用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法
文献发布时间：2023-06-19 16:06:26
技术领域
本发明涉及二氢槲皮素技术领域，具体涉及一种用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法。
背景技术
二氢槲皮素是一种具有显著抗氧化作用的天然药物，可作为医药主辅原料及食品生物活性添加剂而广泛应用于药品、保健功能食品中。在医药、工业和农业领域均有广泛应用。二氢槲皮素属二氢黄酮类化合物，维生素P族，是一种强抗氧化剂，在天然抗氧化剂中对自由基的吸附可达32μmol/mg(二氢槲皮素纯度95％)，二氢槲皮素作为一种天然抗氧剂对于自由基的清除对延长细胞寿命方面有显著作用，可以预期，二氢槲皮素具有较强的生物活性和药用价值。在相关技术中，目前在不同条件下提取的二氢槲皮素的所得到纯度存在一定差异，导致提取率低且纯度难以准确确定。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法，包括：
S10、将具有纤维素酶的酶和预定粒度的落叶松粉末进行混合酶解，得到落叶松酶解液；
S20、采用所述落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按1-5:3-10的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取62-100分钟，得到萃取液；
S30、将所述萃取液放入高压釜中加压并进行加热，在所述萃取液结晶后得到二氢槲皮素；
S40、将结晶后的二氢槲皮素通过红外光谱进行测定，将纯度大于90％以上进行筛选以得到二氢槲皮素精制品。
可选地，所述步骤S10包括：
提供落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将所述具有纤维素酶的酶和所述混合液进行混合酶解2-2.5小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心5-10分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液。
可选地，所述预定粒度为0.11mm-0.16mm。
可选地，所述超声波萃取仪的频率为5MHZ，且脉冲周期频率5次/秒，声束为1000米/秒。
可选地，所述步骤S30包括：
将所述萃取液放入高压釜内，并加压至550-580Mpa；
在所述萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将所述萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待所述萃取液冷却后在温度23-28℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素。
可选地，所述步骤S40包括：
将结晶后的二氢槲皮素选择5个样本，并在每个样本中选择2-7g溶于 99.5％乙醇中；
采用预定波长的红外光谱对每个样本进行测定，确定出每个样本的吸光强度；
根据每个样本的吸光强度筛选出纯度大于90％以上的二氢槲皮素精制品。
可选地，所述预定波长为235nm-270nm。
可选地，所述纤维素酶的用量为所述落叶松粉末的总质量的2.5-2.9％；所述纤维素酶的酶活力≥6万u/g。
本发明提供的用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法，首先将具有纤维素酶的酶和预定粒度的落叶松粉末进行混合酶解，得到落叶松酶解液；并采用所述落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按1-5:3-10的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取62-100分钟，得到萃取液；然后将所述萃取液放入高压釜中加压并进行加热，在所述萃取液结晶后得到二氢槲皮素；最后将结晶后的二氢槲皮素通过红外光谱进行测定，将纯度大于90％以上进行筛选以得到二氢槲皮素精制品。由此在不同条件下提取的二氢槲皮素的所得到纯度能够准确测定，进而提升其提取率且纯度可以准确确定。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下面详细描述本发明实施例的用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法。
根据本发明提供的用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法，以下第一实施例至第五实施例采用了不同条件下制备得到二氢槲皮素，并对不同条件下得到的二氢槲皮素的纯度进行测定。
第一实施例
本发明第一实施例中提供的桑黄提取物制备方法，包括：
提供0.12nm粒度的落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将具有纤维素酶的酶和混合液进行混合酶解2小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心6分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液；
采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按1:4的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取67分钟，得到萃取液；
将萃取液放入高压釜内，并加压至550Mpa；
在萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待萃取液冷却后在温度24℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素；
将结晶后的二氢槲皮素作为样本，并选择3g溶于99.5％乙醇中；
采用240nm的红外光谱对该样本进行测定，确定出对应的吸光强度。
第二实施例
本发明第二实施例中提供的二氢槲皮素的提取方法，包括：
提供0.14nm粒度的落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将具有纤维素酶的酶和混合液进行混合酶解2小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心8分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液；
采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按2:9的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取80分钟，得到萃取液；
将萃取液放入高压釜内，并加压至570Mpa；
在萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待萃取液冷却后在温度27℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素；
将结晶后的二氢槲皮素作为样本，并选择3g溶于99.5％乙醇中；
采用240nm的红外光谱对该样本进行测定，确定出对应的吸光强度。
第三实施例
本发明第三实施例中提供的二氢槲皮素的提取方法，包括：
提供0.11nm粒度的落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将具有纤维素酶的酶和混合液进行混合酶解2小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心8分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液；
采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按3:10的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取75分钟，得到萃取液；
将萃取液放入高压釜内，并加压至570Mpa；
在萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待萃取液冷却后在温度27℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素；
将结晶后的二氢槲皮素作为样本，并选择6g溶于99.5％乙醇中；
采用240nm的红外光谱对该样本进行测定，确定出对应的吸光强度。
第四实施例
本发明第四实施例中提供的二氢槲皮素的提取方法，包括：
提供0.15nm粒度的落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将具有纤维素酶的酶和混合液进行混合酶解2.5小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心8分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液；
采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按2:7的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取90分钟，得到萃取液；
将萃取液放入高压釜内，并加压至580Mpa；
在萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待萃取液冷却后在温度25℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素；
将结晶后的二氢槲皮素作为样本，并选择6g溶于99.5％乙醇中；
采用240nm的红外光谱对该样本进行测定，确定出对应的吸光强度。
第五实施例
本发明第五实施例中提供的二氢槲皮素的提取方法，包括：
提供0.11nm粒度的落叶松粉末和去离子水按1:15的比例进行混合，得到混合液；
将具有纤维素酶的酶和混合液进行混合酶解2.5小时，并加入离心机中以在6000r/min的旋转速度中离心10分钟；
在离心完成后，将上清液进行收集以得到落叶松酶解液；
采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按1:9的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取90分钟，得到萃取液；
将萃取液放入高压釜内，并加压至580Mpa；
在萃取液保持压力状态12分钟后减压，并将萃取液升温至92℃，同时保持持续搅拌；
待萃取液冷却后在温度25℃的条件下静置4天，以得到结晶的二氢槲皮素；
将结晶后的二氢槲皮素作为样本，并选择6g溶于99.5％乙醇中；
采用240nm的红外光谱对该样本进行测定，确定出对应的吸光强度。
结合下表及上述第一实施例至第五实施例，测试结果如下表所示。
由上表第一实施例至第五实施例对比可知，在第五实施例中，在落叶松粉末的粒度越小，且压强越大时，所对应的吸光强度越高，即对应的纯度越高，因此可以采用第五实施例中的条件进行二氢槲皮素的提取，由此可以提升其提取率。
本发明提供的用于抗癌抗氧化抗心脑血管疾病的二氢槲皮素制备方法，首先将具有纤维素酶的酶和预定粒度的落叶松粉末进行混合酶解，得到落叶松酶解液；并采用落叶松酶解液和81％浓度的乙醇溶液按1-5:3-10的比例进行混合后，将得到的混合液置入超声波萃取仪内进行萃取62-100分钟，得到萃取液；然后将萃取液放入高压釜中加压并进行加热，在萃取液结晶后得到二氢槲皮素；最后将结晶后的二氢槲皮素通过红外光谱进行测定，将纯度大于90％以上进行筛选以得到二氢槲皮素精制品。由此在不同条件下提取的二氢槲皮素的所得到纯度能够准确测定，进而提升其提取率且纯度可以准确确定。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是在本发明的发明构思下，直接/间接运用在其他相关的技术领域均包括在本发明的专利保护范围内。