一种玫瑰茄发酵产物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，特别涉及一种玫瑰茄发酵产物及其制备方法和应用。

背景技术

玫瑰茄(学名：HibiscussabdariffaLinn.)是锦葵科木槿属植物，又名洛神花、洛花神、烙花神、烙神花等。原产东半球热带地，全球热带地区均有栽培，在中国台湾地区、福建、广东和云南南部等地也有栽培。玫瑰茄的花紫红色，色泽艳丽，花冠与花尊美丽别致，是美化环境极好的观赏植物。玫瑰茄花是药食两用植物，被广泛用来制作茶剂、饮料、果汁等大宗消费品。现代皮肤学研究表明，玫瑰茄花成分含有丰富的蛋白质、多糖、有机酸、维生素、多种氨基酸、大量的天然色素及多种矿物质等。玫瑰茄的花萼味酸、性寒，具有清热解暑、生津止渴、降压减脂、解酒、养颜美容、清除自由基等作用。玫瑰茄在食品、化妆品及医药等行业中应用广泛，因而研究和开发利用玫瑰茄有着良好的应用价值和发展前景，对于护理化妆品技术的发展以及提高人们的生活水平具有重要意义。目前，玫瑰茄发酵产物在化妆品中的应用存在一些美白效果不佳，刺激性较强等问题。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种玫瑰茄发酵产物及其制备方法和应用，玫瑰茄发酵产物能增强皮肤弹性，具有良好的抑制酪氨酸酶活力、较强的清除自由基能力以及抑制黑色素细胞中黑色素的合成。

本发明的发明构思在于：中药发酵技术是利用微生物的生长代谢过程所产生的代谢物(酶和有机酸等)，对外源性药物进行结构的修饰和转化。在中药发酵过程中加入多种有益菌种，多种菌种共同发酵存在既竞争又相互依存的关系，在竞争营养物质的同时，也会给对方制造对方所需的物质。本发明采用酵母菌和乳酸菌复配进行发酵，在发酵过程中乳酸菌的代谢产物可以为酵母菌提供能量来源，酵母菌为乳酸菌提供氨基酸、维生素、丙酮酸盐等物质。获得的发酵产物不仅能保留玫瑰茄花本身的有效成分，而且还含有微生物产生新的次级代谢产物，增加有效活性成分，减少药物的毒副作用，降低刺激性，增强了发酵产物的抑制酪氨酸酶活力、清除自由基能力以及抑制黑色素细胞中黑色素的功效。中药发酵技术将传统的中药理论和现代生物工程技术有机结合，强化中药资源的有效利用，非常值得深入研究。

本发明的第一方面提供一种玫瑰茄发酵产物的制备方法，包括如下步骤：

1)提取：将玫瑰茄和溶剂混合，进行高压均质提取，得到玫瑰茄提取液；

2)发酵：向玫瑰茄提取液中加入培养基，再接种混合菌液进行发酵反应，然后进行灭菌，离心，收集上清液，得到所述玫瑰茄发酵产物；所述混合菌液包括酵母菌和乳酸菌。

优选地，所述玫瑰茄选用玫瑰茄花。

本发明通过对玫瑰茄花进行高压均质提取得到玫瑰茄花提取液之后，采用酵母菌和乳酸菌在共生条件下存在既竞争又相互依存的关系，在竞争营养物质的同时也会给对方制造对方所需的物质，对玫瑰茄花提取液进行发酵，从而获得一种能增强皮肤弹性，具有良好的抑制酪氨酸酶活力、较强的清除自由基能力以及抑制黑色素细胞中黑色素合成的能力的玫瑰茄花发酵产物，将本发明玫瑰茄花发酵产物添加至化妆品中可以达到保湿、美白和抗衰老功效，在化妆品领域具有广泛的应用前景。

优选地，所述提取的具体过程为：

将玫瑰茄花干花进行粉碎，过80-200目筛，得到玫瑰茄花粉末，将所述玫瑰茄花粉末和体积浓度为10-95％的乙醇溶液，按照质量比为1:(2-20)进行混合，在压强为10-30Mpa下进行高压均质提取5-30min，过滤，减压浓缩，得到玫瑰茄花提取液。

需要说明的是，80-200目筛可以是80目、90目、100目、110目、120目、130目、140目、150目、160目、170目、180目、190目、200目；体积浓度为10-95％的乙醇溶液，可以是10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％；质量比为1：(2-20)，可以是1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、 1:17、1:18、1:19、1:20；10-30Mpa可以是10MPa、12MPa、14MPa、16MPa、18MPa、20MPa、 22MPa、24MPa、26MPa、28MPa、30MPa；5-30min可以是5min、8min、10min、12min、14min、 15min、17min、19min、21min、23min、25min、27min、29min、30min。

优选地，所述玫瑰茄提取液、混合菌液和培养基的投量比为(1-100)mL:(1-5)mL:(0.1-5)g，包括但不限于20mL:1mL:2g、30mL:3mL:3g或80mL:4mL:4g。更优选地，所述玫瑰茄提取液、混合菌液和培养基的投量比为(1-30)mL:(1-5)mL:(1-5)g。

优选地，所述培养基为MRS肉汤培养基。

优选地，所述酵母菌包括酿酒酵母、乳酸克鲁维酵母中的至少一种；所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、植物乳杆菌中的至少一种。更优选地，所述酿酒酵母为酿酒酵母ATCC9763，所述乳酸克鲁维酵母为乳酸克鲁维酵母ATCC10689；所述乳酸乳球菌为乳酸乳球菌ATCC13675，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌ATCC8014。

优选地，所述混合菌液包括0.1-5mL的所述酵母菌和0.1-5mL的所述乳酸菌，包括但不限于0.5mL、1mL、2mL、3mL、4mL的所述酵母菌和0.5mL、1mL、2mL、3mL、4mL的所述乳酸菌。所述混合菌液的浓度为10

优选地，所述发酵反应的温度为25-40℃，包括但不限于28℃、30℃、32℃、34℃、36℃或38℃，更优选地，所述发酵反应的温度为28-35℃。所述发酵反应的pH值为3-7，包括但不限于4、5、6，更优选地，所述发酵反应的pH值为4-6。所述发酵反应的时间为36-120h，包括但不限于42h、48h、64h、70h、96h、102h、108h或114h，更优选地，所述发酵反应的时间为36-96h。

优选地，所述发酵反应通过摇床发酵的方式进行发酵，摇床发酵的转速为 150-200rpm/min，包括但不限于160rpm/min、170rpm/min、180rpm/min、190rpm/min、 200rpm/min。

优选地，所述灭菌的温度为100-121℃，包括但不限于105℃、110℃、115℃或120℃，更优选地，所述灭菌的温度为115-121℃。所述灭菌的时间为20-30min，包括但不限于22min、 24min、26min或28min。

优选地，所述离心的离心半径为6-15cm，包括但不限于7cm、8cm、9cm、12cm、13cm或14cm，更优选地，所述离心的离心半径为8-12cm，最优先地，所述离心的离心半径为 8-11cm。所述离心的时间为10-30min，包括但不限于12min、14min、16min、18min、24min、26min或28min，更优选地，所述离心的时间为10～20min。所述离心的转速为3000-4700rpm，包括但不限于3200rpm、3400rpm、3600rpm、3800rpm、4200rpm、4400rpm或4600rpm，更优选地，所述离心的转速为3500-4700rpm。

本发明的第二方面提供一种玫瑰茄发酵产物，所述玫瑰茄发酵产物采用本发明所述的制备方法制备而成。

本发明的第三方面提供所述的玫瑰茄发酵产物在化妆品中的应用。

优选地，一种化妆品，包括本发明所述的玫瑰茄发酵产物。

优选地，所述化妆品包括面膜、乳液、护肤霜、柔肤水、精华液、补水霜、化妆水或BB霜。

优选地，一种护肤霜，包括本发明所述的玫瑰茄发酵产物和辅料。

优选地，所述辅料包括保湿剂、润肤剂、乳化剂、抗氧化剂、香精中的至少一种。

相对于现有技术，本发明的有益效果如下：

(1)本发明通过对玫瑰茄花进行高压均质提取，提高玫瑰茄花的有效成分的提取率，同时将酵母菌和乳酸菌复配进行发酵，对玫瑰茄花进行结构的修饰和转化，充分利用微生物的生长代谢的优点，代谢产生更多的小分子多糖、有机酸等多种活性成分，制备的玫瑰茄花发酵产物不仅能保留玫瑰茄花本身的有效成分，而且还含有微生物产生新的次级代谢产物，能够增加有效活性成分，减少玫瑰茄花可能产生的毒副作用，降低玫瑰茄花发酵产物的刺激性，使得玫瑰茄花发酵产物具有增强皮肤弹性，良好的抑制酪氨酸酶活力、较强的清除自由基能力以及抑制黑色素细胞中黑色素合成的功效。

(2)本发明制备的玫瑰茄花发酵产物，对超氧阴离子自由基的清除率在73％以上，对羟自由基的清除率在82％以上，对酪氨酸酶的抑制率在86％以上，对黑色素合成抑制率在75％以上，将其添加至化妆品中，可达到保湿、美白和抗衰老的功效，具有广泛的应用前景。

具体实施方式

为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。

以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。

实施例1

一种玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛100目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入1000g的体积浓度为50％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:10)，在压强为20Mpa下进行高压均质提取30min，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将20mL玫瑰茄花提取液、2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

实施例2

一种玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛150目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入500g的体积浓度为70％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:5)，在压强为10Mpa下进行高压均质提取30min，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将100mL玫瑰茄花提取液、5mL混合菌液(2.5mL酿酒酵母和2.5mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

实施例3

一种玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛100目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入1000g的体积浓度为50％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:10)，在压强为30Mpa下进行高压均质提取10min，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将10mL玫瑰茄花提取液、1mL混合菌液(0.5mL乳酸克鲁维酵母和0.5mL植物乳杆菌，菌液的浓度均为10

实施例4

一种玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛100目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入1000g的体积浓度为50％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:10)，在压强为20Mpa下进行高压均质提取30min，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将20mL玫瑰茄花提取液、2mL混合菌液(1mL酿酒酵母、0.5mL乳酸乳球菌和0.5mL 植物乳杆菌，菌液的浓度均为10

实施例5

一种玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛100目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入1000g的体积浓度为50％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:10)，在压强为20Mpa下进行高压均质提取30min，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将20mL玫瑰茄花提取液、2mL混合菌液(0.5mL酿酒酵母、0.5mL乳酸克鲁维酵母、 0.5mL乳酸乳球菌和0.5mL植物乳杆菌，菌液的浓度均为10

对比例1

与实施例1相比，对比例1将步骤(2)中的2mL混合菌液替换成2mL去离子水，其他条件与实施例1相同。

对比例2

与实施例1相比，对比例2将步骤(2)中的2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

对比例3

与实施例1相比，对比例3将步骤(2)中的2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

对比例4

与实施例1相比，对比例4将步骤(2)中的2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

对比例5

与实施例1相比，对比例5将步骤(2)中的2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

对比例6

与实施例1相比，对比例6将步骤(2)中的2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

对比例7

与实施例1相比，对比例7中没有对玫瑰茄花干花进行高压均质提取，而是采用常规的加热回流提取。

本对比例玫瑰茄花发酵产物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取100g玫瑰茄花干花进行粉碎，过筛100目，得到玫瑰茄花粉末，将玫瑰茄花粉末加入1000g的体积浓度为50％的乙醇溶液中(即粉末和溶剂的质量比为1:10)，加热回流提取，膜过滤，之后在60℃下减压浓缩除去乙醇，继续浓缩至100mL，得到玫瑰茄花提取液；

(2)将20mL玫瑰茄花提取液、2mL混合菌液(1mL酿酒酵母和1mL乳酸乳球菌，菌液的浓度均为10

试验例1

将实施例1-5和对比例1-7制得的产品溶于水中，配成浓度为1％的样品溶液，进行下面试验：

(1)超氧阴离子自由基清除能力评价试验

取0.05mol/L，pH＝8.2的Tris-HCl缓冲溶液4.5mL，于25℃水浴锅中预热30min。再加入1mL样品溶液和0.4mL，25mol/L的邻苯三酚溶液，混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入1mL，8mol/L的HCl终止反应。以Tris-HCl缓冲溶液作参比，在299nm处测吸光度值。空白对照组用1mL样品溶液的溶剂来替代样品溶液。

超氧阴离子自由基清除率的计算公式如下所示：

超氧阴离子自由基清除率(％)＝[1-(A

其中，A

(2)羟自由基清除能力评价试验

在25mL比色皿中依次加入3mL，2mmol/L的FeSO

羟自由基清除率的计算公式如下所示：

羟自由基清除率(％)＝[A

其中，A

(3)抑制酪氨酸酶活力效果评价试验

按表1准确吸取样品溶液、pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液(PBS)和质量分数为0.1％的多巴溶液，充分混合，于30℃孵育5min后，加入活度为110U/mL的酪氨酸酶溶液，再在30℃下孵育10min，迅速转移至比色皿中，在475nm处测吸光度。表1为各反应液成分具体组成。

表1

计算样品对酪氨酸酶的相对抑制率(％)公式如下所示：

其中，A

(4)抑制黑色素细胞中黑色素合成的能力试验

将B16黑色素瘤细胞以1×10

将培养板置于孵箱中孵育72小时后，弃去上清液，PBS(磷酸缓冲盐溶液)洗涤两遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min，每孔加入2mL维持液终止消化。混匀后，每种浓度取出0.5mL做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min离心分离5min，弃去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解，选择490nm波长在酶联免疫检测仪下测定吸光度值。

计算样品对黑色素合成抑制率(％)公式如下所示：

其中，A

实施例1-5对比例1-7的制备的样品的超氧阴离子自由基清除率、羟自由基清除率、对酪氨酸酶的相对抑制率以及对黑色素合成抑制率的测试结果见表2。

表2

根据表2中的试验结果可知，本发明实施例1-5制得的玫瑰茄花发酵产物，对超氧阴离子自由基的清除率在73％以上，对羟自由基的清除率在82％以上，对酪氨酸酶的抑制率在86％以上，对黑色素合成抑制率在75％以上。对比例1未采用本发明的混合菌液进行发酵，对比例2-5采用单一菌液进行发酵，对比例6未采用本发明特定的混合菌液(酵母菌和乳酸菌) 进行发酵，对比例7未采用高压均质提取，对比例1-7制得的玫瑰茄花发酵产物的效果均明显低于实施例1-5制得的产品的效果，表明本发明通过对玫瑰茄花进行高压均质提取，能够提高玫瑰茄花的有效成分的提取率，同时将酵母菌和乳酸菌复配对玫瑰茄花进行发酵，制备的玫瑰茄花发酵产物不仅能保留玫瑰茄花本身的有效成分，而且还含有微生物产生新的次级代谢产物，能够增加有效活性成分，提升了玫瑰茄花发酵产物的功效。

试验例2

红细胞溶血实验

红细胞溶血实验是兔眼刺激性实验的替代方法之一，基本原理是通过测定血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤，国际上主要将红细胞溶血实验用于评价化妆品及原料等化学品的眼刺激性研究。

采用兔红细胞溶血实验评价刺激性。具体操作如下：分别取实施例1-5和对比例1-7的制备的产品500μL置于2mL离心管中，再分别加入2％兔红细胞(市售)悬液500μL，轻摇混匀，置于37℃恒温培养箱中温育3h后，2000r/min离心3min，吸取上清液，以生理盐水为阴性对照，以蒸馏水为阳性对照，在波长414nm处测定吸光值。结果分析溶血测定中溶血率按下式计算。

溶血率＝(A－C)/(B－C)×100％

其中，A为各浓度样品在410nm处的平均吸光度，B为阳性对照在414nm处的平均吸光度，C为阴性对照在414nm处的的平均吸光度。

实施例1-5和对比例1-7的制备的产品的溶血率的结果如表3所示。

表3

根据表3中的试验结果可知，本发明实施例1-5制得的玫瑰茄花发酵产物，溶血率在5％以下。对比例1未采用本发明的混合菌液进行发酵，对比例2-5采用单一菌液进行发酵，对比例6未采用本发明特定的混合菌液(酵母菌和乳酸菌)进行发酵，对比例7未采用高压均质提取，对比例1-7制得的玫瑰茄花发酵产物的溶血率均明显高于实施例1-5制得的产品的效果，表明本发明通过对玫瑰茄花进行高压均质提取，能够提高玫瑰茄花的有效成分的提取率，同时将酵母菌和乳酸菌复配对玫瑰茄花进行发酵，由于经过酵母菌和乳酸菌进行结构的修饰和转化，获得的发酵产物可显著降低玫瑰茄花的刺激性，减少毒副作用。

应用实施例1

本应用实施例提供一种含有玫瑰茄花发酵产物的护肤霜，其配方由表4所示质量分数的组分组成(即表中数字代表质量分数，例如5.00代表5.00％)。

表4

本应用实施例护肤霜的制备方法，包括以下步骤：

将A组分各成分在80℃溶解混合均匀，B组分各成分在80℃溶解混合均匀，环聚二甲基硅氧烷乳化前加入B组分，乳化时B组分加入A组分并均质5分钟，降温至50℃时加入C组分并均质2分钟，陈化24h后包装，即可。

应用实施例2

与应用实施例1的区别在于，应用实施例2将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为实施例2制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用实施例3

与应用实施例1的区别在于，应用实施例3将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为实施例3制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用实施例4

与应用实施例1的区别在于，应用实施例4将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为实施例4制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用实施例5

与应用实施例1的区别在于，应用实施例5将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为实施例5制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例1

与应用实施例1的区别在于，应用对比例1将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例1制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例2

与应用实施例1的区别在于，应用对比例2将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例2制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例3

与应用实施例1的区别在于，应用对比例3将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例3制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例4

与应用实施例1的区别在于，应用对比例4将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例4制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例5

与应用实施例1的区别在于，应用对比例5将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例5制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例6

与应用实施例1的区别在于，应用对比例6将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例6制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

应用对比例7

与应用实施例1的区别在于，应用对比例7将B相中的实施例1制备的玫瑰茄花发酵产物替换为对比例7制备的玫瑰茄花发酵产物，其他组分及制备方法不变。

试验例3

保湿效果评价

皮肤水分含量及皮肤水分流失(TEWL)试验：选取应用实施例1-5和应用对比例1-7制得的护肤霜来进行皮肤水分含量及皮肤水分流失(TEWL)试验，水分测试采用的是世界公认的

测试方法具体为：

选取干性肌肤人群(刺痛感累计≥3分者)360名，年龄在20-45岁，男女各半。随机分成 12组，每组15名男性、15名女性。受试部位前15天不能使用任何产品(化妆品、外用药品、内服保健品)。试验前，要求受试者清洗颜面部并在清洗后2h进入气候控制室(22±1℃，相对湿度50％)静坐20min以上，并保持放松状态。

试验中按随机表进行半边脸测试，选取志愿者的左右鼻唇沟部分进行皮肤水分含量(％) 及水分流失(TEWL)(％)测试，取3个值的平均值作为左右鼻唇沟水分含量数据(d0)及鼻唇沟皮肤水分流失(TEWL)的数据(d0)。测试结束后，志愿者需按要求使用，一侧脸涂抹实施例产品，另一侧脸涂抹对比例产品。连续使用28天，并要求试验者在试验的第14天(d14)及第 28天(d28)进行回访。试验结果如表5所示。

表5

根据表5试验结果可知，应用实施例1-5制得的护肤霜相较于应用对比例1-7对皮肤具有明显的增加皮肤角质层的水分含量，减少皮肤对外的水分流失，具有良好的保湿效果。表明将本发明制得的玫瑰茄花发酵产物应用到化妆品中，保湿效果明显比将对比例1-7制得的产品应用到化妆品中的保湿效果好，说明本发明制得的玫瑰茄花发酵产物由于经过多种益生菌发酵，产生更多的小分子多糖等有效活性成分，增强了保湿的功效，保湿增效作用显著。

试验例4

皮肤弹性试验

评价方法：采用德国CK公司皮肤弹性测试仪MPA580，选取应用实施例1-5和应用对比例1-7制得的护肤霜，通过测量使用产品前后测试皮肤表面产生一个负压将皮肤吸进一个特定测试探头内，皮肤被吸进测试探头内的深度是通过一个非接触式的光学测试系统测得的。测试探头包括光的发射器和接收器，光的比率同被吸入皮肤的深度成正比，然后通过MPA 软件分析来确定皮肤的弹性性能。无负压时皮肤的回弹量与有负压时的最大拉伸量之比，比值越接近1，说明皮肤弹性越好。

选取干性肌肤人群(刺痛感累计≥3分者)360名，年龄在20-45岁，男女各半。随机分成 12组，每组15名男性、15名女性。受试部位前15天不能使用任何产品(化妆品、外用药品、内服保健品)。试验前，要求受试者清洗颜面部并在清洗后2h进入气候控制室(22±1℃，相对湿度50％)静坐20min以上，并保持放松状态。

试验方法：试验中按随机表进行半边脸测试，一致的志愿者和使用方法，也是持续28天，期间与D0(第0天)，D14(第14天)，D28(第28天)进行回访，于恒温恒湿环境静坐 30min后，进行VISIA图像拍摄及弹性的测试。再通过计算得出30名志愿者在不同时间间隔点的平均弹性数据，结果如表6所示。

表6

根据表6试验结果可知，使用应用实施例1-5以及应用对比例1-7制得的护肤霜后，各试验组的皮肤弹性均有所提升，但是使用应用实施例1-5制得的护肤霜相较于应用对比例1-7 对皮肤弹性提升的效果更为显著，具体表现为试验的第28天，使用应用实施例1-5制得的护肤霜的皮肤弹性相较于应用对比例1-7高出0.1左右，这说明将本发明制得的玫瑰茄花发酵产物用于化妆品中，提升肌肤弹性的效果显著。

以上对本发明的较佳实施方式进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。