一种以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法

技术领域

本发明涉及一种紫菜的育种方法，特别是以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法。

背景技术

紫菜(Porphyra)，是在海中互生藻类的统称。红藻纲，红毛菜科。藻体呈膜状，称为叶状体，紫色或褐绿色，形状随种类而异，紫菜属海产红藻。

紫菜的生长由较大的叶状体（配子体世代）和微小的丝状体（孢子体世代）两个形态截然不同的阶段组成。叶状体行有性生殖，由营养细胞分别转化成雌、雄性细胞，雌性细胞受精后经多次分裂形成果孢子，成熟后脱离藻体释放于海水中，随海水的流动而附着于具有石灰质的贝壳等基质上，萌发并钻入壳内生长，成长为丝状体。丝状体生长到一定程度产生壳孢子囊枝，进而分裂形成壳孢子。壳孢子放出后即附着于岩石或人工设置的木桩、网帘上直接萌发成叶状体。此外，某些种类的叶状体还可进行无性繁殖，由营养细胞转化为单孢子，放散附着后直接长成叶状体。单孢子在养殖生产上亦是重要苗源之一。

有些紫菜是雌雄同体，例如条斑紫菜和甘紫菜等。其生活史存在世代交替，即叶片状的配子体时期（n）和丝状的孢子体时期（2n）。配子体性别分化形成雌雄配子，受精后合子分裂形成果孢子（2n），果孢子萌发形成孢子体，孢子体成熟释放壳孢子（2n），壳孢子萌发时发生减数分裂，长成嵌合的叶状体（n）。杂交是重要的育种方法，杂交标记的方法很多，常用的如分子标记，存在筛选标记困难、筛选杂交株工作量大、成本较高等缺点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法，该方法以色素突变体作为标记，简单易行，结果便于观察，可快速获得杂交株，提高紫菜育种效率。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法，其特点是：该方法以色素突变体作为标记，筛选获得紫菜杂交株，其具体步骤如下：

（1）以母本株叶状体作为材料，用物理或化学方法诱变获得色素突变体株；（2）从母本突变株叶状体上部取一小片与父本株野生型叶状体上部取下的数片小片共同培养；两种小片性别分化各种产生雌雄配子，雌配子也即果孢位于叶片上与雄配子也即精子受精，分裂形成果孢子囊；

（3）将已形成的果孢子囊的色素突变体小片取出单独培养，收集释放的果孢子，培养这些附着在试管壁上果孢子让其萌发形成丝状体藻落，呈色素突变的藻落是色素突变体的自交丝状体；呈野生型颜色藻落是杂交株或是野生型自交株；

（4）挑选呈野生型颜色藻落单独培养，使其成熟释放壳孢子；壳孢子萌发过程发生减数分裂，使性状分离，杂合叶片会形成颜色嵌合现象；选择颜色嵌合叶片培养至1cm大小，将颜色为野生型的部分切下单独培养，使其性成熟发生自交，将获得的果孢子培养成丝状体，从而获得杂交的孢子体。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来实现进一步实现。以上所述的本发明以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法，其特点是：物理诱变方法可以采用紫外线、χ-射线、г-射线、快中子、以及α-射线、β-射线、激光或者超声波进行。化学诱变方法采用以下化学诱变剂：烷化剂、移码突变剂或者碱基类似物。所述的碱基类似物选自5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶或者6-氯嘌呤。诱变还可以采用物理诱变和化学诱变相搭配的复合处理方法。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明方法以色素突变体作为标记，简单易行，结果便于观察，可快速获得杂交株，提高紫菜育种效率，为进一步筛选做好准备。

附图说明

图1为本发明方法的流程图。

具体实施方式

以下进一步描述本发明的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进一步地理解本发明，而不构成对其权利的限制。

实施例1，参照图1，一种以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法，其特征在于，该方法以色素突变体作为标记，筛选获得紫菜杂交株，其具体步骤如下：

（1）以母本株叶状体作为材料，用物理或化学方法诱变获得色素突变体株；（2）从母本突变株叶状体上部取一小片与父本株野生型叶状体上部取下的数片小片共同培养；两种小片性别分化各种产生雌雄配子，雌配子也即果孢位于叶片上与雄配子也即精子受精，分裂形成果孢子囊；

（3）将已形成的果孢子囊的色素突变体小片取出单独培养，收集释放的果孢子，培养这些附着在试管壁上果孢子让其萌发形成丝状体藻落，呈色素突变的藻落是色素突变体的自交丝状体；呈野生型颜色藻落是杂交株或是野生型自交株；

（4）挑选呈野生型颜色藻落单独培养，使其成熟释放壳孢子；壳孢子萌发过程发生减数分裂，使性状分离，杂合叶片会形成颜色嵌合现象；选择颜色嵌合叶片培养至1cm大小，将颜色为野生型的部分切下单独培养，使其性成熟发生自交，将获得的果孢子培养成丝状体，从而获得杂交的孢子体。

本实施例的物理诱变方法可以采用紫外线、χ-射线、г-射线、快中子、以及α-射线、β-射线、激光或者超声波进行。化学诱变方法采用以下化学诱变剂：烷化剂、移码突变剂或者碱基类似物。所述的碱基类似物选自5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶或者6-氯嘌呤。诱变还可以采用物理诱变和化学诱变相搭配的复合处理方法。