一种丙戊酸钠原料中工艺及降解杂质测定方法

技术领域

本发明涉及测定药物工艺及降解杂质的技术领域，特别涉及一种丙戊酸钠原料中工艺及降解杂质测定方法。

背景技术

丙戊酸钠化学名为2-丙基戊酸钠，分子式：C

丙戊酸钠的作用机制与抑制电压敏感性钠离子通道有关。它通过抑制γ-氨基丁酸代谢，增加脑内的γ-氨基丁酸聚积，达到抑制病灶神经元过度放电以及异常放电扩散的效果。

目前国内外药典中收载了丙戊酸钠原料的检测方法，通过本品杂质谱分析结果，采用现有药典中收载的杂质检测方法，无法将所有的工艺杂质及降解杂质有效分离，同时可以解决空白基线干扰杂质测定的问题。本发明对本品各杂质的分离情况进行了充分的研究，提供了一个专属性好，各杂质能有效分离的检测方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种专属性好、分离度好、能将可能的工艺杂质、降解杂质和主成分有效分离，且灵敏度高、准确度好的检测方法，可应用于丙戊酸钠质量控制。

本发明人针对丙戊酸钠合成工艺以及降解情况，鉴定了以下杂质。

本发明人经过升温程序等条件进行筛选，兼顾以上杂质分离的需要，最终建立了适当的杂质分析方法，使主成分与各工艺及降解杂质之间、各工艺及降解杂质之间均能达到基线分离，达到了上述发明的目的。

本发明实施例首先提供一种丙戊酸钠原料中工艺及降解杂质的测定方法，所述方法采用气相色谱法进行测定，所述气相色谱法的色谱条件包括：

采用气相色谱法，以聚乙二醇(PEG-20M)为固定液的毛细管柱，FID检测器，选用适当的分流比和升温程序。

以聚乙二醇(PEG-20M)为固定液的毛细管柱(DB-WAX UI：30m×0.32mm×0.5μm)。

采用FID检测器。

分流比为10:1。

升温程序为起始温度60℃，维持4分钟，以每分钟7℃的速率升温至110℃，再以每分钟15℃的速率升温至170℃，维持5分钟，以每分钟10℃的速率升温至230℃，维持15分钟；进样口温度为230℃；检测器温度为230℃。

柱流量为1.5ml/min。

氮气管路中增加过滤器。

置于分液漏斗中，加水10ml，加稀硫酸5ml，振摇使溶解，用庚烷提取3次，每次20ml，合并庚烷液，用水10ml洗涤后，加无水硫酸钠适量，振摇，滤过，定量转移至100ml量瓶中，用庚烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用庚烷稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

分别取丙戊酸对照品与杂质K对照品各适量，精密称定，加庚烷溶解并稀释制成每1ml 中各约含5mg与10μg的混合溶液，摇匀，作为系统适用性溶液。

供试品溶液、对照溶液与系统适应性溶液的进样量为1μl。

根据原料合成工艺、国内外同品种质量标准、参考文献、被仿制品及原料降解试验确定本品的杂质谱：丙戊酸甲酯、杂质2-己酮、戊酸甲酯、戊酸(EP杂质A)、3-丙基-2-己酮、(2RS) -2-乙基戊酸(EP杂质B)、2-异丙基戊酸(EP杂质C)、2,2-二丙基戊酸(EP杂质D)、(2RS) -2-乙基-2-甲基戊酸(EP杂质K)、(2RS)-2-甲基戊酸(EP杂质L)、二烯丙基乙酸(USP杂质 A)为合成过程中可能产生的工艺杂质。4-庚酮、3-庚酮、3-乙基-2庚酮为可能产生的降解杂质。

本发明的有益技术效果是：能有效分离丙戊酸钠原料中工艺杂质及降解杂质；本方法专属性强，重复性好，能保证丙戊酸钠中工艺和降解杂的可控性。

附图说明

图1为采用本发明的丙戊酸钠杂质测定方法的方法优化1色谱图；

图2为采用本发明的丙戊酸钠杂质测定方法的方法优化2色谱图；

图3为采用本发明的丙戊酸钠杂质测定方法的方法优化3色谱图；

图4为采用本发明的丙戊酸钠杂质测定方法色谱图。

具体实施方式

为了测定丙戊酸钠工艺及降解杂质，本发明提供了一种丙戊酸钠工艺及降解杂质的测定方法。在该技术方案中，通过优化气相色谱条件，使得丙戊酸钠与相邻杂质及各杂质间较好分离。以下结合附图具体说明本发明的技术方案。

企业内控标准、EP9.0版标准、中国药典2015版标准方法对比

取混合对照品溶液分别采用企业内控标准、EP9.0版标准、中国药典2015版标准方法的色谱条件进行检测对比。

溶液配制：分别取各杂质(杂质A、B、C、D、K、L、USP杂质A、4-庚酮、3庚酮、 3-乙基-2-庚酮、丙戊酸甲酯、戊酸甲酯、2-己酮、3-丙基-2-己酮)及丙戊酸对照品各适量，用庚烷稀释配制成约含杂质K浓度(限度浓度：0.15％)为7.5μg/ml，其它杂质浓度为2.5μg/ml (限度浓度：0.05％)，丙戊酸浓度为5mg/ml的混合溶液，作为混合对照品溶液。

色谱条件：色谱柱为聚乙二醇(PEG-20M)固定相毛细管柱(Agilent DB-WAX UI30m×0.32mm，0.5μm)；流速：1.5ml/min；分流比：10:1；进样量1μl；升温程序见下表：

表1 标准方法对比

结论：丙戊酸钠企业内控标准方法和EP9.0版标准方法检测结果基本一致，14个混合杂质，检出13个杂质，1个杂质未检出，其他各杂质与主峰及杂质间均分离良好。丙戊酸钠中国药典2015版二部标准方法溶剂峰有较大拖尾，影响杂质检测。

根据现行国内外质量标准分析方法的对比结果可排除丙戊酸钠中国药典2015版标准方法；考虑在企业内控标准方法和EP9.0版标准方法基础上初步优化，对起始温度、升温程序、流速、变更色谱柱等进行优化，以满足检测灵敏度及分离度等指标的要求。