一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法

技术领域

本发明涉及天然产物的分离制备技术领域，更具体的说是涉及一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法。

背景技术

南极磷虾，又名大磷虾或南极大磷虾，是一种生活在南冰洋的南极洲水域的磷虾。采用南极磷虾制备而得的磷虾油具有超强的降血脂、降血糖、降血压、穿越血脑屏障营养及活化脑部细胞和神经，从而起到预防和治疗脑血管疾病的作用；同时，还能预防和治疗冠状动脉粥样硬化，冠心病，预防发生心梗、支架、搭桥及二次复发等心血管疾病；南极磷虾油还可以起到抗菌消炎，预防癌症的发生发展，延缓衰老，调节内分泌等多重功效。

南极磷虾油含有Omega-3必需脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。Omega-3必需脂肪酸有很多促进健康的益处，包括心血管，神经，骨骼和关节，视力，皮肤保健等。其不饱和脂肪酸是自然界中唯一以磷脂型态结合ω-3(EPA、DHA)和多样性超强抗氧化物(磷脂型虾青素Astaxanthin)的分子结构。南极磷虾油是含有丰富的维生素E、维生素A、虾青素、磷脂质、类黄酮的功能强大的抗氧化剂。南极磷虾自身富含高效的消化腺蛋白酶。

现有技术中能够有效的从磷虾中提取磷虾油，但所提取的磷虾油中DHA和EDA的含量并不高。因此，如何提供一种从磷虾中提取高含量的DHA+EPA磷虾油的方法是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，该提取方法工艺合理、技术先进、可操作性强、提取率高。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在10-80℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

（2）在南极磷虾浆料中加入4-8倍体积蒸馏水，加入复合酶制剂，调节pH至7-8，进行复合酶解，酶解期间每隔40min进行超声波辅助酶解处理；酶解结束后，95-100℃灭酶10-15min，然后经离心，得到离心液；

（3）离心液经干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用95-100％的乙醇浸提，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于5-10℃条件下静止1-4h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

优选的，所述复合研磨剂包括助溶剂、乳化剂和保护剂；质量比为1:1-20：0.01-5。

优选的，所述助溶剂为乙醇、丙二醇和甘油中的一种或几种的混合物；所述乳化剂为山梨酸醇脂肪酸酯类乳化剂、磷脂类乳化剂和糖脂类乳化剂中的一种或几种的混合物；所述保护剂为抗坏血酸或其钠盐、乙二胺四乙酸或其钠盐中的一种。

通过加入研磨助剂作为保护体系，使最终制备得到的南极磷虾油具良好的稳定性，显著抑制了功能因子的降解，可长期储存，延长了产品货架期。

优选的，所述复合酶制剂为蛋白酶和葡聚糖酶组成的复合酶，蛋白酶的添加量为2000-5000U/g，葡聚糖酶的添加量为500-3000U/g。

本发明中复合酶制剂对南极磷虾油的提取得率和活性物质含量影响显著，其中，葡聚糖酶能够显著提高南极磷虾油中DHA、EPA等的含量。

优选的，所述蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或几种的混合物。

优选的，步骤（2）中所述离心的速度为8000-10000r/min，时间为15-20min。

优选的，所述干燥为喷雾干燥、冷冻干燥或减压干燥。

优选的，所述步骤（4）中所述浸提温度为45-50℃，浸提时间为1-2h。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明的方法所得到的磷虾油中的二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）含量较高，提高了营养物质的回收率。本发明的提取方法工艺合理、技术先进、可操作性强、提取率高，可以广泛地用于磷虾的加工领域。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在70℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

其中，复合研磨剂包括丙二醇、磷脂类乳化剂和抗坏血酸；质量比为1:20：4；

（2）在南极磷虾浆料中加入7倍体积蒸馏水，加入复合酶制剂，调节pH至8，进行复合酶解，酶解期间每隔40min进行超声波辅助酶解处理；酶解结束后，100℃灭酶15min，然后在8500r/min下，离心180min，得到离心液；

其中，复合酶制剂为胃蛋白酶和葡聚糖酶组成的复合酶，蛋白酶的添加量为4500U/g，葡聚糖酶的添加量为3000U/g；

（3）离心液干燥为冷冻干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用100％的乙醇浸提，浸提温度为50℃，浸提时间为1-2h，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于10℃条件下静止4h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

实施例2

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在20℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

其中，复合研磨剂包括乙醇、脂肪酸酯类乳化剂和乙二胺四乙酸；质量比为1:5：1；

（2）在南极磷虾浆料中加入4倍体积蒸馏水，加入复合酶制剂，调节pH至7，进行复合酶解，酶解期间每隔40min进行超声波辅助酶解处理；酶解结束后，95℃灭酶10min，然后在9500r/min下，离心17min，得到离心液；

其中，复合酶制剂为胰蛋白酶和葡聚糖酶组成的复合酶，蛋白酶的添加量为2500U/g，葡聚糖酶的添加量为1000U/g；

（3）离心液干燥为减压干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用95％的乙醇浸提，浸提温度为47℃，浸提时间为1h，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于5℃条件下静止2h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

实施例3

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在45℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

其中，复合研磨剂包括甘油、糖脂类乳化剂和抗坏血酸；质量比为1:12：3.5；

（2）在南极磷虾浆料中加入6倍体积蒸馏水，加入复合酶制剂，调节pH至7，进行复合酶解，酶解期间每隔40min进行超声波辅助酶解处理；酶解结束后，97℃灭酶11min，然后在9500r/min下，离心15min，得到离心液；

其中，复合酶制剂为木瓜蛋白酶和葡聚糖酶组成的复合酶，蛋白酶的添加量为3500U/g，葡聚糖酶的添加量为3000U/g；

（3）离心液干燥为喷雾干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用97％的乙醇浸提，浸提温度为47℃，浸提时间为1.5h，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于7℃条件下静止3h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

对比例1

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在10-80℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

其中，复合研磨剂包括甘油、糖脂类乳化剂和抗坏血酸；质量比为1:10：3；

（2）在南极磷虾粉中加入6倍体积蒸馏水，加入木瓜蛋白酶，调节pH至7，进行复合酶解，酶解期间每隔40min进行超声波辅助酶解处理；酶解结束后，97℃灭酶11min，然后在9000r/min下，离心17min，得到离心液；

其中，木瓜蛋白酶的添加量为3500U/g；

（3）离心液干燥为喷雾干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用97％的乙醇浸提，浸提温度为47℃，浸提时间为1.5h，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于7℃条件下静止3h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

对比例2

一种高EPA/DHA含量磷虾油的提取方法，包括以下步骤：

（1）以南极磷虾粉为原料，加入复合研磨剂，充分搅拌混匀，然后在10-80℃环境下进行研磨处理，得到南极磷虾浆料；

其中，复合研磨剂包括甘油、糖脂类乳化剂和抗坏血酸；质量比为1:10：3；

（2）在南极磷虾浆料中加入6倍体积蒸馏水，加入复合酶制剂，调节pH至7，进行复合酶解，酶解结束后，97℃灭酶11min，然后在9000r/min下，离心17min，得到离心液；

其中，复合酶制剂为木瓜蛋白酶和葡聚糖酶组成的复合酶，蛋白酶的添加量为3500U/g，葡聚糖酶的添加量为2700U/g；

（3）离心液干燥为喷雾干燥，使其中的水分含量低于10%，得到粗提取物；

（4）将粗提物用97％的乙醇浸提，浸提温度为47℃，浸提时间为1.5h，浸提所得的残渣重复浸提两次，合并三次浸提所得的浸提液；

（5）得到的浸提液经减压浓缩至其中含油量大于30％，得到一级浓缩液；将一级浓缩液于7℃条件下静止3h，经过滤或离心进行分离，收集液体，将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留，即得所述磷虾油。

效果实验

采用GB/T 22223-2008中记载的水解提取一气相色谱法测定实施例1-3以及对比例1-2磷虾油中的EPA、DHA含量，结果见表1。

表1

通过表1可知，本发明通过对提取工艺进行改进，采用超声波辅助复合酶解工艺，提取得到的磷虾油中的二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）含量较高，提高了营养物质的回收率。本发明的提取方法工艺合理、技术先进、可操作性强、提取率高。

本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。