甾体衍生物及其药物组合物和用途

技术领域

本发明涉及但不限于药物化学技术领域，尤其涉及一种甾体衍生物及其药物组合物和用途。

背景技术

中国专利CN102076344B公开了一甾体化合物，其化学结构为：

该类化合物是一类NF-κB的非激素甾体调节剂，可用治疗和预防肌肉萎缩疾病，包括外伤性脑损伤、脊髓损伤等疾病；

NF-κB与人体多种疾病相关，对甾体类化合物进行修饰可在一定程度上可调节甚至改变其作用，因此，开发新型结构的甾体类药物以发现更多的药物用途仍有必要。

发明内容

本发明人开发了一种新型结构的甾体衍生物，该化合物具有抗病毒、抗肿瘤及抗炎等作用，可用于某些病毒性感染、实体瘤等的治疗或辅助治疗。

本发明一方面提供一种如式(I

式(I

Q

Y

Y

Y

R

R

R

R

所述的基团A选自下列基团：卤素、OH、-N(R

在一些实施方案中，本发明提供一种如式(I)或式(II)所示的甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐：

式(I)或式(II)中，碳原子4和碳原子5之间为双键，而碳原子5和碳原子6之间为单键；或碳原子5和碳原子6之间为双键，而碳原子4和碳原子5之间为单键；

Y

R

R

R

R

所述的基团A选自下列基团：卤素、OH、-N(R

在一些实施方案中，本发明提供一种如式(III)或式(IV)所示的甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐：

式(III)或式(IV)中取代基的定义如前所述。

在一些实施方案中，本发明提供的一种如式(V)或式(VI)所示的甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐：

式(V)或式(VI)中取代基的定义如前所述。

在一些实施方案中，本发明提供的一种如式(VII)或式(VIII)所示的甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐：

式(VII)或式(VIII)中取代基的定义如前所述。

在一些实施方案中，本发明提供的一种如式(IX)所示的甾体化合物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐：

式(IX)中取代基的定义如前所述。

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，式(I

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，上述式(I

在一些实施方案中，本发明提供的上述甾体化合物，选自下列化合物：

/>

/>

另一方面，本发明提供了包含上述甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐的药物组合物。

本发明公开了一种药物组合物，其以本发明所述的甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐为活性成分或主要活性成分之一，辅以药学上可接受的载体。

第三方面，本发明提供了上述甾体衍生物、互变异构体、立体异构体、及其药学上可接受的盐具有抗病毒、抗肿瘤及抗炎等作用。

本发明所述甾体衍生物可以被配制为药用组合物，按照多种合适选择的给予方式给患者用药，这些途径包括全身例如口服或胃肠外，通过静脉内、肌肉、透皮或皮下等。

定义：

构成本发明的一部分是药学上可接受的溶剂化物，可以使结晶水合物或者是与其它溶剂结晶物，如乙醇等。

构成本发明的一部分是药学上可接受的盐：

如果本发明化合物为碱性的，则适当的“药学上可接受的盐”包括本发明化合物和无机酸或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，包括得自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等的盐，也包括得自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等的盐。

如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”是指本发明化合物通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。

术语“烷基”表示饱和的脂烃基，包括直链、支链基团烷基或环烷基，可以是取代的或未取代的。当是取代的烷基时，该取代基优选是一或多个，更优选1-3个，最优选1或2个取代基。

术语“烯基”表示含不饱和的碳碳双键的脂烃基，包括直链、支链或环状的烃基；可以是取代的或未取代的。碳碳双键可以是一或多个。

术语“环烷基”表示全部为碳的单环或稠合的环(“稠合”环意味着系统中的每个环与系统中的其它环共享毗邻的一对碳原子)基团，其中一个或多个环不具有完全连接的π电子系统，环烷基的实例(不局限于)为环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、金刚烷、环己二烯、环庚烷和环庚三烯。环烷基可为取代的和未取代的。

术语“芳基”表示6至14个碳原子的全碳单环或稠合多环基团，具有完全共轭的π电子系统。芳基的非限制性实例有苯基、萘基和蒽基。芳基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，更优选为一个、两个或三个，进而更优选为一个或两个。

术语“羟基”表示-OH基团.

术语“氨基”表示-NH

术语“羧基”表示-COOH基团。

术语“巯基”表示-SH基团。

术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘，优选为氟或氯。

本申请书中提到的数字范围，例如“C1-C18”，是指该基团可以含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，直至包括18个碳原子。

本发明所述的甾体衍生物具有抗病毒、抗肿瘤及抗炎等作用，可用于某些病毒性感染、实体瘤等的治疗或辅助治疗。所述的病毒性感染包括但不限于乳头多瘤空泡病毒、疱疹病毒、痘病毒、麻疹病毒等引起的感染；所述的实体瘤包括但不限于皮肤癌、胃肠道癌、肾癌、前列腺癌、乳腺癌等；该类化合物对一些包括渗出性炎症或特异性炎症在内的炎症有作用。

附图说明

图1表示的是本发明化合物对HSV-1病毒感染的豚鼠皮肤引起的病变的治疗作用。

具体实施方式

以下实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明，所有化合物的结构均经MS或

实施例1：

化合物DSC2901的合成：

反应瓶中加入1g化合物1,0.46g半胱氨酸乙酯盐酸盐和10ml吡啶，体系氮气保护下室温反应8小时。体系减压浓缩至干，加入约50ml的二氯甲烷和10ml水分液，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩至干。体系加入25ml无水乙醇，加热至沸，趁热过滤后，体系降温结晶，得到0.41g化合物DSC2901，收率31％，ESI-MS(+):m/z 534.19[M+H]。

实施例2：

化合物DSC2902的合成：

反应瓶中加入1g化合物1,2.77g半胱氨酸乙酯盐酸盐和20ml的吡啶，体系氮气保护下室温反应10小时。体系减压浓缩至干，加入约50ml的二氯甲烷，加入10ml水分液，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩至干。体系加入25ml无水乙醇，加热后，体系降温结晶，得到1.06g化合物DSC2902，收率64％，ESI-MS(+):m/z 665.37[M+H]。

实施例3：

化合物DSC2903的合成：

反应瓶中加入8.86g半胱氨酸乙酯盐酸盐和40ml二氯甲烷，缓慢加入10ml三乙胺，体系在室温下剧烈搅拌1小时。体系过滤，浓缩至干得到油状物。

上述反应液中加入3.20g化合物1和30ml的吡啶，体系氮气保护下室温反应4天。体系过滤，用乙酸乙酯结晶，得到2.33g化合物DSC2903，收率44％，ESI-MS(+):m/z665.36[M+H]。

实施例4：

化合物DSC2904的合成：

反应瓶中加入25ml约80％的乙酸，加热至65℃。加入1.0g化合物DSC2902，维持该温度搅拌5分钟。体系用含25g碳酸钠的400ml冰水快速中和，得到的混悬液过滤得到固体，干燥后用8ml乙醇结晶，得到0.24g化合物DSC2904，收率30％，ESI-MS(+):m/z 534.21[M+H]。

实施例5：

化合物DSC2905的合成：

反应瓶中加入3g化合物1、3.45g氨基乙硫醇和20ml的吡啶，体系氮气保护下室温反应8小时。体系减压浓缩至干，加入约100ml的二氯甲烷，加入150ml水分液，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩至干。体系加入10ml热的无水乙醇结晶，降温过滤得到1.34g化合物DSC2905，收率39％，ESI-MS(+):m/z 462.29[M+H]；

化合物DSC2906的合成：

反应瓶中加入0.8g化合物DSC2905和10ml的二氯甲烷，体系加入0.55g乙酸酐，氮气保护下室温反应24小时。体系加入50ml二氯甲烷和40ml水，分出有机相，无水硫酸钠干燥、浓缩至干。体系3ml热无水甲醇结晶，降温过滤得到0.25g化合物DSC2906，收率27％，ESI-MS(+):m/z 546.22[M+H]。

实施例6：

化合物4的合成：

在-78℃，氩气保护下，向化合物2(11.78g,41.6mmoL)的四氢呋喃(200mL)溶液中缓慢加入LDA(二异丙基氨基锂，25mL,49.9mmol)，反应1小时后，再缓慢加入正戊醛(化合物3，5.31mL,49.9mmol)，缓慢升温至0℃，TLC检测原料反应完全，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，减压除去四氢呋喃，加入二氯甲烷萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得化合4(6.1g,40％)。

化合物5的合成：

向化合物4(6.1g,16.6mmoL)的乙醇(40mL)溶液中加入氢氧化钯(610mg),氢气换气3次，加热反应8小时，TLC检测反应完全，冷却至室温，硅藻土抽滤，减压浓缩，柱层析得化合物5(1.8g,60％)。

化合物6的合成：

在0℃下，向化合物5(1.64g,8.66mmoL)的DCM(30mL)溶液中缓慢滴加三乙胺(3.8mL)，搅拌10分钟，加入BOC酸酐(3.98mL,17.32mmoL)，室温反应5小时，TLC检测反应完全，加水淬灭，DCM萃取，1M盐酸洗涤，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得化合物6(2.0g,80％)。

化合物7的合成：

在0℃下，向化合物6(5.0g,17.2mmoL)的DCM(40mL)溶液中加入三乙胺(3.1mL,22.36mmoL)搅拌10分钟，加入MsCl(甲磺酰氯,1.4mL,18.06mmoL)，反应40分钟，TLC检测原料反应完全，加水淬灭，DCM萃取，1M盐酸洗涤，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得化合物7(6.3g,99％)。

化合物8的合成：

在室温下，向化合物7(6.3g,17.1mmoL)的DMF(150mL)溶液中加入硫代乙酸钾(2.92g,25.6mmoL)，搅拌3小时，移至60℃反应5小时,TLC检测反应完全，加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得化合物8(4.0g,67％)。

化合物9的合成：

在0℃下，向化合物8(4.5g,12.96mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入乙醇钠(970.4mg，14.26mmoL)，20℃反应8小时，TLC检测反应完全，减压除去乙醇，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得化合物9(1.8g,45％)。

化合物10的合成：

在0℃下，向化合物9(600mg,1.97mmoL)的乙醇(10mL)溶液中加入1.3mL盐酸乙醇(6N)溶液,反应5小时，TLC检测反应完全，减压浓缩除去乙醇，加入乙醚(20mL)冷却至0℃,白色固体析出，过滤，干燥，得化合物10(270mg,57％)。

化合物DSC2922的合成：

在20℃条件下，向25mL单口瓶中依次加入化合物1(50mg,0.124mmoL),化合物10(239.2mg，0.992mmoL)，甲醇(3mL),甲酸(10μL)，反应48小时，TLC检测反应完全，减压浓缩，柱层析得化合物DSC2922(23mg,35％)。ESI-MS(+):m/z590.35[M+H]；

实施例7：

反应瓶中加入1g化合物1和1g的2-氨基乙硫醇,加入30ml乙酸乙酯和0.1ml冰醋酸。体系加热回流反应3小时。体系减压浓缩至干，加入二氯甲烷和水分液，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩至干。过硅胶柱纯化得到0.48g化合物DSC2924，收率42％，ESI-MS(+):m/z462.36[M+H]。

按照与上述实施例同样的方法，使用市售化合物或由市售化合物适当合成的中间体化合物，合成了下列实施例化合物。

/>

/>

实施例8：体外抗VZV病毒和HSV-1病毒活性实验

将MRC-5细胞以2×10

表1：体外坑VZV病毒和HSV-1病毒活性试验

结果表明，本发明化合物对VZV病毒和HSV-1病毒有较强的抑制作用，明显优于Chloroquine。

实施例9：样品溶液制备及稳定性试验

精密称取60.47mg化合物DSC2922和5.986g的二丙二醇至洁净的配液容器中，完全分散后超声溶解得到浓度为1％的DSC2922黄色溶液(g/g)。

按照相似的方法，制备浓度为1％的化合物1的溶液、1％的DSC2901的溶液。

1％的化合物1的溶液、1％的DSC2901的溶液及1％的DSC2922溶液在25℃±2℃条件下放置0d、1d、3d、7d，考察稳定性，结果表明各样品在实验条件下放置7d稳定。

实施例10：对豚鼠皮肤疱疹的疗效

取健康雄性豚鼠20只，体重280±20g，随机分为4组，分别为A组、B组、C组、D组，每组5只动物。每只豚鼠分别用8％ Na

表2：皮肤病变程度评价标准

结果表明，本发明化合物对HSV-1病毒感染的豚鼠皮肤引起的病变均有治疗作用，而对照组(B组，化合物1)没有表现出明显的治疗作用，本发明化合物(C组DSC2901和D组DSC2922)各观察时间点与模型组(A组)和对照组(B组)比较均有显著性差异(P＜0.05～0.01)。另外，由图1可以明显看出,在实验第6天以后，本发明化合物的皮肤病变明显减轻趋势。

实施例11：对B16-F10皮肤癌细胞抑制增殖作用

取对数生长期的细胞，以7.5×10

表3：对B16-F10皮肤癌细胞抑制增殖作用

结果显示，本发明化合物具有一定的皮肤癌细胞抑制增殖的作用。

实施例12：对小鼠皮肤癌模型的药效学试验

将含有60％DMBA(二甲基苯蒽)的矿物油，涂布于小鼠脱毛后的背部皮肤，连续涂布10天。选择成功造模的小鼠48只，随机分布4组，每组12只。每天口服灌胃给药一次，连续给药四周。组1给药2mg/kg化合物DSC2908；组2给药2mg/kg化合物DSC2922；组3给药2mg/kg雷公藤红素；组4给药2mg/kg雷公藤红素+2mg/kg化合物DSC2922。末次给药次日颈椎脱位法处死小鼠，依次用碘酊酒精消毒操作部位皮肤，于超净工作台上，以无菌操作完整录取肿瘤皮肤，剥离干净后于电子天平称瘤体质量，按公式计算抑瘤率(抑瘤率％＝1-给药组平均瘤质量/模型对照组平均瘤质量)，结果如下表4所示。

表4：对小鼠皮肤癌的抑制率

结果显示，本发明化合物对小鼠皮肤癌有微弱的抑制。雷公藤红素单独用药时，抑制率约45.8％，但当联合用药本发明化合物DSC2922后，肿瘤抑制率明显提高。