一种促头发生长和修护发根的精华喷雾及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体地，本发明涉及一种促头发生长和修护发根的精华喷雾及其制备方法。

背景技术

脱发是指本应该有毛发的部位没有毛发或者毛发少的状态，还归类为毛发生长所需的营养供给和新陈代谢未顺利进行而诱发的进行性疾病。随着生活节奏的加快，工作压力的加大，越来越多的人为脱发而烦恼。据卫健委2021年发布的脱发人群调查显示，中国已约有2.5亿脱发人群，占比总人口近1/5。脱发是重要的民生健康问题，不仅影响患者美观，更给患者带来极大的精神心理负担。以防脱为主诉求的头皮头发健康护理已经成为消费者的基础刚需。目前，临床上常用的改善脱发的方法主要是药物和手术治疗，但均存在显著的局限和弊端。口服和外用药物，例如米诺地尔、口服非那雄安等可暂时缓解脱发症状，但存在副作用大、疗效不稳定、停药后病情反复等诸多问题。手术治疗多采用自体单个毛囊和毛囊单位进行移植，数量有限、存活率不稳定，且费用昂贵。因此，探索新的安全有效的治疗脱发方式尤为重要。

市场上已有的的诸多生发剂，包括化学生发剂和中草药生发剂，化学生发剂的安全性值得商榷，中草药生发剂种类繁多，效果不一。另外，目前的生发剂通常为洗剂或搽剂，使用较为不便，且功效成分在患处的停留时间短，实际疗效并不显著，给患者的治疗带来了困难。

有鉴于此，提供一种性能稳定、功效优异的生物活性制剂来治疗脱发和修护发根变得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种配伍合理，使用方便，安全舒适，可有效促进头发生长和修护发根的精华喷雾，并提供其制备方法。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明一方面提供了一种促头发生长和修护发根的精华喷雾，其包括溶媒和冻干粉；

所述溶媒按质量百分比计，包括：甘油3～10％，1,3-丁二醇0.1～10％，1,2-己二醇0.5～5％，日本獐牙菜提取液2％～4％，绿茶提取液0.1％～2％，迷迭香叶油0.3～0.5％，薄荷精油0.1～0.3％，余量为超纯水；

所述冻干粉按与溶媒的质量体积比计，包括：SOD超氧化物歧化酶1mg～5mg/20mL、重组胶原蛋白10mg～50mg/20mL、海藻糖0.2g～1g/20mL。

作为本发明的一些优选实施方案，所述SOD超氧化物歧化酶分子量范围为10～30kDa，酶比活力在10000U/mg～30000U/mg之间。

作为本发明的一些优选实施方案，所述重组胶原蛋白的分子量范围为25kDa～90kDa。

作为本发明的一些优选实施方案，所述SOD超氧化物歧化酶、重组胶原蛋白均采用基因重组技术及微生物发酵法获得。

作为本发明的一些优选实施方案，所述精华喷雾由溶媒和冻干粉组成：

所述溶媒按质量百分比计，包括：甘油5％，1,3-丁二醇3％，1,2-己二醇1％，日本獐牙菜提取液3％，绿茶提取液0.5％，迷迭香叶油0.3％，薄荷精油0.1％，余量为超纯水；

所述冻干粉按与溶媒的质量体积比计包括：SOD超氧化物歧化酶2mg～4mg/20mL、重组胶原蛋白10mg～20mg/20mL、海藻糖0.4g/20mL。

本发明另一方面提供了一种促头发生长和修护发根的精华喷雾的制备方法，具体包括制备溶媒的步骤和制备冻干粉的步骤。

作为本发明的一些优选实施方案，所述溶媒的制备方法如下：

(1)将日本獐牙菜提取液、绿茶提取液、迭迭香叶油、薄荷精油、甘油、1,2-己二醇、1,3-丁二醇加入超纯水中，补足余量超纯水并搅拌均匀；

(2)将上述混合液用0.45μm滤膜过滤，然后分装即得所述精华喷雾的溶媒液。。

作为本发明的一些优选实施方案，所述冻干粉的制备方法如下：

S1将海藻糖溶解于超纯水中得到相a；

S2将SOD超氧化物歧化酶原液、重组胶原蛋白原液分别用0.22μm微孔滤膜过滤除菌后加到相a中，混合均匀；

S3将得到的混合溶液置于容器中，经冻干得到冻干粉。；

作为本发明的一些优选实施方案，还包括将溶媒和冻干粉用干湿子母瓶分装和组合的步骤。

本发明再一方面提供了一种促头发生长和修护发根的精华喷雾的使用方法，具体方法如下：用力按压几下泵头，使溶媒泵入上层冻干粉中，振摇使冻干粉充分溶解；待混匀后将精华喷雾直接喷在头顶发根处，露头皮的地方多喷，用手轻轻画圆似的按摩至完全吸收即可，每天一次。

采用上述技术方案所产生的有益效果在于：

本发明所提供的一种促头发生长和修护发根的精华喷雾，蕴含SOD超氧化物歧化酶、重组胶原蛋白、四味生发植物精粹，相互协同，具有清除自由基、修复受损毛囊细胞、促进毛发再生、深层滋养头皮发根等功效，可以改善脱发，对抗头皮衰老，养护健康头皮微生态。

本发明组合物采用溶液及冻干粉双组份提供，将SOD超氧化物歧化酶、重组胶原蛋白活性成分采用冻干品形式提供，不仅长期保持了其生物活性，而且复配后可协同地发挥各活性成分的功效。其中SOD超氧化物歧化酶具有超强的抗氧化性，有效清除体内毒素和自由基，恢复受损细胞活力，促进头皮血液循环，改善发质，使毛发更快再生、黑亮；重组胶原蛋白对头皮的渗透性强，能参与改善皮肤细胞的代谢，可刺激毛囊干细胞的分化，增加毛囊数量，刺激休止期毛囊向生长期转化，从而防止脱发。有文献报道胶原蛋白在毛囊干细胞产生转化生长因子-β的过程中也是不可缺少的，而转化生长因子-β对色素干细胞的生成起着重要作用。因此，胶原蛋白可有效改善脱发、白发等问题，蛋白质补充发芯，让发丝更为强韧，防止头发干枯断裂。由于SOD超氧化物歧化酶和重组胶原蛋白组分的协同作用，因此更有效地修护滋养发根、强健发根、防止脱发。另外，日本獐牙菜提取物通过扩充末梢血管、促进血液循环、提高皮肤温度，从而达到促进毛发生长的作用。绿茶提取物中茶多酚能显著减少环磷酰胺诱导的脱发，并促进毛发的再生。本发明优选的多组分协同增效，防脱护发的功效显著，同时避免了传统化学生发剂带来的刺激性。

本发明精华喷雾室温状态下生物活性成分长期稳定，在治愈疾病同时，不会产生抗药性和耐药性，安全有效、亦不会对人体产生毒副作用，建立健康的头皮生态环境，延缓头发脱落，对头皮毛囊细胞进行修复，从而起到固发、消炎、生发的功效，从根本上解决脱发的问题。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为实施例1精华喷雾与对比例1精华喷雾12个月稳定性对比电泳图；M-蛋白分子量Marker，1-实施例1精华喷雾0天，2-对比例1精华喷雾0天，3-实施例1精华喷雾室温放置12个月，4-对比例1精华喷雾室温放置12个月。

图2为本发明实施例1的使用效果对比图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例对发明进行清楚、完整的描述。

本实施方式中，SOD超氧化物歧化酶和重组胶原蛋白均采用基因重组技术及微生物发酵法获得。重组胶原蛋白采用中国专利201911384531.4、名称为“一种具有功能结构的重组人源III型胶原蛋白及其表达方法”的发明专利中公开的方法制备获得。干湿子母瓶为市售产品，用于分装溶液和干粉，在使用时干湿混合。

实施例1

本实施例的促头发生长和修护发根的精华喷雾的组成如下(％表示质量百分比)：

溶媒的制备方法如下：

(1)将日本獐牙菜提取液、绿茶提取液、迭迭香叶油、薄荷精油、甘油、1,2-己二醇、1,3-丁二醇加入超纯水中，补足余量超纯水并搅拌均匀；

(2)将上述混合液用0.45μm滤膜过滤，然后分装至干湿子母瓶的湿瓶装置中，每瓶20mL，即得所述精华喷雾的溶媒液。

冻干粉的制备包括如下步骤：

(1)将0.4g海藻糖溶解于1mL超纯水中得到相a；

(2)将SOD超氧化物歧化酶原液0.2mL、重组胶原蛋白原液2mL分别用0.22μm微孔滤膜过滤除菌后加到相a中，混合均匀；

(3)将得到的混合溶液置于干湿子母瓶的干瓶装置中，固定摆放于真空冷冻干燥机中，冻干得到冻干粉；

(4)组装干湿子母瓶，即得一种促头发生长和修护发根的精华喷雾。

实施例2

本实施例的促头发生长和修护发根的精华喷雾的组成如下(％表示质量百分比)：

制备方法同实施例1。

实施例3

本实施例的促头发生长和修护发根的精华喷雾的组成如下(％表示质量百分比)：

制备方法同实施例1。

对比例1

按照以下方式制备用于促头发生长和修护发根的精华喷雾：将甘油5g，1,3-丁二醇3g，1,2-己二醇1g，日本獐牙菜提取液3g，绿茶提取液0.5g，迷迭香叶油0.3g，薄荷精油0.1g，SOD超氧化物歧化酶0.01g，重组胶原蛋白0.1g、海藻糖2g，最后加入超纯水至终体积100mL。将得到的溶液过滤除菌，分装于喷雾瓶中，20mL/瓶，即得。

对比例2

同实施例1，不同之处在于，冻干粉中只有SOD超氧化物歧化酶单一组分。

对比例3

同实施例1，不同之处在于，冻干粉中只有重组胶原蛋白单一组分。

对比例4

同实施例1，不同之处在于，只有溶媒液无冻干组分。

对比例5

同实施例1，不同之处在于，冻干粉中将重组胶原蛋白替换为等质量的水解角蛋白。

对比例6

同实施例1，不同之处在于，溶媒液中不加日本獐牙菜提取液。

对比例7

同实施例1，不同之处在于，溶媒液中不加绿茶提取液。

考察例1稳定性实验

将对比例1得到的精华喷雾在12个月与实施例1得到的精华喷雾在12个月按照应用实施例1得到复配精华喷雾进行电泳分析，稳定性结果见图1和图2，实施例1得到的精华喷雾稳定性明显优于对比例1。

考察例2安全性评价

(1)皮肤刺激性试验

按2015版《化妆品安全技术规范》中规定的皮肤刺激性试验进行试验和评定，具体为：取白色家兔4只，试验前约24h，将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉，不可损伤表皮，去毛范围左、右各约3cm×3cm。取实施例1制备的精华喷雾约0.5mL直接涂在皮肤上，然后用二层纱布(2.5cm×2.5cm)覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。另一侧皮肤作为对照。采用封闭试验，敷用时间为2h。试验结束后用温水或无刺激性溶剂清除残留受试物。于清除受试物后的1、24、48和72h观察涂抹部位皮肤反应，按表1进行皮肤反应评分，以受试动物积分的平均值进行综合评价，根据24、48和72h各观察时点最高积分均值，按表2判定皮肤刺激强度。

表1皮肤刺激反应评分表

表2皮肤刺激强度分级

表3产品皮肤刺激反应评分结果

根据表3中产品皮肤刺激反应评分结果，判定本产品对皮肤无刺激性。

(2)皮肤变态反应试验

按2015版《化妆品安全技术规范》中规定的皮肤变态反应试验-局部封闭涂皮试验(Buehler Test，BT)进行试验和评定，具体为：取健康豚鼠15只，分成2组，对照组(5只)，实验组(10只)。试验前约24h，将豚鼠背部左侧去毛，去毛范围为4cm

表4变态反应试验皮肤反应评分

表5变态反应试验皮肤反应评分

根据表5中产品皮肤变态反应试验-局部封闭涂皮试验评分结果，判定本产品未见皮肤变态反应。

考察例3大鼠毛发再生实验

54只SD大鼠(200g±20g)，雌雄各半；在大鼠背部区域通过剃毛去除毛发，采用脱毛膏(Veet)均匀涂抹在剃毛区域皮肤上，面积为3×3cm，每两天1次，持续10天后，在给药部位形成脱毛区，即造模成功。选取造模成功的54只大鼠，平分为9组，每组雌雄各半。将8组大鼠分别给药实施例1～3和对比例2～7的精华喷雾，第9组给予生理盐水处理作为空白对照组；给药方式为在形成的脱毛区喷涂精华喷雾，每次喷涂1mL，每天一次；持续给药30天。观察记录新生毛发量，评价标准见表6；并分别在每组动物的给药区拔取10根毛发测量长度，计算每组大鼠毛发的平均长度，计算结果见表7。

表6毛发量的评价标准

表7不同实验组毛发长度和毛发量

本发明实施例制备的精华喷雾能够有效促进大鼠毛发的生长，滋养发根。通过实施例1～3和对比例2～7相比，本发明SOD超氧化物歧化酶复配重组胶原蛋白联合日本獐牙菜提取物和绿茶提取物能够更好的促进毛发生长，稳固发根，达到更好的生发护发效果。

考察例4精华喷雾对大鼠组织中SOD、MDA含量及Col I、Col III表达的影响

对考察例3中大鼠皮肤组织中的SOD、MDA含量以及Col I、Col III表达量进行分析。通过实施例1和对比例2～4检测结果相比(见表8)，本发明实施例制备的精华喷雾各组分协同增效，能够有效促进大鼠皮肤组织中I型和III型胶原蛋白的表达，刺激毛囊干细胞的增殖和分化，使受损的细胞快速修复；组织中SOD活性明显上调，MDA显著降低，有效清除大鼠体内自由基，保护皮肤氧化损伤，恢复受损细胞活力，进而改善皮肤血液微循环，促进毛囊发育。结果表明，本发明SOD超氧化物歧化酶复配重组胶原蛋白联合日本獐牙菜提取物和绿茶提取物能够更好的修护滋养发根，促进毛发生长，达到1+1＞2协同增效的生发护发效果。

表8精华液对大鼠皮肤组织中SOD、MDA含量及Col I、Col III表达的影响

与空白对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。

考察例5人体功效试验

将实施例1和对比例2～4制得的精华喷雾分别发给50名测试人员测试使用。测试人员按照权利要求的使用方法操作，每天一次，测试人员根据自己对精华喷雾的使用效果进行评分，各项评分均采用10分制，分数越高则表明效果越好。使用效果评分结果见表9。

表9精华喷雾使用效果评分表

从表9的数据可知，测试人员对实施例1的精华喷雾的功效给予较高的评价，总分均在25分以上，结果表明本发明制备的一种用于促头发生长和修护发根的精华喷雾，各成分之间协同增效，有效清除体内毒素和自由基，修复受损毛囊细胞，促进头发生长，修护滋养发根，维持健康头皮微生态。