用于制备包括酶的液体消费产品的方法

技术领域

本公开涉及用于制备包括酶的液体消费产品的方法。该产品通常通过向容器提供至少第一液体进料组合物和第二液体进料组合物来原位制备并混合。

背景技术

用于形成液体消费产品(例如液体衣物洗涤剂、液体织物护理增强剂、液体盘碟洗涤剂、液体硬质表面清洁剂等)的传统工业规模方法涉及混合(例如，通过分批混合或连续在线混合)大量的不同颜色、密度、粘度和溶解度的多种原料以首先形成均匀且稳定的液体组合物，该均匀且稳定的液体组合物然后被填充到单独的容器中，随后接着包装并装运此类容器。尽管此类传统方法的特征在于高生产量和令人满意的混合，但是它们仍然缺乏灵活性。如果需要使用相同的生产线制备两种或更多种不同的液体消费产品，则在其用于制备不同的液体消费产品之前，首先需要清洁或吹扫生产线。此类清洁或吹扫步骤还会产生不能用于任一产品中的显著量的“废料”液体。

作为替代方案，可以将原料或它们的预混物直接添加到将出售消费产品的容器中，从而为制造商提供提高的配方灵活性和减少浪费的机会。

酶是一种常见的有益剂，包括在各种液体消费产品中，诸如液体洗涤剂。然而，已经发现，就以容器中混合方式添加而言，酶是特别具有挑战性的原料。例如，如果酶首先或最后以单独预混物少量添加，那么在没有额外混合的情况下，这些酶通常不会良好分散，而额外混合会耗费时间和资本。如果首先添加酶预混物和/或用水或某些含水流体稀释，则可以改善原位混合，但酶可能遭受稳定性的损失，从而导致活性降低。特别地，蛋白酶倾向于降解其他酶(包括蛋白酶的其他分子，因为酶是蛋白质)，导致配制低效率和不必要的成本。

因此，需要通过容器中混合工艺高效地制备含有酶的液体消费产品。

发明内容

本公开涉及制备包括酶的液体消费产品的方法。例如，本公开涉及一种用于在容器中制备液体消费产品的方法，其中该方法包括以下步骤：(A)提供具有开口的容器，其中容器的总体积在约10ml至约10升的范围内；

(B)用第一液体进料组合物将容器部分地填充至容器的总体积的约0.01％至约75％，第一液体进料组合物包括酶、第一助剂和小于约40％的水；

(C)随后用第二液体进料组合物填充容器的剩余体积或其一部分，第二液体进料组合物不同于第一液体进料组合物，第二液体进料组合物包括至少第二助剂。

附图说明

本文的图本质上为例示性的但并不旨在进行限制。

图1示出了如本公开中所述的示例性制造系统。

具体实施方式

本公开涉及用于在容器中制备含酶液体消费产品的方法。更具体地，本公开提供了原位液体混合方法，即直接在容器(例如，瓶、小袋等)内混合两种或更多种液体原料，该容器被指定用于在此类产品的装运和商业化期间或者甚至在此类产品已被销售之后的使用期间容纳成品液体消费产品。

总之，可以在一个或多个填充步骤中将含有酶的第一液体进料组合物添加到容器中，并且随后可以将第二液体进料组合物添加到容器中。已经发现，控制存在于第一液体进料组合物中的水和/或非水性稀释剂的量可以改善酶稳定性，即使在存在蛋白酶和任选的其他酶时也是如此。此外，选择第一液体进料组合物和第二液体进料组合物的某些量、比率和/或填充速率可以改进混合曲线，从而减少了单独或另外的混合操作的必要性。

本公开的方法、材料和组合物在下文更详细地描述。

如本文所用，冠词“一个”和“一种”当用于权利要求中时，被理解为是指一种或多种受权利要求书保护或描述的事物。如本文所用，术语“包括”、“包含”、和“含有”旨在是非限制性的。本公开的组合物可包含本公开的组分、基本上由或由本公开的组分组成。

本文可使用术语“基本上不含”(“substantially free of”或“substantiallyfree from”)。这是指所指材料非常少，非有意添加到组合物中以形成该组合物的部分，或优选地该所指材料不以分析检测到的水平存在。这是指包括其中所指材料仅作为有意加入的其他材料中的一种中的杂质而存在的组合物。如果有的话，所指材料可以按组合物的重量计小于1％、或小于0.1％、或小于0.01％、或甚至0％的水平存在。

如本文所用，术语“织物护理组合物”包括被设计用于处理织物的组合物和制剂。此类组合物包括但不限于衣物洗涤清洁组合物和洗涤剂、织物软化组合物、织物增强组合物、织物清新组合物、衣物洗涤预洗剂、衣物洗涤预处理剂、衣物洗涤添加剂、喷涂产品、干洗剂或组合物、衣物洗涤漂洗添加剂、洗涤添加剂、后漂洗织物处理剂、熨烫助剂、单位剂量制剂、延迟递送制剂、在多孔基质或非织造片材上或中包含的洗涤剂、以及根据本文的教导内容可对本领域技术人员显而易见的其它合适的形式。此类组合物可被用作衣物洗涤预处理剂、衣物洗涤后处理剂，或可在衣物洗涤操作的漂洗循环或洗涤循环期间添加。

如本文所用，短语“盘碟护理组合物”包括被设计用于处理盘碟、玻璃器具和/或扁平餐具的组合物和制剂。此类组合物包括但不限于手洗盘碟洗涤组合物和自动盘碟洗涤组合物。

如本文所用，短语“硬质表面清洁剂”包括被设计用于护理和/或清洁硬质表面的组合物和制剂，诸如浴室表面、玻璃表面、台面、墙壁和地板。目标硬质表面可以包括陶瓷、纤维玻璃、玻璃、聚氨酯、金属表面、塑料表面和所有上述各项的层压体。

如本文所用，术语“原位”是指发生在容器(例如瓶或小袋)内的实时混合，该容器被指定用于在此类产品的装运和商业化期间或者甚至在此类产品已被销售之后的使用期间容纳成品液体消费产品(例如液体衣物洗涤剂、液体织物护理增强剂、液体盘碟洗涤剂、液体硬质表面清洁剂等)。本发明的原位混合特别区别于在一个或多个液体管线内发生的在线混合，该液体管线定位在容器的上游，并且优选地定位在一个或多个填充喷嘴的上游。原位混合也区别于发生在一个或多个混合罐/储罐内的分批混合，该混合罐/储罐定位在通向适合于销售或使用的容器的液体管线的上游。

除非另外指明，否则所有组分或组合物含量均是就该组分或组合物的活性部分而言，且不包括可能存在于此类组分或组合物的可商购获得的来源中的杂质，例如残余溶剂或副产物。

除非另外指明，否则本文所有的温度均以摄氏度(℃)为单位。除非另外指明，否则本文中所有的测量均在20℃和大气压力下进行。

在本公开的所有实施方案中，除非另外特别说明，否则所有百分比均是按总组合物的重量计的。除非另外特别说明，否则所有比率均为重量比。

应当理解，贯穿本说明书给出的每一最大数值限度包括每一较低数值限度，如同此类较低数值限度在本文中明确写出。贯穿本说明书给出的每一最小数值限度将包括每一较高数值限度，如同此类较高数值限度在本文中明确写出。贯穿本说明书给出的每一数值范围将包括落在此类较宽数值范围内的每一较窄数值范围，如同此类较窄的数值范围全部在本文中明确写出。

本公开涉及一种用于在容器中制备液体消费产品的方法。在宽冲程中，该方法可以包括以下步骤：提供容器；用包括酶的第一液体进料组合物部分地填充容器；并且随后用第二液体进料组合物填充容器的剩余体积或其一部分。该步骤和组合物更详细地描述于下文。

本公开的方法可以在单个制造系统上进行。图1示出了示例性制造系统1。制造系统1可以包括输送机系统2，该输送机系统2能够在加工方向3上移动容器100。输送机系统2可以包括皮带、轨道或能够移动一个或多个容器的其他合适的系统4。制造系统1可以包括基于线性同步电机(LSM)的系统，该系统促进载具的推进，该载具可以使用电磁力(EMF)沿着轨道保持容器。制造系统1可以包括其中载具以某种其他方式推进的系统，诸如通过单独的伺服电动机。容器100可以遵循系统上的单个预设路径。制造系统1可以为容器提供多个和/或可变的路径。例如，路径可以通向某些填充站而不是其他填充站。

制造系统1可以包括多个填充站10、11。填充站10、11可以包括一个或多个喷嘴，一种或多种组合物可以通过该喷嘴分配到容器中。通常，一个喷嘴将与一种组合物相关联。例如，第一液体进料组合物101可以在第一填充台10处经由第一喷嘴12提供到容器100。第二液体进料组合物102可以在第二填充台11处经由第二喷嘴13提供到容器102。某些喷嘴可以允许同时提供多于一种组合物。填充站还可以包括多个喷嘴，每个喷嘴可以同时或依序向容器提供组合物。

容器100可以在制造系统的一个处，优选地仅在一些或甚至所有的填充站10、11处停止。要求容器在仅一些填充站处停止允许更大的配制灵活性，这意味着可以在同一制造系统上制造多种类型的消费产品，即使同时，一个容器可以进入某些填充站和/或填充有某些组合物，而第二容器可以进入不同的填充站和/或填充有不同的组合物。

第一液体进料组合物101可以在一个或多个填充站处提供。第一液体进料组合物101可以由一个或多个喷嘴提供。第一液体进料组合物101可以在两个或更多个填充站处和/或由两个或更多个喷嘴提供。

第二液体进料组合物102可以在一个或多个填充站处提供。第二液体进料组合物102可以由一个或多个喷嘴提供。第二液体进料组合物102可以在两个或更多个填充站处和/或由两个或更多个喷嘴提供。

在任何给定填充站处，例如当将第二液体进料组合物102提供给容器100时，填充时间可以在约0.1秒至约20秒、或约0.5秒至约10秒、或约0.5秒至约5秒、优选地约0.5秒至约4秒，并且更优选地约1秒至约3秒的范围内。通常，对于效率而言，可能优选的是更快的时间，和/或可能需要一定的最少填充时间来提高所提供的放置和/或体积的准确性。

诸如第一液体进料组合物101和第二液体进料组合物102的材料可以在有限数量的填充站和/或通过有限数量的喷嘴提供给容器100。可能期望限制填充站和/或喷嘴的数量以平衡配制灵活性与制造复杂性。可以以总计2至10个、或2至8个、或2至6个填充站向容器提供材料。可以经由总计2至10个、或2至8个、或2至6个喷嘴向容器提供材料。

一个或多个喷嘴可以连接到一个或多个流量控制装置，以控制由喷嘴产生的一个或多个液体流的流速。一个或多个流量控制装置可以选自阀、活塞、伺服驱动泵，以及它们的组合。一个或多个流量控制装置可以包括一个或多个伺服驱动泵。

第一液体进料组合物和/或第二液体进料组合物可以提供有动态流动分布。动态流动分布优选地是质量依赖性、体积依赖性和/或时间依赖性的，并且可以包括：(a)斜升区段，其由在填充步骤开始时液体进料的增加的流速限定；和/或(b)下降部分，其由在填充步骤结束时液体进料的减小的流速限定。

可以以特定的峰值流速向容器提供第一液体进料组合物和/或第二液体进料组合物。第二液体进料组合物的峰值流速可以大于第一液体进料组合物的峰值流速。可能期望第一液体进料组合物具有相对较低的峰值流速，以便所提供的酶的量更精确，该酶通常以极低水平的活性成分存在。可能期望第二液体进料组合物具有相对较大的峰值流速以便促进原位混合。第一液体进料组合物和/或第二液体进料组合物的峰值流速可为约5mL/秒至约10L/秒、或约25mL/秒至约10L/秒、或约50mL/秒至约10L/秒、或约100mL/秒至约5L/秒。第一液体进料组合物的峰值流速可以是约1mL/秒、或约5mL/秒、或约10mL/秒至约100mL/秒、或至约75mL/秒。第二液体进料组合物的峰值流速可以大于500mL/秒、或约500mL/秒至约5L/秒、或约750mL/秒至约2.5L/秒。第二液体进料组合物的峰值流速可以大于第一液体进料组合物的峰值流速。

一些制造系统除了填充站之外还可以包括混合站。在此类混合站处，可以对容器进行外部搅拌(例如，通过振荡、旋转和/或翻转容器)或内部搅拌(例如，通过搅拌)以便更好地均匀化最终产物组合物。

然而，当正确选择第一液体进料组合物和第二液体进料组合物的量和/或流速时，液体消费产品可能由于添加过程的湍流变得充分原位混合。因此，制造系统可以不包括专用混合站，和/或方法可以不包括特定混合步骤。此类混合站或步骤的缺失可以节省资本和/或减少制造时间。尽管可能不存在混合站和/或混合步骤，但是应理解，当将材料提供到容器时，当将容器在制造系统上移动时(包括停止和开始(如果有的话))，当容器关闭或密封，和/或从制造系统中取出时，例如放置在二次包装上或二次包装中，可能发生至少一些混合。

为了使与本发明的动态填充分布相关联的误差裕度最小化，可能期望控制被提供给容器的组合物(例如至少第二液体进料组合物)中的曝气。组合物(例如第二液体进料组合物)的特征可在于5体积％或更少体积、优选地3体积％或更少体积、更优选地2体积％或更少体积、并且最优选地1体积％或更少的曝气水平。优选地，也以类似的方式控制第一液体进料组合物中的曝气。

在填充之前可通过在大气压下或在真空条件下，将液体进料组合物放置在脱气槽中达延长的时间段来实现受控曝气，以便允许从此类液体进料组合物中释放捕集的气泡。组合物中曝气水平的量化是通过在大气压下评估曝气组合物与未曝气组合物之间的比重的液体比重计进行的。

本公开的方法可以包括提供具有开口的容器的步骤。容器的总体积可以在约10ml至约10升，或约100mL至约6升范围内。

根据本公开的容器可以为被明确指定用于在此类产品的装运和商业化期间或者甚至在此类产品已被销售之后的使用期间容纳成品液体消费产品的容器。合适的容器可包括小袋(尤其是直立小袋)、瓶、广口瓶、罐、防水或抗水的纸盒等。

此类容器通常包括开口，液体(液体原料或成品液体消费产品)可通过该开口被填充到容器中并从容器分配。开口可具有不同的几何形状和各种横截面形状。例如，开口为具有实质高度和圆形或近似圆形横截面的管状或圆柱形。又如，开口可具有实质高度，但具有椭圆形、三角形、正方形或矩形横截面。又如，开口可具有可忽略的最小高度，并因此仅由其横截面形状限定。此类开口具有中心点或质心。在常规的液体填充工艺中，一个或多个液体填充喷嘴被放置在此类质心处或其附近(例如，稍高于其或低于其)，以用于产生至容器中的一个或多个竖直液体流入物。

容器还具有由三个或更多个点限定的支撑平面，容器可在该支撑平面上稳定地独立地直立，而不管其支撑表面的形状或轮廓如何。此类支撑平面的存在不需要容器具有平坦的支撑表面。例如，容器可具有凹形支撑表面，而此类凹形支撑表面的外边缘限定支撑平面，容器可在该支撑平面上稳定地独立地直立。又如，容器可具有带有多个突起的支撑表面，而三个或更多个此类突起限定支撑平面，容器可在该支撑平面上稳定地独立地直立。

容器也可具有顶端、相对的底端、以及在顶端与底端之间延伸的一个或多个侧壁。上述开口通常位于容器的顶端处。上述支撑平面可位于容器的相对底端处，并因此由此类容器(例如，直立在其底端上的典型的直立液体瓶)的底部表面限定。作为另外一种选择，上述支撑平面可位于容器的顶端处，并因此由此类容器(例如，直立在其顶端上的倒液体瓶)的顶部表面限定。

容器也可具有延伸穿过上述开口的质心并且垂直于上述支撑平面的纵向轴线。请注意，虽然优选的是容器具有细长形状，但容器不必具有细长形状，即，纵向轴线不由容器的形状限定，而是由容器开口的质心的位置和容器的支撑平面限定。

此类容器还可包括在顶端与底端之间的一个或多个侧壁。例如，此类容器可为圆柱形或近似圆柱形的瓶，其带有连接其顶端和其底端的一个连续弯曲侧壁，该侧壁限定圆形或椭圆形的底部表面。又如，容器可为带有两个平面侧壁的直立小袋，这两个平面侧壁在其底端处相遇以形成杏仁形底部表面，并且在其顶端处相遇以形成直线开口/闭合件。此外，容器可具有连接顶端和底端的三个、四个、五个、六个或更多个平面或弯曲侧壁。

本公开的容器可以填充有将在此类容器内原位混合的两种或更多种不同的液体进料组合物。此类液体进料组合物可在任何方面有所不同，例如颜色、密度、粘度和/或溶解度，这可潜在地导致所得混合物的不均匀性或相分离。

本公开的方法可以包括用第一液体进料组合物部分地填充容器。第一液体进料组合物可以包括酶。第一液体进料组合物可以进一步包括第一助剂。第一液体进料组合物可以包括相对有限量的水，如果有的话-例如小于约40％的水。

容器可以部分地填充有第一液体进料组合物，直至容器的总体积的约0.1％至约75％、或约0.5％至约50％、或约1％至约25％、或约2％至约20％、或约3％至约10％。第一液体进料组合物可以以容器的总体积的至少约1％、或至少约2％、或至少约3％、或至少约4％、或至少约5％的水平提供。提供给容器的第一液体进料组合物的量可以是至少1mL、或至少约5mL、或至少约10mL、或至少约25mL、或至少约50mL、或至少约75mL、或至少约100mL。可能期望在添加第二液体进料组合物以促进充分混合之前，容器中具有至少最小量的第一液体进料组合物。

第一液体进料组合物可包括小于约40％、或小于约30％、或小于约25％的水。据信，过量的水可能导致第一液体进料组合物中的酶不稳定性。另外，出于可持续性、配制空间和/或稳定性原因，可能优选的是将水水平保持最小值。

第一液体进料组合物的酶可以包括蛋白酶、非蛋白酶或它们的组合。酶优选地包括至少一种蛋白酶。酶可以包括蛋白酶和至少一种非蛋白酶。可以优选的是酶的组合，以提供更广泛的清洁/治疗益处。第一液体进料组合物可以包括非蛋白酶并且可以不含蛋白酶，并且第二液体进料组合物可以包括蛋白酶。

第一液体进料组合物可包括按第一液体进料组合物的重量计约0.0001％至约10％、或约0.001％至约5％、或约0.001％至约2％的酶。当第一液体进料组合物包括酶时，第一液体进料组合物可以足以向液体消费产品提供按液体消费产品的重量计0.0001％至约5％、或约0.001％至约2％的酶的量提供。

蛋白酶可以选自金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶，诸如包括中性或碱性微生物丝氨酸蛋白酶，诸如枯草杆菌蛋白酶(EC 3.4.21.62)。蛋白酶可以是胰蛋白酶型或胰凝乳蛋白酶型蛋白酶。蛋白酶可以是微生物来源的，诸如细菌来源或真菌来源的。蛋白酶可以是经化学或遗传修饰的野生型突变体或变体。

一种或多种非蛋白酶可以选自过氧化物酶、纤维素酶(其如本文所用，包括破坏纤维素、半纤维素、纤维素组分或半纤维素组分的酶；此类酶可以包括典型的纤维素酶、半纤维素酶、木葡聚糖酶、木聚糖酶或它们的混合物)、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂肪氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、麦芽糖酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和淀粉酶，或它们的混合物，优选地淀粉酶、甘露聚糖酶、脂肪酶、纤维素酶、果胶酸裂解酶或它们的混合物。

特别优选的可以是蛋白酶和一种或多种淀粉酶、甘露聚糖酶、脂肪酶、纤维素酶、果胶酸裂解酶或它们的混合物的混合物。

第一助剂可以是有益剂(诸如表面活性剂)、美化剂(诸如着色剂或珠光剂)或加工或稳定性助剂(诸如溶剂或结构剂)。第一助剂可以呈液体形式或基本上液体形式，诸如悬浮液或乳液。第一助剂可以用作酶的稀释剂，优选非水性稀释剂。第一助剂的量可以与第一液体进料组合物中的水的量相同或比其更多。第一助剂材料的存在可以促进改进的原位混合和/或酶的稳定性。

第一助剂可以包括香料、着色剂、有机溶剂、表面活性剂、遮光剂、珠光助剂、增白剂、漂白剂、漂白活化剂、催化剂、螯合剂、助洗剂、聚合物、结构剂或它们的混合物。第一助剂可以包括香料、着色剂、有机溶剂、表面活性剂或它们的混合物。第一助剂可以按第一液体进料组合物的重量计至少约50％、或至少约60％、或至少约70％的量存在。

第一助剂可以包括有机溶剂。有机溶剂可以选自丙二醇、二丙二醇、苯氧基乙醇、二乙二醇、甘油、肉豆蔻酸异丙酯、聚乙二醇、烷醇胺(诸如单乙醇胺或三乙醇胺)或它们的组合。有机溶剂可以包括丙二醇。

除此之外，据信有机溶剂(诸如丙二醇)促进酶稳定性，特别是当存在与第一进料组合物中的水相比约相同量或更多的有机溶剂时。第一液体进料组合物中有机溶剂与水的重量比可在约0.75:1、或约1:1、或约1.1:1至约1.2:1、或约1.3:1至约20:1、或至约10:1、或至约5:1、或至约3:1、或至约2:1的范围内。

第一液体进料组合物可以包括香料。香料可以包括纯香料、包封的香料、与液体载体预混合的香料或它们的混合物。香料可以改善液体消费产品、使用产品的工艺或用组合物处理的织物的美观性。包封的香料对于持久的香味益处可能是优选的，因为包封物可以在磨损和/或移动时破裂以释放香料。

如本文所用，术语“香料”包括香料原料(PRM)以及香料谐香剂。如本文所用，术语“香料原料”是指具有至少约100g/mol的分子量的化合物，并且其可单独或与其他香料原料一起使用，用于赋予气味、芳香、香精或香味。如本文所用，术语“香料成分”和“香料原料”是可以互换的。如本文所用，术语“谐香剂”是指两种或更多种PRM的混合物。典型的PRM尤其包含醇、酮、醛、酯、醚、亚硝酸盐和烯烃，如萜烯。

第一液体进料组合物可包括按第一液体进料组合物的重量计约0.1％至约50％、或约0.1％至约25％、或约0.1％至约20％、或约0.1％至约10％、或约0.1％至约5％，优选约0.5％至约4％、更优选约1％至约3％的香料。在一些情况下，可能希望组合物是相对无气味的。在此类情况下，没有添加额外的香料，并且组合物可以包括小于0.1％或甚至零百分比的香料。

组合物可包括包封的材料。包封的香料可以通过用壁材料至少部分地包围香料材料形成。胶囊壁材料可包括：三聚氰胺、聚丙烯酰胺、有机硅、二氧化硅、聚苯乙烯、聚脲、聚氨酯、基于聚丙烯酸酯的材料、基于聚丙烯酸酯的材料、明胶、苯乙烯苹果酸酐、聚酰胺、芳族醇、聚乙烯醇，或它们的混合物。三聚氰胺壁材料可包括与甲醛交联的三聚氰胺、与甲醛交联的三聚氰胺-二甲氧基乙醇、以及它们的混合物。用此类壁材料封装可以与甲醛清除剂(诸如乙酰乙酰胺、脲或它们的衍生物)组合使用。基于聚丙烯酸酯的壁材料可包括由甲基丙烯酸甲酯/甲基丙烯酸二甲基氨基甲酯形成的聚丙烯酸酯、由胺丙烯酸酯和/或甲基丙烯酸酯与强酸形成的聚丙烯酸酯、由羧酸丙烯酸酯和/或甲基丙烯酸酯单体与强碱形成的聚丙烯酸酯、由胺丙烯酸酯和/或甲基丙烯酸酯单体与羧酸丙烯酸酯和/或羧酸甲基丙烯酸酯单体形成的聚丙烯酸酯、以及它们的混合物。

香料胶囊可涂覆有沉积助剂、阳离子聚合物、非离子聚合物、阴离子聚合物、或它们的混合物。合适的聚合物可选自：聚乙烯甲醛、部分羟基化的聚乙烯甲醛、聚乙烯胺、聚乙烯亚胺、乙氧基化聚乙烯亚胺、聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、多糖(例如壳聚糖)以及它们的组合。

可使用一种或多种类型的包封物，例如两种包封类型，其中第一或第二包封物中的一种(a)具有由与另一种不同的壁材料制成的壁；(b)具有包括与另一种不同量的壁材料或单体的壁；或(c)含有与其他不同量的香料油成分；或(d)含有不同的香料油。可以将封装物作为浆料添加到组合物中。

第一液体进料组合物可以包括着色剂。可以优选液体着色剂和/或至少部分地经由非水性载体递送的着色剂，以限制第一液体进料组合物中的水量。合适的着色剂可包括美化染料、颜料、调色剂或它们的混合物。

染料可以包括偶氮染料，蒽醌染料，苯并呋喃酮染料，含有由醌系统连接的一个或多个羰基基团的多环芳香羰基染料，靛类染料，聚甲炔和相关染料，苯乙烯基染料，二芳基和三芳基碳鎓及相关染料，诸如二苯基甲烷、亚甲蓝、恶嗪和呫吨类；酞菁也是可用的，例如包括二磺酸盐和三磺酸盐类的那些；喹酞酮，硫化染料和硝基染料。高度优选的染料包括对纺织品具有低坚牢度的染料，有时称为非染色染料。这些具有高美学效果，但不会使经洗涤的纺织品褪色。

调色剂(有时称为调色染料、织物着色染料或上蓝剂或美白剂)通常为织物提供蓝色或紫色色调。此类试剂在本领域中是公知的，并且可单独或组合使用以产生特定的调色色调和/或对不同的织物类型进行调色。调色剂可选自本领域已知的任何合适化学类别的染料，包括但不限于吖啶、蒽醌类(包括多环醌类)、吖嗪、偶氮(例如，单偶氮、双偶氮、三偶氮、四偶氮、多偶氮)、苯并二呋喃、苯并二呋喃酮、类胡萝卜素、香豆素、花菁、二氮杂半花菁、二苯甲烷、甲臜、半花菁、靛蓝类、甲烷、萘酰亚胺、萘醌、硝基、亚硝基、噁嗪、酞菁、吡唑类、二苯乙烯、苯乙烯基、三芳基甲烷、三苯甲烷、氧杂蒽以及它们的混合物。调色剂可选自偶氮试剂、三芳基甲烷试剂、三苯甲烷试剂、或它们的混合物。

第一液体进料组合物可以包括表面活性剂。表面活性剂可以是选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性表面活性剂或它们的组合的去污表面活性剂。可以选择表面活性剂以在消费产品的预期最终用途中提供益处。表面活性剂可至少部分地衍生自天然来源，诸如天然原料醇。

合适的阴离子表面活性剂可包括任何常规的阴离子表面活性剂。这可包括硫酸盐去污表面活性剂(例如烷氧基化和/或非烷氧基化的烷基硫酸盐材料)和/或磺酸去污表面活性剂(例如烷基苯磺酸盐)。阴离子表面活性剂可为直链的、支链的、或它们的组合。优选的表面活性剂包括直链烷基苯磺酸盐(LAS)、烷基乙氧基化硫酸盐(AES)、烷基硫酸盐(AS)、或它们的混合物。其他合适的阴离子表面活性剂包括支链改性的烷基苯磺酸盐(MLAS)、甲酯磺酸盐(MES)、和/或烷基乙氧基化羧酸盐(AEC)。阴离子表面活性剂可以酸形式、盐形式、或它们的混合物存在。阴离子表面活性剂可部分或全部被例如碱金属(例如钠)或胺(例如单乙醇胺)中和。

表面活性剂可包括非离子表面活性剂。合适的非离子表面活性剂包括烷氧基化脂肪醇，诸如乙氧基化脂肪醇。其他合适的非离子表面活性剂包括烷氧基化烷基酚、烷基酚缩合物、中链支化的醇、中链支化的烷基烷氧基化物、烷基多糖(例如烷基多苷)、聚羟基脂肪酸酰胺、醚封端的聚(烷氧基化)醇表面活性剂以及它们的混合物。烷氧基化物单元可为乙烯氧基单元、丙烯氧基单元、或它们的混合物。非离子表面活性剂可为直链的、支链的(例如，中链支化的)、或它们的组合。具体的非离子表面活性剂可包括具有平均约12至约16个碳原子和平均约3至约9个乙氧基基团的醇，诸如C12-C14 EO7非离子表面活性剂。

表面活性剂可包括两性离子表面活性剂，诸如甜菜碱，包括烷基二甲基甜菜碱和椰油二甲基酰胺丙基甜菜碱、C

第一液体进料组合物可以在单个填充步骤中提供给容器，例如在同时添加酶、第一助剂和水(如果有的话)的情况下。

例如，可能期望增加配置灵活性，以在多于一个填充步骤中提供第一液体进料组合物。例如，本公开的方法可以包括在至少两个子步骤(例如至少两个填充步骤)中向容器提供第一液体进料组合物。至少两个子步骤可以包括(i)向容器提供第一酶，例如第一酶预混物。子步骤可以进一步包括选自以下的至少一个附加子步骤：(ii)向容器提供第二酶，例如作为第二酶预混物；(iii)向容器提供第一助剂，优选地有机溶剂、着色剂、香料或它们的混合物；或(iv)它们的组合。酶可以是添加到容器中的第一材料(例如，子步骤(i)和/或(ii)可以是在方法中发生的第一填充步骤)。

方法可以包括子步骤(i)和(ii)，例如向容器提供第一酶和第二酶。子步骤(i)和(ii)可以同时或依序发生。第一酶和/或第一酶预混物可以包括蛋白酶。第二酶和/或第二酶预混物可以包括至少一种非蛋白酶。

当第一助剂可以包括多种材料时，提供第一助剂的步骤(iii)可以包括多个填充步骤，诸如至少两个填充步骤。可以在第一填充步骤中添加一种助剂，并且可以在第二填充步骤中添加另一种助剂。例如，可以在一个填充步骤中添加有机溶剂，可以在另一填充步骤中添加香料，和/或可以在另一填充步骤中添加着色剂。第一助剂材料中的至少两种可以在填充步骤中组合。

第一液体进料组合物或其组分(例如，一种或多种酶)在提供第二进料组合物之前可以在容器中具有停留时间。停留时间可以是约1秒、或约3秒、或约5秒，至约60分钟、或至约30分钟、或至约10分钟、或至约5分钟、或至约2分钟、或至约60秒、或至约45秒、或至约30秒。容器可以在停留时间期间从一个填充站运输到另一填充站。停留时间被测量为从首先将材料(例如，第一液体进料组合物和/或一种或多种酶)提供到容器的时间(即，当第一进料的流动停止的时间)到将第二进料组合物或其组分提供到容器的时间(即，当第二进料的流动开始的时间)。本公开的方法有助于酶稳定性，以实现相对较长的停留时间，例如从一分钟到小时，如果制造系统上存在临时延迟或停止，那么这是有用的。

也就是说，如果第一液体进料组合物的停留时间在添加第二液体进料组合物之前的时间段过长，则该方法可以包括丢弃容器中的第一液体进料组合物的部分的步骤，以防止潜在的降解和/或不稳定性。被认为是“过长”可以取决于第一液体进料组合物的降解/稳定性曲线。如果停留时间超过1分钟、或超过5分钟、或超过10分钟、或超过20分钟、或超过30分钟、或超过45分钟、或超过60分钟，那么已经分配到容器的第一液体进料组合物可以被丢弃或以其他方式从制造线去除。

本公开的方法可以包括向容器提供第二液体进料组合物的步骤。例如，在成分、粘度和/或溶解度的类型或水平方面，第二液体进料组合物不同于第一液体进料组合物。第二液体进料组合物可包括至少第二助剂。

该方法可以包括用第二液体进料组合物填充容器的剩余体积或其一部分。第二液体进料组合物通常在用第一液体进料组合物部分填充容器之后提供，但第一液体进料组合物和第二液体进料组合物可以同时提供到容器。还可能的是，首先将第二液体进料组合物添加到容器中，然后添加第一液体进料组合物；然而，这种顺序可能是不太优选的，因为它可能需要一个或多个附加混合步骤，例如外部混合(例如，翻滚)。

第二液体进料组合物的量(按重量和/或体积计)可以大于第一液体进料组合物的量，这可以优选地促进酶在最终消费产品中的充分混合。该方法可以包括用第二液体进料组合物填充容器总体积的至少50％、或至少60％、或至少70％、或至少80％、或至少90％。第一液体进料组合物与第二液体进料组合物的重量比可以小于或等于1:1、或约1:2至约1:1000、或约1:2至约1:500、或约1:2至约1:200，优选约1:3至约1:100、优选约1:4至约1:50、更优选约1:5至约1:20、甚至更优选约1:5至约1:10。

与第一液体进料组合物中存在的水相比，第二液体进料组合物可以包括相对较大比例的水(以重量％计)。第二液体进料组合物可以包括大于40％的水、或大于约45％的水、或大于约50％的水。第二液体进料可以包括小于约90％的水、或小于约75％的水、或小于约65％的水。

第二液体进料组合物可以包括第二助剂。第二助剂可能不在第一液体进料组合物中存在。第二助剂可以存在于第一液体进料组合物和第二液体进料组合物两者中，但水平不同。

第二助剂可以包括表面活性剂、调节活性物质或它们的混合物，优选地表面活性剂。

第二液体进料组合物可以包括按第二液体进料组合物的重量计约5％至约60％水平的表面活性剂。如上所述，表面活性剂可以选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性表面活性剂或它们的组合。

第二液体进料组合物可以包括调理剂。调理剂可以选自季铵酯化合物、有机硅、非酯季铵化合物、胺、脂肪酯、蔗糖酯、有机硅、可分散聚烯烃、多糖、脂肪酸、软化或调理油、聚合物胶乳或它们的组合，优选地选自季铵酯化合物、有机硅或它们的组合；第二液体进料组合物可包括按第二液体进料组合物的重量计约1％至约50％、或约5％至约30％的调理活性物质。

根据本公开的第二液体进料组合物可以包括外部结构剂。外部结构剂可包括非聚合结晶、羟基官能化结构剂和/或聚合结构剂。非聚合性晶状羟基官能化结构剂可包含可结晶的甘油酯，甘油酯可预乳化以有助于分散到最终洗涤剂组合物中。合适的可结晶甘油酯包括氢化蓖麻油或“HCO”或它们的衍生物，前提条件是它能够在液体洗涤剂组合物中结晶。聚合物结构剂可包括天然衍生结构剂和/或合成结构剂。

第二液体进料组合物可以包括酶稳定剂。虽然在第一液体进料组合物中可能不需要酶稳定剂(例如，由于相对较低的水含量)，但是可能期望包括酶稳定剂作为第二液体进料组合物的一部分，特别是当最终消费产品被调配成包括相对较高比例的水时。合适的酶稳定剂可以包括硼酸盐或其来源(诸如硼酸)、钙源(例如，甲酸钙)和其他已知稳定剂。

第二液体进料组合物可以包括酶。酶可以与第一液体进料组合物中提供的酶相同或不同。在第二液体进料组合物中添加另外的酶可以帮助通过酶类型和/或水平区分不同产物，特别是当使用多种类型或量的第二液体进料组合物时。

本公开的方法涉及制备液体消费产品的方法。如上所述，液体消费产品含有酶。

合适的液体消费产品可以包括其中酶适合的任何产物，例如适合用于提供最终使用益处。液体消费产品可以是清洁产品。液体消费产品可以适用于家庭、商业和/或工业使用。液体消费产品可以适合于手动操作(例如，用手洗涤)或用于自动化操作(例如，用自动机器洗涤)。

液体消费产品可以是家庭护理产品。液体消费产品可以是织物护理产品、盘碟护理产品、硬质表面清洁剂或它们的组合。液体消费产品可以是织物护理产品，诸如重型液体(HDL)液体衣物洗涤剂或预处理产品。液体消费产品可以是盘碟护理产品，诸如手动盘碟洗涤组合物或自动盘碟洗涤组合物。

液体消费产品的粘度可为约1至约2000厘泊(1-2000mPa·s)，或约200至约1400厘泊，或约200至约1000厘泊，或约200至约800厘泊(200-1400mPa·s)。粘度使用布氏粘度计，2号转子，以60RPM/s的速度，在20℃下测定。

液体消费产品可以是各向同性的。液体消费产品可以是相对透明或半透明的。本公开的液体消费产品的特征可在于，在不存在染料和/或遮光剂的情况下，使用去离子水作为胚料，用Beckman DU分光光度计经由标准10mm光程比色皿在室温下测量的在570nm波长下的透射率百分比大于约50％、或大于约60％、或大于约80％、或大于约90％。透射率百分比根据测试方法部分中提供的方法进行测定。

液体消费产品的特征可在于约6.5至约9、或约7至约9、或约7.5至约8.5的pH。pH根据测试方法部分中提供的方法进行测量。

液体消费产品可以包括水。液体消费产品可以包括比第一液体进料组合物相对更大比例(按重量％计)的水。液体消费产品可以包括按液体消费产品的重量计大于约40％、或大于约45％的水、或大于约50％的水。

液体消费产品可以包括按组合物的重量计约5％至约50％、或约5％至约35％的表面活性剂。合适的表面活性剂在上文更详细地描述。

液体消费产品可以包括按组合物的重量计约1％至约30％的调理活性物质。合适的调理活性物质在上文更详细地描述。

液体消费产品可以通过酶的“保留活性”来表征，该“保留活性”是酶随时间的相对稳定性的指示。在给定时间之后，不同的酶对于给定产品可以具有不同的保留活性度。对于特定酶(诸如纤维素酶)，液体消费产品的特征可在于例如在四周之后至少0.85的保留活性和/或十二个月之后至少0.60的保留活性。相对较大的保留活性度是优选的，因为它们指示更大的稳定性和更高效的酶使用。

保留活性可以例如由产品制造商，通过在时间零处测量酶活性(该时间零可以是制造产品时)，并且然后在一定时间段过去之后(例如，四周和/或十二个月)测量酶活性来直接确定；保留活性是储存后的活性除以时间零的活性。另选地，可以通过ELISA分析，将时间X(例如，产品制造之后四周和/或十二个月)的酶活性除以存在的酶(活性和非活性)的总量来测定保留活性。用于测定酶活性的测试方法和ELISA分析提供于以下测试方法部分中。

方法可以包括向容器提供标签或其他标记，例如以贴纸、收缩膜套或直接印刷的形式。

本公开的方法可以进一步包括在至少第一液体进料组合物和第二液体进料组合物已经添加到容器中之后闭合容器的步骤。例如，可以向容器提供盖以闭合或密封开口。盖可以卡扣或螺旋到容器上。例如，当容器呈袋的形式时，容器可以是热密封和/或压力密封的。容器可以选择性地闭合。一旦闭合并任选地标记，容器可以适合于销售、运输、邮寄/运输、存储或例如由消费者使用。

可以将容器提供给次级包装。次级包装可以包括多个容器，该容器可以含有相同或不同的消费产品。次级包装可以呈盒、袋、托盘或任何其他合适的包装的形式。

本公开还涉及一种制备多个液体消费产品的方法。例如，方法可以涉及重复上述步骤以制备在每个容器中具有相同制剂的多个液体消费产品(例如，第一液体消费产品和第二液体消费产品)。容器可以具有相同的尺寸或不同的尺寸。

本公开还涵盖制备多个液体消费产品的方法，其中第一消费产品不同于第二消费产品。该方法可以包括向容器(可以是第一容器)提供第一液体进料组合物和第二液体进料组合物，以制备第一液体消费产品。该方法还可以包括向容器(可以是第二容器)提供替代的第一液体进料组合物和第二液体进料组合物，以制备具有与第一液体消费产品不同的制剂的第二液体消费产品。替代的第一液体进料组合物可以具有与第一液体进料组合物不同的配方，例如不同的酶类型、不同的酶水平、不同的第一助剂类型、不同的第一助剂水平和/或不同的水水平。第二液体进料组合物对于第一液体消费产品和第二液体消费产品两者可以是相同的。

另选地，第一液体消费产品和第二液体消费产品两者的第一液体进料组合物可以相同，但是第二液体进料组合物可以不同(例如，第二液体进料组合物和替代的第二液体进料组合物)。因此，该方法可以包括向容器(可以是第一容器)提供第一液体进料组合物和第二液体进料组合物，以制备第一液体消费产品。该方法还可以包括向容器(可以是第二容器)提供第一液体进料组合物和替代的第二液体进料组合物，以制备具有与第一液体消费产品不同的制剂的第二液体消费产品。替代的第二液体进料组合物可以具有与第二液体进料组合物不同的配方，例如不同的第二助剂类型、不同的第二助剂水平和/或不同的水水平。差异可以包括，作为第二助剂，不同的表面活性剂类型和/或表面活性剂水平。

不同的喷嘴可用于分配第一液体进料组合物和替代的第一液体进料组合物。不同的喷嘴可用于分配第二液体进料组合物和替代的第二液体进料组合物。此类配置允许在同一制造线上制造多种类型的产品，而无需在产品类型之间进行清洁。

本公开的具体预期的组合在本文中在以下标字母的段落中描述。这些组合本质上是例示性的，而不是限制性的。

A.一种用于在容器中制备液体消费产品的方法，该方法包括以下步骤：(A)提供具有开口的容器，其中该容器的总体积在约10ml至约10升的范围内；(B)用第一液体进料组合物将容器部分地填充至容器的总体积的约0.01％至约75％，第一液体进料组合物包含酶、第一助剂和按第一液体进料组合物的重量计小于约50％的水；(C)随后用第二液体进料组合物填充容器的剩余体积或其一部分，该第二液体进料组合物不同于第一液体进料组合物，第二液体进料组合物包括至少第二助剂。

B.根据段落A所述的方法，其中在步骤(B)期间，用第一液体进料组合物将容器部分地填充至该容器的总体积的约0.5％至约50％、或约1％至约25％、或约2％至约20％、或约3％至约10％。

C.根据段落A或B中任一项所述的方法，其中酶包括蛋白酶、非蛋白酶或它们的组合，优选至少蛋白酶，更优选地蛋白酶和一种或多种非蛋白酶。

D.根据段落C所述的方法，其中一种或多种非蛋白酶选自半纤维素酶、过氧化物酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂肪氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、麦芽糖酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和淀粉酶，或它们的混合物，优选地淀粉酶、甘露聚糖酶、脂肪酶、纤维素酶、果胶酸裂解酶或它们的混合物。

E.根据段落A至D中任一项所述的方法，其中第一助剂包含香料、着色剂、有机溶剂、表面活性剂、遮光剂、珠光助剂、增白剂、漂白剂、漂白活化剂、催化剂、螯合剂、助洗剂、聚合物、结构剂或它们的混合物，优选地其中第一助剂包含香料、着色剂、有机溶剂、表面活性剂或它们的混合物，更优选地呈第一液体进料组合物的至少50重量％的量存在。

F.根据段落E所述的方法，其中第一助剂包含有机溶剂，优选地其中有机溶剂选自丙二醇、二丙二醇、苯氧基乙醇、二乙二醇、甘油、肉豆蔻酸异丙酯、聚乙二醇、烷醇胺或它们的组合，优选丙二醇。

G.根据段落F所述的方法，其中第一液体组分中的有机溶剂与水的重量比为约0.75:1、或约1:1、或约1.1:1、或约1.2:1、或约1.3:1至约20:1、或至约10:1、或至约5:1、或至约3:1、或至约2:1。

H.根据段落E所述的方法，其中香料包括纯香料、包封的香料、与液体载体预混合的香料或它们的混合物。

I.根据段落A至H中任一项所述的方法，其中向容器提供第一液体进料组合物的步骤包括至少两个子步骤，优选地其中至少两个子步骤包括：

i)向容器提供第一酶预混物，

和选自以下的至少一个附加子步骤：

ii)向容器提供第二酶预混物；

iii)向容器提供第一助剂，优选地有机溶剂、染料、香料或它们的混合物；

iv)它们的组合。

J.根据段落I所述的方法，方法包括子步骤i)和ii)，其中第一酶预混物包含蛋白酶，并且其中第二酶预混物包含一种或多种非蛋白酶。

K.根据段落I或J中任一项所述的方法，其中方法包括子步骤iii)，其中至少两种材料在至少两个填充步骤中添加。

L.根据段落A至K中任一项所述的方法，其中在步骤(C)期间，该容器的总体积的至少50％、或至少60％、或至少70％、或至少80％、或至少90％填充有该第二液体进料组合物。

M.根据段落A至L中任一项所述的方法，其中第二液体进料组合物包含大于40％的水。

N.根据段落A至M中任一项所述的方法，其中第一液体进料组合物与第二液体进料组合物的重量比小于或等于1:1、或约1:2至约1:1000、或约1:2至约1:500、或约1:2至约1:200、优选约1:3至约1:100、优选约1:4至约1:50、更优选约1:5至约1:20。

O.根据段落A至N中任一项所述的方法，其中第一助剂和/或第二助剂，优选地至少第二助剂，更优选地仅第二助剂包含去污表面活性剂、调理剂或它们的组合。

P.根据段落O所述的方法，其中第一助剂和/或第二助剂包含选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性表面活性剂或它们的组合的去污表面活性剂。

Q.根据段落P所述的方法，其中去污表面活性剂以按第二液体进料组合物的重量计约5％至约60％的水平存在于第二液体组分中。

R.根据段落A至Q中任一项所述的方法，其中第一液体进料组合物和/或第二液体进料组合物进一步包含选自外部结构剂、酶稳定剂或它们的混合物的附加助剂。

S.根据段落A至R中任一项所述的方法，其中液体消费产品包含大于约40％、或大于约45％的水，或大于约50％的水。

T.根据段落A至S中任一项所述的方法，其中液体消费产品的特征在于，在制备液体消费产品后四周测量的酶的保留活性为至少约0.85。

U.根据段落A至T中任一项所述的方法，其中液体消费产品是织物护理产品、盘碟护理产品、硬质表面清洁剂或它们的组合。

V.根据段落A至U中任一项所述的方法，其中方法发生在具有多个填充站的制造线上，其中第一液体进料组合物在一个或多个填充站处提供，其中第二液体进料组合物在一个或多个不同的填充站处提供，并且其中将材料在总共2至10个填充站处提供给容器。

W.根据段落A至V中任一项所述的方法，其中制造系统不包括专用混合站。

X.根据段落A至W中任一项所述的方法，其中第一液体进料组合物和/或第二液体进料组合物的峰值流速在约5mL/秒至约10L/秒、或约25mL/秒至约10L/秒、或约50mL/秒至约10L/秒，优选约100mL/秒至约5L/秒的范围内。

透射百分比是用紫外-可见光度计诸如Beckman Coulter

除非本文另有说明，否则组合物的pH被定义为在20±2℃下的组合物的10％(重量/体积)水溶液的pH。能够测量至±0.01pH单位的pH的任何测量仪均是适宜的。奥立龙测量仪(Thermo Scientific，Clintinpark–Keppekouter，Ninovesteenweg 198，9320Erembodegem–Aalst，Belgium)或等同物是可接受的仪器。pH计应配备有甘汞或银/氯化银参比的合适的玻璃电极。示例包括Mettler DB 115。电极应储存在制造商推荐的电解质溶液中。

根据下列方法制备10％的组合物水溶液。用能够精确测量至±0.02克的天平称量10±0.05克样品。将样品转移到100mL容量瓶中，用去离子水稀释至体积，并且充分混合。将约50mL所得溶液倒入烧杯中，将温度调节至20±2℃，并且根据pH计制造商的标准方法测定pH。应当按照制造商的说明来设置并校正pH组件。

下文描述用于测试各种类型酶的活性的方法。

在制备中，可以制备以下溶液。制备0.5g氯化钙二水合物(Sigma-Aldrich，目录号C-5080)和10g五水合硫代硫酸钠(Sigma-Aldrich，目录号S-6672)于1升去离子水(18.2兆欧姆MΩ或更好)中的稀释溶液。制备12.1g三羟甲基-氨基甲烷(Sigma-Aldrich，目录号T1503)、1.1g氯化钙二水合物和5.0g五水合硫代硫酸钠的TRIS缓冲液，用浓盐酸调节至pH8.3并且补充到1升去离子水。通过每10mL二甲亚砜(J.T.Baker，目录号JT9224-1)将250uL的1克N-琥珀酰基-ALA-ALA-PRO-PHE对硝基苯胺(“PNA”；Sigma-Aldrich，目录号S-7388)稀释至25mL TRIS缓冲液中制备工作PNA溶液。制备7.5070g甘氨酸(Sigma-Aldrich，目录号G7126)，pH 10于1升去离子水中的甘氨酸缓冲液。通过在100mL甘氨酸缓冲液中稀释0.4gAZCL-半乳甘露聚糖(Megazyme，目录号I-AZGMA)来制备半乳甘露聚糖工作溶液。制备21.0g碳酸氢钠(British Drug House，目录号BDH9286.500)和14.6g氯化钠(Sigma-Aldrich，目录号S6014)，pH 9.5于1升去离子水中的碳酸氢钠缓冲液。通过在50mL碳酸氢钠缓冲液中稀释0.9g AZCL-HE-纤维素(Megazyme，目录号I-AZCEL)来制备AZCL-HE-纤维素工作溶液。

A.蛋白酶分析。通过将含蛋白酶的样品与琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Phe对硝基苯胺反应，从而导致光谱学上的随时间吸光度变化来进行蛋白酶分析。该反应与样品中存在的蛋白酶的水平成比例。通过在稀释溶液中稀释来制备蛋白酶样品。反应开始于在37℃下温育250uL的工作PNA溶液360秒，然后递送25uL样品制备并监测405nm处吸光度的变化。蛋白酶活性水平通过与针对该特定蛋白酶建立的蛋白酶水平与反应速率校准的关系来确定。例如，可以通过在已知酶浓度范围内(例如约1mg酶/100g产物到约100mg酶/100g产物)如上所述测量反应后吸光度来建立参考曲线。

B.淀粉酶分析.淀粉酶反应使用样品中存在的α淀粉酶和α葡糖苷酶的组合与含有被亚乙基基团封端的末端葡萄糖单元的修饰的对硝基苯基麦芽糖反应。这种末端封端抑制了α-葡糖苷酶的裂解，直到初始内键可以被α-淀粉酶裂解，然后是α-葡糖苷酶。通过α-葡糖苷酶释放pNP促进吸光度(在405nm下)每分钟的增加与样品中的α-淀粉酶活性成正比。通过在稀释溶液中稀释来制备淀粉酶样品。反应试剂提供于Infinity淀粉酶试剂(ThermoFisher Scientific，目录号986540)。反应开始于在37℃下温育190uL的Infinity淀粉酶试剂360秒，然后递送50uL的稀释样品制备并监测光谱学上在405nm下的吸光度变化。淀粉酶活性水平通过与针对该特定淀粉酶建立的淀粉酶水平与反应速率校准的关系来确定。例如，可以通过在已知酶浓度范围内(例如约1mg酶/100g产物到约100mg酶/100g产物)如上所述测量反应后吸光度来建立参考曲线。

C.甘露聚糖酶分析.通过将含甘露聚糖酶的样品与染色的天青精-交联多糖(半乳甘露聚糖)的悬浮液反应以得到吸光度来进行甘露聚糖酶分析。该吸光度与样品中存在的甘露聚糖酶的水平成比例。通过在稀释溶液中稀释来制备甘露聚糖酶样品。反应开始于在50℃下温育1500uL工作AZCL-半乳甘露聚糖工作溶液20分钟，同时在递送100uL样品制备的情况下在850rpm下搅拌，然后以13,300RPM离心并在600nm下测量顶部部分的吸光度。甘露聚糖酶活性水平通过与针对该特定甘露聚糖酶建立的甘露聚糖酶水平与吸光度校准的关系来确定。例如，可以通过在已知酶浓度范围内(例如约1mg酶/100g产物至约10mg酶/100g产物)如上所述测量反应后吸光度来建立参考曲线。

D.纤维素酶分析.通过将含纤维素酶的样品与染色的天青精-交联羟乙基纤维素AZCL-HE-纤维素的悬浮液反应以获得吸光度来进行纤维素酶分析。该吸光度与样品中存在的纤维素酶的水平成比例。通过在稀释溶液中稀释来制备纤维素酶样品。反应开始于在40℃下温育1000uL工作AZCL-HE-纤维素工作溶液60分钟，同时在递送100uL样品制备的情况下在850RPM下搅拌，然后以13,300RPM离心并在590nm下测量顶部部分的吸光度。纤维素酶活性水平通过与针对该特定纤维素酶建立的纤维素酶水平与吸光度校准的关系来确定。例如，可以通过在已知酶浓度范围内(例如约1mg酶/100g产物至约5mg酶/100g产物)如上所述测量反应后吸光度来建立参考曲线。

本发明描述的酶联免疫吸附剂测定(或“ELISA”)分析方法用于确定存在的特定蛋白质(诸如酶)的总量是组合物。当测量酶时，测试方法提供活性和非活性酶的总和。

在制备中，可以制备以下溶液。制备1.51g碳酸钠(Sigma-Aldrich，目录号223530)和2.93g碳酸氢钠(Sigma-Aldrich，目录号S-6014)的捕获缓冲液，pH 9.6±0.2，使用1L去离子水(18.2兆欧姆MΩ或更好)制成一定体积。制备29.22g氯化钠(J.T.Baker目录号3628-01)和1g牛血清白蛋白(Sigma-Aldrich，目录号A-7888)的洗涤缓冲液，用浓盐酸调节pH至8.0，并且用去离子水制成1L，然后添加0.5mL Tween 20(Sigma-Aldrich目录号T-9039)。制备7.30g柠檬酸(VWR，目录号97062)和23.87g磷酸二氢钠十二水合物(Sigma-Aldrich目录号71649)的柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，用浓氢氧化钠或盐酸调节pH至5.0，并且补充到1L去离子水。制备0.93g三羟甲基-氨基甲烷(Sigma-Aldrich，目录号T1503)和0.147g二水氯化钙(Sigma-Aldrich，目录号C-5080)和4.96g五水合硫代硫酸钠(Sigma-Aldrich，目录号S-6672)和1g牛血清白蛋白于1升去离子水中的样品制备缓冲液，用浓盐酸调节pH至8.0。制备溶解于100mL样品制备缓冲液中的2g牛血清白蛋白的阻断溶液。在分析时制备溶解于30mL柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液中的30mg正苯二胺(Sigma-Aldrich，目录号P-4664)的正苯二胺溶液。制备由在捕获缓冲液中稀释的宿主种类产生的免疫特异性抗体的0.1％捕获抗体溶液。制备由在阻断溶液中稀释的宿主种类产生的免疫特异性检测抗体的0.1％检测抗体溶液。制备在封闭溶液中稀释的0.1％抗原特异性报告基因标记溶液。制备1M硫酸溶液。

ELISA分析通过施加100uL的捕获抗体溶液并且用300uL洗涤缓冲液去除来进行，捕获抗体溶液在350uL孔板中在4℃下温育至少24小时。通过在样品制备缓冲液中稀释来制备样品。然后将100uL样品添加到孔板中，并在37℃下温育90分钟，然后用300uL洗涤缓冲液去除。以100uL将0.1％检测抗体溶液添加到孔中，并在37℃下温育60分钟，并且用300uL的洗涤缓冲液去除。接下来，将100uL的0.1％抗原特异性报告基因标记溶液添加到孔中并在37℃下温育60分钟，然后用300uL洗涤缓冲液去除。此外，用另外的300uL柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液洗涤孔并干抽。将100uL正苯二胺溶液添加到孔。使颜色在通过已知酶浓度范围(例如，约0.2ng/mL至约6ng/mL)内的吸光度建立的同时参考曲线范围内显现。在获得期望的颜色显现之后，将100uL的1M硫酸溶液添加到同一孔中。在492nm下读取吸光度。

下面提供的实施例本质上旨在是例示性的，而并不旨在进行限制。

将空的最终使用消费者容器(例如，具有手柄的刚性塑料瓶；适合含有TIDE

在此操作完成后，将最终使用的消费者包装分配到第二分配站，其中将第二液体进料组合物添加到最终使用消费产品。此第二液体进料组合物被设计成以足够高的速率200mL/s至3000mL/s、或500mL/s至2500mL/s、或750mL/s至1250mL/s填充剩余大约93％的容器。此类高速率促进容器中液体的湍流，同时填充和促进第一液体进料组合物与第二液体进料组合物的共混以产生均匀产物。

对于不对称瓶，或具有完整内部几何形状的瓶，可以有利地设计用于第二液体进料组合物的填充喷嘴，使得来自此分配操作的能量在容器的整个空间限制过程中充分广播，以促进均匀混合，例如通过在容器内的多个方向上分配组合物。

在填充之前或之后，可以根据需要对容器进行装饰和/或标记。

根据实施例1中描述的方法制备液体消费产品，不同之处在于将蛋白酶和非蛋白酶作为单独的组合物添加到容器中。同时添加蛋白酶组合物和非蛋白酶组合物。

根据实施例1中描述的方法制备液体消费产品，不同之处在于将蛋白酶和非蛋白酶作为单独的组合物添加到容器中。依序添加蛋白酶组合物和非蛋白酶组合物。在一些情况下，在非蛋白酶组合物之前添加蛋白酶组合物。在其他情况下，在蛋白酶组合物之前添加非蛋白酶组合物。

根据实施例1中描述的方法制备液体消费产品，并且进一步外部混合，例如通过翻滚和/或振荡。

以下实验测试了在储存最终产物时，第一液体进料组合物中水水平和/或水:溶剂比率对酶稳定性的影响。

对于A-D组，将各种酶预混物提供给容器(例如，洗涤剂瓶)。酶预混物(例如，第一原料组合物)的水水平和/或溶剂水平(即，丙二醇)变化。短时间后，将含有阴离子表面活性剂和酶稳定剂(四硼酸钠)等的基础洗涤剂组合物(例如，第二原料组合物)添加到容器中以形成混合的成品液体洗涤剂产品。将成品产品储存四周。四周后，评估组合物的保留酶活性(具体地，

假设成品产品中的酶衰减率相同，计算对于预混物单独在容器中的时间(在添加洗涤剂基础组合物之前)的近似酶衰减速率。

对于A和B组，将蛋白酶与其他酶分开添加到容器中。在A组中，在与容器中的其他酶组合之前，将四硼酸钠(已知酶稳定剂)添加到蛋白酶中。在B组中，在与容器中的蛋白酶组合之前，将硼酸钠添加到其他酶中。

作为进一步比较，通过传统的批次方法制备对照洗涤剂组合物，其中将酶添加到基础组合物(具有酶稳定剂)并混合；对照组合物的保留酶活性也在储存四周后确定。

结果提供于下表1中。

*通过批量方法制成

基于表1中的结果，预混物中溶剂与水的更大比率和预混物中相对较低的总水分数在预混物中提供相对较低的计算衰减速率，并且在储存后成品中的保留酶活性相对较大。例如，D组示出在4周之后非常接近对照的保留酶活性。

另外，表1中的A组和B组的结果表明，在具有相对较高量的水的环境中，与在组合之前将酶稳定剂添加到其他酶相比，将酶稳定剂添加到蛋白酶中可以相对更有益于最大化保留酶活性。

下表2示出了可根据本公开制备的消费产品组合物的示例性制剂(特别是重型液体衣物洗涤剂制剂)。除非另有说明，所提供的量按活性物质的重量％计。

·AE1.85是C1215烷基乙氧基(1.8)硫酸盐

·AE3S是C1215烷基乙氧基(3)硫酸盐

·AE7是C1213醇乙氧基化物，平均乙氧基化度为7

·AE8是C1213醇乙氧基化物，平均乙氧基化度为8

·AE9是C1213醇乙氧基化物，平均乙氧基化度为9

·烷氧基化聚芳基是例如

·淀粉酶1为

·淀粉酶2为

·淀粉酶3为

·异淀粉酶具有糖原脱支活性

·AS是C1214烷基硫酸盐

·纤维素酶2为

·木葡聚糖酶为

·螯合剂1为二亚乙基三胺五醋酸(DTPA)

·螯合剂2为1-羟乙烷1,1-二膦酸(HEDP)

·螯合剂3为乙二胺-N,N'-二琥珀酸的钠盐，(S,S)异构体(EDDS)

·分散体B为糖苷水解酶，报告为1000mg活性物质/g

·DTI 1为聚(4-乙烯基吡啶-l-氧化物)(诸如CHROMABOND S-

·DTI 2为聚(l-乙烯基吡咯烷酮-共-l-乙烯基咪唑)(诸如SOKALAN

·染料控制剂是例如

·HSAS是如美国专利6,020,303和美国专利6,060,443中所公开的中间支化烷基硫酸盐

·LAS为具有C9-C15平均脂族碳链链长的直链烷基苯磺酸盐(HLAS为酸形式)。

·脂肪酶为

·甘露聚糖酶为

·光学增白剂1为4,4'-双{[4-苯胺基-6-吗啉基-均-三嗪-2-基]-氨基}-2,2-二苯乙烯二磺酸二钠

·光学增白剂2为4,4'-双-(2-磺基苯乙烯基)联苯二钠(钠盐)

·光学增白剂3为来自3V Sigma的OPTIBLANC

·香料胶囊包封物为核-壳三聚氰胺甲醛香料微胶囊，可获自Encapsys

·光漂白剂为磺化酞菁锌

·抛光酶为对硝基苄基酯酶，报告为1000mg活性物质/g

·聚合物1为双((C2H5O)(C2H4O)n)(CH3)-N-CH----N'----(CH3)-双((C2H50)(C2H40)n)，其中n＝20-30，x＝3到8，或其硫酸化或磺化变体

·聚合物2为乙氧基化(EO15)四亚乙基五胺

·聚合物3为乙氧基化聚乙烯亚胺(PEI600 EO20)

·聚合物4为乙氧基化六亚甲基二胺，来自BASF SE的

·聚合物5为

·聚合物6为接枝有乙酸乙烯酯侧链的聚乙二醇聚合物，由BASF提供

·蛋白酶为

·蛋白酶2为

·蛋白酶3为

·季铵为C1214二甲基羟乙基氯化铵

·S-ACMC为由Megazyme提供的活性蓝19偶氮-CM-纤维素

·去垢剂为

·结构剂为氢化蓖麻油

·紫罗兰DD为由Milliken提供的噻吩偶氮染料

·水不溶性植物材料是例如由Herbafood Ingredients GmbH,Werder,Germany供应的Herbacel AQ+Type N

本文所公开的量纲和值不应理解为严格限于所引用的精确数值。相反，除非另外指明，否则每个此类量纲旨在表示所述值以及围绕该值功能上等同的范围。例如，公开为“40mm”的量纲旨在表示“约40mm”。

除非明确排除或以其它方式限制，本文中引用的每一篇文献，包括任何交叉引用或相关专利或专利申请以及本申请对其要求优先权或其有益效果的任何专利申请或专利，均据此全文以引用方式并入本文。对任何文献的引用不是对其作为与本发明的任何所公开或本文受权利要求书保护的现有技术的认可，或不是对其自身或与任何一个或多个参考文献的组合提出、建议或公开任何此类发明的认可。此外，当本发明中术语的任何含义或定义与以引用方式并入的文献中相同术语的任何含义或定义矛盾时，应当服从在本发明中赋予该术语的含义或定义。

虽然已举例说明和描述了本发明的具体实施方案，但是对于本领域技术人员来说显而易见的是，在不脱离本发明的实质和范围的情况下可作出各种其他变化和修改。因此，本文旨在于所附权利要求书中涵盖属于本发明范围内的所有此类变化和修改。