一种饲养和繁育南方小花蝽的方法

技术领域

本发明涉及害虫绿色防控及捕食性天敌昆虫饲养技术领域，尤其是涉及一种饲养和繁育南方小花蝽的方法。

背景技术

当前，农林有害生物的治理策略已逐步地从化学农药防控向绿色防控转移。生物防治作为有害生物绿色防控技术体系的重要组成，与之相关的技术也得到了重视，因此也促进了与生物防治相关产品的研发。在设施蔬菜的生产过程中，以蓟马、粉虱、蚜虫、害螨等小型害虫的发生和危害程度最重，上述昆虫繁殖能力强，易对农药产生抗性，这就对生防作用物的生产和数量提出了更高的要求。天敌昆虫的饲养方法是制约相关产品研发的技术瓶颈之一，寻找到材料易得、操作简便、效率更高的饲料将极大地降低天敌昆虫的生产成本。

南方小花蝽(Orius strigicollis)在我国南方地区分布广泛，可以捕食蓟马、蚜虫、粉虱、害螨等小型害虫以及鳞翅目昆虫卵和低龄幼虫，在农林害虫的综合治理中极具应用价值，尤其是其防控对象与设施蔬菜生产中的常发性害虫契合度极高，是理想的设施蔬菜有害生物的天敌昆虫。

近20年来，为了解决大规模繁殖小花蝽的问题，国内外学者对小花蝽的饲料开展了一系列的研究，包括人工饲料配方优化、替代猎物筛选等。但是由于人工饲料配制成本较高、且对小花蝽的饲养效果较低，并未用于规模化饲养小花蝽。目前，常用替代猎物饲养小花蝽，如地中海粉斑螟、印度谷螟、米蛾、麦蛾等鳞翅目昆虫的卵，在规模化生产中，需经鳞翅目昆虫饲养、成虫卵的收集、去除卵表面鳞片、冷冻或辐照杀胚等步骤，对设备要求和所需生产成本较高。除此之外，少数研究人员采用低龄活体昆虫饲养小花蝽，但是由于活体昆虫活动能力强、在使用期间也能发育至较高龄期，限制了小花蝽的捕食，因此并不适用于小花蝽的规模化生产。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种饲养和繁育南方小花蝽的方法，本发明的方法区别于常规的利用活体猎物(如蚜虫和蓟马)等饲养小花蝽方法，本发明首次提出以冷冻的鳞翅目幼虫作为主要饲料来饲养南方小花蝽，本发明饲养的小花蝽成虫获得率高、寿命长、产卵量大。

具体地，本发明提供的技术方案如下：

一种饲养和繁育南方小花蝽的方法，所述方法包括：利用冷冻的鳞翅目幼虫饲养和繁育南方小花蝽。

在一个实施方案中，所述鳞翅目昆虫为蛾类鳞翅目昆虫；优选地，所述蛾类鳞翅目昆虫为夜蛾科鳞翅目昆虫。

在一个具体的实施方案中，本发明所述鳞翅目昆虫为草地贪夜蛾。

南方小花蝽是一种节肢动物门、昆虫纲、半翅目、花椿科类的动物，在我国，主要分布于湖北、江苏、上海、江西、浙江、福建、广东、台湾等省市。小花蝽可以捕食蓟马、蚜虫、粉虱、害螨以及鳞翅目卵和低龄幼虫等，是一类具有重要利用价值的天敌昆虫。草地贪夜蛾是一种典型的自然入侵的物种，是全球预警的重大农业害虫，其寄主植物种类繁多、破坏性极强。利用草地贪夜蛾作为小花蝽的饲料，对于草地贪夜蛾的绿色防控也具有有益的作用。

在一个实施方案中，所述冷冻的鳞翅目昆虫为冷冻的鳞翅目幼虫；优选地，所述冷冻的鳞翅目幼虫为发育至1～2龄后进行冷冻的幼虫。

在一个实施方案中，所述冷冻的条件为：在-20℃以下的温度条件下，冷冻1-60天；优选地，冷冻1-30天。

在一个实施方案中，所述冷冻的鳞翅目幼虫包括1日龄的1龄幼虫、2～3日龄的1龄幼虫和2龄幼虫中的一种或多种。

在一个实施方案中，所述方法包括以经冷冻的鳞翅目幼虫饲喂南方小花蝽：采用1日龄1龄幼虫的冷冻鳞翅目幼虫饲喂1～2龄南方小花蝽，采用2～3日龄或2龄的冷冻鳞翅目幼虫饲喂3～5龄南方小花蝽若虫以及南方小花蝽成虫。

本发明主要采用1龄和2龄的鳞翅目幼虫冷冻后去饲养南方小花蝽，并且根据小花蝽的发育的不同阶段饲喂不同低龄的幼虫；本发明根据小花蝽的若虫的取食和摄入能力的不同，逐步向其饲喂1日龄的1龄冷冻幼虫、2～3日龄的1龄冷冻幼虫和2龄冷冻幼虫，综合饲喂方案合理，饲喂效果好。

在本发明的具体方案中，待鳞翅目昆虫成虫产卵孵化后，提供饲料饲喂，待幼虫发育至1～2龄转移至-20℃冰箱冷冻保存。饲料饲喂鳞翅目幼虫，所述饲料可以是市面购买，也可以是芸豆豆荚、玉米叶片、甘蓝叶片等易于获取的鳞翅目昆虫的寄主植物。

在一个实施方案中，所述方法还包括在饲养容器内，添加新鲜芸豆豆荚作为小花蝽的寄主和产卵基质；饲养条件为：温度24～28℃，相对湿度60±10％。

在一个实施方案中，本发明在南方小花蝽的饲养的过程中，需要在饲养容器内添加新鲜芸豆豆荚作为小花蝽寄主和产卵基质，每2-3天补充更换饲料，饲养条件为：温度26±1℃，相对湿度60±10％，光照时长14小时。

在一个具体的实施方案中，以冷冻的鳞翅目幼虫饲喂南方小花蝽的方法具体包括：(1)在室内，利用西花蓟马饲养南方小花蝽建立稳定种群，在饲养盒中按照雌雄成虫1:1配对，加入新鲜的芸豆豆荚作为成虫产卵基质，2～3天后，收集带卵豆荚并置于干净的饲养盒中；

(2)在温度24～28℃、相对湿度60％～70％、光照时长14小时条件下，卵2～4天后即可孵化，以冷冻的1日龄鳞翅目幼虫饲喂1～2龄南方小花蝽若虫；以及以冷冻的2～3日龄或2龄鳞翅目幼虫饲喂3～5龄或成虫南方小花蝽。

进一步地，所述饲养容器为一可斜置的玻璃储物罐，长16cm、宽22cm、高23cm，塑料材质盖子直径为13.5cm；在盖子上开一直径9cm圆口，覆以120目纱网，并用热熔胶粘连；在罐底铺一层蛭石，约为储物罐容积的1/5，可保证饲养容器干燥，并在100℃下干燥2h；冷却后，在蛭石上铺一张滤纸，将饲养层和干燥层隔开。

在饲养容器中放入的芸豆豆荚，放置在饲养容器的滤纸上，以6～8根为宜，过多会使容器中湿度过大，导致豆荚霉变；过少不能保证容器中湿度，致使豆荚干瘪较快。

进一步地，所述芸豆豆荚应新鲜、无损伤，经洗洁精浸泡、漂洗、晾干后使用。

在一个实施方案中，本发明中使用的鳞翅目昆虫的幼虫可以购买获得，也可以通过人工饲养获得。

在一个实施方案中，所述方法还包括鳞翅目昆虫成虫的饲养、产卵收集以及幼虫饲养的步骤；优选地，在温度25-28℃、相对湿度60％-70％的条件下饲养鳞翅目昆虫并为成虫提供蜂蜜水。

在一个实施方案中，鳞翅目昆虫成虫的饲养、产卵收集以及幼虫饲养具体包括：(1)在温度25-28℃，相对湿度60％-70％，光照时长14小时条件下饲养鳞翅目昆虫，为成虫提供蜂蜜水，并在饲养容器中提供折叠滤纸条作为产卵载体；(2)每1～3天取一次滤纸条，置于塑料盒中，2～3天后卵孵化，采用鳞翅目饲料或寄主植物饲喂幼虫；(3)将幼虫饲养至1～2龄转移至-20℃冰箱冷冻保存。

在一个实施方案中，为成虫提供的蜂蜜水的体积浓度为5％～10％，优选10％。

在一个具体的实施方案中，饲养小花蝽时，用毛笔将冷冻的鳞翅目昆虫幼虫扫至直径3cm的培养皿中，将培养皿转移至饲养容器中，供小花蝽取食。

有益效果：

(1)本发明首次以冷冻的鳞翅目昆虫幼虫饲喂南方小花蝽，替代了传统的以植物培养猎物(蓟马、蚜虫)和鳞翅目昆虫卵来饲养小花蝽的方法。与以其他鳞翅目昆虫卵规模化饲养相比，该技术不需要去除卵表面鳞片和辐照杀胚仪器，节约了生产成本。在实践操作中，本发明的方法简便易行，节约时间、空间和人力成本，减少了对仪器设备的要求。与使用活体昆虫(蚜虫、蓟马)饲养技术相比，该技术所需的空间缩小，将“植物培育-蚜虫或蓟马等活体昆虫繁育-小花蝽饲养”技术流程简化，节约了人力和物力，降低了生产成本。

(2)本发明将鳞翅目昆虫的幼虫在低温环境下冷冻后作为饲料，不同于以幼虫活体饲养，避免了由于活体昆虫活动能力强、易发育成高龄幼虫导致小花蝽不易取食等弊端，本发明以冷冻的虫体为饲料存储和使用方便。该方法操作起来更加省时省力且高效。

(3)本发明饲喂的效果较好，南方小花蝽发育情况理想，且成虫获得率高、寿命长、产卵量大、幼虫死亡率低(幼虫存活率在78.22％～86.67％)。培养周期略长于使用蓟马以及其他鳞翅目昆虫卵饲养的周期，主要体现在成虫寿命较长，但这对于田间应用有利，成虫对害虫的捕食能力更强。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1.利用经冷冻的鳞翅目昆虫饲养和繁育南方小花蝽

1.鳞翅目昆虫幼虫饲养

所用鳞翅目昆虫为草地贪夜蛾，草地贪夜蛾人工饲料购买于河南省济源市白云实业有限公司，使用的人工饲料也可以用鳞翅目昆虫寄主植物，如芸豆豆荚、玉米、甘蓝等植物代替。

具体步骤如下：

A.成虫饲养：

成虫饲养在直径12cm、高13cm塑料杯中，在底部铺一张直径10cm的定性滤纸，将60cm×60cm滤纸裁成10cm宽的长条，将裁好的滤纸对折成波浪状，围绕塑料杯内壁放置一圈，裁去多余部分；将脱脂棉压入直径6cm培养皿中，添加10％蜂蜜水为成虫提供营养，将脱脂棉完全湿润并确保培养皿外壁干燥，将培养皿放置在塑料杯中；将羽化后的成虫约20头(10对)放入塑料杯中，用120目纱网密封；在温度26℃、相对湿度60％、光照时长14h下饲养。成虫产卵时，通常会将卵产至滤纸和纱网上。每2天取一次卵，更换滤纸和蜂蜜水，若纱网上也有卵块则更换纱网。

B.1～3龄幼虫饲养

将卵收集后放入直径13.5cm、高8cm的塑料碗中，加入购买的草地贪夜蛾人工饲料或芸豆豆荚，卵孵化后，幼虫将转移到饲料或豆荚上取食，取食至3龄，可将幼虫转移至方形养虫盒中饲养。

C.4～6龄幼虫及蛹的饲养

待幼虫发育至3龄，可以将幼虫转移至长35cm、宽23cm、高11cm养虫盒内，用人工饲料或芸豆豆荚饲喂；提前在养虫盒中铺一层吸水纸，并及时更换，避免养虫盒中湿度过大导致幼虫死亡。待幼虫发育至6龄后，在养虫盒中铺一层厚度约1cm彩虹纸，作为化蛹基质。化蛹后，将蛹收集到直径11.5cm、高5cm的塑料碗中，待成虫羽化。

D.低龄幼虫冷冻

冷冻的幼虫主要是1日龄的1龄幼虫、2～3日龄的1龄幼虫和2龄幼虫。待卵孵化后，根据幼虫时长，分别将幼虫冷冻在-20℃冰箱中保存(冷冻致死后即可使用，优选30天内使用)。

2.南方小花蝽若虫的饲养

A.1～2龄若虫的饲养

取含有小花蝽卵的豆荚，使用剪刀剪下含有卵的豆角，长度不超过8cm，放置在直径9cm的培养皿中，并使用封口膜密封。在温度26℃、相对湿度60％、光照时长14h下，3天后开始有小花蝽孵出；将孵化出的幼虫挑至直径6cm培养皿中，并剪取一段长约2cm的新鲜芸豆豆荚为小花蝽幼虫提供水分；用毛笔将冷冻的1日龄草地贪夜蛾幼虫挑至培养皿中，饲喂量以保证小花蝽食物来源充足即可；每2天更换一次豆荚和冷冻的草地贪夜蛾幼虫，观察并记录小花蝽蜕皮情况。

B.3～5龄若虫的饲养

小花蝽发育至3～5龄，取食能力较强，可以饲喂2龄冷冻草地贪夜蛾幼虫，每2天更换一次饲料和芸豆豆荚，观察并记录小花蝽蜕皮情况。

3.南方小花蝽成虫的饲养

将羽化后的小花蝽成虫雌雄1:1配对，在直径9cm培养皿中饲养，剪取6cm长的新鲜芸豆豆荚，用作小花蝽的产卵基质，并为小花蝽提供水分。挑取20头冷冻后的草地贪夜蛾2龄幼虫，每2天更换饲料和新鲜豆荚，并清理培养皿中小花蝽代谢物和残留的草地贪夜蛾虫体。在体视显微镜下观察豆荚上观察小花蝽是否产卵，若发现有卵，收集到养虫容器中。

比较例1

选取孵化8h内的小花蝽1龄若虫，分为3组，各30头，分别采用西花蓟马2龄若虫、冷冻的草地贪夜蛾卵和冷冻的草地贪夜蛾幼虫饲喂南方小花蝽若虫，每天更换新鲜芸豆豆荚，并分别补充蓟马、冷冻的草地贪夜蛾卵和幼虫，以确保小花蝽食物来源充足。观察、统计小花蝽的发育情况，直至羽化。

使用西花蓟马2龄若虫、冷冻的草地贪夜蛾卵和冷冻的草地贪夜蛾幼虫饲养南方小花蝽若虫的发育结果如下：

表1不同食物对南方小花蝽若虫发育历期的影响

注：同一列中不同字母表示南方小花蝽取食不同食物存在显著性差异(p<0.05)。

试验观察发现，使用冷冻的草地贪夜蛾卵饲养的南方小花蝽若虫发育历期最长，为12.73天，其次为以冷冻的草地贪夜蛾低龄幼虫为饲料的小花蝽，若虫发育历期为11.65天。以草地贪夜蛾卵饲养小花蝽时，1龄、3龄和4龄若虫的发育历期最长，尤其是3-4龄若虫发育历期显著高于以西花蓟马和冷冻草地贪夜蛾低龄幼虫为饲料时的发育历期。以冷冻的草地贪夜蛾低龄幼虫为食物，南方小花蝽的成虫获得率可达86.67％，而以草地贪夜蛾卵饲养的小花蝽成虫获得率最低，为73.33％。

比较例2

将羽化24h内的成虫按照雌雄1:1配对后，在培养皿中饲养。该比较例包含4个处理，分别为饲喂西花蓟马2龄若虫、冷冻的草地贪夜蛾卵、草地贪夜蛾低龄活体幼虫和冷冻的草地贪夜蛾低龄幼虫，每日更换新鲜的芸豆豆荚和食物，并在体视显微镜下计数小花蝽产卵数量，直至所有虫体死亡。分别统计各处理下小花蝽雌虫和雄虫寿命，以及各处理的小花蝽产卵前期、产卵期和产卵量。研究结果如下：

表2不同食物对南方小花蝽成虫生长发育的影响

注：同一列中不同字母表示南方小花蝽取食不同食物存在显著性差异(p<0.05)。

试验观察发现，以冷冻的草地贪夜蛾低龄幼虫饲养南方小花蝽，雌、雄虫的寿命均长于以其他三种食物饲养的南方小花蝽，且以草地贪夜蛾低龄幼虫饲养南方小花蝽的产卵期达14.40天，显著长于取食其他三种食物的小花蝽产卵期。此外，以西花蓟马若虫和冷冻的草地贪夜蛾低龄幼虫饲养的南方小花蝽的产卵量不存在显著差异，但均显著高于以冷冻的草地贪夜蛾卵和草地贪夜蛾低龄活体幼虫的产卵量。

比较例3：使用其他鳞翅目蛾类卵饲喂南方小花蝽的效果

表3使用其他鳞翅目卵饲养南方小花蝽效果

注：该对比例数据来自已报道文献。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。