一种病毒消杀用的复合酶制剂及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于卫生防护技术领域，尤其涉及一种病毒消杀用的复合酶制剂及其制备方法与应用。

背景技术

目前，病毒的传播方式有多种，容易造成感染的传播方式包括接触传播、飞沫传播、气溶胶传播、粪口传播等等。为了减少各种传播风险，通常需要对空气环境、医疗废弃物、患者的生活污水、粪尿等进行病毒消杀处理。但是，现有的消毒剂或稳定性差、易于分解，或具有较强的刺激性、腐蚀性，或不适于复杂成分背景的病毒消杀处理，或容易造成新的环境污染，应用范围和效果均较为局限。因此，亟需一种新的病毒消杀用的复合酶制剂及其制备方法。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有的消毒剂或稳定性差、易于分解，或具有较强的刺激性、腐蚀性，或不适于复杂成分背景的病毒消杀处理，或容易造成新的环境污染，应用范围和效果均较为局限。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种病毒消杀用的复合酶制剂及其制备方法与应用。

本发明是这样实现的，一种病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法，所述病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法包括以下步骤：

步骤一，进行菌种培养基的制备：按照质量份数称取白糖40～50份、琼脂30～40份、胡萝卜粉20～25份、磷酸氢二钾15～20份、硫酸镁8～12份和消泡剂4～8份；取1000ml水，在水中依次加入白糖、琼脂和胡萝卜粉，搅拌均匀并进行加热，得到溶解液；将溶解液冷却至室温，加入磷酸氢二钾、硫酸镁和消泡剂，再次搅拌均匀得到培养液；于110～120℃条件下对培养液进行20～30min灭菌，冷却，得到菌种培养基；

步骤二，对米曲霉的纯菌种进行培养：将制备的菌种培养基置于斜面试管中并将斜面试管置于斜面试管架上进行放置，所述斜面试管的规格为15cm×15mm；在无菌环境下，挑取米曲霉的纯菌种接入到菌种培养基中，于20～25℃的恒温条件下进行菌种的培养，培养时间为10～15天，培养结束后得到斜面试管菌种；

步骤三，使用培养得到的斜面试管菌种进行种曲的培养：在无菌环境下，将培养得到的斜面试管中的菌种培养基上的菌种划分为小块，得到菌种块，所述菌种块的长度为1.8～2.2mm，宽度均为1.8～2.2mm；将划分得到的菌种块接种于添加有培养物质的木盒培养器皿中，制得种曲；所述培养物质由琼脂、蛋白胨、麦芽汁组成；

步骤四，使用制备的种曲进行固体发酵培养：在无菌环境下，将制备的种曲接种到发酵罐中的菌种培养基上进行培养；在培养过程中进行通风发酵，所述通风发酵包括：往发酵罐中通入净化的空气，并设置通风量为1：0.6；将发酵罐放置于摇床上，并设置摇床的转速为145～160r/min；通入净化空气后的压力为0.2～0.3MPa，于温度20～24℃的条件下培养80～120h，完成通风发酵；对发酵产物进行化验检测，化验检测结构显示达到预设标准的发酵产物即为米曲霉培养物；

步骤五，将制备的米曲霉培养物干燥粉碎后，依次加入复合酶、酶稳定剂、防腐剂以及助剂，搅拌均匀后，灭菌冷却，所述灭菌冷却的方法包括：将搅拌得到的混合物进行常压蒸料；其中，所述常压蒸料是将所述混合物于120～125℃和0.1MPa～0.15MPa的条件下灭菌3～5h；常压蒸料后，将混合物进行高压蒸料；其中，所述高压蒸料是将所述混合物于110℃和80～120MPa的条件下灭菌2～3h；进行蒸料灭菌后，冷却至室温，完成灭菌冷却；得到所述病毒消杀用的复合酶制剂成品。

本发明的另一目的在于提供一种应用所述病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法制备的病毒消杀用的复合酶制剂，所述病毒消杀用的复合酶制剂按照质量份数计，由米曲霉培养物30～50份、复合酶40～60份、酶稳定剂10～15份、防腐剂6～8份以及助剂3～5份组成。

进一步，所述复合酶以酶的活性单位unit计，由蛋白酶K、角蛋白酶、氨肽酶、胰蛋白酶、广谱核酸酶、溶菌酶、蛋白水解酶、葡萄球菌酶以及过氧化物酶按照(40～1000)：(40～1000)：(30～100)：(30～100)：(10～100)：(10～100)：(5～100)：(0.1～100)：(0.1～50)的比例组成。

进一步，所述核酸酶和所述溶菌酶经包囊材料包被；其中，所述包囊材料包括麦芽糊精和壳聚糖且所述包囊材料中的麦芽糊精和壳聚糖用量比为(2～5)：1。

进一步，所述酶稳定剂质量组成比为：丙三醇：丙二醇：硼酸＝800：300：1。

进一步，所述防腐剂为丙酸钙，所述助剂包括乙醇、香精和色素。

本发明的另一目的在于提供一种所述的病毒消杀用的复合酶制剂在物品或环境病毒消杀中的应用，所述物品包括纺织品，所述环境包括室内环境和室外环境。

进一步，所述病毒消杀用的复合酶制剂在环境病毒消杀中的应用包括：垃圾处理、粪尿处理、空气处理或污水处理。

进一步，所述病毒包括：泡沫病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、鼠干细胞病毒、人类免疫缺陷病毒、SARS病毒、冠状病毒家族成员、人类肺炎后病毒、caraparu关节炎脑炎病毒和Epstein-Bar病毒。

进一步，所述病毒消杀用的复合酶制剂的应用方法，包括：

向所述复合酶制剂中加入灭菌蒸馏水，溶解成酶液，待用；

使用设备使空气通过酶液进行病毒消杀；其中，所述设备为喷淋塔。

结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明提供的病毒消杀用的复合酶制剂添加溶菌酶，利用溶菌酶破坏杂菌的细胞结构，能够实现低热短时间彻底杀菌，可以减少消杀药物的使用量，甚至完全去除消杀药物的使用，可直接用于各种物品、环境的病毒消杀，使用安全方便，消杀效果显著。本发明提供的病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法简单，仅是菌种的培育以及发酵，能够实现病毒消杀用的复合酶制剂的制备成本的降低。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法流程图。

图2是本发明实施例提供的进行菌种培养基的制备流程图。

图3是本发明实施例提供的进行通风发酵流程图。

图4是本发明实施例提供的灭菌冷却流程图。

图5是本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂的应用方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种病毒消杀用的复合酶制剂及其制备方法与应用，下面结合附图对本发明作详细的描述。

如图1所示，本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂的制备方法包括以下步骤：

S101，对米曲霉的纯菌种进行培养：进行菌种培养基的制备，将制备的菌种培养基置于斜面试管中并将斜面试管置于斜面试管架上进行放置，所述斜面试管的规格为15cm×15mm；在无菌环境下，挑取米曲霉的纯菌种接入到菌种培养基中，于20～25℃的恒温条件下进行菌种的培养，培养时间为10～15天，培养结束后得到斜面试管菌种。

S102，使用培养得到的斜面试管菌种进行种曲的培养：在无菌环境下，将培养得到的斜面试管中的菌种培养基上的菌种划分为小块，得到菌种块，所述菌种块的长度为1.8～2.2mm，宽度均为1.8～2.2mm；将划分得到的菌种块接种于添加有培养物质的木盒培养器皿中，制得种曲；所述培养物质由琼脂、蛋白胨、麦芽汁组成。

S103，使用制备的种曲进行固体发酵培养：在无菌环境下，将制备的种曲接种到发酵罐中的菌种培养基上进行培养；在培养过程中进行通风发酵；对发酵产物进行化验检测，化验检测结构显示达到预设标准的发酵产物即为米曲霉培养物。

S104，将制备的米曲霉培养物干燥粉碎后，依次加入复合酶、酶稳定剂、防腐剂以及助剂，搅拌均匀后，灭菌冷却，得到所述病毒消杀用的复合酶制剂成品。

如图2所示，本发明实施例提供的进行菌种培养基的制备，包括：

S201，按照质量份数称取白糖40～50份、琼脂30～40份、胡萝卜粉20～25份、磷酸氢二钾15～20份、硫酸镁8～12份和消泡剂4～8份。

S202，取1000ml水，在水中依次加入白糖、琼脂和胡萝卜粉，搅拌均匀并进行加热，得到溶解液。

S203，将溶解液冷却至室温，加入磷酸氢二钾、硫酸镁和消泡剂，再次搅拌均匀得到培养液。

S204，于110～120℃条件下对培养液进行20～30min灭菌，冷却，得到菌种培养基。

如图3所示，本发明实施例提供的进行通风发酵，包括：

S301，往发酵罐中通入净化的空气，并设置通风量为1：0.6。

S302，将发酵罐放置于摇床上，并设置摇床的转速为145～160r/min。

S303，通入净化空气后的压力为0.2～0.3MPa，于温度20～24℃的条件下培养80～120h，完成通风发酵。

如图4所示，本发明实施例提供的灭菌冷却，包括：

S401，将搅拌得到的混合物进行常压蒸料；其中，所述常压蒸料是将所述混合物于120～125℃和0.1MPa～0.15MPa的条件下灭菌3～5h。

S402，常压蒸料后，将混合物进行高压蒸料；其中，所述高压蒸料是将所述混合物于110℃和80～120MPa的条件下灭菌2～3h。

S403，进行蒸料灭菌后，冷却至室温，完成灭菌冷却。

本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂按照质量份数计，由米曲霉培养物30～50份、复合酶40～60份、酶稳定剂10～15份、防腐剂6～8份以及助剂3～5份组成。

本发明实施例提供的复合酶以酶的活性单位unit计，由蛋白酶K、角蛋白酶、氨肽酶、胰蛋白酶、广谱核酸酶、溶菌酶、蛋白水解酶、葡萄球菌酶以及过氧化物酶按照(40～1000)：(40～1000)：(30～100)：(30～100)：(10～100)：(10～100)：(5～100)：(0.1～100)：(0.1～50)的比例组成。

本发明实施例提供的核酸酶和所述溶菌酶经包囊材料包被；其中，所述包囊材料包括麦芽糊精和壳聚糖且所述包囊材料中的麦芽糊精和壳聚糖用量比为(2～5)：1。

本发明实施例提供的酶稳定剂质量组成比为：丙三醇：丙二醇：硼酸＝800：300：1。

本发明实施例提供的防腐剂为丙酸钙，所述助剂包括乙醇、香精和色素。

本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂在环境病毒消杀中的应用包括：垃圾处理、粪尿处理、空气处理或污水处理。

本发明实施例提供的病毒包括：泡沫病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、鼠干细胞病毒、人类免疫缺陷病毒、SARS病毒、冠状病毒家族成员、人类肺炎后病毒、caraparu关节炎脑炎病毒和Epstein-Bar病毒。

如图5所示，本发明实施例提供的病毒消杀用的复合酶制剂的应用方法，包括：

S501，向所述复合酶制剂中加入灭菌蒸馏水，溶解成酶液，待用；

S502，使用设备使空气通过酶液进行病毒消杀；其中，所述设备为喷淋塔。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。