一种四氢异喹啉二苯乙烯类化合物及其制备方法、应用

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种四氢异喹啉二苯乙烯类化合物及其制备方法、应用。

背景技术

微管蛋白为微管的基本结构单位，其作为一种异二聚体蛋白，不仅能调节细胞分裂，还具有维持细胞形态、维持细胞器的空间分布、参与细胞内物质的运输等功能。以微管蛋白为靶点的抗肿瘤药物可通过抑制微管蛋白聚合或解离，以干扰细胞的有丝分裂，影响细胞的正常生理功能，使细胞分裂停留在M期。

按微管蛋白抑制剂与微管蛋白结合的位点不同，分为长春碱位点、紫杉醇位点和秋水仙碱位点。长春碱、紫杉醇类微管蛋白抑制剂虽已被用于临床治疗多种肿瘤，但仍存在生物利用度低，毒副作用大等缺点，尤其多重耐药糖蛋白的出现，导致其临床治疗效果受限。另外长春碱、紫杉醇类微管蛋白抑制剂多为天然大分子化合物，合成较困难，来源受限，限制了该类抑制剂进一步开发。相对于长春碱、紫杉醇位点，秋水仙碱位点空腔体积小，相应抑制剂的分子结构简单，代表化合物为秋水仙碱、Combretastatin A-4(CA4)，秋水仙碱为临床抗痛风药，也被应用于肿瘤的治疗，但在体内的代谢物二秋水仙碱具有极强毒性，对消化道刺激性较强，限制了其临床应用；CA4为天然顺式二苯乙烯类化合物，具有明显抑制微管蛋白聚合作用，但因其水溶性差，生物利用度低，易转化为活性低的反式构型，限制了其开发和临床应用。

针对于此，以微管蛋白为靶向，开发高效、低毒、抗耐药，作用于秋水仙碱位点的抑制剂具有十分重要的意义。

发明内容

本发明以CA4为先导化合物，依据分子片段理论和拼合原理设计合成了一类四氢异喹啉二苯乙烯类化合物，该类化合物不仅抗肿瘤活性显著，且结构简单、合成方便，具有良好的开发前景。

本发明第一个目的是提供如通式I和通式II所示的四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐：

其中，R1选自甲基、甲氧基、卤素、硝基；R2选自氢、甲氧基、甲基。

优选地，所述化合物选自：

优选地，所述盐为药学上可接受的碱金属、无机酸或有机酸形成的盐。

更优选地，所述碱金属为钠或钾；所述无机酸为盐酸、硫酸或磷酸；所述有机酸为马来酸、枸橼酸、酒石酸、富马酸或醋酸。

本发明第二个目的是提供一种上述四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的用途。

优选地，所述四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐能够抑制能够抑制肿瘤细胞活性。

更优选地，所述肿瘤细胞为肺癌A549细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌HT-29细胞。

本发明还提供一种药物组合物，其包括上述四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐，及药学上可接受的载体或辅料。

对比现有技术，本发明的有益效果为：

本发明提供的化合物中对A549、MCF-7和HT-29细胞的生长均具有一定的抑制作用，其中部分化合物对A549、MCF-7和HT-29细胞抑制作用均强于阳性对照秋水仙碱。

具体实施方式

下面结合具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。

本发明提供如通式I和通式II所示的四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐：

其中，R

上述四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐能够用于制备抗肿瘤的药物。

本发明还提供一种药物组合物，其包括上述四氢异喹啉二苯乙烯类化合物或其药学上可接受的盐，及药学上可接受的载体或辅料。

该药物组合物可以按照药学上可接受的方法制备成普通片剂、胶囊、缓释片剂、口服液、注射剂等制剂学上常规的制剂形式。

一般地，本发明的化合物用于治疗时，人用剂量范围为1mg～1000mg/天。也可根据剂型的不同和疾病严重程度，使用剂量超出该范围。

下面列举具体实施例对本发明提供的化合物进行详细说明。

实施例1

化合物1：(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-1)的合成

S1、N-(3,4-二甲氧基苯乙基)-4-甲基苯甲酰胺的合成：

将甲苯50mL、4-甲基苯甲酸(4g,29.4mmol)、二氯亚砜20mL依次加入一圆底烧瓶，加热升温至75℃搅拌反应4h，TLC[V(氯仿)：V(甲醇)＝5:1]检测反应完全，减压浓缩，用无水甲苯带蒸3次(20mL/次)，得4-甲基苯甲酰氯，用20mL二氯甲烷溶解备用；

将二氯甲烷60mL、3,4–二甲氧基苯乙胺(5.3g,29.3mmol)、三乙胺6mL加入一圆底烧瓶中，冰浴条件下，将4-甲基苯甲酰氯溶液缓慢加入，加毕后继续反应2.5h，TLC[V(乙酸乙酯)：V(石油醚)＝2:1]检测反应完全，分别用3mol·L

S2、6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成：

将甲苯50mL、N-(3,4-二甲氧基苯乙基)-4-甲基苯甲酰胺(3.0g,10.0mmol)加入一三颈烧瓶，升温至85℃，搅拌下，缓慢加入三氯氧磷(7.0mL,24.2mmol)，加毕后升温至115℃反应7h，TLC[V(乙酸乙酯)：V(石油醚)＝2:1]检测反应完全，浓缩，用乙酸乙酯60mL稀释，转移到分液漏斗，水提(50mL×3)，合并水层，在冰浴条件下用浓氨水调pH＝9～10，静置10min，用CH

将6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-3,4-二氢异喹啉(2.4g,8.5mmol)、40mL无水甲醇加入一圆底烧瓶，冰浴下搅拌，待6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-3,4-二氢异喹啉完全溶解后，分批加入NaBH

S3、(E)-4-苯乙烯基苯甲酸的合成：

将对溴苯甲酸甲酯(0.4g,1.9mmol)、苯乙烯(0.3g,2.9mmol)、醋酸耙(9.0mg,0.04mmol)、三(邻甲基苯基)磷(24.3mg,0.08mmol)、2mL三乙胺和20mL N,N-二甲基甲酰胺加入一圆底烧瓶中，氮气保护下，100℃反应4h,TLC[V(石油醚)：V(乙酸乙酯)＝10:1为展开剂]显示反应基本完全。将反应液降至室温，倒入100mL冰水中，经乙酸乙酯(50mLx3)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤(100mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经硅胶柱分离，无水乙醇重结晶，得白色固体化合物(E)-4-苯乙烯基苯甲酸乙酯0.3g，收率72.7％；

将化合物(E)-4-苯乙烯基苯甲酸乙酯(0.3g，1.3mmol)、85％的甲醇30mL、NaOH(0.1g,2.5mmol)加入在一圆底烧瓶中，常温反应8h，TLC[V(氯仿)：V(甲醇)＝8:1]检测反应完全，用浓盐酸调pH＝2～3，浓缩，经CH

S4、(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-1)的合成：

将甲苯10mL、化合物(E)-4-苯乙烯基苯甲酸(0.23g，1.0mmol)、二氯亚砜0.6mL加入一圆底烧瓶，加热升温至75℃搅拌反应6h，TLC[V(氯仿)：V(甲醇)＝8:1]检测反应完全，减压浓缩，用无水甲苯带蒸3次(20mL/次)，得化合物(E)-4-苯乙烯基苯甲酰氯，用10mLCH

将化合物6,7-二甲氧基-1-(对甲苯基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.3g,1.0mmol)、0.3mL三乙胺、20mL CH

实施例2

化合物2：(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对甲氧苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对甲氧苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-2)白色固体，收率53.4％。m.p.：98.4-99.3。

实施例3

化合物3：(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对氯苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对氯苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-3)白色固体，收率50.6％。m.p.：101.7-103.2。

实施例4

化合物4：(E)-(6,7-二甲氧基-1-(3,4二甲氧苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(6,7-二甲氧基-1-(3,4二甲氧苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-4)白色固体，收率58.4％。m.p.：93.5-95.6。

实施例5

化合物5：(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对硝基苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(6,7-二甲氧基-1-(对硝基苯基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)(4-苯乙烯基苯基)甲酮(BY-5)白色固体，收率54.7％。m.p.：92.7-94.1。

实施例6

化合物6：(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对甲苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对甲苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮(BY-6)白色固体，收率64.8％。m.p.：98.5-101.2。

实施例7

化合物7：(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对甲氧苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对甲氧苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮(BY-7)白色固体，收率59.6％。m.p.：100.5-102.1。

实施例8

化合物8：(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对氯苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(对氯苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮(BY-8)白色固体，收率55.1％。m.p.：125.4-127.1。

实施例9

化合物9：(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(3,4-二甲氧苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮的合成

合成反应步骤：按实施例1方法操作制得(E)-(4-苯乙烯基苯基)(5-(3,4-二甲氧苯基)-7,8-二氢-[1,3]二氧杂环[4,5-g]异喹啉-6(5H)-基)甲酮(BY-9)白色固体，收率60.5％。m.p.：98.9-100.4。

下面是本发明化合物的药效学试验及结果：

实验方法：SRB法检测。

细胞株：肺癌A549细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌HT-29细胞。

具体操作步骤：分别将对数生长期的各细胞消化后，吹打成单细胞悬液，以1×10

表1本发明化合物对肺癌A549细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌HT-29细胞增殖抑制活性

结果显示，本发明提供的化合物中对A549、MCF-7和HT-29生长均表现出一定的抑制作用。其中化合物5对A549、MCF-7和HT-29细胞抑制作用均强于阳性对照秋水仙碱；化合物2、化合物7对MCF-7细胞抑制作用亦强于阳性对照秋水仙碱。

以上公开的仅为本发明的几个具体实施例，但是，本发明实施例并非局限于此，任何本领域的技术人员能思之的变化都应落入本发明的保护范围。