一种青豆NMN小肽粉及其SOD软胶囊的生产方法

技术领域

本发明涉及NMN小肽酶解提取及其SOD软胶囊制备技术领域，属于生物技术。

背景技术

NMN(β-烟酰胺单核苷酸)，是人体内长寿蛋白的辅因子NAD+的前体物质。NAD+又称辅酶Ⅰ，全称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，又称二磷酸烟苷，存在每一个细胞中参与上千项反应。NAD+是三羧酸循环的重要辅酶，促进糖、脂肪、氨基酸的代谢，参与能量的合成；NAD+又是辅酶I消耗酶的唯一底物(DNA修复酶PARP的唯一底物、长寿蛋白Sirtuins的唯一底物、环ADP核糖合成酶CD38/157的唯一底物)。因此，NAD+对人体来说非常重要，在人体抗衰老中起到重要作用。但是随着年龄的增长，人体内的NAD+水平是在逐渐下降的，导致线粒体活性降低，加速线粒体、细胞乃至整个机体的衰老，并且逐渐进入恶性循环，人体逐渐衰老。补充NAD+三个代谢循环的四类前体可以有烟酸、色氨酸、烟酰胺和NMN/NR。相较NAD+的其他补充方式，NMN绕过了NAMPT限速酶的瓶颈，可以迅速补充体内NAD+，是最佳的理想补充方法。NAD+分子比较大，外部直接补充的NAD+很难透过细胞膜，进入细胞内部，但NMN分子则很容易就穿过细胞膜，进入到细胞内部。一旦进入到细胞内部，2个NMN分子会结合在一起，形成一个NAD+分子。所以，定期摄入NMN，可以有效地增加其在体内NAD+的含量，有助于人类自身修复DNA的损伤，而达到延缓衰老的目的。

β-烟酰胺单核苷酸作为NAD+补救途径中的中间体，具有抗氧化、减少氧化应激的作用，在一些具体疾病的治疗，如脑卒中、心脏缺血再灌注、阿尔茨海默氏病、帕金森病、急性肾损伤、视网膜退行性疾病、II型糖尿病等中也有良好表现。特别是在抗衰老方面，NMN可以减缓生物体的生理衰退，增强能量代谢，延长寿命。鉴于NMN是人体内源性物质，安全性较高，将其作为活性物质在功能食品领域开发中具有广阔前景。

目前，NMN的生产方法，主要是化学合成法，酶发酵转化法等。这些方法NMN的产品中难免掺杂一些化学物质，目前难以应用于保健品、食品领域。

NMN化学性质不稳定，对光、氧、湿非常敏感，常常需要现用现配。如果采用常规辅料制成普通剂型，存在稳定性差、货架期短等诸多缺点。

为了解决NMN化学性质不稳定的问题，中国专利文献CN109364091A披露了一种方法，即先将NMN与生物高分子载体制成生物高分子纳米球，然后利用该高分子纳米球制成药学上可接受的剂型；中国专利文献CN110812365A披露了另一种方法，即首先利用离子交换树脂对NMN进行吸附制成载药树脂颗粒，然后利用包衣材料、增塑剂对载药树脂进行吸附。上述两种方法不仅工艺复杂且均使用了一些不常见的药用辅料。

小肽的活性很高，往往很小的量就能起很大的作用；小肽具有重要的生理功能。涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域，它可以调节体内各个系统和细胞的生理功能，维持人体的神经、消化、生殖、生长、运动、代谢、循环等系统的正常。小肽在人的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老，死亡的过程中起着关键作用。小肽是人体中最重要的活性物质。

发明内容

本发明的目的之一，是提供一种从食品青豆中直接提取NMN小肽，目的之二是提供NMN小肽与SOD、亚麻籽油(高含量α-亚麻酸)制成囊中囊凝胶糖果的方法。

为实现上述的发明目的，本发明采取的实施方式如下：

本发明所用原料，是新鲜青豆荚，深海热泉酵母SOD粉、亚麻籽油，生产步骤如下：

(1)豆浆生产

剥豆：先将青豆荚剥皮，得到青豆仁；

磨豆浆：浆青豆仁用胶体磨将青豆磨成浆；

超声提取：将上述豆浆，加水，50℃，20000HZ进行超声提取3小时；

离心过滤：采用高速离心机，过滤，得到青豆滤液和青豆滤饼；

(2)青豆NMN提取物粉体

滤液精过滤：采用竹式过滤机，用硅藻土进行精密过滤，得到NMN提取液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除提取液液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的NMN提取液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度160～180℃，出料90～110℃，得到青豆NMN粉，NMN含量1～10％；

筛分：得到的青豆NMN粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆NMN提取物粉；

(3)青豆小肽粉的制备

青豆滤饼酶解反应：将上述青豆滤饼加到反应釜中，加水5倍，进行酶解；先用纯碱将豆浆调节pH＝8.5～9.5，加热到50～55℃，搅拌活化2小时；之后加入青豆重量2％的碱性蛋白酶，在50～55℃搅拌反应2小时；再加入青豆重量2％的中性蛋白酶，调节pH＝6.5～7.5，在50～55℃搅拌反应2小时；之后调节pH＝4～6.5，加入青豆重量2％菠萝蛋白酶或和木瓜蛋白酶在50～75℃搅拌反应8小时；

灭酶活：升温至95℃，10分钟；

分离过滤：采用蝶式离心过滤机，将豆渣分离出去，收集滤液；豆渣烘干回收利用；

精密过滤：采用精密竹式硅藻土过滤机，对上述滤液进行精密过滤，得到澄清透明的青豆小肽水解液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除青豆小肽水解液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的青豆小肽水解液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度160～180℃，出料90～110℃，得到青豆小肽粉；

筛分：得到的青豆小肽粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆小肽粉成品；

(4)青豆NMN小肽SOD片：

采用下述比例压片：

NMN青豆提取物粉,50～80％，

NMN青豆小肽粉,10～30％，

酵母SOD粉(20万U/g),5～10％，

乳糖4％，

木糖醇0.5％，

硬脂酸镁，0.5％。

(5)NMN小肽及其SOD软胶囊生产方法

按照下列配比生产囊中囊软胶囊：

青豆NMN小肽SOD片，0.33g，

亚麻籽油(含α-亚麻酸，70％)，0.6g。

本发明的有益效果是：

1、本发明提供一种从天然食物中提取NMN的方法，并通过酶解技术，同时获得分子量180～500道尔顿的小肽，可以起到保护NMN、提高NMN稳定性的作用。同时增加了小肽的保健功能。

2、为了避免口服NMN经过胃时被胃酸破坏的情况，本发明同时使用高稳定性、高活性的深海热泉酵母SOD(过氧化物歧化酶)做稳定剂，将其压成NMN小肽SOD片。小肽和SOD可以同时保护NMN不易被胃酸分解，提高NMN的胃通过稳定性。SOD的强抗氧化特性也提高了产品的整体抗衰老性能。

3、本发明的NMN小肽SOD片，采用囊中囊的包裹方法，以亚麻籽油(高含量α-亚麻酸)制成囊中囊凝胶糖果。口服时上述软胶囊的外壳在胃中分解，NMN小肽SOD片基本不受胃酸影响，就进入肠道，在肠道充分吸收。软胶囊的介质含大量α-亚麻酸，是软化血管、保护心脏的保健成分，在保护NMN小肽SOD片不被胃酸侵蚀的同时，具有极强的保健效果。

本发明产品根据国家标准《GB 5009.5-2016蛋白质》相应的方法及步骤检测，指标符合该标准要求。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1

(1)豆浆生产

选用优质饱满的青豆荚500kg；

剥豆：先将青豆荚剥皮，得到青豆仁；

磨豆浆：将青豆仁加3倍纯净水，用胶体磨将青豆磨成浆；

超声提取：将上述青豆浆，加1倍纯化水，50℃，20000HZ进行超声提取3小时；

离心过滤：采用高速离心机，过滤，得到青豆滤液和青豆滤饼；

(2)青豆NMN提取物粉的制备

滤液精过滤：采用竹式过滤机，用硅藻土进行精密过滤，得到NMN提取液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除提取液液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的NMN提取液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度170℃，出料100℃，得到青豆NMN粗粉；

筛分：得到的青豆NMN粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆NMN提取物粉，NMN含量2.5％；

(3)青豆小肽粉的制备

青豆滤饼酶解反应：将上述青豆滤饼加到反应釜中，加水5倍，进行酶解；先用纯碱将豆浆调节pH＝9.5，加热到55℃，加入青豆重量的2％的碱性蛋白酶，在55℃搅拌反应2小时；再加入青豆重量2％的中性蛋白酶，调节pH＝7.5，50℃搅拌反应2小时；之后调节pH＝5，加入青豆重量2％菠萝蛋白酶或和木瓜蛋白酶在65℃搅拌反应8小时；

灭酶活：升温至95℃，10分钟；

分离过滤：采用蝶式离心过滤机，将豆渣分离出去，收集滤液；豆渣烘干回收利用；

精密过滤：采用精密竹式硅藻土过滤机，对上述滤液进行精密过滤，得到澄清透明的青豆小肽水解液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除青豆小肽水解液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的青豆小肽水解液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度180℃，出料110℃，得到青豆小肽粗粉；

筛分：得到的青豆小肽粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆小肽粉成品；青豆小肽粉的分子量分布98％以上在1000道尔顿以下，其中60％在180～500道尔顿之间，重均分子量310道尔顿。

(4)青豆NMN小肽SOD片：

采用下述比例压片：

NMN青豆提取物粉,60％

NMN青豆小肽粉,30％

酵母SOD粉(20万U/g),5％

乳糖4％

木糖醇0.5％

硬脂酸镁，0.5％；

(5)NMN小肽及其SOD软胶囊生产方法

按照下列配比生产囊中囊软胶囊：

青豆NMN小肽SOD片，0.33g

亚麻籽油(含α-亚麻酸，70％)，0.6g。

实施例2

(1)豆浆生产

选用优质饱满的青豆荚500kg；

剥豆：先将青豆荚剥皮，得到青豆仁；

磨豆浆：将青豆仁加3倍纯净水，用胶体磨将青豆磨成浆；

超声提取：将上述青豆浆，加1倍纯化水，45℃，50000HZ进行超声提取3小时；

离心过滤：采用高速离心机，过滤，得到青豆滤液和青豆滤饼；

(2)青豆NMN提取物粉的制备

滤液精过滤：采用竹式过滤机，用硅藻土进行精密过滤，得到NMN提取液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除提取液液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的NMN提取液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度160℃，出料90℃，得到青豆NMN粗粉；

筛分：得到的青豆NMN粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆NMN提取物粉；NMN含量1.8％；

(3)青豆小肽粉的制备

青豆滤饼酶解反应：将上述青豆滤饼加到反应釜中，加水5倍，进行酶解；先用纯碱将豆浆调节pH＝8.5，加热到50℃，加入青豆重量的2％的碱性蛋白酶，在50℃搅拌反应2小时；再加入青豆重量2％的中性蛋白酶，调节pH＝6.5，55℃搅拌反应2小时；之后调节pH＝4，加入青豆重量2％菠萝蛋白酶或和木瓜蛋白酶在50℃搅拌反应8小时；

灭酶活：升温至90℃，10分钟；

分离过滤：采用蝶式离心过滤机，将豆渣分离出去，收集滤液；豆渣烘干回收利用；

精密过滤：采用精密竹式硅藻土过滤机，对上述滤液进行精密过滤，得到澄清透明的青豆小肽水解液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除青豆小肽水解液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的青豆小肽水解液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度160℃，出料90℃，得到青豆小肽粉；

筛分：得到的青豆小肽粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆小肽粉成品；青豆小肽粉的分子量分布97％以上在1000道尔顿以下，其中56％在180～500道尔顿之间，重均分子量330道尔顿。

(4)青豆NMN小肽SOD片：

采用下述比例压片：

NMN青豆提取物粉,50％

NMN青豆小肽粉,30％

酵母SOD粉(20万U/g),15％

乳糖4％

木糖醇0.5％

硬脂酸镁，0.5％；

(5)NMN小肽及其SOD软胶囊生产方法

按照下列配比生产囊中囊软胶囊：

青豆NMN小肽SOD片，0.33g

亚麻籽油(含α-亚麻酸，70％)，0.6g。

实施例3

(1)豆浆生产

选用优质饱满的青豆荚500kg；

剥豆：先将青豆荚剥皮，得到青豆仁；

磨豆浆：将青豆仁加3倍纯净水，用胶体磨将青豆磨成浆；

超声提取：将上述青豆浆，加1倍纯化水，55℃，30000HZ进行超声提取3小时；

离心过滤：采用高速离心机，过滤，得到青豆滤液和青豆滤饼；

(2)青豆NMN提取物粉的制备

滤液精过滤：采用竹式过滤机，用硅藻土进行精密过滤，得到NMN提取液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除提取液液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的NMN提取液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度180℃，出料110℃，得到青豆NMN粉，NMN含量3.5％；

筛分：得到的青豆NMN粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆NMN提取物粉；

(3)青豆小肽粉的制备

青豆滤饼酶解反应：将上述青豆滤饼加到反应釜中，加水5倍，进行酶解；先用纯碱将豆浆调节pH＝9.0，加热到53℃，加入青豆重量的2％的碱性蛋白酶，在53℃搅拌反应2小时；再加入青豆重量2％的中性蛋白酶，调节pH＝7.0，53℃搅拌反应2小时；之后调节pH＝6.5，加入青豆重量2％菠萝蛋白酶或和木瓜蛋白酶在75℃搅拌反应8小时；

灭酶活：升温至93℃，10分钟；

分离过滤：采用蝶式离心过滤机，将豆渣分离出去，收集滤液；豆渣烘干回收利用；

精密过滤：采用精密竹式硅藻土过滤机，对上述滤液进行精密过滤，得到澄清透明的青豆小肽水解液；

膜精制浓缩：采用膜过滤器，先脱除青豆小肽水解液中的一价和二价离子，降低其电导率；之后进行浓缩脱水，得到浓缩的青豆小肽水解液；

喷雾干燥：采用喷雾干燥塔进行喷雾干燥，干燥塔进料温度170℃，出料100℃，得到青豆小肽粗粉；

筛分：得到的青豆小肽粉，采用60目超声波振动筛筛分，收集过60目筛的粉；

真空包装：将上述粉体真空包装，用铝箔袋封包，得到青豆小肽粉成品；青豆小肽粉的分子量分布99％以上在1000道尔顿以下，其中66％在180～500道尔顿之间，重均分子量290道尔顿。

(4)青豆NMN小肽SOD片：

采用下述比例压片：

NMN青豆提取物粉,80％

NMN青豆小肽粉,10％

酵母SOD粉(20万U/g),5％

乳糖4％

木糖醇0.5％

硬脂酸镁，0.5％；

(5)NMN小肽及其SOD软胶囊生产方法

按照下列配比生产囊中囊软胶囊：

青豆NMN小肽SOD片，0.33g

亚麻籽油(含α-亚麻酸，70％)，0.6g。

通过以上实施例可知，本发明是一种从天然食物中提取NMN的方法，并通过酶解技术，同时获得分子量180～400道尔顿的小肽，可以起到保护NMN、提高NMN稳定性的作用。同时增加了小肽的保健功能。

为了避免口服NMN经过胃时被胃酸破坏的情况，本发明同时使用高稳定性、高活性的SOD(过氧化物歧化酶)做稳定剂，将其压成NMN小肽SOD片。小肽和SOD可以同时保护NMN不易被胃酸分解，提高NMN的胃通过稳定性。SOD的强抗氧化特性也提高了产品的整体抗衰老性能。

本发明的NMN小肽SOD片，采用囊中囊的包裹方法，以亚麻籽油(高含量α-亚麻酸)制成囊中囊凝胶糖果。口服时上述软胶囊的外壳在胃中分解，NMN小肽SOD片基本不受胃酸影响，就进入肠道，在肠道充分吸收。软胶囊的介质含大量α-亚麻酸，是软化血管、保护心脏的保健成分，在保护NMN小肽SOD片不被胃酸侵蚀的同时，具有极强的保健效果。

需要进一步说明的是，本发明的实施例并非对本发明保护范围的限制，对于属于上述技术构思，并属于本领域显而易见的技术方案的调整，均应属于本发明保护范围之内。