一种髓样分化因子88抑制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及有机物合成技术领域，尤其涉及一种髓样分化因子88抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

固有免疫是人体应对外源性或内源性异质物刺激的生理过程。通常情况下，固有免疫能通过炎症反应清除产生刺激的异质物，保护人体健康。但当某些疾病发生时，免疫调节出现异常，使病变部位产生过量的炎症反应，即炎症风暴，进一步损害人体健康。

固有免疫系统依赖于种系编码受体，即模式识别受体(pattern recognitionreceptors,PRRs)，这些受体可以识别一种或多种病原相关模式分子(pathogen-associated molecular pattern,PAMPs)，以及损伤相关分子模式(damage-associatedmolecular pattern,DAMPs)，是启动固有免疫应答的免疫受体的代表。常见的模式识别受体包括Toll样受体(Toll-like receptors)，RIG-I样受体(RIG-I like receptors)，NOD样受体(NOD like receptors)，AIM2样受体(AIM2 like receptors)和C型凝集素受体，以及cGas和其他细胞内DNA传感器。Toll样受体是研究最多的PRR之一，哺乳动物中目前共发现有10种Toll样受体，其识别DAMPs或PAMPs后通过下游的衔接蛋白进行信号转导。目前发现5种衔接蛋白，分别为MyD88，TRIF，TRAM，MAI和SARM，其中MyD88和TRIF作为主要的衔接蛋白将信号转导至下游。TRIF参与TLR3和TLR4的信号转导，介导IFNβ的产生，主要作为MyD88非依赖途径参与炎性信号转导，而MyD88则参与除TLR3外的所有TLRs家族的信号转导，其是TLRs/IL-1R信号转导的中心分子，也是炎症相关信号通路调节的关键蛋白。

MyD88的激活，一方面导致下游MAPKs/p38/JNK通路激活，从而使AP-1活化，另一方面激活TAK1/TAB复合物，激活NF-κB，使其入核，进而产生促炎因子如TNF-α和IL-6，使得大量炎症相关因子和化学因子转录和表达。有多项研究表明，基因敲除MyD88的小鼠对脂多糖以及葡萄球菌肠毒素诱导的死亡有所耐受。MyD88作为TLRs/IL-R信号通路的一个关键蛋白靶点，有作为治疗炎症相关疾病的潜在能力，已逐渐受到越来越多的研究者关注。但是，目前现有技术中MyD88抑制剂却有限，亟需研发一些新的MyD88抑制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种髓样分化因子88抑制剂及其制备方法和应用，以弥补现有技术的不足。

本发明提供了一种髓样分化因子88抑制剂，为结构如式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；

其中:X和Y独立的包含CH

优选的，当X为C(O)或S(O)

优选的，R

优选的，为以下化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药：

化合物1：N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-[4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]苯磺酰胺

化合物2：4-(4-苄基哌嗪-1-基)-N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基苯磺酰胺

化合物3：N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯磺酰胺

化合物4：N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯磺酰胺

化合物5：4-{4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基苯磺酰胺

化合物6：N-(5-{[4-(4-{[(6-甲氧基吡啶-3-基)氨基]二氧亚基-λ6-硫基}-2-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-1,3-噻唑-2-基)乙酰胺

化合物7：N-(萘-1-基)-3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯甲酰胺

化合物8：3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物9：3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物10：4-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

化合物11：3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

化合物12：3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

化合物13：3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯甲酰胺

化合物14：3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯甲酰胺

化合物15：3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-苯基苯甲酰胺

化合物16：2-(4-{2-硝基-4-[(苯基氨基)甲基]苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

化合物17：4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯甲酰胺

化合物18：4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺

化合物19：4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺

化合物20：4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物21：4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物22：4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺

化合物23：4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺

化合物24：3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯磺酰胺

化合物25：3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯磺酰胺

化合物26：3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-苯基苯磺酰胺

化合物27：4-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物28：3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物29：3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物30：3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物31：4-{4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

化合物32：3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)-4-[4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]苯磺酰胺

化合物33：N-(5-{[4-(4-{二氧亚基[(吡啶-2-基甲基)氨基]-λ6-硫基}-2-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-1,3-噻唑-2-基)乙酰胺

化合物34：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-3-甲基哌啶

化合物35：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-甲基哌嗪

化合物36：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-乙基哌嗪

化合物37：1-{4-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]哌嗪-1-基}乙-1-酮

化合物38：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(4-硝基苯基)哌嗪

化合物39：2-{4-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]哌嗪-1-基}乙-1-醇

化合物40：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

化合物41：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(3-硝基苄基)哌嗪

化合物42：4-[(3-氟苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

化合物43：1-乙基-4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

化合物44：1-(4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

化合物45：1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

化合物46：2-(4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

化合物47：1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

化合物48：1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

化合物49：4-[(4-氟苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

化合物50：1-乙基-4-[4-(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基哌嗪

化合物51：1-(4-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

化合物52：1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

化合物53：2-(4-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

化合物54：1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

化合物55：1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

化合物56：1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苄基)哌嗪

化合物57：1-乙基-4-[4-(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基)哌嗪

化合物58：1-(4-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

化合物59：1-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

化合物60：2-(4-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

化合物61：1-(2-甲氧基乙基)-4-[4-(4-甲基苄基)磺酰基]2-硝基苯基)哌嗪

化合物62：4-[(4-甲氧基苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

化合物63：1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

化合物64：1-乙基-4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

化合物65：1-(4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

化合物66：1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

化合物67：2-(4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

化合物68：1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

化合物69：1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

化合物70：4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物71：4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物72：4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物73：4-{4-[(苯并[d][1,3]噻唑-2-基氨基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物74：4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物75：4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物76：4-{4-[(戊基氨基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物77：6-(4-甲氧基苯基)-4-{4-[(戊基氨基)甲基]苯基}-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物78：4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物79：6-(4-溴苯基)-4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物80：4-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物81：6-(4-溴苯基)-4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物82：6-(4-甲氧基苯基)-4-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物83：6-(4-溴苯基)-4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物84：4-{4-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-(4-溴苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

化合物85：2-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物86：2-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物87：2-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物88：2-{4-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物89：7-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物90：7-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物91：7-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物92：7-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

化合物93：7-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮。

本发明还提供了所述髓样分化因子88抑制剂的制备方法，化合物1～33的制备方法包含如下步骤：

(1)将

(2)将

本发明还提供了所述髓样分化因子88抑制剂的制备方法，化合物34～69的制备方法包含如下步骤：

(1)将碳酸氢钠、亚硫酸钠、4-氯-3-硝基苯磺酰氯和水混后合后进行反应，生成4-氯-3-硝基苯亚磺酸；所述碳酸氢钠、亚硫酸钠、4-氯-3-硝基苯磺酰氯和水的用量比为7～9mmol:7～9mmol:3～5mmol:20～40mL；所述反应的温度为室温，时间为1～5h；

(2)将4-氯-3-硝基苯亚磺酸、溴苄类物质和N,N-二甲基甲酰胺混合后进行反应，生成

(3)将

本发明还提供了所述髓样分化因子88抑制剂的制备方法，化合物70～84的制备方法包含如下步骤：

(1)将苯乙酮、氢氧化钠、

(2)在保护气氛下，将

(3)将

(4)在保护气氛下，将

本发明还提供了所述髓样分化因子88抑制剂的制备方法，化合物85～93的制备方法包含如下步骤：

(1)将

所述

所述反应的温度为80～90℃，时间为1～5h；

所述

所述

所述R

(2)在保护气氛下，将

所述

所述反应的温度为80～90℃，时间为1～5h；

(3)在保护气氛下，将中间产物、2-甲氧基乙基哌嗪、三乙胺和乙腈混合后进行反应，生成化合物85～93中的一种；

所述中间产物、2-甲氧基乙基哌嗪、三乙胺和乙腈的用量比为0.1～0.5mmol:0.1～0.5mmol:45～55μL:5～15mL；

所述反应的温度为80～90℃，时间为1～5h。

本发明还提供了所述髓样分化因子88抑制剂在制备治疗炎症相关疾病的药物制剂中的应用。

优选的，所述炎症相关疾病包含急性肺损伤和/或脓毒血症。

本发明提供了一种新的髓样分化因子88抑制剂及其制备方法和应用。所述新的髓样分化因子88抑制剂可以抑制炎症细胞因子超出正常量表达和释放，并以此为药理机制治疗过度炎症相关的疾病。实验表明，本发明提供的MyD88抑制剂具有有效的炎症因子的抑制作用以及更优的体内抗炎活性。

本发明通式I的MyD88抑制剂可以与酸生成它的药学上可接受的盐。酸可以包括无机酸或有机酸，与下列酸形成的盐是特别优选的：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、三氟乙酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、酒石酸、苯磺酸、苯甲酸或对甲苯磺酸等。

本发明还包括通式IMyD88抑制剂的前药。依据本发明，前药是通式I化合物的衍生物，它们自身可能具有较弱的活性或甚至没有活性，但是在给药后，在生理条件下(例如通过代谢、溶剂分解或另外的方式)被转化成相应的生物活性形式。

本发明可以含有上述通式I含有MyD88抑制剂，及其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物作为活性成份，与药学上可接受的载体或赋型剂混合制备成组合物，并制备成临床上可接受的剂型，上述药学上可接受的赋型剂是指任何可用于药学领域的稀释剂、辅助剂和/或载体。本发明的衍生物可以与其他活性成份组合使用，只要它们不产生其他不利的作用，例如过敏反应。

发明的药用组合物可配制成若干种剂型，其中含有药物领域中一些常用的赋形剂。如上所述的若干种剂型可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。

用于本发明药物组合物的载体是药物领域中可得到的常见类型，包括：粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂、防腐剂、加溶剂和基质等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。

附图说明

图1为实施例3化合物与MyD88蛋白的结合亲和力与浓度的关系。

图2为部分实施例化合物抑制LPS刺激J774A.1细胞释放IL-6的量效关系。

图3为部分实施例化合物抑制LPS刺激J774A.1细胞释放TNF-α的量效关系。

图4为以急性肺损伤为例，实施例3化合物缓解炎症引起的小鼠生理学变化效果。A湿重/干重比(W/D)；B肺泡灌洗液中白细胞蛋白浓度；C肺泡灌洗液中IL-6表达量；D肺泡灌洗液中TNF-α表达量；E血清中IL-6表达量；F血清TNF-α表达量。

图5为以急性肺损伤中肺组织为例，实施例3化合物缓解炎症引起的病理学变化。

图6为以脓毒血症为例，实施例3化合物缓解炎症引起小鼠死亡的变化。

图7为以脓毒血症为例，实施例3化合物缓解炎症引起小鼠脾脏的病理学变化。

具体实施方式

按照本发明的通式Ⅰ化合物，R

抑或：

抑或：

抑或：

化合物1～33的制备方法中：

所述

步骤(1)所述反应的温度为-5～5℃，优选为-2～2℃，进一步优选为0℃；时间为5～15h，优选为8～12h，进一步优选为10h；

所述

步骤(2)所述反应的温度为60～80℃，优选为65～75℃，进一步优选为70～72℃；时间为1～10h，优选为2～8h，进一步优选为4～6h。

化合物34～69的制备方法中：

所述碳酸氢钠、亚硫酸钠、4-氯-3-硝基苯磺酰氯和水的用量比为7～9mmol:7～9mmol:3～5mmol:20～40mL，优选为8mmol:8mmol:4mmol:25～30mL；

步骤(1)所述反应的温度为室温，时间为1～5h，优选为2～4h；

所述4-氯-3-硝基苯亚磺酸、溴苄类物质和N,N-二甲基甲酰胺的用量比为0.4～0.5mmol:0.6～0.8mmol:2～8mL，优选为0.42～0.45mmol:0.65～0.7mmol:4～6mL；

步骤(2)所述反应的温度为70～90℃，优选为75～85℃，进一步优选为80℃；时间为1～5h，优选为2～4h，进一步优选为3h；

所述

步骤(3)所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～4h。

化合物70～84的制备方法中：

所述苯乙酮、氢氧化钠、

步骤(1)中所述反应的温度为室温，时间为5～15h，优选为8～12h；

步骤(2)所述保护气氛优选为氮气或者氩气；

所述

步骤(2)所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h；

所述

步骤(3)所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h；

步骤(4)所述保护气氛优选为氮气或者氩气；

所述

步骤(4)所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h。

化合物85～93的制备方法中：

步骤(1)中所述

所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h；

步骤(2)中所述

所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h；

步骤(3)中所述中间产物、2-甲氧基乙基哌嗪、三乙胺和乙腈的用量比为0.1～0.5mmol:0.1～0.5mmol:45～55μL:5～15mL，优选为0.2～0.3mmol:0.3～0.4mmol:48～53μL:8～12mL；

所述反应的温度为80～90℃，优选为85～87℃；时间为1～5h，优选为2～3h；

步骤(2)和步骤(3)中所述保护气氛独立的包含氮气或氩气。

本发明按照制备通式I的方法，分别制得实施例1～93的化合物，结构式如下表1所示。

表1实施例1～93的结构式

实施例1、N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-[4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]苯磺酰胺

步骤一：4-氯-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺

在25mL圆底烧瓶中加入二氯甲烷(5mL)溶解5-氨基-2-甲氧基吡啶(200mg,1.61mmol)，而后在0℃下分批加入4-氯-3-硝基苯磺酰氯(413mg,1.61mmol)，室温反应过夜。减压蒸干二氯甲烷，加入水中溶解产物，并用EtOAc萃取水层。将合并的有机提取物用无水硫酸钠干燥。减压蒸干乙酸乙酯，柱层析分离(PE:EA＝4:1)得，即为4-氯-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺，收率为70％。

步骤二：N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基-4-(4-嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)苯磺酰胺

在25mL圆底烧瓶中依次将步骤一中合成的4-氯-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺(50mg,0.15mmol)，2-(哌嗪-1-基)嘧啶(35mg,0.22mmol)，碳酸钾(40mg,0.29mmol)，碘化钠(44mg,0.29mmol)加入6mL无水四氢呋喃中，70℃下回流4h。反应结束后减压蒸干四氢呋喃，用EA萃取，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸镁干燥。减压蒸干EA，柱层析分离(DCM:Methanol＝20:1)得，即为N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基-4-(4-嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)苯磺酰胺，收率为90％。

按照实施例1的方法，分别制得实施例2～33化合物

实施例2、4-(4-苄基哌嗪-1-基)-N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基苯磺酰胺

实施例3、N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯磺酰胺

实施例4、N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯磺酰胺

实施例5、4-{4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(2-甲氧基吡啶-5-基)-3-硝基苯磺酰胺

实施例6、N-(5-{[4-(4-{[(6-甲氧基吡啶-3-基)氨基]二氧亚基-λ6-硫基}-2-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-1,3-噻唑-2-基)乙酰胺

实施例7、N-(萘-1-基)-3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}苯甲酰胺

实施例8、3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例9、3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例10、4-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

实施例11、3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

实施例12、3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺

实施例13、3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯甲酰胺

实施例14、3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯甲酰胺

实施例15、3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-苯基苯甲酰胺

实施例16、2-(4-{2-硝基-4-[(苯基氨基)甲基]苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

实施例17、4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯甲酰胺

实施例18、4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺

实施例19、4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-N-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-硝基苯磺酰胺

实施例20、4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例21、4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例22、4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺

实施例23、4-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺

实施例24、3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯磺酰胺

实施例25、3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-苯基苯磺酰胺

实施例26、3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-苯基苯磺酰胺

实施例27、4-(4-苄基哌嗪-1-基)-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例28、3-硝基-4-{4-[(3-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例29、3-硝基-4-{4-[(4-硝基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例30、3-硝基-4-[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例31、4-{4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基}-3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)苯磺酰胺

实施例32、3-硝基-N-(吡啶-2-基甲基)-4-[4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]苯磺酰胺

实施例33、N-(5-{[4-(4-{二氧亚基[(吡啶-2-基甲基)氨基]-λ6-硫基}-2-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-1,3-噻唑-2-基)乙酰胺

实施例34、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-3-甲基哌啶

步骤一：4-氯-3-硝基苯亚磺酸

在25mL圆底烧瓶中将碳酸氢钠(656.16mg,7.81mmol)，亚硫酸钠(984.46mg,7.81mmol)，4-氯-3-硝基苯磺酰氯(1.00g,3.91mmol)依次加入水(30mL)中，室温反应2小时。减压蒸干乙醇，用EA萃取，乙醇重结晶得，即为4-氯-3-硝基苯亚磺酸，收率为90％。

步骤二：4-苄基磺酰基-1-氯-2-硝基苯

在25mL圆底烧瓶中将步骤一制得的4-氯-3-硝基苯亚磺酸(100.00mg,0.45mmol)，溴苄(115.77mg,0.67mmol)，依次加入DMF(5mL)中，80℃反应2小时。加入冰水淬灭反应，用EA萃取，柱层析分离(DCM:MeOH＝20:1)得，即为4-苄基磺酰基-1-氯-2-硝基苯，收率为36％。

步骤三：1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-3-甲基哌啶

在25mL圆底烧瓶中将步骤二制得的4-苄基磺酰基-1-氯-2-硝基苯(30mg,0.096mmol)，碘化钾(19.17mg,0.12mmol)，三甲基哌啶(11.45mg,0.12mmol)，碳酸钾(15.96mg,0.12mmol)依次加入乙腈(5mL)中，85℃反应2小时。加入冰水淬灭反应，用EA萃取，柱层析分离(DCM:MeOH＝20:1)得，即为1-(4-苄基磺酰基)-2-硝基苯基-3-甲基哌啶，收率为76％。

按照实施例34的方法，分别制得实施例35～69化合物

实施例35、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-甲基哌嗪

实施例36、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-乙基哌嗪

实施例37、1-{4-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]哌嗪-1-基}乙-1-酮

实施例38、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(4-硝基苯基)哌嗪

实施例39、2-{4-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]哌嗪-1-基}乙-1-醇

实施例40、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

实施例41、1-[4-(苄基磺酰基)-2-硝基苯基]-4-(3-硝基苄基)哌嗪

实施例42、4-[(3-氟苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

实施例43、1-乙基-4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

实施例44、1-(4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

实施例45、1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

实施例46、2-(4-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

实施例47、1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

实施例48、1-{4-[(3-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

实施例49、4-[(4-氟苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

实施例50、1-乙基-4-[4-(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基哌嗪

实施例51、1-(4-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

实施例52、1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

实施例53、2-(4-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

实施例54、1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

实施例55、1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

实施例56、1-{4-[(4-氟苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苄基)哌嗪

实施例57、1-乙基-4-[4-(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基)哌嗪

实施例58、1-(4-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

实施例59、1-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

实施例60、2-(4-{4-[(4-甲基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

实施例61、1-(2-甲氧基乙基)-4-[4-(4-甲基苄基)磺酰基]2-硝基苯基)哌嗪

实施例62、4-[(4-甲氧基苄基)磺酰基]-N，N-二甲基-2-硝基苯胺

实施例63、1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

实施例64、1-乙基-4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪

实施例65、1-(4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-酮

实施例66、1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(4-硝基苯基)哌嗪

实施例67、2-(4-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}哌嗪-1-基)乙-1-醇

实施例68、1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(2-甲氧基乙基)哌嗪

实施例69、1-{4-[(3-甲氧基苄基)磺酰基]-2-硝基苯基}-4-(3-硝基苄基)哌嗪

实施例70、4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

步骤一：(E)-1-苯基-3-(对甲苯基)丙-2-烯-1-酮

在25mL圆底烧瓶中将苯乙酮(2.00g,16.65mmol)，氢氧化钠(1.00g,25.00mmol)，对甲基苯甲醛(2.00g,16.65mmol)依次加入乙醇(10mL)中，室温反应过夜。抽滤得，即为(E)-1-苯基-3-(对甲苯基)丙-2-烯-1-酮，收率为90％。

步骤二：(E)-3-[4-(溴甲基)苯基]-1-苯基丙-2-烯-1-酮

在25mL圆底烧瓶中将步骤一制得的(E)-1-苯基-3-(对甲苯基)丙-2-烯-1-酮(500.00mg,2.25mmol)，N-溴代琥珀酰亚胺(440.38mg,2.47mmol)，偶氮二异丁腈(73.87mg,0.45mmol)依次加入四氯化碳(20mL)中，氮气保护下85℃反应2h。旋蒸蒸干四氯化碳，EA萃取。蒸干EA，柱层析(PE:EA＝10:1)得，即为(E)-3-[4-(溴甲基)苯基]-1-苯基丙-2-烯-1-酮，收率为60％。

步骤三：(E)-3-(4-{[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮

在25mL圆底烧瓶中将步骤二制得的(E)-3-[4-(溴甲基)苯基]-1-苯基丙-2-烯-1-酮(200mg,0.66mmol)，2-羟乙基哌嗪(129.68mg,1.00mmol)，三乙胺(100.80mg,1.00mmol)依次加入乙腈(10mL)中，85℃反应2h。旋蒸蒸干乙腈，EA萃取。蒸干EA，柱层析(PE:EA＝1:1)得，即为(E)-3-(4-{[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮，收率为60％。

步骤四：4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

在25mL圆底烧瓶中将步骤三制得的E)-3-(4-{[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮(100.00mg,0.29mmol)，脲(25.70mg,0.43mmol)，叔丁醇钠(32.91mg,0.34mmol)依次加入四氢呋喃(5mL)中，氮气保护下85℃反应2h。旋蒸蒸干四氢呋喃，EA萃取。蒸干EA，柱层析(PE:EA＝1:1)得，即为4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮，收率为40％。

按照实施例70的方法，分别制得实施例71～84化合物

实施例71、4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例72、4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例73、4-{4-[(苯并[d][1,3]噻唑-2-基氨基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例74、4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例75、4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例76、4-{4-[(戊基氨基)甲基]苯基}-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例77、6-(4-甲氧基苯基)-4-{4-[(戊基氨基)甲基]苯基}-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例78、4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例79、6-(4-溴苯基)-4-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例80、4-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-6-苯基-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例81、6-(4-溴苯基)-4-{4-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]苯基}-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例82、6-(4-甲氧基苯基)-4-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例83、6-(4-溴苯基)-4-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例84、4-{4-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-6-(4-溴苯基)-1,2-二氢嘧啶-2-酮

实施例85、2-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

步骤一：2-(4-甲基苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

在25mL圆底烧瓶中将2-氨基苯甲酰胺(1.00g,7.34mmol)，碘(2.05g,8.08mmol)，对甲基苯甲醛(1.06g,8.81mmol)依次加入乙醇(10mL)中，85℃反应2小时。5％亚硫酸钠溶液淬灭反应，抽滤得，即为2-(4-甲基苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮，收率为90％。

步骤二：2-[4-(溴甲基)苯基]-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

在25mL圆底烧瓶中将步骤一制得的2-(4-甲基苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮(1.70g,7.20mmol)，N-溴代琥珀酰亚胺(1.41g,7.91mmol)，偶氮二异丁腈(236.30mg,1.44mmol)依次加入四氯化碳(30mL)中，氮气保护下85℃反应2h。旋蒸蒸干四氯化碳，EA萃取。蒸干EA，柱层析(PE:EA＝5:1)得，即为2-[4-(溴甲基)苯基]-3,4-二氢喹唑啉-4-酮，收率为60％。

步骤三：2-(4-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

在25mL圆底烧瓶中将步骤二制得的(E)-3-[4-(溴甲基)苯基]-1-苯基丙-2-烯-1-酮(100mg,0.32mmol)，2-甲氧基乙基哌嗪(50.33mg,0.35mmol)，三乙胺(48.51μL)依次加入乙腈(10mL)中，氮气保护下85℃反应2h。旋蒸蒸干乙腈，EA萃取。蒸干EA，柱层析(PE:EA＝1:1)得，即为(E)-3-(4-{[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮，收率为60％。

按照实施例85的方法，分别制得实施例86～93化合物

实施例86、2-(4-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例87、2-(4-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例88、2-{4-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例89、7-{[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例90、7-{[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例91、7-{[4-(4-硝基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例92、7-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

实施例93、7-[(4-{2-[(2-羟基乙基)氧基]乙基}哌嗪-1-基)甲基]-2-苯基-3,4-二氢喹唑啉-4-酮

本发明产物的药理研究

(1)实施例化合物与MyD88蛋白的结合亲和力与浓度的关系

本实施例测试了实施例3化合物与MyD88蛋白的结合亲和力与浓度的关系。具体方法如下：利用标准氨基化学偶联法固定rh MyD88蛋白于CM7传感芯片表面，先20μg/mL蛋白溶于醋酸缓冲液(pH 5.5、5.0、4.5、4.0)以静电吸附作用预富集在CM7传感芯片(流速10μL/min)，再以100μL的0.05M NHS和0.2M EDC混合溶液活化，反应10min催化蛋白的氨基和芯片上的活性羧基基团交联。最后用150μL的1M盐酸乙醇胺封闭未反应的活性羧基基团并洗去非共价吸附的物质(蛋白偶联量至少25000RFU)。PBSP缓冲液冲洗直至基线稳定。取出CM7芯片备用。动力学测定时，实施例3化合物用PBSP(含5％DMSO)稀释50μM，分别注射到已固定rhMyD88的CM7传感芯片上，每次注射50μl，测定3次。每次测定后，用含10mM Gly-Hcl(pH 2.5)溶液再生传感芯片，然后进行下一次测定。实验结果用评估软件BIAevaluation评估其结合力。实验结果如图1所示，所测试的实施例3化合物可直接结合MyD88，其结合亲和力的Kd值为5.3×10

(2)实施例化合物抑制LPS刺激巨噬细胞释放炎症因子的量效关系

本实施例测试了部分活性实施例化合物抑制LPS刺激J774A.1小鼠巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的量效关系。具体方法如下：1.2×10

(3)实施例化合物缓解由炎症引起的小鼠生理学变化

以缓解急性肺损伤所引起的生理学变化为例。用0.5％羧甲基纤维素钠与实施例化合物制成混悬液用于腹腔给药。各组小鼠乙醚麻醉后暴露气管，除对照组外，其余各组气管内缓慢滴入50μL 5mg/kg LPS，造成小鼠急性肺损伤，对照组以相同的方式滴入等量生理盐水，缝合伤口，建立急性肺损伤模型。动物造模24h后，按照5mL/kg的剂量腹腔注射10％的水合氯醛麻醉老鼠，开胸结扎左肺，右肺用1mL生理盐水进行支气管肺泡灌洗，收集灌洗液，相同操作重复3次。

肺泡灌洗液收集后，4℃1000rpm离心5分钟，取上清液，测肺泡灌洗液的蛋白浓度。肺泡灌洗液离心后，用50μL生理盐水重悬沉淀，混匀后取20μL用细胞计数仪Standard计数肺泡灌洗液中的总细胞数。此外，取右肺上叶，滤纸吸去组织上的水分后称取湿重，放入60℃烘烤48h以上，直到其重量不再发生变化为止，称取干重，计算肺组织湿重/干重比(W/D)，判断肺水肿程度。以实施例3化合物为例，实验数据见图4，其中3代表实施例3化合物，结果表明实施例化合物在生理学上可有效缓解小鼠急性肺损伤。

(4)实施例化合物缓解炎症引起的小鼠病理学变化试验

以缓解由急性肺损伤引起的小鼠肺组织病理学变化为例。实验数据见图5，正常对照组小鼠肺泡腔清晰，结构完整，壁光滑；气管滴注LPS造成急性肺损伤模型后，肺泡壁明显水肿、增厚，炎症细胞浸润增加；给予实施例3化合物治疗后细胞水肿、增厚显著减弱，且炎症细胞浸润明显减少，与正常组差别不大，说明实施例3化合物可有效缓解急性肺损伤中肺组织损伤。

(5)实施例化合物缓解炎症引起的小鼠生存率变化试验

以缓解脓毒血症所引起的小鼠生存率变化为例。用0.5％羧甲基纤维素钠与实施例3化合物制成混悬液用于腹腔给药。各组小鼠乙醚麻醉后暴露气管，除对照组外，其余各组腹腔注射20μL 20mg/kg LPS，造成小鼠脓毒血症，对照组以相同的方式注射等量生理盐水，建立脓毒血症模型。动物造模7天内，每日记录小鼠存活情况。实验数据见图6，结果表明实施例化合物可以有效降低脓毒血症引起的小鼠的死亡率。

(6)实施例化合物缓解炎症引起的小鼠脾脏病理学变化试验

以缓解由脓毒血症引起的小鼠脾脏组织病理学变化为例。实验数据见图7，正常对照组小鼠脾脏清晰，结构完整，白髓红髓分明；腹腔注射LPS造成脓毒血症模型后，小鼠脾脏肿大，白髓扩散；给予实施例3化合物治疗后脾脏肿大减少，白髓与正常组差别不大，说明实施例3化合物可有效缓解脓毒血症引起的脾脏损伤。

从上述试验结果可以清楚地看出，本发明所要保护的通式Ⅰ的化合物，具有良好的抗炎活性。