一种细胞无损输送系统

技术领域

本发明涉及细胞药物制备技术领域，尤其涉及一种细胞无损输送系统。

背景技术

PBMC是外周血单个核细胞，人外周血中包含淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞和其它少量细胞，通过血液细胞分离管路系统对PBMC的分离、筛选、培养，可获得大量的免疫细胞用于细胞治疗，现有的血液细胞分离以及细胞培养等管路系统通过蠕动泵对细胞液直接泵送，例如申请号为CN202121194589.5的一种用于血液分离的管路系统，该专利就是通过蠕动泵直接输送细胞液，而蠕动泵通过挤压软管输送细胞液，容易造成细胞损伤，降低了细胞得率和活率。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种避免通过抽吸装置造成细胞损伤以及大幅提高细胞得率和活率的细胞无损输送系统。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种细胞无损输送系统，包括初始容器、处理装置、收集容器、中转容器以及用于对中转容器内产生正负压的抽吸装置，所述中转容器通过第一连接管与初始容器连通、通过第二连接管与处理装置连通、通过第三连接管与收集容器连通，所述第一连接管上设有第一阀体，所述第二连接管上设有第二阀体，所述第三连接管上设有第三阀体，所述初始容器中的细胞经过中转容器输送至处理装置中进行处理，再从处理装置经过中转容器输送至收集容器中。

作为上述技术方案的进一步改进：

所述处理装置为细胞培养容器或者细胞离心容器。

所述中转容器上设有循环管路，所述第一连接管、第二连接管以及第三连接管分别通过循环管路与中转容器连通。

所述抽吸装置包括泵体、洁净气管，所述泵体通过洁净气管与中转容器连通。

所述细胞无损输送系统还包括废液容器，所述废液容器通过废液管与处理装置连通，所述废液管上设有废液阀，所述泵体设置在废液管上。

所述第一连接管连接有用于与样品源连接的第一分管，所述第一分管上设有第四阀体。

所述泵体通过第一分接管连接有第一容器、通过第二分接管与外部连通，所述第一分接管上设有第五阀体，所述第二分接管上设有第六阀体。

所述细胞无损输送系统还包括废液容器，所述废液容器通过废液管与中转容器连通，所述废液管上设有废液阀。

所述第一连接管通过第一分管与样品源连接、通过第二分管连接有第三容器、通过第三分管连接有第四容器，所述第一分管上设有第四阀体，所述第二分管上设有第八阀体，所述第三分管上设有第九阀体。

所述细胞无损输送系统包括废液容器，所述废液容器通过废液管与第一连接管连通。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

本发明的细胞无损输送系统，生产过程：首先，关闭第一阀体、第二阀体和第三阀体，通过抽吸装置对中转容器内产生负压；其次，打开第一阀体，初始容器的细胞在中转容器的负压作用下流入中转容器中，再关闭第一阀体；然后，打开第二阀体，通过抽吸装置对中转容器内产生正压，使中转容器内的细胞进入处理装置中，再关闭第二阀体；处理装置处理完成后，再次通过抽吸装置对中转容器内产生负压；接着，打开第二阀体，处理装置中的细胞在中转容器的负压作用下流入中转容器中，再关闭第二阀体；最后，打开第三阀体，通过抽吸装置对中转容器内产生正压，使中转容器内的细胞进入收集容器中。本细胞无损输送系统，细胞通过中转容器的正负压作用实现输送，不需要流经抽吸装置，避免通过抽吸装置造成细胞损伤，大幅提高细胞得率和活率。

附图说明

图1是本发明细胞无损输送系统的实施例一的结构示意图。

图2是本发明细胞无损输送系统的实施例二的结构示意图。

图3是本发明细胞无损输送系统的实施例三的结构示意图。

图4是本发明细胞无损输送系统的实施例四的结构示意图。

图中各标号表示：

1、初始容器；11、第一连接管；111、第一阀体；12、第一分管；121、第四阀体；13、第二分管；131、第三容器；132、第八阀体；14、第三分管；141、第四容器；142、第九阀体；2、处理装置；21、第二连接管；211、第二阀体；3、收集容器；31、第三连接管；311、第三阀体；4、中转容器；41、循环管路；411、第十阀体；412、第十一阀体；5、抽吸装置；51、泵体；52、洁净气管；6、废液容器；61、废液管；611、废液阀；7、第一分接管；71、第一容器；72、第五阀体；8、第二分接管；81、第六阀体。

具体实施方式

以下将结合说明书附图和具体实施例对本发明做进一步详细说明。

如本公开和权利要求书中所示，除非上下文明确提示例外情形，“一”、“一个”、“一种”和/或“该”等词并非特指单数，也可包括复数。本公开中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性，而只是用来区分不同的组成部分。同样，“包括”或者“包含”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同，而不排除其他元件或者物件。“连接”或者“相连”等类似的词语并非限定于物理的或者机械的连接，而是可以包括电性的连接，不管是直接的还是间接的。

实施例一：

图1示出了本发明细胞无损输送系统的一种实施例，本实施例的细胞无损输送系统包括初始容器1、处理装置2、收集容器3、中转容器4以及用于对中转容器4内产生正负压的抽吸装置5，中转容器4通过第一连接管11与初始容器1连通、通过第二连接管21与处理装置2连通、通过第三连接管31与收集容器3连通，第一连接管11上设有第一阀体111，第二连接管21上设有第二阀体211，第三连接管31上设有第三阀体311，初始容器1中的细胞经过中转容器4输送至处理装置2中进行处理，再从处理装置2经过中转容器4输送至收集容器3中。

生产过程：首先，打开第一阀体111，关闭第二阀体211和第三阀体311，通过抽吸装置5对中转容器4内产生负压，初始容器1的细胞在中转容器4的负压作用下流入中转容器4中；再关闭第一阀体111，打开第二阀体211，通过抽吸装置5对中转容器4内产生正压，使中转容器4内的细胞进入处理装置2中；处理装置2处理完成后，打开第二阀体211，关闭第一阀体111和第三阀体311，再次通过抽吸装置5对中转容器4内产生负压，让处理装置2中的细胞在中转容器4的负压作用下流入中转容器4中；再关闭第二阀体211，打开第三阀体311，通过抽吸装置5对中转容器4内产生正压，使中转容器4内的细胞进入收集容器3中。本细胞无损输送系统，细胞通过中转容器4的正负压作用实现输送，不需要流经抽吸装置5，避免通过抽吸装置5造成细胞损伤，大幅提高细胞得率和活率。

实施例二：

图2示出了本发明细胞无损输送系统的另一种实施例，本实施例的细胞无损输送系统与实施例一的基本相同，区别仅在于：中转容器4上设有循环管路41，第一连接管11、第二连接管21以及第三连接管31分别通过循环管路41与中转容器4连通。如图2所示，循环管路41的一端与中转容器4上方的进液口连接，另一端与中转容器4下方的出液口连接，即循环管路41将中转容器4的进液口和出液口连通，因为需要进液(细胞从初始容器1流入处理装置2中)和出液(细胞从处理装置2流入收集容器3中)的处理装置2，在进液时，液体由初始容器1通过循环管路41和中转容器4的进液口进入中转容器4，再通过中转容器4的出液口和循环管路41进入到处理装置2，在出液时，液体由处理装置2通过循环管路41和中转容器4的进液口进入中转容器4，再通过中转容器4的出液口和第三连接管31进入到收集容器3中，所以，不管是进液还是出液，都是通过中转容器4的进液口进入、出液口排出，避免液体从中转容器4的出液口进入。如果处理装置2的出液从中转容器4的出液口进入，最后会向中转容器4中吸入大量气泡，气泡的爆裂会对细胞产生不良影响。

本实施例中，抽吸装置5包括泵体51、洁净气管52，泵体51通过洁净气管52与中转容器4连通。泵体51通过洁净气管52对中转容器4内产生正负压，结构简单，拆装方便。

本实施例中，细胞无损输送系统还包括废液容器6，废液容器6通过废液管61与处理装置2连通，废液管61上设有废液阀611，泵体51设置在废液管61上。

本实施例中，第一连接管11连接有用于与样品源连接的第一分管12，第一分管12上设有第四阀体121。

本实施例中，泵体51通过第一分接管7连接有第一容器71、通过第二分接管8与外部连通，第一分接管7上设有第五阀体72，第二分接管8上设有第六阀体81。

本实施例中，处理装置2为细胞离心容器。

循环管路41上设有第十阀体411和第十一阀体412，第十阀体411和第十一阀体412之间的循环管路41与第二连接管21和第三连接管31均连通。循环管路41的一端与中转容器4的出口连接，另一端与中转容器4的进口连接。第十一阀体412与中转容器4的进口之间的循环管路41与第一连接管11连通。

具体实施过程如下：

一、打开相应的阀，通过泵体51，将初始容器1中试剂通过中转容器4加入到处理装置2中，关闭所有阀；

二、打开相应的阀，通过泵体51，将血袋中的样品通过第一分管12和中转容器4加入到处理装置2中，关闭所有阀；

三、启动处理装置2，对处理装置2中的样品与试剂进行混匀处理；

四、高速离心，使处理装置2中经过处理后的样品沉析，并降低离心速度，打开相应的阀，通过泵体51将上清液排出到废液容器6中，关闭所有阀，停止离心；

五、打开相应的阀，通过泵体51，将初始容器1中试剂通过中转容器4加入到处理装置2中，关闭所有阀；

六、打开相应的阀，通过泵体51，将处理装置2内液体抽取到中转容器4内，再反向排回处理装置2内，反复多次吹打使得处理装置2内沉降的细胞得以重悬，并静置一段时间；

七、高速离心，使处理装置2中经过处理后的样品沉析，并降低离心速度，打开相应的阀，通过泵体51将上清液排出到废液容器6中，关闭所有阀，停止离心；

八、重复第五至第七步骤多次；

九、打开相应的阀，通过泵体51，将第一容器71中的试剂加入到处理装置2中，关闭所有阀；

十、打开相应的阀，通过泵体51，将处理装置2中的液体吸入到中转容器4中，并重新泵入到处理装置2中，反复吹打数次后，将中转容器4中液体全部通过第二连接管21排入处理装置2，关闭所有阀；

十一、启动高速离心，使处理装置2中液体高速离心，然后降低离心速度，打开相应的阀，通过泵体51将上清液排出到废液容器6中，关闭所有阀，停止离心；

十二、重复第九至第十一步骤数次；

十三、打开相应的阀，通过泵体51，将第一容器71中的试剂加入到处理装置2中，关闭所有阀；

十四、打开相应的阀，通过泵体51，将处理装置2中的液体吸入到中转容器4中，并重新泵入到处理装置2中，反复吹打数次后，将中转容器4中液体全部通过第二连接管21排入处理装置2，关闭所有阀；

十五、打开相应的阀，通过泵体51，将处理装置2中的液体全部吸入到中转容器4中，关闭所有阀；

十六、打开相应的阀，通过泵体51，将中转容器4中的液体全部排出到收集容器3中，关闭所有阀；

以上第十三至第十六步骤可以重复数次。

实施例三：

图3示出了本发明细胞无损输送系统的另一种实施例，本实施例的细胞无损输送系统与实施例一的基本相同，区别仅在于：中转容器4上设有循环管路41，第一连接管11、第二连接管21以及第三连接管31分别通过循环管路41与中转容器4连通，细胞无损输送系统还包括废液容器6，废液容器6通过废液管61与中转容器4连通，废液管61上设有废液阀611。如图3所示，循环管路41的一端与中转容器4上方的进液口连接，另一端与中转容器4下方的出液口连接，即循环管路41将中转容器4的进液口和出液口连通，因为需要进液(细胞从初始容器1流入处理装置2中)和出液(细胞从处理装置2流入收集容器3中)的处理装置2，在进液时，液体由初始容器1通过循环管路41和中转容器4的进液口进入中转容器4，再通过中转容器4的出液口和循环管路41进入到处理装置2，在出液时，液体由处理装置2通过循环管路41和中转容器4的进液口进入中转容器4，再通过中转容器4的出液口和第三连接管31进入到收集容器3中，所以，不管是进液还是出液，都是通过中转容器4的进液口进入、出液口排出，避免液体从中转容器4的出液口进入。如果处理装置2的出液从中转容器4的出液口进入，最后会向中转容器4中吸入大量气泡，气泡的爆裂会对细胞产生不良影响。

本实施例中，抽吸装置5包括泵体51、洁净气管52，泵体51通过洁净气管52与中转容器4连通。

循环管路41上设有第十阀体411和第十一阀体412，第十阀体411和第十一阀体412之间的循环管路41与第二连接管21、第三连接管31和第一连接管11均连通。循环管路41的一端与中转容器4的出口连接，另一端与中转容器4的进口连接。

本实施例中，第一连接管11通过第一分管12与样品源连接、通过第二分管13连接有第三容器131、通过第三分管14连接有第四容器141，第一分管12上设有第四阀体121，第二分管13上设有第八阀体132，第三分管14上设有第九阀体142。

本实施例中，处理装置2为细胞离心容器。

具体实施方案一：

一、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先通过第一分管12向中转容器4中加载血液样本，然后在泵体51的正压作用下将样品通过第二连接管21载入到细胞离心容器中，完毕后关闭阀；

二、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先通过第一连接管11，将初始容器1中的分离液加入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下通过第二连接管21，将中转容器4中的分离液缓慢载入到细胞离心容器中，使得所加载的分离液位于细胞离心容器底部，需要处理的血液样本位于分离液上层，完毕后关闭阀；

三、启动细胞离心容器高速离心，在离心力作用下，细胞离心容器内，在旋转的径向方向上，自细胞到细胞离心容器锥尖，依次为上清液层、PBMC层、分离液层、红细胞层；

四、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先通过第二连接管21将细胞离心容器锥底的红细胞及部分分离液吸入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的液体排出到废液容器6中，完毕后关闭阀。

五、停止细胞离心容器旋转，先通过第二分管13，将第三容器131中的缓冲液加入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下通过第二连接管21，将中转容器4中的缓冲液载入到细胞离心容器中，使得细胞离心容器中的细胞液与缓冲液混匀，完毕后关闭阀；

六、打开对应的阀，在泵体51的正压作用下，将试剂，通过第二连接管21缓慢加入到细胞离心容器锥尖，加载完后，自细胞离心容器底到细胞离心容器锥尖，依次为细胞混合液层、试剂层，完毕后关闭阀；

七、启动细胞离心容器高速离心，在离心力作用下，细胞离心容器内，在旋转的径向方向上，自细胞离心容器底到细胞离心容器锥尖，依次为上清液层、PBMC层、试剂层；

八、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先将细胞离心容器中的上清液吸入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的液体排出到废液容器6中，细胞离心容器中剩余少量上清液、PBMC和试剂，完毕后关闭阀。

九、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，通过第二连接管21从细胞离心容器锥底将细胞离心容器内的液体吸入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的液体排出到收集容器3中，完毕后关闭阀。

具体实施方案二：

一、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先通过第一分管12向中转容器4中加载血液样本，然后在泵体51的正压作用下将样品通过第二连接管21载入到细胞离心容器中，完毕后关闭阀；

二、打开对应的阀，在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的试剂，通过第二连接管21缓慢加入到细胞离心容器锥尖，加载完后，自细胞离心容器底到细胞离心容器锥尖，依次为细胞液层、试剂层，完毕后关闭阀；

三、启动细胞离心容器高速离心，在离心力作用下，细胞离心容器内，在旋转的径向方向上，自细胞离心容器底到细胞离心容器锥尖，依次为上清液层、目的细胞层、试剂层；

四、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，先通过第二连接管21将细胞离心容器中的上清液吸入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的液体排出到废液容器6中，细胞离心容器中剩余少量上清液、目的细胞和试剂，完毕后关闭阀；

五、打开对应的阀，在泵体51的负压作用下，通过第二连接管21从细胞离心容器锥底将细胞离心容器内的液体吸入到中转容器4中，然后在泵体51的正压作用下，将中转容器4中的液体排出到收集容器3中，完毕后关闭阀。

实施例四：

图4示出了本发明细胞无损输送系统的另一种实施例，本实施例的细胞无损输送系统与实施例一的基本相同，区别仅在于：细胞无损输送系统包括废液容器6，废液容器6通过废液管61与第一连接管11连通。处理装置2为细胞培养容器。抽吸装置5包括泵体51、洁净气管52，泵体51通过洁净气管52与中转容器4连通。泵体51通过洁净气管52对中转容器4内产生正负压，结构简单，拆装方便。废液容器6通过废液管61与第一连接管11连通，可以共用一个第一阀体111，减少阀的使用，降低了成本。

虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明。任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围的情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应落在本发明技术方案保护的范围内。