一种复合菌剂、发酵饲料及其制备方法

技术领域

本发明属于畜牧养殖技术领域，具体地，涉及一种复合菌剂、发酵饲料及其制备方法。

背景技术

畜牧业有一个很重要的任务，就是将质量差的、不能被人类直接食用的粮食作物转化为优质的肉、蛋、奶等高质量的人类的营养物质。目前，复合菌剂在饲料中的应用，促进了动物的生产、保护了动物的健康，对集约化养殖业的发展做出了重大贡献；复合菌剂发酵饲料是指在人工控制条件下，菌种通过自身的代谢活动，将植物性、动物性和矿物质中的抗营养因子分解或转化为养分含量更高、无毒无害且更容易被畜禽采食消化吸收的饲料原料。

但随着时间的推移，复合菌剂发酵饲料中存在的问题日益显现，并受到社会的广泛关注；在畜禽养殖业中，发酵饲料常出现霉变、变质，使得饲用后畜禽生长缓慢，抗病力下降的问题。因此，研究一种能解决发酵饲料给畜禽食用后，其抑菌、促生长效果不佳的问题的发酵饲料显得尤为迫切。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复合菌剂、发酵饲料及其制备方法，加入了丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌，四者协同作用，使其混合而成的复合菌剂再制成的发酵饲料具有优异的抑菌和促生长作用；这是因为，丁酸梭菌和屎肠球菌从限制致病菌的生存到按捺其繁衍入手，起到抑菌作用，在此基础上，加以蜡样芽孢杆菌和保加利亚乳杆菌进一步加强抑菌效果，同时刺激动物的食欲，提高饲料利用率，促进动物生长。此外，加入的复合菌剂中还加入了纤维素分解菌和嗜酸菌，以纤维素分解菌有效分解发酵饲料中的纤维素和复杂碳水化合物，以嗜酸菌快速发酵，产生乳酸、醋酸、丙酸等有机酸，有效提高了发酵饲料的品质和发酵效率。解决了复合菌剂、发酵饲料现有技术中，发酵饲料对畜禽食用后，其抑菌、促生长效果不佳的问题。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种复合菌剂，所述复合菌剂包括如下重量份的原料：

进一步地，所述丁酸梭菌的总活菌数为1×10

进一步地，所述保加利亚乳杆菌的总活菌数为1×10

进一步地，所述纤维素分解菌的总活菌数为1×10

进一步地，所述复合菌剂的制备方法包括如下步骤：

称取丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、纤维素分解菌和嗜酸菌，混合均匀，得到复合菌剂。

一种发酵饲料，所述发酵饲料的制备方法包括如下步骤：

S1、将基础发酵原料混合并打碎，然后加入水混合搅拌均匀，得到混合料；

S2、向混合料中加入复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶并搅拌均匀，恒温静置并密封发酵，得到发酵饲料。

进一步地，步骤S1所述基础发酵原料包括玉米粉、鱼粉、豆粕、麦皮、米糠、骨粉、食盐、小麦粉、石粉、麦麸、菜粕和棉粕中的至少两种。

进一步地，步骤S1所述打碎为将基础发酵原料打碎至长度为3-6cm；所述基础发酵原料和水的质量比为1:0.3-0.5。

进一步地，步骤S2所述混合料、复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶的质量比为1:0.15-0.35:0.1-0.15:0.3-0.5。

进一步地，步骤S2所述恒温静置并密封发酵的温度为25-35℃，时间为3-5天。

本发明的有益效果：

(1)本发明加入了丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌，四者协同作用，使其混合而成的复合菌剂再制成的发酵饲料具有优异的抑菌和促生长作用。

这是因为，丁酸梭菌具有防止病原菌及腐败菌在肠道内异常增殖以及促进肠道有益菌群增殖、发育的双重作用，且其可以长时间粘附在肠道中不被肠蠕动冲走，从而限制了致病菌之间的生存；而屎肠球菌其代谢产物如乳酸和醋酸能够降低发酵饲料的pH值，按捺动物病原菌繁衍，改进动物肠道菌群的成长繁衍环境，从而抑制其他微生物的生长，并维持肠道内的微生态平衡；即丁酸梭菌和屎肠球菌从限制致病菌的生存到按捺其繁衍入手，起到了抑菌作用；

在此基础上，加以蜡样芽孢杆菌和保加利亚乳杆菌，保加利亚乳杆菌能产生过氧化氢和多种抗菌素，有利于调整肠道中菌群之间的平衡，预防致病菌在动物免疫力低时发生感染的作用，从而对动物起到保护作用，其次，保加利亚乳杆菌在饲料中富含呈味核苷酸、谷氨酸等天然诱食成分，具有独特的发酵香味，有助于刺激动物的食欲，促进消化液的分泌，提高消化酶的活性，加速饲料营养成分的分解，从而促进营养物质的吸收，使得采食量和采食速度全面提高；而蜡样芽孢杆菌能迅速消耗环境中的游离氧并激活免疫系统，造成肠道低氧环境并防止耐药菌的产生，其次，蜡样芽孢杆菌可产生有机酸、脂肪酶、蛋白酶和酶促因子等，有利于促进消化吸收，提高饲料利用率，从而促进动物生长；

即在丁酸梭菌和屎肠球菌抑菌的基础上，配以保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌，产生协同作用，以保加利亚乳杆菌调整菌群平衡、预防感染、促进采食，以蜡样芽孢杆菌防止耐药菌产生、促进消化吸收进而促进动物生长；即四者协同作用，使复合菌剂兼具抑菌和促生长作用。

(2)本发明制得的发酵饲料中，其加入的复合菌剂中加入了纤维素分解菌和嗜酸菌，有效提高了发酵饲料的品质和发酵效率。这是因为，纤维素分解菌能有效分解发酵饲料中的纤维素和复杂碳水化合物，使其快速的水解成小分子物质并产生大量的可溶性营养物质和简单糖类，提高了生物利用率，而嗜酸菌则可以利用这些物质进行快速发酵，产生乳酸、醋酸、丙酸等有机酸，降低了饲料中的pH值，且饲料的可消化性和口感得到了改善，同时也促进了发酵饲料的粗纤维降解，进而使得发酵饲料的品质得到显著提高。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种复合菌剂，所述复合菌剂包括如下重量份的原料：

其中，所述丁酸梭菌的总活菌数为1×10

所述复合菌剂的制备方法包括如下步骤：

称取上述丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、纤维素分解菌和嗜酸菌，混合均匀，得到复合菌剂。

实施例2

一种复合菌剂，所述复合菌剂包括如下重量份的原料：

其中，所述丁酸梭菌的总活菌数为1×10

所述复合菌剂的制备方法包括如下步骤：

称取上述丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、纤维素分解菌和嗜酸菌，混合均匀，得到复合菌剂。

实施例3

一种复合菌剂，所述复合菌剂包括如下重量份的原料：

其中，所述丁酸梭菌的总活菌数为1×10

所述复合菌剂的制备方法包括如下步骤：

称取上述丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、纤维素分解菌和嗜酸菌，混合均匀，得到复合菌剂。

对比例1-4

与实施例3相比，区别在于，对比例1-4中的丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌添加的重量份如表1所示，其余原料添加量、制备步骤和参数均相同。

表1

对比例5

与实施例3相比，区别在于，对比例5中不添加纤维素分解菌，余原料添加量、制备步骤和参数均相同。

对比例6

与实施例3相比，区别在于，对比例5中不添加嗜酸菌，余原料添加量、制备步骤和参数均相同。

实施例4

一种发酵饲料，所述发酵饲料的制备方法包括如下步骤：

S1、将玉米粉、鱼粉、豆粕和麦皮按等质量比混合并打碎至长度为5cm，然后加入水混合搅拌均匀，得到混合料；

S2、向混合料中加入实施例1制得的复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶并搅拌均匀，于25℃下恒温静置并密封发酵3天，得到发酵饲料。

所述玉米粉、鱼粉、豆粕和麦皮的总质量和水的质量比为1:0.5；所述混合料、复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶的质量比为1:0.15:0.13:0.5。

实施例5

一种发酵饲料，所述发酵饲料的制备方法包括如下步骤：

S1、将米糠、骨粉、食盐、菜粕和棉粕按等质量比混合并打碎至长度为3cm，然后加入水混合搅拌均匀，得到混合料；

S2、向混合料中加入实施例3制得的复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶并搅拌均匀，于35℃下恒温静置并密封发酵4天，得到发酵饲料。

所述米糠、骨粉、食盐、菜粕和棉粕的总质量和水的质量比为1:0.3；所述混合料、复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶的质量比为1:0.35:0.1:0.4。

实施例6

一种发酵饲料，所述发酵饲料的制备方法包括如下步骤：

S1、将玉米粉、鱼粉、小麦粉、石粉和麦麸按等质量比混合并打碎至长度为6cm，然后加入水混合搅拌均匀，得到混合料；

S2、向混合料中加入实施例2制得的复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶并搅拌均匀，于30℃下恒温静置并密封发酵5天，得到发酵饲料。

所述玉米粉、鱼粉、小麦粉、石粉和麦麸的总质量和水的质量比为1:0.4；所述混合料、复合菌剂、葡萄糖和葡萄糖氧化酶的质量比为1:0.25:0.15:0.3。

对比例7-12

与实施例5相比，区别在于，将对比例7-12步骤S2中实施例3制得的复合菌剂分别依次替换为对比例1-6制得的复合菌剂，其余原料添加量、制备步骤和参数均相同。

测试例1

称取40g(精确至0.001g)实施例4-6和对比例7-10制得的发酵饲料于250mL三角瓶中，加70mL甲醇，混匀浸提2h后用4层纱布过滤，4℃保存，得到浸提液。在已制备好的大肠杆菌和沙门氏菌病原菌平板上打孔，每孔中加入100μL前述浸提液，于37℃培养24h，量取抑菌圈直径并记录，以此测试发酵饲料的抑菌效果。试验结果用Excel2019、SPSS22.0软件进行数据处理和分析。其结果如表2所示。

表2

由表2可以看出，本发明制得的发酵饲料中，其加入的复合菌剂中加入了丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌，四者协同作用，使发酵饲料具有优异的抑菌作用。这是因为，丁酸梭菌具有防止病原菌及腐败菌在肠道内异常增殖以及促进肠道有益菌群增殖、发育的双重作用，且其可以长时间粘附在肠道中不被肠蠕动冲走，从而限制了致病菌之间的生存；而屎肠球菌其代谢产物如乳酸和醋酸能够降低发酵饲料的pH值，按捺动物病原菌繁衍，改进动物肠道菌群的成长繁衍环境，从而抑制其他微生物的生长，并维持肠道内的微生态平衡；即丁酸梭菌和屎肠球菌从限制致病菌的生存到按捺其繁衍入手，起到了抑菌作用；在此基础上，加以蜡样芽孢杆菌和保加利亚乳杆菌，以保加利亚乳杆菌调整肠道中菌群之间的平衡，预防致病菌在动物免疫力低时发生感染的作用，以蜡样芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧并激活免疫系统，造成肠道低氧环境并防止耐药菌的产生，从而起到抑菌作用。

测试例2

选取初始体重相近(10±0.3kg)的健康断奶仔猪，随机分成7组，每组设3个重复，每个重复10头。分别饲喂实施例4-6和对比例7-10制得的发酵饲料。试验期间，仔猪自由采食，自由饮水，常规免疫，试验期为30天。分别于试验开始和结束时，个体空腹称重；而试验期间，每日观察猪群生长情况、测试增重情况和记录饲料消耗情况，以此记录仔猪的平均日增重和平均日采食量。数据统计采用SPSS18.0统计软件进行单因素方差分析，结果以平均值±标准差表示，其结果见表3。

表3

由表3可以看出，本发明制得的发酵饲料中，其加入的复合菌剂中加入了丁酸梭菌、屎肠球菌、保加利亚乳杆菌和蜡样芽孢杆菌，四者协同作用，使发酵饲料具有极好的促生长作用。这是因为，复合菌剂中的保加利亚乳杆菌在饲料中富含呈味核苷酸、谷氨酸等天然诱食成分，具有独特的发酵香味，有助于刺激动物的食欲，促进消化液的分泌，提高消化酶的活性，加速饲料营养成分的分解，从而促进营养物质的吸收，使得采食量和采食速度全面提高；而蜡样芽孢杆菌可产生有机酸、脂肪酶、蛋白酶和酶促因子等，有利于促进消化吸收，提高饲料利用率，从而促进动物生长。

测试例3

(1)发酵饲料粗纤维检测：根据GB/T6434-2006，对实施例4-6和对比例11-12制得的发酵饲料进行粗纤维检测，以此判断发酵饲料是否发酵成功，其检测结果如表4所示。

(2)发酵饲料品质检测：

1)外观：观察发酵完成的发酵饲料是否出现霉变现象，若有霉变，代表发酵饲料品质差。

2)气味：观察发酵完成的发酵饲料是否出现腥味、臭味、酸香味、酒香味或酱香味。若存在腥味或臭味，代表发酵饲料品质差；若存在酸香味或酒香味或酱香味，代表发酵饲料品优。

3)质地：触摸发酵完成的发酵饲料。若触摸手感柔软，代表发酵饲料质地好；若触摸手感黏结成团形成烂泥样或过硬，都代表发酵饲料质地差。

以此对实施例4-6和对比例11-12制得的发酵饲料进行品质检测，其结果如表4所示。

表4

由表4可以看出，本发明制得的发酵饲料中，其加入的复合菌剂中加入了纤维素分解菌和嗜酸菌，有效提高了发酵饲料的品质和发酵效率。这是因为，纤维素分解菌能有效分解发酵饲料中的纤维素和复杂碳水化合物，使其快速的水解成小分子物质并产生大量的可溶性营养物质和简单糖类，提高了生物利用率，而嗜酸菌则可以利用这些物质进行快速发酵，产生乳酸、醋酸、丙酸等有机酸，降低了饲料中的pH值，且饲料的可消化性和口感得到了改善，同时也促进了发酵饲料的粗纤维降解，进而使得发酵饲料的品质得到显著提高。

在说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。