基于微藻培养的培养液制备方法

技术领域

本发明属于藻类培养技术领域，特别涉及基于微藻培养的培养液制备方法。

背景技术

微藻是指那些在显微镜下才能辨别其形态的微小的藻类群体。微藻通常是指含有叶绿素a并能进行光合作用的微生物的总称，属于原生生物的一种。目前应用生物技术进行大量培养或生产的微藻分属于四个藻门：蓝藻门、绿藻门、金藻门和红藻门；

而传统的微藻培养液制备时培养池的温度等培养条件很难控制，不能为微藻提供理想的培养条件，而且工序繁杂，成本高，同时大部分的培养液均在制备过程中添加了有机溶液，使其产生化学的副产物，容易对环境产生一定的污染，给使用带来不便，为此，我们提出基于微藻培养的培养液制备方法。

发明内容

本发明的主要目的在于提供基于微藻培养的培养液制备方法，可以有效解决背景技术中的问题。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

基于微藻培养的培养液制备方法，该基于微藻培养的培养液制备方法包括以下步骤：

步骤一、进行藻类表面清洗和预处理，首先去养殖好的藻棚内挑选一批新鲜的藻类，而后对挑选的藻类进行清洗，使其去泥和去根，再将洗干净的藻类烘干，烘干后对藻类进行切割，得到干净的新鲜藻类；

步骤二、粉碎处理，先将切断的藻类放置在粉碎机内进行粉碎，粉碎后的藻类粒径为10-15um，而后再将粉碎的藻类加入水进行搅拌，搅拌均匀后，浸提3-10h，浸提温度为25-30℃，加入的水与藻类的重量比为1:15-1:25，得到藻类浓浆；

步骤三、酶解处理，将得到的藻类浓浆中按照重量0.3％添加ppc复合酶，而后在温度条件为50-55℃下进行酶解反应，酶解反应结束后进行灭酶，其次进行过滤，得到沉淀物和过滤液；

步骤四、进行提取，将得到的沉淀物通过超声设备进行提取，得到藻类浸提液，而后通过离心机离心后取上清液即可，其次再将取得的上清液进行减压过滤，得到藻类浓缩液；

步骤五、进行高压高温处理，将得到的藻类浓缩液放入夹层锅内进行蒸煮，温度加热至80-90℃，压力为5-10Pa，而后静置60-180min，即可完成微藻培养的培养液制备，最终得到品质好的藻类培养液；

优选的，步骤一中清洗时先将藻类置于碱水池中漂洗10-20min，而后再将藻类放置在清水池中清洗3-5次，每次清洗时长为5-8min，清洗完成后放入切片机中进行切割。

优选的，步骤一中烘干时，将洗干净的藻类放置在烘烤箱中，烘烤温度设置为25-40℃，烘烤时长为3-5min。

优选的，步骤四中离心机的转速为2000r/min。

优选的，步骤三中PPC复合酶选用纤维解酶、果胶水解酶、蛋白水解酶中的一种或任意两种的组合，酶解过程中PH控制在6-7.5，酶解时长为120-150min。

优选的，步骤四中减压浓缩是在45-60℃的条件下将过滤液与上清液浓缩至原来体积的10％-20％。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：该基于微藻培养的培养液制备方法，通过清洗、粉碎、酶解、提取以及高温高压的处理步骤，使得制备过程中不使用有机溶剂，因此不产生化学副产物，避免环境污染问题，同时制得培养液中营养全面，能够提供藻类生长环境中所需要的各类元素，有效的促进藻类的生长，从而提高藻类的品质和产量，方法简单，而且成本低，适用于大规模生产藻类，具有循环经济价值。

具体实施方式

为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

实施例1

制备时，首先进行表面清洗和预处理，首先去养殖好的藻棚内挑选一批新鲜的藻类，而后对挑选的藻类进行清洗，使其去泥和去根，清洗时先将藻类置于碱水池中漂洗15min，而后再将藻类放置在清水池中清洗3次，每次清洗时长为5min，清洗完成后放入切片机中进行切割，再将洗干净的藻类烘干，将洗干净的藻类放置在烘烤箱中，烘烤温度设置为30℃，烘烤时长为3min，烘干后对藻类进行切割，得到干净的新鲜藻类；而后粉碎处理，先将切断的藻类放置在粉碎机内进行粉碎，粉碎后的藻类粒径为10um，而后再将粉碎的藻类加入水进行搅拌，搅拌均匀后，浸提5h，浸提温度为28℃，加入的水与藻类的重量比为1:15，得到藻类浓浆；再进行酶解处理，将得到的藻类浓浆中按照重量0.3％添加ppc复合酶，PPC复合酶选用纤维解酶、果胶水解酶、蛋白水解酶中的一种或任意两种的组合，酶解过程中PH控制在6.5，酶解时长为120min，而后在温度条件为50℃下进行酶解反应，酶解反应结束后进行灭酶，其次进行过滤，得到沉淀物和过滤液；其次进行提取，将得到的沉淀物通过超声设备进行提取，得到藻类浸提液，而后通过离心机离心后取上清液即可，离心机的转速为2000r/min，其次再将取得的上清液进行减压过滤，减压浓缩是在45℃的条件下将过滤液与上清液浓缩至原来体积的15％，得到藻类浓缩液；最后进行高压高温处理，将得到的藻类浓缩液放入夹层锅内进行蒸煮，温度加热至80℃，压力为8Pa，而后静置100min，即可完成微藻培养的培养液制备；

取经过在一段时间于培养液内培养的微藻样品，对其进行观测，藻体方正，藻体长11um，宽7um，厚3.5um，能快速活泼游动。

实施例2

制备时，首先进行表面清洗和预处理，首先去养殖好的藻棚内挑选一批新鲜的藻类，而后对挑选的藻类进行清洗，使其去泥和去根，清洗时先将藻类置于碱水池中漂洗20min，而后再将藻类放置在清水池中清洗5次，每次清洗时长为8min，清洗完成后放入切片机中进行切割，再将洗干净的藻类烘干，将洗干净的藻类放置在烘烤箱中，烘烤温度设置为40℃，烘烤时长为5min，烘干后对藻类进行切割，得到干净的新鲜藻类；而后粉碎处理，先将切断的藻类放置在粉碎机内进行粉碎，粉碎后的藻类粒径为15um，而后再将粉碎的藻类加入水进行搅拌，搅拌均匀后，浸提5h，浸提温度为30℃，加入的水与藻类的重量比为1:25，得到藻类浓浆；再进行酶解处理，将得到的藻类浓浆中按照重量0.3％添加ppc复合酶，PPC复合酶选用纤维解酶、果胶水解酶、蛋白水解酶中的一种或任意两种的组合，酶解过程中PH控制在7，酶解时长为130min，而后在温度条件为55℃下进行酶解反应，酶解反应结束后进行灭酶，其次进行过滤，得到沉淀物和过滤液；其次进行提取，将得到的沉淀物通过超声设备进行提取，得到藻类浸提液，而后通过离心机离心后取上清液即可，离心机的转速为2000r/min，其次再将取得的上清液进行减压过滤，减压浓缩是在55℃的条件下将过滤液与上清液浓缩至原来体积的20％，得到藻类浓缩液；最后进行高压高温处理，将得到的藻类浓缩液放入夹层锅内进行蒸煮，温度加热至85℃，压力为10Pa，而后静置120min，即可完成微藻培养的培养液制备；

取经过在一段时间于培养液内培养的微藻样品，对其进行观测，藻体方正，藻体长15um，宽9um，厚4.0um，能快速活泼游动。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。