他莫昔芬在制备抗垂体生长激素腺瘤药物中的应用

技术领域

本发明涉及他莫昔芬在制备药物中的新应用，主要涉及他莫昔芬在制备抗垂体生长激素腺瘤药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

垂体生长激素腺瘤是垂体前叶发生的良性激素分泌性肿瘤，属罕见病，是肢端肥大症和巨人症的主要病因。

垂体生长激素腺瘤使病人垂体前叶长期过度分泌GH，临床表现为在成人中能够引起肢端肥大症，在幼年期和青春期人群导致巨人症。病理变化包括但不限于：肢端肥大、神经系统损伤、高血压、糖尿病、呼吸系统改变、心脑血管病变、免疫损伤、恶性肿瘤发生率增加和性功能障碍。垂体生长激素腺瘤存在下丘脑-垂体轴机能紊乱及肝功能紊乱，是一种耗竭性疾病，极少自行缓解，若不及时诊治，肿瘤较大，病死率高。

垂体生长激素腺瘤的治疗可分为手术治疗、放射治疗和药物治疗。手术治疗作为目前的主要治疗方式存在微腺瘤清除不彻底、侵袭性肿瘤及巨大腺瘤无法完全切除、复发率高、有感染风险等不足，因此垂体生长激素腺瘤的药物治疗是很有必要的。垂体生长激素腺瘤的治疗药物可分为生长激素受体拮抗剂、生长抑素类似物和多巴胺激动剂。但目前上市的药物少、药物可及性差，已有药物主要通过使血清GH的水平降至正常水平来缓解症状，降低患者死亡率，但需要长期用药且治标不治本，因此药物治疗仅作为辅助治疗手段，寻找新的安全有效的治疗药物迫在眉睫。

他莫昔芬(Tamoxifen)化学名(Z)-2-[4-(1,2-二苯基-1-丁烯基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺，分子式为C

对他莫昔芬制备抗垂体生长激素腺瘤药物中的作用尚未见报道。

发明内容

本发明解决的技术问题在于提供他莫昔芬在制备抗垂体生长激素腺瘤药物中的应用，从而为垂体生长激素腺瘤的治疗提供一种治疗效果较好、不良反应轻微的解决办法。

为此，本发明提供了如下技术方案：

发明提供了他莫昔芬在制备抗垂体生长激素腺瘤药物中的应用。

进一步，所述的垂体生长激素腺瘤包括但不限于体细胞突变导致的垂体GH分泌腺瘤。

进一步，所述他莫昔芬可与药学上可接受的辅料按常规制剂方法制成各种剂型的抗垂体生长激素腺瘤药物。

本发明因此还涉及以本发明化合物作为活性成分的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过发明所述他莫昔芬与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅料组合，制成与人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-99％。

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可以为胃肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。

所述的药物组合剂型包括口服制剂，注射给药剂型，皮肤黏膜途径给药剂型。

口服制剂包括片剂、缓释剂、胶囊剂、控释剂、颗粒剂、散剂、液体制剂，所述的注射给药剂型包括肌肉注射、静脉注射、静脉滴注，所述的皮肤黏膜给药剂型包括凝胶、化学囊球、经皮用软膏、鼻腔喷剂、鼻腔滴剂。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

本发明化合物可以制成普通制剂，也可以制成缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；黏合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羧丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。

还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。

为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、酷酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-400mg/kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。

本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。

进一步，本发明还涉及以本发明化合物作为活性成分的盐类组合物。该组合物可根据本领域公知的方法制备，可通过在溶液中化合物与带有相反电荷的反离子均电离，然后两者以离子键结合，在适宜的溶剂，如甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、醋酸乙醋中以溶解度较大的盐的形式结晶析出。所述化合物盐类与一种或多种药品上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅料组合，制成与人或动物使用的任何剂型。

常用药学上可接受的盐包括有机盐或无机盐，其中，所述的有机盐包括磺酸盐、羧酸盐、氨基酸盐以及脂肪酸盐，无机盐包括盐酸盐、溴酸盐、碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐和硝酸盐。

其所述的磺酸盐包括含1-15个碳原子的烷基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、邻甲苯磺酸盐、间甲苯磺酸盐；羧酸盐包括酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、枸橼酸盐、苹果酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、戊二酸盐、己二酸盐、双羟萘酸盐及乳酸盐；氨基酸盐包括谷氨酸盐、天冬氨酸盐；脂肪酸盐包括含2-18个碳原子的长链脂肪酸盐。

本发明的有益效果在于：本发明采用大鼠垂体瘤细胞(GH分泌型，GH3细胞)对他莫昔芬抑制垂体瘤细胞生长作用进行了考察，结果显示，他莫昔芬可以剂量依赖性地显著抑制GH3细胞生长。本发明采用裸鼠皮下移植瘤模型，对他莫昔芬抗垂体生长激素腺瘤和降低血GH水平作用进行了考察，结果显示，通过口服给药他莫昔芬可以剂量依赖性地显著抑制肿瘤生长，可以显著降低裸鼠血浆GH水平，所以为垂体生长激素腺瘤预防与治疗提供了一种安全、有效、经济的解决办法。

附图说明

图1.他莫昔芬对大鼠垂体瘤细胞(GH分泌型，GH3细胞)增殖情况影响。ˉx±sd，n＝3。

图2.各组皮下移植瘤模型裸鼠平均肿瘤体积变化趋势图。n＝7。

图3.给药终点各组皮下移植瘤模型裸鼠肿瘤对比图。

图4.他莫昔芬对皮下移植瘤模型裸鼠血浆生长激素(GH)水平影响。ˉx±sd，n＝4。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案、优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述。

实验例1.他莫昔芬对大鼠垂体瘤细胞(GH分泌型，GH3细胞)增殖情况影响。

实验材料：GH3细胞购自美国模式培养物研究所(American Type CultureCollection)。他莫昔芬购自MCE(中国，上海皓元生物医药科技有限公司)。无水乙醇购自北京市通广精细化工公司。Ham’s F-12K培养基购自武汉普诺赛生命科技有限公司。胎牛血清(FBS)和马血清(HS)购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。青链霉素混合液购自北京索莱宝科技有限公司。CCK-8试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司。

溶液配制：将他莫昔芬溶于无水乙醇配制成浓度为30mM的母液。

GH3细胞按2x10

结果：如图1所示，他莫昔芬能够剂量依赖性地抑制GH3细胞增殖。

表1.他莫昔芬对GH3细胞增殖抑制率(

与对照组比较，给药剂量8uM、12uM、15uM、20uM、30uM，P<0.0001。

实验例2.他莫昔芬对皮下移植瘤模型裸鼠肿瘤生长影响。

实验材料：BALB/c-Nu裸鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。GH3细胞购自美国模式培养物研究所(American Type Culture Collection)。他莫昔芬和替莫唑胺购自MCE(中国，上海皓元生物医药科技有限公司)。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)购自国药集团化学试剂有限公司。

建模分组：16-18g雌性BALB/c-Nu裸鼠腋下接种GH3细胞(1x10

将1％羧甲基纤维素钠溶解，煮沸，冷却后作为溶媒，将他莫昔芬溶解配置成混悬液。将替莫唑胺溶于生理盐水，配制成稳定溶液。按剂量每天给药，持续21天。每3天测量肿瘤长、短轴直径，并根据公式TV＝3.1416/6xaxbxb计算肿瘤体积(图2)。到达给药终点(第22天)，取血至1.5ml的肝素钠管中，取瘤组织称重并拍照(图3)。

表2.他莫昔芬对裸鼠肿瘤生长速度影响。n＝7。

结果：模型动物口服他莫昔芬能够剂量依赖性地抑制GH垂体腺瘤生长。实验例3.他莫昔芬对皮下移植瘤模型裸鼠血浆生长激素(GH)水平影响。

实验材料：BALB/c-Nu裸鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。GH3细胞购自美国模式培养物研究所(American Type Culture Collection)。他莫昔芬和替莫唑胺购自MCE(中国，上海皓元生物医药科技有限公司)。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)购自国药集团化学试剂有限公司。小鼠GH Elisa试剂盒购于武汉华美生物工程有限公司。

实验分组：相关实验分组及给药处理同实验例2。

给药终点摘眼球取血，立即低温离心取上清，用小鼠GH Elisa试剂盒进行检测。

表3.他莫昔芬对皮下移植瘤模型裸鼠血浆生长激素(GH)水平影响。

与模型组相比，他莫昔芬(50)、他莫昔芬(100)组P<0.05。

结果：如图4所示，模型动物口服他莫昔芬能剂量依赖性地减少GH分泌，显著降低血浆GH水平。

综上所述，本发明采用皮下移植瘤裸鼠模型对他莫昔芬抗垂体生长激素腺瘤，包括降低血GH水平作用进行了考察，结果显示，通过灌胃给药他莫昔芬可以剂量依赖性地显著降低裸鼠血浆GH水平，并在体内、外水平均可抑制垂体腺瘤细胞增殖。因此，他莫昔芬有抗垂体生长激素腺瘤作用。以他莫昔芬为活性物质，单独使用或/与其他具有药理学活性的化合物和/或提取物组成复方使用，按照药学领域的常规制剂方法制成各种剂型的抗垂体生长激素腺瘤药物，或与其他抗肿瘤药物和/或激素分泌抑制剂等制成复方制剂，用于在保持疗效的情况下减少药物作用中的不良反应，可为垂体生长激素腺瘤的预防与治疗提供一种安全、有效、经济的解决办法。

最后说明的是，以上实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本非发明的优选实施例已对本发明进行了描述，但本领域普通技术人员应当理解，可以在实行上和细节上对其做出各种各样的改变，而不偏离所附说明书所限定的本发明的精神和范围。