用于促进脂肪组织中产热的环己烷甲酰胺衍生物
文献发布时间:2023-06-19 11:17:41
技术领域
本发明涉及通过使受影响区域与活化化合物接触来活化脂肪组织的方法,其中脂肪组织在与活化化合物接触时经历产热。本发明还涉及包含治疗有效量的活化化合物的装置。
背景技术
肥胖症已经达到流行性比例,影响着所有年龄层和社会经济群体。据世界卫生组织估计,在2008年20岁及以上的成年人有15亿超重,且超过2亿男性和3亿女性肥胖。据估计到2030年,这些数字增加到21.6亿超重个体和11.2亿肥胖个体。肥胖症是收入损失、活动天数受限、缺勤、工作效率较低(出勤)、生活质量下降、永久残疾、显著的发病率和死亡率,以及寿命缩短的根源。实际上,在2009年,美国和加拿大由于医疗成本、超额死亡率和残疾而造成的超重和肥胖症的总年度经济成本估计为约$3000亿。对肥胖症经济成本的国际研究已经示出,它们占总保健成本的2%至10%。
肥胖症是能量摄取和消耗之间长期不平衡的结果。这导致过剩能量作为脂肪细胞储存,所述脂肪细胞通常表现出肥大(细胞大小增大)和增生(细胞数量增加或脂肪形成)两者。肥胖流行病的产生是由于过度消耗高饱和脂肪和糖的能量密集型食物和体力活动减少的组合。
最近,新的抗肥胖药物大量出现。对抗肥胖药物开发日益增加的关注反映了对该多因素慢性疾病的分子复杂性的不断认识。当今的抗肥胖药物——包括最近五次批准和正在开发中的数种更多药物——致力于食欲抑制或脂肪在胃中吸收(Xenical)的减少作为治疗机制。然而,其他途径已示出在肥胖症中起主要作用。当今,对肥胖症的复杂生物学有更多的信息和更好的理解。通过这种深入理解,该过程中涉及的各种途径,特别是靶标和受体变得透明化。
脂肪细胞是具有多种功能的复杂细胞,这取决于它们的物理位置和生理状态,包括能量的储存(脂肪)、机械(覆盖脆弱器官诸如眼睛的脂肪垫)和适应性产热。此外,最近示出脂肪组织作为全身NAD+生物合成的空间和时间协调的关键决定因素起作用,从而针对营养和环境扰动维持着代谢稳态。因此,脂肪细胞在系统能量和代谢调节中起关键作用。在人类中已描述了三种形式的脂肪细胞即白色、棕色和米色。
白色脂肪细胞储存能量,并且充当分泌执行各种代谢功能的脂肪因子(例如瘦素、脂联素、抵抗素)的主要分泌和内分泌器官。白色脂肪细胞构成动物的脂肪组织的大部分。白色脂肪组织是最常见的脂肪组织类型,并且特征在于较窄周缘的细胞质(其细胞核被挤压在细胞边缘附近,所述细胞围绕单个大膜包裹的脂滴和少量线粒体)、适度的血液供应,并且充当储存能量的储库。而且,白色脂肪细胞是内分泌器官并且分泌调节各种代谢过程的瘦素、脂联素和白脂素激素。白色脂肪组织中的新脂肪细胞在整个生命过程中由前体细胞库形成。需要用这些来替换死亡的那些(经过10年的平均寿命)。除了作为能量储备的主要来源之外,白色脂肪组织还为身体提供一些机械保护和隔离。肥胖症是白色脂肪组织的过度积聚。
棕色脂肪细胞是以热量形式耗散所储存化学能的高度特化细胞。它们通过解偶联蛋白1(UCP-1)即存在于棕色脂肪组织中的线粒体蛋白来实现这一点。冷刺激和/或某些分子可以活化现有棕色脂肪细胞中的UCP-1,从而使总能量消耗增加与可用棕色脂肪细胞的数量成比例的量值。成年人具有大量的棕色脂肪组织储库,并且这些可在暴露于低温时被活化。棕色脂肪组织是热产生(产热)的关键部位。棕色脂肪组织的特征在于在整个具有中心核、许多小脂滴、许多线粒体的细胞中存在细胞质,富含UCP-1,并且富于血液供应。UCP-1被活化时使驱动ATP合成的电化学梯度短路,以替代地生成热量。棕色脂肪组织提供了维持体温的重要热源。当体温下降时,棕色脂肪组织被活化。
米色脂肪细胞是在刺激时由白色脂肪细胞形成的细胞。可以发现米色脂肪细胞散布在白色脂肪组织间,但可以表达UCP-1。米色脂肪细胞中的UCP-1还可被冷刺激和/或某些分子活化。米色脂肪细胞可以从白色脂肪细胞募集或诱导形成。米色脂肪组织是在剧烈运动一段时间后衍生自白色脂肪细胞的棕色样脂肪细胞。在运动之后,骨骼肌细胞分泌称为鸢尾素的蛋白激素。鸢尾素作用于白色脂肪组织以使富含线粒体和脂滴的脂肪细胞的数量增加;UCP1合成显著增加;细胞呼吸率增加,但能量以热量释放而非向ATP的合成供给燃料。较瘦成年人在颈部和上胸部区中具有米色脂肪细胞沉积物。当暴露于寒冷时,米色脂肪细胞被活化。肥胖的人具有很少或没有米色细胞。
充分刺激的棕色或米色脂肪细胞具有相当量的UCP-1,表明类似的产热能力。因此,提高棕色脂肪细胞、米色脂肪细胞或这两者的活性对于治疗代谢紊乱具有巨大的前景。
脂肪细胞产热是将体内储存的能量转化为生物体内热量的过程。存在至少三种类型的产热方法。第一种类型的产热是体力诱导的产热。这在生物体利用其肌肉通过运动产生热量时发生。
第二种类型的产热是体温调节产热。该类型产热通过寒颤产生热量以维持生物体的体温。寒颤通过使以ATP形式储存的化学能转化为动能和热量而产生热量。所生成的动能产生与寒颤相关联的特征性肌肉颤搐。
第三种类型的产热是饮食诱导的产热。在饮食诱导的产热中,超过即时能量需求所需的那些的膳食卡路里的一部分被转化为热量而非作为脂肪组织储存。一些类型的肥胖症可能与该机制的缺陷有关。饮食诱导的产热包括非寒颤产热,其可发生在棕色或米色脂肪细胞中。在棕色和米色脂肪细胞中,UCP-1启动激活级联,其导致产生热量。非寒颤产热可以由交感神经系统控制。交感神经系统可由于各种刺激诸如寒冷、食物摄取以及各种其他激素和化学刺激而激活产热。
脂肪细胞的产热和能量代谢在肥胖个体中有所减少。因此,活化棕色或米色脂肪细胞以增强能量消耗对于对抗肥胖症具有重要意义。此外,现有的白色脂肪细胞转化为棕色或米色脂肪细胞也可增加非寒颤产热和代谢。因此,刺激棕色细胞发育的特定物质;提高各种类型脂肪细胞中的UCP-1表达的物质;以及增强棕色脂肪组织块的物质是令人感兴趣的。后者也可通过低温、越冬和/或引导棕色脂肪细胞分化的分子而增加。
肥胖症的当前对症医学治疗尚未实现其长期治疗目标,这主要是由于有限的药物功效、副作用,以及患者对生活方式改变以及疗法的依从性差。目前,只有限制性和吸收不良的减肥手术才能实现体重过重的显著长期减少,且具有一些有利的心血管益处。
因此,除了仅仅抑制食欲或低脂肪吸收的药物之外,本领域需要肥胖症的新型治疗。本发明提供了通过施用活化化合物来局部活化脂肪细胞的方法和医疗装置。活化化合物激活了白色、棕色或米色脂肪组织的产热,这可导致生成热量、脂肪组织脂解,并最终导致脂肪组织的量和大小的总体减小。
附图说明
图1示出了从染色图像(左侧)分割的示例(右侧)。细胞间区域被染色为酒红色,而脂肪细胞在初始图像中为淡黄色。细胞间和脂肪细胞分区由黄色和深蓝色示出。
发明内容
一种促进产热的方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中活化化合物包括以下结构或其盐:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
一种促进产热的方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中活化化合物包括以下结构或其盐:
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
一种促进产热的方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中活化化合物包括以下结构中的至少一种或其盐:
一种治疗方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中活化化合物包括以下结构或其盐:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
提供了一种装置,包括:治疗有效量的活化化合物,以及用于使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触的工具。
提供了一种上述装置,其中活化化合物包括以下结构:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
提供了一种上述装置,其中活化化合物包括以下结构:
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
提供了一种上述装置,其中活化化合物包括以下结构中的至少一种及其盐:
对于本领域的技术人员来说,通过下面的详细描述,本发明的这些和其它的特征、方面和优点将变得显而易见。
具体实施方式
本发明涉及令人惊讶的发现,即某些环己烷甲酰胺衍生物(活化化合物)可以活化脂肪组织以诱导产热。当与一个或多个脂肪细胞或受影响区域接触时,活化化合物可促进线粒体蛋白(包括但不限于UCP-1、UCP-2或它们的组合)的表达。线粒体蛋白诸如UCP-1、UCP-2或它们的组合的表达可活化一个或多个脂肪细胞以诱导产热。在与活化化合物接触时,白色、棕色和/或米色脂肪细胞可被活化以诱导产热。
因此,本发明基于的令人惊奇的发现在于,所选分子可用于活化一个或多个脂肪细胞以诱导产热。本发明的第二个目的示出的发现在于,所选分子诸如某些环己烷甲酰胺衍生物或活化化合物可以治疗肥胖症和肥胖症相关疾病,包括但不限于1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、慢性疼痛、神经性疼痛、炎性疼痛和肠易激综合征。另外,本发明示出的令人惊奇的发现在于,如上文和本文描述的所选分子可以治疗肥胖症,减小脂肪组织的大小和量,导致身体塑型、形体塑造和最终体重减轻。
虽然一些化合物先前已经示出促进产热,诸如在美国专利申请公布No.2018/0147163中,但它们需要多种活性剂,每种具有不同的机制以助于体重减轻。相比之下,本文公开了具有出乎意料的高活性以促进产热的化合物。所公开的组合物显示的活性可高到足以允许组合物仅包含单一活化化合物。因此,由于所公开的组合物示出的高活性,可以仅使用单一的活化化合物促进产热。不受理论束缚,本文公开了能够诱导棕色、米色和白色脂肪细胞以诱导产热的方法和装置。如本文所述,非寒颤产热可以由低温刺激。然而,令人惊奇地,口腔护理组合物中的先前已示出活化TRPM8受体以提供清凉感觉的某些清凉化合物(美国专利申请公布No.2017-0119639,以引用方式并入本文)也显示出活化一个或多个脂肪细胞和/或脂肪组织以诱导产热。TRMP8的活化和/或一个或多个脂肪细胞和/或脂肪组织中产热的促进可以导致脂肪细胞分化(即,前脂肪细胞优先发育成棕色脂肪细胞而非白色脂肪细胞)和/或白色脂肪细胞转化为米色和/或棕色脂肪细胞。
不受理论的束缚,本文所公开的活化化合物可以活化TRPM8和/或促进一个或多个脂肪细胞中的产热。TRPM8的活化可以促进产热,或者在活化化合物与一个或多个脂肪细胞之间接触后可以直接促进产热。TRPM8的活化和/或产热的促进可以导致相对于白色脂肪细胞而言由前脂肪细胞优先形成米色和棕色脂肪细胞。另外,TRPM8的活化和/或产热的促进可以导致白色脂肪细胞转化成米色和/或棕色脂肪细胞。另外,TRPM8的活化和/或产热的促进可以导致白色脂肪细胞中的线粒体活性提高,这可以使它们更像米色或棕色脂肪细胞起作用。
除非另外指明,否则下文中所用的所有百分比和比率均按总组合物的重量计。除非另外指明,否则本文提及的所有成分的百分比、比率和水平均基于该成分的实际量,并且不包括在可商购获得的产品中可与这些成分一起使用的溶剂、填料或其它物质。
上述总结并非旨在限定本发明的每个方面,而且在其它部分描述了附加方面,诸如具体实施方式。此外,本发明包括(作为附加方面)以任何方式在范围上比由上文示出的特定段落所定义的变体更为狭义的本发明的全部实施方案。例如,本发明的某些方面被描述为属,并且应当了解属的各个成员各自是本发明的一个方面。另外,应当将以属来描述或者选择属的成员的方面理解为涵盖属的两个或更多个成员的组合。对于以“一个”或“一种”来描述或进行权利要求的本发明的方面,应当了解这些术语意味着“一个(种)或多个(种)”,除非上下文明确要求更受限制的含义。术语“或者”应该理解为涵盖了另选的或共同的条目,除非上下文明确另有要求。如果本发明的方面被描述成“包含”特征,则实施方案还考虑了“由…所述特征组成”或者“基本上由…所述特征组成”。
下面描述组合物和方法的特征。章节标题是为了方便阅读,而并非旨在限制本身。全部本文件旨在作为统一的公开内容相关联,并且应当理解本文所述特征的全部组合均被考虑,即使特征的组合并非共同见于本文件的相同句子、段落或者章节之中。应该理解,本文所述的方法或化合物的任何特征可以全部或部分地删除,与本文所述的任何其它特征组合或取代本文所述的任何其它特征。
除非另外指明,否则本文所涉及的所有测量均在25℃下进行。
如本文所用,词语“或”当用作两个或更多个元素的连词时,是指包括单独的所述元素或所述元素的组合;例如,X或Y意指X或Y或两者。
本发明组合物的组分描述于以下段落中。
如本文所用,术语“脂肪细胞”是指主要组成脂肪组织的细胞,其专门以脂肪或甘油三酯形式储存能量。
如本文所用,术语“白色脂肪细胞”是指其主要功能是充当用于未来能量利用的甘油三酯或脂肪储库的脂肪细胞。
如本文所用,术语“棕色脂肪细胞”是指其主要功能是利用非寒颤产热使多余能量转化为体热的脂肪细胞。棕色脂肪细胞的特征在于具有高比例的线粒体。
如本文所用,术语“米色脂肪细胞”是指可诱导非寒颤产热的白色样脂肪细胞。
如本文所用,提及到“低级烷氧基”或“低级烷硫基”时的术语“低级”尤其是指附接到所述官能团的长度为1至10个碳原子的烷基链。例如,“低级烷氧基”是指附接到-OCH
本文中示出SEQ ID NO:1的核苷酸序列的序列表以标题为“15371_Nucleotide_Sequence_Listing_ST25”的ASCII文本文件与本申请同时提交。ASCII文本文件于2018年11月7日创建,大小为5千字节。根据MPEP§605.08and 37 CFR§1.52(e),该ASCII文本文件中的主题以引用方式并入本文。
如本文所用,术语“TRPM8”或“TRPM8受体”是指冷敏感性和薄荷醇敏感性受体(CMR1)或TRPM8。用于所述受体的TRPM8命名来自于其作为瞬时受体电位(TRP)家族的非选择性阳离子通道的特性,其通过刺激包括低温、薄荷醇和其它化学凉爽剂而被活化。TRPM8受体提供为SEQ ID NO:1。
清凉受体(传统称为TRPM8)或薄荷醇受体已被表明是区分引发和传播非热清凉感觉的有机分子的强度和持续时间的手段(D.D.McKemy,The Open Drug Discovery Journal2∶81-88 2010)。McKemy报道了许多TRPM8激动剂的EC50值,其跨越100nM至19mM的范围,因此显示通道可在不同浓度下在广泛的结构内被活化。该通道还具有CRMl和TRPP8的命名。后者由于其对前列腺细胞的识别而被如此命名,其中它被用作识别靶向前列腺癌的分子的手段。
如前所述,本发明涉及以下发现:如下所示的特定(1R,2S,5R)-5-甲基-2-(1-甲基乙基)-N-(2-苯乙基)-环己烷甲酰胺结构递送活化脂肪组织的手段。此类活化化合物在下文有所描述。
活化化合物是可以活化脂肪组织以诱导产热的任何此类化合物或化合物的混合物。活化化合物的示例包括某些环己烷甲酰胺衍生物。可用于活化脂肪组织的活化化合物的其他示例包括可由式I描述的化合物。活化化合物还可为式I化合物的盐。
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
可用于活化脂肪组织的其他活化化合物可由式II描述。活化化合物也可为式II的化合物的盐。
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
活化化合物还可选自以下式(式III、IV、V、VI、以及式III-VI的盐)。
式I-VI的盐可包括由式I-VI表示的活化化合物的任何可接受的盐。可接受的盐是可用于待施用给人的制剂中的盐。式I-VI的盐的合适的非限制性示例包括式VII-IX。
活化化合物可以作为唯一的活性成分施用或与其他活性成分组合地施用。其他活性成分的一些示例包括但不限于β-3肾上腺素能受体激动剂,诸如米拉贝隆或索拉贝隆。
活化化合物还可包括来自式I-IX的化合物的代谢物和/或生物学上可获得的衍生物。
活化化合物可施用到受影响区域。受影响区域可遍及身体,其中活化化合物可通过摄取包含活化化合物的丸剂进入身体。受影响区域可为身体上的目标位置或身体上的位置。受影响区域可为具有过量脂肪组织的区域。从需要此类治疗的人的角度或观点来看,受影响区域可具有过量的脂肪组织。从医疗专业人员的角度或观点来看,受影响区域可具有过量的脂肪组织。受影响区域可具有过量的白色脂肪组织。出于美容或美学目的,受影响区域可具有过量的脂肪组织。出于美容或美学目的,受影响区域是否可具有过量的脂肪组织可以由需要此类治疗的人、医疗专业人员或第三方观察者确定。
脂肪组织可以选自棕色脂肪细胞、白色脂肪细胞、米色脂肪细胞、浅棕色脂肪细胞、皮下脂肪组织、心周脂肪组织、骨髓脂肪组织和/或它们的组合。过量的脂肪组织可存在于皮肤下(即皮下脂肪)、内部器官周围(即内脏脂肪)、骨髓内(即黄骨髓)、肌内(即肌肉系统内)和乳腺组织中。受影响区域可包括存在于皮下脂肪组织、内脏脂肪组织、黄骨髓、肌内脂肪组织和/或乳腺组织中的过量脂肪组织。
需要此类治疗的人可包括具有含过量脂肪组织的受影响区域的人或动物。需要此类治疗的人可具有一个受影响区域、多个受影响区域,或者患有通常与过量脂肪组织相关联的疾病,诸如1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征、慢性疼痛、神经性疼痛和/或炎性疼痛。另外,需要此类治疗的人也可包括针对身体塑型、形体塑造和/或肥胖症采用该治疗的人或低等动物。身体塑型和形体塑造可用作针对单个受影响区域或多个受影响区域的治疗。
不受科学理论的束缚,该方法还可包括活化受体的步骤。在活化化合物施用到受影响区域之后,受体可被活化化合物活化。受体可为TRPM8、α肾上腺素能受体、β肾上腺素能受体、γ肾上腺素能受体、PPARGC1A和/或它们的组合。
不受科学理论的束缚,该方法还可包括表达线粒体蛋白的步骤。在活化化合物施用到受影响区域之后,线粒体蛋白可被表达。线粒体蛋白可为UCP1、UCP2、PPARGC1A、PRDM16、ACADM、CPT1A、FASN和/或它们的组合。线粒体蛋白可存在于白色脂肪细胞、米色脂肪细胞和/或棕色脂肪细胞内。
不受科学理论的束缚,该方法还可包括活化脂肪组织以诱导产热的步骤。在活化化合物施用到受影响区域之后,脂肪组织可被活化以诱导非寒颤产热。脂肪组织可被活化以诱导饮食诱导的产热。
不受科学理论的束缚,该方法还可包括活化受体、表达线粒体蛋白,和/或活化脂肪组织以诱导产热的步骤。
可利用任何有效的工具使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触。用于使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触的工具是允许活化化合物直接进入脂肪组织和/或一个或多个脂肪细胞的任何工具。一些合适的接触途径包括但不限于注射、颊面、肠内、可吸入、输注、肌内、鞘内、静脉内、鼻、眼、口腔、耳、直肠、皮下、舌下、局部、透皮、阴道和/或它们的组合。
可使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,可以以任何适于将活化化合物安全有效地递送到受影响区域的形式接触。一些形式的活化化合物可包括但不限于片剂、丸剂、栓剂、微针贴剂、透皮贴剂、悬浮液、溶液、身体裹敷物和/或它们的组合。
本文公开了一种装置,该装置包括治疗有效量的活化化合物和用于使活化化合物与脂肪组织接触的工具。
对于施用给需要此类治疗的人或其他哺乳动物受试者,尤其是宠物动物,式(I-VI)化合物的总日剂量取决于施用模式。例如,口服可能需要比静脉内剂量更高的总日剂量。总日剂量能够以单剂量或分剂量施用。活化化合物的治疗有效量是可诱导预期效应的活化化合物的量。一些预期效应包括但不限于促进产热、活化脂肪组织、脂肪细胞分化、白色脂肪细胞向米色和/或棕色脂肪细胞转化、减小脂肪组织的大小和/或量、身体塑型、形体塑造、和/或治疗肥胖症、1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征、慢性疼痛、神经性疼痛和/或炎性疼痛。
治疗有效量意指活化化合物或包含活化化合物的组合物的量足以诱导积极的有益效果、健康有益效果,和/或足够低的量以避免严重的副作用,即在技术人员的合理判断范围内提供合理的效险比。治疗有效量可指按组合物的重量计至少0.01%,或至少0.1%的活化化合物。治疗有效量可被确定为活化化合物质量/kg个体体重。治疗有效量可意指至少0.0001mg/kg体重。
在治疗方案中,可使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触。在治疗方案中,可将活化化合物以预定时间表施用。例如,活化化合物可以每日、每周、每月和/或每季施用。另外,活化化合物能够以单剂量和/或多剂量施用。
该装置可包括用于使活化化合物与脂肪组织接触的工具。用于使活化化合物与脂肪组织接触的合适工具包括将活化化合物施用到受影响区域所需的任何设备。例如,注射将是用于使注射器中的活化化合物与皮下脂肪组织接触的合适手段。用于使活化化合物与脂肪组织接触的手段的某些示例包括但不限于注射、颊面、肠内、可吸入、输注、肌内、鞘内、静脉内、鼻、眼、口腔、耳、直肠、皮下、舌下、局部、透皮和/或它们的组合。口服可采用丸剂、片剂、溶液、悬浮液、浆液和/或用于口服摄入活性成分的其他常用制剂来实现。透皮施用可采用微针贴剂、透皮贴剂、织物裹敷物、纸材、海藻裹敷物以及它们的组合来实现。
本文公开了用作药物的活化化合物。活化化合物可选自由式I-VI表示的化合物中的任一种。本文公开了用于治疗肥胖症的活化化合物。本文公开了用于治疗1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征、慢性疼痛、神经性疼痛和/或炎性疼痛的活化化合物。活化化合物在制备用于治疗肥胖症的药物中的用途。本文公开了活化化合物在制备用于治疗肥胖症、1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征和/或慢性疼痛、神经性疼痛和/或炎性疼痛的药物中用途。本文公开了用于身体塑型的活化化合物。本文公开了用于形体塑造的活化化合物。本文公开了用于减小脂肪组织的大小和/或量的活化化合物;活化化合物在制备用于治疗身体塑型的药物中的用途;活化化合物在制备用于治疗形体塑造的药物中的用途;以及活化化合物在制备用于治疗脂肪组织的大小和/或量的减小的药物中的用途。
本文公开了立体异构纯的活化化合物。立体异构纯的活化化合物是不含有立体异构体的混合物的活化化合物,即具有相同分子式但在分子上的一个或多个位置处具有不同手性的化合物。本文公开了对映纯的活化化合物。对映纯的活化化合物是不含有对映异构体的混合物的活化化合物,即彼此为不能重叠的镜像的立体异构体。可以使用用于分离对映纯的式I-VI化合物的任何方法,例如美国公开申请No.2017/0036994中所示,其以引用的方式并入本文。
本发明还涉及乳液组合物。本发明的乳液组合物包含至少一种流变结构剂,其通常为固体。乳液组合物还可包含其他任选成分,如表面能改性剂。在一个实施方案中,乳液组合物基本上由或由流变结构剂组成,诸如微晶蜡、烷基聚二甲基硅氧烷、乙二醇二山嵛酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、甘油三山嵛酸酯、甘油三硬脂酸酯和亚乙基双油酰胺。本发明的乳液组合物可含有单一流变结构剂或者两种或更多种流变结构剂的混合物。
在制备根据本发明的加洗剂的经期用具中,可将乳液组合物施加到吸收制品的外表面,例如顶片的外表面。可以使用分配具有熔融或液体稠度的润滑材料的多种施加方法中的任一种,例如美国专利No.5,968,025和美国公开申请No.2005/0208113中所示。合适的方法包括但不限于喷涂、印刷(例如柔性版印刷)、涂布(例如凹面涂布)、挤出、浸渍,或这些施加技术的组合,例如将乳液组合物喷涂到旋转表面诸如压延辊上,然后将组合物转移到卫生巾顶片的外表面。另外,将乳液组合物施加到经期用具的一部分的方式可使得基底或部件不会变得浸透有乳液组合物。乳液组合物可在组装期间的任何点施加至经期用具。例如,乳液组合物还可在其与其他原料组合形成成品经期用具之前施加到顶片的外表面。
A.一种促进产热的方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中所述活化化合物包括以下结构或其盐:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
B.根据段落A所述的方法,其中所述活化化合物包括以下结构或其盐:
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
C.根据段落A或B所述的方法,其中所述活化化合物选自:
D.根据段落A-C中任一项所述的方法,其中所述方法还包括以下步骤:
表达线粒体蛋白;并且
活化一个或多个脂肪细胞以诱导产热。
E.根据段落A-D中任一项所述的方法,其中所述线粒体蛋白选自Ucp1、Ucp2,以及它们的组合。
F.根据段落A-E中任一项所述的方法,其中所述方法还包括在活化化合物与一个或多个脂肪细胞接触时活化受体。
G.根据段落A-F中任一项所述的方法,其中所述受体选自TrpM8、PPARGC1A、α肾上腺素能受体、β肾上腺素能受体和γ肾上腺素能受体。
H.根据段落A-G中任一项所述的方法,其中一个或多个脂肪细胞存在于受影响区域中。
I.根据段落A-H中任一项所述的方法,其中所述受影响区域具有过量的脂肪组织。
J.根据段落A-I中任一项所述的方法,其中所述脂肪组织选自棕色脂肪细胞、白色脂肪细胞、米色脂肪细胞、浅棕色脂肪细胞、皮下脂肪组织、心周脂肪组织、骨髓脂肪组织,以及它们的组合。
K.根据段落A-J中任一项所述的方法,其中治疗减小白色脂肪细胞的大小和量。
L.根据段落A-K中任一项所述的方法,其中通过使所述活化化合物与一个或多个脂肪细胞接触来治疗个体。
M.根据段落A-L中任一项所述的方法,其中所述治疗选自以下项的治疗:肥胖症、脂肪组织减少、身体塑型、形体塑造、1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征、慢性疼痛、神经性疼痛和炎性疼痛。
N.根据段落A-M中任一项所述的方法,其中所述活化化合物通过选自注射、颊面、肠内、可吸入、输注、肌内、鞘内、静脉内、鼻、眼、口腔、耳、直肠、皮下、舌下、局部、透皮,以及它们的组合的途径与一个或多个脂肪细胞接触。
O.根据段落A-N中任一项所述的方法,其中所述活化化合物以选自片剂、丸剂、栓剂、微针贴剂、透皮贴剂、悬浮液、溶液、身体裹敷物,以及它们的组合的形式与一个或多个脂肪细胞接触。
A.一种治疗方法,包括使一个或多个脂肪细胞与活化化合物接触,其中所述活化化合物包括以下结构或其盐:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
B.根据段落A所述的方法,其中所述活化化合物包括以下结构或其盐:
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
C.根据段落A或B所述的方法,其中所述活化化合物选自:
D.根据段落A-C中任一项所述的方法,其中所述方法还包括以下步骤:
表达线粒体蛋白;并且
活化一个或多个脂肪细胞以诱导产热。
E.根据段落A-D中任一项所述的方法,其中所述线粒体蛋白选自Ucp1、Ucp2,以及它们的组合。
F.根据段落A-E中任一项所述的方法,其中所述方法还包括在活化化合物与一个或多个脂肪细胞接触时活化受体。
G.根据段落A-F中任一项所述的方法,其中所述受体选自TrpM8、PPARGC1A、α肾上腺素能受体、β肾上腺素能受体和γ肾上腺素能受体。
H.根据段落A-G中任一项所述的方法,其中一个或多个脂肪细胞存在于受影响区域中。
I.根据段落A-H中任一项所述的方法,其中所述受影响区域具有过量的脂肪组织。
J.根据段落A-I中任一项所述的方法,其中所述脂肪组织选自棕色脂肪细胞、白色脂肪细胞、米色脂肪细胞、浅棕色脂肪细胞、皮下脂肪组织、心周脂肪组织、骨髓脂肪组织,以及它们的组合。
K.根据段落A-J中任一项所述的方法,其中治疗减小白色脂肪细胞的大小和量。
L.根据段落A-K中任一项所述的方法,其中通过使所述活化化合物与一个或多个脂肪细胞接触来治疗个体。
M.根据段落A-L中任一项所述的方法,其中所述治疗选自以下项的治疗:肥胖症、脂肪组织减少、身体塑型、形体塑造、1型糖尿病、2型糖尿病、胰岛素耐受性、血脂异常、肠易激综合征、慢性疼痛、神经性疼痛和炎性疼痛。
N.根据段落A-M中任一项所述的方法,其中所述活化化合物通过选自注射、颊面、肠内、可吸入、输注、肌内、鞘内、静脉内、鼻、眼、口腔、耳、直肠、皮下、舌下、局部、透皮,以及它们的组合的途径与一个或多个脂肪细胞接触。
O.根据段落A-N中任一项所述的方法,其中所述活化化合物以选自片剂、丸剂、栓剂、微针贴剂、透皮贴剂、悬浮液、溶液、身体裹敷物,以及它们的组合的形式与一个或多个脂肪细胞接触。
A.一种装置,包括:
治疗有效量的活化化合物,以及
用于使所述一个或多个脂肪细胞与所述活化化合物接触的工具。
B.根据段落A所述的装置,其中所述活化化合物包括以下结构:
R
Q=H
V=NR
W=H
对于n=0,X、Y=独立地选自H、芳基、萘基;
对于n≥1,X、Y=脂族CH
A=低级烷氧基、低级烷硫基、芳基、取代的芳基或稠合的芳基;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
C.根据段落A或B所述的装置,其中所述活化化合物包括以下结构或其盐:
R
V为-O-或–(NH)-;并且
立体化学能够在标记*的位置处变化。
D.根据段落A-C所述的装置,其中用于使所述活化化合物与一个或多个脂肪细胞接触的所述手段选自注射、颊面、肠内、可吸入、输注、肌内、鞘内、静脉内、鼻、眼、口腔、耳、直肠、皮下、舌下、局部、透皮,以及它们的组合。
A.用作药物的式I-VI。
A.用于治疗过量脂肪组织的式I-VI。
除非另有说明,所有实施例均在室温(RT,20℃)、标准压力和气氛下进行。除非另外指明,否则实施例中使用的水为去离子水。
为了确定TRPM8是否被活化,从具有TRPM8受体序列(SEQ ID NO:1)的转染细胞测量细胞内钙离子(Ca
将沉淀的细胞重新悬浮在10mL分析缓冲液中,并且将90μL等分试样(约50,000个细胞)/孔递送至96孔的含有10μL受试化合物(1mM,在分析缓冲液中,最终浓度100μM)或者缓冲液对照的检测板上,并且在室温下温育30分钟。在30分钟之后,将板(Falcon 353219,Corning Corning NY)置于荧光成像读板机(FLIPR384,得自Molecular Devices,Sunnyvale,CA)中并且记录基础荧光(激发波长488nm且发射波长510nm)。然后添加20μL的含100mM TRPM8激动剂WS5冷却剂的分析缓冲液,并记录荧光。为了确定受试化合物对TRPM8的直接效应,在添加每种化合物后立即测量荧光(表1)。FLIPR方法的附加讨论可见于Smart等人的“Characterization using FLIPR of human vanilloid VR1 receptorpharmacology”(European Journal of Pharmacology 417,51-58,2001)和Liu等人的“Development and validation of a platelet calcium flux assay using afluorescent imaging plate reader”(Analytical Biochemistry 357,216-224,2006)。
如上所述,将活化处理的细胞的荧光量值与来自基准激动剂(WS-5)的荧光量值进行比较。绘制作为活性物质剂量的函数的荧光百分比,并生成S形曲线。从该剂量-响应曲线拟合的曲线得到TRPM8 IC
脂肪生成是乙酰CoA转化为脂肪酸的过程。通过脂肪生成和随后的甘油三酯合成,能量能够以脂肪组织(即脂肪)的形式储存。为了确定活化化合物(示于表1中)对脂肪生成具有何种效应(如果有的话),使用以下列出的方案。
为了确定活化化合物(示于表1中)是否影响由前脂肪细胞形成白色脂肪细胞,进行脂肪生成测定。该方案中利用的细胞是低温保存的人皮下前脂肪细胞超批次(Zen-Bio,Inc.,Research Triangle Park,NC,目录号SP-F-SL)。所使用的生长培养基是PM-1(Zen-Bio,Inc.,Research Triangle Park,NC,目录号PM-1)加上5ng/mL表皮生长因子(EGF)。通过将12.5uL的200ug/mL EGF原液添加到500mL PM-1中制备PM-1+5ng/mL EGF。所使用的分化培养基是DM-2(Zen-Bio,Inc.,Research Triangle Park,NC,目录号DM-2)。所使用的脂肪细胞维持培养基是AM-1(Zen-Bio,Inc.,Research Triangle Park,NC,目录号AM-1)。
首先,将人皮下前脂肪细胞在37℃水浴中解冻。接着,在20℃下将解冻的前脂肪细胞添加到15mL聚丙烯管(Bioexpress,Corning,Corning,NY)中的9mL生长培养基(PM-1)中。将管在20℃下以280×g(约1100rpm)离心5min。在5min之后,移除上清液并利用研磨使积聚的固体再悬浮于2mL的PM-1中。使用Cyto C-Chip血球计(Incyto,Seoul,South Korea,目录号DHC-N01-5)在100×放大倍率下对悬浮的细胞进行计数。为了继续进行,血球计中每1×1平方毫米需要15-50个细胞。如果未满足每平方的细胞数,则将每T75烧瓶(Bioexpress,Corning,Corning,NY)6.7×10
在前脂肪细胞充分生长至90%汇合后,细胞准备分化并用活化化合物处理。用3mL的PBS洗涤细胞并使用3mL胰蛋白酶EDTA分离。将细胞在37℃下孵育5分钟。接着,将细胞在20℃下以280×g离心5分钟。弃去上清液,并且利用研磨将所得的沉淀物重悬于10mL的PM-1中。在100×放大倍率下对细胞进行计数,并且通过添加所需量的PM-1将细胞稀释至86,667个细胞/mL(约13,000个细胞/150μL)以实现期望的浓度。在添加PM-1之后,用手涡漩样品以在铺板前均匀分散细胞。一旦处于期望的浓度(86,667个细胞/mL),就将细胞以13,000个细胞(即,使用150μL的悬浮液)铺板在96孔板(#3595,Corning,Corning,NY)中。将细胞在37℃的CO
一旦达到汇合,就添加150μL分化培养基(DM-2)(第0天)。将样品在37℃下温育6天。在第6天,经由抽吸从每个样品移除90μL培养基,而不接触孔的底部。接着,添加140μL的脂肪细胞维持培养基(AM-1)。AM-1沿孔侧面向下行进。在第6天,添加活化化合物(2μL的10mM活化化合物),以给出100μM的活化化合物的最终浓度。将所有样品在37℃下再温育9天,而不更换培养基或摇动样品。
活化化合物的阳性对照是Genistein(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO,Sigma目录号G6649)。制备5mM的Genistein(5mg)在二甲基亚砜(DMSO,3.7004mL)中的原液。将2μL的Genistein原液添加至每个阳性对照孔,以给出50μM的最终浓度。将所有样品在37℃下再温育9天,而不更换培养基。
接着,对样品染色以助于脂肪生成定量。将5μL的AdipoRed(Lonza Group,Basel,Switzerland,目录号PT07009)直接添加到96孔细胞处理板的细胞中。通过轻敲实验室工作台侧面的平板来轻柔地混合各行。将样品在室温(约20℃)下温育至少15min。使用Envision荧光分光光度计读板机(PerkinElmer,Waltham,MA,目录号3595)定量脂肪生成。在Envision分光光度计提供的软件上利用“Copy of AdipoRed”方案。使用451镜(激发485nm;发射535nm)从底部扫描板。每个孔以Z模式扫描,因为细胞获取甘油三酯,一些可能漂浮,特别是朝向孔中间(7个从左到右读取,7个从右到左对角读取并且7个从左到右读取,总共21个端点)。
在扫描样品之后,使用
稍后通过将平板从-80℃冷冻机移除并使其环境温热至室温(约20℃)来解冻平板。将25μL的Hoechst 33258溶液(Invitrogen,Carlsbad,CA,目录号F2962,组分A)添加到10.0mL的TNE缓冲液(Invitrogen,Carlsbad,CA,目录号F2962,组分B)中。对于大量细胞(>100,000个),可通过在10.0mL的TNE缓冲液中将Hoechst 33258的最终浓度增加至50μL来获得改善的分析线性度。然后将100μL含水Hoechst 33258的TNE缓冲液添加到各孔中。包括空白荧光孔,其使用100uL含水Hoechst 33258的TNE缓冲液+100uL ddH2O/孔。然后采用360nm激发和460nm发射来测量荧光。从样品测试数据减去空白荧光值。然后使用以下公式I计算归一化因子:
RFU
对照=对照DMSO或水,其匹配用于受试化合物的溶剂。
公式I
通过将AdipoRed数据除以用公式I确定的归一化因子来计算归一化AdipoRed值。使用公式II计算归一化%抑制。
RFU
对照=对照DMSO或水,其匹配用于受试化合物的溶剂。
公式II
将%抑制值对治疗剂量作图,其在抑制存在时产生S形曲线。使用Graphpad Prism软件拟合曲线,以计算脂肪生成IC
对于脂肪细胞的实时PCR分析,收集来自24孔板中生长的培养物的细胞。采用制造商的方案,使用RNeasy试剂盒(Cat 74104,Qiagen,Germantown,MD)分离RNA。RNA使用Nanodrop 1000(Thermofisher,Waltham,MA)定量。cDNA形成使用PowerUp SYBR
如实施例1中所述,通过测量来自具有TRPM8受体基因的转染细胞的细胞内钙离子(Ca
实际上,如表1中所示,式III-VI以及比较例1和2达到TRPM8活化的IC
通过在用AdipoRed染色后测量经活化化合物处理的样品的荧光来确定脂肪生成抑制,这使得能够定量细胞内脂滴。脂滴存在于在白色脂肪细胞内。IC
比较例1在800μM下达到脂肪生成IC
令人惊奇地,相比之下,式III、V和VI各自在低浓度下抑制脂肪生成。例如,式III在25μM下达到脂肪生成IC
表2示出了用活化化合物处理的脂肪细胞中mRNA的相对表达。表2使用实时PCR来确定在用活化化合物处理后何种蛋白质在脂肪细胞中表达。如先前在表1中所述,活化化合物导致抑制前脂肪细胞向白色脂肪细胞的转化。实时PCR值是相对于未经过任何活化化合物处理的对照样品而言的。因此,超过1的值指示特定蛋白质的mRNA在经处理样品中更频繁地表达。在WS-5和薄荷醇中,实时PCR值未超过2.0,其指示mRNA表达仅有轻微变化。
在经式IV处理的样品中,没有一个PCR值超过2。然而,经式III处理的样品显示5.8的UCP-1PCR值。此类高PCR值指示UCP-1mRNA表达显著提高。米色和棕色脂肪细胞具有高比例的UCP-1蛋白。因此,经式III处理的前脂肪细胞显示脂肪生成减少(即白色脂肪细胞形成率较小)和UCP-1mRNA表达提高(即棕色/米色脂肪细胞形成率较高)。
NI代表在小于/等于1mM的浓度下未观察到抑制
*p值<0.05
小鼠(8-10周龄雄性C57BJ/6品系)从商业供应商Charles River Laboratories获得。动物研究方案由Procter&Gamble公司的机构动物照顾与使用委员会(InstitutionalAnimal Care and Use Committee)批准。在开始研究之前,使小鼠适应设施14天。从到达时起,就将小鼠饲养在22±2℃室温内的实底鞋盒式笼中,随意获取水和常规啮齿动物饲料饮食,以12小时明/暗循环。将小鼠单独饲养,并提供垫料和各种丰富选择。垫料和筑巢材料允许小鼠体温调节至它们所需的舒适度水平。在研究开始时的每个给药日、给药之前记录体重,并且在研究结束时记录最终重量。在笼侧临床观察期间监测总体食物消耗、粪便输出和身体外观,但不进行科学地测量或跟踪。在给药期期间,每天观察动物若干次(例如,在注射之前和期间,紧接注射后至30分钟,注射后数小时,以及工作日结束)。
三组动物在左侧用米拉贝隆(即阳性对照)(n=4)、安慰剂(n=2)和式III(n=6)治疗,而所有三组中右侧接收安慰剂。使用25-27号1/2-5/8”长的针,经由皮下(SC)注射在下腹部的腹股沟脂肪垫区域附近或其内进行注射。每周注射两次进行给药,持续3周。在第4周进行尸检。在室温和中性pH范围内施用测试材料。最后一次给药后三天,采用CO2吸入对动物处以安乐死,收集腹股沟脂肪垫,并且对组织进行组织学和生物标记分析。
通过Vet Path Services在H&E染色后进行组织学分析。通过CO
米拉贝隆购自Selleck Chemicals S4009(VWR 103543-358)。所有化学品购自Millipore-Sigma,除另外指明。通过Millipore NanoPure纯化系统(电阻率高于18.2MΩcm-1)制备去离子水以用于缓冲液制备。所有材料溶解于PBS中。
确认研究采用三只小鼠。在后腿一侧注射式III,且在另一侧注射米拉贝隆,并且一只小鼠获得高剂量,另外两只小鼠获得中水平剂量。从每个治疗部位采集活检标本,并且通过下文提及的图像分析制备来自每个活检标本的三个历史图像,以确认治疗和对照之间的差异。
由每个活检标本(式III和对照治疗两者)制备切片组织。H&E用于染色细胞间区域,以与脂肪细胞区域形成表观对比度。通过TIFF格式从每个切片组织捕获三个图像。
通过Python scikit-learn软件包鉴定染色图像中的脂肪细胞和细胞间区域的分区。首先利用OpenCV-python库的cv2函数将所有彩色图像转换为灰度。通过scikit-learn的Otsu滤波函数来检测转换图像中脂肪细胞和细胞间区域之间的阈值。通过乘以1.1来调整检测值。图1示出了从染色图像(左侧)分割的示例(右侧)。
由分区的像素数计算图像中脂肪细胞的比率——脂肪细胞像素除以总像素。表4示出了来自治疗和对照受试者的各图像的检测分区的脂肪%汇编。
使用R lme4软件包的glmer.nb函数,通过负二项式广义线性混合效应模型,评估治疗组与对照组之间的脂肪细胞比率差异的显著性。采用治疗组作为固定因素,受试者作为随机因素且总像素作为偏移值,对脂肪细胞像素进行建模。在该分析中,高水平和中水平剂量受试者合并为治疗组。该模型中采用除以18的像素数来避免转换问题。
模型示出治疗与对照之间的脂肪细胞比率差异的p值为0.0278,因此得出结论,降低脂肪细胞比率的Glaciem治疗效应是统计上显著的。
由来自上述小鼠研究的快速冷冻脂肪组织进行qPCR生物标记分析。首先,用RNAdvance组织试剂盒(Agencourt)手动提取RNA。根据制造商的说明从快速冷冻脂肪组织中提取RNA。例如,将5mm钢珠置于冷冻机中大约15-20分钟。接着,使Qiagen Buffer RLT冷却至4℃保持20分钟,并置于96孔1.5mL管架中以用于样品转移。将异丙醇添加到Agencourt洗涤缓冲液中。制备70%乙醇在水中的100mL等分试样。允许RNA组织珠升温至22℃(约30分钟),并且然后剧烈且间歇地振摇珠粒至少15-20分钟。将1个不锈钢珠加入储存在干冰上的2mL圆底管中。然后将组织样品转移至2mL圆底管中。
将管架置于湿冰上。然后,将管从干冰转移至湿冰中的架,并将350μL的冷缓冲液RLT添加到管中。将珠粒在30Hz下振动2分钟。在珠粒振动之后,使样品离心2分钟。将上清液转移至96孔深孔分离板中。
使80μL的RNA组织珠与320μL异丙醇混合以产生结合缓冲液。对于每次分离新鲜制备该溶液,弃去任何未使用的溶液。
将400μL的结合缓冲液添加到RLT混合物中并缓慢混合。将溶液在室温下温育10分钟。特别注意避免在翻转混合时形成气泡。一些珠粒发生结块,但其不影响质量或产率。
将混合物置于磁体(96孔板——Agencourt SPRIPlate)上6-10分钟。在溶液变得澄清之后,在管保持在磁体上的情况下从每个管移除上清液,并弃去溶液。
将管从磁体移除并且将沉淀物用800μL异丙醇洗涤缓冲液洗涤十次。将板放回磁体上,并且一旦溶液再次变得澄清,在管保持在磁体上的情况下从每个管移除上清液,并弃去溶液。
将板从磁体移除并且用600μL的70%EtOH洗涤。将板放回磁体上10分钟,并且一旦溶液再次变得澄清,在管保持在磁体上的情况下从每个管移除上清液,并弃去溶液。该过程用70%EtOH再重复一次。使珠粒风干10-20分钟。
再次从磁体移除板。将珠粒用40μL水洗脱。轻轻搅拌混合物,并且然后在22℃下温育5分钟。将板置于磁体上5-10分钟,并且/或者直至溶液变得澄清。收集上清液并收集qPCR。
使用
除非明确排除或以其他方式限制,本文中引用的每一篇文献,包括任何交叉引用或相关专利或专利申请以及本申请对其要求优先权或其有益效果的任何专利申请或专利,均据此全文以引用方式并入本文。对任何文献的引用不是对其作为与本发明的任何所公开或本文受权利要求书保护的现有技术的认可,或不是对其自身或与任何一个或多个参考文献的组合提出、建议或公开任何此类发明的认可。此外,当本发明中术语的任何含义或定义与以引用方式并入的文献中相同术语的任何含义或定义矛盾时,应当服从在本发明中赋予该术语的含义或定义。
虽然已举例说明和描述了本发明的具体实施方案,但是对于本领域技术人员来说显而易见的是,在不脱离本发明的实质和范围的情况下可作出各种其他变化和修改。因此,本文旨在于所附权利要求中涵盖属于本发明范围内的所有此类变化和修改。
序列表
<110> 宝洁公司
<120> 用于促进脂肪组织中产热的环己烷甲酰胺衍生物
<130> 15371
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 3315
<212> DNA
<213> 智人(Homo Sapiens)
<400> 1
atgtccttcg agggagccag gctcagcatg aggagccgca gaaatggtac tatgggcagc 60
acccggaccc tgtactccag tgtatctcgg agcacagacg tgtcctacag tgacagtgat 120
ttggtgaatt ttattcaggc aaattttaaa aaacgagaat gtgtcttctt taccagagac 180
tccaaggcca tggagaacat atgcaagtgt ggttatgccc agagccagca catcgaaggc 240
acccagatca accaaaatga gaagtggaac tacaaaaaac ataccaagga gtttccaaca 300
gacgccttcg gggacattca gtttgagact ctggggaaga aaggcaagta cttacgcttg 360
tcctgtgaca ccgactctga aactctctac gaactgctga cccagcactg gcacctcaaa 420
acacccaacc tggtcatttc agtgacgggt ggagccaaaa actttgcttt gaagccacgc 480
atgcgcaaga tcttcagcag gctgatttac atcgcacagt ctaaaggtgc gtggattctc 540
actggaggca ctcactacgg cctgatgaag tacataggcg aggtggtgag agacaacacc 600
atcagcagga actcagaaga gaacatcgtg gccattggca tcgcagcatg gggcatggtc 660
tccaacaggg acaccctcat caggagctgt gatgatgagg gacatttttc agctcaatac 720
atcatggatg actttaccag agaccctcta tacatcctgg acaacaacca tacccacctg 780
ctgcttgtgg acaacggttg tcatggacac cccacagtgg aagccaagct ccggaatcag 840
ctggaaaagt acatctctga gcgcaccagt caagattcca actatggtgg taagatcccc 900
atcgtgtgtt ttgcccaagg aggtggaaga gagactctaa aagccatcaa cacctctgtc 960
aaaagcaaga tcccttgtgt ggtggtggaa ggctcggggc agattgctga tgtgatcgcc 1020
agcctggtgg aggtggagga tgttttaacc tcttccatgg tcaaagagaa gctggtacgc 1080
tttttaccac gcactgtgtc ccggctgcct gaagaggaaa ttgagagctg gatcaaatgg 1140
ctcaaagaaa ttcttgagag ttctcaccta ctcacagtaa ttaagatgga agaggctgga 1200
gatgagattg tgagcaacgc catttcctat gcgctgtaca aagccttcag cactaatgag 1260
caagacaagg acaactggaa tggacagctg aagcttctgc tggagtggaa ccagttggac 1320
cttgccagtg atgagatctt caccaatgat cgccgctggg agtctgccga ccttcaggag 1380
gtcatgttca cggctctcat aaaggacaga cccaagtttg tccgcctctt tctggagaat 1440
ggcctgaatc tgcagaagtt tctcaccaat gaagtcctca cagagctctt ctccacccac 1500
ttcagcaccc tagtgtaccg gaatctgcag atcgccaaga actcctacaa tgacgcactc 1560
ctcacctttg tctggaagtt ggtggcaaac ttccgtcgaa gcttctggaa agaggacaga 1620
agcagcaggg aggacttgga tgtggaactc catgatgcat ctctcaccac ccggcacccg 1680
ctgcaagctc tcttcatctg ggccattctt cagaacaaga aggaactctc caaggtcatt 1740
tgggagcaga ccaaaggctg tactctggca gccttggggg ccagcaagct tctgaagacc 1800
ctggccaaag ttaagaatga tatcaacgct gctggggaat cggaggaact ggccaatgaa 1860
tatgagaccc gagcagtgga gttgttcacc gagtgttaca gcaatgatga agacttggca 1920
gaacagctac tggtctactc ctgcgaagcc tggggtggga gcaactgtct ggagctggca 1980
gtggaggcta cagatcagca tttcatcgct cagcctgggg tccagaattt cctttctaag 2040
caatggtatg gagagatttc ccgagacacg aagaactgga agattatcct gtgtctattc 2100
atcatcccct tagtgggctg tggcctcgta tcatttagga agaaacccat tgacaagcac 2160
aagaagctgc tgtggtacta tgtggccttc ttcacgtcgc ccttcgtggt cttctcctgg 2220
aacgtggtct tctacatcgc cttcctcctg ctgtttgcct atgtgctgct catggacttc 2280
cactcagtgc cacacacccc cgagctgatc ctctacgccc tggtcttcgt cctcttctgt 2340
gatgaagtga ggcagtggta catgaacgga gtgaattatt tcaccgacct atggaacgtt 2400
atggacaccc tgggactctt ctacttcata gcgggtattg tattccggct ccactcttct 2460
aataaaagct cgttgtactc tgggcgcgtc attttctgtc tggattacat tatattcacg 2520
ctaaggctca tccacatttt caccgtcagc aggaacttgg gacccaagat tataatgctg 2580
cagcggatgc tgatcgacgt tttcttcttc ctgttcctct ttgctgtgtg gatggtggcc 2640
tttggcgtgg ccagacaggg gatcctaagg caaaatgaac agcgctggag atggatcttc 2700
cgctctgtca tctatgagcc ctacctggcc atgtttggcc aggttcccag tgacgtggat 2760
agtaccacat atgacttctc ccactgtacc ttctcgggaa atgagtccaa gccactgtgt 2820
gtggagctgg atgagcacaa cctgccccgc ttccctgagt ggatcaccat tccgctggtg 2880
tgcatctaca tgctctccac caatatcctt ctggtcaacc tcctggtcgc catgtttggc 2940
tacacggtag gcattgtaca ggagaacaac gaccaggtct ggaaattcca gcggtacttc 3000
ctggtgcagg agtactgcaa ccgcctaaac atccccttcc ccttcgttgt cttcgcttat 3060
ttctacatgg tggtgaagaa gtgtttcaaa tgctgctgta aagagaagaa tatggagtct 3120
aatgcctgct gtttcagaaa tgaggacaat gagactttgg cgtgggaggg tgtcatgaag 3180
gagaattacc ttgtcaagat caacacgaaa gccaacgaca actcagagga gatgaggcat 3240
cggtttagac aactggactc aaagcttaac gacctcaaaa gtcttctgaa agagattgct 3300
aataacatca agtaa 3315
- 用于促进脂肪组织中产热的环己烷甲酰胺衍生物
- 多元醇和环己烷多甲酸衍生物用于从化学建筑产品中除尘的应用