一种干细胞因子组合物及其用途

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及一种干细胞因子组合物及其用途。

背景技术

糖尿病患病率增长迅速，对于糖尿病患者而言，不仅要控制血糖水平，更要预防和治疗糖尿病患并发症。例如，由于糖尿病患者存在各种代谢紊乱，高糖环境促进了碳水化合物和蛋白质之间非酶促糖基化反应的产物——晚期糖基化终末产物(advanced glycationend products,AGEs)的形成，AGEs含量升通过一系列生化反应导致机体老化、糖尿病肾病、心血管疾病、神经病变疾病。此外氧化应激和疼痛也是糖尿病常见的并发症，例如氧化应激会加快皮肤衰老等等疾病，疼痛给患者带来痛苦。因此，可以看出，由于机体的复杂性，糖尿病及其并发症如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高会进一步导致其它病症的出现。因此，如何预防和治疗糖尿病及其并发症如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高，以及进一步防治糖尿病并发的如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高导致的其它病症的发生成为当今研究的热点。

因此，本领域亟需开发一种能够改善糖尿病及其并症以及进一步防治糖尿病并发导致的其它病症的发生的药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够改善糖尿病及其并症以及进一步防治糖尿病并发导致的其它病症的发生的组合物。

本发明的第一个方面提供一种组合物，所述组合物包括碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子。

优选地，所述的碱性成纤维细胞生长因子与所述神经生长因子的重量比为1：0.1-15，较佳地1：0.5-10，更佳地1：0.5-5，更佳地1：0.5-3，更佳地1：0.5-2.5，更佳地1：1-2，更佳地1：1.3-1.7。

优选地，所述的碱性成纤维细胞生长因子的含量为0.0005-0.005wt％，较佳地0.001-0.005wt％，更佳地0.001-0.003wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的神经生长因子的含量为0.0005-0.006wt％，较佳地0.001-0.006wt％，更佳地0.002-0.004wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的组合物的剂型为口服制剂、注射制剂或外用制剂。

优选地，所述的组合物为固体制剂、液体制剂或半固体制剂。

优选地，所述的组合物的剂型为片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、散剂或糖浆剂。

优选地，所述的组合物的剂型为皮肤外用制剂。

优选地，所述的组合物的剂型为皮肤涂抹制剂。

优选地，所述的组合物包括药物组合物。

优选地，所述的药物组合物还包括药学上可接受的载体。

优选地，所述的组合物的剂型为乳液。

优选地，所述的组合物为乳液，所述的乳液包括：

(A)水相，所述的水相包括碱性成纤维细胞生长因子、神经生长因子和水；

(B)油相，所述的油相包括葵花籽油和大豆油；和

(C)乳化剂，所述的乳化剂包括聚山梨酯-80。

优选地，所述的乳液为水包油乳液。

优选地，所述的水选自下组：蒸馏水、纯化水、注射用水，或其组合。

优选地，所述的油相还包括选自下组是植物油：大豆油、橄榄油、玉米油、鱼油、花生油、芝麻油、亚麻籽油、蓖麻油、油菜籽油、核桃油、向日葵油、红花油，或其组合。

优选地，所述的乳液还包括选自下组是润湿剂：甘油、乙醇、丙二醇、丁二醇、聚乙二醇，或其组合。

优选地，所述的乳液还包括选自下组是抑菌剂：尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金冰酯，或其组合。

优选地，所述的水相的含量为50-70wt％，优选地55-65wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的油相的含量为25-40wt％，优选地28-37wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的乳化剂的含量为4-12wt％，优选地6-10wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的重量份的单位为克(g)。

优选地，所述的乳液的粒径为110-130nm，更佳地115-128nm。

优选地，所述的乳液通过以下方法制备：

(1)将处方量的油相各组分混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到乳液。

优选地，所述的乳液通过以下方法制备：

(1)将处方量的葵花籽油和大豆油混合，得到油性A相；

(2)将处方量的碱性成纤维细胞生长因子、神经生长因子、水和聚山梨酯-80混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到乳液。

优选地，所述的步骤(1)中，所述的混合是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

优选地，所述的步骤(2)中，所述的混合是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

优选地，所述的混合包括搅拌混合。

本发明的第二个方面提供一种如本发明第一个方面所述的组合物用途，用于制备药物，所述的药物用于选自下组的一种或多种用途：(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症；(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(d)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病。

优选地，所述的糖尿病并发症选自下组：疼痛、氧化应激、AGEs含量升高，或其组合物。

优选地，所述的(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症包括选自下组的一种或多种方式进行：(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(d)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病。

优选地，所述的疼痛包括急性疼痛和/或炎症疼痛。

优选地，所述的氧化应激包括由于ROS(活性氧自由基)升高导致的氧化应激。

优选地，所述的氧化应激包括皮肤氧化应激。

优选地，所述的氧化应激包括皮肤组织的氧化应激。

优选地，所述的ROS包括皮肤ROS。

优选地，所述的ROS包括皮肤组织中的ROS。

优选地，所述的AGEs包括皮肤AGEs。

优选地，所述的AGEs包括皮肤组织中的AGEs。

优选地，所述的疼痛包括糖尿病并发的疼痛。

优选地，所述的氧化应激包括糖尿病并发的氧化应激。

优选地，所述的AGEs含量升高包括糖尿病并发的AGEs含量升高。

优选地，所述的由氧化应激引起的疾病包括糖尿病和/或皮肤衰老。

优选地，所述的AGEs含量升高导致的疾病包括机体老化、糖尿病肾病、心血管疾病和/或神经病变。

本发明的第三个方面提供一种(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症；(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(b)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病的方法，给予所需对象施用如本发明的第一个方面所述的组合物。

优选地，所述的对象包括人或非人哺乳动物。

应理解，本发明的上述各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。

具体实施方式

本发明开发了一种包括碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子的组合物，所述的组合物能够用于预防和治疗糖尿病及其并发症如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高以及进一步防治糖尿病并发的如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高导致的其它病症的发生。

术语

如本文所用，术语“包括”不仅包含封闭式定义，还包含半封闭、开放式定义。换言之，所述的术语包括了“由……构成”、“基本上由……构成”。

如本文所用，术语“重量份”和“重量份数”可互换使用，所述的重量份可以是任何一个固定的以毫克、克数或千克表示重量(如1mg、1g或1kg等等)。例如，一个由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物，可以是1克组分a+9克组分b，也可以是10克组分a+90克组分b等构成的组合物。在所述的组合物中，某一组分的百分比含量＝(该组分的重量份数/所有组分的重量份数之和)×100％，因此，由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物中，组分a的含量为10％，组分b的含量为90％。

如本文所用，术语“聚山梨酯-80”与吐温80可互换使用。

如本文所用，术语“AGEs”与“晚期糖基化终末产物(advanced glycation endproducts)”可互换使用。

如本文所用，术语“ROS”与“活性氧自由基”可互换使用。

组合物及其制备方法

本发明提供一种组合物，所述的组合物包括干细胞因子，例如碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和神经生长因子(nerve growthfactor，NGF)。

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)是干细胞因子的一种，具有血管生成作用，在体外，能刺激细胞增殖、迁移，诱导纤溶酶原激活物及胶原酶活性，是与肝素有高亲和力的细胞促分裂原。

神经生长因子(nerve growth factor，NGF)是干细胞因子的一种，能促进中枢和外周神经元的生长、发育、分化、成熟，维持神经系统的正常功能，加快神经系统损伤后的修复。

在本发明的一个优选例中，所述的碱性成纤维细胞生长因子与所述神经生长因子的重量比为1：0.1-15，较佳地1：0.5-10，更佳地1：0.5-5，更佳地1：0.5-3，更佳地1：0.5-2.5，更佳地1：1-2，更佳地1：1.3-1.7。

优选地，所述的碱性成纤维细胞生长因子的含量为0.0005-0.005wt％，较佳地0.001-0.005wt％，更佳地0.001-0.003wt％，以组合物的总重量计。

优选地，所述的神经生长因子的含量为0.0005-0.006wt％，较佳地0.001-0.006wt％，更佳地0.002-0.004wt％，以组合物的总重量计。

本发明所述的组合物的剂型优选为口服制剂、注射制剂或外用制剂。

本发明所述的组合物的剂型优选为固体制剂、液体制剂或半固体制剂。

代表性地，所述的组合物的剂型为片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂、散剂或糖浆剂。

代表性地，所述的组合物的剂型为皮肤外用制剂。

代表性地，所述的组合物的剂型为皮肤涂抹制剂。

在本发明的一个优选例中，所述的组合物包括药物组合物。

优选地，所述的药物组合物还包括药学上可接受的载体。

在本发明的一个优选例中，所述的组合物的剂型为乳液。

在本发明的一个优选例中，所述的组合物为乳液，所述的乳液包括：

(A)水相，所述的水相包括碱性成纤维细胞生长因子、神经生长因子和水；

(B)油相，所述的油相包括葵花籽油和大豆油；和

(C)乳化剂，所述的乳化剂包括聚山梨酯-80。

在本发明的一个优选例中所述的乳液为水包油乳液。

在本发明的一个优选例中，所述的水选自下组：蒸馏水、纯化水、注射用水，或其组合。

在本发明的一个优选例中，所述的油相还包括选自下组是植物油：大豆油、橄榄油、玉米油、鱼油、花生油、芝麻油、亚麻籽油、蓖麻油、油菜籽油、核桃油、向日葵油、红花油，或其组合。

在本发明的一个优选例中，所述的乳液还包括选自下组是润湿剂：甘油、乙醇、丙二醇、丁二醇、聚乙二醇，或其组合。

在本发明的一个优选例中，所述的乳液还包括选自下组是抑菌剂：尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金冰酯，或其组合。

在本发明的一个优选例中，所述的水相的含量为50-70wt％，优选地55-65wt％，以组合物的总重量计算。

在本发明的一个优选例中，所述的油相的含量为25-40wt％，优选地28-37wt％，以组合物的总重量计算。

在本发明的一个优选例中，所述的乳化剂的含量为4-12wt％，优选地6-10wt％，以组合物的总重量计算。

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

优选地，所述的乳液的处方包括：

在本发明的一个优选例中，所述的乳液的粒径为110-130nm，更佳地115-128nm。

在本发明的一个优选例中，所述的乳液通过以下方法制备：

(1)将处方量的油相各组分混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到乳液。

优选地，所述的乳液通过以下方法制备：

(1)将处方量的葵花籽油和大豆油混合，得到油性A相；

(2)将处方量的碱性成纤维细胞生长因子、神经生长因子、水和聚山梨酯-80混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到乳液。

优选地，所述的步骤(1)中，所述的混合是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

优选地，所述的步骤(2)中，所述的混合是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

优选地，所述的步骤(1)中，所述的搅拌是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

优选地，所述的步骤(2)中，所述的搅拌是在35-45℃(较佳地38-42℃)下搅拌。

用途

本发明提供一种如本发明所述的组合物用途，用于制备药物，所述的药物用于选自下组的一种或多种用途：(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症；(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(d)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病。

本发明还提供一种(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症；(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(d)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病的方法，给予所需对象施用如本发明所述的组合物。

在本发明中，术语“预防”表示预防疾病和/或它的附随症状的发作或者保护对象免于获得疾病的方法。本文中使用的"预防"还包括延迟疾病和/或它的附随症状的发作和降低对象的得病的风险。

本发明所述的“治疗”包括延缓和终止疾病的进展，或消除疾病，并不需要100％抑制、消灭和逆转，例如，与不存在本发明所述的组合物相比，本发明包括碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子的组合物将糖尿病并发的如疼痛、氧化应激、AGEs含量减轻、抑制和/或降低了例如至少约10％、至少约50％、或至少约80％或完全根除。

优选地，所述的糖尿病并发症选自下组：疼痛、氧化应激、AGEs含量升高，或其组合物。

优选地，所述的(a)预防和/或治疗糖尿病和/或其并发症包括选自下组的一种或多种方式进行：(b)预防和/或治疗疼痛；(c)预防和/或治疗氧化应激；(d)预防和/或治疗由氧化应激引起的疾病；(e)降低AGEs含量；和/或(f)预防和/或治疗AGEs含量升高导致的疾病。

在本发明的一个优选例中，所述的疼痛包括急性疼痛和/或炎症疼痛。

在本发明的一个优选例中，所述的氧化应激包括由于ROS(活性氧自由基)升高导致的氧化应激。

在本发明的一个优选例中，所述的氧化应激包括皮肤氧化应激。

优选地，所述的氧化应激包括皮肤组织的氧化应激。

优选地，所述的ROS包括皮肤ROS。

优选地，所述的ROS包括皮肤组织中的ROS。

在本发明的一个优选例中，所述的AGEs包括皮肤AGEs。

优选地，所述的AGEs包括皮肤组织中的AGEs。

在本发明的一个优选例中，所述的疼痛包括糖尿病并发的疼痛。

在本发明的一个优选例中，所述的氧化应激包括糖尿病并发的氧化应激。

在本发明的一个优选例中，所述的AGEs含量升高包括糖尿病并发的AGEs含量升高。

在本发明的一个优选例中，所述的由氧化应激引起的疾病包括糖尿病和/或皮肤衰老。

在本发明的一个优选例中，所述的AGEs含量升高导致的疾病包括机体老化、糖尿病肾病、心血管疾病和/或神经病变。

在本发明的霜剂中，碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子给药量是治疗有效量。在使用组合物时，将安全有效量的药物适用于人或哺乳动物，其中安全有效量至少为10微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过10毫克/千克体重，较佳的为10微克/千克体重-5毫克/千克体重。当然具体剂量还要考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。此外本发明霜剂还可以与其他治疗剂一起使用如透皮剂(包括之前、之中或之后)。

本发明的优异技术效果包括：

本发明所述的组合物能够改善糖尿病及其并发症如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高以及进一步防治糖尿病并发的如疼痛、氧化应激、AGEs含量升高导致的其它病症的发生。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

本实施例1制备一种乳液，所述乳液处方如表1所示：

表1乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相各组分在40℃下搅拌混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为123.8±5.7nm。

实施例2

本实施例2制备一种乳液，所述乳液处方如表2所示：

表2乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相各组分在40℃下搅拌混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为117.9±6.2nm。

实施例3

本实施例3制备一种乳液，所述乳液处方如表3所示：

表3乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相各组分在40℃下搅拌混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为135.9±4.9nm。

实施例4

本实施例4制备一种乳液，所述乳液处方如表4所示：

表4乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相组分在40℃下搅拌，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为109.3±5.2nm。

实施例5

本实施例5制备一种乳液，所述乳液处方如表5所示：

表5乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相组分在40℃下搅拌，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为118.9±7.8nm。

实施例6

本实施例6制备一种乳液，所述乳液处方如表6所示：

表6乳液的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相各组分在40℃下搅拌混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为142.9±8.1nm。

对比例1

本对比例1制备一种空白乳液，所述空白乳液基质处方如表7所示：

表7空白乳液基质的组成

制备方法：

(1)将处方量的油相各组分在40℃下搅拌混合，得到油性A相；

(2)将处方量的水相各组分和处方量的乳化剂组分在40℃下搅拌混合，得到水性B相；

(3)在搅拌条件下将油性A相加入到水性B相中，搅拌得到水包油乳液。

粒径测定：

用马尔文激光粒度仪测得乳液的平均粒径为128.2±6.7nm。

效果例

1.实验方法

1.1构建糖尿病大鼠模型

将正常健康雄性SD大鼠通过注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，诱导8天后，大鼠的血糖值维持在25.89±1.25mmol/L(p<0.05)，显著高于正常大鼠的7.4±0.5mmol/L，多饮、多食、多尿，体重与同期正常健康大鼠相比显著降低，毛发枯黄，表明糖尿病大鼠模型构建成功。

1.2动物分组与给药

将糖尿病大鼠随机分成模型组、实验组1、实验组2、实验组3、实验组4、实验组5和实验组6，每组各5只，并选择5只未经链脲佐菌素(STZ)诱导的正常健康雄性SD大鼠作为空白对照组，各组大鼠自由饮食，动物房温度保持在24～26℃，湿度40～60％。

模型组、实验组1、实验组2、实验组3、实验组4、实验组5和实验组6各组大鼠的同一背部皮肤部位涂抹相同量的不同乳液(用药部位皮肤经脱毛处理)，空白对照组的大鼠按照相同方式涂抹生理盐水，各组大鼠的给药如下：

模型组：对比例1制备的空白乳液；

实验组1：实施例1制备的乳液；

实验组2：实施例2制备的乳液；

实验组3：实施例3制备的乳液；

实验组4：实施例4制备的乳液；

实验组5：实施例5制备的乳液；

实验组6：实施例6制备的乳液；

空白对照组：生理盐水。

每天给药1次，连续给药6周后，对各组大鼠镇痛效果进行考察，然后取各组皮肤组织，测定皮肤组织中AGEs和ROS(活性氧自由基)含量。

镇痛效果的考察：将各组大鼠置于透明、通气的有机玻璃圆筒内，各组大鼠左后足底注射4％福尔马林溶液30μl后，以微型摄像机实时记录各组大鼠在注射4％福尔马林溶液后0-60min内的舔左足时间，进行统计学分析。

AGEs(晚期糖基化终末产物)含量测定：皮肤组织匀浆后，离心取上清液，测定紫外光280nm吸光度值，测定皮肤组织中AGEs含量。

ROS(活性氧自由基)的测定方法：皮肤组织匀浆后，离心取上清液，样本经蛋白定量后，经市售活性氧自由基(ROS)检测试剂盒处理，通过检测样本的吸光度来测定ROS(活性氧自由基)的表达含量。

2.实验结果

2.1疼痛治疗效果

各组大鼠的左后足底注射4％福尔马林溶液后，0-60min内的舔左足时间如表8所示；

表8各组大鼠的添足时间(M±SD)

备注：与模型组比较，“*”为P＜0.05，“**”为P＜0.01。

从表8中可以看出，与空白对照组比较，模型组的大鼠添足时间显著延长且具有显著性差异(P＜0.05)，表明糖尿病并发疼痛。福尔马林模型是急性疼痛和炎症疼痛的经典模型，与模型组大鼠相比，本实施例制备的乳液中，碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子能够协同显著降低疼痛，对糖尿病并发的疼痛(急性疼痛和炎症疼痛)具有优异的协同治疗效果。

2.2AGEs含量测定

各组大鼠皮肤组织中AGEs含量如表9所示：

表9各组皮肤组织中AGEs含量(M±SD)

备注：与模型组比较，“*”为P＜0.05，“**”为P＜0.01。

从表9中可以看出，模型组的AGEs含量显著高于空白对照组(P＜0.05，具有显著性差异)，表明糖尿病并发AGEs升高，AGEs升高导致机体老化、糖尿病肾病、心血管疾病、神经病变等。与模型组大鼠相比，本实施例制备的乳液中，碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子能够显著降低AGEs含量，从而对糖尿病并发的AGEs升高具有优异的改善效果。

2.3 ROS含量测定

各组大鼠皮肤组织中ROS含量如表10所示：

表10 ROS(活性氧自由基)的表达含量(M±SD)

备注：与模型组比较，“*”为P＜0.05，“**”为P＜0.01。

从表10中可以看出，模型组的ROS含量显著高于空白对照组(P＜0.05，具有显著性差异)，表明糖尿病并发氧化应激。与模型组大鼠相比，本实施例制备的乳液中，碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子能够协同显著降低ROS含量，对糖尿病并发的氧化应激具有优异的协同治疗效果。

以上所述是本发明针对一种案例设计的实施方案，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下还可以作出若干改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。