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一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂

文献发布时间:2023-06-19 16:11:11



技术领域

本发明涉及抑菌剂技术领域,具体是指一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂。

背景技术

香蕉是亚热带以及热带地区广泛种植的水果之一,属于单子叶植物。目前,香蕉在130多个国家均有种植分布,年均产量可以达到14500万吨。在我国,香蕉的种植主要位于中国的南部地区,分别是广东、广西、云南、海南、福建等地。香蕉枯萎病(又称香蕉黄叶病,巴拿马枯萎病)是一种常见的香蕉真菌病害,成株期病株先在下部叶片及靠外的叶鞘呈现特异的黄色,初期在叶片边缘发生,然后逐部向中肋扩展,与叶片的深绿部分对比显著。也有整片叶子发黄的,感病叶片迅速凋萎,由黄变褐而干枯,其最后一片顶叶往往迟抽出或不能抽出,最后病株枯死。有个别虽然不随即枯死,但果实发育不良,品质低劣。

近年来,由尖孢镰刀菌古巴专化型Fusariumoxysporum f.sp.cubense(FOC)侵染引起的香蕉枯萎病,在我国迅速蔓延,严重阻碍了现代香蕉产业的健康发展,使香蕉的生产面临着严峻的挑战。香蕉枯萎病菌依据寄主致病性分为1号(Race 1,R1)、2号(Race 2,R2)和4号生理小种(Race 4,R4)。根据不同侵染条件,4号小种又分为热带4号(Tropical Race4,TR4)和亚热带4号(Subtropical Race 4,STR4)。该病害传播途径广泛,可通过水、土壤、种苗等介质传播,我国部分蕉园已经遭受毁园打击。目前还没有找到一种有效的防治香蕉枯萎病的化学药剂,香蕉只能在不含病菌或含病菌量小的土壤上生长,为此,提出一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服以上技术问题,提供一种设计合理、方法简单、抑菌效果好的一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂。

为解决上述技术问题,本发明提供的技术方案为:一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂,包括以下步骤:

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:材料处理:将土豆洗净去皮,切成小块,加水煮烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆碾碎,用纱布过滤后放置在培养皿中,加入适量的琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分,加入0~3g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌15~30分钟,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

作为改进,所述S2中土豆块蒸煮时间为20~30分钟。

作为改进,所述S3中土豆用玻璃棒碾碎。

作为改进,所述S3中分装用的锥形瓶的容量为100ml。

作为改进,所述S3中高压灭菌锅的灭菌温度为115℃。

作为改进,所述S4中培养箱的温度为26℃~30℃。

采用以上方法后,本发明具有如下优点:本发明设计合理,方法简单,本发明仅用山梨酸钾,改变传统复合抑菌剂的模式,减少其他辅助或功能性成分的添加,但不降低抑菌功效,特异性选择山梨酸钾的质量浓度延长保鲜期和货架期,本发明通过调整山梨酸钾溶液的配置方法增加抑菌剂的溶解度、提高抑菌剂的生物利用度及体系的稳定性,工艺方法简单便捷,实用性好,适合全面推广。

附图说明

图1是本发明一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂的制备流程图。

图2是本发明一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂中不同山梨酸钾浓度的抑菌效果图。

图3是本发明一种抑制香蕉枯萎病的山梨酸钾抑菌剂中不同山梨酸钾浓度的抑菌效果柱形图。

为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。

具体实施方式

在下文中,仅简单地描述了某些示例性实施例。正如本领域技术人员可认识到的那样,在不脱离本发明的精神或范围的情况下,可通过各种不同方式修改所描述的实施例。因此,描述被认为本质上是示例性的而非限制性的。

实施例一:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮20分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入0g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌15分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在26℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

实施例二:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮25分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入0.4g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌20分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在27℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

实施例三:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮26分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入0.8g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌20分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在28℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

实施例四:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮25分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入1.2g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌20分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在28℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

实施例五:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮25分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入1.6g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌20分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在28℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

实施例六:

每制备1LPDA培养基,需准备土豆200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂20g

S1:材料的准备:山梨酸钾、新鲜土豆、葡萄糖、琼脂;

S2:将土豆洗净去皮,再称取200g土豆切成小块,加水煮25分钟,使土豆块软烂;

S3:PDA培养基的制作:将煮烂后的土豆用玻璃棒碾碎,用八层纱布过滤后放置在培养皿中,加入20g琼脂,然后加热搅拌均匀,待琼脂溶解完后,加入20g葡萄糖,搅拌均匀,冷却后再补足水分至1000ml,加入2g山梨酸钾粉末搅拌至完全溶解后分装到100ml锥形瓶中,加塞、包扎,用高压灭菌锅灭菌20分钟,灭菌温度为115℃,取出锥形瓶摇匀,冷却后贮存备用;

S4:接菌:超净台中,将加热融化的PDA培养基导入直径10cm的圆形培养皿中,待凝固后将约1沉默大小的圆形菌种块放到培养皿中间,菌丝面接触培养基,用封口膜封板,在28℃培养箱中避光倒置培养五天即可得到山梨酸钾抑菌剂。

本发明分别使用含有4mM、8mM、12mM、16mM和20mM五个浓度的山梨酸钾(C

以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到其各种变化或替换,这些都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

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06120114729247