一种用于预防和缓解关节亚健康的生物制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物制剂的技术领域，特别涉及一种用于预防和缓解关节 亚健康的生物制剂及其制备方法。

背景技术

关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织，由炎症、感染、退化、创 伤或其他因素引起的炎性疾病。根据病因，关节炎可分为骨关节炎、类风 湿性关节炎、强直性关节炎、反应性关节炎、痛风性关节炎、风湿性关节 炎、感染性关节炎等。我国的关节炎患者数量众多，多发于中老年人，也 发生于青年人。该病好发于手、腕、足等处，早期表现为红、肿、热、痛 以及功能障碍，晚期可出现关节畸形，甚至关节残疾。全球每年60岁以上 的老年人当中80％患有骨关节炎。随着人口老龄化的逐渐加剧，关节炎的 发病人数也在逐年增加，给世界各国带来了极大的经济和医疗负担。

近年来，随着生活方式的转变，关节炎日益年轻化的趋势越来越明显。 年轻人不良的生活习惯(如手腕、手指的长时间反复使用电子产品、久坐、 常穿高跟鞋、经常开车等)和不科学的运动方法容易使年轻人患关节炎。 新一代年轻人肥胖率升高已是不争的事实，肥胖不仅加重关节软骨的负担， 使关节结构加速磨损和老化，还会通过其他代谢并发症间接影响关节，如 糖耐量异常、脂质异常等。另外，中医认为关节炎是风寒湿邪痹阻经脉， 致使经脉不通引发的，关节长期受凉就会导致风湿，严重时还会导致骨性 关节炎。

关节软骨基质中的蛋白多糖(PG)对关节的正常功能发挥起着重要作 用。蛋白多糖是一类非常复杂的大分子糖复合物，主要由糖胺聚糖(GAG) 链共价连接于核心蛋白所组成，分子量11-220kd。蛋白多糖的核心蛋白有 多个酶解位点，许多酶类参与蛋白多糖的降解过程。酶作用的结果是直接 导致蛋白多糖的降解，同时也激活一些细胞活性因子，这些小分子蛋白通 过复杂的网络调节，直接或间接的促进蛋白多糖的降解。此外，基质中胶 原和蛋白多糖结构的破坏也会引起免疫反应，反过来加剧蛋白多糖的破坏， 导致蛋白多糖从基质中迅速丢失。有研究显示，骨关节炎患者的关节滑液 中，蛋白多糖的含量会明显低于正常组，使关节滑液丧失边界润滑的能力， 导致关节运动时摩擦力增大，关节软骨破坏。

糖胺聚糖(GAG)在过去也常被称为黏多糖，其包括透明质酸(HA) 和硫酸软骨素(CS)等。其中，透明质酸具有极高的黏粘性、润滑性和保 湿性。注入关节内的透明质酸可增加关节液的粘稠性和润滑性。部分透明 质酸可在软骨表面和滑膜表面集聚，重新形成被破坏的屏障，阻止炎性递 质或软骨基质降解酶与软骨的接触，防止软骨基质进一步破坏，缓解关节 疼痛。部分透明质酸还可进入软骨基质与黏蛋白形成聚合物，有利于损伤 软骨的修复。

中医将关节炎归为“痹证”、“骨痹”的范畴。《素问痹论》中说：“痹在 骨则重，在于脉则血凝而不流，在于筋则屈不利，在于肉则不仁”。中医认 为，肝主筋，肾主骨，筋附于骨上。肝之阴血亏虚，则筋失于濡养。肾虚 则骨髓生化不足，骨骼失去肾之温养，加之长期劳损，可使气血亏损，风、 寒、湿之邪乘虚侵袭，可使寒凝湿阻，筋骨失运，导致筋络痹阻，筋骨失 养，引发关节疼痛、屈伸不利、肿胀、畸形等症状。中医对关节炎患者主 要是进行祛风散寒、除湿清热、舒经通络、补益肝肾、养血活血、消肿止 痛的治疗。

常用于关节炎预防和治疗的药膏有风湿贴、伤湿止痛膏，这些膏药针 对不同的病例具有比较好的效果，但是它们具有主治功能单一的缺点，尤 其是对于治疗骨质增生所致的腰腿疼痛没有好的疗效。而目前市面上以中 西医结合理念用于预防和治疗关节炎的外用类生物制剂并不多，且效果难 以确定。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于预防和缓解关节亚健康的生物制剂及其 制备方法。

一方面，本发明公开了一种用于预防和缓解关节亚健康的生物制剂， 按重量百分数计，包括以下组分：

A相物料：

B相物料：

C相物料：

(20)丁二醇 0.1-8.0％，

(21)四氢胡椒碱 0.05-5.0％，

D相物料：

E相物料：

通过采用上述技术方案，本发明的生物制剂可用于预防和缓解关节炎。

优选地，本发明的生物制剂按重量百分比计，包括以下组分：

A相物料：

B相物料：

C相物料：

(20)丁二醇 0.1-6.0％，

(21)四氢胡椒碱 0.05-4.0％，

D相物料：

E相物料：

通过采用上述技术方案，本发明的生物制剂能有效的预防和缓解关节 炎。

优选地，本发明的生物制剂通过皮肤给药，预防和缓解人体骨关节炎、 类风湿性关节炎、强直性关节炎、反应性关节炎、痛风性关节炎、风湿性 关节炎和感染性关节炎。

进一步优选地，本发明的生物制剂以液体制剂的形式通过皮肤给药。

又一方面，本发明公开了一种用于预防和缓解关节亚健康的生物制剂 的制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至80-85℃，恒温灭菌， 得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至75-80℃，恒温灭菌， 得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/4-1/2体积的步骤(2)所得水相物料泵 入乳化锅中与步骤(3)所得油相物料混合，再将剩余的水相物料泵入乳化 锅中进行均质，并在70-80℃均质3-5min；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至60-65℃，加入已 溶解的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至40-45℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至32-38℃，加入E相物料，搅拌均匀， 出料。

优选地，步骤(2)恒温灭菌25-30分钟。

进一步优选地，步骤(3)加热至固体油脂溶解完全，并恒温灭菌20-25 分钟。

再一步优选地，步骤(4)恒温灭菌25-35分钟。

本发明中的各有效活性成分的作用如下：

S-腺苷甲硫氨酸，通过皮肤给药能够穿过滑膜到达软骨，滋养软骨和 关节液，具有消炎、减轻疼痛及组织修复功能，在酶的催化作用下转移氨 丙基产生多胺，防止各种酶对软骨细胞蛋白多糖的分解，保障蛋白多糖功 能的发挥，使软骨和关节保持健康状态；同时，S-腺苷甲硫氨酸还可对抗 肿瘤坏死因子α的破坏作用，保持滑膜细胞的正常增殖，使纤连蛋白mRNA 表达顺畅。在欧洲，S-腺苷甲硫氨酸已作为处方药广泛用于肝病、抑郁症、 关节炎等疾病的治疗。另外，S-腺苷甲硫氨酸在长期维持关节健康与预防 骨关节炎方面，成效十分卓著，还能与透明质酸发挥协同作用，增强疗效。

透明质酸钠，为透明质酸的钠盐，透明质酸钠具有如下作用：(1)润 滑，减少软骨组织及关节面间摩擦；(2)关节负重时，透明质酸钠可以形 成凝胶状物，由流动体转为弹性体，起到缓冲作用，保护关节软骨；(3) 在软骨及滑膜表面形成流动屏障，调控水及营养成分进出软骨基质；(4) 与蛋白质、凝集原构成蛋白多糖聚集体，组成软骨基质；(5)维持关节腔 隙开张，保证关节的伸展和运动。

硫酸软骨素钠，为硫酸软骨素的钠盐。临床试验已经证明，硫酸软骨 素能够减少骨关节炎患者疼痛，促进软骨再生，改善关节功能、减少关节 肿胀和积液，防止膝关节和手关节部位的间隙狭窄，并提供垫衬作用，缓 和行动时的冲击和摩擦，能将水分吸入蛋白多糖分子内，使软骨变厚，并 增加关节内的滑液量。

玻色因，化学名称为羟丙基四氢吡喃三醇，具有广泛的生物活性，可 以激活黏多糖的合成，促进生成透明质酸和胶原蛋白。

乙酰壳糖胺,促进皮肤角质形成细胞与成纤维细胞对透明质酸的合成 与分泌，提高皮肤内透明质酸含量，用于治疗和预防关节炎。

路路通提取物，路路通为金缕梅科植物枫香树的干燥成熟果序，祛风 活络，用于关节痹痛，麻木痉挛。

伸筋草提取物，伸筋草为石松科植物石松的干燥全草，味苦、微辛， 性温，有祛风除湿，舒筋活络的功效，用于关节酸痛，屈伸不利。

锡兰肉桂叶油，锡兰肉桂是樟科樟属植物，常绿乔木，为一种食用香 料或中药材，具有止痛功效，可用于缓解关节炎引起的疼痛。

姜根提取物，姜根为姜科姜属的多年生草本植物的新鲜根茎，温中、 散寒、祛风、活血，主风湿痹痛，跌打损。

乳香油，为橄榄科植物乳香树渗出的树脂，辛、苦、温，活血行气止 痛，消肿生肌，有助于减轻关节炎引起的疼痛和炎症。

海巴戟果提取物，性凉，味苦，对关节炎以及风湿病有显著疗效。

薄荷脑，由薄菏油中得到的一种饱和的环状醇组成，具有疏风，清热， 解毒的功效；舒缓肌肤，减轻关节炎引起的疼痛；与樟脑合用，还可促进 药物透皮吸收。

柠檬香茅叶精油，祛风、除湿、抗感染、抗真菌，减轻关节炎引起的 关节疼痛。

香兰基丁基醚，油溶性热感剂，局部作用于皮肤后，能快速产生温和 持久的热原效应，加快局部微循环，刺激皮下脂肪代谢，促进毛细管血液 循环等。

本发明的预防和缓解关节炎的生物制剂具有如下有益效果：本发明的 生物制剂含多种生物活性成分和多种中药活性成分，通过中西结合，从根 本上预防和缓解关节炎症。其中，S-腺苷甲硫氨酸、透明质酸钠、硫酸软 骨素钠、玻色因以及乙酰壳糖胺为生物活性成分，一方面可防止酶对蛋白 多糖的分解，避免体内蛋白多糖含量降低；另一方面为人体关节提供外源 性透明质酸，并激活机体黏多糖的合成，促进透明质酸、胶原蛋白的合成和软骨再生，提高体内透明质酸的含量，减轻软骨损失，维持软骨与关节 液形态；协同路路通提取物、伸筋草提取物、海巴戟果提取物、姜根提取 物、锡兰肉桂叶油、乳香油、柠檬香茅叶精油以及香兰基丁基醚等中药活 性成分，舒筋活络，活血化瘀，改善局部微循环，缓解疼痛；通过薄荷脑 和樟脑联合用药，促进药物透皮吸收到达病灶部位，有效预防和缓解关节炎，减少患者因注射给药引起的疼痛。

具体实施方式

实施例1

原料总量100公斤。其中，

A相物料：甘油9.0公斤、丙二醇6.0公斤、丁二醇2.0公斤；

B相物料：山梨坦倍半油酸酯5公斤，异硬脂醇聚醚-20 1.2公斤，异 十六烷2.0公斤，山梨坦硬脂酸酯1.6公斤，山梨坦异硬脂酸酯2.3公斤， 乳香油0.7公斤，锡兰肉桂叶油0.05公斤，柠檬香茅叶油0.02公斤，聚山 梨醇酯-60，0.8公斤，硬脂酰谷氨酸钠0.4公斤，丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二 甲基牛磺酸钠共聚物0.3公斤，丙烯酸(酯)类共聚物1.1公斤，硅酸铝镁 0.05公斤，羟苯甲酯0.1公斤，羟苯乙酯0.02公斤；

C相物料：丁二醇2.0公斤，四氢胡椒碱0.05公斤；

D相物料：伸筋草提取物3.1公斤，路路通提取物6.2公斤，姜根提取 物4.0公斤，海巴戟果提取物5.3公斤，樟脑0.15公斤，水杨酸甲酯2.5公 斤，抗坏血酸棕榈酸酯0.15公斤，柠檬酸0.7公斤，薄荷脑3.5公斤，三乙 醇胺4.2公斤，硫酸软骨素钠8.4公斤，S-腺苷甲硫氨酸6.3公斤，透明质 酸钠4.6公斤，羟苯基丙酰胺苯甲酸0.5公斤，羟丙基四氢吡喃三醇0.16公斤，乙酰壳糖胺5.5公斤；

E相物料：1.2-戊二醇0.24公斤，丁羟甲苯0.13公斤，香兰基丁基醚 1.2公斤，乙基己基甘油2.1公斤，苯氧乙醇0.3公斤。

余量为A相去离子水。

制备工艺：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至80℃，恒温灭菌25 分钟，得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至75℃，恒温灭菌20分 钟，得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/4体积的步骤(2)所得水相物料泵入乳 化锅中与步骤(3)所得油相物料混合，再将剩余的水相物料泵入乳化锅中 进行均质，并在70℃均质3min，恒温灭菌25分钟；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至60℃，加入已溶 解的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至40℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至32℃，加入E相物料，搅拌均匀，出 料。

实施例2

实施例2与实施例1的配方相同，实施例2与实施例1的不同之处仅 在于制备工艺，实施例2的制备工艺如下：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至80℃，恒温灭菌25 分钟，得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至75℃，恒温灭菌20分 钟，得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/2体积步骤(2)所得水相物料的泵入乳 化锅中与步骤(3)所得油相物料混合，并在70℃均质3min，恒温灭菌25 分钟；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至60℃，加入已溶 解的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至40℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至32℃，加入E相物料，搅拌均匀，出 料。

实施例3

原料总量100公斤。其中，

A相物料：甘油1.0公斤、丙二醇9.8公斤、丁二醇4.5公斤；

B相物料：山梨坦倍半油酸酯3.5公斤，异硬脂醇聚醚-20 3.0公斤，异 十六烷2.3公斤，山梨坦硬脂酸酯1.5公斤，山梨坦异硬脂酸酯2.0公斤， 乳香油3.2公斤，锡兰肉桂叶油0.6公斤，柠檬香茅叶油0.5公斤，聚山梨 醇酯-60 1.0公斤，硬脂酰谷氨酸钠0.8公斤，丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基 牛磺酸钠共聚物0.1公斤，丙烯酸(酯)类共聚物0.05公斤，硅酸铝镁0.01 公斤，羟苯甲酯0.01公斤，羟苯乙酯0.01公斤；

C相物料：丁二醇3.0公斤，四氢胡椒碱4.0公斤；

D相物料：伸筋草提取物2.0公斤，路路通提取物4.2公斤，姜根提取 物5.0公斤，海巴戟果提取物3.0公斤，樟脑0.01公斤，水杨酸甲酯0.1公 斤，抗坏血酸棕榈酸酯0.1公斤，柠檬酸0.7公斤，薄荷脑3.6公斤，三乙 醇胺4.0公斤，硫酸软骨素钠7.5公斤，S-腺苷甲硫氨酸10.0公斤，透明质 酸钠5.0公斤，羟苯基丙酰胺苯甲酸0.1公斤，羟丙基四氢吡喃三醇0.2公 斤，乙酰壳糖胺4.4公斤；

E相物料：1.2-戊二醇0.2公斤，丁羟甲苯0.1公斤，香兰基丁基醚2.5 公斤，乙基己基甘油2.0公斤，苯氧乙醇0.2公斤。

余量为A相去离子水。

制备工艺：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至85℃，恒温灭菌30分 钟，得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至80℃，恒温灭菌25分 钟，得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/2体积的步骤(2)所得水相物料泵入乳 化锅中与步骤(3)所得油相物料混合，再将剩余的水相物料泵入乳化锅中 进行均质，并在70℃均质5min，恒温灭菌35分钟；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至65℃，加入已溶解 的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至45℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至38℃，加入E相物料，搅拌均匀，出料。

实施例4

实施例4与实施例3的配方相同，实施例4与实施例3的区别仅在于 制备工艺，实施例4的制备工艺如下：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至85℃，恒温灭菌30 分钟，得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至80℃，恒温灭菌25分 钟，得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/2体积步骤(2)所得水相物料泵入乳化 锅中与步骤(3)所得油相物料混合，并在70℃均质5min，恒温灭菌35 分钟；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至65℃，加入已溶 解的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至42℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至35℃，加入E相物料，搅拌均匀，出 料。

实施例5

原料总量100公斤。其中，

A相物料：甘油8.9公斤、丙二醇1.0公斤、丁二醇1.0公斤；

B相物料：山梨坦倍半油酸酯2.0公斤，异硬脂醇聚醚-20 1.5公斤，异 十六烷1.5公斤，山梨坦硬脂酸酯1.5公斤，山梨坦异硬脂酸酯4.5公斤， 乳香油7.0公斤，锡兰肉桂叶油5.5公斤，柠檬香茅叶油0.5公斤，聚山梨 醇酯-60 1.0公斤，硬脂酰谷氨酸钠0.8公斤，丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基 牛磺酸钠共聚物0.1公斤，丙烯酸(酯)类共聚物0.05公斤，硅酸铝镁0.01 公斤，羟苯甲酯0.01公斤，羟苯乙酯0.01公斤；

C相物料：丁二醇0.1公斤，四氢胡椒碱0.05公斤；

D相物料：伸筋草提取物3.5公斤，路路通提取物2.5公斤，姜根提取 物0.5公斤，海巴戟果提取物9.5公斤，樟脑0.01公斤，水杨酸甲酯0.1公 斤，抗坏血酸棕榈酸酯0.1公斤，柠檬酸0.01公斤，薄荷脑0.01公斤，三 乙醇胺0.01公斤，硫酸软骨素钠9.0公斤，S-腺苷甲硫氨酸19.0公斤，透 明质酸钠5.0公斤，羟苯基丙酰胺苯甲酸0.1公斤，羟丙基四氢吡喃三醇0.1 公斤，乙酰壳糖胺9.0公斤；

E相物料：1.2-戊二醇0.2公斤，丁羟甲苯0.1公斤，香兰基丁基醚0.01 公斤，乙基己基甘油0.05公斤，苯氧乙醇0.05公斤。

余量为A相去离子水。

实施例5的制备工艺同实施例3的制备工艺。

实施例6

实施例6与实施例5的配方相同，实施例6与实施例5的区别仅在于 制备工艺，实施例6的制备工艺如下：

(1)按重量百分比称量各相原料；

(2)将A相物料混匀，加入水相锅中，加热至85℃，恒温灭菌10分 钟，得到水相物料；

(3)将B相物料混匀，加入乳化锅中，加热至80℃，恒温灭菌15分 钟，得到油相物料；

(4)在真空搅拌状态下，将1/3体积的步骤(2)所得水相物料泵入乳 化锅中与步骤(3)所得油相物料混合，再将剩余的水相物料泵入乳化锅中 进行均质，并在70℃均质5min，恒温灭菌20分钟；

(5)加热溶解C相物料，待乳化锅中物料温度降至65℃，加入已溶解 的C相物料，搅拌均匀；

(6)待乳化锅中物料温度降至45℃，加入D相物料，搅拌均匀；

(7)待乳化锅中物料温度降至38℃，加入E相物料，搅拌均匀，出料。

(一)临床实例

1.李某，男，55岁，近期感觉双膝偶有疼痛，外抹本发明实施例1所 制的生物制剂，一日三次，使用一周后，疼痛缓解。使用过程中无任何刺 激皮肤等不良症状出现。

2.张某，男，52岁，雨天会明显感到关节酸痛，外抹本发明实施例2 所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，2周后疼痛缓解。使用过程中无 任何刺激皮肤等不良症状出现。

3.钱某，女，30岁，脚跟处轻度骨质增生，外抹本发明实施例3所制 的生物制剂，一日三次，每次20ml，2周后疼痛缓解。使用过程中无任何 刺激皮肤等不良症状出现。

4.林某，男，34岁。体重严重超标，自觉膝关节僵硬，活动不能自如。 使用本发明生物制剂结合专业按摩手法一月后，痛感渐消。使用过程中无 任何刺激皮肤等不良症状出现。

5.江某，女，40岁，长期缺乏锻炼，导致膝关节疼痛，酸软无力。使 用本发明生物制剂结合专业按摩手法一月后，关节灵活度增加，可正常行 动无碍使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

6.赵某，女，27岁，夏天怕热，长期吹空调，偶感膝盖关节处疼痛。 外抹本发明实施例4所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，1周后疼痛 缓解，晨僵减轻。使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

7.郑某，女，32岁，某次爬山回家后，感到踝关节酸软无力，行走困 难。外抹本发明实施例5所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，2周后 行动自如。使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

8.文某，女，49岁，手指关节不能用力，稍用力，即会疼痛难忍，外 抹本发明实施例6所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，1周后指关节 可正常活动，且疼痛感消失。使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

9.李某，女，41岁，因为不爱运动，又经常坐着，近期上下楼梯隐隐 感觉关节疼痛僵硬，外抹本发明实施例1所制的生物制剂，一日三次，每 次20ml，4-6天疼痛感逐渐消失。使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状 出现。

10.吴某，男，36岁，偶有感到关节肿胀疼痛，无法大幅度运动。外抹 本发明实施例1所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，4-6天疼痛感逐 渐消失。使用过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

11.刘某，女，42岁，轻度骨质增生，行动不便。外抹本发明实施例1 所制的生物制剂，一日三次，每次20ml，2周后天疼痛感逐渐消失。使用 过程中无任何刺激皮肤等不良症状出现。

12.余某，男，38岁，近期常感觉腿部酸胀。外抹本发明实施例1所制 的生物制剂，一日三次，每次20ml，4-6天疼痛感逐渐消失。使用过程中 无任何刺激皮肤等不良症状出现。

(二)为了进一步证实其治疗效果及安全性，取本发明实施例2的生物 制剂进行功效试验，具体试验方法和试验结果如下：

将500例患有亚健康志愿者随机分为两组，治疗组400例外用本发明 的生物制剂并配合中医推拿按摩手法进行每周2次临床治疗，对照组的100 例仅采用与治疗组相同的中医推拿按摩手法进行每周2次治疗。两组患者 年龄、病程无明显差异，具有可比性。在治疗500例中：年龄最小的25岁， 最大的60岁，治疗观察期为12个月。

1、关节养护疗效的判定标准如下：

高效：关节炎症状消失，并持续保持半年以上无反弹。

显效：关节炎症状消失，并持续保持3个月以上无反弹。

有效：关节炎症状基本消失。

无效：关节炎症未得到改善。

2、中医推拿按摩手法，具体操作过程步骤如下：

抹霜，以打圈方式均匀抹开。(注意事项:做一侧只抹一侧，要连贯，到 位。)

拨膀胱经：由上向下，分四线，四线为一遍。

拨三焦经：有内向外，分四线，四线为一遍。

拨大肠经：由下向上，分四线，四线为一遍。

点揉痛点：点揉关节疼痛部位及相关穴位。

使用注意事项如下:

使用本产品10g-30g，配合中医按摩手法来达到缓解焦虑情绪的目的。

每一个按摩步骤要重复30-40次，全程约90分钟。

使用者在用本品做按摩护理前、后要注意补充适量水分，有助于体内 毒素的排出。

做按摩的过程中，要及时添加以上实施例的产品作为按摩介质，保证 有足量产品被吸收的同时，增强疗效。

3、测定结果如表1所示。

表1治疗组和对照组的临床试验情况

根据400例临床试验显示，400例亚健康者外用本产品进行临床治疗期 间并无任何毒性及刺激性，食欲正常及人体机能正常运行，且患者内分泌 正常。16次治疗后，治疗组400例中总有效率达到97.00％，而对照组总有 效率仅为39.00％。对400例进行跟踪发现，停止治疗6个月后，治疗组治 疗有效人员81％均未感觉症状与体征有反弹、恶化或加重，而对照组治疗 有效人员78％明显感觉症状与体征存在反弹现象。

结果分析一：改善关节疼痛

对300名关节疼痛的25-60岁的人进行治疗，每周2次外用本发明的 生物制剂并结合中医按摩手法进行临床治疗，按摩方法同上，跟踪统计6 个月，得到试验结果如表2。

表2改善关节疼痛跟踪案例结果

结果分析二：缓解关节僵硬

为了验证本发明的生物制剂可以缓解关节僵硬症状，本发明人组织 25-60岁关节僵硬的受试者100名，其选择标准如下：无严重系统性能疾病、 无过敏性疾病，近一周局部内未使用任何抗关节炎药物者，近一个月内未 曾参加其他同类化妆品临床试验者，自愿参加受试。使用方法为外用本发 明的生物制剂并结合上述中医按摩手法。选取本次试验前所有志愿者均记 录使用前关节僵硬状况，连续试用本发明生物制剂的时间为两个月，试用结束后观察与试用前的效果。表3为试用本发明产品的统计情况。

表3改善关节僵硬跟踪案例结果

上述试验表明：本发明的生物制剂具有改善关节炎，修复关节结构物 质，辅以传统按摩手法，达到改善关节炎的作用功效。而且本发明的生物 制剂不含任何毒性或影响人体正常运行、吸收、生长的物质，对人体无害， 不影响人体脏腑功能的正常运行吸收，无任何副作用，不产生内分泌紊乱， 疗效好。中医按摩推拿手法配合本产品帮助经络疏通，改善血液循环，改 善机体内部病症，从根源处预防和缓解关节炎症状。

以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进， 这些都属于本发明的保护范围。