一种微生态抑菌液及制备方法

技术领域

本发明涉及食品技术领域，具体涉及一种微生态抑菌液及制备方法。

背景技术

龋齿也被称为蛀牙，主要是因为细菌感染等因素所致的一种牙体硬组织破坏病症，是学龄前儿童最为常见的疾病之一，其临床症状主要为牙痛，不仅会对儿童的咀嚼功能造成影响，而且会对儿童恒牙的生长造成阻碍。龋齿会发生不可逆转的龋蚀，如未得到及时有效的治疗会引发牙髓炎、根尖周炎甚至颌骨炎等并发症，对儿童身心健康造成严重的影响，对此时期儿童牙齿健康应予以重视。

龋齿属于多因子所造成的疾病，发生原因除了要考虑到牙齿组成元素、形态、位置、唾液组成成份、酸碱值、分泌量、粘度、抗菌因子、饮食中碳水化合物含量、氟化物、维生物以及其物理性质，因此，降低口腔内细菌的数量，可以减少龋齿及细菌造成的牙周病的发生率。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种微生态抑菌液及制备方法，以期能够解决防治儿童龋齿难的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

提供一种微生态抑菌液，由以下重量百分比的原料组成：

保湿剂20～30%，防腐剂1～5%，氟化钠0.02～0.1%，余量为嗜酸乳杆菌含发酵代谢产物的滤液。

优选的，所述保湿剂为山梨醇或丙二醇。

优选的，所述防腐剂为山梨酸钾或苯甲酸钠。

优选的，所述嗜酸乳杆菌含发酵代谢产物的滤液的制备方法为：

（1）取嗜酸乳杆菌菌悬液转接于MRS琼脂培养基平板上，在37℃下过夜培养；

（2）去过夜培养的单菌落接入MRS液体培养基中，37℃培养2～3天；

（3）取液体培养的菌液，以3～5%的接种量接入种子罐中，37℃培养36～48h；

（4）取种子罐培养的菌液，以1～2％的接种量接入发酵罐，发酵至菌体浓度达到10

（5）离心发酵液收集上清液，再分离滤除活菌菌体，即得。

进一步的，在所述步骤（5）中，所述滤除采用膜分离技术使发酵液通过微孔滤膜过滤设备。

另提供一种所述的微生态抑菌液的制备方法，包括以下步骤：

（1）取嗜酸乳杆菌菌悬液转接于MRS琼脂培养基平板上，在37℃下过夜培养；

（2）去过夜培养的单菌落接入MRS液体培养基中，37℃培养2～3天；

（3）取液体培养的菌液，以3～5%的接种量接入种子罐中，37℃培养36～48h；

（4）取种子罐培养的菌液，以1～2％的接种量接入发酵罐，发酵至菌体浓度达到10

（5）离心发酵液收集上清液，再分离滤除活菌菌体，即得嗜酸乳杆菌含发酵代谢产物的滤液；

（6）取保湿剂20～30%，防腐剂1～5%，氟化钠0.02～0.1%，余量为嗜酸乳杆菌含发酵代谢产物的滤液，混合，即成。

与现有技术相比，本发明的有益技术效果在于：

本发明的微生态抑菌液有效避免了儿童抗生素的滥用和细菌耐药性的问题，通过乳杆菌的代谢产物来制备抑菌漱口液用于防治龋齿，简单便捷、安全高效。

具体实施方式

下面结合实施例来说明本发明的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本发明，并不以任何方式限制本发明的范围。

在以下实施例中所涉及的仪器设备如无特别说明，均为常规仪器设备；所涉及的试剂和原料如无特别说明，均为市售常规试剂和培养基。

实施例1：嗜酸乳杆菌NCMF的培养

（1）活化嗜酸乳杆菌NCMF菌种，取约0.2mL菌悬液，转接于MRS琼脂培养基平板上，在37℃下过夜培养。

MRS培养基按重量份数计，由以下组分组成：蛋白胨1%，酵母浸粉0.5%，牛肉浸膏1%，葡萄糖2%，无水醋酸钠0.3%，柠檬酸二铵0.2%，吐温80 0.1%，磷酸氢二钾 0.2%，MgSO4·7H

（2）液体培养

将过夜培养的嗜酸乳杆菌NCMF菌落接入装有MRS液体培养基三角瓶中，37℃培养箱静置培养。培养2～3天至菌株在液体培养基中生长缓慢且均一，且有明显的分层现象。

（3）扩大培养

取液体培养的菌液无菌条件下，以5%的接种量接入消毒后的种子罐中，37℃培养48h后，由种子罐输送到发酵罐，接种量1～2％，发酵48～72小时，至菌体浓度达到10

（4）分离发酵液

以7000r/min离心收集发酵液，采用膜分离技术进行分离，在洁净生产环境条件下施以压力使发酵液通过微孔滤膜过滤设备，滤除活菌菌体，即得含发酵代谢产物的滤液。

实施例2：一种微生态抑菌液

该微生态抑菌液由以下重量份数的原料组成：

取山梨醇20份，山梨酸钾1份，氟化钠0.02份，余量为实施例1的含发酵代谢产物的滤液。

嗜酸乳杆菌NCMF的发酵液中的表面活性剂能够抑制龋齿致病菌变异链球菌水溶性和水不溶性葡聚糖的合成，进而抑制变异链球菌生物膜的形成；嗜酸乳杆菌NCMF的发酵液中细菌素能够显著抑制变异链球菌的生长。

实施例3：一种微生态抑菌液

该微生态抑菌液由以下重量份数的原料组成：

取山梨醇25份，山梨酸钾2份，氟化钠0.05份，余量为实施例1的含发酵代谢产物的滤液。

实施例4：一种微生态抑菌液

该微生态抑菌液由以下重量份数的原料组成：

取丙二醇28份，苯甲酸钠3份，氟化钠0.04份，余量为实施例1的含发酵代谢产物的滤液。

实施例5：一种微生态抑菌液

该微生态抑菌液由以下重量份数的原料组成：

取山梨醇30份，山梨酸钾5份，氟化钠0.1份，余量为实施例1的含发酵代谢产物的滤液。

上面结合实施例对本发明作了详细的说明，但是，所属技术领域的技术人员能够理解，在不脱离本发明宗旨的前提下，还可以对上述实施例中的各个具体参数进行变更，形成多个具体的实施例，均为本发明的常见变化范围，在此不再一一详述。