一种富含黄酮的茶及其制品中粗多糖的检测方法

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，特别涉及一种富含黄酮的茶及其制品中粗多糖的检测方法。

背景技术

茶叶可做饮品，含有多种有益成分，并有保健功效。通常，茶叶在生产过程中，需要检测茶叶中粗多糖的含量。

目前，检测茶叶中粗多糖含量的主要检测方式为蒽酮硫酸法和苯酚硫酸法，尤其是苯酚硫酸法，由于其受环境干扰较小、检测结果稳定、准确，应用广泛。然而，由于茶叶中通常还含有黄酮，对苯酚硫酸法的检测造成干扰，影响茶叶中粗多糖含量的检测准确性。

因此，如何设计一种可以高效、准确的检测茶叶中粗多糖含量的方法，是本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种富含黄酮的茶及其制品中粗多糖的检测方法，其检测简单、方便，结果稳定、准确，且检测周期短，可大规模推广应用。

本发明的技术方案是：一种富含黄酮的茶及其制品中粗多糖的检测方法，包括以下步骤：

1)取茶样品，用乙醇进行浸提，得到浸提液A和滤渣A；

2)滤渣A离心，取沉淀，用乙醇洗涤，经干燥后得到粗提物；

3)粗提物用水进行浸提，得到浸提液B；

4)浸提液B中加入大孔树脂，吸附杂质后去掉；

5)利用苯酚硫酸法测定其中粗多糖的含量。

进一步的，步骤1)所述茶样品为老鹰茶，茶样品和乙醇的质量体积比为1：5-8，浸提温度为室温，浸提时间为8-12h。

进一步的，步骤2)所述离心，离心转速为3500r/min，离心时间为5-15min，所述洗涤的次数为三次，各次洗涤用乙醇与沉淀的体积质量比为1：1。

进一步的，步骤2)采用烘箱进行干燥，干燥温度为60℃。

进一步的，步骤3)所述水为双蒸水，粗提物和水的质量体积比为1：8-10，浸提温度为100℃，浸提时间为3-5h，重复浸提三次，合并浸提液，得到浸提液B。

进一步的，步骤4)所述吸附的时间为10-15h。

优选的，步骤1)所述茶样品为代用茶、茶叶或代用茶饮料、茶饮料或茶含片。

采用上述技术方案具有以下有益效果：

1、本发明利用乙醇、大孔树脂对待测样品进行预处理，以去除样品中的黄酮、色素等物质，避免了后续检测中对多糖含量检测的干扰。其中，通过乙醇浸提并洗涤滤渣A，可以有效去除样品中大部分的色素、黄酮类干扰物质，以避免黄酮和色素类物质对于多糖检测的干扰。然后利用水浸提滤渣，浸提出样品中的多糖，即待测物。含有待测物的浸提液采用大孔树脂进一步去除样品中的色素、黄酮类物质，以避免黄酮和色素类物质对于多糖检测的干扰，有效提高对粗多糖的检测精度。

2、本发明通过限定步骤1)茶样品和乙醇的质量体积比为1：5-8，浸提温度为室温，浸提时间为8-12h，尽可能去除样品中的色素、黄酮类干扰物质，以避免黄酮和色素类物质对于多糖检测的干扰。若浸提液体积比过小，样品中的色素、黄酮类物质无法大量去除，若浸提液体积比较大，则会造成浸提液的浪费，不绿色环保；本发明浸提后的滤渣A先后经离心、洗涤、干燥，可有效除去滤渣A上残留的干扰物，保证检测精度。步骤3)利用水浸提粗提物，且控制粗提物和水的质量体积比为1：8-10，浸提温度为100℃，浸提时间为3-5h，重复浸提三次，合并浸提液，得到浸提液B，将粗提物中绝大部分粗多糖浸提出，提高茶及其制品中粗多糖含量的检测精度，满足检测的需求，若粗提物和水的质量比减小、温度偏低或浸提时间偏低，将导致粗多糖浸提效率降低，且不能将粗多糖完全浸提出，造成检测结果偏低，若浸提温度过高将造成部分粗多糖结构发生变化，同样会造成检测结果偏低。

经申请人试验验证，采用本发明检测方法，对茶样品中粗多糖的检测精度可达到0.998。

下面结合具体实施方式作进一步的说明。

具体实施方式

实施例1

取老鹰茶叶5g，破碎后，用25ml乙醇进行第一次浸提，浸提温度为室温(25℃)，过夜(12h)，将浸提液及老鹰茶叶采用离心机于3500r/min条件下离心10min，弃去上清液，得到沉淀，加入1倍体积乙醇(5ml)依次洗涤3次，沉淀物干燥后，得到固形物4.5-4.8g，加入15-18ml双蒸水，于沸水中浸提4h，且重复浸提三次，合并浸提液(48ml)，冷却至室温。浸提液中加入大孔树脂25mL，吸附过夜(12h)，弃去大孔树脂，得到多糖母液，加水定容至100mL，取1mL多糖母液，加入苯酚1mL，摇匀后加入浓硫酸8mL，摇匀，于100℃水浴中反应5min，冷却后，495nm测定吸光度为0.214。

绘准葡萄糖浓度标准曲线，在相同条件下，测定495nm吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线图，得到标准曲线：y＝0.0005x+0.0586。将上述吸光度代入标准曲线图，计算得到老鹰茶叶中粗多糖的浓度为30.69％。标准老鹰茶叶中粗多糖含量为30.74％。结果表明，本发明检测方法是一种准确、快速的检测方法。

实施例2

取绿茶粗提物5g，破碎后，用25ml乙醇进行第一次浸提，浸提温度为室温(25℃)，过夜(12h)，将浸提液及绿茶粗提物采用离心机于3500r/min条件下离心10min，弃去上清液，得到沉淀，加入1倍体积乙醇(5ml)依次洗涤3次，沉淀物干燥后，得到固形物4.5-4.8g，加入15-18ml双蒸水，于沸水中浸提4h，且重复浸提三次，合并浸提液(45-55ml)，冷却至室温。浸提液中加入大孔树脂25mL，吸附过夜(12h)，弃去大孔树脂，得到多糖母液，定容至100mL，取1mL多糖母液，加入苯酚1mL，摇匀后加入浓硫酸8mL，摇匀，于100℃水浴中反应5min，冷却后，495nm测定吸光度为0.216。

绘准葡萄糖浓度标准曲线，在相同条件下，测定495nm吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线图y＝0.0005x+0.0586。将上述吸光度代入标准曲线图，计算得到绿茶中粗多糖的浓度为31.08％。标准老鹰茶叶中粗多糖含量为31.14％。结果表明，本发明检测方法是一种准确、快速的检测方法。