一种培养基质及利用此培养基质合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法

技术领域

本发明涉及菌类仿生栽培技术领域，尤其涉及一种培养基质及利用此培养基质合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法。

背景技术

暗褐网柄牛肝菌Phlebopus portentosus隶属于小牛肝菌科Boletinellaceae，脉柄牛肝菌属Phlebopus。国外分布于泰国、斯里兰卡、越南、印度尼西亚、巴西、墨西哥、澳大利亚、新西兰等热带地区(Maria 2007，Bandala 2004，Watling 2001，Barbara1987，Peglerl986，Heinemann 1982)。国内主要分布在云南，广西、海南也有分布(臧穆等1986，2006；杨祝良和臧穆2003)。暗褐网柄牛肝菌含有丰富的蛋白质、粗脂肪、总糖、粗纤维、多种矿质元素和氨基酸，是一种营养价值较高的食用菌(R.Sanmee2003，张春霞等2010)，是深受消费者喜爱的美味食用菌。

随着大量的商业采收以及生态环境的变化，野生暗褐网柄牛肝菌资源逐渐枯竭。取而代之的为经过仿生栽培技术培养的暗褐网柄牛肝菌，而牛肝菌菌腔虫瘿的合成为仿生栽培技术中最重要，最关键的一步，影响着仿生栽培技术的质量和产量。菌腔虫瘿染菌率高才能提高产量和质量。但是，现有技术中报道的牛肝菌菌腔虫瘿的合成技术不仅感染率低而且合成慢。因此，急需一种合成速度快，且感染率高的合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法来满足市场的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种培养基质及利用此培养基质合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法。采用本发明的培养基质，利用本发明的方法合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的速度快，感染率高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种培养基质，包括如下质量份数的组分：木屑3～5份、珍珠岩8～10份、红壤土6～8份、牛粪0.5～1.5份、米糠4～6份。

作为优选，所述培养基质中各组分的粒径≤15mm。

本发明还提供了一种合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法，包括如下步骤：利用所述的培养基质培养蔓花生萌发种子，待萌发种子长出侧根时，接种牛肝菌菌种以及接入粉蚧，培养得到菌腔虫瘿。

作为优选，所述的培养基质培养蔓花生萌发种子前需要经过105～115℃，蒸汽灭菌1.5～2h。

作为优选，所述的培养蔓花生萌发种子的条件为：27～29℃，黑暗条件下培养10～20d。

作为优选，所述的蔓花生萌发种子为组织培养的无菌萌发种子。

作为优选，所述的接种牛肝菌菌种以及接入粉蚧的部位为蔓花生的侧根部。

作为优选，所述的接种牛肝菌菌种的量为10～30g/株。

作为优选，所述的粉蚧为伴毛地粉蚧，接入粉蚧的量为40～60头/株。

作为优选，所述的培养得到菌腔虫瘿时的条件为：27～29℃，黑暗条件下培养2～3个月。

本发明的合成方法，能够有效的建立暗褐网柄牛肝菌与蔓花生之间的共生关系，在接入菌种和粉蚧后培养2个月后，菌腔虫瘿的感染率能够达到80％以上，3个月后感染率达到90％以上。

具体实施方式

本发明提供了一种培养基质，包括如下质量份数的组分：木屑3～5份、珍珠岩8～10份、红壤土6～8份、牛粪0.5～1.5份、米糠4～6份。

在本发明中，所述木屑的添加量为3～5份，优选为4份。

在本发明中，所述珍珠岩的添加量为8～10份，优选为9份。

在本发明中，所述红壤土的添加量为6～8份，优选为7份。

在本发明中，所述牛粪的添加量为0.5～1.5份，优选为1份。

在本发明中，所述米糠的添加量为4～6份，优选为5份。

在本发明中，所述培养基质中各组分的粒径≤15mm，优选为≤12mm，进一步优选为≤8mm。

本发明还提供了一种合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法，包括如下步骤：利用所述的培养基质培养蔓花生萌发种子，待萌发种子长出侧根时，接种牛肝菌菌种以及接入粉蚧，培养得到菌腔虫瘿。

在本发明中，所述的培养基质培养蔓花生萌发种子前需要经过105～115℃蒸汽灭菌，优选为110℃。

在本发明中，所述的蒸汽灭菌时间为1.5～2h，优选为1.75h。

在本发明中，所述的培养蔓花生萌发种子的条件为：27～29℃，黑暗条件下培养10～20d；优选为28℃，黑暗条件下培养15d。

在本发明中，所述的蔓花生萌发种子为组织培养的无菌萌发种子。

在本发明中，所述接种牛肝菌菌种以及接入粉蚧的时机为蔓花生萌发种子长出侧根时。

在本发明中，所述的接种牛肝菌菌种以及接入粉蚧的部位为蔓花生的侧根部。

在本发明中，所述的接种牛肝菌菌种为市售菌种，由云南省热带作物科学研究所植物保护与微生物研究中心牛肝菌课题提供的编号为13013的菌种。

在本发明中，所述的接种牛肝菌菌种的量为10～30g/株，优选为15～25g/株，进一步优选为20g/株。

在本发明中，所述的粉蚧为伴毛地粉蚧，接入粉蚧的量为40～60头/株，优选为50头/株。

在本发明中，所述的伴毛地粉蚧为取自蔓花生根部的伴毛地粉蚧。

在本发明中，所述的培养得到菌腔虫瘿时的条件为：27～29℃，黑暗条件下培养2～3个月；优选为28℃，黑暗条件下培养2.5个月。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

称取木屑5kg，珍珠岩8kg，红壤土7kg，牛粪1.5kg，米糠6kg，混合均匀，粉碎至粒径为15mm的小颗粒，105℃蒸汽灭菌1.5h，得到无菌的培养基质。将无菌的培养基质装入用75％酒精消毒的底部带孔的玻璃瓶中，得到装载有培养基质的玻璃瓶。将经组织培养得到的无菌蔓花生萌发种子移栽至装载有培养基质的玻璃瓶中，黑暗条件下，29℃培养10d至蔓花生萌发种子长出侧根时，在侧根部位接种牛肝菌菌种和伴毛地粉蚧，接种牛肝菌菌种的量为20g/株，接种伴毛地粉蚧的量为60头/株。接种后，继续在29℃，黑暗条件下培养。培养2个月后观察蔓花生侧根牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率为86.3％，培养3个月后发现牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率达到93.5％。

实施例2

称取木屑3kg，珍珠岩10kg，红壤土8kg，牛粪1kg，米糠4kg，混合均匀，粉碎至粒径为10mm的小颗粒，110℃蒸汽灭菌2h，得到无菌的培养基质。将无菌的培养基质装入用75％酒精消毒的底部带孔的玻璃瓶中，得到装载有培养基质的玻璃瓶。将经组织培养得到的无菌蔓花生萌发种子移栽至装载有培养基质的玻璃瓶中，黑暗条件下，28℃培养15d至蔓花生萌发种子长出侧根时，在侧根部位接种牛肝菌菌种和伴毛地粉蚧，接种牛肝菌菌种的量为10g/株，接种伴毛地粉蚧的量为50头/株。接种后，继续在28℃，黑暗条件下培养。培养2个月后观察蔓花生侧根牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率为84.9％，培养3个月后发现牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率达到92.7％。

实施例3

称取木屑4kg，珍珠岩9kg，红壤土1kg，牛粪0.5kg，米糠5kg，混合均匀，粉碎至粒径为8mm的小颗粒，115℃蒸汽灭菌1.5h，得到无菌的培养基质。将无菌的培养基质装入用75％酒精消毒的底部带孔的玻璃瓶中，得到装载有培养基质的玻璃瓶。将经组织培养得到的无菌蔓花生萌发种子移栽至装载有培养基质的玻璃瓶中，黑暗条件下，27℃培养20d至蔓花生萌发种子长出侧根时，在侧根部位接种牛肝菌菌种和伴毛地粉蚧，接种牛肝菌菌种的量为30g/株，接种伴毛地粉蚧的量为40头/株。接种后，继续在27℃，黑暗条件下培养。培养2个月后观察蔓花生侧根牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率为89.6％，培养3个月后发现牛肝菌菌腔中虫瘿的感染率达到94.8％。

由以上实施例可知，本发明提供了一种培养基质及利用此培养基质合成暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的方法。通过本发明实施例可以看出，本发明的合成方法能够有效的建立暗褐网柄牛肝菌与蔓花生之间的共生关系，在接入菌种和粉蚧后2个月，菌腔虫瘿的感染率能够达到80％以上，3个月后感染率达到90％以上。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。