在受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于在受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的方法。

背景技术

鉴别诊断的进行使临床医生可以对患者进行分类，然后该患者就有机会接受适当的治疗以治愈或至少改善他/她的医疗状况。

以神经元的结构或功能进行性丧失为特征的神经退行性疾病众多，如以下列出所示：阿尔茨海默氏病、精神抑郁症、肌萎缩性侧索硬化症、额颞痴呆、帕金森氏病、进行性核上性麻痹、伴随痴呆症的帕金森氏病、路易体痴呆、血管性痴呆等。

关于阿尔茨海默氏病，已经注意到升高的去甲肾上腺素浓度可能是某些患者的病因(Fitzgerald P.J.,Current Alzheimer Research,2010,7,506-516)。

这些疾病之间的界限有时很难区分(特别是在阿尔茨海默氏病的情况下)，因此负责患者随访的临床医生会犹豫不决，并对一名患者进行不适当的治疗。从其意味着昂贵且繁琐的实验(例如医学成像和/或腰椎穿刺术以收集脑脊髓液(CSF)样品)的意义上来说，所述诊断也很难建立。还应注意，不存在综合症并不能“排除”疾病的存在。没有生物标记物的误诊率高达30％(Jack C.R.,等人，Alzheimer’s&Dementia,2018,14,532-562)。

另一方面，医疗调查问卷不足以使临床医生确定所诊断的疾病。

已提出单胺能上升系统(monoaminergic ascending system)中发生的形态和功能变化与AD的生理病理之间的联系(Simic G.等人，Neuropathol.Appl.Neurobiol.,2009,35,532-554和Trillo L.等人，Neurosci Biobehav.Rev.,2013,37,1363-1379)。蓝斑(LC)中的去甲肾上腺素能神经元是大脑中许多区域的去甲肾上腺素能输入的主要来源。由于其广泛的传出神经分布，LC投射系统在压力和维持认知表现等过程中起着关键的调节作用。(Sara S.J.,Nat.Rev.Neurosci.,2009,10,211-223)。这导致对儿茶酚胺检测以开发用于神经退行性疾病诊断的新工具的需求。儿茶酚胺是衍生自酪氨酸的单胺，在中枢神经系统和周围交感神经系统中作为神经调节剂以及血液循环中作为激素。

由于患者通常仅被诊断出患有单一类型的痴呆症，混合型痴呆症也不能很好地治疗。在这种情况下，医生将基于已诊断出的痴呆类型做出药物决定/处方，最终将无助于改善患者的生活状况。

发明内容

本发明的技术问题是减轻现有技术中存在的至少一个缺点。更具体地，本发明的技术问题是避免昂贵且繁琐的实验来诊断患有神经退行性疾病或患有混合型痴呆症的受试者。所述疾病可能是以下疾病之一：阿尔茨海默氏病、精神抑郁症、路易体痴呆、额颞痴呆、血管性痴呆或混合型痴呆症。

本发明涉及用于在受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的体外方法，所述受试者选自患有阿尔茨海默氏病、精神抑郁症、路易体痴呆、额颞痴呆和/或血管性痴呆的受试者。所述方法包括以下步骤：(a)确定所述受试者的至少五项标准，(b)通过计算与每种神经退行性疾病有关的整体注释(global note)，将所述受试者的所述至少五项标准与参照值进行比较，以及(c)确定所述受试者是否患有阿尔茨海默氏病、精神抑郁症、路易体痴呆、额颞痴呆、血管性痴呆或混合型痴呆症。

根据优选的实施方案，所述患有阿尔茨海默氏病的受试者选自患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于3000pmol/l至15000pmol/l之间的阿尔茨海默氏病的受试者和患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于100pmol/l至2700pmol/l之间的阿尔茨海默氏病的受试者。

根据优选实施方案，所述步骤(a)是确定至少八项标准的步骤。

根据优选实施方案，所述标准选自

-所述受试者的年龄，

-适于筛查认知功能的调查问卷(优选小型心理状态测试调查问卷)中所述受试者的评分，

-所述受试者的一份血液样品中的多巴胺浓度[D]，

-所述受试者的一份血液样品中的肾上腺素浓度[A]，

-所述受试者的一份血液样品中的去甲肾上腺素浓度[NA]，

-所述受试者的一份血液样品中的多巴胺预期浓度[D]

-所述受试者的一份血液样品中的肾上腺素预期浓度[A]

-所述受试者的一份血液样品中的去甲肾上腺素预期浓度[NA]

根据优选的实施方案，所述受试者的所述血液样品是所述受试者的一份血浆样品。

根据优选的实施方案，用装有电化学检测器的HPLC测定所述多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度。

根据优选的实施方案，所述多巴胺预期浓度是通过应用以下等式获得

其中K

其中[D]

根据优选的实施方案，所述肾上腺素的预期浓度通过应用以下等式获得

其中K

其中[A]

根据优选的实施方案，所述去甲肾上腺素的预期浓度通过应用以下等式获得

其中K

其中[NA]

根据优选的实施方案，步骤(b)中使用的所述参照值如下：

a.所述受试者的年龄在40.2岁至89.8岁之间，

b.所述适于筛查认知功能的调查问卷的评分介于0至30之间，

c.所述多巴胺浓度介于111pmol/l至1334pmol/l之间，

d.所述肾上腺素浓度介于66pmol/l至2366pmol/l之间，

e.所述去甲肾上腺素浓度介于874pmol/l至8681pmol/l之间，

f.所述多巴胺的预期浓度介于2pmol/l至838pmol/l之间，

g.所述肾上腺素的预期浓度介于8pmol/l至1788pmol/l之间，

h.所述去甲肾上腺素的预期浓度介于2pmol/l至4727pmol/l之间。

根据优选的实施方案，所述方法进一步包括将校正因子δ分配于所述参照值的步骤，所述校正因子δ介于0.50和1.50之间。

根据优选的实施方案，所述计算与每种神经退行性疾病有关的整体注释的步骤(b)包括以下子步骤：

a)通过神经退行性疾病针对每项标准确定虚拟值

b)将权重因子分配于上一个子步骤中确定的每个虚拟值

c)确定每个所述加权虚拟值的总和以获得与每种神经退行性疾病有关的一个整体注释。

根据优选的实施方案，如果所述受试者对于每项标准的一个测量值VAL

其中VAL

其中

其中

其中K是数学参数，K优选地介于0和0.1之间。

根据优选的实施方案，与关于所述受试者的年龄和所述受试者的评分的虚拟值相关的权重因子(w

根据优选的实施方案，所述确定所述受试者是否患有阿尔茨海默氏病、精神抑郁症、路易体痴呆、额颞痴呆、血管性痴呆或混合型痴呆症的步骤通过比较与每种神经退行性疾病相关的整体注释来进行。

根据优选的实施方案，所述方法进一步包括，在所述步骤(c)和所述步骤(d)之间，确定所述受试者是否患有动脉高血压的步骤(c’)。

通常，本发明的每个目标的特定实施方案也适用于本发明的其他目标。在可能的范围内，本发明的每个目标可以与其他目标结合。

根据另一方面，本发明的目标是用于进行神经退行性疾病的鉴别诊断的体外方法，所述神经退行性疾病选自阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)、阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)；所述方法在表现出痴呆的迹象的受试者中进行；

所述方法包括以下步骤：

a)确定所述受试者的至少五项标准，所述至少五项标准包括所述受试者的年龄、所述受试者在适于筛查认知功能的问卷中的评分，所述受试者的血液样品中的多巴胺浓度[D]、所述受试者的所述血液样品中的肾上腺素浓度[A]和所述受试者的所述血液样品中的去甲肾上腺素浓度[NA]，

c)根据以下子步骤，为每种神经退行性疾病计算一个整体注释：

i)为每项标准确定一种神经退行性疾病的一个参数

ii)将子步骤(i)中获得的与所述一种神经退行性疾病有关的每个参数

iii)对每种神经退行性疾病重复子步骤(i)和(ii)，

d)基于在步骤(c)中计算的每种神经退行性疾病的每个整体注释，确定所述受试者是否患有一种或多种选自阿尔茨海默氏病(AD1)的早期阶段、阿尔茨海默氏病(AD2)的晚期阶段、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)的神经退行性疾病；

所述方法的显著之处在于它进一步包括：

-在步骤(a)之后进行步骤(b)；其中步骤(b)包括将所述去甲肾上腺素浓度[NA]与预定阈值进行比较的步骤，并且如果所述去甲肾上腺素浓度[NA]低于或等于所述预定阈值，则确定所述受试者的动脉高血压状态，

-并且在步骤(c)中进一步包括，如果所述去甲肾上腺素浓度[NA]低于或等于所述预定阈值，则通过添加与所述受试者的动脉高血压状态有关的参数V

令人惊讶地，发明人发现可以通过分析受试者的至少五个标准来提供神经退行性疾病的精确诊断，其中将所述五个标准与每种选自以下的神经退行性疾病的参照值特征结合：阿尔茨海默氏病(AD1)的早期阶段、阿尔茨海默氏病(AD2)的晚期阶段、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)，额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)。所述五个标准和与动脉高血压状态相关的另外的标准的唯一组合之后确定整体注释可提供能确定受试者是否患有AD、精神抑郁、DLB、FTD、VD和/或混合型痴呆症的诊断方法。

进一步值得注意的是，所述诊断不是侵害性的，并且是在体外在容易地(例如通过与腰椎穿刺比较)从受试者收集的血液样品上进行的。此外，这允许了所述诊断的可重复性，并因此允许了所述诊断的统计确认。

所述鉴别诊断的准确性使得它还可以在阿尔茨海默氏病的两个不同阶段(即阿尔茨海默氏病的早期阶段和阿尔茨海默氏病的晚期阶段)之间进行诊断。

这样的鉴别诊断可以根据受试者的疾病对她/他进行分类，并且这是这样的人接受适当的医疗的机会。此外，所述诊断可以识别患有混合型痴呆症的受试者，这是不容易的，因为这种类型的受试者可以表现出与两种或更多种神经退行性疾病有关的症状。

在一个受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的体外方法的以下特征被有利地用于更好地定义本发明。

-所述受试者处于动态不平衡(homeostatic imbalance)。

-步骤(b)的所述预定阈值为去甲肾上腺素浓度[NA]介于2900pmol/1至3100pmol/l，优选介于2950pmol/l至3050pmol/l之间，更优选介于2975pmol/1至3025pmol/l之间，再更优选去甲肾上腺素浓度[NA]至少为3000pmol/l。

-在一种情况下，所述预定阈值为去甲肾上腺素浓度[NA]为3023pmol/1。

-所述步骤(b)、(c)和(d)由计算机执行。

-所述适用于筛查认知功能的问卷是小型精神状态检查(MMSE)问卷。

-针对每种神经退行性疾病的每个标准的所述参数

-规定如果

-所述在一个受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的体外方法进一步包括将权重因子分配给每个参数

-关于选自与所述受试者的与年龄有关的参数、与多巴胺浓度[D]有关的参数、与肾上腺素浓度有关的参数[A]和与去甲肾上腺素浓度有关的参数[NA]中的一个或多个参数，所述权重因子介于1.0和10.0之间；优选所述权重因子是5.0。

-关于与适于筛查所述受试者的认知功能的问卷的评分相关的参数，所述权重因子介于0.1至3.0之间；优选地，关于与适于筛查所述受试者的认知功能的问卷的评分相关的参数的权重因子为2.0。

-与所述受试者的动脉高血压状态有关的所述参数V

-根据以下数学等式(2)确定与所述受试者的动脉高血压状态有关的所述参数V

-在一个受试者中进行神经退行性疾病的鉴别诊断的所述体外方法包括对所述参照值施加校正因子δ的步骤，所述校正因子δ介于0.50至1.50之间，优选在0.60至1.40之间。

-所述受试者的所述血液样品是所述受试者的一份血浆样品。

-所述去甲肾上腺素、多巴胺和肾上腺素的浓度用配有电化学检测器的HPLC测定。

-确定所述受试者是否患有一种或多种选自阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)、阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)的神经退行性疾病的所述步骤(d)通过比较获得的与每种神经退行性疾病相关的整体注释来进行。

-确定所述受试者是否患有一种或多种选自阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)、阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)的神经退行性疾病的所述步骤(d)等同于确定所述受试者是否患有一种选自阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)、阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)或血管性痴呆(VD)的神经退行性疾病或所述受试者是否患有混合型痴呆症的步骤。

-所述步骤(a)进一步包括以下标准中的一个或多个的确定，所述标准是所述受试者的性别或所述受试者的基因型中APOEε4等位基因的存在。

在优选的实施方案中，步骤(c)中使用的与阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为50岁，优选52.92；和/或最大参照值最多为90岁；优选87.72岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为14，优选15；和/或最大参照值最多为29，优选28；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为90pmol/l，优选110.74pmol/l；和/或最大参照值最多为1000pmol/l，优选878.22pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为40pmol/l，优选65.66pmol/l；和/或最大参照值最多为2000pmol/l，优选1720.74pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为2900pmol/l，优选2962.54pmol/l；和/或最大参照值最多为9000pmol/l，优选8681.22pmol/l。

在优选的实施方案中，步骤(c)中使用的与阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为45岁，优选51.94；和/或最大参照值最多为95岁，优选89.76岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为3，优选4；和/或最大参照值最多为30，优选29；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为140pmol/l，优选152.88pmol/l；和/或最大参照值最多为1000pmol/l，优选655.86pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为80pmol/l，优选143.08pmol/l；和/或最大参照值最多为1500pmol/l，优选1371.09pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为750pmol/l，优选1023.12pmol/l；和/或最大参照值最多为3000pmol/l，优选2758.08pmol/l。

在优选的实施方案中，步骤(c)中与精神抑郁症(PSY)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为35岁，优选40.18；和/或最大参照值最多为80岁，优选74.46岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为21，优选22；和/或最大参照值最多为30，优选29；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为250pmol/l，优选276.36pmol/l；和/或最大参照值最多为750pmol/l，优选519.18pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为180pmol/l，优选191.10pmol/l；和/或最大参照值最多为450pmol/l，优选406.98pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为1000pmol/l，优选1533.70pmol/l；和/或最大参照值最多为4000pmol/l，优选3691.38pmol/l。

在优选的实施方案中，步骤(c)中与路易体痴呆(DLB)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为55岁，优选61.74；和/或最大参照值最多为85岁，优选81.6岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为7，优选8；和/或最大参照值最多为25，优选24；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为150pmol/l，优选203.84pmol/l；和/或最大参照值最多为400pmol/l，优选375.36pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为80pmol/l，优选103.88pmol/l；和/或最大参照值最多为700pmol/l，优选418.20pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为900pmol/l，优选1065.26pmol/l；和/或最大参照值最多为8000pmol/l，优选7216.50pmol/l。

在优选的实施方案中，步骤(c)中使用的与额颞痴呆(FTD)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为45岁，优选49；和/或最大参照值最多为80岁，优选75.48岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为0，优选0；和/或最大参照值最多为28，优选27；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为200pmol/l，优选245.98pmol/l；和/或最大参照值最多为1100pmol/l，优选1002.66pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为100pmol/l，优选123.48pmol/l；和/或最大参照值最多为1500pmol/l，优选1270.92pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为700pmol/l，优选874.16pmol/l；和/或最大参照值最多为6000pmol/l；优选5743.62pmol/l。

在优选实施方案中，步骤(c)中与血管性痴呆(VD)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为55岁，优选58.8；和/或最大参照值最多为90岁，优选85.68岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为20，优选21；和/或最大参照值最多为29，优选28；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为140pmol/l，优选198.94pmol/l；和/或最大参照值最多为580pmol/l，优选533.46pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为200pmol/l，优选240.10pmol/l；和/或最大参照值最多为1800pmol/l，优选1525.92pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为1400pmol/l，优选1518.02pmol/l；和/或最大参照值最多为4000pmol/l；优选3705.66pmol/l。

在优选的实施方案中，步骤(c)进一步包括计算与神经对照(NC)有关的一个整体注释；优选地，在步骤(c)中与神经对照(NC)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为35岁，优选40.18；和/或最大参照值最多为90岁，优选84.66岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为22，优选23；和/或最大参照值最多为30，优选30；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为180pmol/l，优选207.76pmol/l；和/或最大参照值最多为1600pmol/l，优选1334.16pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为110pmol/l，优选163.66pmol/l；和/或最大参照值最多为2500pmol/l，优选2366.40pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为900pmol/l，优选925.12pmol/l；和/或最大参照值最多为7000pmol/l；优选6331.14pmol/l。

根据另一方面，本发明的目标是包括被配置为在由计算机执行所述步骤(b)、(c)和(d)时进行根据第一方面的方法的处理器的数据处理系统。

根据另一方面，本发明的目标是包括指令的计算机程序，当所述步骤(b)、(c)和(d)由计算机执行时，所述指令(当所述程序由计算机执行时)使计算机执行根据第一方面的方法。

根据另一方面，本发明的目标是计算机可读数据载体，其上存储有根据本发明第三方面的计算机程序。

本发明特别令人感兴趣，因为当所述诊断是精确的时，对患者的鉴别诊断允许临床医生对患者进行充分的随访。一旦该患者被诊断出其患有的准确的疾病，她/他就可以得到最好的医疗护理，这将帮助她/他改善她/他的医疗状况。所述鉴别诊断可以检测出混合型痴呆症，提供适当的“混合疗法”以对此类健康状况产生更多疗效也具有优势，特别是因为目前很难检测这种混合型痴呆症并且当检测到混合型痴呆症时很难知道哪种疾病被包含。

血液测试的使用使诊断的可重复性变得容易，其允许对患者进行随访、及早诊断(众所周知，及早诊断有利于治疗并大大改善患者和他/她的家人的生活状况)。

附图的简要说明

图1：本发明方法的原理。

图2：确定方法中使用的小组中受试者的分布。

图3：使用根据患有阿尔茨海默氏病具有介于3000pmol/l至15000pmol/l之间(AD1)的去甲肾上腺素浓度[NA]的人群的视角的整体注释的点云。

图4：使用根据患有阿尔茨海默氏病具有介于100pmol/l至2700pmol/l之间(AD2)的去甲肾上腺素浓度[NA]的人群的视角的整体注释的点云。

图5显示了四类受试者的直方图分布：AD1、AD2、FTD/DLB/VD和PSY/NC。

图6显示了AD(n＝50)和非AD(n＝50)受试者血浆[NA]浓度的相对频率分布。

图7显示了AD与非AD受试者血浆[NA]浓度的接受者工作特征(ROC)曲线。

具体实施方案

本发明可以开发有效的鉴别诊断方法。

由于本发明的方法而被诊断出的疾病是以下神经退行性疾病：去甲肾上腺素浓度[NA]介于3000pmol/l至15000pmol/l之间(AD1)的阿尔茨海默氏病、去甲肾上腺素浓度[NA]介于100pmol/l至2700pmol/l之间(AD2)的阿尔茨海默氏病、精神抑郁症(PSY)、路易体痴呆(DLB)、额颞痴呆(FTD)和/或血管性痴呆(VD)。所述诊断能够区分患者患有哪种神经退行性疾病。本发明的诊断方法还显然可以区分患有轻度认知障碍的患者。这些患者通常会出现认知问题、焦虑、倦怠、睡眠呼吸暂停，酗酒。他们被称为对照患者或神经对照患者(Control/CTRL/NeuroControl/NeuroCtrl)。

已经确定对于每种筛查出的神经退行性疾病的

关于去甲肾上腺素浓度[NA]介于3000pmol/l至15000pmol/l之间(AD1)的阿尔茨海默氏病，最大灵敏度为94.74％且最大特异性为95.77％。

关于去甲肾上腺素浓度[NA]介于100pmol/l至2700pmol/l之间(AD2)的阿尔茨海默氏病，最大灵敏度为95.65％且最大特异性为88.89％。

关于精神抑郁症(PSY)，最大灵敏度为83.33％且最大特异性为100.00％。

关于路易体痴呆(DLB)，最大灵敏度为100.00％且最大特异性为98.80％。

关于额颞痴呆(FTD)，最大灵敏度为70.0％且最大特异性为93.75％。

关于血管性痴呆(VD)，最大灵敏度为42.86％且最大特异性为97.70％。

最后，关于对照患者(对照患者的定义，请参见上文)，最大灵敏度为57.89％且最大特异性为100.00％。

为了获得这些高度重要的统计结果，已经进行了可靠的神经退行性疾病的鉴别诊断方法。图1在概念上示出了本发明的方法，图2示出了已经确定了参照值的受试者组。缩写OD代表“其他疾病”并实际上包括PSY、DLB、FTD和VD。PSY(精神抑郁症)还包括患有双相障碍(bipolar disorders)的患者。

在本方法中使用了以下标准：

通过明确询问患者或询问其一位熟人或在其身份证明文件中确认来收集要诊断的患者的年龄。

然后，要求所述患者对他们的认知能力进行医疗问卷调查。这些测试由一组20到30个问题组成，用于评估基本的认知功能。大多数评估要求个体给出基本的个人信息(即姓名，地址等)，根据常识回答简单的问题(即谁是美国总统？)，并记忆简单信息项目，例如三个单词或姓名和地址的列表，然后回忆。根据个体给出的响应，给出有助于临床医生对患者分类的评分。所述问卷可以是缩简的心理测试(AMT)、小型精神状态检查(MMSE)和六项认知障碍测验(6CIT)之一。为了本鉴别诊断方法的目标，已选择MMSE，但是可以使用用于评估基本认知功能的任何其他合适的医学问卷。

其次，收集每个个体的血液样品并进行分析，以确定患者血浆中的三种儿茶酚胺(CA)水平。使用标准HPLC方法同时定量肾上腺素(adrenaline)，去甲肾上腺素(noradrenaline)和多巴胺。所述HPLC与电化学检测结合。与通常需要收集脑脊液的神经退行性疾病的标准诊断方法相比，这种筛查的优势在于，血液样品的收集易于在个体上进行，尤其是对老年人。确实应当了解的是腰椎穿刺比血液采集更具侵害性，并且腰椎穿刺并不总是适用于所有类型的患者。

个体血浆中的CA水平、MMSE结果以及个体年龄将被考虑并在以下数学模型中进行处理。

现在处理这前五项标准(年龄、医疗问卷评分、肾上腺素浓度([A])、去甲肾上腺素浓度([NA])和多巴胺浓度([D]))以确定所述受试者患有哪种神经退行性疾病。

基于儿茶酚胺浓度的参数可由此确定以改进诊断。确实要注意的是前五项标准足以提供正确的诊断。在需要改进的情况下，将对实验确定的儿茶酚胺浓度进行处理以确定那些儿茶酚胺的预期浓度。

儿茶酚胺中预期浓度的确定基于所测浓度与参照浓度之间的差异测量。选择患有阿尔茨海默氏病(AD)的患者血液样品中儿茶酚胺的浓度，尤其是血浆中的浓度作为参照浓度。已经在训练模型步骤中选择的100位受试者的初始小组中确定了这种浓度的平均值。

所述肾上腺素的预期浓度对应于以下数学函数：

其表示肾上腺素的预期浓度对应于K

其中

K

因此，所述去甲肾上腺素的预期浓度对应于以下数学函数：

其表示去甲肾上腺素的预期浓度对应于K

其中

K

因此，多巴胺的预期浓度对应于以下数学函数：

其表示多巴胺的预期浓度对应于K

其中

K

由一个受试者获得的那些值，无论是测量的(年龄、评分、[A]、[NA]和[D])还是确定的([A]

表I显示了已确定的与神经退行性疾病有关的五项标准(年龄、医疗调查问卷评分、[NA]、[A]和[D])的最小参照值。还指出了在改进诊断方法的情况下使用的三个计算标准的最小值([NA]

表II显示了已确定的与神经退行性疾病有关的五项标准(年龄、医疗调查问卷评分、[NA]、[A]和[D])的最大参照值。还指出了在改进诊断方法的情况下使用的三个计算标准的最大值([NA]

因此，对于患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于3000pmol/l至15000pmol/l之间(AD1)的阿尔茨海默氏病的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于57.8岁至87.7岁之间；

-MMSE中的评分介于20至29之间；

-[NA]介于2963pmol/l至8681pmol/l之间；

-[A]介于66pmol/l至1721pmol/l之间；

-[D]介于111pmol/l至878pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于100pmol/l至2700pmol/l之间(AD2)的阿尔茨海默氏病的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于51.9岁至89.8岁之间；

-MMSE中的评分介于4至27之间；

-[NA]介于1023pmol/l至2539pmol/l之间；

-[A]介于143pmol/l至1372pmol/l之间；

-[D]介于153pmol/l至656pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于患有精神抑郁症(PSY)的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于40.2岁至74.5岁之间；

-MMSE中的评分介于22至30.0之间；

-[NA]介于1534pmol/l至3691pmol/l之间；

-[A]介于191pmol/l至407pmol/l之间；

-[D]介于276pmol/l至519pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于患有路易体痴呆(DLB)的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于61.7岁至81.6岁之间；

-MMSE中的评分介于8至24之间；

-[NA]介于1065pmol/l至7217pmol/l之间；

-[A]介于104pmol/l至418pmol/l之间；

-[D]介于204pmol/l至375pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于患有额颞痴呆(FTD)的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于49.0岁至75.5岁之间；

-MMSE中的评分介于0至27.0之间；

-[NA]介于874pmol/l至5744pmol/l之间；

-[A]介于123pmol/l至1271pmol/l之间；

-[D]介于246pmol/l至1003pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于患有血管性痴呆(VD)的受试者，所述标准的参照值如下：

-年龄介于58.8岁至85.7岁之间；

-MMSE中的评分介于21至29之间；

-[NA]介于1518pmol/l至3706pmol/l之间；

-[A]介于240pmol/l至1526pmol/l之间；

-[D]介于199pmol/l至533pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

对于健康对照，所述标准的参照值如下：

-年龄介于40.2岁至84.7岁之间；

-MMSE中的评分介于22至30之间；

-[NA]介于925pmol/l至6331pmol/l之间；

-[A]介于164pmol/l至2366pmol/l之间；

-[D]介于208pmol/l至1334pmol/l之间；

-[NA]

-[A]

-[D]

所述参照值实际上可以写为介于

校正因子δ可分配于这些最低和最高参照值。所述校正因子δ可介于0.50至1.50之间。优选地，所述校正因子δ可介于0.75至1.25之间。如果校正因子δ等于1，则实际上在本发明的诊断方法中使用的参照值是表I和表II中所示的参照值。

校正因子δ用于考虑儿茶酚胺浓度的测量过程中可能发生的任何可能的偏差，或在确定MMSE评分时因疏忽而造成的可能的误差。实际上，对于不等于1的校正因子δ，表I和表II的值略有不同。在一个受试者上通过不同参照表(通过不同校正因子δ获得)对本发明的方法进行迭代可以提供更好的结果稳健性(robustness)。例如，如果患者通过3个不同的参照表被诊断为额颞痴呆，那么与仅参照1个参照表就诊断出该患者患有该具体疾病相比，诊断的确定性就会提高。

参照值或校正后的参照值用于比较至少五项标准(甚至八项标准)。实际上，比较步骤是表达每种神经退行性疾病的整体注释(或整体评分)的决定因素。为了获得将用于诊断受试者的整体注释，首先为每项标准确定一个虚拟值。

如果所述受试者对一项标准的值超出参照值的范围(下限在表I中，或在校正后的表I中表示(如果应用了校正因子δ)；上限在表II中，或在校正后的表II中表示(如果应用了校正因子δ))，则将虚拟值设置为零。换句话说，所选标准不计算在内。

如果所述受试者对一项标准的值在参照值范围内(如上所述，根据(校正的)表I和(校正的)表II的参照值)，则适用以下数学等式：

其中VAL

K是数学参数，介于0到0.1之间。优选地，K介于0至0.05之间。

为了确定与每种神经退行性疾病有关的整体注释，与所有五项标准(年龄、评分、[A]、[NA]、[D])和/或三个补充标准有关的虚拟值(([A]

然后，将权重因子分配于每个虚拟值。与年龄和评分有关的虚拟值比与浓度或预期浓度有关的虚拟值的相关性更小。科学地确定血液中儿茶酚胺的浓度比向他人提出问题实际上更为客观。年龄也是一个比较主观的参数，因为它与疾病的相关性相当多变并取决于个体而不是确定的规律。由于这些原因，关于年龄和医疗调查问卷评分的虚拟值的权重因子已设置为例如0.5，而关于浓度或预期浓度的虚拟值的权重因子已设置为例如2。

与每种神经退行性疾病有关的整体注释仅通过将所有加权虚拟值相加而获得。因此，数学写法如下：

整体注释＝w

+w

其中w

其中w

表III中示出了与针对13名受试者的样品获得的每种神经退行性疾病有关的整体注释。为了进行诊断，临床医生会比较获得的六种神经退行性疾病中每种疾病的整体注释，并得出结论，如果某具体疾病的整体注释在六种整体注释中最高，则该患者患有该具体疾病。表III的最后三列显示了诊断结论，第一个诊断是最有可能针对患者的诊断。当整体注释之间的间隔太弱时，通常是当该间隔小于2.00(优选小于1.00，更优选小于0.50)时，则进行第二次诊断。可以进行两次诊断，甚至可以进行第三次诊断的患者(也在表III中显示)通常患有混合型痴呆症。还确定了患有精神抑郁症(PSY)的患者也显示出阿尔茨海默氏病(AD)的体征，精神抑郁症是阿尔茨海默氏病(AD)的先兆。

实际上，对于每个患者，测量每个类别中患者的评分与患者云之间的距离。例如，当在公式(2)中考虑到AD1的参照值时(即

这就是为什么必须通过考虑所有正在研究的神经退行性疾病来计算整体注释的原因。例如，当将公式(2)中的参照值用于对照组时，对于同一组患者绘制如图4所示的表示形式。

通过将此算法应用于每位患者，最终建议的诊断是根据测量的距离与患者最接近的点云(在8种可能的原始云中)的诊断。如果次优诊断(如表III所示)(可能还有第三优诊断)的评分足够接近，则也可以向临床医生指示该次优(也可能是第三优)。

因此，有可能将个体从神经退行性疾病或混合型痴呆症中诊断出。对于每种神经退行性疾病和每位患者的整体注释的归属使临床医生不仅可以将患者分类为疾病中一类(例如，通过评估，所述患者患有AD)，还可以洞察同一患者可能患有的其他疾病(基于次优和可能的第三优诊断)。

使用的另外的标准是确定所讨论的受试者是否患有动脉高血压。确实已经注意到的是患有AD的患者中动脉高血压的患病率低四倍。这可能与大脑中聚集体的形成以及这些聚集体的清除率低有关(由于这些患者的血压(极)低)。因此，确定所述受试者中的血压可以是进一步的参数，以确定所述受试者是否患有AD。

同时准确地检测和鉴定血液中的儿茶酚胺为研究AD和儿茶酚胺之间的潜在联系奠定了坚实的基础。在这项探索性研究中，通过一群患有痴呆症和其他神经退行性疾病的患者(n＝100)，我们证明了血浆儿茶酚胺测定对于开发侵害性更小且可及的解决方案以诊断阿尔茨海默氏病(AD1+AD2)和其他神经退行性疾病(例如PSY、DLB、FTD、VD，以及混合型痴呆症)的益处。对儿茶酚胺信号的统计利用，再加上简单的数据(例如年龄、小型精神状态检查(MMSE)和血压测定)可以实现具有高灵敏度和特异性(即分别为94.74％和95.77％)的患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于3000pmol/l至15000pmol/l之间(AD1)的阿尔茨海默氏病的受试者的诊断以及患有去甲肾上腺素浓度[NA]介于100pmol/l至2700pmol/l之间(AD2)的阿尔茨海默氏病的受试者的诊断(灵敏度和特异性分别为95.65％和88.89％)。

本发明的诊断方法不仅对诊断受试者非常有用，而且还是提供这些受试者的随访的工具。特别要强调的是，由于是基于简单的血液检查，因此样品的制备是很容易进行的。从医学研究的角度来看，这种诊断方法也是非常实用的，因为由于使用了简单的检测方法，可以轻松地评估新疗法和新药。

分析方法

将在肝素锂试管中收集的血液在+4℃以3500rpm离心10分钟。将1mL血浆和100μL的2,3-二羟基苯甲酸(DHBA)内标物(来自100nM DHBA储备液)添加到含有100mg氧化铝的萃取管中，其中100mg氧化铝根据已知方法(Anton A.H.等人,J.Pharmacol.Exp.Ther.,1962,138(3),360-375)，预先用500μL TRIS 3M和100μL EDTA 10％(5：1)的混合物活化。将样品搅拌10分钟，并在4℃以2000rpm离心。然后将具有结合的儿茶酚胺的氧化铝用5mL蒸馏水洗涤3次，然后离心。儿茶酚胺的洗脱是通过添加500μL HClO

样品制备说明

在HPLC分析之前，通过吸附在氧化铝上从血浆基质中提取儿茶酚胺(肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺)。样品制备很简单，因为无需调节血浆样品的pH。此外，样品制备仅需要使用洗涤缓冲液进行洗涤步骤。选定的HPLC色谱柱与流动相结合，针对此特定分离进行了优化，可确保进行准确可靠的色谱定量。使用经过认证的HPLC试剂盒，每人每天可以分析多达100个血浆样品。

低浓度去甲肾上腺素

低浓度的去甲肾上腺素表示大脑机能减退，特别是在大脑的蓝斑中去甲肾上腺素的低产量。脑干中的这个核负责去甲肾上腺素的大脑合成。实际上，这种去甲肾上腺素可以通过肾上腺释放到血液系统中。所述大脑机能减退(通常与用于筛查认知功能的医疗调查问卷的低评分相联系，例如，低的MMSE评分，即低于15)可能表明所述患者患有阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)。

统计学研究，特别是基于接受者工作特征(ROC)曲线的研究，已经可以确定关于去甲肾上腺素浓度的阈值以便将受试者分类为可能患有AD1或AD2。ROC曲线是阐明了二元分类器系统的区分阈值变化时的诊断能力的图表。确实，血浆去甲肾上腺素数据样本未呈正态分布，并且样本的直方图分布未显示两组样本均等分布(参见图5)。AD患者与非AD患者血浆去甲肾上腺素浓度的相对频率分布是确定关于去甲肾上腺素浓度的阈值以便将受试者分类为可能患有AD1或AD2(见图6)的视觉方式。确实，可以清楚地看到，在所有去甲肾上腺素浓度相似的患者中，AD患者被分为两种截然不同的分布，分界线(cut-off line)介于2900pmol/l和3100pmol/l之间。所述ROC分析(参见图7)还可以确定使去甲肾上腺素的约登指数(Youden Index)最大化的最佳分界值(cut-off)。曲线下面积(AUC)不是很好，因为仅去甲肾上腺素不足以具体区分AD患者和非AD患者。但是，该分界值应用于分开AD患者的两个亚型(AD1和AD2)时，提供了很好的区分度(特别是对于AD1，因为AUC在AD1之一和AD2之一中是最大的)。AD患者和非AD患者血浆NA浓度的ROC曲线分析可以确定3023pmol/l是使约登指数最大化的最佳分界值。

因此可以可靠地确认，当受试者的去甲肾上腺素浓度[NA]低于或等于2900pmol/l至3100pmol/l的预定阈值时，则所述受试者被怀疑患有阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)。为了实际可行，优选将区分AD1和AD2的分界值设置为至少为3000pmol/l的去甲肾上腺素浓度。

然而，所述怀疑不足以对一名患者进行准确的诊断。因此，需要进行进一步的研究以建立准确而精确的诊断。

一旦在受试者中确定了去甲肾上腺素的浓度，并且在该浓度低于或等于预定阈值(优选低于或等于3000pmol/l)的情况下，确定患者的动脉高血压状态(也称为高血压状态或HBP状态)。

为此，检查所述受试者是否连续至少三天血压至少为120/80mmHg。第一个数字对应于收缩压而第二个数字对应于舒张压。优选地，为了确定患有动脉高血压，所述受试者应该连续至少三天表现出至少140/90mmHg的血压。相比之下，健康患者的正常心脏收缩压在90到119mmHg之间，而健康患者的正常心脏舒张压在60到79mmHg之间。

在至少连续3天的血压低于140/90mmHg，优选至少连续3天的血压低于120/80mmHg的情况下，可以得出结论该受试者未患有动脉高血压。

然后用数学算法处理实验数据(年龄、评分、浓度)以确定将用于评估最终诊断的整体注释。还可以包括实验数据，例如性别和基因型中APOEε4等位基因的存在。但是，它们也可以被省略。确定整体注释首先需要参数的确定。

因为在诊断之前，要诊断的受试者不是被分类为患有一种具体的神经退行性疾病，而是被分类为患有选自神经对照(NC)之外的六种疾病(AD1、AD2、PSY、DLB、FTD、VD)中的一种医疗状况，所以通过以下方式衍生了所述数学算法：将每个实验临床数据(在[NA]>3000pmol/l的情况下的年龄、MMSE评分、[A]、[NA]、[D]和动脉高血压程度)转换为针对当前研究的七项医疗状况之一的一个参数。

这就是为什么对于一个表现出[NA]高于3000pmol/l的受试者，要确定35个参数的原因。实际上，没有检查所述受试者的动脉高血压。

但是，当受试者的[NA]低于3000pmol/l时，可以确定动脉高血压，因此，总共需要考虑42个参数。

确定所述参数后，可以将它们处理为与所研究的每种神经疾病有关的整体注释。这样计算出的整体注释将作为对所述受试者的最终诊断得出结论的基础。

在等式(2)中，K是数学参数，其可以介于0.01至1.00之间，优选地在0.02与0.99之间，更优选地在0.05与0.95之间。

在优选的实施方案中，在等式(2)中使用的与阿尔茨海默氏病的早期阶段(AD1)有关的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为50岁和/或最多60岁，优选至少51岁，更优选至少52岁，最优选为52.92；和/或最大参照值至少为85岁和/或最多90岁，优选最多89岁，更优选最多88岁，最优选为87.72岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为14和/或最多16，优选为15；和/或最大参照值至少为27和/或最多29，优选为28；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为90pmol/l和/或最多150pmol/l，优选至少100pmol/l，更优选至少105pmol/l，最优选为110.74pmol/l；和/或最大参照值至少为800pmol/l和/或最多1000pmol/l，优选最多950pmol/l，更优选最多925pmol/l，最优选为878.22pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为40pmol/l和/或最多100pmol/l，优选至少50pmol/l，更优选至少60pmol/l，最优选为65.66pmol/l；和/或最大参照值至少为1500pmol/l和/或最多2000pmol/l，优选最多1900pmol/l，更优选最多1800pmol/l，最优选为1720.74pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为2900pmol/l和/或最多3200pmol/l，优选至少2950pmol/l，更优选至少2960pmol/l，最优选为2962.54pmol/l；和/或最大参照值至少为8100pmol/l和/或最多9000pmol/l，优选最多8800pmol/l，更优选最多8700pmol/l，最优选为8681.22pmol/l。

在优选的实施方案中，使用的与阿尔茨海默氏病的晚期阶段(AD2)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为45岁和/或最多55岁，优选至少47岁，更优选至少50岁，最优选为51.94；和/或最大参照值至少为85岁和/或最多95岁，优选最多92岁，更优选最多90岁，最优选为89.76岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为3和/或最多5，优选为4；和/或最大参照值至少为28和/或最多30，优选为29；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为140pmol/l和/或最多175pmol/l，优选至少145pmol/l，更优选至少150pmol/l，最优选为152.88pmol/l；和/或最大参照值至少为500pmol/l和/或最多1000pmol/l，优选最多800pmol/l，更优选最多700pmol/l，最优选为655.86pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为80pmol/l和/或最多200pmol/l，优选至少120pmol/l，更优选至少130pmol/l，最优选为143.08pmol/l；和/或最大参照值至少为1100pmol/l和/或最多1500pmol/l，优选最多1450pmol/l，更优选最多1400pmol/l，最优选为1371.09pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为750pmol/l和/或最多1150pmol/l，优选至少850pmol/l，更优选至少1000pmol/l，最优选为1023.12pmol/l；和/或最大参照值至少为2600pmol/l和/或最多3000pmol/l，优选最多2900pmol/l，更优选最多2800pmol/l，最优选为2758.08pmol/l。

在优选的实施方案中，与精神抑郁症(PSY)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为35岁和/或最多45岁，优选至少37岁，更优选至少40岁，最优选为40.18；和/或最大参照值至少为70和/或最多80岁，优选最多78岁，更优选最多76岁，最优选为74.46岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为21和/或最多23，优选为22；和/或最大参照值至少为28和/或最多30，优选为29；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为250pmol/l和/或最多320pmol/l；优选至少260pmol/l，更优选至少270pmol/l，最优选为276.36pmol/l；和/或最大参照值至少为450pmol/l和/或最多750pmol/l，优选最多700pmol/l，更优选最多600pmol/l，最优选为519.18pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为180pmol/l和/或最多220pmol/l；优选至少185pmol/l，更优选至少190pmol/l，最优选为191.10pmol/l；和/或最大参照值至少为360pmol/l和/或最多450pmol/l，优选最多420pmol/l，更优选最多410pmol/l，最优选为406.98pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为1000pmol/l和/或最多2000pmol/l；优选至少1200pmol/l，更优选至少1400pmol/l，最优选为1533.70pmol/l；和/或最大参照值至少为3000pmol/l和/或最多4000pmol/l，优选最多3800pmol/l，更优选最多3700pmol/l，最优选为3691.38pmol/l。

在优选的实施方案中，使用的与路易体痴呆(DLB)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为55岁和/或最多65，优选至少57岁，更优选至少60岁，最优选为61.74；和/或最大参照值至少为75岁和/或最多85岁，优选最多83岁，更优选最多82岁，最优选为81.6岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为7和/或最多9，优选为8；和/或最大参照值至少为23和/或最多25，优选为24；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为150pmol/l和/或最多250pmol/l；优选至少170pmol/l，更优选至少180pmol/l，最优选为203.84pmol/l；和/或最大参照值至少为300pmol/l和/或最多400pmol/l，优选最多390pmol/l，更优选最多380pmol/l，最优选为375.36pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为80pmol/l和/或最多125pmol/l；优选至少90pmol/l，更优选至少100pmol/l，最优选为108pmol/l；和/或最大参照值至少为580pmol/l和/或最多720pmol/l，优选最多690pmol/l，更优选最多670pmol/l，最优选为650pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为900pmol/l和/或最多1300pmol/l；优选至少1000pmol/l，更优选至少1050pmol/l，最优选为1065.26pmol/l；和/或最大参照值至少为6500pmol/l和/或最多8000pmol/l，优选最多7500pmol/l，更优选最多7300pmol/l，最优选为7216.50pmol/l。

在优选的实施方案中，使用的与额颞痴呆(FTD)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为45岁和/或最多53，优选至少47岁，更优选至少48岁，最优选为49；和/或最大参照值至少为70岁和/或最多80岁，优选最多78岁，更优选最多76岁，最优选为75.48岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为0和/或最多1，优选为0；和/或最大参照值至少为26和/或最多28，优选为27；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为200pmol/l和/或最多400pmol/l；优选至少230pmol/l，更优选至少240pmol/l，最优选为245.98pmol/l；和/或最大参照值至少为900pmol/l和/或最多1100pmol/l，优选最多1050pmol/l，更优选最多1020pmol/l，最优选为1002.66pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为100pmol/l和/或最多150pmol/l；优选至少110pmol/l，更优选至少120pmol/l，最优选为123.48pmol/l；和/或最大参照值至少为1100pmol/l和/或最多1500pmol/l，优选最多1400pmol/l，更优选最多1300pmol/l，最优选为1270.90pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为700pmol/l和/或最多1000pmol/l；优选至少800pmol/l，更优选至少850pmol/l，最优选为874.16pmol/l；和/或最大参照值至少为5300pmol/l和/或最多6000pmol/l，优选最多5900pmol/l，更优选最多5800pmol/l，最优选为5743.62pmol/l。

在优选的实施方案中，使用的与血管性痴呆(VD)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为55岁和/或最多63，优选至少56岁，更优选至少58岁，最优选为58.8；和/或最大参照值至少为80岁和/或最多90岁，优选最多88岁，更优选最多86岁，最优选为85.68岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为20和/或最多22，优选为21；和/或最大参照值至少为27和/或最多29，优选为28；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为140pmol/l和/或最多250pmol/l；优选至少160pmol/l，更优选至少180pmol/l，最优选为198.94pmol/l；和/或最大参照值至少为450pmol/l和/或最多580pmol/l，优选最多560pmol/l，更优选最多540pmol/l，最优选为533.46pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为200pmol/l和/或最多270pmol/l；优选至少210pmol/l，更优选至少230pmol/l，最优选为240.10pmol/l；和/或最大参照值至少为1200pmol/l和/或最多1800pmol/l，优选最多1700pmol/l，更优选最多1600pmol/l，最优选为1525.92pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为1400pmol/l和/或最多1800pmol/l；优选至少1450pmol/l，更优选至少1500pmol/l，最优选为1518.02pmol/l；和/或最大参照值至少为3400pmol/l和/或最多4000pmol/l，优选最多3900pmol/l，更优选最多3800pmol/l，最优选为3705.66pmol/l。

在优选的实施方案中，所述方法进一步包括计算与神经对照(NC)有关的一个整体注释；优选地，在步骤(c)中使用的与神经对照(NC)有关的并在等式(2)中实施的参照值如下：

-关于所述受试者的年龄，最小参照值至少为35岁和/或最多45，优选至少37岁，更优选至少39岁，最优选为40.18；和/或最大参照值至少为80岁和/或最多90岁，优选最多88岁，更优选最多86岁，最优选为84.66岁；

-关于所述受试者对适于筛查认知功能的问卷的评分，最小参照值至少为22和/或最多24，优选为23；和/或最大参照值至少为29和/或最多30，优选为30；

-关于多巴胺浓度[D]，最小参照值至少为180pmol/l和/或最多240pmol/l；优选至少190pmol/l，更优选至少200pmol/l，最优选为207.76pmol/l；和/或最大参照值至少为1250pmol/l和/或最多1600pmol/l，优选最多1500pmol/l，更优选最多1400pmol/l，最优选为1334.16pmol/l；

-关于肾上腺素浓度[A]，最小参照值至少为110pmol/l和/或最多200pmol/l；优选至少130pmol/l，更优选至少150pmol/l，最优选为163.66pmol/l；和/或最大参照值至少为2250pmol/l和/或最多2500pmol/l，优选最多2450pmol/l，更优选最多2400pmol/l，最优选为2366.40pmol/l；

-关于去甲肾上腺素浓度[NA]，最小参照值至少为900pmol/l和/或最多1650pmol/l；优选至少910pmol/l，更优选至少920pmol/l，最优选为925.12pmol/l；和/或最大参照值至少为6000pmol/l和/或最多7000pmol/l，优选最多6600pmol/l，更优选最多6400pmol/l，最优选为6331.14pmol/l。