三联苯类化合物、其制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体而言，涉及三联苯类化合物、其制备方法及其应用。

背景技术

近年来癌症免疫疗法发展迅速。以程序性死亡受体1(Programmed cell-deathreceptor1，PD-1)和程序性死亡配体1(Programmed cell-death receptor1，PD-L1)为靶点的免疫检查点抑制剂在肿瘤领域的临床应用中取得了显著的成功。在肿瘤微环境中，肿瘤浸润淋巴细胞中的PD-1与表达于肿瘤细胞表面的PD-L1的结合使肿瘤发生免疫逃逸，促进肿瘤的生长。目前，已有15种以PD-1/PD-L1为靶点的抗体药物得到美国食品药品监督管理局(FDA)和我国药品监管机构的批准进入市场，这包括9种PD-1单克隆抗体和6种PD-L1单克隆抗体。但是抗体药物固有的局限性，包括组织和肿瘤渗透性差、半衰期长、口服生物利用度差、生产成本昂贵，以及具有免疫原性，严重阻碍了免疫治疗的效果。以PD-1/PD-L1为靶点的小分子抑制剂由于具有更好的药代动力学特征、口服利用度，可以和抗体药物组合用药甚至直接替代抗体药物，而受到越来越多的关注。

然而，PD-1/PD-L1小分子抑制剂的开发远远落后于单克隆抗体，仅有少数小分子抑制剂进入临床研究。早期由于靶点结构信息的缺乏，限制了PD-1/PD-L1小分子抑制剂的合理设计。直至2015年hPD-1、hPD-L1晶体复合物结构发表，越来越多针对PD-1和PD-L1的抗体、环肽和小分子抑制剂的专利被发表出来其中，最引人注目的是百时美施贵宝公司(BMS)公开的一类2-甲基-3-联苯衍生物。由Hoalk课题组研究发现此类化合物会诱导PD-L1蛋白发生聚合，两个PD-L1单体可以形成圆柱形疏水口袋，这为小分子药物的设计提供了易成药靶点。因此，以PD-L1为靶点的小分子抑制剂成为研究的热点。但是，至今都没有以PD-L1为靶点的小分子抑制剂批准上市，这也表明开发新型的PD-1/PD-1小分子抑制剂仍然是一项艰巨的工作，是临床未被满足的需要。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供三联苯类化合物、其制备方法及其应用。本发明实施例提供的三联苯类化合物对PD-1/PD-1有良好的抑制效果，可以作为PD-1/PD-1小分子抑制剂，继而起到治疗肿瘤的效果。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种三联苯类化合物，其包括式1所示化合物：

在可选的实施方式中，R

在可选的实施方式中，R

在可选的实施方式中，取代仲胺基团选自

在可选的实施方式中，所述三联苯类化合物选自下述结构式所示化合物中的任意一种：

第二方面，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物的制备方法，包括：参照下述合成路径进行合成：

在可选的实施方式中，包括：步骤a中1-溴-3-碘-2-甲基苯和苯硼酸的摩尔比为1:1-2，采用的催化剂为钯类催化剂，温度为80-100℃，时间为8-12小时；

步骤b的条件包括：采用的催化剂为钯类催化剂，温度为70-90℃，时间为10-16小时；

步骤c的条件包括：采用的催化剂为钯类催化剂，温度为80-100℃，时间为8-12小时；

步骤d的步骤包括：温度为20-30℃，时间为12小时以上。

第三方面，本发明提供一种PD-1/PD-L1抑制剂，其包括前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药。

第四方面，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药在制备PD-1/PD-L1抑制剂中的应用。

第五方面，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明具有以下有益效果：本发明实施例提供的三联苯类化合物对PD-1/PD-L1有良好的抑制效果，可以作为PD-1/PD-1小分子抑制剂，继而起到治疗肿瘤的效果。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本发明实施例提供三联苯类化合物，其包括式1所示化合物：

具体地，R

取代仲胺基团选自

具体地，三联苯类化合物选自下述结构式所示化合物中的任意一种：

进一步地，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物的制备方法，制备方法包括：以1-溴-3-碘-2-甲基苯和苯硼酸为起始原料经过3步Suzuki-Miyaura偶联反应得到关键中间体4；中间体4与相应胺经席夫碱反应，最后还原得到目标产物。

具体参照下述合成路径进行合成：

合成路线中的试剂和条件：(a)苯硼酸，Pd(PPh

第三方面，本发明提供一种PD-1/PD-L1抑制剂，其包括前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药。

第四方面，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药在制备PD-1/PD-L1抑制剂中的应用。

第五方面，本发明提供一种前述实施方式所述的三联苯类化合物、其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化合物或者前药在制备抗肿瘤药物中的应用。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本发明实施例提供一种三联苯类化合物，其结构式如下所示：

本实施例还提供该三联苯类化合物的合成方法，包括：

(1)3-溴-2-甲基-1,1’-联苯的合成

将1-溴-3-碘-2-甲基苯(1.18g，4.0mmol)、苯硼酸(0.59g，4.8mmol)和四三苯基膦钯(0.23g，0.2mmol)溶于30ml甲苯和水(体积比2：1)混合溶液中，然后在混合物中加入碳酸钾(1.1g，8.0mmol)，在氮气环境下，90℃反应9h，TLC检测反应完成。将反应液用乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机相后，依次用5ml水、饱和食盐水5ml分别洗涤2次，然后用无水Na

产物表征数据如下：

(2)4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-[1,1’-联苯]-3-基)-1,3,2-二氧硼烷的合成

将3-溴-2-甲基-1,1’-联苯(0.82g，3.33mmol)、联硼酸频哪醇酯(1.0g，4.0mmol)和1,1’-双(二-叔丁基膦酯)二茂铁二氯合钯(0.1g，0.167mmol)溶于15ml DMSO溶液中，然后加入乙酸钾(0.962g，9.8mmol)，在氮气环境下80℃反应12h，TLC检测反应完成。将反应液用乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机相后，依次用5ml水、饱和食盐水5ml洗涤二次，然后用无水Na

产物表征数据如下：

(3)3-氯-2’-甲基-[1,1’:3’,1”-三苯基]-4-甲醛的合成

将4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-[1,1’-联苯]-3-基)-1,3,2-二氧硼烷(0.645g2.19mmol)、4-溴-2-氯苯甲醛(0.41g，1.9mmol)和四三苯基膦钯(0.11g，0.095mmol)溶于30ml甲苯和水(体积比2：1)混合溶液中，然后在混合物中加入碳酸钾(0.656g，4.75mmol)，在氮气环境下，90℃反应12h，TLC检测反应完成。将反应液用乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机相后，依次用5ml水、饱和食盐水5ml分别洗涤2次，然后用无水Na

产物表征数据如下：

(4)N-(2-(((3-氯-2’-甲基-[1,1’:3’,1”-三苯]-4-基)甲基)氨基)乙基)乙酰胺的合成

将3-氯-2’-甲基-[1,1’:3’,1”-三苯基]-4-甲醛(0.34g，1.1mmol)、N-乙酰基乙二胺(0.135g，1.32mmol)溶于10ml二氯甲烷和甲醇(体积比1:1)混合溶液中，然后加入0.07ml冰醋酸。室温反应2h后，加入腈基硼氢化钠(0.242，3.85mmol)，反应常温搅拌过夜，TLC检测反应完成。减压蒸馏出去溶剂，得到的残留物经硅胶柱纯化，得到白色固体0.33g，产率76.6％。

产物表征数据如下：

实施例2-6

参照实施例1的合成方法合成对应的三联苯类化合物，，制备得到的三联苯类化合物的结构以及表征数据具体如下：

实施例2：

实施例3：

实施例4：

实施例5：

实施例6：

检测例1

对下述化合物进行Autodock Vina分子对接实验，检测下述化合物与PD-L1蛋白之间的结合能，结果参见表1。

表1

根据表1可知，更改本发明实施例化合物提供的基团，其结合能力降低，不能进行良好的结合，继而无法有效抑制PD-1/PD-L1结合。

检测例2

1、化合物对PD-1/PD-L1抑制活性测试

所述部分化合物的体内抗肿瘤活性测试采用均相时间分辨荧光法(HomogeneousTime-Resolved Fluorescence,HTRF)。利用Cisbio公司开发的HTRF PD-1/PD-L1bindingassay kit试剂盒，按照说明书操作，对本发明实施例提供的三联苯衍生物测试对PD-1/PD-L1的抑制效果。

实验过程：在96孔板中，每孔加入2μl稀释液或者用稀释液稀释的目标化合物，然后每孔再加入4μl PD-1蛋白和4μl PD-L1蛋白，常温孵育15min后，再向每孔加入10μlanti-Tag1-Eu

表2化合物对PD-1/PD-L1的抑制活性

根据表2可知，采用HTRF技术，根据标准操作程序测定本发明实施例提供的三联苯衍生物对PD-1/PD-L1的抑制效果，以化合物BMS202为参照，结果显示本发明实施例1-6提供的三联苯衍生物对PD-1/PD-L1均具有明显的抑制作用。本发明实施例提供的化合物可用于治疗免疫类疾病，诸如肝炎、HIV和肿瘤。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。