一种难溶性药物的水溶液及其制备方法

技术领域

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种难溶性药物的水溶液及其制备方法。

背景技术

免疫抑制剂环孢素A、他克莫司、西罗莫司等均为脂溶性的药物分子，一般将其溶解在植物油或有机溶剂中配制溶液，用这些溶液制备的药物制剂如果应用于注射剂及眼用制剂，不仅有较大的刺激性，植物油本身也存在容易氧化等问题，对药物的稳定性产生不利影响。

为了提高环孢素A的注射剂和眼用制剂的耐受性，现有的研究采用水溶性潜药策略或者胶体载药体系(胶束、乳剂、脂质体、纳米颗粒)等来改善这种状况。然而，目前的研究体系确实还是存在众多问题，不能达到完全满意，因此，环孢素A在眼用制剂和注射剂的应用还存在较大的提升空间，需要研究者进一步探索。

中国专利CN105726479提供了一种环孢素A眼用乳剂的制备方法，和油溶液或含有机溶剂配制的溶液相比，减少了刺激性。

杨蕾(2014，西南大学硕士论文)采用乙醇溶解环孢素A，再转入含有表面活性剂的水溶液中制备胶束溶液的方法，该方法最终用冻干工艺去除乙醇。然而，实际应用中，对冻干机和场地的防爆性能都有一定要求，即对生产设备和生产场地的要求高，工业化成本高。

CN105997863B公开了一种环孢素A滴眼液及其制备方法。滴眼液主要成分包括环孢素A、高分子接枝共聚物、余量为注射用水；其中，高分子接枝共聚物为壳聚糖-g-环糊精。主要制备方法包括先将高分子接枝共聚物溶解在注射用水里，搅拌直到溶液变成至透明的颜色，然后，将环孢素A的乙醇溶液加入到上述溶液中，在温度为0-4℃搅拌，直到混合溶液完全变为澄清；最后，在温度为0-4℃下减压除去乙醇，洗涤，再加入注射用水定容，灭菌，得到最终产物。实验结果表明，本发明制备的环孢素A在水中的溶解度为630mg/L，制备的0.06wt％环孢素A滴眼液在白兔身上实验，在1h的时间点发现本发明滴眼液具有较好的角膜透性。另外测得本发明环孢素A的渗透压为305mOsmol/kg，粘度为36.5cP。

CN101130059A公开了一种环孢素A的自微乳化软胶囊及其制备方法。具体制备步骤是将环孢素A、无水乙醇、丙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40、司盘-80和中链脂肪酸甘油三酯混合加热，制备成软胶囊，然后用乙醇表面处理得到成品。实验测试微乳的稳定性，结果表明，本发明配方配制的微乳粒径均匀，4h后平均粒径为0.055μm，相对标本含量为99％。但制备该软胶囊的工艺复杂，在储存过程中容易发生液态醇类溶剂挥发，促进外壳明胶的交联固化反应，最终导致产品限不合格等问题。

CN1167462C公开了一种含环孢素的药物组合物，其主要原料组成包括环孢素A、乙醇、丙二醇、表面活性剂、增溶剂、油性组分、中长链饱和或不饱和脂肪酸、余量水等，其中表面活性剂是聚氧乙烯蓖麻油衍生物或吐温类或麦泽类，用该组合物可以制备成明胶包封软胶囊、滴眼剂、软膏剂、口服液等。实验测试制备的口服液的生物有效性，测试主要活性成分为环孢素A的赛斯平胶囊、新赛斯平胶囊与新山地明胶囊的相对生物利用度，按均数计算分别为69.7％和102.3％，此配方的制备工艺虽然做了一些改进，但同时还存在配方组份较多的缺陷，同样会引起配制过程的复杂及相应产品的成本增加。

CN107753419A公开了一种他克莫司外用制剂。其成分含有他克莫司、三丙烯酸甘油酯和基质的外用制剂，其中他克莫司作为活性成分和三丙烯酸甘油酯作为其增溶剂，游离形式的他克莫司可在25℃以约18.5g/100g的比例溶解在三丙烯酸甘油酯中。测试结果显示，与含有碳酸丙烯酯及三乙酸甘油酯的对照例相比，本发明的包含三丙烯酸甘油酯的软膏对他克莫司更稳定，在原发兔皮肤刺激试验中，结果表现为无刺激。

CN102670499B公开了一种缓释型西罗莫司眼用制剂。以西罗莫司为药效原料，以白芨作缓释剂，配以适当辅料制作而成，其中，西罗莫司与白芨的用量按其重量比表示为：西罗莫司:白芨＝1:0.1-10.0。制备的缓释型西罗莫司眼用制剂与普通型西罗莫司眼用制剂的稳定性比较发现，前3个月西罗莫司含量没有明显变化，6个月时有所降低，而且能够抑制大鼠EAU的发生和减轻EAU的病情。

为了解决难溶性药物水溶液的溶解性问题，提高药物的稳定性，研究出对使用者无刺激，解决难溶性药物分子难溶于水的缺陷，研发人员进行了大量的研究，因此，亟需提供一种生产方法简单，即对使用者无刺激，又能达到较好治疗效果的难溶性药物水溶液。

发明内容

针对上述背景技术指出的不足：

一方面，本发明提供了一种难溶性药物的增溶剂，所述的增溶剂为嵌段式聚醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨醇(吐温)、聚乙二醇硬脂酸酯和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种；所述的难溶性药物为环孢素A、他克莫司和西罗莫司中的一种或多种。

另一方面，本发明提供了一种难溶性药物的水溶液及其制备方法，所述的水溶液包含前述增溶剂、水和难溶性药物；所述的难溶性药物为环孢素A、他克莫司和西罗莫司中的一种或多种。所述的制备方法为将难溶性药物与增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水，即得难溶性药物的水溶液。

上述难溶性药物的水溶液可以作为母液，可通过加入缓冲液，将母液制备为所需浓度和所需pH的难溶性药物的药液。

再一方面，本发明提供了一种增加环孢素A、他克莫司和西罗莫司溶解度的方法，所述的方法为将环孢素A、他克莫司或西罗莫司和增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水；

所述的增溶剂为嵌段式聚醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨醇(吐温)、聚乙二醇硬脂酸酯和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种；

环孢素A、他克莫司或西罗莫司：增溶剂：水为0.5-1.5mg：20-80mg：0.5-8mL。

如无特殊说明，本发明实施过程中所用的水可以为超纯水。但这并不限制本发明的保护范围，即超纯水可以被其他具有等同功能的种类的水替换，由此形成的技术方案，也在本发明的保护范围内。

环孢素A水溶液及其制备方法，制备的环孢素A水溶液具有较好的环孢素A的表观溶解度，增加眼用制剂和注射剂应用后的耐受性，具有较好的治疗效果。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种环孢素A水溶液，包括以下原料：环孢素A、增溶剂和水。

进一步地，所述环孢素A：增溶剂：水为0.5-1.5mg：20-80mg：0.5-8mL。

进一步优选地，所述环孢素A水溶液包括以下含量的原料：环孢素A20mg、增溶剂600mg和水20mL。

进一步地，所述增溶剂为嵌段式聚醚F68(泊洛沙姆188)、聚氧乙烯蓖麻油EL-35、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、聚山梨醇80(吐温80)、聚山梨醇20(吐温20)、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(Kolliphor HS15)、羟丙基-β-环糊精中的一种或多种，优选为聚氧乙烯蓖麻油EL-35、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、吐温80、吐温20、Kolliphor HS15中的一种或多种。

本发明还提供了所述的环孢素A水溶液的制备方法，包括以下步骤：

将环孢素A与增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水，搅拌30-40分钟后，即得环孢素A水溶液。

上述环孢素A水溶液可以作为母液，可通过加入缓冲液，将母液制备为所需浓度和所需pH的环孢素A的药液。

进一步地，所述缓冲液包括但不限于磷酸盐缓冲液、柠檬酸(枸橼酸)盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、邻苯二甲酸缓冲液中的一种或多种。

本发明还提供了一种他克莫司水溶液，包括以下原料：他克莫司、增溶剂和水。

进一步地，所述他克莫司：增溶剂：水为0.5-1.5mg：20-80mg：0.5-8mL。

进一步优选地，所述他克莫司水溶液包括以下含量的原料：他克莫司4mg、增溶剂120或240mg、水20mL。

进一步地，所述增溶剂为聚氧乙烯蓖麻油EL-35、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、吐温80、吐温20和Kolliphor HS15中的一种或多种，优选为聚氧乙烯蓖麻油EL-35、吐温80和Kolliphor HS15中的一种或多种。

本发明还提供了一种他克莫司水溶液的制备方法，包括以下步骤：

将他克莫司与增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水，搅拌30-40分钟后，即得他克莫司水溶液。

上述他克莫司水溶液可以作为母液，可通过加入缓冲液，将母液制备为所需浓度和所需pH的他克莫司的药液。

进一步地，所述缓冲液包括但不限于磷酸盐缓冲液、柠檬酸(枸橼酸)盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、邻苯二甲酸缓冲液中的一种或多种。

本发明还提供了一种西罗莫司水溶液，包括以下原料：西罗莫司、增溶剂和水。

进一步地，所述西罗莫司：增溶剂：水为0.5-1.5mg：20-80mg：0.5-8mL。

进一步优选地，所述西罗莫司的溶液包括以下含量的原料：西罗莫司4mg、增溶剂120或240mg、水20mL。

进一步地，所述增溶剂为聚氧乙烯蓖麻油EL-35、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、吐温80、吐温20和Kolliphor HS15中的一种或多种，优选为聚氧乙烯蓖麻油EL-40、吐温80和Kolliphor HS15中的一种或多种。

本发明还提供了一种西罗莫司水溶液的制备方法，包括以下步骤：

将西罗莫司与增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水，搅拌30-40分钟后，即得西罗莫司水溶液。

上述西罗莫司水溶液可以作为母液，可通过加入缓冲液，将母液制备为所需浓度和所需pH的西罗莫司的药液。

进一步地，所述缓冲液包括但不限于磷酸盐缓冲液、柠檬酸(枸橼酸)盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、邻苯二甲酸缓冲液中的一种或多种。

前述制备方法中，当增溶剂包含聚乙二醇硬脂酸酯时，包括以下步骤：

将聚乙二醇硬脂酸酯在60-80℃水浴中融化；后在60-80℃水浴中加入其他增溶剂；

在60-80℃下一边搅拌一边加入难溶性药物，至药物充分溶解；

在60-80℃下一边搅拌一边加入预热到60-80℃的水，冷却至室温，即得难溶性药物的水溶液。

上述难溶性药物的水溶液可以作为母液，可通过加入缓冲液，将母液制备为所需浓度和所需pH的难溶性药物的药液。

一种增加环孢素A、他克莫司和西罗莫司溶解度的方法，所述的方法为将环孢素A、他克莫司或西罗莫司和增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边加入水；所述的增溶剂为嵌段式聚醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨醇(吐温)、聚乙二醇硬脂酸酯和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种；环孢素A、他克莫司或西罗莫司：增溶剂：水为0.5-1.5mg：20-80mg：0.5-8mL。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本申请提供了一种难溶性药物水溶液的制备方法，采用表面活性剂溶解药物分子制备含有难溶性药物的水溶液。

(2)本申请的通过研究不同增溶剂浓度、制备温度和增溶剂种类对药物的溶解度的影响，研究出一种溶解度较大的制备工艺。

(3)本申请还提供了可用于难溶性药物水溶液制备的增溶剂的种类。

(4)本申请研究出了一种制备方法较简单的工艺，将难溶性药物和液体状态的增溶剂按照一定比例混合，溶解后，加入纯水，至所需要的药物浓度。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述，其中实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，不构成对本发明保护范围的限制。

本发明所使用原料均为普通市售产品，因此不需要对其来源做具体限定。

部分原料来源举例：

实施例1组

一种环孢素A水溶液及其制备方法，包括以下步骤：

称取20mg环孢素A，与600mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到环孢素A的水溶液母液。对母液浓度进行检测。

当增溶剂为Kolliphor HS15时，Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，与环孢素A混合后在60℃下搅拌，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入60℃的超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温。其他组均在室温操作，用室温的超纯水稀释。

对照组为DMSO作为增溶剂；药物理论浓度为1mg/mL，增溶剂理论浓度为30mg/mL。

母液中药物浓度用HPLC进行检测，结果如下：

上述环孢素A水溶液母液，可通过加入磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例2组

称取20mg环孢素A，与600mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到环孢素A的水溶液母液。对母液浓度进行检测。

上述环孢素A水溶液母液，可通过加入柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例3组

将全部配方用量的Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，然后加入20mg环孢素A和其他增溶剂，至药物充分溶解后，在60℃下，一边搅拌一边缓慢加入20mL的60℃超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到环孢素A的水溶液母液。对母液浓度进行检测。

上述环孢素A水溶液母液，可通过加入Tris-盐酸缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例4组

一种他克莫司水溶液及其制备方法，包括以下步骤：

称取4mg他克莫司，与120mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到他克莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。对照组为DMSO作为增溶剂；药物理论浓度为200μg/mL，增溶剂理论浓度为6mg/mL。他克莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

称取4mg他克莫司，与240mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到他克莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。对照组为DMSO作为增溶剂；药物理论浓度为200μg/mL，增溶剂理论浓度为12mg/mL。他克莫司：增溶剂＝1:60(w/w)。

当增溶剂为Kolliphor HS15时，Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，与他克莫司混合后在60℃下搅拌，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入60℃的超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温。其他组均在室温操作，用室温的超纯水溶解。

母液中药物浓度用HPLC进行检测，结果如下：

他克莫司：增溶剂＝1:30(w/w)

他克莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述他克莫司水溶液母液，可通过加入磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例5组

称取4mg他克莫司，与120mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到他克莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。他克莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

称取4mg他克莫司，与240mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到他克莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。他克莫司：增溶剂＝1:60(w/w)。

他克莫司：增溶剂＝1:30(w/w)

他克莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述他克莫司水溶液母液，可通过加入甘氨酸-氢氧化钠缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例6组

将全部配方用量的Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，然后加入4mg他克莫司和其他增溶剂，至药物充分溶解后，在60℃下，一边搅拌一边缓慢加入20mL的60℃超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到他克莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。

他克莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

他克莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述他克莫司水溶液母液，可通过加入硼酸-硼砂缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例7组

一种西罗莫司水溶液及其制备方法，包括以下步骤：

称取4mg西罗莫司，与120mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到西罗莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。对照组为DMSO作为增溶剂；药物理论浓度为200μg/mL，增溶剂理论浓度为6mg/mL。西罗莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

称取4mg西罗莫司，与240mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到西罗莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。对照组为DMSO作为增溶剂；药物理论浓度为200μg/mL，增溶剂理论浓度为12mg/mL。西罗莫司：增溶剂＝1:60(w/w)。

当增溶剂为Kolliphor HS15时，Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，与西罗莫司混合后在60℃下搅拌，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入60℃的超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温。其他组均在室温操作，用室温的超纯水溶解。

母液中药物浓度用HPLC进行检测，结果如下：

西罗莫司：增溶剂＝1:30(w/w)

西罗莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述西罗莫司水溶液母液，可通过加入磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例8组

称取4mg西罗莫司，与120mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到西罗莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。西罗莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

称取4mg西罗莫司，与240mg增溶剂混合，至药物充分溶解后，一边搅拌一边缓慢加入20mL超纯水，搅拌30分钟后，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到西罗莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。西罗莫司：增溶剂＝1:60(w/w)。

西罗莫司：增溶剂＝1:30(w/w)

西罗莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述西罗莫司水溶液母液，可通过加入醋酸-醋酸钠缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。

实施例9组

将全部配方用量的Kolliphor HS15先在60℃水浴中融化，然后加入4mg西罗莫司和其他增溶剂，至药物充分溶解后，在60℃下，一边搅拌一边缓慢加入20mL的60℃超纯水，搅拌30分钟后，冷却至室温，在超净台内对药物溶液进行过滤除菌(滤膜孔径0.22μm)，得到西罗莫司的水溶液母液。对母液浓度进行检测。

西罗莫司：增溶剂＝1:30(w/w)。

西罗莫司：增溶剂＝1:60(w/w)

上述西罗莫司水溶液母液，可通过加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲体系，将其制备为所需浓度和所需pH的药液。