atattttaca agtataaaat agaatatatt tattctattc tctttgacac aaagtgacca 18120

taagacatat tacttaagta tgactagcaa agtcatgggg cttgtcattc aggaggaaac 18180

tcttaactaa ctgttcagtt tttgttcact gcaccattta cataagccaa actaatgctt 18240

cacactgtgc aaaacaatgc acagtgttgt gaatgaatgg ctaaaataaa actctaatga 18300

gtggggtttg aaaaatgcaa ctttagaaaa ctgttgagaa aatgttgcac actgcgcatt 18360

ttacaaaatt tcgttgaagg acactggata ttctttttag gattatggag ggaagcaaaa 18420

ttttggctcc tacatgcagt ttttgtggcc tttgcctgaa atagtcatct cccattaatt 18480

atttagatat cattcatttc ctaagacaac atttagggag actgccttaa gtacaatttg 18540

tacactaccc agataagaat tctttttggt gaaacatcga taaatattac ttggcagtaa 18600

caccaagtta aaatatttgt ttcacagtcg acgttaataa ctattataga taaagtgaat 18660

tttataagac atactcagat ctaaaacagc aatatggagc tcttcaaatc cattgaaact 18720

tcataccagc ctacggaagt agaggttttt atgcaaactc ttcaagaaat atgctctgaa 18780

cttttaattc cttagattga tagaggaatt aaatcatgat ataactaata ggtttgtggt 18840

acaaattgct gctgcttaat ctgactctgt gtcttcccag tgttctatat gaattagata 18900

ttccattatc taaagacaat caaccccatc ccacggtgat agctctagga ctccctttga 18960

gttcattaaa tctgtattct cagtctccaa acttctggtt aattcaaaca gaaaagtcaa 19020

ctggcccatg aactaaaata aagtcatctg aatttttttt ttattttgca gtgtgataaa 19080

agtctcgcac tttttatttc tgaaagtttc tgctttcact gagagcataa taggctatcc 19140

acccttatgc aatcttacat acaaagtcat agtcaggcta aattcaaaaa cacatgtgag 19200

atagaagtca acgtttattt tctggagaaa agccacacat tacaacaaag tgaacaatga 19260

agctggcatc cttatcactg gtgaccaaaa catttgtgac tctggacatt ggccccacaa 19320

atgcgataaa cattctgcat aggaagtgag ttttgctaat taaaaatgga tccaaaatac 19380

tttctactct tcagccaaga attaaaaagt aatagggagg aattgaaatc acttgggtgc 19440

tacattgagc cattctggag aagcaattca gagaatgtca tggcagcctc aaattgctgc 19500

tcaggagcat cccagcttag aagattgcag gaaaggaaga gcaaagtcat tcttacatga 19560

gaactgtcct taaccagatg aatagactct ccatttttta ccctggcttt gtctcattta 19620

agtcccaacc aatctagcta tcattttagg ttttactacc tgctagtatt taggagctta 19680

gggggataaa aaaatccctc aatactcaga attagacttg gtgataaaaa tcttgacaca 19740

taaacagaat aaagcgcttt cattactcct ctaaaccaca gtgtcatttg gtctctatca 19800

aggactgtaa gaatttcttt catcagggga aagaaaaaaa ggacaagagc ctgcaagatg 19860

tagcggaact ctcattaaac acagcaggag ctttaactgg aatccagagt aaggtgaggt 19920

accaggttac aacaatttac tgcttttatt acaattttga tcacaaggac tgattcatgt 19980

catctagttt cttttccttg tcactatcac tggtgctaag aatacatcaa attgaaattt 20040

aagagcctca tatgtttctg tataacccag tgatgggttg tactgctttg accttcttaa 20100

atgtcccttt atttcatttg atatccattc ccatagaaaa actataatgc tttggttggt 20160

caaaatatta atctttcaaa acctccctgg cttagaaaac caaatttttg tagagagaga 20220

tgggtagaat ctaattttat tctaaagcaa ttagcattac atcatcacag cagaaatatc 20280

tagaatatta cctcatgtca gtgatcttct gatatgttaa aaagggtatt ttaaaatctg 20340

agttatttct ttttcttttt aaagttacat cattaattac atactcatca accaaaatat 20400

tttatgctcc aaatttgaac cgatatagta tgtaagaagt gttcaaaatg aaattatttt 20460

ggtctatttt gtctttgaag aagatcacag ggatggacct cccaaaagga tttttaaatg 20520

ggattacata tctgactttt aaaaaaaatt atctgacctt gagttatagt gccccaaagt 20580

aagcaaagtt ccaaacacac agtatcatca gaattgagtt aaaattatca ccaggggctt 20640

aatttctgaa attaaaaagg aaatgttatt tccttatgaa aagaaaagga accaaaaatg 20700

aacttcaagg tagctgattt ctgtctatgt taagacttag gtaatgggag aaagggaaaa 20760

ggaaggacag aattaggaga ggagcagtgt ttaacaattg cgggtgcaag actcaagttt 20820

tttagaatcc attagcagag aaccctattt ctcccattaa ctgctgtcct tttaaatcct 20880

ggcaccagct ctgaggactg cagggtccat agctagtgcc ccactctacc cagtttaaag 20940

acaccactgc ctggaaatga caggggtttt tttcttaagg aaagaggtgc tttctgccac 21000

gtatatataa attggtaagc ttcaaataaa gtgcttttgt cctttctgtc tatcagaaac 21060

tgtgcaaatc gaattgctgt aaaaccaagg gcaagagaca tcaatcctgc attctatagc 21120

atctgatttt atcctttatc cccaggcaca tttcaaaagg aaaaaaatga ggttgcattt 21180

aaattgagta tttgggactt gccaggaaaa cctcccgcta gactaatatg attgcaggga 21240

aaacaagaga aaggaaaagt ggagagggag tgtgctaaca gatcctgggc ctcgtcagca 21300

gagccgtcct gagcacaagg ccatggtcag acatctggtc ccgcgaatga cgttttcttt 21360

atggtcatta agaacaccag tgtgtcggga cacaaacaag tattcctttc agggattatg 21420

acacattttc tcccaaagta gtatattaat gacatttcca gagcattctt tactatcttt 21480

tatatgtgat caggaagact aatacatatc actacttctt ttacacacag cattagccaa 21540

aactaaagtg tcaaatacaa ttttgcctag gatgaataaa cagaagaaat ttttatgata 21600

ctgcactatc aattccaaat taaataacaa caaaatgata agtgttaaaa ttcatattaa 21660

tgattgttcc cacacaagcc ggaaaaaatc tttctaagaa gtctttcatg agttaatccc 21720

atctttcaaa gtgttcagtg gctccgaatt cagttactgt ttcctatcag ttcttctttc 21780

attaagtctc ttcccttttt tttctctttg cactatttcc cttagccggg tacataatct 21840

gctgtgcttt attcatttgt gtcttaagtt tgtttcccga tgacatacct ttccagcaac 21900

gccatctggg gagtttgggc aactgtacca cgttaggagg aaacccttct tcacaggaga 21960

gtgtgccttt gctgcaggga aggaattagg atttgcttgg actgtggttg cagctggctt 22020

ttaaggatct ccttagaatg caagcaactc atcaatgaga atctctgcaa tggttgtcac 22080

tgggtagagt catgctatgt ggggtcatag cctttgaaac aaataacagt aaagataaaa 22140

atgctattaa aggaatcacc acccacagag gttaactggg ttttgtcccc agaccacctc 22200

gaacaagaaa gaacattttt atcagtcatt ttcttagttt tagctgataa aacaaagtac 22260

catagactag gtggcttata aacaacagaa atttattttt cacagctttg gaaactggaa 22320

gtctgagatc aggccgccag aatgatcaga ttctagttag ggcctacttt gcttttgcag 22380

actgccaact tctagctgca ttttcatgtg gcaaaaggag attgagctag ctctctggtc 22440

tcttcttata aggacactaa tcccattcat gaaggcttca ccttcatcat ctaattactc 22500

tccaaagacc ccacctccaa atactatcac attgggaatt agatttcaaa tacaaatttt 22560

gcggggacac aaatattcag tccataatag taatgattac tcattataca tagggctcta 22620

aatgtgctag cttctgatag tttttacact cacttctctt tattagcttg tcaagcataa 22680

ttagggcagt ggccttactg aaaattattg aatttagttt cctaaggaca gatattgagg 22740

agttttttct tcactaaaaa ttcacgttcc gatacagctt tcatctgtta ctactttgtg 22800

agatggaaaa tcttttattt tatttttatg tttggattga cccttcttaa taaagtcggc 22860

atgtaatatg cttcatgtgt ttctaatatg tgcttaattt tgcaaaatgt tttgcatacc 22920

agaatgcatt tctcttccaa aaaaggtacc agcctacaaa accttgctgt tactgttttc 22980

aattagttca tggaattaaa tgtattaaat gttttatgct ctggcagaaa ttatgattct 23040

cacttaactc catataaatc tggatctgcc tgggccttta taagtgacac aatttcatta 23100

actgaataaa caaatgatac aaagaaattt ggtttagcct tctaaaattc caaaggcgtt 23160

caacaaaata tctcagaatg gatgttccag gacttttatg gcacaggaca acatgtattg 23220

cttattttaa gaaaataagc taaatagtga ggggattctt ttagcagatc ctcaggatgt 23280

gttaggttga atcataggca aatgatattt gatcattgca cctgttaaca cattgaacct 23340

catcctaaaa ttgtagagct agaagaaagc cttctggcag tttttaaata gattgattta 23400

ctgcaattta tccagaagct tcaccgttgt cactggctac atgtgacttt ggcctctgtg 23460

gggctatatc ctcatttgta aaattggtgg tgaggtaggt ggacagttga ctaaataatc 23520

tcttagaata attctagtat ctgtggatct aaagcatcca ggggttgaat atgtttcttt 23580

ctggccaaga aaagatgcac ctgtcaataa tgcccaaact catcttctga gaatcctctt 23640

tcccaagata cccactctcc cttgggttat attatagtaa tgatcagaag cccctgccaa 23700

gaagaaactg ttaacctggg aggtctatat tttatttcac agccatctgt ttatactttc 23760

tcacaagtta gtgcacagta tacccatcat tttctaccat tttccttaat ttattaattt 23820

tactaattgc ataattaaca aaagtaagaa gattttacct ccttatcccc atctggtagt 23880

ttgcagatac ttggcctgat gacaactgac agtgatgaga tactcaccaa gtttaccagg 23940

gcaggaggct tcctagagaa aaaatgagaa aatgaaatgg ggaaggggag tgaaggattg 24000

aggaggtgac aatctggact cttgcaactg catggcaagg ttggcacaca agctgggttg 24060

caacggaggg aaggagatcc ttatcagatg taatcagagc tcagatcgag ggctttggtg 24120

tgtgtagaaa gagggagaga caaagaactt aaaacagagc tgccatttga ccttgcaatc 24180

ccattacttg gtgtataccc aaaggagaat aaatcattct attaaaaaga cacatgtgct 24240

tgtatgttca tggcagcact attcacaata gctaagacat ggaatcaaac taggtgtcca 24300

tctatggcag attggataaa gaaaatgggg taaatataaa gcatgcaata caacatggcc 24360

ataagaaaaa atgaaatcat gtcctttgct gcaacatgga tgcagttggg acccataatc 24420

ctaagtgaat taacacagga acagaaaacc aaatacagca tgttctcact tataagtggg 24480

agctaaacac tgagcacaca tggacataaa tatgagaaca ataaacactg tggactacta 24540

gaggggggaa ggagagaggt ttgtaaaact acctatcagg tgctatgctc aatacctggg 24600

tgatgggatt tacaccccaa acatcagcat catttaatat tcccatgtaa aaagactgca 24660

catatacccc ttgtatctaa aataaaactt gaaattaaaa aaaaaagaaa gaaagaaaga 24720

ggctggaaat agaggctcac acctgtaatc ccagcacttt gggtggccaa ggtgggtgga 24780

ttgcttgagc ccgggaattc aagaccagcc tgagaaacct ggtgaaactc tgtctgtaca 24840

aaaaatacaa aaattatcca ggcatggtgg agcgcacctg tagtcccagc taatggggag 24900

gctgaggggg gaacatcact tgagcccagg aggtggaggt tgcagtgagc tgggatcaca 24960

ccactgcact acagcctggg taacagagca actctgtctc aaagagagag aggaaagaaa 25020

aaagaaaaga tggacagata agaaaatgca cttggagatt aagagaaagc agcaacatag 25080

gaccctggat aatgtgtttg cttaataact atcctgatga gttatctgac tattcccaaa 25140

tgagtacgtg gcaattcagg ctgaaccatc agagtagccc tccggaatct tacttatgta 25200

caatagacct gcatgcacat ttactagaat gagcctctct ctctggtaat catgtctgct 25260

tccactaatt ccatctgttt cctctctctc cctcctatcc tgctagatct taattccttc 25320

gaccttcctt tgtttttcta actccctttc tttctcttgt tatttaacct gctatactat 25380

gcaattgatc tcctctgcac taaggaacat gcacttcaga attctgttga catcttgcat 25440

tcctttatat ttagtgaaag aatgcaaagg agtctacctg gcaatattca ctctgcagga 25500

ggcaataatt attattcaaa ttaaaggaag cagtaaagag aaattcagaa aaaatgaaat 25560

atactaatct tcagcttttc atttcag 25587

<210>394

<400>394

000

<210>395

<400>395

000

<210>396

<400>396

000

<210>397

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物GAPDH FWD 5'-3'

<400>397

gttcgacagt cagccgcatc20

<210>398

<211>19

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物GAPDH RVS 5'-3'

<400>398

ggaatttgcc atgggtgga 19

<210>399

<211>23

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物RPLP0_2 FWD 5'-3'

<400>399

tctacaaccc tgaagtgctt gat23

<210>400

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>RPLP0_2 RVS 5'-3'

<400>400

caatctgcag acagacactg g21

<210>401

<400>401

000

<210>402

<400>402

000

<210>403

<400>403

000

<210>404

<400>404

000

<210>405

<400>405

000

<210>406

<400>406

000

<210>407

<211>19

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物mCherry FWD 5'-3'

<400>407

gttcatgcgc ttcaaggtg 19

<210>408

<211>19

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物mCherry RVS 5'-3'

<400>408

ttggtcacct tcagcttgg 19

<210>409

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物EGFP FWD 5'-3'

<400>409

acaggtactg tgcctatcaa ag 22

<210>410

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物EGFP RVS 5'-3'

<400>410

tgtggcggat cttgaagtta g21

<210>411

<211>31

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>UNC13A小基因FWD引物

<400>411

aggtcatatg cactgctata gtgggaagtt c 31

<210>412

<211>34

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>UNC13A小基因RVS引物

<400>412

cttacatatg taataactca accacacttc catc34

<210>413

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_CE_小基因FWD 5'-3'

<400>413

gattgaacag atgaatgagt gatga25

<210>414

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物UNC13A_CE_小基因RVS 5'-3'

<400>414

tgtctggacc aatgttggtg20

<210>415

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物GFP_OE FWD 5'-3'

<400>415

gaagcgcgat cacatggt18

<210>416

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物GFP_OE RVS 5'-3'

<400>416

ccatgccgag agtgatcc18

<210>417

<400>417

000

<210>418

<400>418

000

<210>419

<400>419

000

<210>420

<400>420

000

<210>421

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物TARDBP_2 FWD 5'-3'

<400>421

tggacgatgg tgtgactgca a21

<210>422

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 引物TARDBP_2 RVS 5'-3'

<400>422

agagaagaac tcccgcagct ca 22

<210>423

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_1

<400>423

tcaacaaact agttcctg18

<210>424

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_2

<400>424

acaaactagt tcctgggg18

<210>425

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_3

<400>425

aactagttcc tggggata18

<210>426

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_4

<400>426

tagttcctgg ggataaga18

<210>427

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_5

<400>427

ttcctgggga taagagtt18

<210>428

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_6

<400>428

ctggggataa gagttctt18

<210>429

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_7

<400>429

gggataagag ttctttcc18

<210>430

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_8

<400>430

ataagagttc tttccagg18

<210>431

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_9

<400>431

agagttcttt ccaggaaa18

<210>432

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_10

<400>432

gttctttcca ggaaaccc18

<210>433

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_11

<400>433

ctttccagga aacccagg18

<210>434

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_12

<400>434

tccaggaaac ccaggcag18

<210>435

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_13

<400>435

aggaaaccca ggcagctg18

<210>436

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_14

<400>436

aaacccaggc agctggaa18

<210>437

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_15

<400>437

cccaggcagc tggaagag18

<210>438

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_16

<400>438

aggcagctgg aagagaca18

<210>439

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_17

<400>439

cagctggaag agacatac18

<210>440

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_18

<400>440

ctggaagaga cataccca18

<210>441

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_19

<400>441

gaagagacat acccagac18

<210>442

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_20

<400>442

gagacatacc cagacaca18

<210>443

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_21

<400>443

acatacccag acacaaac18

<210>444

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_22

<400>444

tacccagaca caaacggc18

<210>445

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_23

<400>445

ccagacacaa acggccca18

<210>446

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_24

<400>446

gacacaaacg gcccaatc18

<210>447

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_25

<400>447

acaaacggcc caatcctg18

<210>448

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_26

<400>448

aacggcccaa tcctgagt18

<210>449

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_27

<400>449

ggcccaatcc tgagtggt18

<210>450

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_28

<400>450

ccaatcctga gtggttag18

<210>451

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_29

<400>451

atcctgagtg gttagggc18

<210>452

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_30

<400>452

ctgagtggtt agggctgg18

<210>453

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_31

<400>453

agtggttagg gctggaat18

<210>454

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_32

<400>454

ggttagggct ggaataga18

<210>455

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_33

<400>455

tagggctgga atagaagg18

<210>456

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_34

<400>456

ggctggaata gaaggaag18

<210>457

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_35

<400>457

tggaatagaa ggaagaac18

<210>458

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_36

<400>458

aatagaagga agaacctg18

<210>459

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_37

<400>459

agaaggaaga acctgatg18

<210>460

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_38

<400>460

aggaagaacc tgatgatg18

<210>461

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_39

<400>461

aagaacctga tgatgagt18

<210>462

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_40

<400>462

aacctgatga tgagtagt18

<210>463

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_41

<400>463

ctgatgatga gtagtgag18

<210>464

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_42

<400>464

atgatgagta gtgagagt18

<210>465

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_43

<400>465

atgagtagtg agagtcaa18

<210>466

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_44

<400>466

agtagtgaga gtcaacct18

<210>467

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_45

<400>467

agtgagagtc aacctgga18

<210>468

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_121

<400>468

ggcagctgga agagacat18

<210>469

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_122

<400>469

gcagctggaa gagacata18

<210>470

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_123

<400>470

cagctggaag agacatac18

<210>471

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_124

<400>471

agctggaaga gacatacc18

<210>472

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_125

<400>472

gctggaagag acataccc18

<210>473

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_126

<400>473

ctggaagaga cataccca18

<210>474

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_127

<400>474

tggaagagac atacccag18

<210>475

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_128

<400>475

ggaagagaca tacccaga18

<210>476

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_129

<400>476

gaagagacat acccagac18

<210>477

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_130

<400>477

aagagacata cccagaca18

<210>478

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_131

<400>478

agagacatac ccagacac18

<210>479

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_132

<400>479

ggcagctgga agagacat18

<210>480

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_133

<400>480

gcagctggaa gagacata18

<210>481

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_134

<400>481

cagctggaag agacatac18

<210>482

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_135

<400>482

agctggaaga gacatacc18

<210>483

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_136

<400>483

gctggaagag acataccc18

<210>484

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_137

<400>484

ctggaagaga cataccca18

<210>485

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_138

<400>485

tggaagagac atacccag18

<210>486

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_139

<400>486

ggaagagaca tacccaga18

<210>487

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_140

<400>487

gaagagacat acccagac18

<210>488

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_141

<400>488

aagagacata cccagaca18

<210>489

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_142

<400>489

agagacatac ccagacac18

<210>490

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_248

<400>490

catctatcca tccatgta18

<210>491

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_249

<400>491

ctatccatcc atgtactc18

<210>492

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_250

<400>492

tccatccatg tactcacc18

<210>493

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_251

<400>493

atccatgtac tcacccat18

<210>494

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_252

<400>494

catgtactca cccatctc18

<210>495

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_253

<400>495

gtactcaccc atctctcc18

<210>496

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_254

<400>496

ctcacccatc tctccatc18

<210>497

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_255

<400>497

acccatctct ccatccat18

<210>498

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_256

<400>498

catctctcca tccatcct18

<210>499

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_257

<400>499

ctctccatcc atcctttt18

<210>500

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_258

<400>500

tccatccatc cttttatc18

<210>501

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_259

<400>501

atccatcctt ttatctac18

<210>502

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_260

<400>502

catcctttta tctactca18

<210>503

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_261

<400>503

ccttttatct actcatca18

<210>504

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_262

<400>504

tttatctact catcactc18

<210>505

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_263

<400>505

atctactcat cactcatt18

<210>506

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_264

<400>506

tactcatcac tcattcat18

<210>507

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_265

<400>507

tcatcactca ttcatctg18

<210>508

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_266

<400>508

tcactcattc atctgttc18

<210>509

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_267

<400>509

ctcattcatc tgttcaat18

<210>510

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_268

<400>510

attcatctgt tcaatcat18

<210>511

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_269

<400>511

catctgttca atcattca18

<210>512

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_270

<400>512

ctgttcaatc attcattc18

<210>513

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_271

<400>513

ttcaatcatt cattcatt18

<210>514

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_272

<400>514

aatcattcat tcattcac18

<210>515

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_273

<400>515

cattcattca ttcaccag18

<210>516

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_274

<400>516

tcattcattc accagcat18

<210>517

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_275

<400>517

ttcattcacc agcattta18

<210>518

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_276

<400>518

attcaccagc atttattc18

<210>519

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_277

<400>519

caccagcatt tattcaac18

<210>520

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_278

<400>520

cagcatttat tcaacaaa18

<210>521

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_279

<400>521

catttattca acaaacta18

<210>522

<211>18

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_280

<400>522

ttattcaaca aactagtt18

<210>523

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_306

<400>523

acaaactagt tcctggggat a21

<210>524

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_307

<400>524

caaactagtt cctggggata a21

<210>525

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_308

<400>525

aaactagttc ctggggataa g21

<210>526

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_309

<400>526

aactagttcc tggggataag a21

<210>527

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_310

<400>527

actagttcct ggggataaga g21

<210>528

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_311

<400>528

ctagttcctg gggataagag t21

<210>529

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_312

<400>529

tagttcctgg ggataagagt t21

<210>530

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_313

<400>530

agttcctggg gataagagtt c21

<210>531

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_314

<400>531

gttcctgggg ataagagttc t21

<210>532

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_315

<400>532

ttcctgggga taagagttct t21

<210>533

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_316

<400>533

tcctggggat aagagttctt t21

<210>534

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_317

<400>534

cctggggata agagttcttt c21

<210>535

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_318

<400>535

ctggggataa gagttctttc c21

<210>536

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_319

<400>536

tggggataag agttctttcc a21

<210>537

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_320

<400>537

ggggataaga gttctttcca g21

<210>538

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_321

<400>538

gggataagag ttctttccag g21

<210>539

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_322

<400>539

ggataagagt tctttccagg a21

<210>540

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_323

<400>540

gataagagtt ctttccagga a21

<210>541

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_324

<400>541

ataagagttc tttccaggaa a21

<210>542

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_325

<400>542

taagagttct ttccaggaaa c21

<210>543

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_326

<400>543

aagagttctt tccaggaaac c21

<210>544

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_327

<400>544

agagttcttt ccaggaaacc c21

<210>545

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_328

<400>545

gagttctttc caggaaaccc a21

<210>546

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_329

<400>546

agttctttcc aggaaaccca g21

<210>547

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_330

<400>547

gttctttcca ggaaacccag g21

<210>548

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_331

<400>548

ttctttccag gaaacccagg c21

<210>549

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_332

<400>549

tctttccagg aaacccaggc a21

<210>550

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_333

<400>550

ctttccagga aacccaggca g21

<210>551

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_334

<400>551

tttccaggaa acccaggcag c21

<210>552

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_335

<400>552

ttccaggaaa cccaggcagc t21

<210>553

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_336

<400>553

tccaggaaac ccaggcagct g21

<210>554

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_337

<400>554

ccaggaaacc caggcagctg g21

<210>555

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_338

<400>555

caggaaaccc aggcagctgg a21

<210>556

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_339

<400>556

aggaaaccca ggcagctgga a21

<210>557

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_340

<400>557

ggaaacccag gcagctggaa g21

<210>558

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_341

<400>558

gaaacccagg cagctggaag a21

<210>559

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_342

<400>559

aaacccaggc agctggaaga g21

<210>560

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_343

<400>560

aacccaggca gctggaagag a21

<210>561

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_344

<400>561

acccaggcag ctggaagaga c21

<210>562

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_345

<400>562

cccaggcagc tggaagagac a21

<210>563

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_346

<400>563

ccaggcagct ggaagagaca t21

<210>564

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_347

<400>564

caggcagctg gaagagacat a21

<210>565

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_348

<400>565

aggcagctgg aagagacata c21

<210>566

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_349

<400>566

ggcagctgga agagacatac c21

<210>567

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_350

<400>567

gcagctggaa gagacatacc c21

<210>568

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_351

<400>568

cagctggaag agacataccc a21

<210>569

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_352

<400>569

agctggaaga gacataccca g21

<210>570

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_353

<400>570

gctggaagag acatacccag a21

<210>571

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_354

<400>571

ctggaagaga catacccaga c21

<210>572

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_355

<400>572

catctatcca tccatgtact c21

<210>573

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_356

<400>573

atctatccat ccatgtactc a21

<210>574

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_357

<400>574

tctatccatc catgtactca c21

<210>575

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_358

<400>575

ctatccatcc atgtactcac c21

<210>576

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_359

<400>576

tatccatcca tgtactcacc c21

<210>577

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_360

<400>577

atccatccat gtactcaccc a21

<210>578

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_361

<400>578

tccatccatg tactcaccca t21

<210>579

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_362

<400>579

ccatccatgt actcacccat c21

<210>580

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_363

<400>580

catccatgta ctcacccatc t21

<210>581

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_364

<400>581

atccatgtac tcacccatct c21

<210>582

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_365

<400>582

tccatgtact cacccatctc t21

<210>583

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_366

<400>583

ccatgtactc acccatctct c21

<210>584

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_367

<400>584

catgtactca cccatctctc c21

<210>585

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_368

<400>585

atgtactcac ccatctctcc a21

<210>586

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_369

<400>586

tgtactcacc catctctcca t21

<210>587

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_370

<400>587

gtactcaccc atctctccat c21

<210>588

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_371

<400>588

tactcaccca tctctccatc c21

<210>589

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_372

<400>589

actcacccat ctctccatcc a21

<210>590

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_373

<400>590

ctcacccatc tctccatcca t21

<210>591

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_374

<400>591

tcacccatct ctccatccat c21

<210>592

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_375

<400>592

cacccatctc tccatccatc c21

<210>593

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_376

<400>593

acccatctct ccatccatcc t21

<210>594

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_377

<400>594

cccatctctc catccatcct t21

<210>595

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_378

<400>595

ccatctctcc atccatcctt t21

<210>596

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_379

<400>596

catctctcca tccatccttt t21

<210>597

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_380

<400>597

atctctccat ccatcctttt a21

<210>598

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_381

<400>598

tctctccatc catcctttta t21

<210>599

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_382

<400>599

ctctccatcc atccttttat c21

<210>600

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_383

<400>600

tctccatcca tccttttatc t21

<210>601

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_384

<400>601

ctccatccat ccttttatct a21

<210>602

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_385

<400>602

tccatccatc cttttatcta c21

<210>603

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_386

<400>603

ccatccatcc ttttatctac t21

<210>604

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_387

<400>604

catccatcct tttatctact c21

<210>605

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_388

<400>605

atccatcctt ttatctactc a21

<210>606

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_389

<400>606

tccatccttt tatctactca t21

<210>607

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_390

<400>607

ccatcctttt atctactcat c21

<210>608

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_391

<400>608

catcctttta tctactcatc a21

<210>609

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_392

<400>609

atccttttat ctactcatca c21

<210>610

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_393

<400>610

tccttttatc tactcatcac t21

<210>611

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_394

<400>611

ccttttatct actcatcact c21

<210>612

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_395

<400>612

cttttatcta ctcatcactc a21

<210>613

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_396

<400>613

ttttatctac tcatcactca t21

<210>614

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_397

<400>614

tttatctact catcactcat t21

<210>615

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_398

<400>615

ttatctactc atcactcatt c21

<210>616

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_399

<400>616

tatctactca tcactcattc a21

<210>617

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_400

<400>617

atctactcat cactcattca t21

<210>618

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_401

<400>618

tctactcatc actcattcat c21

<210>619

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_402

<400>619

ctactcatca ctcattcatc t21

<210>620

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_403

<400>620

tactcatcac tcattcatct g21

<210>621

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_404

<400>621

actcatcact cattcatctg t21

<210>622

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_405

<400>622

ctcatcactc attcatctgt t21

<210>623

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_406

<400>623

tcatcactca ttcatctgtt c21

<210>624

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_407

<400>624

catcactcat tcatctgttc a21

<210>625

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_408

<400>625

atcactcatt catctgttca a21

<210>626

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_409

<400>626

tcactcattc atctgttcaa t21

<210>627

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_410

<400>627

cactcattca tctgttcaat c21

<210>628

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_411

<400>628

actcattcat ctgttcaatc a21

<210>629

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_412

<400>629

ctcattcatc tgttcaatca t21

<210>630

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_413

<400>630

tcattcatct gttcaatcat t21

<210>631

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_414

<400>631

cattcatctg ttcaatcatt c21

<210>632

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_415

<400>632

attcatctgt tcaatcattc a21

<210>633

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_416

<400>633

ttcatctgtt caatcattca t21

<210>634

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_417

<400>634

tcatctgttc aatcattcat t21

<210>635

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_418

<400>635

catctgttca atcattcatt c21

<210>636

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_419

<400>636

atctgttcaa tcattcattc a21

<210>637

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_420

<400>637

tctgttcaat cattcattca t21

<210>638

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_421

<400>638

ctgttcaatc attcattcat t21

<210>639

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_422

<400>639

tgttcaatca ttcattcatt c21

<210>640

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>反义寡核苷酸MTx_ASO_423

<400>640

gttcaatcat tcattcattc a21

<210>641

<211>150

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(150)

<223>隐蔽外显子剪接受体hg38 chr19:17,642,640-17,642,491

<400>641

tccaggttga ctctcactac tcatcatcag gttcttcctt ctattccagc cctaaccact60

caggattggg ccgtttgtgt ctgggtatgt ctcttccagc tgcctgggtt tcctggaaag 120

aactcttatc cccaggaact agtttgttga150

<210>642

<211>114

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(114)

<223>隐蔽外显子剪接供体hg38 chr19 17,642,504-17,642,391

<400>642

aactagtttg ttgaataaat gctggtgaat gaatgaatga ttgaacagat gaatgagtga60

tgagtagata aaaggatgga tggagagatg ggtgagtaca tggatggata gatg 114

<210>643

<211>69

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(69)

<223>隐蔽外显子剪接受体hg38 chr19 17,642,562-17,642,494

<400>643

gtctgggtat gtctcttcca gctgcctggg tttcctggaa agaactctta tccccaggaa60

ctagtttgt69

<210>644

<211>89

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(89)

<223>隐蔽外显子剪接供体hg38 chr19 17,642,479-17,642,391

<400>644

tgaatgaatg aatgattgaa cagatgaatg agtgatgagt agataaaagg atggatggag60

agatgggtga gtacatggat ggatagatg89

<210>645

<211>45

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>ASO 1-10编译序列

<400>645

tcaacaaact agttcctggg gataagagtt ctttccagga aaccc45

<210>646

<211>30

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>ASO 17-21编译序列

<400>646

cagctggaag agacataccc agacacaaac 30

<210>647

<211>39

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>ASO 249-256编译序列

<400>647

ctatccatcc atgtactcac ccatctctcc atccatcct 39

<210>648

<211>33

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>ASO 260-265编译序列

<400>648

catcctttta tctactcatc actcattcat ctg 33

<210>649

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223>ASO 271-272编译序列

<400>649

ttcaatcatt cattcattca c21

<210>650

<211>45

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(45)

<223>ASO 1-10编译序列反向互补序列

<400>650

gggtttcctg gaaagaactc ttatccccag gaactagttt gttga45

<210>651

<211>30

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(30)

<223>ASO 17-21编译序列反向互补序列

<400>651

gtttgtgtct gggtatgtct cttccagctg 30

<210>652

<211>39

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(39)

<223>ASO 249-256编译序列反向互补序列

<400>652

aggatggatg gagagatggg tgagtacatg gatggatag 39

<210>653

<211>33

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(33)

<223>ASO 260-265编译序列反向互补序列

<400>653

cagatgaatg agtgatgagt agataaaagg atg 33

<210>654

<211>21

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(21)

<223>ASO 271-272编译序列反向互补序列

<400>654

gtgaatgaat gaatgattga a21