一种生物果蔬保鲜剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物工程技术、食品保鲜技术等领域，尤其涉及一种生物果蔬保鲜剂及其制备方法。

背景技术

水果蔬菜中富含大量人体必需的维生素、矿物质、无机盐和膳食纤维等营养物质，是中国居民日常膳食结构中的重要组成部分之一。近年来随着社会的高速发展，人们对高质量物质生活水平的追求逐渐提升，新鲜的果蔬已是人们餐桌上必不可少的一部分。然而，果蔬生产地远离城市，果蔬采摘后的储藏不当和远距离运输直接导致了果蔬的新鲜程度大大下降、甚至在运输过程中发生腐烂变质。因此，采取合理有效的措施来延长果蔬的保鲜期是亟待解决的问题。

目前国内外常采取的果蔬保鲜措施有物理保鲜、化学保鲜和生物保鲜等各类方法。物理保鲜法中多为冷藏、冷链运输、气调等，通过降低环境温度，抑制果蔬呼吸，减缓果蔬新陈代谢，从而达到保鲜效果，其所需的设备造价昂贵、技术要求高，不适宜广泛推广；化学保鲜常采用各类化学防腐剂对果蔬进行防腐和保色处理，但化学防腐剂的安全性饱受争议，而且化学防腐剂会不同程度地影响果蔬口感。生物保鲜是一种较为安全、绿色、环保的保鲜方式，其主要机理是从动植物、微生物中提取的活性物质或微生物自身具有抗菌活性，或形成保护膜，防止腐败菌入侵。生物保鲜剂具有安全、易生产、保鲜广谱性高等优点。

发明内容

本发明旨在发明一种高效、安全的生物果蔬保鲜剂，采用天然益生菌发酵获得，可有效保鲜果蔬，尤其是草莓、樱桃等脆弱不宜贮藏的水果。

本发明的目的是提出一种生物果蔬保鲜剂，该生物果蔬保鲜剂安全、环保，能有效提高果蔬货架期；本发明另一方面的目的在于，提供一种生物果蔬保鲜剂的制备方法。

本发明采取的技术解决方案如下：本发明提供一种生物果蔬保鲜剂，其配方组分为：库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevi)发酵过滤液和副干酪乳杆菌(Lactobacilus paracasei)G2B5发酵过滤液，调节PH在4.0～4.5，混合比例为：按质量比2:5混合。

本发明同时提供上述生物保鲜剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)发酵过滤液制备：

将所述库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)接种于YPD液体培养基中，30℃～32℃，摇床140r/min～150r/min培养18至24小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um的水系滤膜过滤，得到库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液。

(2)副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液制备：

将所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5接种于MRS液体培养基中，37℃静止培养24至28小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um的水系滤膜过滤，得到副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液。

(3)将步骤(1)得到的库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液、步骤(2)得到的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液按质量比1～2:3～5 混合，调节pH至4.0～4.5。

本发明中，步骤(1)中所述的YPD液体培养基为如下配方：胰蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，酵母浸粉10g/L，溶剂为水。

本发明中，步骤(2)中所述所述的MRS液体培养基为如下配方：胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖20g/L，牛肉蛋白胨10g/L，吐温-80 10g/L，磷酸氢二钾2g/L，结晶乙酸钠5g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.05g/L，溶剂为水。

与现有技术相比，本发明具有的有益效果是：

(1)本发明中使用的库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2与副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5均为益生菌，菌株安全性高，绿色环保。

(2)本发明中使用的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5抑菌效果强、防腐货架期长。

(3)本发明提供的生物果蔬保鲜剂可以维持果蔬原有的口感，防止果蔬变色变味，尤其适用于草莓、樱桃等脆弱的水果。

(4)本发明选用天然菌株的发酵产物，不添加其他化学保鲜物质，绿色安全。而且整个制备过程简单易操作，易实施，可广泛使用。

生物样品保藏信息

库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2于2018年7月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.16160。

副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5于2018年7月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.16161。

具体实施方式

下面由特定的具体实施例说明本发明的实施方式。实施方案为便于更好的理解本发明，但并非对本发明的限制。

实施例1

一种生物果蔬保鲜剂的制备方法，其步骤如下：

(1)按照如下配方：胰蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，酵母浸粉10g/L，溶剂为水，121℃灭菌20分钟，制得YPD液体培养基。

(2)将所述库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)接种于上述YPD液体培养基中，30℃，摇床140r/min培养20小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um的水系滤膜过滤，得到库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液。

(3)按如下配方：胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖20g/L，牛肉蛋白胨10g/L，吐温-80 10g/L，磷酸氢二钾2g/L，结晶乙酸钠5g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.05g/L，溶剂为水，121℃灭菌20分钟，制得MRS液体培养基。

(4)将所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5接种于上述MRS液体培养基中，37℃静止培养24小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um水系滤膜过滤，得到副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液。

(5)将上述得到的库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液按质量比1:3混合，调节pH至4.0，即得到本发明所述的生物果蔬保鲜剂。

实施例2

一种生物果蔬保鲜剂的制备方法，其步骤如下：

(1)按照如下配方：胰蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，酵母浸粉10g/L，溶剂为水，121℃灭菌20分钟，制得YPD液体培养基。

(2)将所述库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2接种于上述YPD液体培养基中，32℃，摇床150r/min培养24小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um水系滤膜过滤，得到库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液。

(3)按如下配方：胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖20g/L，牛肉蛋白胨10g/L，吐温-80 10g/L，磷酸氢二钾2g/L，结晶乙酸钠5g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.05g/L，溶剂为水，121℃灭菌20分钟，制得MRS液体培养基。

(4)将所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5接种于上述MRS液体培养基中，37℃静止培养28小时，得到发酵液，再将上述发酵液通过0.45um水系滤膜过滤，得到副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液。

(5)将上述得到的库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G1A2发酵过滤液和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)G2B5发酵过滤液按质量比2:5混合，调节pH至4.5，即得到本发明所述的生物果蔬保鲜剂。

实施例3

一种生物果蔬保鲜剂在草莓保鲜实验的效果表现：

将重量相等、果形相似、成熟度相近的新鲜草莓装入保鲜泡沫盒中，将本发明产品用自来水稀释200倍，均匀喷洒在草莓表面，以自来水作为空白对照，密封后在12～15℃条件下贮藏5day后分别打开，测定实施例1、实施例2和空白对照组草莓的失水率、坏果率、外观质地口感指标。

表1实施例1、实施例2和空白对照组的保鲜试验效果

注：+表示外观质地好，—表示外观质地差

结果说明：经本发明的生物果蔬保鲜剂处理的草莓失水率和坏果率明显降低，基本能维持果实的质地和口感。

实施例4

一种生物果蔬保鲜剂在葡萄保鲜实验中的效果表现：

将新采摘的成熟度适当、无病虫害和表皮损伤的葡萄，将本发明产品按实施例1和实施例2的方法用自来水稀释200倍，浸泡3min，取出晾干，以自来水作为空白对照，密封后在 12～15℃条件下贮藏5day后分别打开，测定实施例1、实施例2和空白对照组葡萄的失水率、坏果率、抗坏血酸、硬度指标。

表2实施例1、实施例2和空白对照组的保鲜试验效果

以上结果说明：经本发明的生物果蔬保鲜剂处理的葡萄保鲜期延长，采摘后贮藏品质提高。

以上所述本发明的具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何根据本发明的技术构思所做出的各种其他相应的改变，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。