一种用HPLC分析及制备叔丁基亚磺酰胺对映异构体的方法

技术领域

本申请涉及一种色谱分析分离方法，尤其是一种用HPLC分析及制备 叔丁基亚磺酰胺对映异构体的方法。

背景技术

大多数药物及合成化合物都含有手性胺官能团。因此，手性胺类化合 物的不对称合成应用极为广泛。叔丁基亚磺酰胺是一种物理、化学和光学 性质均稳定的新型手性化合物，其作为手性胺的引入剂引起了许多化学家 的关注。例如：学术报道中在紫杉醇的合成和抗过敏性药物盐酸西替利嗪 的合成中均有应用等。临床及上市新药中也越来越多采用手性叔丁基亚磺 酰胺作为构建手性胺的助剂。叔丁基亚磺酰胺作为手性辅剂，主要有以下优点：(1)易于与各类醛或酮形成亚胺；(2)由于叔丁基亚磺酰基的活化 作用，生成的亚胺亲电性更强，更易于与亲核试剂反应或被金属硼试剂还 原，诱导出高的非对映选择性；(3)在加成产物中，叔丁基亚磺酰基也是 一个很好的保护基团，能够耐受反应中的强碱、过渡金属等；(4)酸性条 件下，叔丁基亚磺酰基容易脱去，所得盐酸盐可用醚类溶剂纯化。因而光 学纯的叔丁基亚磺酰胺以及衍生物广泛用于合成手性药物和天然产物，同 时也可作为手性配体诱导催化不对称合成反应。

获得单一手性化合物可通过不对称合成获得，也可由消旋体拆分得 到。在消旋体手性拆分技术中，高效液相色谱法(HPLC)被公认为是一 种强大、快速、高效的分离技术，它已成功应用于对映体药物的分离分析 和制备中。

手性叔丁基亚磺酰胺，英文名为2-methylpropane-2-sulfinamide，分子 式为(CH

图中A为(S)-叔丁基亚磺酰胺，B为(R)-叔丁基亚磺酰胺。

近年来涌现了大量有关光学纯的叔丁基亚磺酰胺的创新合成方法，但 用高效液相色谱法对叔丁基亚磺酰胺两种对映异构体分析分离方法仍鲜 见相关报道。建立一种能够简单、快速、高效的分析及制备叔丁基亚磺酰 胺两种对映异构体的方法，实现对其质量的控制，是目前需要解决的技术 问题。

近年来涌现了大量有关光学纯的叔丁基亚磺酰胺的创新合成方法，但 用高效液相色谱法对叔丁基亚磺酰胺两种对映异构体分析分离方法仍鲜 见相关报道。建立一种能够简单、快速、高效的分析及制备叔丁基亚磺酰 胺两种对映异构体的方法，实现对其质量的控制，是目前需要解决的技术 问题

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供了一种应用手性固定 相的液相色谱方法为叔丁基亚磺酰胺两种对映异构体进行分析及制备，进 而实现对其进行质量控制及单一对映体的制备。

根据本申请的一个方面，提供了一种用HPLC分析及制备叔丁基亚磺 酰胺对映异构体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将含有(RS)-叔丁基亚磺酰胺的样品用HPLC法进行分析和/或制备， 采用正相色谱法；以硅胶表面涂覆纤维素衍生物作为手性固定相，以烷烃 和低级醇及其酯的混合溶液作为流动相。

可选地，所述手性固定相选自硅胶表面涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基 氨基甲酸酯)手性固定相、硅胶表面涂覆纤维素-三(对甲基苯甲酸酯)手 性固定相中的一种。

可选地，所述烷烃选自正己烷、环己烷、正庚烷中的至少一种；所述 低级醇及其酯选自异丙醇、乙醇、乙酸乙酯中的至少一种。

可选地，所述流动相中，烷烃和低级醇及其酯的体积比为85:15～ 99.5:0.5。

可选地，所述流动相中，烷烃和低级醇及其酯的体积比为88:12～99:1。

可选地，所述流动相中，烷烃和低级醇及其酯的体积比上限选自 88:12、90:10、92:8、93:7、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或99.5:0.5；下 限选自85:15、88:12、90:10、92:8、93:7、95:5、96:4、97:3、98:2或99:1。

可选地，在进行HPLC检测时，柱温为10℃～40℃，进样量为5～15uL， 检测波长为200～250nm；流动相的流速为0.3～2.5mL/min。

可选地，在进行叔丁基亚磺酰胺对映异构体制备时，柱温为10℃～ 40℃，进样量为1～10mL，检测波长为200～250nm；流动相的流速为5～ 30mL/min。

可选地，在进行HPLC检测或制备前，还包括将所述(RS)-叔丁基亚磺 酰胺样品用异丙醇溶解的过程。

可选地，所述含有(RS)-叔丁基亚磺酰胺的样品用异丙醇溶解后的浓度 为0.5～10mg/mL。

可选地，所述含有(RS)-叔丁基亚磺酰胺的样品是指包含R-叔丁基亚 磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的混合物。

所述的分析方法包括以下步骤：

(1)R-叔丁基亚磺酰胺及S-叔丁基亚磺酰胺对照品用异丙醇溶解， 配置成浓度为0.5mg/mL的对照品溶液

(2)(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品用异丙醇溶解，配制成(RS) -叔丁基亚磺酰胺浓度为1mg/mL的工业供试品溶液，进样量为5～10μL；

(3)设置烷烃和低级醇及其酯两种混合溶剂的比例为85:15～ 99.5:0.5，设置液相色谱柱温箱温度为30℃，检测波长为220nm，流速为 0.5～1mL/min；

(4)吸取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)- 叔丁基亚磺酰胺工业供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及 其对映异构体的分析；

所述的制备方法包括以下步骤：

(1)R-叔丁基亚磺酰胺及S-叔丁基亚磺酰胺对照品分别用异丙醇溶解， 配制成浓度为1mg/mL的对照品溶液；

(2)(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品用异丙醇溶解，配制成浓度为 5mg/mL的工业供试品溶液；进样量为1～10mL；

(3)设置烷烃和低级醇及其酯两种混合溶剂的比例为85:15～99.5:0.5， 检测波长为220nm，流速为5～30ml/min；

(4)吸取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁 基亚磺酰胺工业供供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥， 完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的制备。

实验结果表明：采用硅胶表面涂覆有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲 酸酯)和纤维素-三(对基苯甲酸酯)的手性色谱柱，采用正己烷-异丙醇 (85:15)，正庚烷-异丙醇，环己烷-异丙醇混合剂的流动相，选用较优的 波长，提高色谱峰的对称性，取得较好的分离效果。其中采用硅胶表面涂 覆有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的手性色谱柱能够实现(RS)-叔 丁基亚磺酰胺的基线分离，采用硅胶表面涂覆有纤维素-三(对基苯甲酸酯) 的手性色谱柱具有较好的分离效果，分离度大于5.9。

可见，本发明克服了现有技术的不足，解决了叔丁基亚磺酰胺对映异 构体的分析分离问题，能够快速、准确和高效分析分离叔丁基亚磺酰胺对 映异构体，有效控制叔丁基亚磺酰胺的质量，得到光学纯的叔丁基亚磺酰 胺。

因此，本发明开发的一种通过正相色谱法高效分析分离叔丁基亚磺酰 胺异构体的HPLC方法是十分必要的。

本申请能产生的有益效果包括：

(1)本发明采用手性固定相的液相色谱法对叔丁基亚磺酰胺对映异 构体进行分析分离，其方法操作简单、准确和高效，能够有效控制叔丁基 亚磺酰胺的质量，得到光学纯的叔丁基亚磺酰胺；

(2)在本发明提供的方法的基础上，采用合适的手性色谱柱、流动 相、进样量和波长，可确保得到光学纯的叔丁基亚磺酰胺，提高了色谱峰 的对称性，具有较好的分离效果。

(3)本发明使用的两类手性色谱柱，尤其是硅胶表面涂覆有纤维素- 三(对甲基苯甲酸酯)的手性色谱柱，分离度更高，具有更好的分离效果。

附图说明

图1为实施例1的HPLC图，色谱条件：实验室自制OD-H(250mm*4. 6mm，5.0μm)；流动相：正己烷-异丙醇(98:2)；

图2为实施例2的HPLC图，色谱条件：实验室自制OD-H (250mm*4.6mm，5.0μm)；流动相：正庚烷-乙醇(97:3)；

图3为实施例3的HPLC图，色谱条件：实验室自制OJ-H (150mm*4.6mm，5.0μm)；流动相：正己烷-乙醇(90:10)；

图4为实施例5的HPLC图，色谱条件：实验室自制OJ-H (150mm*4.6mm，5.0μm)；流动相：环己烷-异丙醇(85:15)；

图5为实施例6的HPLC图，色谱条件：实验室自制OJ-H (150mm*4.6mm，5.0μm)；流动相：正庚烷-乙酸乙酯(93:7)；

图6为实施例8的HPLC图，色谱条件：实验室自制OJ-H (150mm*4.6mm，5.0μm)；流动相：正己烷-异丙醇(96:4)。

具体实施方式

下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。

如无特别说明，本申请的实施例中的原料均通过商业途径购买。

本申请的实施例中分离性能的评价是在日本岛津公司生产的LC-2030 型高效液相色谱仪上进行。该仪器配备了附有5路脱气单元的四元低压梯 度输液泵、自动进样器、强制空气循环式柱温箱以及UV检测器，工作站 为LabSolutions。分离度通过工作站软件计算得到。

色谱柱OD-H为实验室自制，为硅胶表面涂覆有纤维素-三(3,5-二甲基 苯基氨基甲酸酯)的手性色谱柱，制备方法为以微晶纤维素和3,5-二甲基苯 基异氰酸酯为原料合成在吡啶中反应生成纤维素-三(对甲基苯甲酸酯)衍 生物，将其涂覆到大孔硅胶上制得手性固定相，将其分散于含有正己烷与 异丙醇(正己烷/异丙醇，90/10，v/v)的混合溶液中，超声十分钟后，在 40MPa下以正己烷作为顶替液装到空的不锈钢柱管中。

色谱柱OJ-H为实验室自制，为硅胶表面涂覆有纤维素-三(对甲基苯 甲酸酯)的手性色谱柱，制备方法为以微晶纤维素和4-甲基苯甲酰氯为原 料合成在吡啶中反应生成纤维素-三(对甲基苯甲酸酯)衍生物，将其涂覆 到大孔硅胶上制得手性固定相，将其分散于含有正己烷与异丙醇(正己烷 /异丙醇，90/10，v/v)的混合溶液中，超声十分钟后，在40MPa下以正 己烷作为顶替液装到空的不锈钢柱管中。

本申请实施例中，分离度指相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比 值，由液相色谱工作站软件LabSolutions计算得到。

本申请实施例中，HPLC图上，峰的归属从左往右依次为溶剂峰、R- 叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺。

实施例1：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OD-H(250mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正己烷-异丙醇(98:2)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：如图1所示，HPLC谱图上从左往右依次为溶剂峰、R-叔 丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺。R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺 酰胺两个对应异构体的分离度为1.798，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构 体能够完全分离。

实施例2：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OD-H(250mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正庚烷-乙醇(97:3)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：5μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各5μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：图2为该实施例的HPLC图，可以看出R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的分离度为1.502，R-叔丁基亚磺 酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例3：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正己烷-乙醇(90:10)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：图3为该实施例的HPLC图，可以看出R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的分离度为4.891，R-叔丁基亚磺 酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例4：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正己烷-乙醇(99:1)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为6.372，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例5：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：环己烷-异丙醇(85:15)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：图4为该实施例的HPLC图，可以看出R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的分离度为4.109，R-叔丁基亚磺 酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例6：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正庚烷-乙酸乙酯(93:7)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：图5为该实施例的HPLC图，可以看出R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的分离度为5.52，R-叔丁基亚磺 酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例7：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正庚烷-乙醇(99.5:0.5)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：5μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各5μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为3.423，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例8：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正己烷-异丙醇(96:4)

柱温：30℃

流速：0.5mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：图6为该实施例的HPLC图，可以看出R-叔丁基亚磺酰 胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的分离度为5.919，R-叔丁基亚磺 酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例9：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：环己烷-乙酸乙酯(92:8)

柱温：30℃

流速：1mL/min

进样体积：5μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各5μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为4.052，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例10：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：环己烷-乙醇(85:15)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：5μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各5μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为4.878，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例11：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：环己烷-异丙醇(96:4)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为5.919，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例12：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正庚烷-异丙醇(88:12)

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为4.891，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例13：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的分析分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(150mm*4.6mm，5.0μm)

流动相：正己烷-乙酸乙酯(95:5)

柱温：30℃

流速：0.5mL/min

进样体积：10μL

样品浓度：1mg/mL

检测波长：220nm

实验步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品10mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各10μL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺 对照品保留时间，完成对R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体的分析。

实验结果：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺两个对应异构体的 分离度为4.269，R-叔丁基亚磺酰胺及其对映异构体能够完全分离。

实施例14：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*10mm，10.0μm)

流动相：正庚烷-异丙醇(90:10)

柱温：室温

流速：5.0mL/min

进样体积：1mL

样品浓度5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品50mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各1mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺酰胺 1.8mg和S-叔丁基亚磺酰胺1.9mg。

实施例15：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*20mm，10.0μm)

流动相：正庚烷-乙酸乙酯(85:15)

柱温：室温

流速：20mL/min

进样体积：10mL

样品浓度：5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各100mg，置 于100mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。 精密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品500mg，置于100mL容量瓶中， 异丙醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基 亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试 品母液各10mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰 胺对照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺 酰胺21mg和S-叔丁基亚磺酰胺19mg。

实施例16：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*20mm，10.0μm)

流动相：正己烷-异丙醇(85:15)

柱温：室温

流速：30mL/min

进样体积：3mL

样品浓度：5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品50mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各3mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺酰胺 6mg和S-叔丁基亚磺酰胺7mg。

实施例17：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*20mm，10.0μm)

流动相：环己烷-乙醇(88:12)

柱温：室温

流速：10mL/min

进样体积：5mL

样品浓度：5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品50mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各5mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺酰胺 11mg和S-叔丁基亚磺酰胺10mg。

实施例18：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*10mm，10.0μm)

流动相：环己烷-乙酸乙酯(92:8)

柱温：室温

流速：8mL/min

进样体积：2mL

样品浓度5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品50mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各2mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺酰胺 4.1mg和S-叔丁基亚磺酰胺4.3mg。

实施例19：R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺的制备分离

仪器与条件

色谱柱：实验室自制OJ-H(250mm*20mm，10.0μm)

流动相：正庚烷-乙醇(96:4)

柱温：室温

流速：20mL/min

进样体积：8mL

样品浓度：5mg/mL

检测波长：220nm

制备步骤

分别精密量取R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺各10mg，置于 10mL容量瓶中，异丙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品溶液。精 密称量(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业品50mg，置于10mL容量瓶中，异丙 醇溶解并稀释，摇匀，作为工业供试品母液。分别精密吸取R-叔丁基亚磺 酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对照品及(RS)-叔丁基亚磺酰胺工业供试品母 液各8mL进入液相色谱，参照R-叔丁基亚磺酰胺和S-叔丁基亚磺酰胺对 照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，制得R-叔丁基亚磺酰胺17mg和S-叔丁基亚磺酰胺18mg。

以上所述，仅是本申请的几个实施例，并非对本申请做任何形式的限 制，虽然本申请以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本申请，任何 熟悉本专业的技术人员，在不脱离本申请技术方案的范围内，利用上述揭 示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于技术 方案范围内。