清洁组合物，其制造方法和使用

本申请是申请号为2017800549025(国际申请号为：PCT/US2017/050337)，申请日为2017年9月6日，发明名称为“清洁组合物，其制造方法和使用”的发明专利申请的分案申请。

本申请要求于2016年9月8日提交的顺序号为62/495,274的美国临时申请和2017年9月6日提交的顺序号为15/696,480的美国申请的优先权。其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本申请大体上涉及一种清洁组合物和方法，并且具体地，涉及用于清理表面，例如从公共区域消毒或去除生物危害物质的清洁组合物和方法。

背景技术

通常，在一段时间内，在各行业(包括制药和医疗行业)中，已经使用不同类型的消毒剂作为加热消毒、辐射消毒或其他不太理想的技术的替代品。消毒剂提供了消除潜在有害病菌、病毒、真菌和细菌的更安全，更经济和/或方便的手段。然而，化学消毒剂的固有强度有时导致有效性和成本超过安全性。因此，关于所使用的化学消毒剂的性质，使用者必须非常小心，并且对所有化学消毒剂组合物都有严格的指南。

发明内容

本申请的一个方面涉及配制清洁组合物的方法，包括以下步骤：用涂布剂涂布颗粒状吸收性材料以制备涂布的吸收性材料；将所述涂布的吸收性材料与卫生剂混合，其中所述涂布的吸收性材料吸收所述卫生剂以形成清洁组合物。

本申请的另一方面涉及一种清洁组合物，其包含涂布有杀生物剂的颗粒状吸收性材料；和在所述颗粒状吸收性材料中吸收的卫生剂。

本申请的另一方面涉及一种用于预防和/或净化表面免于病原体的方法，包括：在所述表面上施加有效量的清洁组合物，其中所述清洁组合物包含涂布有杀生物剂的颗粒状吸收性材料；和在所述颗粒状吸收性材料中吸收的卫生剂。在一个实施方式中，所述病原体是病毒或细菌。

此外，本申请的另一方面涉及一种卫生方法，包括以下步骤：将有效量的清洁组合物施加到需要卫生的表面，所述清洁组合物包含涂布有杀生物剂的颗粒状吸收性材料；和在所述颗粒状吸收性材料中吸收的卫生剂；并在一段时间后除去所述清洁组合物。

本申请的另一方面涉及清洁组件，其包括清洁组合物，所述清洁组合物包含涂布有杀生物剂的颗粒状吸收性材料；和在所述颗粒状吸收性材料中吸收的卫生剂到需要卫生的表面，以及如何使用该清洁组合物的说明书。

本申请的另一个方面是无毒生物静态膜在高表面积固体(例如颗粒状吸收性材料)上的专门涂布方法。

当结合附图和权利要求考虑时，参考以下详细描述，将更好地理解本申请的这些和其他方面和实施方式。

具体实施方式

结合示例性实施方式描述了本申请的各方面，包括方法、材料和实施例，这些描述是非限制性的，并且本申请的范围旨在涵盖所有等同物、替代物和修改，它们或通常已知，或纳入本文。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本领域技术人员将认识到与本文描述的技术和材料类似或等同的许多技术和材料，其可以用于本申请的方面和实施方式的实践中。所描述的本申请的方面和实施方式不限于所描述的方法和材料。

如在本说明书和所附权利要求中所使用的，单数形式“一”、“一个”和“所述”包括复数指代物，除非内容另有明确说明。

范围在本文中可以表示为从“约”一个特定值，和/或到“约”另一个特定值。当表达这样的范围时，另一个实施方式包括从一个特定值和/或到另一个特定值。类似地，当通过使用先行词“约”将值表示为近似值时，应理解该特定值形成另一实施方式。还应理解，每个范围的端点相对于另一个端点且独立于另一个端点都是重要的。还应理解，本文公开了许多值，并且除了值本身之外，每个值在本文中也被公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则还公开了“约10”。还应理解，当公开值“小于或等于”该值时，“大于或等于该值”和值之间的可能范围也被公开，如本领域技术人员适当理解的那样。例如，如果公开值“10”，则还公开了“小于或等于10”以及“大于或等于10”。

本申请描述了一种新颖、有效且低成本的清洁组合物，其可在医院、紧急护理设施、医疗室、疗养院、监狱、学校和酒店业中用于快速和安全地清理表面的生物危害泄漏物(呕吐物/尿液/血液和粪便)。该方法和制剂也非常适用于这些环境中常见的、高度危险泄露物，例如化疗药物的泄露物。

制造方法

本申请的一个方面涉及制造清洁组合物的方法。该方法包括以下步骤：用涂布剂涂布颗粒状吸收性材料，以制备涂布的吸收性材料；将所述涂布的吸收性材料与卫生剂混合，其中所述涂布的吸收性材料吸收所述卫生剂以形成涂布的和吸收的吸收性材料。在一些实施方式中，该方法还包括研磨吸收性材料以制备在涂布步骤中使用的颗粒状吸收性材料的步骤。在其它实施方式中，该方法还包括以足以实现所需的物理特性(例如，无尘和团块，易于拾取，液体负载能力，等等)的量，将一种或多种改性剂添加到涂布的和吸收的吸收性材料中的步骤。

所述清洁组合物可用于根除，消除，灭活，抑制表面上病原体的活性或减少其数量。所述清洁组合物尤其用于清理生物危害泄露物，例如医院、紧急护理设施、医疗室、疗养院、监狱、学校和酒店业中的呕吐物、尿液、血液和粪便。本申请的清洁组合物还理想地适用于清理这些环境中常见的，高度危险的泄露物，例如化疗药物的泄露物。

颗粒状吸收性材料

颗粒状吸收性材料可以是具有所需表面积、造粒和吸收特性的任何固体材料。如本文所用，术语“吸收剂”或“吸附剂”应理解为意指能够吸取并保持含水流体的材料。合适的颗粒状吸收性材料包括但不限于膨胀和优化的陶瓷矿物，例如珍珠岩和蛭石、沸石、活性炭、纤维素吸收剂和纤维吸收剂。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包括活性炭、气相氧化硅(fumed silica)、细珍珠岩、沸石、加工粘土或其组合。吸附剂/吸收剂将表现出结块或铺垫特性(matting characteristics)，以获得最佳性能并且可以很好地除尘。颗粒状吸收性材料优选具有表面积/质量比或表面积/体积比。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比在下述范围内：100-10,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比高达10,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比为100m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比为1000-6,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包含陶瓷矿物。

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包含珍珠岩和/或蛭石。

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比为下述范围：100-5,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比高达5,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比为100m

如本文所用，术语“陶瓷(ceramics)”可指具有一般硬度、压缩强度、弹性模量、热膨胀和密度的非金属元素的混合物。示例性陶瓷包括但不限于用于陶瓷器皿(pottery)、砖、瓦、水泥和玻璃的材料，钛酸钡，钛酸锶，铋锶钙铜氧化物，氧化硼，氮化硼，陶器，铁氧体，锆钛酸铅，二硼化镁，瓷(porcelain)，赛纶陶瓷(sialon)，碳化硅，氮化硅，块滑石，碳化钛，氧化铀，钇钡铜氧化物，氧化锌，二氧化锆和部分稳定的氧化锆。陶瓷可以是氧化物(氧化铝、氧化铍、氧化铈、氧化锆)、非氧化物(碳化物、硼化物、氮化物、硅化物)或复合材料(氧化物和非氧化物的组合)。

珍珠岩是天然存在形式的黑曜石，其特征在于通过火山玻璃在冷却过程中裂化形成的球晶。珍珠岩通常包含二氧化硅、氧化铝、氧化钠、氧化钾、氧化铁、氧化镁和氧化钙的混合物。珍珠岩的潜在替代物包括但不限于硅藻土、膨胀粘土、页岩、浮石、矿渣或蛭石。蛭石是天然存在的含水页硅酸盐材料，其为2:1粘土。

如本文所用，术语“沸石”可指包含钠、钾、钙和钡的水合硅铝酸盐的大量矿物中的任何一种。沸石可以天然存在，也可以人工合成。示例性沸石包括但不限于方沸石、菱沸石、斜发沸石、片沸石、钠沸石、钙十字沸石和辉沸石。

如本文所用，术语“活性炭”可指加工成具有小的低体积孔的碳形式，这些小的低体积孔增加可用于吸附或化学反应的表面积。活性炭(active carbon)的同义词是“活化木炭(activated charcoal)”。

如本文所用，术语“纤维素吸收剂”可指纤维素和纤维素衍生物，其可在宽尺寸范围内提供结构、体积、保水能力和流体通道。

如本文所用，术语“纤维吸收剂”是指具有高空隙体积、亲水性质和湿回弹性的纤维结构。纤维吸收剂的实例包括但不限于基于棉纤维的吸收剂、基于谷物纤维的吸收剂和基于大麻的吸收剂。

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占最终产品的10-70％(w/w)，10-60％(w/w)，10-50％(w/w)，10-40％(w/w)，10-30％(w/w)，10-20％(w/w)，20-70％(w/w)，20-60％(w/w)，20-50％(w/w)，20-40％(w/w)，20-30％(w/w)，30-70％(w/w)，30-60％(w/w)，30-50％(w/w)，30-40％(w/w)，40-70％(w/w)，40-60％(w/w)，40-50％(w/w)，50-70％(w/w)，50-70％(w/w)或60-70％(w/w)。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占最终产品的25-30％(w/w)。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占最终产品的约27％(w/w)。

涂布剂

涂布剂可以是能够在本申请的颗粒状吸收性材料的表面上形成涂层的任何杀生物剂。在一些实施方式中，所述涂布剂含有选自硅烷、硅氧烷、氨基丙基三甲氧基硅烷、季胺、气相金属氢氧化物(fumed metal hydroxide)、银溶液、铜溶液的一种或多种试剂及其组合。

在一些实施方式中，涂布剂是杀生物剂，其在颗粒状吸收性材料上形成表面结合的膜。静态表面结合的杀生物剂膜长期灭活或抑制与本发明的清洁组合物接触的病原体，因此长期保证清洁效果的有效性。在一些实施方式中，通过气相沉积将涂布剂施加到颗粒状吸收性材料上。在一些实施方式中，通过热加热涂布剂和颗粒状吸收剂进行气相沉积。

在一些实施方式中，通过压力微滴喷雾将涂布剂施加到颗粒状吸收性材料上。

在一些实施方式中，通过发烟或雾化喷嘴将涂布剂施加到颗粒状吸收性材料上。

在一些实施方式中，通过常用于金属电镀的沉积技术将涂布剂施加到颗粒状吸收性材料上。

如本文所用，术语“杀生物剂”是指破坏，灭活，消除，阻止，抑制病原体或微生物的生长或以其他方式使其无害和/或防止其破坏或感染的任何材料。杀生物剂的实例包括但不限于硅烷、硅氧烷、氨基丙基三甲氧基硅烷、季胺、气相金属氢氧化物、银及其盐或溶液、铜及其盐或溶液、甲醛；溴硝丙二醇；氯甲酚；过乙酸；对氯甲酚；联苯-2-醇；六-2,4-二烯酸/坏血酸(scorbutic acid)；戊二醛；氯苄酚(clorofen)；2-苯氧基乙醇；西吡氯铵；氯胺T钠；邻苯基苯酚钠；苯二醛；N-(3-氨基丙基)-N-十二烷基丙烷-1,3-二胺；曲氯新钠；二氯异氰尿酸钠二水合物；二癸基二甲基氯化铵；碘；次氯酸钠；过氧化氢；次氯酸钙；氯化银；木质素；2,2-二溴-2-氰基乙酰胺；对氯间甲酚钠；具有N,N”-双(4-氯苯基)-3,12-二亚氨基-2,4,11,13-四氮杂十四烷二脒的d-葡萄糖酸混合物(2:1)；(E,E)-己-2,4-二烯酸钾；季铵化合物，苄基-C12-18-烷基二甲基-氯化物；苄基-C12-16-烷基二甲基-氯化物；二-C8-10-烷基二甲基-氯化物；双(过氧单硫酸)-双(硫酸)五钾；苄基-C12-14-烷基二甲基-氯化物；C12-14-烷基[(乙基苯基)甲基]二甲基-氯化物；[2-[[2-[(2-羧乙基)(2-羟乙基)-氨基]乙基]氨基]-2-氧代乙基]-椰油烷基二甲基氢氧化物，内盐；来自以下物质的反应产物：谷氨酸和N-(C12-14-烷基)-丙二胺；6-(邻苯二甲酰亚氨基)过氧己酸；磷酸银钠氢锆；聚(六亚甲基二胺胍氯化物)；聚六亚甲基双胍；低聚(2-(2-乙氧基)乙氧基乙基胍氯化物)聚合物；胺，n-C10-16-烷基三亚甲基二-，来自氯乙酸的反应产物；季铵碘化物；苄基烷基二甲基(C8-C22的烷基，饱和和不饱和的，以及牛脂烷基、椰油烷基和大豆烷基)，氯化物，溴化物或氢氧化物)/BKC；二烷基二甲基(C6-C18的烷基，饱和和不饱和的，以及牛脂烷基、椰油烷基和大豆烷基)氯化物，溴化物或甲基硫酸盐)/DDAC；2-丁酮，过氧化物；硼酸；八硼酸二钠四水合物；三氯生；茶树(melaleuca alternifolia)，提取物/澳大利亚茶树油；二氧化硫；亚硫酸氢钠；二亚硫酸二钠；亚硫酸钠；亚硫酸钾；二亚硫酸二钾；1-[[2-(2,4-二-氯苯基)-4-丙基-1,3-二氧戊环-2-基]甲基]-1H-1,2,4-三唑/丙环唑；三氯卡班；十二烷基胍一盐酸盐；银锌铝硼磷酸盐玻璃/玻璃氧化物，含银和锌的；硅酸铝钠银锌络合物/银锌沸石植物保护剂；苯甲酸钠；四硼酸二钠，无水的；顺式和反式对-薄荷烷-3,8-二醇/对薄荷基-3,8-二醇(citriodiol)的混合物；乙硫酸美西铵；胺，C10-16-烷基二甲基-，N-氧化物；二六-2,4-二烯酸钙；碳酸氢钠；苯扎氯铵；苄索氯铵；替溴铵；聚乙烯吡咯烷酮-碘；硝酸银；N,N'-(癸-1,10-二基二-1(4H)-吡啶基-4-亚基)双(辛基铵)二氯化物；2,4,8,10-四(叔丁基)-6-羟基-12H-二苯并[d,g][1,3,2]二氧磷杂环辛-6-氧化物，钠盐。

如本文所用，术语“硅烷”是指在硅上具有四个取代基的化合物，包括有机硅化合物。示例性的硅烷包括但不限于三氯硅烷(SiHCl

如本文所用，术语“硅氧烷”是指在有机硅化学中含有具有Si-O-Ai连接的官能团的化合物。示例性的硅氧烷包括但不限于聚二甲基硅氧烷或环甲硅油。

如本文所用，术语“病原体”包括但不限于病毒、细菌、酵母、原生动物或其他病原微生物。下面描述通过施用本申请的清洁组合物可以消除，杀死，灭活或抑制的病原体的定义和描述。普通技术人员将理解，本文描述的病原体是非限制性的。在一些实施方式中，本申请的杀生物剂和/或清洁组合物可以针对诸如诺如病毒、HIV、MRSA、艰难梭菌(C.Diff.)、肝炎病毒、埃博拉(ebola)、多种GI相关病毒或靶向生物恐怖剂等关键病原体家族，除其他，其定义和描述如下。

病毒的实例包括但不限于流感病毒、疱疹病毒、脊髓灰质炎病毒、诺如病毒、胃肠道相关(GI相关)病毒和逆转录病毒。病毒的实例包括但不限于人免疫缺陷病毒1型和2型(HIV-1和HIV-2)、人T细胞嗜淋巴细胞病毒I型和II型(HTLV-I和HTLV-II)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)、戊型肝炎病毒(HEV)、庚型肝炎病毒(HGV)、细小病毒B19病毒、输血传播病毒(TTV)、Epstein-Barr病毒、人巨细胞病毒1型(HCMV-1)、人疱疹病毒6型(HHV-6)、人疱疹病毒7型(HHV-7)、人疱疹病毒8型(HHV-8)、甲型流感病毒(包括亚型H1N1和H5N1)、乙型流感病毒、人间质肺病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒、汉他病毒，以及来自以下病毒的RNA病毒：沙粒病毒科(如拉沙热病毒(LFV))，肺病毒科(如人类偏肺病毒)，丝状病毒科(例如，埃博拉病毒(EBOV)、马尔堡病毒(MBGV)和寨卡病毒)；布尼亚病毒科(例如，裂谷热病毒(RVFV)、克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)和汉他病毒)；黄病毒科(西尼罗河病毒(WNV)、登革热病毒(DENV)、黄热病病毒(YFV)、GB病毒C(GBV-C；以前称为庚型肝炎病毒(HGV))；轮状病毒科(如轮状病毒)，人类T细胞嗜淋巴细胞病毒(HTLV)I型和II型(HTLV-I和HTLV-II)，细小病毒B19病毒，输血传播病毒(TTV)；麻疹病毒；轮状病毒，包括A、B、C、D和E型；人乳头瘤病毒(HPV)及其多种血清型；以及其他各种RNA病毒。

引起人和动物胃肠炎的微生物的实例包括病毒、细菌、寄生虫和真菌。病毒引起约7％的感染性腹泻。引起胃肠炎的病毒感染可归因于轮状病毒、腺病毒、诺如病毒、星状病毒和冠状病毒。导致胃肠炎的细菌感染可由弯曲杆菌属(Campylobacter)、大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shigella)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和梭菌属(Clostridum)菌种引起。导致胃肠炎的原生动物感染可能是贾第虫属(Giardia)、内阿米巴属(Entamoeba)和隐孢子虫属(Cryptosporidium)物种的结果。

如本文所用，术语“细菌”应指具有细胞壁但缺乏细胞器和有组织的细胞核的大量单细胞微生物的成员。细菌的同义词包括术语“微生物(microorganisms)”、“微生物(microbes)”、“病菌(germs)”、“杆菌”、“病原体”和“原核生物”。示例性的细菌包括但不限于分枝杆菌属菌种(Mycobacterium species)，包括结核分枝杆菌(M.tuberculosis)；金黄色葡萄球菌属菌种(Staphylococcus species)，包括表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantS.aureus)；链球菌属菌种(Streptococcus species)，包括肺炎链球菌(S.pneumoniae)、化脓性链球菌(S.pyogenes)、变形链球菌(S.mutans)、无乳链球菌(S.agalactiae)、马链球菌(S.equi)、犬链球菌(S.canis)、牛链球菌(S.bovis)、马肠链球菌(S.equinus)、咽峡炎链球菌(S.anginosus)、血链球菌(S.sanguis)、唾液链球菌(S.salivarius)、缓症链球菌(S.mitis)；其他致病性链球菌属菌种，包括肠球菌属菌种(Enterococcus species)，如粪肠球菌(E.faecalis)和屎肠球菌(E.faecium)；流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)，假单胞菌属菌种(Pseudomonas species)，包括铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、类鼻疽假单胞菌(P.pseudomallei)和鼻疽假单胞菌(P.mallei)；沙门氏菌属菌种(Salmonellaspecies)，包括小肠结肠炎沙门氏菌(S.enterocolitis)、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)、邦戈沙门氏菌(S.bongori)和猪霍乱沙门氏菌(S.choleraesuis)；志贺氏菌属菌种(Shigella species)，包括福氏志贺菌(S.flexneri)、宋内氏志贺菌(S.sonnei)、痢疾志贺菌(S.dysenteriae)和鲍氏志贺菌(S.boydii)；布鲁氏菌属菌种(Brucella species)，包括羊布鲁菌(B.melitensis)、猪布鲁菌(B.suis)、牛布鲁菌(B.abortus)和百日咳布鲁菌(B.pertussis)；奈瑟菌属菌种(Neisseria species)，包括脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)和淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae)；大肠杆菌(Escherichia coli)，包括产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli)(ETEC)；霍乱弧菌(Vibrio cholerae)，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)，沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)，艰难梭菌(Clostridiumdifficile)，新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)，莫拉氏菌属菌种(Moraxellaspecies)，包括粘膜炎莫拉氏菌(M.catarrhalis)，弯曲杆菌属菌种(Campylobacterspecies)，包括空肠弯曲杆菌(C.jejuni)；棒状杆菌属菌种(Corynebacterium species)，包括白喉棒状杆菌(C.diphtheriae)、溃疡棒状杆菌(C.ulcerans)、假结核棒状杆菌(C.pseudotuberculosis)、假白喉棒状杆菌(C.pseudodiphtheriticum)、解脲嗜血杆菌(C.urealyticum)、溶血性梭状芽胞杆菌(C.hemolyticum)、马棒状杆菌(C.equi)；单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)，星形土壤丝菌(Nocardia asteroides)，拟杆菌属菌种(Bacteroides species)，放线菌菌种(Actinomycetes species)，苍白密螺旋体(Treponema pallidum)，钩端螺旋体菌种(Leptospirosa species)，肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)；变形杆菌属菌种(Proteus sp.)，包括普通变形杆菌(Proteusvulgaris)；沙雷氏菌属菌种(Serratia species)，不动杆菌属(Acinetobacter)，耶尔森氏菌属菌种(Yersinia species)，包括鼠疫杆菌(Y.pestis)和假性结核耶氏菌(Y.pseudotuberculosis)；土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)，肠杆菌属菌种(Enterobacter species)，拟杆菌属菌种(Bacteriodes species)，军团菌属菌种(Legionella species)，伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)等。

如本文所用，术语“MRSA”可指革兰氏阳性细菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。术语MRSA包括通过水平基因转移和自然选择产生的金黄色葡萄球菌的任何菌株，其对β-内酰胺抗生素具有多重耐药性。

如本文所用，术语“C.Diff”是指一种革兰氏阳性孢子形成细菌，称为艰难梭菌(Clostridium difficile)，或C.difficile，或C.diff或有时称为CDF/cdf。艰难梭菌感染(CDI)是由这种细菌引起的症状性感染，其可引起艰难梭菌相关性腹泻或艰难梭菌结肠炎。

如本文所用，术语“真菌”可指腐生和寄生的产生孢子的真核的通常为丝状的生物(原先被分类为缺乏叶绿素的植物)的任何成员，包括霉菌、锈菌、霉菌、禾菌(smut)、蘑菇和酵母菌。示例性真菌包括但不限于曲霉属物种(Aspergillus species)，皮肤真菌(Dermatophytes)，皮炎芽生菌(Blastomyces derinatitidis)，念珠菌属菌种(Candidaspecies)，包括白色念珠菌(C.albicans)和克鲁氏菌(C.krusei)；糠秕马拉色癣菌(Malassezia furfur)，威尼克外瓶霉(Exophiala werneckii)，霍塔氏毛孢子菌(Piedraiahortai)，白吉利毛孢子菌(Trichosporon beigelii)，波氏假阿利什菌(Pseudallescheriaboydii)，耶氏肺孢子虫(Pneumocystis jiroveci)，灰马杜拉分枝菌(Madurella grisea)，荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)，申克孢子丝菌(Sporothrix schenckii)，荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)，癣物种(Tinea species)，包括花斑癣(T.versicolor)、足癣(T.pedis)、甲癣(T.unguium)、股癣(T.cruris)、头癣(T.capitus)、体癣(T.corporis)、须癣(T.barbae)；毛癣菌属菌种(Trichophyton species)，包括红色毛癣菌(T.rubrum)、趾间毛癣菌(T.interdigitale)、断发毛癣菌(T.tonsurans)、紫色毛癣菌(T.violaceum)、赤非毛癣菌(T.yaoundei)、许兰黄癣菌(T.schoenleinii)、麦格尼毛癣菌(T.megninii)、苏丹毛癣菌(T.soudanense)、马毛癣菌(T.equinum)、须癣毛癣菌(T.erinacei)和疣状毛癣菌(T.verrucosum)；生殖支原体(Mycoplasma genitalia)；小孢菌属菌种(Microsporum species)，包括奥杜安小芽孢菌(M.audouini)、M.ferrugineum、犬小芽孢菌(M.canis)、M.nanum、M.distortum、石膏样小芽孢菌(M.gypseum)、M.fulvum等。

如本文所用，术语“原生动物”可指多种真核生物的任何成员，其主要是单细胞的，单独存在或聚集成集落，通常是非光合作用的，并且通常根据它们运动的能力和方式(伪足、鞭毛或纤毛)进一步分类为门。示例性原生动物包括但不限于疟原虫属物种(Plasmodium species)，包括恶性疟原虫(P.falciparum)、间日疟原虫(P.vivax)、卵形疟原虫(P.ovale)和

如本文所用，术语“靶向生物恐怖剂”包括但不限于炭疽(炭疽芽孢杆菌(Bacillusanthracis))、肉毒中毒(肉毒杆菌毒素(Clostridium botulinum toxin))、鼠疫(鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis))、天花(天花病毒(Variola virus))、土拉菌病(土拉热弗朗西斯菌(Franciscella tularensis))和病毒性出血热(沙粒病毒(arenaviruses)、布尼亚病毒(bunyaviruses)、丝状病毒(filoviruses)和沙粒病毒(arenaviruses))，或其他CDC A类试剂。布鲁氏菌属菌种(Brucella species)，产气荚膜梭菌(Clostrodium perfringens)，沙门氏菌属菌种(Salmonella species)，大肠杆菌(Escherichia coli)和志贺氏菌属菌种(Shigella species)，鼻疽假单胞菌(Burkholderia mallei)，类鼻疽假单胞菌(Burkholderia pseudomallei)，鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci)，伯纳特科克斯氏体(Coxiella brunetii)，蓖麻(Ricinus communis)，普氏立克次体(Rickettsiaprowazekii)，霍乱弧菌(Vibrio cholera)和隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)，以及甲病毒(alphaviruses)，如委内瑞拉马脑炎(Venezuelan equine encephalitis)、东部马脑炎(eastern equine encephalitis)、西部马脑炎(western equine encephalitis)病毒和其他CDC B类试剂。新出现的传染病传染因子，如尼帕病毒(Nipah virus)、汉坦病毒(hantavirus)和其他CDC C类试剂。

在一些实施方式中，涂布剂的添加量为最终产品的0.1至10％(w/w)，0.1至5％(w/w)，0.1至2％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.5％(w/w)，0.3至10％(w/w)，0.3至5％(w/w)，0.3至2％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至10％(w/w)，1至5％(w/w)，1至2％(w/w)，3至10％(w/w)或3至5％(w/w)。

在一些实施方式中，涂布剂的添加量为最终产品的0.5至3.5％(w/w)或1至3％(w/w)。在一些实施方式中，涂布剂的添加量为最终产品的约2％(w/w)。

卫生剂

卫生剂可以是具有杀生物剂活性的任何试剂，并且可以被本申请的涂布的颗粒状吸收剂吸收。卫生剂包含活性物质，其设计为破坏，抑制有害生物或有毒化学物质，降低其活性，抑制其生长或以其他方式使其无害。在一些实施方式中，卫生剂是液相试剂。在一些实施方式中，卫生剂是液相杀生物剂。在一些实施方式中，卫生剂是液相化学品，其灭活或除去有毒化学物质，例如化疗药物。在一些实施方式中，在施用部位添加液相杀生物剂以提供化学消毒以便立即响应。

液相杀生物剂的实例包括但不限于氯漂白溶液、过氧化氢溶液、过乙酸、季胺溶液、醇溶液、periodine溶液，二甲基苄基氯化铵、二甲基乙基苄基氯化铵及其混合物。

可用于灭活或除去有毒化学品的液相化学品的实例包括但不限于阴离子表面活性剂，例如皂、磺酸盐和硫酸盐。在一些实施方式中，使用大量水来稀释有毒化学品。

在一些实施方式中，卫生剂的添加量为最终产物的0.1至10％(w/w)，0.1至3％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.3％(w/w)，0.3至10％(w/w)，0.3至3％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至10％(w/w)，1至3％(w/w)或3至10％(w/w)。

在一些实施方式中，卫生剂包含二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵。在一些实施方式中，卫生剂包含二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵的混合物。在一些实施方式中，卫生剂是二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵的1:1混合物。

在一些实施方式中，卫生剂是季胺，并且其添加量占最终产品的0.3至3％(w/w)，0.5至2％(w/w)或0.5至1.5％(w/w)。在一些实施方式中，卫生剂是季胺，并且其添加量占最终产品的约1％(w/w)。

改性剂

在最终产品中，将改性剂以达到所需的物理特性(例如，无尘和团块，易于拾取，液体负载能力等)的量加入到涂布的颗粒状吸收剂或吸收的和涂布的颗粒状吸收剂中。改性剂的实例包括但不限于增稠剂、胶(gum)、吸收性聚合物、增粘剂及其组合。

如本文所用，术语“增稠剂”可包括已知或以其他方式有效地为组合物提供悬浮、胶凝、增粘、固化或增稠性质的任何材料，或者以其他方式提供最终产品形式的结构。这些增稠剂可包括胶凝剂、聚合或非聚合试剂、无机增稠剂或增粘剂。增稠剂的量和类型可以根据最终产品的所需特性而变化。

如本文所用，术语“增粘剂”是指聚合物粘合剂，其增加组合物的粘性，即固有的粘性或自粘性，使得在短时间轻轻的压力下它们牢固地粘附到表面上。合适的增粘剂的实例包括高柔韧性树脂，例如但不限于(甲基)丙烯酸烷基酯(尤其是丙烯酸烷基酯)的均聚物，例如聚(丙烯酸异丁酯)或聚(丙烯酸2-乙基己酯)，如通常用于卷材涂布的线性聚酯，基于聚碳酸酯二醇或聚酯二醇的线性双官能低聚物，其可用光化辐射固化，数均分子量大于2000，特别是3000-4000，线性乙烯基醚均聚物或基于乙基、丙基、异丁基、丁基和/或2-乙基己基乙烯基醚的共聚物，或非反应性氨基甲酸酯脲低聚物(nonreactive urethane ureaoligomer)，其由双(4,4-异氰酸基苯基)甲烷、N,N-二甲基乙醇胺或二醇(如丙二醇、己二醇或二甲基戊二醇)制备。

在一些实施方式中，改性剂包含吸收液体(优选水)，溶胀，并最终转化为粘性真的或胶体溶液的高分子物质。

在一些实施方式中，改性剂包含一种或多种有机硅胶。如本文所用，术语“有机硅胶”是指具有足以提供具有胶状结构的有机硅的聚合度的有机硅聚合物。在某些情况下，形成胶的有机硅聚合物可以是交联的。

在一些实施方式中，改性剂包含聚合物。如本文所用，聚合物的实例包括但不限于天然和合成聚合物，例如聚丙烯酰胺(ACAM)和羧甲基纤维素。

在一些实施方式中，本申请的聚合物包括但不限于聚丙烯酸盐，如聚丙烯酸钠，和羧甲基纤维素。

在一些实施方式中，改性剂包含一种或多种超吸收性聚合物。术语“超吸收性聚合物”应理解为是指亲水性聚合物结构，其能够以大于10g纯水/盐水/克干基材料(>10g/g)吸收水或盐水溶液。超吸收性聚合物的实例包括但不限于聚丙烯酸钠和羧甲基纤维素。

在一些实施方式中，一种或多种改性剂还包含一种或多种选自包括变性剂、着色剂、气味校正剂和/或pH调节剂的群组的添加剂。

在一些实施方式中，一种或多种改性剂的添加量占最终产物的0.1至5％(w/w)，0.1至2％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.3％(w/w)，0.3至5％(w/w)，0.3至2％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至5％(w/w)，1至2％(w/w)或2至5％(w/w)。

清洁组合物

本申请的另一方面涉及清洁组合物。清洁组合物含有涂布有涂布剂的颗粒状吸收性材料。上面已经描述了涂布剂的实例。在一些实施方式中，涂布剂含有杀生物剂。在一些实施方式中，杀生物剂包括选自硅烷、硅氧烷、氨基丙基三甲氧基硅烷、季胺、气相金属氢氧化物、银和银盐、铜和铜盐的试剂。在一些实施方式中，杀生物剂在颗粒状吸收性材料的表面上形成静态膜。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包括活性炭、气相氧化硅、细珍珠岩、沸石、加工粘土或其组合。在一些实施方式中，涂布剂占清洁组合物的0.1至5％(w/w)，0.1至2％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.3％(w/w)，0.3至5％(w/w)，0.3至2％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至5％(w/w)，1至2％(w/w)或2至5％(w/w)。

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包括陶瓷矿物。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料包括珍珠岩和/或蛭石。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比在下述范围内：100-10,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比高达10,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比为100m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/质量比在1000-6,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比在下述范围内：100-5,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比高达5,000m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料的表面积/体积比为100m

在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占清洁组合物的10-70％(w/w)，10-60％(w/w)，10-50％(w/w)，10-40％(w/w)，10-30％(w/w)，10-20％(w/w)，20-70％(w/w)，20-60％(w/w)，20-50％(w/w)，20-40％(w/w)，20-30％(w/w)，30-70％(w/w)，30-60％(w/w)，30-50％(w/w)，30-40％(w/w)，40-70％(w/w)，40-60％(w/w)，40-50％(w/w)，50-70％(w/w)，50-70％(w/w)或60-70％(w/w)。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占最终产品的25-30％(w/w)。在一些实施方式中，颗粒状吸收性材料占清洁组合物的约27％(w/w)。

在一些实施方式中，清洁组合物还包含在涂布的颗粒状吸收性材料中吸收的卫生剂。上面已经描述了卫生剂的实例。

在一些实施方式中，卫生剂包含活性物质，其设计用于破坏，抑制有害生物或有毒化学物质，降低其活性，抑制其生长或以其他方式使其无害。在一些实施方式中，卫生剂是液相剂。在一些实施方式中，卫生剂是液相杀生物剂。在一些实施方式中，卫生剂是液相化学品，其灭活有毒化学品，例如化疗药物。

液相杀生物剂的实例包括但不限于氯漂白溶液、过氧化氢溶液、过乙酸、季胺溶液、periodine、醇溶液、二甲基苄基氯化铵、二甲基乙基苄基氯化铵及其混合物。

可用于灭活或除去有毒化学品的液相化学品的实例包括但不限于阴离子表面活性剂，例如皂、磺酸盐和硫酸盐。在一些实施方式中，使用大量水来稀释有毒化学品。

在一些实施方式中，卫生剂占清洁组合物的0.1至10％(w/w)，0.1至3％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.3％(w/w)，0.3至10％(w/w)，0.3至3％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至10％(w/w)，1至3％(w/w)或3至10％(w/w)。

在一些实施方式中，卫生剂包含二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵。在一些实施方式中，卫生剂包含二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵的混合物。在一些实施方式中，卫生剂是二甲基苄基氯化铵或二甲基乙基苄基氯化铵的1:1混合物。

在一些实施方式中，清洁组合物还包含一种或多种改性剂。上面已经描述了卫生剂的实例。在一些实施方式中，改性剂包括增稠剂、增粘剂、胶、吸收性聚合物或其组合。在一些实施方式中，一种或多种改性剂包含羧甲基纤维素(CMC)衍生的聚合物和/或分级多孔碳(HPC)衍生的聚合物。

在一些实施方式中，一种或多种改性剂还包含一种或多种选自包括变性剂、着色剂、气味校正剂和/或pH调节剂的群组的添加剂。

在一些实施方式中，一种或多种改性剂占清洁组合物的0.1至5％(w/w)，0.1至2％(w/w)，0.1至1％(w/w)，0.1至0.3％(w/w)，0.3至5％(w/w)，0.3至2％(w/w)，0.3至1％(w/w)，1至5％(w/w)，1至2％(w/w)或2至5％(w/w)。

在一些实施方式中，清洁组合物的液体负载能力在下列范围内：10-50体积％，15-45体积％，20-40体积％，25-35体积％或25-30体积％。在其他实施方式中，清洁组合物的液体负载能力为100-400质量增加％，150-350质量增加％或200-300质量增加％。在一些实施方式中，本申请的清洁组合物能够以25-30体积％或200-300质量增加％吸收液体。

使用方法

本申请的另一方面涉及使用本申请的清洁组合物的方法。该方法包括以下步骤：将有效量的本申请的清洁组合物施加到需要清洁的表面上，并在一定时间段后除去清洁组合物。

在一些实施方式中，所述时间段为30秒至30分钟。在一些实施方式中，所述时间段为1至30分钟，1至20分钟，1至10分钟，2至30分钟，2至20分钟，2至10分钟，5至30分钟，5至20分钟以及5至10分钟。

在一些实施方式中，需要清洁的表面包含生物危害泄露物。在一些实施方式中，生物危害泄露物是呕吐物、尿液、血液、粪便和/或化疗药物。在一些实施方式中，需要清洁的表面是公共区域中的表面并且需要进行处理以防止或减少交叉污染或感染。如本文所用，术语“公共区域”包括但不限于医院、医疗室、紧急护理设施、疗养院、监狱和相关校正设施、学校、公共汽车、飞机、机场、酒吧、餐馆、酒店、游乐园、任何大型收容机构设施、兽医设施和药物研发设施。在一些实施例中，公共区域位于酒店中。

在一些实施方式中，所述方法还包括以下步骤：在除去清洁组合物之后，用液体洗涤处理过的表面或用擦拭材料如纸巾或拖把擦拭表面。

本申请的另一方面涉及消毒受影响区域以防止或减少病原体(如病毒和细菌)散布的方法。该方法包括以下步骤：将有效量的本申请的清洁组合物施加到受影响的区域并在一段时间后除去清洁组合物，其中清洁组合物包含涂有静态表面结合的杀生物剂膜的颗粒状吸收性材料，所述杀生物剂选自硅烷、硅氧烷、氨基丙基三甲氧基硅烷、季胺、气相金属氢氧化物、银和银盐、铜和铜盐。在一些实施方式中，清洁组合物还包括选自氯漂白溶液、过氧化氢溶液、过乙酸、季胺溶液和醇溶液的卫生剂。在一些实施方式中，在施用于受影响区域前一刻将卫生剂添加到清洁组合物中。

在一些实施方式中，本申请的清洁组合物是多相产品，其可通过许多不同的机制杀死微生物。在一个实施方式中，该组合物是掺杂的颗粒状陶瓷消毒剂，其将表面积静态消毒剂或杀生物剂涂层与在陶瓷颗粒中吸收的化学相主要消毒剂或杀生物剂组合。如本文所用，术语“消毒剂”描述了本文所述的用于从表面消除病原体的组合物和制剂。如本文所用，术语“消毒”可指消除施用消毒剂的表面上的许多或所有病原体。

在一些实施方式中，本申请的清洁组合物是表面积固相消毒剂，其与超吸收性聚合物结合使得可以增加可用的液体的液体负载量(例如，25-30体积％/200-300质量增加％)从而在受影响的区域上赋予化学消毒，赋予除臭化学品或赋予覆盖效果，以减少微生物扩散到开放的空气中。

在一些实施方式中，本申请的清洁组合物是添加了增粘剂的高表面积固相消毒剂，因此它涂在生物危害物上并形成包被，这大大减少了空气传播的病原体的释放。

通过举例说明本申请的方面的某些实施方式提供以下实施例。这些实施例均不应视为限制本申请的范围。

组件

本申请的另一方面涉及一种清洁组件。所述组件可用于清理危害物质，如呕吐物、尿液、血液、粪便和/或化疗药物的泄露物，或消毒表面。在一些实施方式中，所述组件包含本申请的清洁组合物及关于如何使用所述清洁组合物的说明书。

在一些实施方式中，所述组件还包含职业安全与健康管理局(OSHA)指南的副本。在一些实施方式中，所述组件还包含下列物品中的一个或多个：生物危害物袋、手套、扎带、抗微生物手擦、杀菌擦拭物、铲子/刮刀。

所述清洁组件可以方便地放置在所有护理人员快速到达的位置。例如，所有患者室和化疗室、救生箱&救生车、急救车、自助餐厅、环境服务柜，以及急救箱内或附近等。

实施例1：本申请的清洁组合物的杀病毒效果测试

培养VR-728猫嵌杯样病毒株F-9

材料：CCL-94细胞，具有CCL-94细胞的T-75烧瓶，70％汇合，具有CCL-94细胞的6孔板，70％汇合，EMEM，FBS，VR-728猫嵌杯样病毒株F-9，50ml锥形管，血清移液管，stripette，35℃培养箱，CleanUp。

方法

1.病毒原液＝1:10稀释，1ml病毒+9ml无血清EMEM

2.从所有烧瓶和平板中取出培养基

3.向每个烧瓶和平板中加入无血清培养基和病毒

a.烧瓶1：2ml病毒+8ml培养基

b.烧瓶2：1.5ml病毒+8.5ml培养基

c.平板1：病毒+培养基，所有6个孔中

d.平板2

4.在35℃下孵育1个半小时

5.准备培养基：EMEM+2％FBS并过滤

6.向每个烧瓶中加入15ml培养基

7.向每个平板中的每个孔中加入1ml培养基

收获VR-728猫嵌杯样病毒株F-9

1.将烧瓶1和2以及平板1中的培养基合并

2.将细胞分到10个15ml锥形管，每个含10ml病毒

3.在-80℃下储存

材料：VR-728猫嵌杯样病毒株F-9，EMEM+2％FBS，CleanUp，具有CCL-94细胞的6孔板，70％汇合，烧杯，1.5ml离心管，离心机，35℃培养箱，细胞刮刀，细胞计数器

方法

1.以1:50在EMEM+2％FBS中稀释病毒。

2.测量2组2g，3g，4g，5g，6g CleanUp，并将每组放入单独的烧杯中。一组5分钟，一组10分钟，高压灭菌。

3.将4ml病毒加入6ml清洁粉末中，静置5分钟。

4.从每个烧杯中取出Clean Up。

5.向每个烧杯中加入3ml培养基。

6.重复步骤3-5，持续10分钟。

7.从每个烧杯中取1ml，加入1.5ml离心管中。以2200RPM，4℃下离心4分钟。

8.从含有CCL-94细胞的平板中取出培养基。

9.每孔加入30μl Clean Up和3ml培养基。

10.孵育一个小时。

11.刮去细胞并将培养基置于15ml管中。

12.确定细胞死亡。

平板设置

结果

与未处理的病毒样品相比，用CleanUp处理的病毒样品显示出显著降低的细胞毒性，表明CleanUp激活了病毒。

实施例2：用初始杀病毒有效性测试的本申请的清洁组合物的测试

使用由美国环境保护局(USEPA)的抗微生物部门提供的初始杀病毒有效性测试方案进一步测试本申请的清洁组合物的杀病毒效果。

简而言之，该测试旨在验证即将注册为杀病毒剂的产品所要求的杀病毒有效性。确定测试剂对诺如病毒污染的坚硬无孔表面的消毒潜力。该测试旨在模拟消费者使用，符合EPA指南DIS/TSS-7，1981年11月，并遵循FR通知中概述的用于另一种在线1提供的替代病毒的一般程序和EPA发布的杀病毒测试格式和统计入门(Virucidal Testing Format andStatistics Primer)(2000年3月)。

测试条件：两批测试剂将用于灭活已在无菌玻璃表面上干燥的攻击病毒(每批次(batch)/批(lot)测试剂重复两次)。以与测试剂的使用标签指示一致的方式或由资助人指定的方式测试所述测试剂。

A.测试对照和参考物质：由资助人提供(参见最后一页)除非另有指示，否则将按资助人提供的那样测试测试剂。在开始测试之前，资助人必须说明在测试剂上进行的所有操作，例如测试剂的稀释，测试剂的稀释剂或专门的储存条件。

如适用，必须测试测试剂的身份、强度、纯度、稳定性和均匀性。所有未使用的测试剂将在测试完成后保留一段时间，然后以符合安全主管批准的方式丢弃。

B.材料可包括但不限于：

1.研究的资助人要求的攻击病毒：猫嵌杯样病毒(美国典型培养物保藏中心，马纳萨斯，弗吉尼亚州；ATCC VR-782)。

2.宿主细胞系：Crandel Reese猫肾(Crandel Reese Feline Kidney，CRFK)细胞(美国典型培养物保藏中心，马纳萨斯，弗吉尼亚州；ATCC CCL-94)。在含有胎牛血清(FBS)的细胞培养基(Eagle氏最低必需培养基(Eagle's Minimum Essential Media)，含有$5％胎牛血清)中培养CRFK细胞。将使用低感染复数(MOI)，通过接种汇合细胞单层，年龄不超过24-48小时，使FCV生长。简而言之，将使用一瓶在含有10％胎牛血清(FBS)的细胞培养基中生长的宿主细胞。将调整原液病毒等分试样中所含的FBS百分比以产生最小5％的有机土壤负荷(organic soil load)。将细胞用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤三次并接种病毒。病毒吸附后，将细胞单层在Eagle氏平衡盐溶液(EBSS)中洗涤一次，重新添加细胞培养基并孵育。致细胞病变效应(CPE)将被描述为小的圆形细胞，具有轻微的颗粒状外观。CPE在接种后1-2天内开始发生，当观察到超过90％的致细胞病变效应(CPE)时收获细胞。孵育后，细胞将被破坏，通过离心除去细胞碎片。将通过从75-100％受感染的培养细胞中收集上清培养液来制备原液病毒。将上清液取出，等分，并储存在超低温冰箱中直至使用当天。在使用当天，取出等分试样，解冻并冷藏直至用于测定。

3.实验室设备和用品，以及

4.培养基和试剂：

a.细胞培养基(含有$5％的胎牛血清的Eagle氏最低必需培养基)

b.Eagle氏平衡盐溶液(EBSS)

c.胎牛血清(FBS)

d.磷酸盐缓冲盐水(PBS)

e.Sephadex

f.中和剂

测试系统识别：所有培养皿、稀释试管架和含有宿主的装置将标有以下信息：病毒、宿主、测试剂和项目编号。

实验设计：

A.接种物准备：猫嵌杯样病毒(FCV)F-9株将获自美国典型培养物保藏中心，马纳萨斯，弗吉尼亚州，(ATCC VR-782)。将使用低感染复数(MOI)，通过接种汇合细胞单层，年龄不超过24-48小时，使FCV生长。简而言之，将使用一瓶在含有10％胎牛血清(FBS)的细胞培养基中生长的宿主细胞。将细胞用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤三次并接种病毒。病毒吸附后，将在Eagle平衡盐溶液(EBSS)中洗涤细胞单层一次，重新添加细胞培养基并孵育。致细胞病变效应(CPE)被描述为小的圆形细胞，具有轻微的颗粒状外观。CPE在接种后1-2天开始发生，当观察到超过百分之九十的致细胞病变效应(CPE)时收获细胞。孵育后，细胞将被破坏，通过离心除去细胞碎片。

将通过从75-100％受感染的培养细胞中收集上清培养液来制备原液病毒。将上清液取出，等分，并储存在超低温冰箱中直至使用当天。在使用当天，取出等分试样，解冻并冷藏直至用于测定。调节原液病毒等分试样中所含的FBS百分比，以产生最小5％的有机土壤负荷。如果资助人选择的土壤负荷大于5％，则调整原液病毒等分试样中所含的FBS百分比，以产生所要求的土壤负荷百分比。

B.载体制备：将0.2ml原液病毒的等分试样用细胞刮刀均匀涂布在100×15mm无菌玻璃培养皿的底部上。将病毒在室温下风干30-60分钟(直到明显干燥)。该干燥条件(温度和湿度)将适合于测试病毒在干燥后获得最大存活率。记录实际干燥时间和温度。将准备两个载体用于每批测试剂和平板回收对照。另外，将使用细胞培养基代替原液病毒，每个测试剂批次准备一个载体用于中和剂有效性对照。

C.测试剂制备：将根据资助人的指导或建议的标签要求制备和使用测试剂。

D.测试：对于两批测试物质中的每一批，在指定的暴露时间和温度的使用条件(喷雾产品)下，将两个干燥的病毒膜暴露于2.0ml使用稀释的测试物质，或暴露于释放的喷雾量。接触时间后，测试剂将被中和，并且将混合物从培养皿表面刮下。这将被认为是大约一个log

1.Sephardex

2.如果不使用柱，则将在细胞培养基中制备中和的病毒的连续十倍稀释物。对于喷雾型试剂，将按照资助人的说明使用该剂，将在测试前测量资助人指定的在喷涂应用中喷雾产品产生的体积，并将在接触时间后施加等量的中和剂。在施加测试剂，接触时间，及中和之后，处理样品的程序将与之前描述的相同(参见上文)。

E.感染，细胞保持和感染性测定：将中和的接种物/测试剂混合物的选定稀释物加入培养的细胞单层中。将每个稀释度的四个孔加入宿主细胞单层，并在37±2℃，5±1％CO

F.对照：所有对照将在测试期间同时进行，在相同条件下孵育并以与测试相同的方式测定(参见上文)。将对测试剂进行中和剂有效性对照、细胞毒性对照和细胞毒性相关的病毒干扰对照。

1.细胞活力。对照该对照将证明细胞在整个测定期间保持活力。另外，将确认在整个测定期间使用的细胞培养物无菌。仅四孔将接收细胞培养基。

2.病毒原液滴度。将在测试时滴定攻击病毒以确定病毒的相对感染性并证明宿主细胞对支持FCV感染的易感性。将病毒接种物在细胞培养基中连续稀释10倍。将选择的稀释物接种到孔中，每个稀释度4个孔，并在与测试相同的条件下孵育。

3.平板回收对照(PRC)。将2ml细胞培养基加入干燥的病毒中。接触时间后，将对病毒/细胞培养混合物进行与测试剂相同的中和程序。如果使用色谱柱，则将一部分病毒/细胞培养基/中和剂混合物用于色谱柱滴度对照(见下文)。该对照将确定仅由干燥和中和引起的病毒感染性的相对损失。将来自PRC的结果与测试结果进行比较，以确认在干燥和中和后回收至少4个log

4.中和剂有效性对照(NEC)。中和程序将取决于在测试剂中和在内部对照测试剂中存在的活性成分。对于该对照，每批测试剂将完全按照测试程序处理，不添加病毒接种物，而是将添加细胞培养基。中和后，将样品分为三个部分[两部分用于细胞毒性相关的对照(见下文)，一部分用于中和剂有效性]。

如果使用色谱柱，则将使每个样品通过各个柱，并且在细胞培养基中适当地连续稀释洗脱液。如果不使用柱，则将在细胞培养基中将中和剂有效性样品连续稀释10倍。将稀释的样品与低滴度病毒混合，保持相当于接触时间的时间并测定病毒感染性和/或细胞毒性(见下文)，以确定测试剂的稀释度，在该稀释度下，杀病毒活性，如果有的话，则保留。如所述测试程序所述，然后将用选择的稀释度接种宿主细胞。在确定测试剂降低病毒感染性时，将不考虑显示杀病毒活性的稀释度。

5.细胞毒性对照(CT)。将测试CT对照以确定产品是否对细胞有毒。将测试每批中和的测试剂以确定细胞毒性。将从NEC获得的CT样品在细胞培养基中连续稀释10倍，不添加病毒。将以与测试和对照样品相同的方式接种选择的稀释物并孵育。

G.计算。通过Spearman Karber的方法计算，病毒和细胞毒性滴度将分别表示为50％滴定终点感染性(TCID

接种的第一稀释度的-Log–[(每个稀释度下死亡率％之和/100)–0.5)×(稀释度的对数)]

将使用修订的EPA批准的用于计算最大可能数(MPN)的方法计算感染性的log

实施例3：在不同环境中及对抗多种病原体的效力测试

根据EPA标准操作程序测试本申请的清洁组合物的有效性，以测量硬表面消毒剂对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)、艰难梭菌(Clostridium difficile)和病毒的有效性。标准操作程序基于AOAC International和ASTM International标准方法的严格解释。

在示例性测试中，本申请的清洁组合物作为杀菌喷雾产品进行测试，以测试其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和肠道沙门氏菌(Salmonella enterica)的有效性(EPA方法ID：MB-06-08，日期：2014年9月22日)。

如下制备细菌的测试培养物：在室温下解冻单个冷冻瓶并短暂涡旋混合。将10μL解冻的冷冻原液(单次使用)加入含有10mL培养基的试管中(合成肉汤用于金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和肠道沙门氏菌。营养肉汤可用于铜绿假单胞菌。)。涡旋，在36±1℃下孵育24±2小时。在接种最终测试培养物之前需要每日一次转移。日培养物可以传代培养长达5天；每日培养物可用于生成测试培养物。仅对金黄色葡萄球菌和肠道沙门氏菌，在转移前短暂涡旋24小时培养物。对于最终的传代培养转移，接种足够数量的含有10mL生长培养基(例如合成肉汤或营养肉汤)的20×150mm试管，每管24小时培养物10μL，然后涡旋混合。在36±1℃孵育48-54小时，不摇晃。

如下进行载体接种：接种约80个载体；测试需要60个载体，对照载体计数需要6个载体，活力对照需要1个载体。对于铜绿假单胞菌，通过以下方式从肉汤中除去表膜：无菌地倾析液体至无菌管中，使用移液管轻轻地将肉汤从表膜吸出，或真空除去。避免从管底部收集表膜。将表膜移除后，将测试培养物转移到无菌的25×150mm试管中(每管最多约20mL)并目视检查表膜碎片。在最终培养物中存在表膜使得无法用于测试。

对于金黄色葡萄球菌和肠道沙门氏菌，使用涡旋式混合器，混合48-54小时测试培养物3-4秒并在室温下静置10分钟，然后继续。取出每种培养物的上部(例如，上部3/4或约7.5mL)，留下任何碎片或团块，并转移到无菌烧瓶中；将培养物放入烧瓶中并旋转混合。

对于金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和肠道沙门氏菌，使用涡旋式混合器，将48-54小时测试培养物混合3-4秒并在室温下静置10分钟，然后继续。取出每种培养物的上部(例如，上部3/4或约7.5mL)，留下任何碎片或团块，并将培养物放入无菌烧瓶中；旋转混合。测量并记录650nm处的OD。使用无菌肉汤培养基校准分光光度计。注意：为了达到适当范围内的平均载体计数(参见第8节)，可以在将OSL添加到接种物之前使用用于产生最终测试培养物的无菌培养基(例如合成肉汤)稀释最终的测试培养物(例如，一份培养物加一份无菌肉汤)。在30分钟内使用稀释的测试培养物进行载体接种。如果需要，添加适量的有机负荷。旋转混合。

在载体接种期间周期性地涡旋混合接种物。使用校准的正位置换型移液管(calibrated positive displacement pipette)将0.01mL培养物转移到培养皿中的无菌测试载体中。使用无菌环立即均匀地铺展接种物。不要让接种物接触载玻片载体的边缘。立刻盖上平皿。在36±1℃下培养箱中干燥载体30-40分钟。在干燥后两小时内进行效力测试。

如下进行来自载体的活细菌的计数(对照载体计数)：测定干燥的载体，2组，每组三个载体，一组在进行效力测试之前即刻进行，一组在测试后立即进行。在效力测试之前随机选择6个接种的载体用于载体计数分析。将每个接种的干燥载体置于38×100mm培养管或含有20mL letheen肉汤的无菌50mL聚丙烯锥形管中。对于铜绿假单胞菌立即涡旋–60±5秒或对金黄色葡萄球菌和肠道沙门氏菌立即涡旋120±5秒。涡旋后，短暂混合并在9mL PBDW稀释空白中制备连续十倍稀释物。短暂涡旋并使用铺平板技术在TSA或BAP上平板涂布0.1mL等分试样的适当稀释物，一式两份。将适当稀释物铺平板以实现每板30-300菌落形成单位(CFU)范围内的菌落计数。将接种物在琼脂表面上均匀铺平。孵育前培养皿必须干燥。如果没能立即进行连续稀释并立即铺平板，则将管保持在2-5℃，直到完成此步骤。在涡旋后2小时内完成稀释和铺平板。或者，将来自管的letheen肉汤与载体一起合并并短暂涡旋。将合并培养基(60mL)的0.1mL等分试样连续稀释并铺平板。将计算每组的平均载体计数。将平板(倒置)在36±1℃下孵育长达48±2小时。统计菌落。

如下进行消毒剂样品制备：对于气溶胶罐和触发器或泵式喷雾器，除非制造商另有规定，否则在使用前摇动罐25次。在测试前喷涂测试物质10-15秒，以确保喷雾器正常运行并适当分配测试物质。对于浓缩的测试物质，使用适当的无菌玻璃器皿或移液管无菌制备测试所需的测试物质使用稀释物。对于浓缩的测试物质，使用≥1.0mL或1.0g的测试物质样品来制备待测试的最终溶液。对液体测试物质使用v/v稀释度，对固体使用w/v稀释度。在测试之前，使用70％乙醇和无菌纱布擦拭喷嘴并使其干燥。

如下进行测试程序：在要求的载体干燥时间之后，载体处于水平位置，以定时间隔(通常30秒)以指定的时间、距离和泵数向载玻片依次喷涂。使用经过认证的计时器来计时喷涂间隔。对于接触时间1-10分钟，在±5秒的指定时间内喷涂载玻片，或对于接触时间＜1分钟，在±3秒内的指定时间内喷涂载玻片。喷涂后，将载体保持在水平位置。在接触时间内，务必不干扰经处理的载体。在用消毒剂喷涂最后一组载玻片(通常为20个载玻片)并且暴露时间完成之后，在±5秒的时限内依次将每个载玻片转移到含有适当中和剂的初级传代管中。在转移到中和管之前，排干每个载玻片中多余的消毒剂。在不接触培养皿或滤纸的情况下排干载体。使用火焰灭菌或高压灭菌钳进行转移。在转移期间，载玻片可以接触培养皿和传代管的内侧，但是尽可能地避免这种接触。放下载玻片后，重新盖上传代培养管并充分摇动培养物。在36±1℃下孵育48±2小时。

结果记录如下：在记录结果之前轻轻摇动每个管。记录结果为+(生长)或0(无生长)，由浊度的存在或不存在来确定。每次测试确认最少三个阳性载体组。如果少于三个阳性载体，则确认每个载体。

根据EPA在810系列-产品性能测试指南，特别是消毒剂的公共卫生使用(OCSPP810.2200(EPA-HQ-OPPT-2009-0150-0029))中设定的参数测试本申请的清洁组合物。为了证明效力，对肠道沙门氏菌(S.enterica)，以前称为霍乱沙门氏菌，美国典型培养物保藏中心(ATCC)10708(抗革兰氏阴性菌的有效性)或金黄色葡萄球菌(S.aureus)(ATCC 6538)(抗革兰氏阳性菌的有效性)进行了测试。以认证下限(LCL)对三批产品进行测试。对于每批，在测试中使用六十个载体。以LCL对测试微生物进行三次独立测试(即，在三个不同测试日测试三个批次一次)。金黄色葡萄球菌的性能标准是60个中0-3个阳性载体。肠道沙门氏菌的性能标准是60个中0-1个阳性载体。每60个载体组允许仅一个载体(培养管)污染；多于一个污染载体的出现，则测试结果无效。对于杀菌喷雾产品，该产品应杀死每组60个载体/载玻片中59个测试微生物。每60个载体组仅允许一个载体(培养管)污染；多于一个污染载体的出现，则测试结果无效。

对于用作医院或医疗消毒剂，为了证明效力，对金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)和铜绿假单胞菌(ATCC 15442)进行测试。对于抗真菌用途，为了证明效力，对须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)(ATCC 9533)进行测试。对于抗病毒用途，分别对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和诺如病毒、鸭乙型肝炎病毒、牛病毒性腹泻病毒和猫嵌杯样病毒进行测试，这些病毒被认为是可接受的测试替代品。

尽管上面已经描述了各种实施例，但是应该理解，这些公开内容仅作为示例呈现，而不是限制性的。因此，主题组合物和方法的广度和范围不应受任何上述示例性实施方式的限制，而应仅根据所附权利要求及其等同物来限定。

以上描述是为了教导本领域普通技术人员如何实践本申请的目的，并且不旨在详述其所有那些明显的修改和变化，本领域的技术人员在阅读说明书时，这些修改和变化将变得显而易见。然而，所有这些明显的修改和变化都包括在由以下权利要求限定的本申请的范围内。除非上下文明确指出相反的情况，否则这些方面和实施例旨在以有效地满足预期目标的任意顺序涵盖组分和步骤。