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诱导植物对节肢动物害虫耐受性的方法和化合物

文献发布时间:2023-06-19 12:02:28



技术领域

本发明属于农业节肢动物病原体防治的领域。

更具体地,本发明涉及用于防治植物害虫,特别是昆虫和螨的化合物。本发明还提供包含该化合物的组合物、制备该化合物的方法和防治植物病害的方法。

背景技术

许多具有商业价值的植物(包括普通农作物)容易受到包括节肢动物害虫在内的植物害虫的侵袭,导致作物产量和品质大幅下降。例如,植物害虫是世界上重要农作物损失的主要因素。除了大田作物的损失外,节肢动物害虫也是蔬菜和水果种植者、观赏花卉生产者和家庭园丁的负担。它们可以显著影响重要的中耕作物(包括例如玉米、大豆、棉花和某些其他类型的蔬菜)的产量。可以对这些作物产生破坏性影响的昆虫害虫的实例包括但不限于棉铃虫(Helicoverpa amigara)、烟粉虱(Bemisia tabaci)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、红粉甲虫(Tribolium castaneum)、青桃蚜虫(Myzus persicae)、粘虫(Spodoptera spp.)、西方花蓟马(Frankliniella occidentalis)和褐飞虱(Nilaparvatalugens)。高破坏性的螨的实例包括但不限于二斑叶螨(Tetranychus urticae)、番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)、欧洲红螨(Panonychus ulmi)、柑橘红螨(Panonychuscitri)、扁螨如短须螨属(Brevipalpus sp)和螟螨如水稻穗螨(Steneotarsonemusspinki)。

昆虫和/或螨害虫主要通过大量施用化学杀昆虫剂来防治,所述化学杀昆虫剂通过抑制昆虫生长、阻止昆虫取食或繁殖或者导致死亡而具有活性。生物害虫防治剂,如捕食性昆虫或昆虫病原性线虫,也已应用来保护作物植物免受封闭环境如温室中的螨和昆虫的侵害,从而提供化学杀昆虫剂的替代或补充。

因此可以达到良好的昆虫防治,但是某些化学品有时也会影响非目标的益虫,并且某些生物制品的活性谱非常窄。另外,某些化学防治方法的持续使用增加了节肢动物害虫对此类防治措施发展抗性的机会。已通过各种抗药性管理实践部分地缓解了这种情况,但是仍然需要发现新的且有效的害虫防治剂,其为农民提供经济利益且是环境可接受的。特别需要的是这样的防治剂:靶向更宽光谱的经济上重要的害虫并且有效地防治对现有防治剂具有抗性或可能变得具有抗性的节肢动物品系。

与当前防治策略的缺点相关的其他因素包括对农业可持续性的高度关注,以及可能阻止或严格限制使用许多可用农业化学杀昆虫剂和杀螨剂的新政府法规。这些试剂也可能在地下水位或食物链以及在更高营养级的物种中积累。这些试剂还可以充当诱变剂和/或致癌物而在非目标生物中引起不可逆且有害的遗传修饰。

因此,需要用于防治植物和作物中的节肢动物害虫的替代方法。

发明内容

本发明提供用于防治植物中的昆虫和/或螨害虫,特别是限制植物中的昆虫和/或螨损害的化合物。

特别有利的是,这些化合物抢先激活植物中的先天免疫反应,以增强植物免疫力,导致病原体防治。

可以通过本文所述的方法、化合物和用途防治的昆虫害虫的非限制性实例包括鞘翅目(Coleoptera)、双翅目(Diptera)、半翅目(hemiptera)、缨翅目(Thysanoptera)和鳞翅类(Lepidoptera)的成员。

本发明的化合物具有如本文所公开的通式I、Ie、II、III或IV,或者子组Ia-e和IIa-e式中的一个。优选的是由式I、II和III表示的化合物。特别地,所述化合物选自由以下各项组成的组:3,4-(亚甲基二氧基)苯基甲酸(下面也称作胡椒基酸)(PA)(或任选地其前体如3,4-亚甲基二氧基肉桂酸(MDCA));4-碘苯甲酸(4-IBA);4-三氟甲基苯甲酸;4-丙炔氧基苯甲酸(4-PB)和3-(4-吡啶基)丙烯酸(3PA);或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或功能类似物。更特别地,所述化合物是胡椒基酸,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或功能类似物。在如本文所提供的方法和用途中的化合物的合适浓度在约0,1至1000μM,特别是1至800μM,更特别地10至500μM的范围内。

本发明还公开了本文所述的化合物用于预防、治疗和/或减少植物被节肢动物害虫如昆虫和/或螨感染,和/或防治(例如预防或减少)由此引起的植物损害的用途。

在另一个实施方案中,本发明公开了一种组合物或制剂,其包含如本文所述的化合物和稀释剂、添加剂、植物(微量)营养物、乳液稳定剂、表面活性剂、缓冲剂、作物油、漂移抑制剂和/或(惰性)基质。特别地,所述组合物是叶面喷雾剂或种子包衣剂。此外,所述化合物或组合物还可以包含一种或多种肥料、生物刺激剂、除草剂、杀真菌剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂和/或杀昆虫剂或者与一种或多种肥料、生物刺激剂、除草剂、杀真菌剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂和/或杀昆虫剂组合使用。特别地,所述组合物是包含式I、Ia-e、II、IIa-e、III或IV的化合物中的任何一种或多种以及至少一种赋形剂的农业化学组合物。

在另一个实施方案中,将所述化合物或组合物施用至植物或植物部分,或者施用至植物周围的土壤。优选的施用方法是叶面处理(例如通过喷洒)、种子处理(例如通过种子包衣)、土壤处理(例如通过土壤浸透)或添加到生长基质中。植物部分可以是种子、果实、子实体、叶、茎、枝、杆、花、根、块茎或根茎。

本发明还涉及一种包括包衣的种子,该包衣包含如本文提供的化合物,以及涉及一种用于防治(例如预防、抑制或治疗植物感染)植物病原体如本文提供的节肢动物害虫的方法,所述方法包括对所述植物施用本发明的化合物。

附图说明

图1:在接种十只二斑叶螨(Tetranychus urticae)雌虫后十天,在用300μM胡椒基酸(PA)或水对照处理剂(CON)处理的植物的番茄叶片中,每个叶片的螨数量(左)和褪绿面积占总叶面积的百分比(右)的箱线图。N=8。

图2:用300μM胡椒基酸(PA)或水对照处理剂(CON)处理的小麦植物上的禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)的繁殖因子的箱线图。N=8(每种处理剂八个盆,每个盆容纳有五株植物)。

图3:用300μM胡椒基酸(PA)或水对照处理剂(CON)处理的小麦植物上的禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)的繁殖因子的箱线图。N=8(每种处理剂八个盆,每个盆容纳有五株植物)。

图4:烟粉虱(Bemisia tabaci)在用300μM胡椒基酸(PA)或水对照处理剂(CON)处理的棉花植物上沉积的卵的发育的条形图。“卵”是指未孵化的卵;“爬虫”是第一龄幼虫,而“若虫”是第二龄幼虫。N=8(每种处理剂八株棉花;每株植物允许60个烟粉虱(B.tabaci)成虫产卵)。

图5:在用30个成虫接种之后十天,从用对照溶液或胡椒基酸(PA)(1000μM(左)或300μM(右))处理的番茄植物中回收的番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)的数量(平均值±se)的条形图。N=5

图6:表示从用对照溶液或胡椒基酸(PA,300μM)处理的辣椒植物甜椒(Capsicumannuum)中回收的蓟马幼虫(西方花蓟马(Frankliniella occidentalis))的数量(平均值±se)的条形图。N=6

具体实施方式

如本文所使用的,除非上下文另有明确规定,否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括单数和复数指代。如本文所使用的,术语“包括(comprising)”、“包含(comprises)”和“包括(comprised of)”与“包含(including)”、“包括(includes)”或“含有(containing)”、“包含(contains)”同义,并且是包含性的或开放式的,并且不排除额外的、未述及的成员、要素或方法步骤。如本文所使用的,术语“约”在提及诸如参数、量、持续时间等的可测量值时,意指涵盖指定值的+/-20%或更小,优选+1-10%或更小,更优选+/-5%或更小的变化,以及自该指定值起的+/-20%或更小,优选+1-10%或更小,更优选+/-5%或更小的变化,只要这样的变化适合在所公开的发明中实施。应当理解,修饰语“约”提及的值本身也是具体且优选地被公开的。尽管术语“一个或多个”或“至少一个”,例如一组成员中的一个或多个或至少一个成员本身是清楚的,但借助于进一步举例说明,该术语尤其涵盖提及对所述成员的任何一个提及,或对所述成员的任何两个或更多个提及,如例如对所述成员中的任何>3个、>4个、>5个、>6个或>7个等,直至全部的所述成员的提及。本说明书中引用的所有参考文献和具体提及的教导以其整体通过引用结合于此。除非另有定义,否则在公开本发明中使用的所有术语,包括技术和科学术语,都具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。借助于进一步的指导,包括术语定义以更好地理解本发明的教导。在以下段落中,更详细地定义了本发明的不同方面。除非明确指出相反,否则如此定义的每个方面都可以与任何其他方面或多个方面组合。特别地,被指示为优选或有利的任何特征可以与被指示为优选或有利的任何其他特征进行组合。在整个说明书中对“一个实施方案”或“实施方案”的提及意指关于该实施方案描述的特定特征、结构或特性包括在本发明的至少一个实施方案中。

本发明提供了用于防治植物中的节肢动物害虫,特别是对植物有害的昆虫和/或螨的方法、化合物和组合物。如本文所使用的,“防治”昆虫/螨是指(间接)抑制昆虫或螨害虫存活、生长、取食和/或繁殖的能力,或限制昆虫和/或螨相关的作物植物的损害或损失,或在昆虫和/或螨害虫存在下生长时保护作物的产量潜力。

特别有利的是,这些方法和化合物抢先刺激植物针对病原昆虫和螨的防御和/或免疫反应。通过经由植物起作用,这些化合物对有益(土壤)生物具有最小的影响,从而使它们成为更适合的作物保护剂。本发明证实了化合物间接抑制以被处理植物为食的昆虫或螨的繁殖(例如减少卵或若虫的数量),以及对植物造成的损害(例如通过受损的叶片面积或根损伤测量的)减少。值得注意的是,已证实这些化合物对植物生长具有积极作用,并且在昆虫/螨压力下对例如根和枝(shoot)发育(例如增加的数量和/或高度)、种子繁殖和/或作物产量具有更特定的影响。本发明证实了化合物抑制以所处理的植物为食的昆虫或螨的发育和繁殖,并且对植物造成的损害减少。

本文提供的化合物能够抑制肉桂酸-4-羟化酶(C4H)(NCBI参考序列:NP_180607.1)/使其失活,该C4H是苯丙烷类(phenylpropanoid)途径的第二种酶和细胞色素P450血红素硫醇蛋白超家族的一个成员(Schalk等人1998年)。因此,这些化合物通过选择性扰动苯丙烷类途径来刺激植物防御机制而起作用。

在一个特别的实施方案中,本发明提供了一种增强植物针对食植性昆虫和/或螨的免疫力的方法,特别是通过酶C4H的抑制或灭活进行,所述方法包括向植物施用例如通过结合C4H而能够破坏C4H的功能或活性的(外源性)化合物,特别是小分子。如本文所使用的,“肉桂酸-4-羟化酶(C4H)抑制剂”涉及能够降低或抑制植物中的C4H活性的化合物。如本文所使用的,术语“C4H活性的抑制”或“抑制C4H”应解释为意指在功能性C4H酶的合成水平或C4H生物活性方面的任何变化,其可以包括存在于植物细胞中的功能性C4H酶的水平降低、C4H酶的功效降低,或影响C4H酶的一种或多种生物学特性的任何其他方式,如例如其在植物中将反式肉桂酸转化为4-羟基肉桂酸方面的作用。

如本文所使用的,术语“改善的抗病性”是指健康植物中的植物防御增加(参见预防性措施)或者植物或植物种群的疾病严重程度的降低,或植物种群中受影响的植物数量的减少。

用于测量和测定C4H的活性(对C4H的影响)的技术是本领域普通技术人员众所周知的。测定C4H活性抑制的有用方法是(通过引用并入):

-在植物细胞培养物中或在表达CYP73A1的酵母微粒体中存在可能的C4H抑制剂下,测量用

-C4H酶的抑制增加游离的反式肉桂酸的浓度,其在植物中迅速缀合。反式肉桂酸氨基酸缀合物的累积(其可以使用HPLC-MS进行定量)可以用作植物中C4H抑制的间接测量。这种方法在Steenackers等人2016年中进行了概述。简而言之,拟南芥(A.thaliana)幼苗在体外在含有10μM的疑似C4H抑制剂的培养基上生长,之后进行收集、汇合并经过HPLC分析。在Steenackers等人2016年的补充附图S2(通过引用并入)中找到了反式肉桂酸缀合物的量增加的代表值。

-C4H酶的抑制导致C4H基因的补偿性上调,如实施例20中所示。在收获前二十四小时和三小时用100μM的PA和MDCA叶面处理的十四天龄的水稻植物(Oryza sativacv.Bomba),在根系中的C4H表达分别增加了十倍和三倍。

-拟南芥(Arabidopsis thaliana)幼苗在连续暴露于C4H抑制剂后的初生根伸长大大降低。IC50-根(即使初生根伸长减少50%所需的候选抑制剂的剂量)可以是C4H抑制剂活性的另一种间接测量。这种程序描述与Steenackers等人2016年。C4H抑制剂的参考IC50-根值对于MDCA为5.07μM(Steenackers等人2016年),对于PA为40.0μM(未发表的数据)。

-当拟南芥幼苗在体外生长并持续暴露于10μM的疑似C4H抑制剂时,应该可以看到在五天龄幼苗的凯氏带(Casparian strip)中的木质化明显受损(很少的木质化细胞)。作为参考,PA、MDCA和4-IBA使凯氏带区域中的非木质化内胚层细胞的数量分别增加了134%、104%和57%(Van de Wouwer等人2016年)。

在植物中,测定特别可用于确定本文提供的化合物的结构类似物和“C4H抑制剂前体”(即在植物中转化为有效C4H抑制剂的化合物)的抑制活性。在本发明的上下文中,胡椒基酸(PA)的前体的实例是3,4-亚甲基二氧基肉桂酸(MDCA)、胡椒酸和胡椒碱,优选MDCA。因此,本发明还涉及C4H抑制剂前体在如本文所述的方法、组合物和应用/用途中的使用。

在一个特定的实施方案中,本发明的化合物是小分子。在一个实施方案中,该化合物是芳族羧酸或特征在于存在包含羧酸基团的苯并间二氧杂环戊烯。

特别地,本发明的化合物具有通式I,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐或溶剂化物:

其中n为0、1、2、3或4。

更特别地n为0。

在另一个实施方案中,本发明的化合物具有通式II,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐或溶剂化物:

其中X是卤素或-R,其中R选自-CF3或-O-C1-6炔基。在一个特别的实施方案中,X是-I,并且R是-4-O-丙炔基、-3-O-丙炔基或-4-CF3。

在另一个实施方案中,本发明的化合物具有式III,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐或溶剂化物:

其中n为0、1、2、3或4。

更特别地n为1。

如本文所用,术语“卤素”涵盖氟(F)、氯(C1)、溴(Br)或碘(I),特别是碘(I)。如本文所使用的,术语“炔基”是指含有至少一个碳-碳三键的直链或支链烃基。炔基的实例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、异丁炔基和戊炔基、己炔基等。在一个特别的实施方案中,炔基是丙炔基。“任选取代的炔基”是指在任何可用的连接点处具有任选的一个或多个取代基(例如1、2、3或4个)的炔基。这样的取代基的非限制性实例包括卤素、羟基、羰基、硝基、氨基、肟、亚氨基、叠氮基、肼基、氰基、芳基、杂芳基、环烷基、酰基、烷氨基、烷氧基、巯基、烷硫基、羧酸、酰氨基、烷基酯、氨基甲酸酯、硫代酰胺基、脲、磺酰氨基等。

在一个特定的实施方案中,本发明的化合物选自如表1中所呈现的化合物。

表1

甚至更具体地,本发明的化合物或C4H抑制剂选自由以下各项组成的组:胡椒基酸(PA)(或任选地其前体);4-碘苯甲酸(4-IBA);4-三氟甲基苯甲酸;4-丙炔氧基苯甲酸(4-PB)和3-(4-吡啶基)丙烯酸(3PA);或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或溶剂化物。在另一个实施方案中,所述化合物选自由以下各项组成的组:胡椒基酸(PA),3,4-亚甲基二氧基肉桂酸(MDCA),胡椒酸和胡椒碱,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或溶剂化物。在另一个实施方案中,所述化合物选自由以下各项组成的组:4-碘苯甲酸(4-IBA),4-三氟甲基苯甲酸,4-丙炔氧基甲基苯甲酸,4-丙炔氧基苯甲酸(4-PB)和3-丙炔氧基苯甲酸,或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或溶剂化物。在仍然另一个实施方案中,所述化合物是3-(4-吡啶基)丙烯酸(3PA),或者其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或溶剂化物。一种优选的化合物是胡椒基酸(PA),或其立体异构体、互变异构体、水合物、盐、酯和/或溶剂化物,或者其任选的功能类似物。可以通过使用如本文提供的测定来评价其他化合物与本发明的化合物(特别是PA)的功能相当性,例如可以发现该化合物具有与参考化合物例如PA相似的效果(例如在如本文所述测定的至少2或3个中)。因此,在本发明中还设想了本文提供的化合物的“功能等同物或类似物”,其是与参考化合物相比具有较小结构差异(所谓的结构类似物)但具有相同设想的功能或性质的化合物。在一个实施方案中,功能类似物是特征在于存在芳族羧酸或存在包含羧酸基团的苯并间二氧杂环戊烯的小分子。

除非另有说明,否则术语“本发明的化合物”及等效表达意在包括该化合物的前药、药用盐、氧化物、溶剂化物,例如水合物,并且在上下文允许的情况下包括该化合物的配合物,以及该化合物的任何立体异构或互变异构形式,或任何这样的形式以任何比率形成的混合物。此外,由于本发明的化合物带有酸性部分,所以其合适的农业化学上可接受的盐可以包括碱金属盐,例如钠盐或钾盐;碱土金属盐,例如钙盐或镁盐;以及与合适有机配体形成的盐,例如季铵盐。盐可以是能够通过如本文提供的酸性化合物和碱的中和反应形成的任何离子化合物。实例包括但不限于铵盐、钾盐或异丙胺盐。在另一个实施方案中,碱盐由形成无毒盐的碱形成,包括铝盐、精氨酸盐、苄星(benzathine)盐、胆碱盐、二乙胺盐、二醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、葡甲胺盐、胆胺(olamine)盐、氨丁三醇盐和锌盐。在一个实施方案中,还可以形成酸和碱的半盐,例如半硫酸盐和半钙盐。在一个特别的实施方案中,本发明还涵盖衍生自本发明化合物的酯,即其中羧酸的-OH(羟基)基团被-O-烷基(烷氧基)或其他有机基团替代。因此,式I、II、III和IV(包括子组的个体化合物)中的羧酸(-COOH)被R1-0-C=O替代,其中R1是C1-C4-烷基。实例包括但不限于甲基、乙基己基或乙基酯。鉴于增强的渗透性能,所述酯对于叶面施用可能是特别令人感兴趣的。

本发明提供了用于防治节肢类食草动物(也称为节肢动物害虫)的方法、化合物和组合物。术语“防治”此类食植性昆虫和/或螨是指减少食植性昆虫和/或螨对植物的总体负面影响,使得与未用所述化合物或组合物处理的植物相比,植物经历减少量的由所述食草动物/害虫导致的负面影响。如通过降低植物上或土壤中的食植性昆虫和/或螨的总体数量或密度(即种群、卵量或昆虫/螨发育的减少)或者通过减少害虫的严重程度或负面影响程度(例如植物部分的食植性、褪绿、韧皮部汁液损失、生长减少、产量损失等)或植物寄生昆虫和/或螨(即种群表现出降低的适应性),可以减少食植性昆虫和/或螨的总体负面影响。此外,该化合物可以用于在节肢动物胁迫下提高植物产量和繁殖力。

食植性是其中异养生物消耗植物的一种消费形式。食植性昆虫和/或螨是以植物组织为食的节肢动物。它们通过例如以细胞内容物进食、咀嚼、吮吸韧皮部汁液或充当病毒性植物病害的载体来伤害植物。

可以通过本文所述的方法、化合物和用途来防治的昆虫害虫的非限制性实例包括无翅目的成员,如石蛃亚目(Archaeognatha)(目:石蛃目(Microcoryphia))和三叉刺尾(目:缨尾目(Thysanura));[亚类]翅亚纲(Pterygota)如[门]外翅类(Exopterygota)例如叮咬和吸吮虱子(目:虱目(Phthiraptera));书虱和树虱(目:啮虫目(Psooptera));蟑螂(目:蜚蠊目(Blattodea));蜻蜓和豆娘(目:蜻蜓目(odonata));蠼螋(目:革翅目(Dermaptera));蚱蜢和蟋蟀(目:直翅目(Orthoptera));祈祷螳螂(目:螳螂目(Mantodea));蜉蝣(目:蜉蝣目(Ephemeroptera));竹节虫和叶虫(目:虫目(Phasmatodea));石蝇(目:襀翅目(Plecoptera));白蚁(先前的目:等翅目(Isoptera),但现在是目:蜚蠊目的一部分);蓟马(目:缨翅目(Thysanoptera));真虫(目:半翅目(Hemiptera));纺足目昆虫(目:纺足目(Embioptera));缺翅目昆虫(Zorapteras)(目:缺翅目(Zoraptera));或[门]内翅类(Endopterygota),例如泥蛉(Alderflies)、蛇蜻蜒(Dobsonflies)和黄石蛉(Fishflies)(目:广翅目(Megaloptera));蜜蜂、黄蜂和蚂蚁(目:膜翅目(Hymenoptera));甲虫(目:鞘翅目(Coleoptera));蝴蝶和飞蛾(目:鳞翅目(Lepidoptera));石蛾(目:毛翅目(Trichoptera));跳蚤(目:虹吸目(Siphonaptera));苍蝇(目:双翅目(Diptera));草蛉、蚁狮和螳螂(目:神经翅目(Neuroptera));蝎蛉(Scorpionflies)(目:长翅目(Mecoptera));蛇蝇(目:蛇蛉目(Raphidioptera));和链翅目昆虫(目:链翅目(Strepsiptera))。

鞘翅目成员的实例包括叶甲科(Acalymma)、三齿豆象属(Acanthoscelides)、味丽金龟(Adoretus)、萤叶甲(Agelastica)、叩甲(Agriotes)、黑菌虫(Alphitobius)、總角金龟(Amphimallon)、家具窃蠹(Anobium)、星天牛(Anoplophora)、花象(Anthonomus)、圆皮蠹(Anthrenus)、小象虫(Apion)、阿熟金龟(Apogonia)、蜡蝉(Atomaria)、毛皮蠹(Attagenus)、恶条豆象(Bruchidius)、豆象(Bruchus)、龟金花虫(Cassida)、豆叶甲虫(Cerotoma)、龟象(Ceutorrhynchus)、茎跳甲(Chaetocnema)、方喙象(Cleonus)、宽胸叩头虫(Conoderus)、黑象虫(Cosmopolites)、蛴螬(Costelytra)、叩甲(Ctenicera)、锥象甲(Curculio)、象甲(Cryptorhynchus)、米象(Cylindrocopturus)、皮蠹(Dermestes)、玉米根虫(Diabrotica)、桃蛀螟(Dichocrocis)、蛴螬(Diloboderus)、食植瓢虫(Epilachna)、毛跳甲(Epitrix)、蛀茎象甲(Faustinus)、裸蛛甲(Gibbium)、菜螟(Hellula)、异爪犀金龟(Heteronychus)、寡节鳃金龟(Heteronyx)、金龟子甲虫(Hylamorpha)、家天牛(Hylotrupes)、紫苜蓿叶象(Hypera)、果蛀虫(Hypothenemus)、大褐齿爪總金龟(Lachnosterna)、负泥虫(Lema)、马铃薯甲虫(Leptinotarsa)、潜叶蛾(Leucoptera)、稻水象甲(Lissorhoptrus)、筒味象(Lixus)、萤叶甲(Luperodes)、竹粉蠹虫(Lyctus)、美洲叶甲(Megascelis)、梳爪叩头虫(Melanotus)、油菜露尾甲(Meligethes)、棉花金龟子(Melolontha)、天牛(Migdolus)、松墨天牛(Monochanus)、白缘象甲(Naupactus)、黄珠甲(Niptus)、蛀犀金龟(Oryctes)、锯谷盗(Oryzaephilus)、Oryzaphagus、黑葡萄耳象(Otiorrhynchus)、小青花金龟(Oxycetonia)、猿叶虫(Phaedon)、鳃角金龟(Phyllophaga)、菜叶蚤(Phyllotreta)、弧丽金龟(Popillia)、白蠕虫(Premnotrypes)、大谷蠹(Prostephanus)、金头跳甲(Psylliodes)、蛛甲(Ptinus)、Rhizobius、劫根蠹(Rhizopertha)、谷象(Sitophilus)、尖隐味象(Sphenophorus)、药材甲(Stegobium)、茎干象(Sternechus)、Symphyletes、纤毛象(Tanymecus)、拟步行虫(Tenebrio)、拟谷盗(Tribolium)、斑皮蠹(Trogoderma)、籽象甲(Tychius)、脊虎天牛(Xylotrechus)和距步甲(Zabrus)。

双翅目成员的实例包括伊蚊(Aedes)、潜蝇(Agromyza)、按实蝇(Anastrepha)、按蚊(Anopheles)、金柑芽瘿蚊(Asphondylia)、南亚实蝇(Bactrocera)、毛蚊(Bibio)、丽蝇(Calliphora)、实蝇(Ceratitis)、摇蚊(Chironomus)、金蝇(Chrysomyia)、斑蛇(Chrysops)、锥蝇(Cochliomyia)、枣瘿蚊(Contarinia)、瘤蝇(Cordylobia)、库蚊(Culex)、糠蚊(Culicoides)、脉毛蚊(Culiseta)、黄蝇(Cuterebra)、寡鬃实蝇(Dacus)、叶瘿蚊(Dasyneura)、地种蝇(Delia)、人皮蝇(Dermatobia)、果蝇(Drosophila)、稻象(Echinocnemus)、厕蝇(Fannia)、胃蝇(Gasterophilus)、舌蝇(Glossina)、麻虻(Haematopota)、水蝇(Hydrellia)、种蝇(Hylemyia)、虱蝇(Hyppobosca)、皮蝇(Hypoderma)、潜叶蝇(Liriomyza)、绿蝇(Lucilia)、Lutzomia、曼蚊(Mansonia)、家蝇(Musca)、绿蝽(Nezara)、狂蝇(Oestrus)、麦秆蝇(Oscinella)、泉蝇(Pegomyia)、白蛉(Phlebotomus)、草种蝇(Phorbia)、伏蝇(Phormia)、Prodiplosis、茎蝇(Psila)、绕实蝇(Rhagoletis)、肉蝇(Sarcophaga)、蚋蚊(Simulium)、厩螯蝇(Stomoxys)、虻虫(Tabanus)、Tannia、根斑蝇(Tetanops)和稻大蚊(Tipula)。

半翅目(亚目异翅目)成员的实例包括南瓜缘蝽(Anasa tristis)、拟丽蝽属(Antestiopsis spp.)、蚜属(Aphis spp.)、粉虱属(Bemisia spp.)、Boisea属、土长蝽属(Blissis spp.)、俊盲蝽属(Calocoris spp.)、斑腿微刺盲蝽(Campylomma livida)、长蝽(Cavelerius spp.)、臭虫属(Cimex spp.)、温带臭虫(Cimex lectularius)、热带臭虫(Cimex hemipterus)、白辧麦寄绳属(Collaria spp.)、淡盲蝽(Creontiades dilutes)、胡椒缘蝽(Dasynus piperis)、椿虫(Dichelops furcatus)、厚氏长棒网蝽(Diconocorishewetti)、棉红蝽属(Dysdercus spp.)、臭椿属(Euschistus spp.)、扁盾蝽属(Eurygasterspp.)、刺盲蝽属(Heliopeltis spp.)、棉花臭虫(Horcias nobilellus)、稻缘蜂属(Leptocorisa spp.)、叶味缘棒(Leptoglossus phyllopus)、草盲蜂属(Lygus spp.)、蔗黑长蜂(Macropes excavates)、盲椿科(Miridae)、金光绿盲蝽(Monalonion atratum)、桃蚜属(Myzus spp.)、绿蝽属(Nezara spp.)、飞虱属(Nilparvata spp.)、稻蝽属(Oebalusspp.)、蝽科(Pentomidae)、方背皮蝽(Piesma quadrata)、璧蝽属(Piezodorus spp.)、杂盲蝽属(Psallus spp.)、Pseudacysta persea、红锥蝽(Rhodnius spp.)、可可褐盲蝽(Sahlbergella singularis)、Scaptocoris castanea、黑蝽属(Scotinophora spp.)、梨冠网蝽(Stephanitis nashi)、替拉卡属(Tibraca spp.)、锥猎蝽属(Triatoma spp.)、无网长管蚜属(Acyrthosipon spp.)、Acrogonia spp.、沫蝉属(Aeneolamia spp.)、隆脉木虱属(Agonoscena spp.)、白粉虱(Aleurodes spp.)、甘庶穴粉虱(Aleurolobus barodensis)、橘绵粉虱属(Aleurothrixus spp.)、叶蝉属(Amrasca spp.)、飞廉短尾蚜(Anuraphiscardui)、圆蚧属(Aonidiella spp.)、梨根瘤蚜(Aphanostigma piri)、蚜属(Aphis spp.)、葡萄叶蝉(Arboridia apicalis)、小圆蚧属(Aspidiella spp.)、盾蚧属(Aspidiotusspp.)、Atanus spp.、茄粗额蚜(Aulacorthum solani)、粉虱属(Bemisia spp.)、李短尾蚜(Brachycaudus helichrysii)、Brachycolus spp.、甘蓝蚜(Brevicoryne brassicae)、小褐稻虱(Calligypona marginata)、红头大叶蝉(Carneocephala fulgida)、甘蔗棉蚜(Ceratovacuna lanigera)、沫蝉科(Cercopidae)、蜡蚧属(Ceroplastes spp.)、草莓钉蚜(Chaetosiphon fragaefolii)、庶黄雪盾蚁(Chionaspis tegalensis)、茶绿叶蝉(Chlorita onukii)、核桃黑斑蚜(Chromaphis juglandicola)、褐圆介壳虫(Chrysomphalus f1cus)、玉米叶蝉(Cicadulina mbila)、Coccomytilus halli、绒粉蚧属(CoccuS spp.)、荼薦隐瘤蚜(Cryptomyzus ribis)、玉米叶蝉属(Dalbulus spp.)、裸粉虱属(Dialeurodes spp.)、木虱属(Diaphorina spp.)、盘蚧属(Diaspis spp.)、草履蚧属(Drosicha spp.)、西圆尾蚜属(Dysaphis spp.)、洁粉蚧属(Dysmicoccus spp.)、棉叶蝉属(Empoasca spp.)、绵蚜属(Eriosoma spp.)、红斑叶蝉属(Erythroneura spp.)、块叶蝉(Euscelis bilobatus)、拂粉蚧属(Ferrisia spp.)、咖啡荒粉蚧(GeococcuS coffeae)、蔗蝗属(Hieroglyphus spp.)、琉璃叶蝉(Homalodisca coagulate)、桃大尾蚜(Hyalopterusarundinis)、绵团蚧属(Icerya spp.)、片角叶蝉属(Idiocerus spp.)、扁喙叶蝉属(Idioscopus spp.)、灰飞虱(Laodelphax striatellus)、蜡蚧属(Lecanium spp.)、牡蛎蚧属(Lepidosaphes spp.)、萝卜蚜(Lipaphis erysimi)、长管蚜属(Macrosiphum spp.)、象蝶属(Mahanarva spp.)、高粱蚜(Melanaphis sacchari)、Metcalflella spp.、麦无网长管蚜(Metopolophium dirhodum)、黑缘平翅斑蚜(Monellia costalis)、Monelliopsispecanis、象虱属(Myzus spp.)、莴苣蚜(Nasonovia ribisnigri)、黑尾叶蝉属(Nephotettix spp.)、褐飞虱(Nilaparvata lugens)、大叶蝉属(Oncometopia spp.)、Orthezia praelonga、杨梅缘粉虱(Parabemisia myricae)、木虱属(Paratrioza spp.)、黑点蚧属(Parlatoria spp.)、瘿虫属(Pemphigus spp.)、玉米花翅飞虱(Peregrinusmaidis)、绵粉蚧属(Phenacoccus spp.)、Phloeomyzus passerinii、忽布疣额蚜(Phorodonhumuli)、葡蚜属(Phylloxera spp.)、柳蛎盾蚧(Pinnaspis aspidistrae)、纹粉蚧属(Planococcus spp.)、梨形原绵蜡蚧(Protopulvinaria pyriformis)、桑白盾蚧(Pseudaulacaspis pentagona)、粉蚧属(Pseudococcus spp.)、叶虱(Psylla spp.)、蝶蛹金小蜂属(Pteromalus spp.)、足蜡蝉属(Pyrilla spp.)、淡圆介壳虫属(Quadraspidiotus spp.)、Quesada gigas、平刺粉蚧属(Rastrococcus spp.)、缢管蚜属(Rhopalosiphum spp.)(例如禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)(鸟樱燕麦蚜虫))、珠蜡蚧属(Saissetia spp.)、葡萄带叶蝉(Scaphoides titanus)、麦二叉蚜(Schizaphisgraminum)、刺盾蚧(Selenaspidus articulates)、飞虱属(Sogata spp.)、白背飞虱(Sogatella furcifera)、Sogatodes spp.、三角蝶(Stictocephala festina)、Tenalaphara malayensis、美洲山核桃长斑蚜(Tinocallis caryaefoliae)、沫蝉属(Tomaspis spp.)、二叉蚜属(Toxoptera spp.)、白粉虱属(Trialeurodes spp.)、木虱属(Trioza spp.)、红闪小叶蝉(Typhlocyba spp.)、矢尖蚧属(Unaspis spp.)、葡萄根瘤蚜(Viteus vitifolii)和么叶蝉属(Zygina spp.)。

鳞翅目成员的非限制性实例包括桑剑纹夜蛾(Acronicta major)、褐带卷蛾(Adoxophyes)、白斑烦夜蛾(Aedia leucomelas)、夜蛾(Agrotis)、波纹夜蛾(Alabama)、脐橙螟蛾(Amyelois transitclla)、条麦蛾(Anarsia)、干煞夜(Anticarsia)、黄螟(Argyroploce)、甘蓝夜蛾(Barathra brassicae)、籼弄蝶(Borbo cinnara)、榆潜蛾(Bucculatrix thurberiella)、松尺蠖(Bupalus Piniarius)、蛀茎夜蛾(Busseola)、卷蛾(Cacoecia)、茶细蛾(Caloptilia theivora)、烟卷蛾(Capua reticulana)、苹果蠹蛾(Carpocapsa pomonella)、桃小食心虫(Carposinaniponensis)、Chematobia brumata、二化螟(Chilo)、色卷蛾(Choristoneura)、葡萄果蠹蛾(Clysia ambiguella)、卷叶螟(Cnaphalocerus)、云卷蛾(Cnephasia)、细蛾(Conopomorpha)、鳄梨象(Conotrachelus)、夜蛾(Copitarsia)、蠹蛾(Cydia)、Dalaca noctuides、绢野螟(Diaphania)、小蔗螟(Diatraeasaccharalis)、钻夜蛾(Earias)、绒花小卷蛾(Ecdytolopha aurantium)、小玉米螟(Elasmopalpus lignosellus)、非洲茎螟(Eldana Saccharina)、粉螟(Ephestia)、叶小卷蛾(Epinotia)、苹淡褐卷蛾(Epiphyas postvittana)、白缘螟蛾(Etiella)、金茅属(Eulia)、葡萄果蠹蛾(Eupoecilia ambiguella)、黄毒蛾(Euproctis)、切夜蛾(Euxoa)、长卷蛾(Feltia)、蜡螟(Galleria mellonella)、细蛾(Gracillaria)、小食心虫(Grapholitha)、卷叶野螟(Hedylepta)、铃夜蛾(Helicoverpa)、烟芽夜蛾(Heliothis)、褐织蛾(Hofmannophila pseudospretella)、向日葵螟(Homoeosoma)、长卷蛾(Homona)、苹巢蛾(Hyponomeuta padella)、柿蒂虫(Kakivoria flavofasciata)、文殊兰夜蛾(Laphygma)、Laspeyresia molesta、茄白翅野螟(Leucinodes orbonalis)、苹果潜叶蛾(Leucoptera)、金纹细蛾(Lithocolletis)、绿果冬夜蛾(Lithophane antennata)、葡萄蛾(Lobesia)、西部豆夜蛾(Loxagrotis albicosta)、毒蛾(Lymantria)、莱氏蛾(Lyonetia)、天幕毛虫(Malacosoma Neustria)、豆荚野螟(Maruca testulalis)、甘蓝夜蛾(Mamestrabrassicae)、黒蛾(Mods)、粘虫(Mythimna separate)、水螟(Nymphula)、Oiketicus、粘虫蛾(Oria)、樟巢螟(Orthaga)、豆螟(Ostrinia)、水稻负泥虫(Oulema oryzae)、桤木鞘蛾(Panolis flammea)、稻弄蝶(Parnara)、红铃虫(Pectinophora)、潜叶蛾(Perileucoptera)、茄麦蛾(Phthorimaea)、柑桔潜叶蛾(Phyllocnistis citrella)、小潜细蛾(Phyllonorycter)、粉蝶(Pieris)、荷兰石竹小卷蛾(Platynota stultana)、印度谷螟(Plodia inter punctella)、银纹夜蛾(Plusia)、菜蛾(Plutella xylostella)、小蛾(Prays)、斜纹夜蛾(Prodenia)、天蛾(Protoparce)、夜蛾(Pseudaletia)、大豆夜蛾(Pseudoplusia includens)、玉米螟(Pyrausta nubilalis)、金翅夜蛾(Rachiplusia nu)、禾螟(Schoenobius)、螟蛾(Scirpophaga)、黄地老虎(Scotia segetum)、大螟(Sesamia)、长须卷蛾(Sparganothis)、斜纹夜蛾(Spodoptera)、(例如贪夜蛾(Spodoptera exigua)(甜菜夜蛾(Beet armyworm))、展足蛾(Stathmopoda)、花生卷叶麦蛾(Stomopteryxsubsecivella)、透翅蛾(Synanthedon)、马铃薯块茎蛾(Tecia solanivora)、大显夜蛾(thermesiagemmatalis)、衣蛾(Tineapellionella)、幕谷蛾(Tineola bisselliella)、卷蛾科(Tortrix)、毛颤蛾(Trichophaga tapetzella)、粉夜蛾(Trichoplusia)、番茄斑潜蝇(Tuta Absoluta)和石榴灰蝶(Virachola)。

除了分类学,食植性昆虫害虫还可以根据它们的取食方式分类到取食行会中,例如如Novotny等人2010年(通过引用并入)所述的。与经济相关的饲养行会的主要实例包括但不限于叶咀嚼者、潜叶者、韧皮部吮吸者、根咀嚼者、单细胞吮吸者和瘿瘤制造者。

农艺学上重要的叶子咀嚼昆虫的实例包括粘虫、斜纹夜蛾属(Spodoptera spp.)和蚱蜢、黑蝗属(Melanoplus spp.)。吸食韧皮部昆虫的非限制性实例包括蚜属(Aphisspp.)、象虱属(Myzus spp.)、粉虱(Bemisia spp.)和褐飞虱属(Nilaparvata spp.)。具有经济意义的根咀嚼昆虫的实例包括玉米根虫、Diobrotica spp.。潜叶虫的实例包括番茄潜蛾属(Tuta spp.)、泉蝇属(Pegomya spp.)和斑潜蝇属(Liriomyza spp.)。单细胞吮吸者的代表性实例包括蓟马属(Thrips spp.)、西花蓟马属(Franklienella spp)和茶翅蝽属(Halyomorpha spp.)。

特别地,本发明的化合物已显示有效防治以植物汁液或韧皮部为食的节肢动物害虫(也称为“吸吮植物”害虫)。它们例如通过吸食韧皮部、汁液或细胞质来伤害植物。这些节肢动物使用高度改良的口器(管心针)以穿过植物角质层、表皮和叶肉,并在韧皮部筛网元件中建立觅食点。因此,本发明中特别设想的是以植物汁液或韧皮部为食的吸吮植物的节肢动物,特别是吸食韧皮部、汁液的昆虫、单细胞摄食昆虫和/或潜叶昆虫。同翅目(例如蚜虫和粉虱)的实例是通过刺穿-吮吸来取食韧皮部的代表。缨翅目(thirps)具有刺耳和(刺穿)吸吮取食模式,并且螨物种(Acari)如叶螨和番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)是单细胞取食者的代表。全都在农业、园艺、林业方面都非常重要。因此,在一个实施方案中,本发明提供了用于防治蚜虫、粉虱、蓟马和螨,特别是蓟马(如例如西方花蓟马(Frankliniella occidentalis)),更特别是螨(如例如番茄刺皮瘿螨(Aculopslycopersici)、Steneotarsonemus spinki、二斑叶螨(Tetranychus urticae))的化合物和方法。

在更具体的实施方案中,可以通过实施本文的公开内容来防治的昆虫害虫包括例如烟粉虱(Bemisia tabaci)、西方花蓟马(Frankliniella occidentalis)、象虱属(Myzusspp.)、禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)、蚜属(Aphis spp.)、番茄潜麦蛾(Tutaabsoluta)和褐飞虱(Nilaparvata lugens)。

本发明中还已证实了对植物中螨目(螨)的成虫和幼虫的防治。实例是小麦曲螨(Aceria tosichella Keifer(小麦卷曲螨);麦岩螨(Petrobia latens Müller)(褐麦螨);叶螨科(Tetranychidae)家族中的叶螨和红螨,苹果全爪螨(Panonychus ulmi Koch)(欧洲红螨);二斑叶螨(Tetranychus urticae Koch)(二斑红蜘蛛);麦氏叶螨(T.mcdanieliMcGregor)(McDaniel螨);朱砂叶螨(T.cinnabarinus Boisduval)(胭脂叶螨);土耳其斯坦叶螨(T.turkestani Ugarov&Nikolski)(草莓叶螨);细须螨科家族中的扁螨、Brevipalpusyotersi McGregor(柑橘扁螨);瘿螨科(Eriophyidae)中的锈瘿螨和其他食叶螨。

此外,蓟马等的瘟疫也可以通过本发明的方法和化合物来防治。蓟马属于缨翅目,包括蓟马、西花蓟马(Franklienella)和硬蓟马属(Scirtothrips)。

一个特别的优点是,本发明的化合物不表现出(显著的)毒性,并且因此在适合应用于植物的工作浓度下对非目标生物没有有害影响。例如,已证实本文提供的化合物对小鼠、苍蝇、细菌或真菌是无毒的。因此,在一个特定的实施方案中,本发明的化合物不被认为是杀昆虫剂或杀螨剂的。根据定义,杀昆虫剂或杀螨剂分别是杀死昆虫或螨的化学品。所述特征可以通过例如在实施例部分中提供的本领域已知的方法确定,或通过如由杀昆虫剂抗性行动委员会(IRAC)例如在(Elias,2018年)中描述的直接接触生物测定法确定。

特别有利的是,本发明的化合物可以抢先使用或预防性使用(作为触发剂,例如应用于幼苗或未感染的植物;或在节肢动物害虫的生长或繁殖季节之前)以及治愈性使用,仅需要简单配制,并且在室温下是高度稳定的。在实践中,这些触发剂可以在综合作物保护框架内使用:它们的抢先使用将延迟或甚至阻止节肢动物害虫达到损害阈值,从而减少对传统农药的需求。

在另一个实施方案中,本发明的化合物是分离的(例如以基本上纯化的形式)或使用标准技术合成制备的,或可商购获得的。在一个特别的实施方案中,所述化合物不是通过提取原材料的一部分制得的天然提取物的一部分,所述提取通常通过使用溶剂如乙醇或水(例如种子或植物的含水或乙醇提取物;油)。更特别地,所述化合物(作为组合物的一部分)以90%至100%,优选95%至100%(根据它们的NMR谱)的纯度使用。

本发明还涵盖包含本发明化合物的组合物或制剂(其用途)。如本文所使用的,“农业化学组合物”是指用于农业化学用途,如在农业化学工业(包括农业、园艺、花卉栽培)以及家庭和花园用途中用于保护如本文定义的植物或植物部分、作物、鳞茎、块茎、水果(例如免于有害生物、病害或害虫)的组合物,其包含如本文所定义的化合物的至少一种活性物质,任选地具有一种或多种有利于最佳分散、雾化、沉积、叶片润湿、分布、保留和/或摄取农用化学品的添加剂。典型地,这样的组合物或制剂还包含至少一种附加组分或赋形剂,如表面活性剂、(固体或液体)稀释剂和/或乳液稳定剂,其用作载体。(农业化学)制剂通常包含0.01至95重量%,优选0.1至90重量%,最优选0.5至90重量%的活性物质。“表面活性剂”在本文中是指降低液体的表面张力而使其更容易铺展的化合物。表面活性剂可以是去污剂、乳化剂(包括烷基多糖苷甘油酯或聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯)、分散剂(包括氯化钠、氯化钾、硝酸钾、氯化钙或玉米淀粉)、发泡剂(包括酒石酸、苹果酸或醇的衍生物)、渗透增强剂、保湿剂(包括硫酸铵、甘油或脲)或者离子型或非离子型润湿剂,或者这样的表面活性剂的混合物。特别地,用于本文所定义的组合物中的表面活性剂是渗透增强剂、分散剂或乳化剂。术语“渗透增强剂”在本文中被理解为加速活性成分通过植物的角质层摄取到植物中(即摄取速率)和/或增加吸收到植物中的活性成分的量的化合物。被称为渗透增强剂的物质类别包括磷酸烷基酯,如磷酸三丁酯和磷酸三丙酯,以及萘磺酸盐。“分散剂”是指添加到悬浮液(通常是胶体)中以改善颗粒的分离并防止沉降或结块的物质。如本文所使用的,术语“乳化剂”是指使乳液(即两种或更多种液体的混合物)稳定的物质。可以提及的乳化剂是以商品名

例如,表面活性剂包括以下组分中的一种或多种:蓖麻油乙氧基化物、菜籽甲酯、磷酸烷基酯、磷酸三丁酯、磷酸三丙酯、萘磺酸盐、有机磺酸盐/2-甲基戊烷-2,4-二醇、烷基多糖苷、硅氧烷衍生物、烷基磺酸盐、聚羧酸盐、木质素磺酸盐、烷氧基化甘油三酯、脂肪胺聚合物、二辛基磺基琥珀酸盐或聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯20)。

添加剂、植物(微量)营养物、缓冲剂、作物油、漂移抑制剂和/或(惰性)基质也可以是组合物的一部分。典型地,本发明的化合物可以以合适的农业上可接受的制剂施用于植物,这包括但不限于生长介质如土壤或水培液体介质、粉尘剂、颗粒剂、溶液浓缩物、可乳化浓缩物和可湿性粉剂。术语“农业上可接受的”表示该制剂无毒并且其他方面可接受用于植物,无论是在室内(例如在封闭环境中)还是在室外(例如在暴露于其他植物、动物和人类生命的非封闭环境中)。制剂可以包括添加剂,如溶剂,例如酮、醇、脂族醚、填料和载体,例如粘土和矿物质。固体组合物的一般类型是粉尘剂、粉剂、颗粒剂、团粒剂、丸剂、锭剂、片剂、填充薄膜(包括种子包衣)等,它们可以是水分散性的(“可湿性的”)或水溶性的。由成膜溶液或可流动悬浮液形成的薄膜和包衣特别可用于种子处理。喷雾制剂典型地在喷雾前在合适的介质中扩展。这样的液体和固体制剂被配制成易于在喷雾介质中稀释,通常是水,但偶尔也可以使用另一种合适的介质,如芳烃或石蜡烃或植物油。喷雾体积可以在每公顷约一到几千升的范围内,但更典型地在每公顷约十到几百升的范围内。喷雾制剂可以与水或另一种合适的介质罐混合,用于通过空中或地面施用进行叶面处理,或施用至植物的生长介质。液体和干燥制剂可以直接计量进入滴灌系统或在种植期间计量进入犁沟。

液体稀释剂包括例如水、NN-二甲基烷酰胺(例如,NN二甲基甲酰胺)、柠檬烯、二甲亚砜、N-烷基吡咯烷酮(例如,N甲基吡咯烷酮)、磷酸烷基酯(例如磷酸三乙酯)、乙二醇、三乙二醇、丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、碳酸丙二酯、碳酸丁二酯、石蜡(例如,白矿物油、正链烷烃、异链烷烃)、烷基苯、烷基萘、甘油、甘油三乙酸酯、山梨糖醇、芳烃、脱芳化脂族化合物、烷基苯、烷基萘、酮如环己酮、2-庚酮、异佛尔酮和4-羟基-4-甲基-2-戊酮,乙酸酯如乙酸异戊酯、乙酸己酯、乙酸庚酯、乙酸辛酯、乙酸壬酯、乙酸十三酯和乙酸异冰片酯,其他酯如烷基化乳酸酯、二元酯、苯甲酸烷基酯和苯甲酸芳基酯及γ-丁内酯,以及可以是直链、支链、饱和或不饱和的醇,如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正己醇、2-乙基己醇、正辛醇、癸醇、异癸醇、异十八醇、鲸蜡醇、月桂醇、十三醇、油醇,环己醇、四氢糠醇、双丙酮醇、甲酚和苯甲醇。液体稀释剂还包括饱和及不饱和的脂肪酸(典型地为C6-C22)的甘油酯,如植物种油和果油(例如橄榄油、蓖麻油、亚麻籽油、芝麻油、玉米油(玉米油)、花生油、向日葵油、葡萄籽油、红花油、棉籽油、大豆油、菜籽油、椰子油和棕榈仁油)、动物来源的脂肪(例如,牛脂、猪脂、猪油、鱼肝油、鱼油)及其混合物。液体稀释剂还包括烷基化脂肪酸(例如,甲基化的、乙基化的、丁基化的),其中脂肪酸可以通过水解来自植物和动物来源的甘油酯获得,并且可以通过蒸馏纯化。典型的液体稀释剂描述于Marsden,Solvents Guide(溶剂使用指南),2nd Ed.,Interscience,New York,1950。

在一个特别的实施方案中,本发明提供了一种纤维组合物,其包含无纺纤维和有效量的至少一种如本文提供的化合物,所述化合物共价连接或稳定吸附到纤维上。

组合物或制剂典型地将含有有效量的如本文所述的化合物。“有效量”是指它们以允许获得所期望效果但不会对所处理的植物产生任何植物毒性症状的量使用。一个特别的实施方案使用本发明的化合物,其可以有利地以高达400μM、500μM、600μM、700μM、800μM、900μM、1000μM、1500μM或2000μM的浓度施用;或以在约0.1μM至约1500μM范围内的浓度施用,更具体在约0.1μM至约800μM,甚至更具体在约0.1μM至约500μM范围内的浓度施用;并且更特别地以至少或大约或自1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900至1000μM的浓度施用。特别地,所使用的量是非杀昆虫剂和非杀螨剂的。

本发明的化合物可以单独使用或已经彼此部分或完全混合以制备根据本发明的组合物。还可以将它们包装并进一步用作组合的组合物,如多部件套件。根据本发明的方法,根据本发明的化合物或组合物可以施用于土壤/植物(部分)/作物一次,或者可以以在每两次应用之间彼此间隔开(例如,间隔1周、2周、3周、4周……)应用两次、三次或更多次。

任何植物/作物都可以在任何发育阶段进行处理。术语“植物(或多种植物)”是术语“作物”的同义词,其应理解为具有经济重要性的植物和/或人工栽培的植物。本发明的方法、化合物和组合物可以应用于任何单子叶植物或双子叶植物,这取决于所需的病原体防治。根据本文的公开内容可以保护免受昆虫和/或螨害虫的植物包括作物植物。可以根据本文的公开内容保护的示例性作物植物包括例如玉米、棉花、大豆、谷类、花生、向日葵、干豆、番茄、豌豆、豆类蔬菜、甘蔗、水稻、苜蓿和油菜。可以用类似的方式保护观赏植物。

可以根据本文所述的化合物和方法保护的植物的非限制性实例包括单子叶植物作物如玉米、小麦、大麦、黑麦、甘蔗、水稻、高粱、燕麦;双子叶植物作物如棉花、甜菜、花生、马铃薯、甘薯、山药、向日葵、大豆、苜蓿、亚麻、油菜、葡萄、烟草;蔬菜,包括茄科蔬菜如茄子、番茄、青椒、胡椒;葫芦科蔬菜如黄瓜、南瓜、西葫芦、西瓜、冬瓜和笋瓜;十字花科蔬菜如萝卜、芜菁、辣根、大白菜、卷心菜、芥菜、西兰花和花椰菜;菊科蔬菜如朝鲜蓟和生菜;百合科蔬菜如韭葱、洋葱、大蒜和芦笋;伞形科蔬菜如胡萝卜、欧芹、芹菜和欧洲防风草;藜科蔬菜如菠菜和甜菜;唇形科蔬菜如薄荷和罗勒;花卉如矮牵牛、牵牛花、康乃馨、菊花和玫瑰;观叶植物;果树如仁果(例如,苹果、梨和日本梨)、核果(例如,桃、李(plum)、油桃、樱桃、杏和李子(prune))、柑橘(例如,橙、柠檬、酸橙和葡萄柚)、树坚果(例如,栗子、山核桃、胡桃、榛子、杏仁、开心果、腰果和澳洲坚果),浆果如蓝莓、蔓越莓、黑莓、草莓和覆盆子;柿子;橄榄;枇杷;香蕉;咖啡;棕榈;可可;其他树木如茶树、桑树、花树和山水树(例如,白蜡、桦树、山茱萸、桉树、银杏、丁香、枫树、橡树、杨树、台湾香胶、梧桐树、冷杉、铁杉、针刺松、松树、云杉和红豆杉);和草皮。

在一个特定的实施方案中,待处理的植物是具有由于昆虫和螨寄生所致的最大估计损失的这些作物,即玉米、棉花、葫芦、豆类蔬菜、花生、茄科蔬菜(例如番茄)、生菜、草莓、马铃薯、洋葱、小麦、大米、香蕉、树果(例如,苹果、柑橘)、咖啡、大豆、甘蔗、甜菜和烟草,更特别地是茄科蔬菜(例如,番茄、马铃薯、茄子、辣椒籽和辣椒粉)和小麦。在一个实施方案中,待根据本文提供的方法处理的植物是番茄、小麦、棉花和胡椒。

在本发明的另一个实施方案中,将化合物或包含该化合物的组合物直接或间接施用于植物。可以处理或使用任何合适的植物部分,包括植物器官(例如,叶、茎、根等)、种子和植物细胞及其后代。备选地,可以将化合物或组合物施用于植物周围的土壤。化合物的施用在种植前、种植时或种植后。在一个实施方案中,接触包括直接施用于植物。植物的全部或部分,包括但不限于叶、茎、种子、根、繁殖体(例如插枝)、果实等,可以与一种或多种本文所述的化合物接触。接触也可以经由施加到例如土壤或其他植物基质而间接地进行。

合适的应用方法包括高压或低压喷雾、浸渍、雾化、发泡、起雾、包衣和包壳。本领域技术人员可以设想其他合适的应用程序。在一个特别的实施方案中,本发明的化合物通过喷洒例如通过使用(机械)喷雾器而施用于植物的地上部分或施用于植物的叶片。喷雾器将与液体载体如水或肥料混合的本发明制剂转化成液滴。液滴可以为任何大小。悬臂式喷雾器和鼓风喷雾器也可用于将本发明的制剂施用于发芽前或发芽后的作物。鼓风喷雾器将与液体载体混合的本发明制剂注入快速移动的气流中。悬臂式喷雾器、航空喷雾器、超低容量喷雾器、滴灌、喷灌和起雾器也可用于施用本发明的制剂。在本发明的制剂为固体、粉末或颗粒形式的情况下,它们可以用颗粒或粉剂施用设备施用。本发明的制剂还可以作为熏蒸剂施用于土壤、植物培养基、植物、植物组织或种子。

应用可以是单次应用或重复应用,例如两次、三次、四次或更多次,例如以每周、每两周、每三周或每月为间隔。

在另一个实施方案中,植物的种子用本发明的化合物包衣(“包衣种子”)。可以使用技术人员已知的任何合适的种子包衣方法。例如。可以以多种方式用本发明的化合物处理种子,这包括但不限于,经由喷雾或滴落、浸透或团粒施用。喷雾和滴落处理可以例如通过将有效量的化合物配制在农学上可接受的载体中,典型地是水性的载体,并经由连续处理系统将组合物喷雾或滴落到种子上(所述系统经过校准从而以与种子的连续流动成比例的预定速率施加处理),如滚筒式处理器。这样的方法包括可以有利地使用相对小体积的载体以允许相对快速地干燥处理过的种子的那些方法。可以有效地处理大量种子。也可以采用批量系统,其中将预定的分批尺寸的种子和信号分子组成递送到混合器中。用于执行这些过程的系统和设备可从众多供应商处购得。本发明还提供了一种用一种或多种本发明的化合物/组合物包衣的种子。

在另一方面,可以将化合物或组合物直接施用于土壤,例如通过浸透应用(土壤浸渍剂)。土壤浸渍剂将化合物(任选地与水混合)应用于植物基部周围的土壤,以便其根部可以吸收化合物。

在一个特定的实施方案中,本发明的化合物可以单独地、与其他化合物组合或混合的方式施用于如本文提供的植物。合适的其他化合物包括有效量的其他农业或园艺化学品,如除草剂、杀昆虫剂、杀线虫剂、杀软体动物剂、杀细菌剂、杀螨剂、杀真菌剂和/或植物生长调节剂或肥料。

在又一个实施方案中,本发明提供了一种用于制造(或“生产”,其是等价词)根据本发明的(农业化学)组合物的方法,包括配制本发明的化合物,特别是如本文前面所定义的式I、Ie、II、III或IV的分子(包括表1的任何子组和化合物),连同至少一种常规的农业化学助剂。合适的制造方法在本领域是已知的,并且包括但不限于高或低剪切混合、湿磨或干磨、滴注、包封、乳化、包衣、包壳、制粒、挤出造粒、流化床造粒、共挤出、喷雾干燥、喷雾冷却、雾化、加聚或缩聚、界面聚合、原位聚合、凝聚、喷雾封装、冷却熔融分散、溶剂蒸发、相分离、溶剂萃取、溶胶-凝胶聚合、流化床包衣、锅包衣、熔化、被动或主动吸收或吸附。常规农业化学助剂在本领域是公知的,并且包括但不限于水性或有机溶剂、缓冲剂、酸化剂、表面活性剂、润湿剂、铺展剂、增粘剂、粘合剂、载体、填料、增稠剂、乳化剂、分散剂、螯合剂、抗沉降剂、聚结剂、流变改性剂、消泡剂、光保护剂、防冻剂、杀生物剂、渗透剂、矿物油或植物油、颜料和漂移控制剂或其任何合适的组合。

下面列出了以下实施例以举例说明根据所公开主题的方法、组合物和结果。这些实施例并不意图包括本文公开的主题的所有方面,而是为了说明代表性的方法、组合物和结果。这些实施例并不意图排除本发明的等同物和变体,其对于本领域技术人员来说是显而易见的。

实施例

材料和方法

植物材料

番茄(Solanum lycopersicum)

番茄(cv.Moneymaker)种子获自Vreeken’s Zaden(Dordrecht,theNetherlands)。种子在22℃的盆栽土上发芽;然后将幼苗转移到填充有盆栽土的单个盆中,并放置在24℃的生长室中,该生长室每天有16小时的荧光灯照射。

小麦(Triticum aestivum)

冬小麦(cv.Sahara)种子获自Aveve Agrarisch(Landen,Belgium)。种子用10%乙醇溶液洗涤以去除残留的痕量杀菌剂,然后在室温下在湿纸上发芽。将幼苗转移到盆栽土中,并放置在22℃且每天有16小时的荧光灯照射的的生长室中。

棉花(Gossypium hirsutum)

棉花种子在填充有盆栽土的单个盆中发芽,并放置在具有补充照明(每天16小时光照)的温室中。

胡椒(Capsicum annuum)

播种后两周,将胡椒幼苗(cv.Cayenne long slim)转移到带有盆栽土的单个盆中。植物在生长室(25℃,16∶8 L:D)中再保持两周。在蓟马侵染开始时(4周龄),将植物从土壤中取出并使其根置于水中(以适应Plexiglas笼系统)。

化学品

通过将胡椒基酸(Sigma-Aldrich,Saint-Louis,USA)溶解在DMSO(DuchefaBiochemie,Haarlem,the Netherlands)中来制备100mM的胡椒基酸储液。在使用前,将此储液用蒸馏水稀释至300μM的浓度,并与0.1v/v%Tween 20混合。以类似的方式由300mM储液制备1000μM PA的工作溶液(Aculops实验)。使用雾化器将所得喷雾溶液施用于植物直至流出。作为对照,以相同方式使用由等量的DMSO和吐温20组成的溶液。在接种前一天和八天对植物喷洒两次。用于叶螨实验的番茄植物在接种后五天最后一次喷洒,但仅喷洒在未接种的叶子上以避免喷洒对螨的直接影响。

螨和昆虫实验

二斑叶螨(Tetranychus urticae)

二斑叶螨(T.urticae)螨(品系:London;在番茄上生长了几代)在24℃的生长室中在番茄植物上饲养。

通过在每株植物的第二片叶子上放置十只成年雌虫,对处于早期四叶阶段的番茄植物接种二斑叶螨。然后将接种的植物置于在24℃且每天有16小时的荧光灯照射的培养箱中。小心以避免叶子相互接触从而避免植物之间的移动。在十天后,将第二片叶子摘下,使用数码相机成像并放置在双目显微镜下。对叶子上存在的所有移动的螨进行计数(无论生命阶段如何)。

禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)

在第一个实验中,禾谷缢管蚜(R.padi)蚜虫在室温生长的大麦植物上饲养。通过在每个小麦幼苗上放置一只成年无翅雌虫,将各自容纳有五株约两周龄的小麦幼苗的盆用禾谷缢管蚜接种。然后将每个盆放在一个单独的plexiglass圆筒中,该圆筒用网纱覆盖以防止蚜虫在植物之间移动,然后移到22℃且每天有16小时的荧光灯照射的培养箱中。在二十四小时后,记录每个盆上剩余的成虫的数量。在十天后,对每个盆中的蚜虫数量进行计数。通过将在十天后计数的蚜虫数量除以在接种后二十四小时剩余的成年雌虫数量来计算繁殖因子。

在第二个实验中,禾谷缢管蚜蚜虫在室温下生长的大麦植物上饲养。然后通过在水琼脂中保存一周的摘下的小麦叶子上挑取最近孵化的个体来同步蚜虫。三只同步的成年雌虫各自被放置在容纳有五株大约两周龄的小麦幼苗的盆中,这些幼苗放置在单独的plexiglass圆筒中,该圆筒用网纱覆盖以防止蚜虫在植物之间移动。将植物保持在24℃且每天有16小时的荧光灯照射的生长室中。在二十四小时后,记录每个盆上剩余的成虫数量。在十天后,对每个盆中的蚜虫数量进行计数。通过将在十天后计数的蚜虫数量除以在接种后二十四小时剩余的成年雌虫数量来计算繁殖因子。

烟粉虱(Bemisia tabaci)

烟粉虱(生物型Q)在受控实验室条件下在棉花植物上饲养。收集了大约六十只混合性别的成虫,并将它们放入与两周龄的棉花植物的叶子连接的通风小瓶中。在允许排卵24小时后,取出成虫。在产卵后八天,摘下叶子并记录每株植物未孵化的卵、爬虫和若虫的数量。

番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)

将番茄刺皮瘿螨(A.lycopersici)在27℃、50%RH和16∶8 L:D的培养箱中在番茄植株上饲养。为了接种PA处理过的(300μM或1000μM)或对照植物,用细刷将30只螨转移到小叶盘(1cm)上,然后将其放置在植物顶部上。在十天期间使螨在番茄植物上繁殖,之后对螨的总数进行比较。

西方花蓟马(Frankliniella occidentalis)

将西方花蓟马(F.occidentalis)在28℃、70%RH和16∶8 L∶D的培养箱中在豆荚上饲养。为了接种PA处理的(300μM)植物或对照植物,用细刷将10只雌虫(自成年后两天龄)转移到Plexiglas笼内的胡椒植物上。在四天后,所有雌虫都被移除,而在三天后对它们的后代进行计数。

极性毒性的评价

贪夜蛾(Spodoptera exigua)-将贪夜蛾(S.exigua)在24℃培养箱中在人工饲料上饲养。将最近蜕皮的L3幼虫放置在容纳有棉纸和2g人工饲料颗粒的培养皿中。棉纸和颗粒都用10ml的蒸馏水或含有300μM PA的蒸馏水润湿。在二十四和七十二小时后,对存活的毛虫数量进行计数。如果毛虫主动移动,或者如在轻轻刺激时移动,则认为毛虫还活着。还记录毛虫是否正在进食(存在于饲料颗粒上)以测量PA处理的饲料颗粒是否对毛虫具有排斥性。

二斑叶螨(Tetranychus urticae)收集实验室参考品系的叶螨并将其放置在由方形豆叶盘组成的圆台上,放置在湿棉绒上并衬有纸巾。每个圆台接收25到30只成年雌性螨。然后将圆台用300μM PA或对照溶液在定制搭建的喷雾塔中喷洒,各自重复6次。螨在25℃、18∶6 L:D下饲养。在24h后对死亡率进行评分。螨被评分为淹死(在水屏障中)、活着或死亡(在用小刷子刺激后10秒内不移动其自己的身体长度)。

番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)-从实验室培养物中收集番茄赤褐色螨,并将其转移到置于琼脂上的番茄叶盘上。每个圆盘接收25到30只成虫。然后将带有螨的圆盘用300μM PA或对照溶液在定制搭建的喷雾塔中喷洒,各自重复六次。将赤褐色螨在25℃、18∶6 L:D下饲养。在24h后对死亡率评分为丢失(在琼脂屏障中)、活着或死亡。

温室实验

将水稻种子(cv.Kitaake)消毒并在湿纸上于30℃在黑暗中发芽。将幼苗转移到经过消毒的盆栽土中,并放置在根特大学温室综合体(Melle,Belgium)的气候控制隔间中。已知隔间是自然螨侵扰的宿主;之前根特大学农业动物学实验室的Thomas van Leeuwen教授已将该致病螨鉴定为狭跗线螨(Steneotarsonemus spinki)。将盆以完全随机的方式布置在相同托盘中。

数据分析

所有统计分析均在R(v.3.5.0)中进行。使用ggplot2来创建统计图。对于二斑叶螨(T.urticae)实验,使用准泊松(quasipoisson)模型来比较螨的数量,而使用高斯(gaussian)模型来分析病变区域。使用高斯模型分析每盆蚜虫的数量。最后,使用在lme4包中实现的一般线性混合模型来分析贪夜蛾的体重增加,其中幼虫的重量作为自变量,处理(PA或对照)作为因变量,并且宿主番茄植物作为随机效应。在所有情况下,使用诊断图来验证模型假设。

使用ImageJ软件来分析被贪夜蛾损害的番茄叶片的图像。对于二斑叶螨损害,使用多边形选择工具来对每株植物的第二片叶子的总面积进行定量。然后,以相同的方式测量叶片上褪绿斑块的总面积,并计算两个值的比率以获得叶片褪绿的百分比。

结果

实施例1:在番茄(Solanum lycopersicum cv.Moneymaker)上的二斑叶螨(Tetranychus urticae)繁殖的减少

在此实验中,证实了含有胡椒基酸(PA)的叶面喷洒抢占防治番茄中的二斑叶螨(Tetranychus urticae)的能力。

实验的结果总结在图1中。用胡椒基酸的处理降低了可看见的褪绿叶面积的百分比(-62%,p=0.0021)以及在叶子上存在的螨的数量(-49%,p=0.0041)。此外,每片叶子的螨数量与褪绿叶面积呈高度显著的线性相关性(Pearson相关系数:0.895;p<0.0001)。

这些数据显示,PA处理降低了二斑叶螨个体在番茄植物上的繁殖力,并且因此减少了二斑叶螨个体的数量。二斑叶螨数量的减少也导致褪绿叶面积相应减少,并且因此减少对宿主植物的损害。

实施例2:在小麦(Triticum aestivum cv.Sahara)上的禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi)繁殖的减少

在此实验中,证实了含有胡椒基酸(PA)的叶面喷洒能够抢占防治小麦中的鸟樱桃-燕麦蚜虫禾谷缢管蚜。

实验结果总结在图2(第一个实验)和图3(第二个实验)中。在第一个和第二个实验中,用胡椒基酸处理显著降低了禾谷缢管蚜在小麦上的繁殖因子(分别为-32%,p=0.0275和-29%,p=0.0407)。

实施例3:在用C4H抑制剂处理的棉花上的烟粉虱(Bemisia tabaci)的抑制。

在此实验中,证实了含有胡椒基酸(PA)的叶面喷雾能够抢占防治棉花中的烟粉虱(Bemisia tabaci)。

实验结果总结在图4中。用胡椒基酸处理不影响在棉花植物上的产卵数(p=0.3810),但确实显著抑制了卵孵化并减缓了从爬虫(第一龄)到若虫(第二龄)的发育。在对照处理的植物中,在八天后3%的卵没有孵化;在PA处理的植物中,20%的卵未能孵化(p=0.0009)。在对照植物上产的所有卵中,16%已经发育成若虫,而在PA处理的植物上显著更少的9%发育成若虫(p=0.02731)。

实施例4:用C4H抑制剂处理提高水稻(Oryza sativa cv.Kitaake)在穗稻螨(Steneotarsonemus spinki)胁迫下的产量

为了测定在螨存在下C4H抑制对产量和繁殖力的影响,将水稻(Oryza sativacv.Kitaake)在温室中生长直至成熟,并且每隔两周用对照或300μM PA叶面喷雾进行处理。这个温室自然感染了穗稻螨(Steneotarsonemus spinki)。

在出苗三个月后,PA处理的水稻植物发育出更多的分蘖和更少的空穗,这导致种子数量显著增加(+104%,p<0.0001)。此外,来自PA处理植物的种子显示在湿纸上7天后的更高发芽率(+45%,p=0.0253),这表明种子质量更高。这些数据显示,PA处理提高了在节肢动物胁迫下的植物产量和繁殖力。

实施例5:PA处理降低了番茄刺皮瘿螨(Aculops lycopersici)的种群生长

与对照植物相比,当螨在用300或1000μM PA处理的番茄植物上喂养时,观察到赤褐色螨种群生长减少的强烈趋势。对于两种浓度都观察到约50%的减少(图5)。然而,由于高度可变性,这种减少并不是显著的(Mann-Whitney U检验;分别为p=0.052和0.089)。

实施例6:PA处理降低了西方花蓟马(Frankliniella occidentalis)的种群生长

用PA处理胡椒植物显著降低在用10只成虫的四天侵染期后三天计数的后代数量(Kruskal Wallis检验;p=0.018),因为从对照植物中回收的幼虫数量几乎是从PA处理过的植物中回收的幼虫数量的两倍(分别为19.0±1.84和11.33±1.82个幼虫(平均值±SE);图6)。

实施例7:C4H抑制剂胡椒基酸对节肢动物害虫不是直接毒性的

贪夜蛾(S.exigua)-胡椒基酸(PA)的直接毒性是使用在材料和方法部分中概述的方案来确定的。简而言之,将30只最近蜕皮的L3幼虫放在培养皿中,每个培养皿中都容纳有已用300μM胡椒基酸溶液或水对照润湿的棉纸和食物颗粒。

在二十四小时后,30只L3幼虫中的29只在对照培养皿中存活,并且30只中的28只在PA处理过的培养皿中存活。在七十二小时后,对照中有29只幼虫存活,并且PA处理的培养皿中有27只幼虫存活。因此,在两组之间的存活率相同(p=0.6111)。

二斑叶螨(T.urticae)-PA对二斑叶螨的直接毒性是通过用300μM PA或对照溶液喷雾在叶盘上的螨来评价的。在24h后未观察到在二斑叶螨死亡率方面的显著差异(Fisher检验;p=1)。

番茄刺皮瘿螨(A.lycopersici)-PA对赤褐色螨的直接毒性是通过用300μM PA或对照溶液喷雾在叶盘上的螨来评价的。在24h后未观察到在赤褐色螨死亡率方面的显著差异(Fisher检验;p=0.20)。

参考文献

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