作为流感病毒复制的抑制剂的吡咯并2,3-B吡啶衍生物

技术领域

本公开一般涉及流感病毒复制的抑制剂，和通过向需要治疗的患者施用所述抑制剂而治疗或预防流感感染的方法。

背景技术

流感以季节性流行方式在全世界传播，导致每年数十万人死亡，在大流行性年份中数百万人死亡。举例来说，20世纪发生了三次流感大流行，且杀死数千万人，其中每次大流行均由人类病毒的新颖病毒株的的出现而引起。通常，这些新颖病毒株系由于现有流感病毒自其它动物物种传播至人类而产生。

流感主要经由感染者咳嗽或打喷嚏时产生的较大的携带病毒的液滴在人与人之间传播；这些较大的液滴接着可停留于感染者附近(例如约6英尺内)的易感个体的上呼吸道的粘膜表面上。传播也可经由与呼吸道分泌物直接接触或间接接触(如触摸被流感病毒污染的表面且接着触摸眼睛、鼻或口腔)而发生。在症状出现前1天至症状开始后约5天内，成人可能将流感传播给其它人。幼儿和免疫系统较弱的人可在症状发作后10天或更多天仍具传染性。

流感病毒为正粘液病毒科的RNA病毒，所述正粘液病毒科包括五个属：A型流感病毒属、B型流感病毒属、C型流感病毒属、传染性鲑鱼贫血症病毒(Isavirus)属和托高土病毒(Thogoto virus)属。

A型流感病毒属可引起季节性流感和大流行性流感流行。其具有一个物种，A型流感病毒，且野生水鸟为多种A型流感的天然宿主。偶尔，病毒会传播至其它物种且接着可在家禽中引起破坏性爆发或产生人类流感大流行。A型病毒为三种流感类型的中最具毒性的人类病原体，且引起最严重的疾病。A型流感病毒可基于抗体对这些病毒的反应再分为不同的血清型。按已知人类大流行性死亡的数目排序的人类中已确认的血清型为：H1N1(其于1918年引起西班牙流感)、H2N2(其于1957年引起亚洲流感)、H3N2(其于1968年引起香港流感)、H5N1(2007至2008年流感季节的大流行性威胁)、H7N7(其为潜在的大流行性威胁)、H1N2(存在于人类和猪中的地方病)、H9N2、H7N2、H7N3和H10N7。

B型流感病毒属可引起季节性流感，且具有一种物种，B型流感病毒。B型流感几乎完全感染人类且不如A型流感普遍。已知易受B型流感感染影响的唯一一种其它动物为海豹。此类型的流感以相比A型慢2至3倍的速率突变，且因此基因多样性较低，仅具有一种B型流感血清型。由于此抗原多样性缺乏，通常在早期获得对B型流感的一定程度的免疫性。然而，B型流感充分突变使得持续免疫性不可能。抗原变化的此降低速率结合其受限宿主范围(抑制交叉物种抗原转移)确保不会发生B型流感的大流行。

C型流感病毒属具有一个物种，C型流感病毒，其感染人类和猪且可引起严重疾病和局部流行。然而，C型流感不如其它类型普遍，且似乎通常引起儿童的轻度疾病。

各血清型和属的流感病毒的结构极其类似。流感病毒基因组由八个单股RNA组成，所述单股RNA包装成不同大小的棒状结构，称为核糖核蛋白复合物(RNP)。各RNP含有独特病毒RNA、骨架核蛋白的多个拷贝和由PA、PB1和PB2次单元组成的异源三聚病毒聚合酶，所述异源三聚病毒聚合酶催化病毒基因组的转录和复制。流感聚合酶复合物的近期生物化学和结构研究提供对通过流感聚合酶的夺帽(cap-snatching)和RNA合成的机理理解的见解。简单来说，PB2端帽结合域首先结合于其5'端帽而隔离宿主前体mRNA。PA，核酸内切酶次单元，接着分解端帽下游的所捕捉前体mRNA 10-13核苷酸。PB2次单元随后旋转约700以将加帽引物导引至PB1聚合酶活性位点中。PB1次单元与PB2和PA次单元直接相互作用。这些次单元在不同流感病毒株中含有高度保守域，且作为有吸引力的抗流感药物目标而被吸引。除聚合酶复合物以外，流感基因组编码其自身神经氨酸酶(NA)、血球凝集素(HA)、核蛋白(NP)、基质蛋白M1与M2和非结构蛋白NS1与NS2。NA为抗病毒药物奥司他韦(oseltamivir)(Tamiflu)和扎那米韦(zanamivir)(Relenza)的目标。这些药物为抑制NA的酶活性，从而减缓后代病毒自感染细胞释放的唾液酸类似物。

流感归因于生产力丧失和相关医疗治疗而产生直接成本，且由于防治性措施而产生间接成本。在美国，流感每年造成总共超过100亿美元的成本，而据估计未来的大流行可引起数千亿美元的直接和间接成本。防治性成本也较高。全世界政府已花费数十亿美元来为潜在的H5N1禽流感大流行做准备和计划，其中成本与购买药物和疫苗以及进行灾难演习和发展针对改良边境管制的策略相关联。

用于流感的当前治疗选项包含疫苗接种和使用抗病毒药物进行化学疗法或化学预防。使用流感疫苗进行针对流感的疫苗接种通常推荐用于高风险群组，如儿童和老年人，或患有哮喘、糖尿病或心脏病的人。然而，有可能接种后仍患上流感。所述疫苗各季节针对几个特殊流感病毒株进行重新调配，但可能无法包含在所述季节在世界范围内有效感染人群的所有病毒株。制造商花费约六个月调配且生产应对季节性流行所需的数百万剂量；偶尔，新颖或被忽略的病毒株在那期间变得突出且感染已经接种的人群(如2003至2004流感季中的H3N2福建流感)。也可能恰巧在疫苗接种之前感染，且感染所述疫苗应预防的特定病毒株，因为疫苗需要约两周才能起效。

此外，这些流感疫苗的有效性多变。由于病毒的高突变率，特定流感疫苗通常提供不超过几年的保护。针对某一年调配的疫苗在下一年可能无效，因为流感病毒随时间推移而快速变化，且不同的病毒株成为主导。

由于不存在RNA改正酶，流感vRNA的RNA依赖性RNA聚合酶大致每一万个核苷酸(其为流感vRNA的大致长度)产生一次核苷酸插入错误。因此，几乎每一新制造的流感病毒均为突变型抗原漂移。将基因组分离成vRNA的八个独个别区段允许当超过一个病毒株感染单个细胞时混合或再配vRNA。所得病毒遗传学的迅速变化产生抗原转移且允许病毒感染新颖宿主物种且快速克服保护性免疫。

抗病毒药物也可用以治疗流感，其中NA抑制剂尤其有效，但病毒可对批准的NA抗病毒药物产生耐药性。此外，已充分证明了多重耐药性大流行性A型流感病毒的出现。耐药性大流行性A型流感变成重大公共卫生威胁。除耐药性A型流感病毒以外，NA抑制剂经批准用于治疗早期流感感染(流感症状发作48小时内)。

因此，仍需要用于治疗流感感染的药物，如具有延长治疗窗户和/或对病毒滴度的降低敏感性的药物。

发明内容

本公开一般涉及治疗流感的方法，抑制流感病毒的复制的方法，减少流感病毒的量的方法，可用于此类方法的化合物和组合物。

在一个方面中，本公开提供式A、B和C的化合物和其药学上可接受的盐：

其中：

Z

Z

Z

X为-C(R

其中当X为-N(R

R

R

R

每个R

每个R

R

每个R*独立地为：i)-H；ii)C

每个J独立地选自由以下组成的组：卤素、氰基、羟基、氧代基、-NH

L为(C

每个R

每个Y独立地选自C

m为0、1、2或3；

q为0、1、2或3，且如果X不为-C(R

r和s中的每一个为0、1、2或3；且r+s为1至6。

在一些情况下，化合物为式1至13的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

X为-C(R

每个Q独立地为N、CH或C*，其中*指示L基团的连接点且仅一个Q为C*；且n独立地为1、2、3或4。

在一些情况下，化合物或其医药盐具有结构

其中

Het/Ar为C

L为C

R

-NH(C

在一些情况下，化合物或其医药盐具有式

其中R"为-H或C

在一些情况下，化合物或其医药盐具有式

其中R"为-H或C

进一步提供向生物样品或患者施用安全且有效量的如本文所公开，例如如由式A、B或C或式1至13表示的化合物的方法。

本文还提供通过向生物样品或患者施用安全且有效量的如本文所公开，例如如由式A、B或C或式1至13中的任一个表示的化合物而减少所述生物样品或患者的流感病毒的量的方法。

进一步提供治疗或预防患者的流感的方法，其包括向所述患者施用安全且有效量的如本文所公开，例如如由式A、B或C或式1至13表示的化合物。

还提供药物组合物，其包括如本文所公开，例如如由式A、B或C、或式1至13中的任一个表示的化合物，或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载剂、佐剂或媒剂。

还提供本文所述化合物的用途，其用于抑制生物样品或患者的流感病毒的复制，用于减少生物样品或患者的流感病毒的量，或用于治疗患者的流感。

本文进一步提供本文所述化合物的用途，其用于制造用于治疗患者的流感的药剂，用于减少生物样品或患者的流感病毒的量，或用于抑制生物样品或患者的流感病毒的复制。

本文公开化合物和这些化合物在抑制流感病毒中的用途。本公开的一个方面一般涉及本文所述化合物或药学上可接受的盐或包括此类化合物或其药学上可接受的盐的药学上可接受的组合物的用途，其用于抑制生物样品或患者的流感病毒的复制，用于减少生物样品或患者的流感病毒的量(降低病毒滴度)和用于治疗患者的流感。

本公开提供式A、B或C、或式1至13的化合物，或其药学上可接受的盐：

Z

Z

Z

X为-C(R

其中当X为-N(R

R

R

R

每个R

每个R

R

每个R*独立地为：i)-H；ii)C

每个J独立地选自由以下组成的组：卤素、氰基、羟基、氧代基、-NH

L为(C

每个R

每个Y独立地选自C

m为0、1、2或3；

q为0、1、2或3，且如果X不为-C(R

r和s中的每一个为0、1、2或3；且r+s为1至6。

在一些情况下，化合物具有下式中的一个的结构：

或其药学上可接受的盐，其中：

X为-C(R

每个Q独立地为N、CH或C*，其中*指示L基团的连接点且仅一个Q为C*；和

n独立地为1、2、3或4，且所有剩余取代基如对于式A、B或C中的一个所描述。

在一些实施例中，本文所述化合物可具有下式中的一个：

其中R"为-H或C

在本文所述式的实施例中，未示为连接至结构中的特定位置的侧链部分L应理解为在任何开放位置连接。

在一些实施例中，式7至13的化合物不包含侧链，即L＝H。

侧链部分L可具有下式中的一个：

-CH

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-C

-芳基/杂芳基-U；

-芳基/杂芳基-C

-芳基/杂芳基-C

-芳基/杂芳基-C

-芳基/杂芳基-C

-芳基/杂芳基-C

U选自由以下组成的组：H、C

其中，所述烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基和环烷基部分可任选地经一至三个(例如1、2或3个)选自由以下组成的组的取代基取代：羟基、C

代表性侧链部分L可包含侧链S1至S57：

在一些实施例中，对于式A、B或C、或式1至13中的任一个，Z

在一些实施例中，对于式A、B或C、或式1至13中的任一个或其药学上可接受的盐：R

在一些实施例中，本文所述化合物可具有下式：

其中Het/Ar为C

在一些实施例中，Het/Ar为吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、三唑基、呋喃基、吡喃基、噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、嘌呤基、苯基或萘基。在一些实施例中，Het/Ar为吡啶基或苯基。在一些实施例中，Het/Ar为吡啶基。

在一些实施例中，L为C

在一些实施例中，本文所述化合物可具有下式：

其中R"为-H或C

在一些实施例中，本文所述化合物可具有下式：

其中R"为-H或C

应理解，每个变量的值的选择为使得形成稳定或化学上可行的化合物的那些选择。

涵盖的特定化合物包含下表中的化合物。显示特定立体异构中心的化合物指示至少相对立体异构，且可指绝对立体异构。不指示特定立体异构的具有手性中心的化合物指示所述手性中心处的立体异构中心的混合物。

所述化合物可为表A中所列的化合物或其药学上可接受的盐。

表A

本文所述化合物或其药学上可接受的盐可用以降低生物样品(例如感染的细胞培养物)或人类(例如患者的肺病毒滴度)的病毒滴度。

如本文所用，术语“流感病毒介导的症状”、“流感感染”或“流感”可互换使用以意指由流感病毒感染引起的疾病。

流感为由流感病毒引起的影响鸟类和哺乳动物的传染病。流感病毒为正粘液病毒科的RNA病毒，所述正粘液病毒科包括五个属：A型流感病毒属、B型流感病毒属、C型流感病毒属、传染性鲑鱼贫血症病毒属和托高土病毒属。A型流感病毒属具有一种物种，A型流感病毒，其可根据抗体对这些病毒的反应再分为不同血清型：H1N1、H2N2、H3N2、H5N1、H7N7、H1N2、H9N2、H7N2、H7N3、H7N9和H10N7。B型流感病毒属具有一种物种，B型流感病毒。B型流感几乎完全感染人类且不如A型流感普遍。C型流感病毒属具有一种物种，C型流感病毒，其感染人类和猪且可引起重度疾病和局部流行。然而，C型流感病毒不如其它类型普遍，且似乎通常引起儿童的轻度疾病。

在一些实施例中，流感或流感病毒与A型或B型流感病毒相关联。在一些实施例中，流感或流感病毒与A型流感病毒相关联。在一些特定实施例中，A型流感病毒为H1N1、H2N2、H3N2、H7N9或H5N1。

在人类中，流感的共同症状为发冷、发热、咽炎、肌肉疼痛、严重头痛、咳嗽、虚弱和浑身不适。在更严重情况下，流感引起肺炎，其可致命，尤其对于幼儿和老年人来说。尽管其通常与感冒混淆，但流感为严重得多的疾病且由不同病毒类型引起。流感可引起恶心和呕吐，尤其对于儿童，但这些症状更多的为不相关的胃肠炎的特征，其有时被称为“胃部流感(stomach flu)”或“24小时流感”。

流感的症状可在感染之后一至两天十分突然地出现。通常，第一症状为发冷或畏寒，但发热在感染早期也是普遍的，其中体温范围为38℃至39℃(约100℉至103℉)。许多人病情严重以致卧床数天，其全身疼痛不适，所述疼痛不适在其背部和腿部较严重。流感的症状可包含：全身疼痛(尤其关节和咽喉)、极端寒冷和发热、乏力、头痛、眼部刺激流泪、眼部发红、皮肤(尤其面部)红肿、口腔红肿、咽喉红肿和鼻部发红、腹痛(患B型流感的儿童)。流感的症状并非特异性的，而是与许多病原体迭加的(“流感类疾病)。通常，需要实验室数据以确认诊断。

术语“疾病”、“病症”和“症状”可在本文中互换使用以指流感病毒介导的医学或病理学症状。

如本文所用，术语“个体”和“患者”可互换使用。术语“个体”和“患者”是指动物(例如，如鸡、鹌鹑或火鸡的鸟类，或哺乳动物)，确切地说，“哺乳动物”包含非灵长类动物(例如牛、猪、马、羊、兔、天竺鼠、大鼠、猫、狗和小鼠)和灵长类动物(例如猴、黑猩猩和人类)，且更确切地说为人类。在一些实施例中，个体为非人类动物，如家畜(例如马、牛、猪或羊)，或宠物(例如狗、猫、天竺鼠或兔)。在一个优选实施例中，个体为“人类”。

如本文所用，术语“生物样品”包含(但不限于)细胞培养物或其提取物；由哺乳动物所获得的活检材料或其提取物；血液、唾液、尿液、粪便、精液、泪液或其它体液或其提取物。

如本文所用，术语“抑制流感病毒的复制”包含减少病毒复制的量(例如减少至少10％)与完全遏制病毒复制(即100％减少病毒复制的量)。在一些实施例中，流感病毒的复制抑制至少50％、至少65％、至少75％、至少85％、至少90％或至少95％。

流感病毒复制可通过所属领域中已知的任何适合的方法测量。举例来说，可测量生物样品(例如感染的细胞培养物)或人类(例如患者的肺病毒滴度)的流感病毒滴度。更确切地说，对于基于细胞的分析，在细胞经体外培养的每种情况下，在存在或不存在测试药剂的情况下将病毒添加至培养物，且在适合的时间长度后评估病毒依赖性端点。对于典型分析，可使用适于流感病毒株A/Puerto Rico/8/34的Madin-Darby犬肾细胞(MDCK)和标准组织培养物。可使用的第一类细胞分析视感染的目标细胞的死亡，即被称作细胞病变效应(CPE)的过程而定，其中病毒感染引起细胞来源的耗竭和细胞的最终溶解。在第一类细胞分析中，微量滴定板的孔中的较小部分细胞感染(通常1/10至1/1000)，使病毒在48至72小时内经历若干轮复制，接着使用细胞ATP含量相较于未感染对照的减小来测量细胞死亡的量。可采用的第二类细胞分析视感染的细胞中的病毒特异性RNA分子的增殖而定，其中使用分支链DNA杂交方法(bDNA)直接测量RNA含量。在第二类细胞分析中，较低数目的细胞最初于微量滴定板的孔中进行感染，使病毒在感染的细胞中复制且传播至额外轮次的细胞，接着所述细胞溶解且对病毒RNA含量进行测量。通常在18至36小时之后提早停止此分析，此时所有目标细胞仍存活。病毒RNA通过杂交至固定于分析板的孔的特异性寡核苷酸探针、接着通过与连接至报告酶的额外探针杂交而扩增信号来定量。

如本文所用，“病毒滴度”或“滴度”为病毒浓度的量度。滴度测试可采用连续稀释以自本身仅评估为正或负的分析型程序获得近似数量信息。滴度对应于仍产生正读数的最高稀释因子；举例来说，前8次连续两倍稀释中的正读数转换为1:256的滴度。特定实例为病毒滴度。为确定滴度，将制备若干稀释液，如10

如本文所用，术语“治疗(treat/treatment/treating)”是指治疗性与预防性治疗。举例来说，治疗性治疗包含通过施用一种或多种疗法(例如一种或多种治疗剂，如本发明的化合物或组合物)降低或改善流感病毒介导的病状的进展、严重程度和/或持续时间，或改善流感病毒介导病状的一种或多种症状(确切地说，一种或多种可辨别的症状)。在特定实施例中，治疗性治疗包含改善流感病毒介导的症状的至少一个可测量物理参数。在其它实施例中，治疗性治疗包含在物理上通过例如稳定可辨别症状、在生理上通过例如稳定物理参数或两者来抑制流感病毒介导的病状的进展。在其它实施例中，治疗性治疗包含减少或稳定流感病毒介导的感染。抗病毒药物可用于社区环境以治疗已患有流感的人群，以降低症状的严重程度且减少其患病的天数。

术语“化学疗法”是指使用例如小分子药物(而非“疫苗”)的药物治疗病症或疾病。

如本文所用，术语“预防”、“预防性”、“预防性用途”和“预防性治疗”是指目的在于预防而非治疗或治愈疾病的任何医学或公共卫生程序。如本文所用，术语“预防(prevent/prevention/preventing)”是指降低患上或显现既定病状的风险，或降低或抑制并未不适但已成为或可能接近成为带病人员的个体的复发或所述病状。术语“化学预防”是指使用例如小分子药物(而非“疫苗”)的药物治疗病症或疾病。

如本文所用，预防性用途包含在已检测到爆发的情形下使用，以预防感染在处于严重流感并发症的高风险下的大量人群彼此紧密接触的场所(例如医院病房、日托中心、监狱、养老中心等)的接触传染或传播。其还包含在需要保护以免患发生流感但在疫苗接种后并未获得保护(例如归因于较弱免疫系统)的人群的中的使用，或在疫苗对其不可用时或在其由于副作用无法获得疫苗时的使用。其还包含在疫苗接种后两周内或在疫苗接种之后但在疫苗有效之前的任何时段期间的使用。预防性用途还可包含治疗并未患流感或不认为具有并发症高风险的人，以降低感染流感且将其传染给与其紧密接触的高风险的人(例如医疗保健工作人员、养老中心工作人员等)的机会。

如本文所用且根据美国疾病控制中心(United States Center for DiseaseControl；US CDC)，流感“爆发”定义为在彼此接近的人群中(例如在辅助生活设施的同一区域中，在同一家庭中等)于48至72小时时段内发生的急性发热性呼吸道疾病(AFRI)相对于正常先前技术速率的急剧提高或当所分析的群体中的任何个体测试为流感阳性时。通过任何测试方法确认的流感的一种情况视为爆发。

如本文所用，“指示病例(index case)”、“原发病例(primary case)”或“零号患者(patient zero)”为流行病研究的群体样品中的首个患者。指示病例为指示爆发存在的第一个患者。可能发现更早的病例，且将其标记为原发、继发、三发等。

在一些实施例中，本发明的方法为针对易患由流感病毒的感染引起的并发症的患者(确切地说人类)的防治性或预防性措施。本文所述的预防性方法可在已确认指示病例或爆发的情形下使用，以防止感染在社区或人群的其余部分中传播。

在一些实施例中，本发明的方法作为预防性措施应用于社区或人群的成员，确切地说人类，以防止感染传播。

如本文所用，“有效量”是指足以引发所需生物反应的量。在本发明中，所需生物反应为抑制流感病毒的复制，减少流感病毒的量或降低或改善流感病毒感染的严重程度、持续时间、进展或发作，预防流感病毒感染的加快，预防与流感病毒感染相关联的症状的复发、显现、发作或进展，或增强或改良针对流感感染使用的另一疗法的预防性或治疗效果。向个体施用的化合物的精确量将视施用模式、感染的类型和严重程度和个体的特征(如一般健康状况、年龄、性别、体重和对药物的耐受性)而定。所属领域的技术人员将能够根据这些和其它因素判定适当的剂量。当与其它抗病毒剂共同施用时，例如当与抗流感药物共同施用时，第二药剂的有效量将视所用药物的类型而定。安全量为具有极小副作用的量，如所属领域的技术人员可容易确定的量。批准药剂的适合的剂量为已知的且可由所属领域的技术人员根据个体的病状、所治疗病状的类型和所用的本文所述化合物的量进行调整。在未明确地标注量的情况下，应假设安全且有效的量。举例来说，本文所述化合物可以约0.01至100毫克/千克体重/天之间的剂量范围向个体施用以用于治疗性或预防性治疗。

如本文所用，本文所述化合物或组合物的“安全且有效的量”为不在患者中引起过度或有害副作用的化合物或组合物的有效量。

一般来说，给药方案可根据各种因素进行选择，所述因素包含：所治疗的病症和病症的严重程度；采用的特定化合物的活性；采用的特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和膳食；采用的特定化合物的施用时间、施用途径和排泄率；个体的肾和肝功能；和采用的特定化合物或其盐、治疗的持续时间；与采用的特定化合物组合或同时使用的药物；以及医学领域中熟知的类似因素。所属领域的技术人员可容易确定和开立用于治疗、预防、抑制(完全或部分)或遏止疾病进展所需的本文所述化合物的安全且有效量。

本文所述化合物的剂量可在约0.01至约100毫克/千克体重/天、约0.01至约50毫克/千克体重/天、约0.1至约50毫克/千克体重/天或约1至约25毫克/千克体重/天之间的范围内。应理解，每天的总量可以单次剂量施用，或可以多次给药施用，如一天两次(例如每12小时)、一天三次(例如每8小时)或一天四次(例如每6小时)。

对于治疗性治疗，可在症状(例如鼻塞、咽喉痛、咳嗽、疼痛、乏力、头痛和发冷/盗汗)的发作的例如48小时内(或40小时内、或小于2天、或小于1.5天或24小时内)向患者施用本文所述化合物。治疗性处理可持续任何适合的持续时间，例如持续5天、7天、10天、14天等。对于社区爆发期间的预防性治疗，本文所述化合物可例如在指示病例中的症状发作2天内向患者施用，且可持续任何合适的持续时间，例如持续7天、10天、14天、20天、28天、35天、42天等。

本文所述化合物或其药学上可接受的盐可单独或与额外适合的治疗剂，例如抗病毒剂或疫苗组合施用。当采用组合疗法时，安全且有效的量可使用第一量的如本文所公开的化合物，例如式A、B或C的化合物中的任一个或式1至13中的任一个或其药学上可接受的盐，和第二量的额外适合的治疗剂(例如抗病毒剂或疫苗)获得。

在本公开的一些实施例中，本文所述化合物或其药学上可接受的盐和额外治疗剂各以安全且有效的量施用(即各以如果单独施用则治疗有效的量)。在一些实施例中，化合物和额外治疗剂各以单独不提供治疗效果的量(低于治疗剂量)施用。在一些实施例中，化合物可以安全且有效的量施用，而额外治疗剂以低于治疗剂量施用。在一些实施例中，化合物可以低于治疗剂量施用，而额外治疗剂，例如适合的癌症治疗剂以安全且有效的量施用。

如本文所使用，术语“组合疗法”、“组合”和“共同施用”或“共施用”可互换使用以指使用多于一种疗法(例如一种或多种预防剂和/或治疗剂)。所述术语的使用不限制向个体施用的疗法(例如预防剂和/或治疗剂)的次序。

共施用可涵盖以基本上同时的方式，如以单一药物组合物形式，例如具有固定比率的第一量和第二量的胶囊或片剂，或以多个各自的个别胶囊或片剂形式施用组合的第一量和第二量的化合物。另外，此类共施用还可涵盖以任一次序以依序方式使用各化合物。

在一些实施例中，本公开涉及组合疗法用于使用本发明的化合物或药物组合物抑制生物样品或患者的流感病毒复制或治疗或预防患者的流感病毒感染的方法。因此，本文所述的药物组合物还包含包括如本文所述的流感病毒复制的抑制剂与展现抗流感病毒活性的抗病毒化合物的组合的那些药物组合物。

使用方法还包含用本文所述化合物或用本文所公开的化合物与其它抗病毒药剂的组合进行化学疗法和用流感疫苗进行疫苗接种的组合。

当共同施用涉及个别施用第一量的如本文所述化合物和第二量的额外治疗剂时，在足够接近的时间内施用化合物和药剂，以具有所需治疗效果。举例来说，可产生所需治疗效果的各施用之间的时段的范围可在数分钟至数小时之间，且可考虑到各化合物的特性(如效力、溶解度、生物可用性、血浆半衰期和动力学概况)来判定。举例来说，如本文所述化合物和第二治疗剂可彼此在约24小时内、彼此在约16小时内、彼此在约8小时内、彼此在约4小时内、彼此在约1小时内或彼此在约30分钟内以任何次序施用。

更确切地说，第一疗法(例如预防剂或治疗剂，如本发明化合物)可在向个体施用额外治疗剂(例如抗病毒药剂或流感疫苗)之前(例如之前5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)、同时或之后(例如之后5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)施用。

应理解，共同施用第一量的如本文所述化合物和第二量的额外治疗剂的方法可产生增强或协同治疗效果，其中组合效果大于由个别施用第一量的如本文所述化合物和第二量的额外治疗剂产生的累加效果。

如本文所用，术语“协同”是指本发明化合物和另一疗法(例如预防剂或治疗剂)的组合，其比所述疗法的累加效果更有效。疗法的组合(例如预防剂或治疗剂的组合)的协同效果可允许使用较低剂量的疗法中的一种或多种和/或较不频繁地向个体施用所述疗法。能够利用较低剂量的疗法(例如预防剂或治疗剂)和/或较不频繁地施用所述疗法可降低与向个体施用所述疗法相关联的毒性而不降低所述疗法在预防、处理或治疗病症方面的功效。另外，协同效果可使得药剂在预防、处理或治疗病症方面的功效改良。最后，疗法的组合(例如预防剂或治疗剂的组合)的协同效果可避免或降低与任一单独疗法的使用相关联的不利或不合需要的副作用。

当使用本发明化合物的组合疗法与流感疫苗组合时，可施用两种治疗剂以使得各施用之间的时段可更长(例如数天、数周或数月)。

协同效果的存在可使用用于评定药物相互作用的适合的方法来判定。适合的方法包含例如Sigmoid-Emax方程式(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.，《临床药物动力学(Clin.Pharmacokinet)》6:429-453(1981))、Loewe相加方程式(Loewe,S和Muischnek,H.,《实验病理学和药理学档案(Arch.Exp.Pathol.Pharmacol.)》114:313-326(1926))和中效方程式(Chou,T.C.和Talalay,P.，《酶调节进展(Adv.Enzyme Regul.)》22:27-55(1984))。上文提及的各方程式可应用于实验数据以产生有助于评定药物组合的效果的对应图表。与上文提及的方程式相关联的对应图表分别为浓度-效果曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

本文所述化合物可预防性地结合抗流感疫苗施用。这些疫苗可例如经由皮下或鼻内施用来施用。经由皮下注射进行疫苗接种通常在血清中诱导具有中和活性的IgG抗体，且对于预防病状发展成如肺炎和类似者的更严重病状极其有效。然而，在作为感染位点的上呼吸道粘膜中，IgA为主要预防组分。由于IgA并不通过皮下施用诱导，故其对于经由鼻内途径施用疫苗也可能是有利的。

各种其它化合物可与本文所述化合物组合使用以治疗或预防流感感染。批准的化合物包含神经氨酸酶(NA)抑制剂、离子通道(M2)抑制剂、聚合酶(PB1)抑制剂和其它流感抗病毒剂。

存在用于对抗流感病毒的三种FDA批准的流感抗病毒药物，包含

神经氨酸酶(NA)抑制剂为阻断神经氨酸酶的一类药物。其通常用作抗病毒药物，因为其通过透过自宿主细胞出芽而防止流感病毒的繁殖来阻断流感病毒的病毒神经氨酸酶的功能。代表性神经氨酸酶抑制剂包含奥司他韦

也可使用M2抑制剂。基质-2(M2)蛋白质为质子选择性离子通道蛋白质，整体处于A型流感病毒的病毒包膜中。

抗流感病毒药物金刚胺为M2 H+通道的特异性阻断剂。金刚烷胺(aminoadamantane)(包含金刚胺和金刚乙胺)已因病毒耐药性而广泛地被舍弃，但组合疗法可减轻这些药剂抗性的发展，因为对一种活性剂变得具有抗性的病毒仍可由组合疗法中的其它药剂治疗。

流感RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)的抑制剂包含法匹拉韦(favipiravir)和PCT WO2013/138236中所述的化合物。Muratore等人，《美国科学院院报(PNAS)》,109(16),6247-6252(2012年4月)中所公开的额外化合物包含以下：

可与本文所述化合物共同施用的特定实例包含：神经氨酸酶抑制剂，如奥司他韦

本文所述化合物可适用作生物样本或患者的流感病毒复制的抑制剂。这些化合物还可适用于减少生物样品或患者的流感病毒的量(病毒滴度)。其还可适用于生物样品或患者的由流感病毒引起的感染的治疗性和预防性治疗。

本公开还提供制备本文所述化合物的方法。在一些实施例中，所述方法涉及制备由式1-13表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本文所述化合物的合成可使用一种或多种骨架简化。举例来说，下式中的一者的骨架可与适当官能化的嘧啶环反应以形成包含连接至嘧啶环的氮杂吲哚的核心结构。

本公开还提供制备本文所述化合物的方法。本文所述化合物和其医药盐和前药都包含共同核心，所述共同核心包含与嘧啶环偶合的氮杂吲哚环。在一些实施例中，具有适当取代模式以提供本文所述化合物的这些两个环系统可使用下文所述化学物质偶合。

在一些实施例中，所述方法包括以下步骤：使前体A：

与前体B或B1反应：

以形成由式I1表示的化合物(中间物，或式1化合物的“I”)：

可使用除钾盐外的其它盐且可使用种离去基(LG)中的任一个，包含甲苯磺酸酯基、4-硝基苯磺酸酯基、溴苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基等。

前体B和B1的代表性实例包含以下：

这些式中的变量(Z

在所属领域中，例如在PCT WO 2005/095400和PCT WO 2007/084557中关于二氧杂硼戊环与氯-嘧啶的偶合已知的任何适合的反应条件均可用于前体(A)与(B或B1)之间的反应。举例来说，前体(A)与(B或B1)之间的反应可在存在Pd(PPh

可置换式I1化合物上的离去基以得到式1化合物：

在合成式I1化合物的一些实施例中，合成包含使前体C1或C2与经适当取代的环己胺(即经N(R

流程B

在一些实施例中，离去基为甲苯磺酸酯基，且将甲苯磺酸酯基“去甲苯磺酰化”以产生式(IA)的中间物。可采用所属领域中已知的用于脱除Ts基团的保护的任何适合的条件。特定例示性条件描述于实施例中。去甲苯磺酰化可产生结构式(IA)的化合物，其中R

前体(A)、(B)、(B1)、(C1)、(C2)和经适当取代的环己胺可通过所属领域中已知的任何适合的方法制备。特定例示性合成方法描述于以下实施例中。

可使用类似的化学物质制备式2至11的化合物。下文提供适合用于流程B中的前体的列表：

或者，我们可使用中间物Int-11的结构的化合物以制备中间物Int-12的结构的化合物

从Int-12，我们可通过与式L-X-C(O)-Cl化合物在适当酰胺化条件下反应来制备式1化合物(通常涉及将三烷基胺用作质子海绵)。

从Int-12，我们可通过与经适当取代的氮杂环戊烷-C(O)Cl或氮杂环己烷-C(O)Cl化合物在适当酰胺化条件下反应来制备式2至3的化合物。

从Int-12，我们可通过与经适当取代的四氢异喹啉-C(O)Cl在适当酰胺化条件下反应来制备式4至5的化合物。

从Int-12，我们可通过与经适当取代的吡啶-C(O)Cl、嘧啶-C(O)Cl或吡嗪-C(O)Cl在适当酰胺化条件下反应来制备式8至9的化合物。

从Int-12，我们可通过与经适当取代的氮杂萘-C(O)Cl在适当酰胺化条件下反应来制备式10至13的化合物。

本文所述化合物可具有不对称中心且以外消旋体、外消旋混合物、个别非对映异构体或对映异构体形式存在，其中所有异构体形式均包含在本发明中。具有手性中心的本文所述化合物可以光学活性和外消旋形式存在且分离。一些化合物可展现多形现象。本公开涵盖具有本文中所述的适用特性的本文所述化合物的外消旋、光学活性、多晶型或立体异构形式或其混合物。光学活性形式可通过例如用再结晶技术拆分外消旋形式、通过自光学活性起始物质合成、通过手性合成、或通过使用手性固定相的色谱分离或通过酶促拆分来制备。我们可纯化对应化合物，接着衍生化所述化合物以形成本文所述化合物或纯化所述化合物本身。

可使用所属领域中已知的任何方法制备化合物的光学活性形式，包含(但不限于)通过用再结晶技术拆分外消旋形式、通过自光学活性起始物质合成、通过手性合成或通过使用手性固定相色谱分离。

获得光学活性物质的方法的实例至少包含以下。

i)

ii)

iii)

iv)

v)

vi)

vii)

viii)

ix)

x)

xi)

xii)

xiii)

一个实施例中使用手性色谱，包含(但不限于)模拟移动床色谱。多种手性固定相为市售的。

出于本公开的目的，化学元素根据元素周期表(Periodic Table of theElements),CAS版本,《化学和物理手册(Handbook of Chemistry and Physics)》,第75版来鉴别。另外，有机化学的一般原理描述于《有机化学(Organic Chemistry)》,ThomasSorrell,《索萨里托大学科学书(University Science Books,Sausalito)》:1999和《马奇的高等有机化学(March's Advanced Organic Chemistry)》,第5版,编者：Smith,M.B.和March,J.，John Wiley&Sons,纽约:2001中，其全部内容以引用的方式并入本文中。

如本文所述，本文所述化合物可任选地经如下文一般所示出或通过本文所述的特定类别、亚类和物种所例示的一个或多个取代基取代。应了解，短语“任选经取代”可与短语“经取代或未经取代”互换使用。一般来说，术语“经取代”无论是否放在术语“任选地”之后皆是指既定结构中的一个或多个氢基团经特定取代基的基团置换。除非另外指明，否则任选经取代的基团可在所述基团的各可取代位置处具有取代基。当既定结构中的超过一个位置可经选自特定群组的超过一个取代基取代时，所述取代基在各位置处可相同或不同。当术语“任选经取代”在一个列表之前时，所述术语是指所述列表中的所有后续可取代基团。如果取代基或结构未经鉴别或定义为“任选经取代”，则所述取代基或结构未经取代。举例来说，如果X为任选经取代的C

如本文所用，短语“至多”是指零或等于或小于短语后的数字的任何整数。举例来说，“至多3”意指0、1、2和3中的任一个。如本文所述，原子的规定数目范围包含其中的任何整数。举例来说，具有1-4个原子的基团可具有1、2、3或4个原子。

如本文所用，短语“经一个或多个实例取代”指示提及的部分带有至少一个如本文所定义的取代基，如通过经取代的部分的价数所允许。举例来说，经一个或多个J实例取代的6元芳基环(例如苯环)可经1、2、3、4、5和6个J中的任一个取代。

本文中涵盖的取代基的选择和取代基的组合为形成稳定或化学上可行的化合物的那些选择和组合。如本文所用，术语“稳定”是指化合物在经历允许其生产、检测和确切地说其回收、纯化和针对本文中所公开的目的中的一个或多个的使用的条件时基本上不变化。在一些实施例中，稳定化合物或化学上可行的化合物为在不存在水分或其它化学反应条件的情况下在40℃或更低的温度下保持至少一周时基本上不更改的化合物。仅涵盖产生稳定结构的取代基的那些选择和组合。此类选择和组合对于所属领域的技术人员将为显而易见的，且可在无不当实验的情况下确定。

如本文所用，术语“脂族基”或“脂族基团”意指完全饱和或含有不饱和但为非芳族的一个或多个单元的直链(即非分支链)或分支链烃链。除非另外规定，否则脂族基含有1至20个脂族碳原子。在一些实施例中，脂族基含有1至10个脂族碳原子。在其它实施例中，脂族基含有1至8个脂族碳原子。在其它实施例中，脂族基含有1至6个脂族碳原子，且在其它实施例中，脂族基含有1至4个脂族碳原子。脂族基可为直链或分支链、经取代或未经取代的烷基、烯基或炔基。特定实例包含(但不限于)甲基、乙基、异丙基、正丙基、仲丁基、乙烯基、正丁烯基、乙炔基和叔丁基和乙炔。

如本文所用，术语“烷基”意指饱和直链或分支链烃。如本文所用，术语“烯基”意指包括一个或多个双键的直链或分支链烃。如本文所用，术语“炔基”意指包括一个或多个三键的直链或分支链烃。如本文所用，“烷基”、“烯基”或“炔基”中的每一个可任选地如下文所阐述经取代。在一些实施例中，“烷基”为C

术语“环脂族基”(或“环烷基”、“碳环”或“碳环基”或“碳环的”)是指一种非芳族的仅含有碳的环系统，其可为饱和的或含有一个或多个不饱和单元，具有3至14个环碳原子。在一些实施例中，碳原子数为3至12(即C

如本文所用，术语“杂环”(或“杂环基”或“杂环的”或“非芳族杂环”)是指一种非芳族环系统，其可为饱和的或含有一个或多个不饱和单元，具有三个至十四个环原子，其中一个或多个环碳经如N、S或O的杂原子替换。在一些实施例中，环系统可包含3至12个环原子(即3至12元杂环基)。在一些实施例中，非芳族杂环在环内包括至多三个选自N、S和O的杂原子。在其它实施例中，非芳族杂环在环系统内包括至多两个选自N、S和O的杂原子。在其它实施例中，非芳族杂环在环系统内包括至多两个选自N和O的杂原子。所述术语包含单环、双环或多环融合、螺接或桥连杂环系统。所述术语还包含多环系统，其中杂环可与一个或多个非芳族碳环或杂环或一个或多个芳族环或其组合“稠合”，其中基团或连接点处于所述杂环上。杂环的实例包含(但不限于)：哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吡唑啶基、咪唑啶基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、三氮杂环庚烷基、氮杂环辛基、二氮杂环辛基、三氮杂环辛基、噁唑啶基、异噁唑啶基、噻唑啶基、异噻唑啶基、氧氮杂环辛基、氧氮杂环庚烷基、噻氮环庚烷基、噻氮环辛基、苯并咪唑酮基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、N-吗啉基(包含例如3-N-吗啉基、4-N-吗啉基、2-N-硫代吗啉基、3-N-硫代吗啉基、4-N-硫代吗啉基)、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-四氢哌嗪基、2-四氢哌嗪基、3-四氢哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-噻唑啶基、3-噻唑啶基、4-噻唑啶基、1-咪唑啶基、2-咪唑啶基、4-咪唑啶基、5-咪唑啶基、吲哚啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、苯并二硫杂环戊烷基、苯并二噻烷基、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮基和1,3-二氢-咪唑-2-酮基。

如本文所用，术语“芳基”是指单环芳族基团，如苯基。除非另外指明，否则芳基在环中可具有6至14个碳原子，如在环中具有6至10个碳原子(即C

单独或在“杂芳烷基”或“杂芳基烷氧基”中作为较大部分的一部分使用的术语“杂芳基(heteroaryl)”、“杂芳族的”、“杂芳基环”、“杂芳基(heteroaryl group)”、“芳族杂环”或“杂芳族基团”是指具有五至十四个成员的杂芳族环基团，包含单环杂芳族环和多环芳族环，其中单环芳族环与一个或多个其它芳族环稠合。杂芳基在芳族环中具有一个或多个选自氮、氧和硫的环杂原子。如本文所用，杂芳基环可具有5至14个环原子，如5至10个环原子(即5至10元杂芳基)。本文所用的术语“杂芳基”的范围内还包含芳族环与一个或多个非芳族环(碳环或杂环)“稠合”的基团，其中基团或连接点处于芳族环上。如本文所用，例如双环6.5杂芳族环为与第二五元环稠合的六元杂芳族环，其中基团或连接点处于六元环上。杂芳基的实例包含吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基或噻二唑基，包含例如2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噁二唑基、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、3-吡唑基、4-吡唑基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-哒嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-三唑基、5-三唑基、四唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、吖啶基、苯并异噁唑基、异噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、嘌呤基、吡嗪基、1,3,5-三嗪基、喹啉基(例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)和异喹啉基(例如1-异喹啉基、3-异喹啉基或4-异喹啉基)。

如本文所用，“环”、“环状”、“环基”或“环状部分”包含单、二和三环状环系统、桥连双环系统和螺环系统，包含环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基或其组合，其各自先前已进行定义。

如本文所用，“桥连双环系统”是指其中环经桥连的双环杂环脂族环系统或双环脂族环系统。桥连双环系统的实例包含(但不限于)金刚烷基、降冰片烷基、双环[3.2.1]辛基、双环[2.2.2]辛基、双环[3.3.1]壬基、双环[3.2.3]壬基、2-氧杂-双环[2.2.2]辛基、1-氮杂-双环[2.2.2]辛基、3-氮杂-双环[3.2.1]辛基和2,6-二氧杂-三环[3.3.1.03,7]壬基。桥连双环系统可任选经取代。

如本文所用，术语“螺接”是指具有在两个环之间作为唯一共同原子的一个原子(通常第四碳)的环系统。

术语“环原子”为如C、N、O或S的原子，其位于环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基的环中。

“可取代环原子”为可键结至氢原子但键结至除氢原子外的部分的环碳或氮原子。因此，术语“可取代环原子”不包含两个环稠合时共用的环氮或碳原子。另外，“可取代环原子”在结构描绘其已连接至除氢外的部分时不包含环碳或氮原子。

除非在本文中另外陈述，否则术语“杂原子”意指氧、硫、氮、磷或中的一种或多种。

如本文所用，术语“芳烷基”是指连接至烷基链的芳基环，且“芳烷氧基”是指连接至烷氧基链的芳基环。任选经取代的芳烷基可在烷基与芳基部分上经取代。除非另外指明，否则如本文所用，任选经取代的芳烷基在芳基部分上任选经取代。

在一些实施例中，脂族或杂脂族基或非芳族杂环可含有一个或多个取代基。脂族或杂脂族基团或非芳族杂环的饱和碳上的适合的取代基选自上文，例如J的定义中所列的那些取代基。其它适合的取代基包含列为适用于碳环芳基或杂芳基的不饱和碳的那些取代基，且另外包含以下：＝O、＝S、＝NNHR*、＝NN(R*)

在一些实施例中，非芳族杂环的氮上的任选的取代基包含上文，例如J的定义中所用的那些取代基。其它适合的取代基包含-R

在一些实施例中，芳基或杂芳基可包括一个或多个(例如1、2或3个)取代基。适合的取代基包含：卤素；-R°；-OR°；-SR°；1,2-亚甲二氧基；1,2-亚乙二氧基；任选地经R°取代的苯基(Ph)；任选地经R°取代的-O(Ph)；任选地经R°取代的-(CH

在环氮上经取代且在环碳原子处连接至分子的其余部分的非芳族含氮杂环称为经N取代的。举例来说，N烷基哌啶基在哌啶基环的两个、三个或四个位置处连接至分子的其余部分且在环氮处经烷基取代。于环氮上经取代且在第二环氮原子处连接至分子的其余部分的如吡嗪基的非芳族含氮杂环称为N'取代的-N-杂环。举例来说，N'-酰基N-吡嗪基在一个环氮原子处连接至分子的其余部分且在第二环氮原子处经酰基取代。

如上文所详述，在一些实施例中，两个独立出现的R°(或R

应了解，多种其它环可在两个独立出现的R°(或R

在一些实施例中，烷基链可任选地间杂有另一原子或基团。此意指烷基链的亚甲基单元任选地经所述另一原子或基团置换。此类原子或基团的实例包含(但不限于)每个式后的变量的定义中所列的那些原子或基团。举例来说，侧链中的亚甲基可经以下置换：-NR

如本文所用，“氨基”是指-NR

如本文所用，“酰胺基”在末端使用时涵盖N(R

如本文所用，“酰基”是指甲酰基或R

如本文所用，“羧基”在用作端基时是指-COOH、-COOR

如本文所用，单独或结合另一基团使用的由术语羧基涵盖的“烷氧基羰基”是指如(烷基-O)-C(O)-的基团。

如本文所用，“羰基”是指-C(O)-。

如本文所用，“氧代基”是指＝O。

如本文所用，如本文所用的术语“烷氧基”或“烷基硫基”是指如先前所定义经由氧(“烷氧基”，例如-O-烷基)或硫(“烷硫基”，例如-S-烷基)原子连接至分子的烷基。

如本文所用，术语“卤基”、“卤基”和“卤”意指F、Cl、Br或I。

如本文所用，术语“氰基”或“腈”是指-CN。

术语“烷氧基烷基”、“烷氧基烯基”、“烷氧基脂族基”和“烷氧基烷氧基”意指任选地可经一个或多个烷氧基取代的烷基、烯基、脂族基或烷氧基。

术语“卤烷基”、“卤烯基”、“卤脂族基”和“卤烷氧基”意指视任选地可经一个或多个卤素原子取代的烷基、烯基、脂族基或烷氧基。此术语包含全氟烷基，如-CF

术语“氰基烷基”、“氰基烯基”、“氰基脂族基”和“氰基烷氧基”意指任选地可经一个或多个氰基取代的烷基、烯基、脂族基或烷氧基。在一些实施例中，氰基烷基为(NC)-烷基-。

术语“氨基烷基”、“氨基烯基”和“氨基烷氧基”意指任选地可经一个或多个氨基取代的烷基、烯基或烷氧基，其中氨基如上文所定义。在一些实施例中，C

术语“羟基烷基”和“羟基烷氧基”意指任选地可经一个或多个-OH基团取代的烷基或烷氧基。

术语“烷氧基烷基”和“烷氧基烷氧基”意指任选地可经一个或多个烷氧基取代的烷基或烷氧基。举例来说，“烷氧基烷基”是指一种烷基，如(烷基-O)-烷基-，其中烷基如上文所定义。

术语“羧基烷基”意指经一个或多个羧基取代的烷基，其中烷基和羧基如上文所定义。

在一些实施例中，针对本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的氨基中的每一个独立地为-NH

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的酰胺基中的每一个独立地为-NHC(O)(C

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的氨基烷基中的每一个独立地为经一个或多个独立地选自由以下组成的组的氨基取代的C

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的氨基烷氧基中的每一个独立地为-O(C

在一些实施例中，对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的氨基中的每一个独立地为-NH

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的羧基中的每一个独立地为-C(O)O(C

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的酰胺基中的每一个独立地为-NHC(O)(C

对于本文所公开的式(例如式A、B或C或式1至13)的变量的描述中提及的氨基烷基中的每一个独立地为经一个或多个独立地选自由以下组成的组的氨基取代的C

如本文所用，术语“保护基(protecting group)”和“保护基(protective group)”可互换且是指用以暂时阻断具有多个反应性位点的化合物中的一个或多个所需官能团的药剂。在某些实施例中，保护基具有一个或多个或确切地说所有以下特征：a)以良好产率选择性添加至官能团，得到b)对于在其它反应性位点中的一个或多个处发生的反应稳定的经保护基质；和c)可通过不攻击再生的脱除保护基的官能团的试剂以良好产率选择性地去除。如所属领域的技术人员所了解，在一些情况下，试剂不攻击化合物中的其它反应性基团。在其它情况下，所述试剂也可与化合物中的其它反应性基团反应。保护基的实例详述于Greene,T.W.、Wuts,P.G的《有机合成中的保护基(Protective Groups in OrganicSynthesis)》，第三版，John Wiley&Sons,纽约:1999(和所述书籍的其它版本)中，其全部内容以引用的方式并入本文中。如本文所用，术语“氮保护基”是指用以暂时阻断多官能化合物中的一个或多个所需氮反应性位点的药剂。优选的氮保护基也具有以上保护基所例示的特征，且某些例示性氮保护基还详述于Greene,T.W.、Wuts,P.G的《有机合成中的保护基》，第三版，第7章，John Wiley&Sons,纽约:1999中，其全部内容以引用的方式并入本文中。

如本文所用，术语“可移位部分”或“离去基”是指与如本文所定义的脂族基或芳族基相关联且通过亲核试剂的亲核攻击经历移位的基团。

除非另外指明，否则本文中所描绘的结构也打算包含结构的所有异构(例如对映异构、非对映异构、顺反异构、构形异构和旋转异构)形式。举例来说，除非仅特异性地绘制一种异构体，否则本发明中包含各不对称中心的R和S组态、(Z)和(E)双键异构体和(Z)和(E)构形异构体。

因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构、非对映异构、顺/反异构、构形异构和旋转异构混合物属于本发明的范围内。

除非另外指明，否则本文所述化合物的所有互变异构形式均在本发明的范围内。

另外，除非另外指明，否则本文所描绘的结构还打算包含仅在存在一个或多个经同位素增浓的原子的方面不同的化合物。举例来说，除了氢经氘或氚置换或碳经

术语“一键”和“不存在”可互换使用以指示基团不存在。

本文所述化合物在本文中通过其化学结构和/或化学名称定义。在通过化学结构与化学名称提及化合物且化学结构与化学名称冲突时，化学结构决定化合物的身分。

本文所述化合物可以游离形式或在适当时以盐形式存在。药学上可接受的那些盐尤其受关注，因为其适用于施用下文所述的用于医疗用途的化合物。非药学上可接受的盐适用于制造过程以达到分离和纯化目的，且在一些个例中，用于分离本文所述化合物或其中间物的立体异构形式。

如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指合理医疗判断范围内适合用于接触人类和低等动物的组织而无不当副作用(如毒性、刺激、过敏反应和类似者)且与合理益处/风险比相当的化合物的盐。

药学上可接受的盐在所属领域中已熟知。举例来说，S.M.Berge等人在以引用的方式并入本文中的《医药科学杂志(J.Pharmaceutical Sciences)》,1977,66,1-19中详细描述药学上可接受的盐。本文所述化合物的药学上可接受的盐包含衍生自适合的无机酸和碱以及有机酸和碱的那些盐。可在化合物的最终分离和纯化期间就地制备这些盐。

在本文所述化合物含有碱基或足够碱性的生物电子等排物体的情况下，酸加成盐可通过1)使呈其游离碱形式的纯化化合物与适合的有机或无机酸反应和2)分离因此形成的盐来制备。实际上，酸加成盐可为供使用的更适宜形式，且所述盐的使用相当于游离碱形式的使用。

药学上可接受的无毒酸加成盐的实例为氨基与无机酸(如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸)或有机酸(如乙酸、草酸、顺丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、丁二酸或丙二酸)形成的盐，或通过使用所属领域中所用的其它方法(如离子交换)形成的盐。其它药学上可接受的盐包含己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、羟乙酸盐、葡糖酸盐、羟乙酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、柳酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。

在本文所述化合物含有羧基或足够酸性的生物电子等排物体的情况下，碱加成盐可通过1)使呈其酸形式的纯化的化合物与适合的有机或无机碱反应和2)分离因此形成的盐来制备。实际上，碱加成盐的使用可为更适宜的，且所述盐形式本身的使用相当于游离酸形式的使用。衍生自适当碱的盐包含碱金属(例如钠、锂和钾)、碱土金属(例如镁和钙)、铵和N

碱加成盐包含药学上可接受的金属盐和胺盐。适合的金属盐包含钠、钾、钙、钡、锌、镁和铝。钠盐和钾盐通常为优选的。在适当时，其它药学上可接受的盐包含使用如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳数烷基磺酸根和芳基磺酸根的相对离子形成的无毒铵、季铵和胺阳离子。适合的无机碱加成盐由金属碱制备，所述金属碱包含氢化钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化铝、氢氧化锂、氢氧化镁、氢氧化锌等。适合的胺碱加成盐由因其低毒性和医疗用途的可接受性而常用于药物化学的胺制备。氨、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸、胆碱、N,N'-二苯甲基乙二胺、氯普鲁卡因、二乙醇胺、普鲁卡因、N-苯甲基苯乙基胺、二乙胺、哌嗪、三(羟基甲基)-氨基甲烷、氢氧化四甲基铵、三乙胺、二苯甲基胺、二苯羟甲胺、去氢松香胺、N-乙基哌啶、苯甲胺、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、碱性氨基酸、二环己胺等。

其它酸和碱在其本身并非医药学上可接受时可用于制备在获得本文所述化合物和其药学上可接受的酸或碱加成盐时适用作中间物的盐。

应了解，本公开包含不同药学上可接受的盐的混合物/组合，并且还包含呈游离形式的化合物和药学上可接受的盐的混合物/组合。

本文所述化合物可调配成进一步包括药学上可接受的载剂、稀释剂、佐剂或媒剂的药物组合物。在一些实施例中，本发明涉及一种药物组合物，其包括本文所述化合物和药学上可接受的载剂、稀释剂、佐剂或媒剂。在一些实施例中，本公开包含一种药物组合物，其包括安全且有效量的本文所述化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载剂、稀释剂、佐剂或媒剂。药学上可接受的载剂包含例如关于预期施用形式适当选择且符合常规医药惯例的医药稀释剂、赋形剂或载剂。

“有效量”包含“治疗有效量”和“预防有效量”。术语“治疗有效量”是指在治疗和/或改善患者的流感病毒感染方面有效的量。术语“预防有效量”是指在预防和/或基本上减轻流感病毒感染爆发的机会或规模方面有效的量。

药学上可接受的载剂可含有并不过度抑制化合物的生物活性的惰性成分。药学上可接受的载剂应为生物相容的，例如无毒、非炎性、非免疫原性或在向个体施用时无其它不合需要的反应或副作用。可采用标准医药调配技术。

如本文所用的药学上可接受的载剂、佐剂或媒剂包含适用于所需特定剂型的形式的任何溶剂、稀释剂或其它液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、等张剂、增稠或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。《雷明顿氏医药科学(Remington's PharmaceuticalSciences)》,第16版,E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1980)公开用于调配药学上可接受的组合物的各种载剂和其已知制备技术。除非任何常规载剂介质如通过产生任何不合需要的生物效应或另外以有害方式与药学上可接受的组合物的任何其它组分相互作用而与本文所述化合物不相容，否则预期其使用属于本公开的范围内。如本文所用，短语“副作用”涵盖疗法(例如预防剂或治疗剂)的不合需要且不良的作用。副作用始终为不合需要的，但不合需要的作为不一定为不良的。疗法(例如预防剂或治疗剂)的不良作用可为有害的或不适的或有风险的。副作用包含(但不限于)发热、发冷、嗜睡、胃肠道毒性(包含胃和肠溃疡和糜烂)、恶心、呕吐、神经毒性、肾毒性、肾脏毒性(包含如乳头状坏死和慢性间质性肾炎的包含病状)、肝毒性(包含血清肝脏酶含量升高)、骨髓毒性(包含白血球减少症、骨髓抑制、血小板减少症和贫血)、口腔干燥、金属味、妊娠延长、无力、嗜眠、疼痛(包含肌肉疼痛、骨痛和头痛)、脱发、乏力、眩晕、椎体外症状、静坐不能、心血管紊乱和性功能障碍。

可充当药学上可接受的载剂的物质的一些实例包含(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝；卵磷脂；血清蛋白(如人类血清白蛋白)；缓冲物质(如twin 80、磷酸盐、甘氨酸、山梨酸或山梨酸钾)；饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠或锌盐)；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯吡咯烷酮；聚丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物；甲基纤维素；羟丙基甲基纤维素；羊毛脂；糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇或聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原质水；等张生理食盐水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇和磷酸盐缓冲溶液；以及其它无毒性可相容润滑剂，如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁；以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可根据调配者的判断而存在于组合物中。

在一些实施例中，本文所述的药物组合物适用于通过吸入直接经由呼吸道向下呼吸道(例如肺)施用。通过吸入施用的组合物可呈可吸入粉末组合物或液体或粉末喷雾剂形式，且可以标准形式使用粉末吸入装置或气溶胶分配装置来施用。此类装置为熟知的。对于通过吸入施用，粉末状调配物通常包括活性化合物以及惰性固体粉末状稀释剂，如乳糖或淀粉。可吸入干粉组合物可存在于明胶或类似物质的胶囊和药筒或用于吸入器或吹入器的层压铝箔的泡壳中。各胶囊或药筒可通常含有例如约10mg至约100g的各活性化合物。或者，本文所述的组合物可在无赋形剂的情况下呈现。

可吸入组合物可经封装用于单位剂量或多剂量递送。举例来说，组合物可按类似于以下中所述的方式封装以用于多剂量递送：GB2242134、美国专利第6,632,666号、第5,860,419号、第5,873,360号和第5,590,645号(皆说明了“Diskus”装置)；或GB2i78965、GB2129691、GB2169265、美国专利第4,778,054号、第4,811,731号和第5,035,237号(其说明了“Diskhaler”装置)；或者EP 69715(“Turbuhaler”装置)或GB 2064336和美国专利第4,353,656号(“Rotahaler”装置)。

用于通过吸入表面递送至肺的喷雾组合物可调配为水溶液或悬浮液或自加压包装递送的气溶胶，如定剂量吸入器(MDI)，其中使用适合的液化推进剂，包含氢氟烷烃，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷和尤其1,1,1,2-四氟乙烷、1,1,1,2,3,3,3-七氟-正丙烷和其混合物。适用于吸入的气溶胶组合物可以悬浮液或溶液的形式呈现。

通过吸入施用的药物通常具有对照粒度。用于吸入至支气管系统中的最佳粒度通常为约1μm至约10μm，且在一些实施例中，为约2μm至约5μm。具有大于约20μm的粒度的粒子一般过大而在吸入时不能达至较小呼吸道。为达成这些粒度，活性成分的粒子可经历如微米尺寸化的粒径减小处理过程。可通过风选或筛分分离出所需粒度径部分。优选地，所述粒子将为结晶。

鼻内喷雾剂可使用水性或非水性媒剂由添加如增稠剂、缓冲盐或调节pH的酸或碱、等张调节剂或抗氧化剂的药剂来调配。

用于通过雾化吸入的溶液可使用水性媒剂由添加如酸或碱、缓冲盐、等张调节剂或抗微生物剂的药剂来调配。其可通过过滤或在高压釜中加热来灭菌，或以非灭菌产品呈现。雾化器以自调配物水溶液产生的薄雾形式供应气溶胶。

在一些实施例中，本文所述的药物组合物可与补充活性成分一起调配。

在一些实施例中，本文所述的药物组合物自干粉吸入器施用。

在其它实施例中，本文所述的药物组合物通过气溶胶分配装置任选地结合如

载剂可为含有例如水、乙醇、多元醇(例如丙三醇、丙二醇、液体聚乙二醇和类似物)、其适合的混合物和/或植物油的溶剂或分散介质。可例如通过使用如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过维持所要粒度和通过使用表面活性剂来维持适当流动性。本文中所描述的组合物中微生物的作用的预防可通过添加抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等来实现。在许多情况下，优选包含等张剂，例如糖或氯化钠。可通过在组合物中使用延缓吸收剂(例如单硬脂酸铝和明胶)来延长可注射组合物的吸收。

在一些实施例中，本文所述的药物组合物可在控制组合物释放的基质内。在一些实施例中，所述基质可包括：脂质、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚己内酯、聚(乙醇酸)、聚(乳酸)、聚己内酯、聚乳酸、聚酸酐、聚丙交酯-共-乙交酯、聚氨基酸、聚氧化乙烯、丙烯酸封端的聚氧化乙烯、聚酰胺、聚乙烯、聚丙烯腈、聚磷氮烯、聚(原酸酯)、蔗糖乙酸异丁酸酯(SAIB)和其组合，以及例如美国专利第6,667,371号、第6,613,355号、第6,596,296号、第6,413,536号、第5,968,543号、第4,079,038号、第4,093,709号、第4,131,648号、第4,138,344号、第4,180,646号、第4,304,767号、第4,946,931号中所公开的其它聚合物，所述文献中的每一个明确地以全文引用的方式并入本文中。在这些实施例中，所述基质持续释放药物。

药学上可接受的载剂和/或稀释剂还可包含任何溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和/或抗真菌剂、等张剂和吸收延迟剂等。此类介质和药剂用于医药活性物质的用途在所属领域中熟知。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，否则预期将其用于药物组合物中。

本文所述的药物组合物可经调配用于根据常规技术施用。参见例如Remington《药学科学与实践(The Science and Practice of Pharmacy)》(第20版，2000)。举例来说，本公开鼻内药物组合物可调配为气溶胶(此术语包含液体与干粉气溶胶)。如所属领域的技术人员所已知，液体粒子的气溶胶可通过任何适合的手段产生，如使用压力驱动的气溶胶雾化器或超音波雾化器。参见例如美国专利第4,501,729号。固体粒子的气溶胶(例如冻干、冷冻干燥等)可同样使用任何固体微粒药剂气溶胶产生器通过医药领域中已知的技术来产生。作为另一实例，本公开的药物组合物可调配为按需可溶形式，其提供药物组合物的冻干部分和药物组合物的溶解溶液部分。

在本发明的一些实施例中，药物组合物呈水性悬浮液形式，其可由溶液或悬浮液来制备。对于溶液或悬浮液，剂型可包含亲脂性物质、脂质体(磷脂小泡/膜)和/或脂肪酸(例如棕榈酸)的微胞。在特定实施例中，药物组合物为能够溶解于由经施用、应用和/或递送药物组合物的组织的上皮细胞粘膜分泌的流体中的溶液或悬浮液，其宜可增强吸收。

药物组合物可为水溶液、非水溶液或水溶液和非水溶液的组合。

适合的水溶液包含(但不限于)：水凝胶、水性悬浮液、水性微球体悬浮液、水性微球体分散液、水性脂质体分散液、脂质体的水性微胞、水性微乳液和前述的任何组合或可溶解于鼻腔粘膜分泌的流体中的任何其它水溶液。例示性非水溶液包含(但不限于)：非水凝胶、非水性悬浮液、非水性微球体悬浮液、非水性微球体分散液、非水性脂质体分散液、非水性乳液、非水性微乳液和前述的任何组合或可溶解或混合于粘膜分泌的流体中的任何其它非水溶液。

粉末调配物的实例包含(但不限于)：纯粉末混合物、微米化粉末、冷冻干燥粉末、冻干粉末、粉末微球、包衣粉末微球、脂质体分散液和前述的任何组合。粉末微球可由各种多醣和纤维素形成，包含(但不限于)淀粉、甲基纤维素、黄原胶、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、卡波姆(carbomer)、聚乙烯醇海藻酸盐、阿拉伯胶、聚葡萄胺糖和其任何组合。

在特定实施例中，组合物为至少部分或甚至大量(例如至少80％、90％、95％或更多)可溶于粘膜分泌的流体中以便有助于吸收的组合物。或者或另外，组合物可与以下一起调配：促进药剂溶解于分泌物内的载剂和/或其它物质，包含(但不限于)脂肪酸(例如棕榈酸)、神经节苷脂(例如GM-1)、磷脂(例如磷脂酰丝氨酸)和乳化剂(例如聚山梨醇酯80)。

所属领域的技术人员将了解，对于鼻内施用或递送，由于施用的药物组合物的体积一般较小，故鼻分泌物可改变所施用剂量的pH，因为鼻腔中的pH范围可宽达5至8。此类改变可影响可供吸收的未游离化药物的浓度。因此，在代表性实施例中，药物组合物进一步包括缓冲剂以就地维持或调节pH。典型缓冲剂包含(但不限于)抗坏血酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、麸蛋白、碳酸盐和磷酸盐缓冲剂。

在本发明的实施例中，药物组合物的pH经选择以使得粘膜组织的内部环境在施用后处于酸性至中性，其(1)可提供未游离化形式的活性化合物以供吸收，(2)阻止更可能出现于碱性环境中的病原性细菌的生长，和(3)降低黏膜刺激的可能性。

对于液体和粉末喷雾剂或气溶胶，药物组合物可经调配以具有任何适合且所需的粒度或液滴大小。在说明性实施例中，粒子或液滴的大部分和/或平均粒度的范围等于或大于约1、2.5、5、10、15或20微米和/或等于或小于约25、30、40、45、50、60、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400或425微米(包含前述的所有组合)。大部分和/或平均粒度或液滴大小的适合范围的代表性实例包含(但不限于)约5至100微米、约10至60微米、约175至325微米和约220至300微米，其有助于安全且有效量的活性化合物例如在鼻腔中(例如在鼻腔上部三分的一、上鼻道、嗅区和/或通向嗅觉神经通路的鼻窦区中)的沉积。一般来说，小于约5微米的粒子或液滴将沉积于气管或甚至肺中，而为约50微米或更大的粒子或液滴一般不能达至鼻腔且沉积于鼻前部。

国际专利公开案WO 2005/023335(Kurve Technology,Inc.)描述具有适用于实践本公开代表性实施例的直径大小的粒子和液滴。在特定实施例中，粒子或液滴具有约5至30微米、约10至20微米、约10至17微米、约10至15微米、约12至17微米、约10至15微米或约10至12微米的平均直径。所述粒子可“基本上”具有如本文所述的平均直径或大小，即至少约50％、60％、70％、80％、90％或95或更多的粒子具有所指示的直径或大小范围。

本文所述的药物组合物可以具有如上文所述的液滴大小的喷雾化或雾化液体形式递送。

根据包括鼻内递送方法的本公开的特定实施例，可能需要延长药物组合物在鼻腔中(例如在鼻腔上部三分的一、上鼻道、嗅区和/或鼻窦区中)的滞留时间，例如以增强吸收。因此，药物组合物可任选地与以下一起调配：生物粘附聚合物、胶(例如黄原胶)、聚葡萄胺糖(例如高度纯化阳离子多醣)、果胶(或当施用至鼻粘膜时如同凝胶一样稠化或乳化的任何碳水化合物)、微球体(例如淀粉、白蛋白、聚葡萄糖、环糊精)、明胶、脂质体、卡波姆、聚乙烯醇、海藻酸盐、阿拉伯胶、聚葡萄胺糖和/或纤维素(例如甲基或丙基纤维素；羟基或羧基纤维素；羧甲基或羟丙基纤维素)，其为增加在鼻腔中的滞留时间的药剂。作为另一方法，增大调配物的粘度也可提供延长药剂与鼻上皮细胞的接触的手段。药物组合物可调配为鼻乳液、软膏或凝胶，其由于其粘度而提供局部施用的优势。

潮湿和高度血管化的膜可有助于快速吸收；因此，药物组合物可任选地包括保湿剂，尤其在基于凝胶的组合物的情况下，以确保足够的鼻内水分含量。适合的保湿剂的实例包含(但不限于)丙三醇(glycerin/glycerol)、矿物油、植物油、膜调节剂、舒缓剂和/或糖醇(例如木糖醇、山梨糖醇；和/或甘露糖醇)。保湿剂在药物组合物中的浓度将视所选药剂和调配物而变化。

药物组合物还可任选地包含吸收增进剂，如抑制酶活性、降低粘液的粘度或弹性、降低粘膜纤毛清除效应、打开紧密结合和/或溶解活性化合物的药剂。化学增强剂在所属领域中已知且包含螯合剂(例如EDTA)、脂肪酸、胆酸盐、表面活性剂和/或防腐剂。当调配展现较差膜渗透率、缺乏亲脂性和/或由氨基肽酶降解的化合物时，用于渗透的增强剂可尤其适用。吸收增进剂在药物组合物中的浓度将视所选药剂和调配物而变化。

为了延长储存寿命，可任选地将防腐剂添加至药物组合物。适合的防腐剂包含(但不限于)苯甲醇、对羟基苯甲酸酯、硫柳汞、氯丁醇和氯化苯甲烃铵和前述的组合。防腐剂的浓度将视使用的防腐剂、所调配的化合物、调配物等而变化。在代表性实施例中，防腐剂以约2重量％或更小的量存在。

本文所述的药物组合物可任选地含有气味剂，例如如EP 0 504 263B1中所描述，以提供对气味的感觉，以便有助于吸入组合物，从而促进至嗅区的递送和/或通过嗅觉神经元触发传输。

作为另一选项，组合物可包括调味剂，例如以增强味道和/或个体对组合物的可接受性。

在一些实施例中，粒子为多孔的，以使得其具有适当密度以避免在经由吸入器施用时沉积于咽喉后部。相对较大的粒度和相对较低的密度的组合避免肺中的吞噬作用，提供适当靶向的递送，避免组分的全身递送且在肺内提供高浓度的组分。

用于制备此类粒子和用于递送此类粒子的代表性方法描述于以下中：例如标题为“用于经肺递送的粒子组合物(Particulate compositions for pulmonary delivery的)”的美国专利第7,384,649号；标题为“用于经肺递送的粒子组合物(Particulatecompositions for pulmonary delivery)”的美国专利第7,182,961号；标题为“吸入装置和方法(Inhalation device and method)”的美国专利第7,146,978号；标题为“用于吸入的具有持续释放特性的粒子(Particles for inhalation having sustained releaseproperties)”的美国专利第7,048,908号；标题为“稳定喷雾干燥蛋白调配物(Stablespray-dried protein formulations)”的美国专利第6,956,021号；标题为“吸入装置(Inhalation device)”的美国专利第6,766,799号；和标题为“吸入装置和方法(Inhalation device and method)”的美国专利第6,732,732号。

公开此类粒子的额外专利包含：标题为“喷雾干燥多孔大粒子的调配(Formulation for spray-drying large porous particles)”的美国专利第7,279,182号；标题为“使用纯氨基酸形成多孔粒子(Use of simple amino acids to form porousparticles)”的美国专利第7,252,840号；标题为“吸入装置和方法(Inhalation deviceand method)”的美国专利第7,032,593号；标题为“用于生产干燥粒子的方法和装置(Method and apparatus for producing dry particles)”的美国专利第7,008,644号；标题为“生产多孔大粒子的过程湿度的控制(Control of process humidity to producelarge,porous particles)”的美国专利第6,848,197号；和标题为“喷雾干燥多孔大粒子的调配(Formulation for spray-drying large porous particles)”的美国专利第6,749,835号。

标题为“用于吸入的具有持续释放特性的粒子(Particles for inhalationhaving sustained release properties)”的美国专利第7,678,364号公开用于将粒子递送至肺部系统的方法，包括：向需要治疗、预防或诊断的患者的呼吸道施用安全且有效量的干粉，所述干粉包括：a)与治疗剂、预防剂或诊断剂复合的多价金属阳离子，b)药学上可接受的载剂，和c)含多价金属阳离子的组分，其中所述干粉经喷雾干燥且具有为药剂总重量的约10％w/w或更多的多价金属阳离子总量、约0.4g/cm

粒子中存在的本文所述化合物或其盐的量可在约0.1重量％至约95重量％的范围内，尽管在一些情况下，可甚至高达100％。举例来说，约1至约50％，如约5至约30％。药物分布于在整个粒子中的粒子可为优选的。

在一些实施例中，粒子包含除上文所述的磷脂外的表面活性剂。如本文所用，术语“表面活性剂”是指优选吸收至两种不可混溶相之间的界面(如水与有机聚合物溶液之间的界面、水/空气界面或有机溶剂/空气界面)的任何试剂。表面活性剂一般具有亲水性部分和亲脂性部分，使得其在吸收至粒子时易于使各部分达至不吸引类似包衣的粒子的外部环境，因此减少粒子集结。表面活性剂还可促进治疗剂或诊断剂的吸收且提高药剂的生物可用性。

可用于制造本文所述的粒子的适合的表面活性剂包含(但不限于)：十六烷醇；脂肪醇，如聚乙二醇(PEG)；聚氧乙烯-9-月桂醚；表面活性脂肪酸，如棕榈酸或油酸；甘胆酸盐；表面活性肽(surfactin)；泊洛沙姆(poloxamer)；脱水山梨糖醇脂肪酸酯，如脱水山梨糖醇三油酸酯(Span 85)；

表面活性剂可以约0至约5重量％范围内的量存在于粒子中。优选地，其可以约0.1至约1.0重量％范围内的量存在于粒子中。

具有小于约0.4g/cm

本文所述的组合物宜递送至肺，以便在实际或潜在流感感染的位点处提供化合物。此可通过经肺递送经由定剂量吸入器或其它经肺递送装置实现，并且还通过使粒子进入肺中的肺泡周围的微血管床实现。

包含较小单层囊泡的纳米载剂(如脂质体)展示优于用于将药物递送至肺的其它常规方法的若干优势，包含延长的药物释放和细胞特异性靶向药物递送。纳米级药物载剂也可有利于递送水溶性较差的药物，且本文所述化合物中的某些水溶性较差。额外优势包含其提供控制释放、保护以免代谢和降解、降低药物毒性和靶向能力的能力。

脂质体(优选单层囊泡)如通过动态光散射所测量具有小于200nm的大小，且特征优选在于包含化学纯的合成磷脂组成，最优选具有长度至少16个碳的脂族侧链，且含有本文所述化合物中的一种或多种或足以将一定量的其化合物优选递送(即靶向)至肺泡周围的微血管床的其药学上可接受的盐。可例如通过动态光散射使用氦-氖100mW NEC气体激光和Malvern K7027相关器测量囊泡直径，理想地每次产生至少两个或三个测量值以用于各大小判定。

表述“化学纯的磷脂”意指定义基本上不含有害净化部分和引起由其形成的较小单层囊泡(SUV)的聚合的杂质且纯度超过97％的磷脂。优选地，脂质体的直径主要为约50至约160nm，电荷基本上为中性，且并入侧链长度为16至18个碳原子的磷脂。更优选地，脂质体由二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)制备且包含作为囊泡稳定剂的胆固醇(最优选地，量为全部脂质的10％至50％)。

脂质体具有大于体温(即大于37℃)的熔点也可以是有利的。因此，使用纯磷脂，优选饱和且具有至少16个碳、优选16个碳与18个碳之间的碳链长度的磷脂可为有利的。二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)为优选的磷脂。胆固醇有助于稳定脂质体且优选以足以提供脂质体稳定性的量添加。最优选地，脂质体进一步包含聚乙二醇化磷脂，如DSPEPEG。所述方法涉及向患者的血流中引入一定量脂质体，所述脂质体大小小于200nm(优选为单层囊泡)且特征优选在于包含化学纯的合成磷脂，最优选具有长度为至少16个碳的脂族侧链，且含有本文所述化合物或足以将一定量化合物优选递送(即靶向)至肺中肺泡周围的微血管床的其药学上可接受的盐或前药。

本文所述化合物可与也如本文所述的其它抗流感药剂组合。此类额外药剂也可存在于所述脂质体中，可存在于不同脂质体中，或可经由不同途径共同施用。

所述脂质体包含本文所述化合物中的一种或多种或其药学上可接受的盐，且可任选地包含其它抗流感药剂。所述脂质体可通过将磷脂和胆固醇溶解于如氯仿的适当有机溶剂中和蒸发溶剂以形成脂质膜来制备。如果采用离子载体将本文所述的化合物载入脂质体中，则可在蒸发前将离子载体添加至脂质溶液中。接着将干燥脂质膜于适当水相中再水合，所述水相为如磷酸盐缓冲盐水或其它生理学上适当的溶液。水溶性药物或治疗剂可含于水合溶液中，但如果需要远距离装载，则可将如上文所述螯合剂的装载剂添加至水合溶液中以包封于脂质体的内部水空间内。

在添加水合溶液时，不同大小的脂质体自发地形成且包封一部分水相。此后，使脂质体和悬浮水溶液经受如挤压的剪切力、音波处理或根据描述于美国专利第4,753,788号中的方法经由均质机进行的处理；以产生特定大小内的囊泡。

接着可处理脂质体以自悬浮溶液去除不合需要的化合物，例如未包封药物，其可经由如凝胶色谱或超滤的过程实现。

脂质体于干粉气溶胶中用于靶向肺递送的用途描述于例如Willis等人,《肺(Lung)》,2012年6月,190(3):251-262中。一个优点为用于制备脂质体的磷脂与内源性肺表面活性剂类似。

视所治疗感染的严重程度而定，上文所述的化合物和药学上可接受的组合物可经口、经直肠、非经肠、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(作为散剂、软膏或滴剂)、经颊、作为经口或经鼻喷雾、至经肺系统(如通过使用吸入器，如定剂量吸入器(MDI))或其类似途径向人类和其它动物施用。

用于经口施用的液体剂型包含(但不限于)药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物以外，液体剂型可含有：所属领域中常用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂；助溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(详细地说，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、丙三醇、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯；和其混合物。除惰性稀释剂的外，经口组合物还可包含佐剂，如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。

举例来说，可根据已知技术，使用适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂来调配可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮液。无菌可注射制剂也可为于无毒性非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如呈于1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒剂和溶剂中，可采用的有水、林格氏溶液(Ringer's solution)、U.S.P.和等张氯化钠溶液。另外，无菌非挥发性油常规地用作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和的不挥发性油，包含合成的单甘油酯或二甘油酯。另外，使用脂肪酸(如油酸)制备可注射剂。

可例如通过经由细菌截留过滤器过滤或通过并入呈无菌固体组合物形式的灭菌剂将可注射调配物灭菌，所述无菌固体组合物可在即将使用时溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中。

为延长本文所述化合物的作用，通常期望减缓来自皮下或肌肉内注射的化合物的吸收。此可通过使用具有不良水溶性的结晶或非晶形物质的液体悬浮液来实现。化合物的吸收速率则视其溶解速率而定，而溶解速率又可视晶体尺寸和结晶形式而定。或者，通过将化合物溶解或悬浮于油媒剂中来达成非经肠施用的化合物的延迟吸收。可注射积存形式通过在可生物降解聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成化合物的微胶囊基质来制得。视化合物与聚合物的比率和所用的特定聚合物的性质而定，可控制化合物释放速率。其它生物可降解聚合物的实例包含聚(原酸酯)和聚(酸酐)。可注射积存调配物也可通过将化合物包覆于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。

用于经直肠或经阴道施用的组合物特定地为栓剂，其可通过将本文所述化合物与适合的非刺激性赋形剂或载剂，如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，所述赋形剂或载剂在环境温度下为固体，但在体温下为液体且因此在直肠或阴道腔中熔融且释放活性化合物。

用于经口施用的固体剂型包含胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，将活性化合物与以下各者混合：至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载剂，如柠檬酸钠或磷酸二钙；和/或a)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂，如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如丙三醇；d)崩解剂，如琼脂-琼脂，碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，如石蜡；f)吸收促进剂，如季铵化合物；g)润湿剂，如鲸蜡醇和丙三醇单硬脂酸酯；h)吸收剂，如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包括缓冲剂。

也可使用类似类型的固体组合物作为软填充和硬填充的明胶胶囊中的填充剂，所述胶囊使用赋形剂，如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可制备有包衣和外壳，如肠溶包衣和医药调配领域中熟知的其它包衣。其可任选地含有乳浊剂，且也可具有仅在或优选在肠道的某一部分中释放或任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包含聚合物质和蜡。也可使用类似类型的固体组合物作为软填充和硬填充的明胶胶囊中的填充剂，所述胶囊使用赋形剂，如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等。

活性化合物也可呈与一种或多种如上所述的赋形剂的微囊封化形式。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可制备有包衣和外壳，如肠溶包衣、释放控制包衣和医药调配领域中熟知的其它包衣。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀释剂(如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。如在一般实践中，此类剂型也可包括除惰性稀释剂外的其它物质，例如制锭润滑剂和其它制锭助剂，如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包括缓冲剂。其可任选地含有乳浊剂，且也可具有仅在或优选在肠道的某一部分中释放或任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包含聚合物质和蜡。

用于表面或经皮施用本文所述化合物的剂型包含软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴片。活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载剂和如可为所需的任何所需防腐剂或缓冲剂混杂。也涵盖经眼调配物、滴耳剂和滴眼剂属于本公开的范围内。另外，本公开涵盖使用经皮贴片，其具有向身体提供控制递送化合物的附加优点。此类剂型可通过将化合物溶解或分配于适当介质中来制备。也可使用吸收增强剂来增加化合物通过皮肤的通量。速率可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制。

本文中所述的组合物可经口、非经肠、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入式贮器施用。如本文所用，术语“非经肠”包含(但不限于)皮下、静脉内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术。确切地说，组合物是经口、腹膜内或静脉内施用的。

本文所述的组合物的无菌可注射形式可为水性或油性悬浮液。这些悬浮液可根据所属领域中已知的技术使用适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂来调配。无菌可注射制剂也可为无毒非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒剂和溶剂中，可采用的有水、林格氏溶液和等张氯化钠溶液。另外，无菌非挥发性油常规地用作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和的非挥发性油，包含合成的单甘油酯或二甘油酯。脂肪酸(如油酸和其甘油酯衍生物)适用于制备可注射剂，天然药学上可接受的油(如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化形式)也是如此。这些油溶液或悬浮液也可含有长链醇稀释剂或分散剂，如羧甲基纤维素或通常用于调配药学上可接受的剂型(包含乳液和悬浮液)的类似分散剂。其它常用表面活性剂(如Tween、Span和其它乳化剂)或常用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型的生物可用性增强剂也可用于调配的目的。

本文所述的药物组合物可用任何经口可接受的剂型经口施用，所述剂型包含(但不限于)胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液。在用于经口用途的片剂的情况下，常用载剂包含(但不限于)乳糖和玉米淀粉。通常也添加润滑剂，如硬脂酸镁。对于以胶囊形式经口施用，适用的稀释剂包括乳糖和干燥玉米淀粉。当需要水性用于经口使用时，活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。必要时，也可添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。

或者，本文所述的药物组合物可以用于经直肠施用的栓剂形式施用。这些栓剂可通过将药剂与适合的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体且因此将在直肠中熔融以释放药物。此类物质包含(但不限于)可可脂、蜂腊和聚乙二醇。

本文所述的药物组合物也可局部施用，当治疗标靶包含表面施用可容易地接近的区域或器官时尤其如此，所述治疗目标包含眼、皮肤或低位肠道的疾病。易于制备用于这些区域或器官中的每一个的适合的表面调配物。

用于低位肠道的表面施用可以直肠栓剂调配物(参见上文)形式或以适合的灌肠调配物形式实现。也可使用局部经皮贴片。

对于表面施用，药物组合物可以含有悬浮或溶解于一种或多种载剂中的活性组分的适合的软膏形式调配。用于本文所述化合物的表面投药的载剂包含(但不限于)矿物油、液体石蜡脂、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚环氧丙烷化合物、乳化蜡和水。或者，药物组合物可以含有悬浮或溶解于一种或多种药学上可接受的载剂中的活性组分的适合的洗剂或乳膏形式调配。适合的载剂包含(但不限于)矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二醇、苯甲醇和水。

对于经眼用途，药物组合物可调配为于等张pH经调节无菌生理食盐水的微米化悬浮液，或确切地说为于等张pH经调节无菌生理食盐水中的溶液，其具有或不具有防腐剂(如苯扎氯铵)。或者，对于经眼施用，药物组合物可调配于如石蜡脂的软膏中。

用于本文所述方法中的化合物可以单位剂型调配。术语“单位剂型”是指适合以单位剂量形式用于经受治疗的个体的物理离散单元，其中各单元含有经计算以产生所需治疗效应的预定量的活性物质，其任选地与适合的医药载剂结合。单位剂型可用于单一日剂量或多种日剂量(例如每天约1至4次或更多次)中的一者。当使用多种日剂量时，用于各剂量的单位剂型可相同或不同。

本公开参考详述例示性实施例的本文所述的实例更全面地理解。然而，这些实例不应解释为限制本公开的范围。整个本公开的所有引用在此均明确地以引用的方式并入。

具体实施方式

实例

侧链-1

2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酸(侧链-1)

在0℃下向2-(2-乙氧基乙氧基乙-1-醇1(2.68g，20mmol)于1,4-二噁烷(60mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(1.2g，30mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着冷却至0℃，将2-溴乙酸叔丁酯2(7.8g，40mmol)和18-冠醚(250mg)添加至反应混合物中且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用冰冷水(200mL)稀释混合物，用乙醚(2×100mL)萃取。分离的水层用浓HCl(30mL)酸化(pH约2)，且用二氯甲烷(2×250mL)盐水溶液(50mL)萃取，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到呈棕色液体状的纯2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酸

侧链-1(1.5g，7.8mmol，产率39％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇：R

侧链-2

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯(2)

在0℃下向2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙-1-醇1(5.0g，28.05mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(2.28g，57.22mmol)于水(10mL)中的溶液，之后在0℃下添加对甲苯磺酰氯(6.84g，35.90mmol)于THF(10mL)中的溶液。接着使混合物达至室温且搅拌4小时。在起始物质耗尽之后，混合物用水(100mL)淬灭且用乙醚(2×100mL)萃取，用冰冷水(2×25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥，且浓缩，得到呈无色油状的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯2(9.02g，27.16mmol，产率96％)。TLC系统：40％于己烷中的乙酸乙酯，R

2-(2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(3)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯2(6g，18.07mmol)于DMF(15mL)中的搅拌溶液中添加邻苯二甲酰亚胺钾(4.418g，23.85mmol)，接着在110℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，使反应混合物冷却至室温，添加乙醚(50mL)且在室温下搅拌15分钟，过滤，用乙醚洗涤。用1M NaOH溶液(50mL)、水(50mL)、盐水溶液(50mL)洗涤滤液，经Na

2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-2)

向2-(2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮3(500mg，1.62mmol)于乙醇(5mL)中的搅拌溶液中添加水合肼(5mL)且在110℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，使反应混合物冷却至室温，且用甲苯(2×50mL)萃取且用盐水溶液(25mL)洗涤，经Na

侧链-3

2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)-N-甲基乙-1-胺(侧链-3)

在50℃下在密封管中加热4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯1(化合物1的合成报告于侧链-2中)(500mg，1.50mmol)和33％甲基胺于乙醇溶液(3mL)中的搅拌溶液16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，将粗物质溶解于水(25mL)中，且用二氯甲烷(2×50mL)萃取。用盐水溶液(25mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-4

2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙烷-1-硫醇(2)

向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯1(化合物1的合成已报告于侧链-2中)(2.2g，6.626mmol)于乙醇(10mL)、THF(1mL)中的搅拌溶液中添加水合硫化氢钠(3.7g，66.26mmol)且在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，用水(100ml)稀释粗物质，且萃取至乙酸乙酯(2×100mL)中。用盐水溶液(100mL)洗涤有机层，经Na

2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙烷-1-磺酰氯(侧链-4)

在0℃下向2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙烷-1-硫醇2(1.4g，7.21mmol)和硝酸钾(2.41g，18.04mmol)的搅拌溶液中添加硫酰氯(1.5ml)且在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，添加水(200mL)且用DCM(2×200mL)萃取，用盐水溶液(100mL)洗涤有机层，经Na

侧链-5

2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇(2)

在0℃下向2,2'-(乙烷-1,2-二基双(氧基))二乙醇1(50g，333.3mmol)于二氯甲烷(1.5L)中的搅拌溶液中添加二氢吡喃(20g，233.3mmol)和对甲苯磺酸(6.3g，33.33mmol)，且在室温下搅拌4小时。用水(1000mL)稀释反应混合物，且用二氯甲烷(3×800mL)萃取，用盐水(2×200mL)洗涤合并的有机层且经硫酸钠干燥，且浓缩。残余物通过急骤柱色谱(100-200二氧化硅)使用3％于二氯甲烷中的甲醇纯化，得到呈无色油性液体状的2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇2(3g，12.82mmol，10％产率)。TLC系统：15％于二氯甲烷中的丙酮，R

2-(2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(4)

在0℃下向2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇2(2.7g，11.54mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的搅拌溶液中添加NaH(554mg，23.08mmol)，且在室温下搅拌30min。接着在0℃下将2-溴乙酸乙酯3(2.3g，13.84mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液添加至以上反应混合物中，且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰冷水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

2-(2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(侧链-5)

在0℃下向2-(2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯3(550mg，1.7187mmol)于THF:H

侧链-6

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(2)

在0℃下向2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇1(9.5g，40.598mmol，(化合物1的合成报告于侧链-5中))于THF(100mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(3.25g，81.196mmol)和对甲苯磺酰氯(9.3g，48.718mmol)，接着在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽之后，用乙酸乙酯(50mL)稀释混合物且用冰冷水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到呈无色油性液体状的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯2(14g，36.08mmol，粗物质)。TLC系统：70％于石油醚中的乙酸乙酯，R

2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯2(14g，36.08mmol)于DMF(35mL)中的搅拌溶液中添加邻苯二甲酰亚胺钾(8.8g，47.62mmol)，接着在110℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，将反应混合物浓缩，使残余物悬浮于乙醚中且搅拌15分钟，且过滤，用1M NaOH溶液(2×100mL)、水(100mL)和盐水溶液(100mL)洗涤滤液，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到呈黄色油性液体状的2-(2-(2-(2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮3(9g，24.79mmol，产率69％)。TLC系统：40％于石油醚中的乙酸乙酯，R

2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(4)

向2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮3(9g，24.79mmol)于乙醇中的搅拌溶液中添加水合肼(18mL)且在110℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，向粗物质中添加水(100mL)且用甲苯(3×200mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤有机层，经Na

(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(5)

向2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(4)(3.2g，13.7mmol)于THF(30mL)中的搅拌溶液中添加(Boc)

(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(6)

在0℃下向(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯5(2.8g，8.408mmol)于甲醇(30mL)中的搅拌溶液中添加对甲苯磺酸吡锭(1.4g，5.885mmol)且在室温下搅拌16小时。蒸馏出有机溶剂，向粗物质中添加水(100mL)，且用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物经由急骤柱色谱(100-200二氧化硅)使用50％于石油醚中的乙酸乙酯纯化，得到呈无色胶质液体状的(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯6(1.8g，7.229mmol，产率86％)。TLC系统：40％于石油醚中的乙酸乙酯，R

2,2-二甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-酸乙酯(8)

在0℃下用NaH(30mg，1.255mmol)处理(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯6(125mg，0.502mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的搅拌溶液，且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的2-溴乙酸乙酯7(125mg，0.7530mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下于氩气气氛下搅拌混合物16小时。用冰水(50mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。用盐水溶液(20mL)洗涤合并的有机层，经Na

2,2-二甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-酸(侧链-6)

在室温下向2,2-二甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-酸乙酯8(300mg，0.895mmol)于THF:H

侧链-7

2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙醇(2)

在0℃下向2,2'-氧代二乙醇1(25g，235.58mmol)于二氯甲烷(750mL)中的搅拌溶液中添加二氢吡喃(13.8g，164.85mmol)和对甲苯磺酸吡锭(4.48g，23.55mmol)，且在室温下搅拌混合物4小时。用水(600mL)稀释反应混合物，萃取至二氯甲烷(3×250mL)中，用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层，且经硫酸钠干燥且浓缩。残余物通过柱色谱(100-200二氧化硅)使用2％甲醇/二氯甲烷纯化，得到呈淡黄色油性液体状的2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙醇2(7.8g，41.0mmol，产率17％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇，R

3-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(4)

在0℃下向NaH(1.74g，43.42mmol)于THF(70mL)中的搅拌悬浮液中添加2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙醇2(5.5g，28.947mmol)于THF(20mL)中的溶液，且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于THF(10mL)中的3-溴丙酸乙酯3(7.85g，43.42mmol)添加至以上反应混合物中且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰水(200mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

3-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(5)

在0℃下向3-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯4(4.3g，14.827mmol)于甲醇(40mL)中的搅拌溶液中添加对甲苯磺酸吡锭(1.86g，7.413mmol)且在室温下搅拌16小时。减压蒸馏出溶剂，得到残余物，用水(50ml)稀释残余物且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的有机物，经硫酸钠干燥且浓缩。粗残余物通过柱色谱(100-200二氧化硅)使用70％于石油醚中的乙酸乙酯纯化，得到呈淡黄色胶质液体状的3-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯5(2.6g，12.62mmol，产率86％)。TLC系统：70％于石油醚中的乙酸乙酯，R

3-(2-(2-(2-叔丁氧基-2-氧代基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯

在0℃下用NaH(0.35g，14.65mmol)处理3-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯5(2.0g，9.708mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的2-溴乙酸叔丁酯(2.27g，11.65mmol)添加至以上反应混合物，且在室温下在氮气气氛下搅拌3小时。用冰水(50mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用盐水(2×50mL)洗涤合并的有机层且经Na

12-氧代基-3,6,9,13-四氧杂十五烷-1-酸(侧链-7)

向3-(2-(2-(2-叔丁氧基-2-氧代基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯6(600mg，1.875mmol)于二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中添加4N HCl的二噁烷溶液(1mL)，接着在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，用水(50ml)稀释粗物质且萃取至乙酸乙酯(2×30mL)中。用盐水溶液(30mL)洗涤有机层，经Na

2,2-二甲基-4-氧代基-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酸(侧链-8)

在0℃下向3-(2-(2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(200mg，0.625mmol，化合物1的合成报告于侧链-7中)于THF：H

侧链-9

2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(2)

在0℃下向2,2'-((氧基双(乙烷-2,1-二基))双(氧基))双(乙-1-醇)1(10g，51.546mmol)于二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液中添加二氢吡喃(2.8mL，30.6mmol)和对甲苯磺酸(979mg，5.154mmol)，且在室温下搅拌4小时。用水(100mL)稀释反应混合物，用二氯甲烷(3×200mL)萃取，用盐水(2×75mL)洗涤合并的有机层，且经硫酸钠干燥且浓缩。残余物通过急骤柱色谱(100-200二氧化硅)使用2％甲醇/二氯甲烷纯化，得到呈黄色浓稠液体状的2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇2(2.2g，7.913mmol，产率15.4％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇，R

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(3)

在0℃下向2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇2(1g，4.27mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中添加Et

2-(2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(4)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯3(500Mg，1.15mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加邻苯二甲酰亚胺钾(282mg，1.52mmol)，接着在110℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，向反应混合物添加冰水(2×200mL)且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤有机层，经Na

2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-9)

向2-(2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮4(400g，0.98mmol)于乙醇(3mL)中的搅拌溶液中添加水合肼(3ml)且在110℃下搅拌12小时。如TLC指示反应完成后，向反应混合物添加甲苯(10ml)，形成两个层且将两个层分离。用盐水溶液(10mL)洗涤甲苯层，经Na

侧链-10

N-甲基-2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-10)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯1(500mg，1.15mmol，化合物-1的合成报告于侧链-9中)的搅拌溶液中添加33％于乙醇中的MeNH

侧链-11

2,2-二甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十七烷-17-酸乙酯(3)

在0℃下用NaH(240mg，10.04mmol)将(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯1(1g，4.01mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液处理至室温持续30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺中的3-溴丙酸乙酯2(1.1g，6.02mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下于氩气气氛下搅拌16小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的有机层且经Na

3-(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(侧链-11)

在室温下向2,2-二甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十七烷-17-酸乙酯3(310mg，0.888mmol)于二噁烷(1mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的HCl(4M，3mL)且在氩气气氛下搅拌16小时。蒸馏出有机溶剂且与二氯甲烷共蒸馏，得到呈无色液体状的3-(2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯侧链11(260mg，1.044mmol，粗物质)。TLC系统：20％于二氯甲烷中的甲醇，R

侧链-12

3-(2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(3)

在0℃下用NaH(1.3g，53.417mmol)处理2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇1(化合物1的合成报告于侧链-5中)(5g，21.367mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液，且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的3-溴丙酸乙酯2(5.8g，32.05mmol)添加至以上反应混合物，且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

3-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(4)

在0℃下向3-(2-(2-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯3(1g，2.994mmol)于甲醇(10mL)中的搅拌溶液中添加对甲苯磺酸吡锭(376mg，1.497mmol)且在室温下搅拌16小时。减压去除挥发物，添加水(50mL)且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用盐水溶液(30mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥且浓缩，得到呈淡黄色油性液体状的3-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯4(580mg，2.32mmol，产率77％)。TLC系统：5％于二氯甲烷中的甲醇，R

3-(2-(2-(2-(甲苯磺酰基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(5)

在0℃下向3-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯4(580mg，2.32mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(186mg，4.64mmol)且在室温下搅拌15分钟。接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(530mg，2.784mmol)添加至反应混合物，且在室温下搅拌16小时。在根据TLC起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(50mL)稀释反应混合物且用冰冷水(2×40mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩，得到呈淡黄色油性液体状的3-(2-(2-(2-(甲苯磺酰基氧基)乙基)乙基)乙氧基)丙酸乙酯5(750mg，1.856mmol，产率17％)。TLC系统：70％于己烷中的乙酸乙酯；R

5,8,11-三氧杂-2-氮杂十四烷-14-酸乙酯(侧链-12)

将3-(2-(2-(2-(甲苯磺酰基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯5(750mg，1.856mmol)置放于密封管中，溶解于乙醇(5mL)中。在室温下添加含33％于乙醇中的MeNH

侧链-13

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(2)

在0℃下向2,2'-((氧基双(乙烷-2,1-二基))双(氧基))双(乙-1-醇)1(2g，10.30mmol)于二氯甲烷(30mL)中的搅拌溶液中添加氧化银(3.5g，15.46mmol)、对甲苯磺酰氯(2.3g，12.37mmol)、碘化钾(342mg，2.06mmol)。在0℃下搅拌混合物30分钟。在起始物质耗尽之后，混合物经由硅藻土衬垫过滤且用DCM洗涤衬垫若干次。用水、盐水溶液(50mL)洗涤滤液，经硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过柱色谱纯化且用3％于二氯甲烷中的甲醇洗脱，得到呈无色油性液体状的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯2(2.6g，7.471mmol，产率72％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇，R

5,8,11-三氧杂-2-氮杂十三烷-13-醇(3)

在密封管中，在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯2(600mg，1.724mmol)于乙醇(5mL)中的搅拌溶液中添加33％于乙醇中的MeNH

(2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4)

在0℃下向5,8,11-三氧杂-2-氮杂十三烷-13-醇3(2.9g，14.09mmol)于DCM(30mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(3.8mL，28.01mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.2mL，14.09mmol)，接着在室温下搅拌2小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(150mL)稀释混合物，且用冰冷水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过100-200硅胶柱色谱用5％于二氯甲烷中的甲醇洗脱来纯化，得到呈淡棕色液体状的(2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯4(1.8g，5.863mmol，产率42％)。TLC系统：100％乙酸乙酯，R

4-甲基苯磺酸2,2,5-三甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-基酯(5)

在0℃下向(2-(2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯4(1.85g，6.026mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钠(485mg，12.052mmol)和对甲苯磺酰氯(1.63g，7.231mmol)，接着在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，用乙酸乙酯(150mL)稀释混合物且用冰冷水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过100-200硅胶柱色谱用40％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈无色胶质液体状的4-甲基苯磺酸2,2,5-三甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-酯5(2.5g，5.423mmol，产率90％)。TLC系统：70％于石油醚中的乙酸乙酯，R

(2-(2-(2-(2-(1,3-二氧代基异吲哚啉-2-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(6)

在室温下向4-甲基苯磺酸2,2,5-三甲基-4-氧代基-3,8,11,14-四氧杂-5-氮杂十六烷-16-酯5(2.5g，5.423mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加邻苯二甲酰亚胺钾(1.3g，7.049mmol)，接着在110℃下搅拌16小时。使反应混合物冷却至室温，接着添加乙醚(100mL)且搅拌15分钟，过滤。用1M NaOH溶液(50mL)、水(100mL)、盐水溶液(100mL)洗涤滤液，经Na

2-(5,8,11-三氧杂-2-氮杂十三烷-13-基)异吲哚啉-1,3-二酮(侧链-13)

向(2-(2-(2-(2-(1,3-二氧代基异吲哚啉-2-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯6(1.55g，3.555mmol)于二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中添加4N于二噁烷中的HCl(5mL)，接着在室温下搅拌30分钟。浓缩反应混合物，将水(50mL)添加至粗物质中，用碳酸氢钠溶液(100mL)碱化，且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-14

5-(2-乙氧基乙氧基)戊酸乙酯(3)

在0℃下向2-乙氧基乙醇1(500mg，5.555mmol)于四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中添加NaH(267mg，11.11mmol)且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于四氢呋喃(5mL)中的5-溴戊酸乙酯2(1.74g，8.333mmol)添加至以上反应混合物中且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰冷水(50mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的有机层，经Na

5-(2-乙氧基乙氧基)戊酸(侧链-14)

在室温下向5-(2-乙氧基乙氧基)戊酸乙酯3(220mg，1.009mmol)于THF：H

侧链-15

5-(2-乙氧基乙氧基)戊-1醇(3)

在0℃下用60％NaH(4.5g，116.34mmol)处理1,5-戊二醇1(11g，105.76mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的1-溴-2-乙氧乙烷2(12mL，105.76mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下在氩气气氛下搅拌16小时。用冰水(200mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

4-甲基苯磺酸5-(2-乙氧基乙氧基)戊酯(4)

在0℃下向5-(2-乙氧基乙氧基)戊-1醇3(4.6g，26.136mmol)于DCM(45mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(11g，78.40mmol)。在0℃下搅拌混合物10分钟。接着冷却至0℃，添加对甲苯磺酰氯(5.95g，31.36mmol)且向反应混合物中添加DMAP(31mg，0.261mmol)，且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用二氯甲烷(100mL)稀释混合物且用冰冷水(2×50mL)、盐水溶液(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过组合急骤色谱且用35％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈黄色油性液体状的4-甲基苯磺酸5-(2-乙氧基乙氧基)戊酯4(3.9g，11.81mmol，产率45％)。TLC系统：50％于己烷中的乙酸乙酯，R

1-叠氮基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊烷(5)

在室温下向4-甲基苯磺酸5-(2-乙氧基乙氧基)戊酯4(1.4g，4.242mmol)于DMF(15mL)中的搅拌溶液中添加NaN

5-(2-乙氧基乙氧基)戊-1-胺(侧链-15)

在0℃下向1-叠氮基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊烷5(840mg，4.179mmol)于THF：H

5-(2-乙氧基乙氧基)-N-甲基戊-1-胺(侧链-16)

在70℃下搅拌4-甲基苯磺酸5-(2-乙氧基乙氧基)戊酯1(化合物1的合成报告于侧链-15中)(3g，9.090mmol)于1M甲胺于乙醇溶液中的溶液中的溶液(70mL)6小时。如TLC指示反应完成后，蒸发反应混合物且用乙酸乙酯(150mL)稀释。用三乙胺碱化有机层，添加水且用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-17

N-苯甲基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊酰胺(2)

在室温下向5-(2-乙氧基乙氧基)戊酸1(化合物1的合成报告于侧链-14中)(500mg，2.64mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加二异丙基乙胺(1.4mL，7.9mmol)、HATU(2g，5.28mmol)，且搅拌10分钟，接着添加苯甲胺(420mg，3.96mmol)且在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，向反应混合物中添加冰冷水(50ml)且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na

N-苯甲基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊-1-胺(侧链17)

在0℃下向N-苯甲基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊酰胺2(400mg，1.43mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中添加1M硼烷于THF中的溶液(5.7ml，5.73mmol)，且在室温下搅拌混合物4小时。如TLC指示反应完成后，用1ml甲醇、冰水(50ml)谨慎地淬灭过量硼烷且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的有机层且经Na

侧链-18

5-乙氧基戊-1-醇(2)

在0℃下向戊烷-1,5-二醇1(500mg，4.807mmol))于四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中添加NaH(115mg，4.807mmol)且在室温下搅拌1小时。在0℃下将于四氢呋喃(5mL)中的碘乙烷(740mg，4.807mmol)添加至以上反应混合物中，且在60℃下在氮气气氛下搅拌48小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水(20mL)洗涤合并的有机层，经Na

2-(5-乙氧基戊氧基)乙酸叔丁酯(4)

向5-乙氧基戊-1-醇2(500mg，3.7878mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(1.6g，11.363mmol)和2-溴乙酸叔丁酯3(1.85g，9.4697mmol)，接着在80℃下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水溶液(20mL)洗涤合并的有机层，经Na

2-(5-乙氧基戊氧基)乙酸(侧链-18)

向2-(5-乙氧基戊氧基)乙酸叔丁酯4(2g，8.13mmol))于二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加4N于二噁烷中的HCl(15mL)，接着在室温下搅拌4小时。浓缩反应混合物，将水(100ml)添加至粗物质中且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用1N HCl溶液酸化水层达至pH＝2且接着用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-19

5-乙氧基戊-1-醇(2)

在0℃下向NaH(3.8g，96.15mmol)的搅拌悬浮液中添加戊烷-1,5-二醇1(10g，96.15mmol)于THF(100mL)中的溶液，且在室温下搅拌1小时。在0℃下将于THF(50mL)中的碘乙烷(3.7ml，96.15mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下在氩气气氛下搅拌16小时。用冰冷水(200mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。用盐水(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

((2-溴乙氧基)甲烷三苯甲基)三苯(4)

在0℃下向2-溴乙-1-醇3(7g，56mmol)于DCM(175mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(15.5mL，112mmol)和三苯甲基氯，且在室温下搅拌3小时。如TLC指示反应完成后，用水(300ml)稀释反应混合物，且用二氯甲烷(2×200mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

((2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙氧基)甲烷三苯甲基)三苯(5)

在0℃下向NaH(568mg，23.67mmol))的搅拌悬浮液中添加5-乙氧基戊-1-醇2(1.25g，9.469mmol)于DMF(20mL)中的溶液，且在室温下搅拌30分钟。接着在0℃下将于DMF(5mL)中的((2-溴乙氧基)甲烷三苯甲基)三苯4(4.5g，12.31mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下在氩气气氛下搅拌16小时。用冰冷水(200mL)淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙-1-醇(6)

在0℃下向((2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙氧基)甲烷三苯甲基)三苯5(12g，28.70mmol)于二噁烷(60mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的HCl(4N，24mL)，接着在室温下搅拌1小时。如TLC指示反应完成后，浓缩反应混合物，将水(50ml)添加至残余物中，用碳酸氢钠溶液(100mL)碱化且用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

4-甲基苯磺酸2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙酯(7)

在0℃下向2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙-1-醇6(3g，17.04mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(1.3g，34.09mmol)和对甲苯磺酰氯(3.8g，20.45mmol)，至反应混合物中，且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用水(200mL)淬灭反应混合物，且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物经由100-200硅胶柱色谱用20％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈液体状的4-甲基苯磺酸2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙酯7(5.2g，15.75mmol，产率92％)。TLC系统：20％于石油醚中的乙酸乙酯，R

1-(2-叠氮基乙氧基)-5-乙氧基戊烷(8)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙酯7(3.5g，10.60mmol)于DMF(30mL)中的搅拌溶液中添加NaN

2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙-1-胺(侧链-19)

在0℃下向1-叠氮基-5-(2-乙氧基乙氧基)戊烷8(900mg，4.477mmol)于THF：H

侧链-20

2-((5-乙氧基戊基)氧基)-N-甲基乙-1-胺(侧链-20)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙酯1(化合物1的合成报告于侧链-19中)(1g，3.030mmol)于乙醇(3mL)中的搅拌溶液中添加于乙醇中的MeNH

侧链-21

N-苯甲基-2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙-1-胺(侧链-21)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸2-((5-乙氧基戊基)氧基)乙酯1(化合物1的合成报告于侧链-19中)(65mg，0.196mmol)于乙醇(4mL)中的搅拌溶液中添加苯甲胺(63mg，0.5908mmol)，接着在70℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，向粗物质中添加水(50ml)且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用盐水溶液(30mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-22

2-(戊氧基)乙-1-醇(3)

在室温下将金属钠(0.6g，0.025mmol)添加至乙二醇1(5g，0.083mmol)中且在80℃下加热。接着，在相同温度下将1-溴戊烷2(3.7g，0.025mmol)添加至反应混合物中，且持续搅拌反应混合物4小时。过滤混合物以去除无机物质且用冰水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用盐水溶液洗涤有机层，干燥(Na

2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酸(侧链-22)

在室温下向2-(戊氧基)乙-1-醇3(500mg，4.23mmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(0.84g，21.12mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着将2-溴乙酸叔丁酯4(1.3mL，8.47mmol)和18-冠醚(25mg)添加至反应混合物中，且在室温下搅拌18小时。在起始物质耗尽后，用冰冷水(50mL)稀释混合物，用乙醚(2×50mL)萃取。用浓HCl酸化分离的水层(pH约2)且用10％于二氯甲烷中的甲醇混合物(2×100mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥且浓缩，得到呈浓稠棕色液体状的纯2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酸侧链-22(200mg，1.05mmol，产率24％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇，R

侧链-23

2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙-1-醇(3)

向甲基2,2'-氧基双(乙-1-醇)1(10g，66.25mmol)于50％NaOH水溶液(250ml)中的搅拌溶液中添加1-溴戊烷2且在100℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，将水添加至反应混合物(200ml)中且用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。用盐水溶液(200mL)洗涤合并的有机层，经Na

4-甲基苯磺酸2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酯(4)

在0℃下向2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙-1-醇3(4g，22.72mmol)于THF(30mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(1.8g，45.45mmol)于水(10mL)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物15分钟，接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(5.1g，27.27mmol)添加至反应混合物中且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(150mL)稀释混合物且用冰冷水(2×30mL)、盐水溶液(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过100-200目硅胶柱色谱用30％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈棕色液体状的4-甲基苯磺酸2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酯4(5.4g，16.36mmol，产率72％)。TLC系统：70％于石油醚中的乙酸乙酯，R

1-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)戊烷(5)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酯4(2g，6.06mmol)于DMF(20mL)中的搅拌溶液中添加NaN

2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-23)

在0℃下向1-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)戊烷5(1.1g，5.47mmol)于THF：H

侧链-24

N-甲基-2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-24)

在室温下将4-甲基苯磺酸2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酯1(化合物1的合成报告于侧链-23中)(500mg，1.51mmol)添加至于乙醇中的甲胺(1M，5mL)中，接着在80℃下搅拌12小时。如TLC指示反应完成后，蒸发反应混合物，用水(50mL)稀释，用1N HCl酸化(pH约2)，且用乙醚(2×50mL)洗涤。接着用饱和NaHCO

侧链-25

N-苯甲基-2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链25)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(戊氧基)乙氧基)乙酯1(化合物1的合成报告于侧链-23中)(500g，1.515mmol)于DMF(5ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(2g，15.15mmol)和苯甲胺(256mg，2.424mmol)，接着在80℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，向反应混合物中添加冰水(30mL)且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用盐水溶液(30mL)洗涤有机层，经Na

侧链-26

4-甲基苯磺酸十一烷酯(2)

在0℃下向十一烷-1-醇1(2.0g，11.6mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(0.93g，23.2mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(2.65g，13.92mmol)添加至反应混合物中且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(150mL)稀释混合物，且用冰冷水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过100-200目硅胶柱色谱用20％于己烷中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈灰白色固体状的4-甲基苯磺酸十一烷酯2(2.6g，7.97mmol，产率68％)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的甲醇，R

N-甲基十一烷-1-胺(侧链-26)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸十一烷酯2(600mg，1.84mmol)于甲醇(2mL)中的搅拌溶液中添加1M于甲醇中的MeNH

侧链-27

N-苯甲基十一烷-1-胺(侧链-27)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸十一酯1(化合物1的合成报告于侧链-26中)(600mg，1.84mmol)于乙醇(10mL)中的搅拌溶液中添加苯甲胺(0.6mL)，接着在60℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，向粗物质中添加水(20ml)且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用1N HCL溶液(20mL)和饱和NaHCO

侧链-28

(3-(乙氧基甲基)苯基)甲醇(2)

在0℃至室温下用NaH(1.17g，29.197mmol)处理1,3-亚苯基二甲醇(1)(5g，36.496mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液30分钟。在℃下将于THF(10mL)中的碘乙烷(2.3ml，29.197mmol)添加至以上反应混合物中，且在60℃下在氮气气氛下搅拌6小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酸叔丁酯(4)

在0℃下向(3-(乙氧基甲基)苯基)甲醇2(750mg，4.158mmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(542mg，13.55mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟，接着冷却至0℃，添加2-溴乙酸叔丁酯3(1.76g，9.036mmol)和18-冠醚(40mg)，且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(50mL)稀释反应混合物且用冰冷水(50mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过组合急骤色谱纯化且用10％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱，得到呈无色油性液体状的2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酸叔丁酯4(900mg，3.21mmol，产率71.1％)。TLC系统：30％于石油醚中的乙酸乙酯，R

2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酸(侧链-28)

在室温下向密封管中的2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酸叔丁酯4(300mg，1.0714mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的搅拌溶液中添加4M于1,4-二噁烷中的HCl(2.5mL)，接着在回流下搅拌4小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂，将水(50ml)添加至粗物质中且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用盐水溶液(30mL)洗涤有机层，经Na

侧链-29

2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙醇(2)

在0℃下向2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酸叔丁酯1(化合物1的合成报告于侧链-28中)(500mg，1.7857mmol)于THF(10mL)中的搅拌溶液中添加1M于THF中的LiAlH

4-甲基苯磺酸2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酯(3)

在0℃下向2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙醇2(1.1g，5.23mmol)于THF(30mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(0.42g，10.47mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(1.2g，6.28mmol)添加至反应混合物中且在室温下搅拌16小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(100mL)稀释混合物，且用冰冷水(2×50mL)、盐水溶液(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过100-200目硅胶柱色谱纯化且用10％于己烷中的乙酸乙酯洗脱，得到呈无色油性液体状的4-甲基苯磺酸2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酯3(1.6g，4.39mmol，产率84％)。TLC系统：30％于己烷中的乙酸乙酯，R

1-((2-叠氮基乙氧基)甲基)-3-(乙氧基甲基)苯(4)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酯3(1.7g，4.39mmol)于DMF(30mL)中的搅拌溶液中添加NaN

2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙胺(侧链-29)

向1-((2-叠氮基乙氧基)甲基)-3-(乙氧基甲基)苯4(600mg，2.564mmol)于THF:H

侧链-30

2-((3-(乙氧基甲基)苯甲基)氧基)-N-甲基乙-1-胺(侧链-30)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸2-(3-(乙氧基甲基)苯甲氧基)乙酯3(化合物3的合成报告于侧链-29中)(500mg，1.373mmol)于甲醇(3mL)中的搅拌溶液中添加1M于乙醇中的MeNH

侧链-31

2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)乙酸(侧链-31)

在室温下向2-(3-羟基苯基)乙酸1(2.0g，13.157mmol)于10％NaOH溶液(10ml)和DMSO(20ml)中的搅拌溶液中。在室温下搅拌混合物15分钟。接着将1-溴-2-乙氧乙烷2(2.01g，13.15mmol)添加至反应混合物中且在80℃下搅拌4小时。在起始物质耗尽后，用1NHCl溶液(20mL)淬灭混合物且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，且用盐水溶液(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过(100-200目硅胶)柱色谱纯化，且用40％于己烷中的乙酸乙酯洗脱，得到呈灰白色固体状的2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)乙酸侧链-31(520mg，2.32mmol，18％)。TLC系统：100％乙酸乙酯，R

侧链-32

3-(2-乙氧基乙氧基)苯甲醛(3)

在80℃下向3-羟基苯甲醛1(15g，122.9mmol)于DMSO(100mL)和10％NaOH水溶液中的搅拌溶液中逐滴添加于DMSO(50mL)中的1-溴-2-乙氧乙烷2(34mL，307.3mmol)，接着在相同温度下搅拌10小时。如TLC指示反应完成后，将反应混合物倒入1M HCl溶液(200ml)中且用乙醚(2×500mL)萃取。用盐水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经Na

(E)-1-(2-乙氧基乙氧基)-3-(2-硝基乙烯基)苯(4)

在室温下向3-(2-乙氧基乙氧基)苯甲醛(200mg，1.03mmol)于硝基甲烷(0.55mL，10.3mmol)中的搅拌溶液中添加乙酸铵(88mg，1.133mmol)，接着在100℃下搅拌12小时。如TLC指示反应完成后，用水(50ml)稀释反应混合物且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用盐水溶液(20mL)洗涤合并的有机层，经Na

2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)乙-1-胺(侧链-32)

在0℃下向(E)-1-(2-乙氧基乙氧基)-3-(2-硝基乙烯基)苯4(1.25g，5.27mmol)于THF(15mL)中的搅拌溶液中添加于THF中的LAH(1M，26.3mL，26.37mmol)，接着在75℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，用冰水(100mL)稀释反应混合物且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，经Na

侧链-33

2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)-N-甲基乙酰胺(2)

在0℃下向2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)乙酸1(化合物1的合成报告于侧链-31中)(400mg，1.785mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加甲胺盐酸盐(299mg，4.464mmol)、HATU(458mg，2.678mmol)和DIPEA(1.24mL，7.143mmol)，且在室温下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂且向粗残余物中添加水(50ml)且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用盐水溶液(30mL)洗涤合并的有机层，经Na

2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)-N-甲基乙-1-胺(侧链-33)

在0℃下向2-(3-(2-乙氧基乙氧基)苯基)-N-甲基乙酰胺2(165mg，0.696mmol)于THF(2mL)中的搅拌溶液中添加1M BH

侧链-34

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯(2)

在0℃下向2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙-1-醇1(8.5g，47.69mmol)于THF(30mL)中的搅拌溶液中添加于水(10ml)中的NaOH(3.89g，97.415mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(11.63g，61.04mmol)添加至反应混合物中且在室温下搅拌16小时。在根据TLC起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(150mL)稀释混合物且用冰冷水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过100-200目硅胶柱色谱用20％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈棕色液体状的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯2(4g，12.048mmol，产率25％)。TLC系统：40％于石油醚中的乙酸乙酯，R

N-苯甲基-2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙-1-胺(侧链-34)

在室温下向4-甲基苯磺酸2-(2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基)乙酯2(500g，1.506mmol)于DMF(5ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(2g，15.06mmol)和苯甲胺(273mg，2.409mmol)且在80℃下搅拌16小时。反应完成(通过TLC指示)后，将冰水添加至反应混合物(100ml)中且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤有机层，经Na

侧链-35

5-(戊氧基)戊酸乙酯(3)

在0℃下向戊-1-醇1(1.0g，11.36mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液中添加NaH(450mg，11.63mmol)且在室温下搅拌30分钟。在0℃下将于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的5-溴戊酸乙酯2(1.99ml，12.49mmol)添加至以上反应混合物中，且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用氯化铵水溶液淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用盐水(2×50mL)洗涤合并的有机层且经Na

5-(戊氧基)戊酸(侧链-35)

在0℃下向5-(戊氧基)戊酸乙酯(200mg，0.92mmol)于THF:H

侧链-36

5-(戊氧基)戊-1-醇(3)

在0℃下向戊烷-1,5-二醇1(10g，96.153mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(70mL)中的搅拌溶液中添加60％的NaH(4.2g，105.768mmol)且在室温下搅拌1小时。在0℃下将1-溴戊烷(14.5g，96.153mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液添加至以上反应混合物中且在室温下在氮气气氛下搅拌16小时。用冰水淬灭反应混合物且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。用盐水(2×100mL)洗涤合并的有机层且经Na

4-甲基苯磺酸5-(戊氧基)戊酯(4)

在0℃下向5-(戊氧基)戊-1-醇3(4g，22.98mmol)于DCM(40mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(7g，68.94mmol)和DMAP(0.28g，2.298mmol)。在室温下搅拌混合物15分钟。接着冷却至0℃，将对甲苯磺酰氯(6.58g，34.48mmol)添加至反应混合物中且在室温下搅拌1小时。在起始物质耗尽后，用乙酸乙酯(200mL)稀释混合物，且用冰冷水(2×200mL)、盐水溶液(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过组合急骤色谱用10％于己烷中的乙酸乙酯洗脱来纯化，得到呈无色油性液体状的4-甲基苯磺酸5-(戊氧基)戊酯4(6g，18.29mmol，产率80％)。LC系统：20％于己烷中的乙酸乙酯，R

1-叠氮基-5-(戊氧基)戊烷(5)

在室温下向4-甲基苯磺酸5-(戊氧基)戊酯4(4.0g，12.195mmol)于DMF(30mL)中的搅拌溶液中添加NaN

5-(戊氧基)戊-1-胺(侧链-36)

向1-叠氮基-5-(戊氧基)戊烷(5)(2.3g，11.55mmol)于THF:H

侧链-37

N-甲基-5-(戊氧基)戊-1-胺(侧链-37)

在室温下向密封管中的4-甲基苯磺酸5-(戊氧基)戊酯1(化合物1的合成报告于侧链-36中)(6g，18.29mmol)于乙醇(20mL)中的搅拌溶液中添加1M于乙醇中的甲胺(91mL，91.45mmol)，接着在80℃下搅拌16小时。如TLC指示反应完成后，蒸发有机溶剂。向粗残余物中添加水(2×200ml)且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用1％三乙胺水溶液(200mL)、盐水溶液(100mL)洗涤有机层，经Na

实验：

5-氟-3-碘吡啶-2-胺(2)

在0℃下向5-氟吡啶-2-胺(1)(10g，89.28mmol)于2M H

5-氟-3-((三甲基硅烷基)乙炔基)吡啶-2-胺(3)

用氩气使5-氟-3-碘吡啶-2-胺(12g，50mmol)、三甲基硅烷基乙炔(10mL，75mmol)和三乙胺(40mL)于DMF(20mL)中的混合物脱气持续15分钟。接着，添加二氯双(三苯基膦)钯(II)(350mg，0.5mmol)和CuI(280mg，1.5mmol)，将反应混合物加热至50℃且搅拌2小时。在起始物质耗尽后，经由硅藻土衬垫过滤混合物，用乙酸乙酯充分洗涤所述衬垫。用水、盐水溶液洗涤合并的滤液，干燥(无水Na

5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(4)

在室温下向5-氟-3-((三甲基硅烷基)乙炔基)吡啶-2-胺(3)(500mg，2.4mmol)于NMP(5mL)中的搅拌溶液中添加叔丁醇钾(430mg，3.8mmol)。在130℃下搅拌反应混合物2小时。如TLC指示反应完成后，将混合物倒入饱和氯化钠水溶液(50mL)中且用乙醚(3×100mL)萃取。用冰冷水(2×50ml)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥且浓缩以获得呈淡棕色固体状的5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(4)(200mg，1.47mmol，61％)。TLC系统：20％于己烷中的EtOAc，R

3-溴-5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(5)

在0℃下向5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(4.5g，33mmol)于DMF(50mL)中的搅拌溶液中逐份添加NBS(6.4g，36mmol)且静置2小时。如TLC指示反应完成后，将反应混合物倒入冰冷水(100mL)中，过滤沉淀的固体且真空干燥，得到呈淡棕色固体状的3-溴-5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(5)(4.6g，21mmol，64％)。TLC系统：20％于己烷中的EtOAc，R

3-溴-5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(6)

在0℃下向NaH(1.3g，34mmol)于DMF(30mL)中的搅拌悬浮液中添加于DMF中的3-溴-5-氟1H吡咯并[2,3-b]吡啶5(4.6g，21mmol)。在1小时后，在相同温度下缓慢添加p-TsCl(5.7g，30mmol)于DMF(20mL)中的溶液且搅拌2小时。如TLC指示反应完成后，将混合物倒入冰冷水(200mL)中，且过滤沉淀的固体，且干燥，得到呈灰白色固体状的3-溴-5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(6)(6.2g，16mmol，76％)。TLC系统：10％于己烷中的EtOAc，R

5-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶中间物1

在室温下向3-溴-5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶6(1g，2.7mmol)于二噁烷(10mL)中的氩净化溶液中添加双频哪醇根基二硼(2g，8.1mmol)、乙酸钾(0.8g，8.1mmol)和PdCl

三氟(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)硼酸钾(中间物2)

在室温下向5-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(中间物1)(36g，0.086mol)于MeOH(100mL)中的搅拌溶液中添加4.5M KHF

(1S,3R)-N1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)环己烷-1,3-二胺(3)

在0℃下向(1R,3S)-环己烷-1,3-二胺(1)(5g，43mmol)于DMF(40mL)中的搅拌溶液中逐滴添加于DMF(10mL)中的DIPEA(4mL，24mmol)和2,4-二氯-5-氟嘧啶(2)(3.8g，23mmol)。在相同温度下搅拌反应混合物15分钟。在根据TLC起始物质耗尽后(不存在化合物2)，用乙酸乙酯(200mL)稀释混合物且用冰冷水(3×150mL)、盐水溶液(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过柱色谱使用100-200硅胶纯化且用10％于DCM和Et

(1S,3R)-N1-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)环己烷-1,3-二胺(中间物12)

用氩气脱气(1S,3R)-N1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)环己烷-1,3-二胺(3)(3g，12.3mmol)、中间物2(7.3g，18.4mmol)和碳酸钠水溶液(2M，4mL)于1,2-DME(30mL)中的混合物15分钟。接着，添加四(三苯基膦)钯(0.7g，0.6mmol)且在100℃下搅拌混合物16小时。起始物质耗尽后，减压浓缩混合物。粗化合物通过柱色谱使用100-200二氧化硅纯化且用10％于DCM和Et

(R)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在0℃下向(R)-3-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1)(1.437g，7.18mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中逐滴添加于DMF(10mL)中的DIPEA(1.56mL，8.98mmol)和2,4-二氯-5-氟嘧啶(2)(1.0g，5.98mmol)。在室温下搅拌反应混合物16小时。在根据TLC起始物质耗尽后(不存在化合物2)，用乙酸乙酯(50mL)稀释混合物且用冰冷水(3×10mL)、盐水溶液(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥且浓缩。粗化合物通过柱色谱使用100-200硅石纯化且用20％于石油醚中的EA洗脱，得到呈灰白色固体状的(R)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3)(1.6g，4.84mmol，产率81％)。TLC系统：30％于石油醚中的EA，Rf：0.5LCMS(ESI):m/z 330.74(M+H)

(R)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

用氩气脱气(R)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3)(600mg，1.81mmol)、中间物Int-2(1.0g，2.54mmol)和碳酸钠水溶液(2M，3mL)于1,2-DME(12mL)中的混合物15分钟。接着，添加四(三苯基膦)钯(104mg，0.09mmol)且再次用氩气脱气10分钟。在90℃下搅拌反应混合物16小时。起始物质耗尽后，减压浓缩混合物。粗化合物通过柱色谱使用100-200硅石纯化，且用30％乙酸乙酯-石油醚洗脱化合物，得到呈灰白色固体状的(R)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯4(750mg，1.28mmol，产率71％)。TLC系统：30％于石油醚中的EA，Rf：0.5LCMS(ESI):m/z 585.12(M+H)

(R)-5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N-(哌啶-3-基)嘧啶-4-胺盐酸盐

在密封管中放入(R)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4)(300mg，0.51mmol)、乙腈(4mL)和4N于二噁烷中的HCl(2mL)。接着在70℃加热16小时。在起始物质耗尽后，用乙醚湿磨混合物以形成白色沉淀物，将其过滤且进一步用乙醚湿磨，得到呈灰白色固体状的(R)-5-氟-2-(5-氟-1H吡咯并[2,3-b]吡啶-3基)-N-(哌啶-3-基)嘧啶-4-胺盐酸盐(中间物13)(147mg，0.40mmol，产率78％)。TLC系统：10％MeOH-DCM Rf：0.3LCMS(ESI):m/z 331.37(M+1)

(S)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在0℃下向(S)-3-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1)(1.437g，7.18mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中逐滴添加于DMF(2mL)中的DIPEA(1.56mL，8.98mmol)和2,4-二氯-5-氟嘧啶(2)(1.0g，5.98mmol)。在室温下搅拌反应混合物16小时。在根据TLC起始物质耗尽后(不存在化合物2)，用乙醚(75mL)稀释混合物且用冰冷水(3×50mL)、盐水溶液(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到呈白色固体状的(S)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3)(1.670g，5.06mmol，产率84％)。TLC系统：30％于石油醚中的EA，Rf：0.5LCMS(ESI):m/z 331.44(M+1)

(S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

用氩气脱气(S)-3-((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸酯(3)(2.5g，7.57mmol)、中间物2(4.49g，11.36mmol)和碳酸钠水溶液(2M，10mL)于1,2-DME(40mL)中的混合物15分钟。添加四(三苯基膦)钯(0.437g，0.37mmol)且再次用氩气脱气10分钟。在90℃下加热反应混合物16小时。起始物质耗尽后，减压浓缩混合物。粗化合物通过柱色谱使用100-200二氧化硅纯化且用30％乙酸乙酯-石油醚洗脱化合物，得到呈棕色固体状的(S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯4(3.650g，6.25mmol，产率82％)。TLC系统：40％于石油醚中的EtOAc，Rf：0.5LCMS(ESI):m/z 585.48(M+H)

(S)-5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-N-(哌啶-3-基)嘧啶-4-胺盐酸盐

在密封管中添加于乙腈(40mL)中的(S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4)(3.5g，5.99mmol)和4N于二噁烷中的HCl(20mL)。接着在70℃下加热16小时，在起始物质耗尽后，用乙醚湿磨混合物，将沉淀的白色固体过滤且进一步用乙醚湿磨，得到呈灰白色固体状的(S)-5-氟-2-(5-氟-1H吡咯并[2,3-b]吡啶-3基)-N-(哌啶-3-基)嘧啶-4-胺盐酸盐(中间物14)(2.020g，5.51mmol，产率92％)。TLC系统：10％MeOH-DCM Rf：0.3LCMS(ESI):m/z 331.02(M+H)

3-溴-5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2)

在0℃下向5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶1(5.0g，32.89mmol)于丙酮(50mL)中的搅拌溶液中逐份添加NBS(7.02g，39.46mmol)且搅拌2小时。如TLC指示反应完成后，真空浓缩反应混合物。用水(50mL)稀释粗物质且用EtOAc(3×100mL)萃取。用盐水溶液(2×50mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥且浓缩，得到呈淡棕色固体状的3-溴-5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶2(7.0g，30.43mmol，92％)。TLC系统：20％于己烷中的EtOAc，R

3-溴-5-氯-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(3)

在0℃下向NaH(1.4g，58.33mmol)于DMF(30mL)中的搅拌悬浮液中添加于DMF中的3-溴-5-氯1H吡咯并[2,3-b]吡啶2(7.0g，30.43mmol)。在1小时后，在相同温度下缓慢添加p-TsCl(6.3g，33.47mmol)于DMF(20mL)中的溶液且搅拌2小时。反应完成(如TLC指示)后，将混合物倒入冰冷水(200mL)中，过滤沉淀的固体且干燥，得到呈灰白色固体状的3-溴-5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶3(8.5g，22.14mmol，73％)。TLC系统：10％于己烷中的EtOAc，R

5-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(4)

在室温下向3-溴-5-氯-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶3(2.8g，7.29mmol)于DMF(10mL)中的氩净化溶液中添加双频哪醇根基二硼(3.71g，14.58mmol)、乙酸钾(2.14g，21.87mmol)和PdCl

(5-氯-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)三氟硼酸钾(中间物18)

在室温下向5-氯-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶4(9.0g，20.83mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中添加4.5MKHF

(1R,4R)-双环[2.2.2]辛-5-烯-2-甲酸乙酯(2)

在密封管中置放环己-1,3-二烯1(15.0g，187.19mmol)、丙烯酸乙酯(18.74g，187.19mmol)和亚甲基蓝(119mg，0.37mmol)，且在140℃下加热混合物16小时。在起始物质耗尽后，通过分馏(在70℃和0.1mmHg下)得到呈无色油状的(1R,4R)-双环[2.2.2]辛-5-烯-2-甲酸乙酯2(20.0g，111.11mmol，产率59％)。1HNMR符合。TLC系统：5％于石油醚中的EA，R

(1S,4S)-双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸乙酯(3)

在帕尔振荡设备中，向(1R,4R)-双环[2.2.2]辛-5-烯-2-甲酸乙酯2(20.0g，111.11mmol)于EtOH(100mL)中的溶液中添加10％Pd/C(2.0g，10％w/w)。在H

(1S,4S)-双环[2.2.2]辛-2-烯-2-甲酸-乙酯(4)

在0℃向刚新近蒸馏的DIPA(7.68mL，54.94mmol)于THF(50mL)中的搅拌溶液中添加2.5M n-BuLi溶液(于己烷中，19.78mL，49.45mmol)且搅拌30分钟。在-78℃下添加(1S,4S)-双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸乙酯3(5.0g，27.47mmol)于THF(10mL)中的溶液，且在相同温度下搅拌1小时。接着在-78℃下添加PhSeBr(9.724g，41.20mmol)于THF中的溶液，且使其升温至0℃且搅拌30分钟。接着在0℃下依序添加H

2-氯-5-氟-4-(甲硫基)嘧啶

在-30℃下向2,4-二氯-5-氟嘧啶1(5.0g，29.94mmol)于THF(40mL)中的搅拌溶液中添加15％甲硫醇钠的水溶液(15.36mL，32.93mmol)且搅拌2小时。用水(50mL)稀释反应混合物且用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。用盐水溶液(50mL)洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干燥且减压浓缩，得到呈灰白色固体状的2-氯-5-氟-4-(甲硫基)嘧啶2(5.0g，28.08mmol，93％)。TLC系统：5％于石油醚中的EtOAc，Rf：0.6LCMS(ESI):m/z 179.08(M+1)

5-氟-3-(5-氟-4-(甲硫基甲)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶

用氩气脱气2-氯-5-氟-4-(甲硫基)嘧啶2(1g，5.61mmol)中间物2(2.66mg,6.74mmol)和碳酸钠水溶液(2M，5mL)于1,2-DME(25mL)中的混合物15分钟。接着，添加四(三苯基膦)钯(324mg，0.28mmol)且在90℃下搅拌混合物16小时。在起始物质耗尽后，将混合物倒入水(200mL)中，将沉淀的棕色固体过滤且干燥，得到粗物质5-氟-3-(5-氟-4-(甲硫基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶3(2g)和痕量的三苯基膦氧化物，其未经进一步纯化即用于下一步骤。TLC系统：20％于石油醚中的EtOAc，Rf：0.6LCMS(ESI):m/z433.15(M+1)

5-氟-3-(5-氟-4-(甲基亚磺酰基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶和5-氟-3-(5-氟-4-(甲磺酰基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶

在0℃下5-氟-3-(5-氟-4-(甲硫基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶3(300mg，0.69mmol)于二氯甲烷(15mL)中的混合物中逐份添加70％m-CPBA(188mg，0.76mmol)30分钟，接着使达到室温且搅拌4小时。起始物质耗尽后，用饱和氯化铵溶液(50mL)淬灭混合物且用乙酸乙酯(2×50mL)萃取且用盐水溶液(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗化合物通过柱色谱使用100-200二氧化硅纯化，且用20％乙酸乙酯-石油醚洗脱，得到呈灰白色固体状的5-氟-3-(5-氟-4-(甲磺酰基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶中间物20A(90mg)，以及用80％乙酸乙酯-石油醚洗脱，得到呈灰白色固体状的5-氟-3-(5-氟-4-(甲基亚磺酰基)嘧啶-2-基)-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶中间物20(60mg)。两种化合物未经进一步纯化即用于下一步骤中。用于中间物20a的TLC系统：40％于石油醚中的EtOAc，Rf：0.4LCMS(ESI):m/z 433.15(M+1)

目标化合物

2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(3)

在室温下向2,2,2-三氟乙醇1(3.0g，30.00mmol)于甲苯中的搅拌溶液中依序添加2-羟乙基氨基甲酸叔丁酯2(0.97g，6.00mmol)、1,1'-(氮杂二羰基)二哌啶(3.0g，12.00mmol)、三丁基膦(3.0ml，12.00mmol)且在室温下搅拌16小时。减压浓缩反应混合物。粗化合物通过柱色谱(硅胶100-200)纯化，用8％于石油醚中的乙酸乙酯洗脱化合物，得到化合物2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯3(2.0g，8.23mmol，产率27％)。TLC系统：20％乙酸乙酯/石油醚；R

2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙胺盐酸盐(4)

在0℃下向2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(3)(2.0g，8.23mmol)于二噁烷中的搅拌溶液中添加4M于二噁烷中的HCl(5ml)且在室温下于密封管中搅拌16小时。减压浓缩反应混合物。粗化合物通过用乙醚(3×25ml)湿磨纯化，得到化合物2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙胺盐酸盐4(1.4g，6.17mmol，95％)。TLC系统：100％EtOAc；Rf：0.1

2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸(2-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯(5)

在室温下向N-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基)-4-(羟基甲基)吡啶甲酰胺(中间物23)(200mg，0.315mmol)于DMF中的搅拌溶液中添加1,1'-羰基二咪唑(130mg，0.789mmol)且在室温下搅拌1小时。在室温下向反应混合物中添加-(2,2,2-三氟乙氧基)乙胺盐酸盐4(0.11g，0.63mmol)且在60℃下搅拌6小时。添加冰水(20mL)，过滤且干燥，且粗化合物通过柱色谱(硅胶100-200)纯化。化合物用50％EtOAc/石油醚洗脱，得到(2-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲基2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸酯(5)(180mg，0.224mmol，产率72％)。TLC系统：100％EtOAc；Rf：0.5LCMS(ESI):m/z 803.38(M+H)

2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸(2-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯

在0℃下于THF(5.0mL)和水(5.0mL)中的Cpd-5的2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸(2-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯：(180mg，0.22mmol)中添加氢氧化锂(21mg 0.89mmol)且在室温下搅拌48小时。蒸馏出有机溶剂且向粗物质中添加水(5mL)且用硫代硫酸钠水溶液酸化且减压干燥过滤的固体。粗残余物通过制备型HPLC纯化，得到灰白色固体(2-((1R,3S)-3-(5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙基氨基甲酸酯(70mg，0.108mmol，产率48％)。TLC系统：100％EtOAc；Rf：0.4；LCMS(ESI):m/z 649.14(M+H)

4-((4-甲氧基苯甲基氨甲酰氧基)甲基)吡啶甲酸甲酯(3)

在室温下向4-(羟基甲基)吡啶甲酸甲酯1(150mg，0.898mmol)于DMF(2mL)中的搅拌溶液中添加1,1'-羰基二咪唑(291mg 1.796mmol)且在室温下搅拌2小时。向反应混合物中添加(4-甲氧基苯基)甲胺(246mg，1.796mmol)且在70℃下搅拌16小时。反应完成后，向混合物中添加冰水(30mL)且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用冰水(2×20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤分离的有机层，经硫酸钠干燥且减压浓缩以获得粗物质4-((4-甲氧基苯甲基氨甲酰氧基)甲基)吡啶甲酸甲酯3(150mg，粗物质)。粗化合物未经进一步纯化即直接用于下一步骤中。TLC系统：70％乙酸乙酯/己烷；R

4-((4-甲氧基苯甲基氨甲酰氧基)甲基)吡啶甲酸(4)

向4-((4-甲氧基苯甲基氨甲酰氧基)甲基)吡啶甲酸甲酯3(150mg，0.454)于THF:H

4-甲氧基苯甲基氨基甲酸(2-((1S,3R)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯(5)

在0℃下向4-((4-甲氧基苯甲基氨甲酰氧基)甲基)吡啶甲酸(4)(50mg，0.158mmol)于DMF(2mL)中的搅拌溶液中依序添加(1R,3S)-N1-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)环己烷-1,3-二胺(中间物12，对映异构体2(Ent-2))(94mg，0.189mmol)、HATU(120mg，0.316mmol)、DIPEA(0.087mL，0.474mmol)且在室温下搅拌16小时。反应完成后，用冰冷水(20mL)稀释反应混合物且过滤沉淀的固体。此物质通过格雷斯逆相色谱纯化，得到呈灰白色固体状的4-甲氧基苯甲基氨基甲酸(2-((1S,3R)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯(5)(90mg，0.113mmol，产率72％)。TLC系统：100％乙酸乙酯；R

4-甲氧基苯甲基氨基甲酸(2-((1S,3R)-3-(5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯

向4-甲氧基苯甲基氨基甲酸(2-((1S,3R)-3-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲酯(5)(90mg，0.113mmol)于THF:H

目标化合物

N-((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)-4-(羟基甲基)吡啶甲酰胺(中间物23)

在0℃下向4-(羟基甲基)吡啶甲酸1(461mg，3.012mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加二异丙基乙胺(0.8mL，4.518mmol)和HATU(1.14g，3.012mmol)。20分钟后添加(1S,3R)-N1-(5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)环己烷-1,3-二胺(中间物12，对映异构体2(Ent-2))(750mg，1.506mmol)且在室温下搅拌反应混合物16小时。反应完成后，用冰冷水(100mL)稀释混合物且过滤沉淀的固体，得到呈棕色固体状的纯化合物N-((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)-4-(羟基甲基)吡啶甲酰胺(中间物23)(950mg，75％的LCMS纯度)。TLC系统：10％于二氯甲烷中的MeOH；Rf：0.6；LCMS(ESI):m/z 634.31(M+H)

(((2-(((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)羰基)-D-缬氨酸甲酯(3)

在室温下向N-((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)-3-(羟基甲基)苯甲酰胺(中间物23)(100mg，0.157mmol)于DMF中的搅拌溶液中添加1,1'-羰基二咪唑(64mg 0.394mmol)且在室温下搅拌2小时。向反应混合物中添加冰水(30mL)且过滤且干燥，将粗物质溶解于DMF中，添加D-缬氨酸甲酯盐酸盐2(53mg，0.3159mmol)且在70℃下搅拌3小时。反应完成后，用冰水(30mL)稀释混合物，过滤且干燥。粗化合物通过柱色谱纯化，用50％乙酸乙酯/石油醚洗脱化合物，得到化合物(((2-(((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)羰基)-D-缬氨酸甲酯3(65mg，0.082mmol，产率52％)。TLC系统：70％乙酸乙酯/石油醚；Rf：0.6；LCMS(ESI):m/z 791.38(M+H)

(((2-(((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)羰基)-D-缬氨酸

在0℃下向(((2-(((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)羰基)-D-缬氨酸甲酯3(140mg，0.1772mmol)于1,4二噁烷(1.5mL)和水(0.5mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾(39mg，0.708mmol)，接着在室温下搅拌24小时。减压浓缩反应混合物，得到粗化合物，用水(5mL)稀释且用柠檬酸溶液酸化直至pH约6。接着，将沉淀的固体过滤且减压干燥。粗残余物通过制备型HPLC纯化，得到灰白色固体(((2-(((1R,3S)-3-((5-氟-2-(5-氟-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)羰基)-D-缬氨酸(17mg，0.0273mmol，产率15％)。TLC系统：10％于二氯甲烷/乙酸中的甲醇；Rf：0.1；LCMS(ESI):m/z 623.40(M+H)

MDCK细胞(雌性可卡犬肾上皮细胞，ATCC CCL-34)中A型流感(病毒株A/PR/8/34，ATCC VR-95)或B型流感(细胞培养适应病毒株B/Lee/40，ATCC VR-1535)复制后病毒诱发的细胞病变效应(CPE)和细胞存活力的抑制通过XTT染料还原测量(Appleyard等人，《抗生素化学治疗(J Antimicrob Chemother)》1(增刊4):49-53,1975和Shigeta等人《抗菌物和化学疗法(Antimicrob Agents Chemother)》41(7):1423-1427,1997.)。使用补充有10％加热灭活胎牛血清(FBS)、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素、100μg/ml链霉素、1mM丙酮酸钠和0.1mM NEAA的达尔伯克最低必需培养基(Dulbecco's Minimum Essential Medium，DMEM)，以每孔体积100μL使MDCK细胞(每孔1×10

(2)PB2结合分析用于设计用于测定PB2抑制剂的IC50的均相、高通量结合/置换分析。分析的原理回复通过PB2抑制剂实现的来自其复合物的荧光探针(m7GTP类似物)与PB2的竞争性置换。简单来说，将纯化的PB2与荧光m7GTP类似物一起培育，且将测试抑制剂添加至反应混合物中。使用Perkin Elmer Envision来读取荧光m7GTP的置换。性能报告于如下表B中：+++++：IC50，<5μM；++++：IC50，5-25μM；+++：IC50，25-50μM；++：IC50，50-100μM；和+：IC50，>100μM

表B

也比较若干A型流感病毒株的PB2结合分析。IC50值报告于如下表C中：+++++：EC50，<5μM；++++：EC50，5-25μM；+++：EC50，25-50μM；++：EC50，50-100μM；和+：EC50，>100μM，-：未测试。

表C