一种海参液及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于海产品深加工技术领域，尤其涉及一种海参液及其制备方法和应用。

背景技术

海参不但是海产八珍之首，也是名贵的药材。海参体内含有50余种有益于人体的生理活性营养物质，其中蛋白质含量极高，每100g生鲜海参含蛋白质21.5g，脂肪0.3g，碳水化合物1g，灰分1.1g，钙0.118g，磷0.022g、铁0.0014g。海参含有8种人体自身不能合成的必需氨基酸和丰富的微量元素，尤其是钙、钒、镁、锰、镍、硒、锌，特别是微量元素钒居各种食物之首，可参与血液中铁的运输、增强造血能力。海参还含有特殊的活性物质、酸性粘多糖、基因及脑神经细胞的修复因子，具有滋阴养血、补肾壮阳功效，可以增强机体免疫力、抗炎、抗病毒，改善亚健康，修复受损的基因及脑细胞，改善睡眠，增强记忆力，消除疲劳、美容抗衰老，抗癌护心脏，抑制癌细胞的生长与转移。然而，传统海参加工工艺对海参皂苷等活性物质的破坏较大，获得的海参提取物不利于人体消化吸收，营养损失严重。因此，如何提供一种海参的精深加工工艺，以减少传统加工的营养损失，综合利用海参的活性功能成份，充分发挥其协同保健作用，是本领域研究的关键。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种海参液的制备方法，能有效避免海参中活性物质的损失，保留海参的营养成分和药理功效。

本发明的目的还在于提供一种海参-PQQ组合物，对受损细胞线粒体有修复作用，具有良好的抗衰老、缓解疲劳功效。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种海参液的制备方法，包括如下步骤：海参漂烫、浸泡后粉碎，加水得到海参浆，海参浆中加入复合风味蛋白酶，微波辅助酶解，酶解液灭酶、离心得到海参液；以海参质量计，所述复合风味蛋白酶的添加量为10～15g/kg；所述微波功率为400～500W。

优选的，所述漂烫温度为80～90℃，时间为15～25min。

优选的，所述浸泡温度为3～4℃，时间为2～4h。

优选的，所述酶解温度为45～50℃，pH为6.8～7，时间为2.5～3.5h。

优选的，所述离心采用内衬2000目丙纶滤布的离心过滤机，所述离心转速为1200～1800r/min。

本发明还提供了上述制备方法制备得到的海参液，所述海参液氨基态氮含量为0.1～0.2％。

本发明还提供了一种海参-PQQ组合物，包括以下组分：上述海参液8～12mL、PQQ20～30mg、辅酶Q1045～55mg、鱼胶原蛋白肽260～320mg和蜂王浆0.4～0.8mL。

本发明还提供了上述海参-PQQ组合物的制备方法，包括以下步骤：按组分配比，将各组分混合，混合液在微波辅助条件下均浆处理，均浆后离心，离心上清液微波保温，得到海参-PQQ组合物。

优选的，所述微波功率为1～1.5KW，均浆温度为80～90℃，微波保温温度为80～90℃。

本发明还提供了上述海参液或上述海参-PQQ组合物在制备线粒体修复、抗衰老、缓解疲劳产品中的应用。

本发明的有益效果：

本发明所述海参液的制备方法能有效避免海参中活性物质的损失，保留海参的营养成分和药理功效，并且该方法工艺简单，可用于工厂的批量生产。

本发明所述的海参-PQQ组合物，通过海参液与PQQ等营养组分的合理配比，可以协同发挥海参和PQQ的药理功效，得到的海参-PQQ组合物对受损细胞线粒体有修复作用，具有良好的抗衰老、缓解疲劳功效，可进一步用于相关药物的制备。

附图说明

图1：浸泡时间对海参含钠量的影响；

图2：加水量对酶解度的影响。

具体实施方式

本发明提供了一种海参液的制备方法，包括如下步骤：海参漂烫、浸泡后粉碎，加水得到海参浆，海参浆中加入复合风味蛋白酶，微波辅助酶解，酶解液灭酶、离心得到海参液；以海参质量计，所述复合风味蛋白酶的添加量为10～15g/kg，优选为12～13g/kg；所述微波功率为400～500W，优选为450W。本发明所述微波功率以酶解液5L为基数计，若酶解液为10L，则微波功率为800～1000W。

本发明所述海参为2～3年龄以上的活海参，优选为刺参，更优选为浅海底播牧场刺参。本发明将海参去内脏、清洗、除去泥沙杂质后备用。

本发明将海参进行漂烫，所述漂烫温度为80～90℃，优选为84～88℃，更优选为85℃；所述漂烫时间为15～25min，优选为18～22min，更优选为20min。本发明通过漂烫可以灭活海参中的自溶酶，使海参皂苷等活性物质免遭破坏，使蛋白质固化，保护海参小分子活性成分的天然化学结构定型不受分解。本发明将漂烫后的海参自然冷却。

本发明将海参进行浸泡，所述浸泡温度为3～4℃；所述浸泡时间为2～4h，优选为3h。本发明在浸泡过程中优选为每小时换水一次。本发明通过浸泡可以去除多余的钠、钙、镁离子，去除部分腥异味，以避免制备得到的海参液钠、钙、镁离子超标，省去了酶解后的钠滤工艺。

本发明将浸泡后的海参进行粉碎，所述粉碎优选为在4℃条件下常压粉碎，所述粉碎时间为60～70min，优选为65min。本发明粉碎至粒径为6～10μm。

本发明在粉碎后的海参中加水得到海参浆，所述加水量为海参质量的10～15倍，优选为12～13倍；所述水为纯净水。本发明在海参浆中加入复合风味蛋白酶进行酶解，以海参质量(海参固形物质量)计，所述复合风味蛋白酶(复合风味蛋白酶酶活优选为20万U/g)的添加量为10～15g/kg，优选为12～13g/kg；本发明所述酶解过程中采用微波辅助，所述(以酶解液5L为基数计)微波功率为400～500W，优选为450W；本发明所述微波辅助酶解过程优选为在水浴条件下进行，在微波恒定功率的情况下，自动调节水套夹层水温以达到最佳酶解度。

本发明所述酶解温度为45～50℃，优选为46～48℃；所述酶解pH为6.8～7，优选为6.9；所述酶解时间为2.5～3.5h，优选为3h。本发明采用微波辅助酶解可有效避免海参营养物质的损失，若加大微波功率，酶解速度加快，酶解时间减短，酶提前失活，酶解不完整，不利于海参营养成分的提取。若不用微波辅助，则需要增加酶用量和酶解时间，会使得风味变差，且海参分子大小差别很大，长时间酶解会使小分子活性物质过度降解，甚至变成氨气，对消化吸收不利，造成营养损失。

本发明将酶解液进行灭酶处理，所述灭酶条件优选为90℃保持15min。

本发明将灭酶处理后的酶解液自然冷却至室温，再进行离心分离。所述离心采用内衬2000目丙纶滤布的离心过滤机，所述离心转速为1200～1800r/min，优选为1500r/min；本发明采用内衬2000目丙纶滤布的离心过滤机进行连续离心分离，在离心力的作用下，通过2000目滤布的为上清液，被滤布拦下的12％～18％的大分子参与下次酶解。较短酶解时间及时分离合格产品，不被过度降解，保证了质量，大分子参与二次酶解可最大限度提高材料利用率，保证质与量的最大化。

本发明离心分离得到的上清液即为海参液。本发明优选的将海参液进行真空浓缩处理，所述真空度可选为-0.085MPa，浓缩温度可选为62～65℃；浓缩至海参液氨基态氮含量为0.1～0.2％，优选为0.14～0.15％。

本发明还提供了上述制备方法制备得到的海参液，所述海参液氨基态氮含量为0.1～0.2％，优选为0.14～0.15％。

本发明还提供了一种海参-PQQ组合物，包括以下组分：上述海参液8～12mL、PQQ20～30mg、辅酶Q1045～55mg、鱼胶原蛋白肽260～320mg和蜂王浆0.4～0.8mL。优选为，所述海参-PQQ组合物包括上述制备得到的海参液10mL、PQQ 25mg、辅酶Q1050mg、鱼胶原蛋白肽300mg和蜂王浆0.5mL；所述海参液氨基态氮含量为0.1～0.2％。

本发明所述PQQ为吡咯喹啉醌，分子式是C

本发明所述海参-PQQ组合物的制备方法，包括以下步骤：按组分配比，将各组分混合，混合液在微波辅助条件下均浆处理，均浆后离心，离心上清液微波保温，得到海参-PQQ组合物。

本发明将各组分混合液经微波辅助均浆处理。本发明所述均浆搅拌速度为400～600r/min，优选为500r/min；本发明所述均浆温度为80～90℃，优选为15min内升温至80～85℃，所述微波功率为1～1.5KW，优选为1.2KW。作为可选的实施方式，本发明根据均浆罐容积以5升为基数，微波输出功率为1.5KW，在15min内升温达到85℃，不得超过90℃(过高会影响热敏成分，过低灌装真空度不足)，保温10min，保持均浆参数要求，由夹层水温自动控制，在25min内完成均浆过程，进入分离工序。

本发明将均浆处理后的混合液进行离心分离，所述离心条件为4000～5000r/min，优选为4500r/min；作为可选的实施方式，本发明采用碟片式离心机(内容积20L)，以每分钟5升流量给料，在离心机内4500r/min沉降4min，可保证灌装后的成品不沉淀，又不浪费合格原料。

本发明离心得到的上清液进入保温工序。所述微波功率为1～1.5KW，优选为1.2KW，所述微波保温温度为80～90℃，优选为82～85℃。本发明将保温处理的上清液(海参-PQQ组合物)在80～85℃恒温条件下灌装、封口，灌装后进行灭菌，得到口服液产品

在本发明中，所述微波保温、灌装过程可选为微波恒温条件下自动灌装、封口。所述微波功率为1～1.5KW，优选为1.2KW，所述微波保温温度为80～90℃，优选为82～85℃。作为可选的实施方式，本发明根据灌装流水线速度，也就是进出保温罐流量，微波输出功率设置为1KW，自动温度控制仪设定在下限83℃，上限85℃以确保最佳保温温度。

本发明通过两道微波处理工艺，极性小分子与物料小分子在高频作用下，通过剪切摩擦起到加热、均浆、分解作用，可使辅酶Q10脂溶性物质与水分子结合，便于消化吸收，降解PQQ，使PQQ分子量变小，提高利用率；通过上清液微波保温，提高后续灌装的真空度，并且加热气体挥发可除去部分腥异味，同时给后续灭菌起到辅助作用。

本发明将灌装后的海参-PQQ组合物在进行灭菌，得到口服液产品。本发明所述灭菌条件优选为微波灭菌。所述微波条件为20kW灭菌4min，温度为85℃。作为可选的实施方式，本发明将海参-PQQ组合物(液体)用淡蓝色10毫升玻璃瓶灌装，灌装后的成品在流水线上冷却至40℃，用自动微波灭菌流水线(功率20KW)灭菌4min，温度达85℃后，下线冷却装盒，保质期24个月。

本发明还提供了上述海参液或上述海参-PQQ组合物在制备线粒体修复、抗衰老、缓解疲劳产品中的应用。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下述实施例中，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

在具体实施例中，复合风味蛋白酶购自江苏采薇生物科技有限公司，复合风味蛋白酶酶活为20万U/g，PQQ购自北京泛球生物科技有限公司，辅酶Q10购自武汉泽诺生物科技有限公司，鱼胶原蛋白肽购自养生堂药业，蜂王浆选购王浆酸达到1.8％以上的蜂王浆即可。

实施例1

一种海参液的制备方法：

(1)原料选取：采用浅海底播牧场刺参(3龄)，将海参去内脏、清洗，除去泥沙杂质，备用。

(2)漂烫：将自动漂烫流水线加热至温度85℃，自动控温仪设定85℃为准，经流水线漂烫20min，漂烫结束后冷却至室温。

(3)浸泡：在不锈钢水槽中用3℃冷水浸泡3h，每小时换水一次。

(4)粉碎：采用海康/HLF/6/8高速台式组织捣碎机，转速12000r/min，加装冷却水套，物料在4℃的条件下常压粉碎，均质65min，至粒度在6～10微米之间。

(5)酶解：粉碎后的海参加12倍质量的纯净水，调节pH至6.9，以海参质量计，1kg海参固形物添加12g复合风味蛋白酶(生产厂家：江苏采薇生物科技有限公司，网购，酶活为20万U/g)；水浴温度为48℃条件下，以5L物料为基数，施加500W微波辅助酶解，酶解时间3h。

(6)灭酶：90℃维持15min，灭酶完成。

(7)离心分离：酶解液自然冷却至30℃，采用内衬2000目丙纶滤布的离心过滤机进行连续离心分离，1500r/min在离心力的作用下，通过2000目滤布的为上清液，被滤布拦下的12％～18％的大分子参与下次酶解。

(8)浓缩：用真空浓缩锅，真空度-0.085MPa，温度62℃浓缩至海参液氨基态氮含量为0.14％浓度标准。

实施例2

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(2)中漂烫温度为90℃，时间为18min。

实施例3

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(3)中冷水温度为4℃，时间为2.5h。

实施例4

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(5)中加入10倍质量的纯净水，调节pH为7。

实施例5

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(5)中复合风味蛋白酶添加量为1kg海参固形物添加15g复合风味蛋白酶。

实施例6

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(5)中酶解温度为50℃，时间为2.5h。

实施例7

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(5)中微波功率为450W。

实施例8

1、对实施例1步骤(3)中冷水浸泡时间进行验证，设置冷水浸泡时间分别为0min、30min、60min、90min、120min、150min、180min、210min，其余步骤同实施例1。

经实验室测定，2.5h以后继续浸泡，含钠量曲线继续下降，3h后曲线平缓，含钠量曲线见图1。

2、对实施例1步骤(5)中纯净水添加量进行验证，设置纯净水添加量为5倍、10倍、15倍、20倍、25倍，其余步骤同实施例1。

经实验室测定，在加水量为10倍时，酶解的氨基态氮含量为0.094，加水量为12倍时为0.098，达到曲线峰值。

实施例9

一种海参-PQQ组合物，包括以下组分：实施例1制备得到的海参液10mL、PQQ 25mg、辅酶Q1050mg、鱼胶原蛋白肽300mg和蜂王浆0.8mL。

制备方法：各组分混匀，经微波辅助均浆处理。均浆搅拌速度为500r/min，根据均浆罐容积以5升为基数，微波输出功率为1.5KW，均浆参数要求在15min内升温达到85℃，不得超过90℃，保温10min，保持均浆参数要求，由夹层水温自动控制，在25min内完成均浆过程，进入分离工序。

碟片式离心机内容积20L，以每分钟5升流量给料，在离心机内4500r/min沉降4min，离心得到的上清液进入保温工序。

根据灌装流水线速度(进出保温罐流量)，微波输出功率为1KW自动温度控制仪设定在下限83℃，上限85℃以确保最佳保温温度。用淡蓝色10毫升玻璃瓶自动灌装，灌装后的成品在流水线上冷却至40℃，用自动微波灭菌流水线(功率20KW)灭菌4min，温度达85℃后，下线冷却装盒，保质期24个月。

对比例1

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(2)中将自动漂烫流水线加热至温度90℃，自动控温仪设定90℃为准，经流水线漂烫18min，漂烫结束后冷却至室温。

经实验室测定，在温度85℃时自溶酶已全部失活，提高漂烫温度至90℃反而会降低热敏物质含量。

对比例2

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(3)中在不锈钢水槽中用5℃冷水浸泡3h，每小时换水一次。

经实验室测定，提高温度对去除钠没有作用，反而降低保鲜效果。

对比例3

本实施例与实施例1的区别在于：步骤(5)中，粉碎后的海参加5倍质量的纯净水，调节pH为7。

经实验室测定，降低加水量，酶解的氨基态氮含量显著下降。

对比例4

本实施例与实施例8的区别在于：在均浆工序中不用微波处理，仅采用机械搅拌。

该制备方法无法使组份充分混合，无法降解辅酶Q10及PQQ，影响组分的消化吸收。

对比例5

本实施例与实施例8的区别在于：灌装前不进行保温处理。

该制备方法由于没有进行灌装前保温，灌装真空度不足，没有排气挥发，会使腥异味残留，没有微波预灭菌，灭菌不彻底影响产品保质期。

实验例

随机筛选20名志愿者，年龄45岁-75岁(45-55岁6人，56岁-65岁8人，66岁-75岁6人，其中男性13人，女性7人)，普遍存在慢性疲劳，失眠及糖尿病(糖尿病患者8人，在服用降糖药期间，空腹血糖在7.5-11之间波动)。受试志愿者每天早餐后半个小时，服用实施例9中海参-PQQ组合物(10毫升)，服用期间对每个个体进行观察记录，6周后做总结评估。

85％受试者睡眠得到改善、脸色红润、精神状态好转、慢性疲劳消除，65岁以上老年人步速提高。8名糖尿病患者中，除一名高龄女性效果不明显外，其余7人空腹血糖稳定在5.5-7之间，其中3人已停用降糖药2周，未见血糖波动。表明实施例9中海参-PQQ组合物对代谢疾病的辅助效果甚佳。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。