一种降解除草剂的复合微生物菌剂及制备方法与应用
文献发布时间：2023-06-19 16:09:34
技术领域
本发明涉及微生物菌剂领域，特别涉及一种降解除草剂的复合微生物菌剂及制备方法与应用。
背景技术
除草剂是指可使杂草彻底地或选择地发生枯死的药剂，又称除莠剂，用以消灭或抑制植物生长的一类物质。
其中的氯酸钠、硼砂、砒酸盐、三氯醋酸对于任何种类的植物都有枯死的作用，其作用受除草剂、植物和环境条件三因素的影响。按作用分为灭生性和选择性除草剂，选择性除草剂特别是硝基苯酚、氯苯酚、氨基甲酸的衍生物多数都有效。世界除草剂发展渐趋平稳，主要发展高效、低毒、广谱、低用量的品种，对环境污染小的一次性处理剂逐渐成为主流。常用的品种为有机化合物，可广泛用于防治农田、果园、花卉苗圃、草原及非耕地、铁路线、河道、水库、仓库等地杂草、杂灌、杂树等有害植物。
微生物菌剂是指目标微生物经过工业化生产扩繁后，利用多孔的物质作为吸附剂，吸附菌体的发酵液加工制成的活菌制剂。这种菌剂用于拌种或蘸根，具有直接或间接改良土壤、恢复地力、预防土传病害、维持根际微生物区系平衡和降解有毒害物质等作用。农用微生物菌剂恰当使用可以提高农产品产量、改善农产品品质、减少化肥用量、降低成本、改良土壤、保护生态环境。
现有的除草剂在使用的过程中，会存在较多的残留，微生物发酵技术相结合，使用安全高效，会对环境造成污染，无农残，为此，我们提出一种降解除草剂的复合微生物菌剂及制备方法与应用来解决上述问题。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种降解除草剂的复合微生物菌剂及制备方法与应用，来解决背景技术中的技术问题。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种降解除草剂的复合微生物菌剂，包括：
复合菌体与载体材料混合而成，其中复合菌体和载体材料混合的比例为1比5至1比20，
所述复合菌体由枯草芽孢杆菌∶食苯芽孢杆菌∶解几丁质芽孢杆菌∶蜡状芽孢杆菌∶嗜热侧孢霉＝1～2∶0.5～1∶1～2∶1～2∶1～2；复合菌体发酵获得有效活菌的菌液。
所述载体材料按照以下重量份数的原料制成：蛋白胨5-8份、NaCl5-7份、牛肉膏2-3份、酵母膏3-5份、羟烯腺嘌呤0.005份、烯酰腺嘌呤0.005份、MnSO4.H2O 0.005份、营养琼脂15-20份相混合。
将所述复合微生物菌剂再进行复合发酵，发酵后的食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌数含量均达到15-20亿个/mL时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，电解质为硝酸钾，抗冻剂为甘油。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
(1)制备培养基：将载体材料按照上述比例进行混合并搅拌均匀，添加蒸馏水至1000毫升，pH值调至6.5-7.2，保持温度120-125℃高压灭菌30-45分钟后，取出冷却至60℃左右；
(2)菌剂培养：在超洁净工作台上，于无菌条件下将上述营养肉汁蛋白胨培养基倒入灭过菌的培养皿中，将食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌转到上述培养皿中分别培养；
(3)微生物菌剂的复合发酵：发酵罐营养液配方：蛋白胨0.5％；NaCl0.5％；牛肉膏0.3％；酵母膏0.3％；羟烯腺嘌呤0.5‰；烯酰腺嘌呤0.5‰；MgSO4.H2O 0.5‰；pH值调至6.5-7.2；罐体装料后在121℃，0.12MPa下灭菌30分钟，冷却至30℃左右后按3％的比例接种；
(4)复合微生物菌剂的配制：随后添加30％海藻酸、3％的硝酸钾，3％的甘油，以上百分数均为重量百分数。
在菌剂培养中，于30-35℃培养箱中培养65-75小时，将两个菌株的菌液以体积比1∶1的比例混合摇匀，然后以体积比10％的比例接种到发酵罐。
在(3)微生物菌剂的复合发酵中，培养温度30℃，通气量开始在1∶1v.v.m，培养24小时后增至1∶1.5v.v.m，48小时后降至1∶1.2v.v.m，发酵至72小时发酵完毕，经过检测食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例在1∶1左右，发酵液中二者的菌数含量均达到15-20亿个/mL时为合格菌液。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用，步骤如下：
进一步的，将上述复合微生物菌剂进行溶解按照每kg添加15～35g的量添加纯净水，使含水量达到60～70wt％，得到除草剂降解液。
进一步的，将上述除草剂降解液采用均匀喷洒，喷洒到需要进行降解除草剂，喷洒密度为25ml/m
综上所述，本发明具有以下有益效果：
将上述复合菌剂再进行复合发酵，发酵后的发酵液中二者的菌数含量均达到15-20亿个/ml时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，所述海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，所述电解质为硝酸钾，所述抗冻剂为甘油。配制好的菌剂中食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例为1∶1左右，二者在菌剂中的菌数含量均达到10亿个/ml以上。
本发明含有微生物制剂，与微生物发酵技术相结合，无化学残留，使用安全高效，不会对环境造成污染，且原料充足加工简便，成本低，持效性好，无农残，相互之间可以充分发挥协同降解与相互弥补的作用，分泌多种降解酶类，能够有效的降解除草剂，该复合菌剂在具体使用时可以稀释到1000-2000倍液，降解的效果仍非常明显。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明较优实施例中一种降解除草剂的复合微生物菌剂，包括：
复合菌体与载体材料混合而成，其中复合菌体和载体材料混合的比例为1比5，
所述复合菌体由枯草芽孢杆菌∶食苯芽孢杆菌∶解几丁质芽孢杆菌∶蜡状芽孢杆菌∶嗜热侧孢霉＝1～2∶0.5～1∶1～2∶1～2∶1～2；复合菌体发酵获得有效活菌的菌液。
所述载体材料按照以下重量份数的原料制成：蛋白胨5份、NaCl5份、牛肉膏2份、酵母膏3份、羟烯腺嘌呤0.005份、烯酰腺嘌呤0.005份、MnSO4.H2O 0.005份、营养琼脂15份相混合。
将所述复合微生物菌剂再进行复合发酵，发酵后的食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌数含量均达到15亿个/mL时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，电解质为硝酸钾，抗冻剂为甘油。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
(1)制备培养基：将载体材料按照上述比例进行混合并搅拌均匀，添加蒸馏水至1000毫升，pH值调至6.5，保持温度120℃高压灭菌30分钟后，取出冷却至60℃左右；
(2)菌剂培养：在超洁净工作台上，于无菌条件下将上述营养肉汁蛋白胨培养基倒入灭过菌的培养皿中，将食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌转到上述培养皿中分别培养，于30℃培养箱中培养65小时，将两个菌株的菌液以体积比1∶1的比例混合摇匀，然后以体积比10％的比例接种到发酵罐；
(3)微生物菌剂的复合发酵：发酵罐营养液配方：蛋白胨0.5％；NaCl0.5％；牛肉膏0.3％；酵母膏0.3％；羟烯腺嘌呤0.5‰；烯酰腺嘌呤0.5％；MgSO4.H2O 0.5‰；pH值调至6.5；罐体装料后在121℃，0.12MPa下灭菌30分钟，冷却至30℃左右后按3％的比例接种，培养温度30℃，通气量开始在1∶1v.v.m，培养24小时后增至1∶1.5v.v.m，48小时后降至1∶1.2v.v.m，发酵至72小时发酵完毕，经过检测食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例在1∶1左右，发酵液中二者的菌数含量均达到15亿个/mL时为合格菌液；
(4)复合微生物菌剂的配制：随后添加30％海藻酸、3％的硝酸钾，3％的甘油，以上百分数均为重量百分数。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用，步骤如下：
(1)将上述复合微生物菌剂进行溶解按照每kg添加35g的量添加纯净水，使含水量达到70wt％，得到除草剂降解液；
(2)将上述除草剂降解液采用均匀喷洒，喷洒到需要进行降解除草剂，喷洒密度为25ml/m
实施例2
本发明较优实施例中一种降解除草剂的复合微生物菌剂，包括：
复合菌体与载体材料混合而成，其中复合菌体和载体材料混合的比例为1比10，
所述复合菌体由枯草芽孢杆菌∶食苯芽孢杆菌∶解几丁质芽孢杆菌∶蜡状芽孢杆菌∶嗜热侧孢霉＝1～2∶O.5～1∶1～2∶1～2∶1～2；复合菌体发酵获得有效活菌的菌液。
所述载体材料按照以下重量份数的原料制成：蛋白胨6份、NaCl6份、牛肉膏2份、酵母膏4份、羟烯腺嘌呤O.005份、烯酰腺嘌呤O.005份、MnSO4.H2O O.005份、营养琼脂18份相混合。
将所述复合微生物菌剂再进行复合发酵，发酵后的食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌数含量均达到18亿个/mL时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，电解质为硝酸钾，抗冻剂为甘油。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
(1)制备培养基：将载体材料按照上述比例进行混合并搅拌均匀，添加蒸馏水至1000毫升，pH值调至6.8，保持温度120-125℃高压灭菌38分钟后，取出冷却至60℃左右；
(2)菌剂培养：在超洁净工作台上，于无菌条件下将上述营养肉汁蛋白胨培养基倒入灭过菌的培养皿中，将食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌转到上述培养皿中分别培养，于33℃培养箱中培养68小时，将两个菌株的菌液以体积比1∶1的比例混合摇匀，然后以体积比10％的比例接种到发酵罐；
(3)微生物菌剂的复合发酵：发酵罐营养液配方：蛋白胨0.5％；NaCl0.5％；牛肉膏0.3％；酵母膏0.3％；羟烯腺嘌呤0.5‰；烯酰腺嘌呤0.5‰；MgSO4.H2O0.5‰；pH值调至6.8；罐体装料后在121℃，0.12MPa下灭菌30分钟，冷却至30℃左右后按3％的比例接种，培养温度30℃，通气量开始在1∶1v.v.m，培养24小时后增至1∶1.5v.v.m，48小时后降至1∶1.2v.v.m，发酵至72小时发酵完毕，经过检测食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例在1；1左右，发酵液中二者的菌数含量均达到18亿个/mL时为合格菌液；
(4)复合微生物菌剂的配制：随后添加30％海藻酸、3％的硝酸钾，3％的甘油，以上百分数均为重量百分数。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用，步骤如下：
(1)将上述复合微生物菌剂进行溶解按照每kg添加15～35g的量添加纯净水，使含水量达到65wt％，得到除草剂降解液；
(2)将上述除草剂降解液采用均匀喷洒，喷洒到需要进行降解除草剂，喷洒密度为25ml/m
实施例3
本发明较优实施例中一种降解除草剂的复合微生物菌剂，包括：
复合菌体与载体材料混合而成，其中复合菌体和载体材料混合的比例为1比20，
所述复合菌体由枯草芽孢杆菌∶食苯芽孢杆菌∶解几丁质芽孢杆菌∶蜡状芽孢杆菌∶嗜热侧孢霉＝1～2∶0.5～1∶1～2∶1～2∶1～2；复合菌体发酵获得有效活菌的菌液。
所述载体材料按照以下重量份数的原料制成：蛋白胨8份、NaCl7份、牛肉膏3份、酵母膏5份、羟烯腺嘌呤0.005份、烯酰腺嘌呤0.005份、MnSO4.H2O0.005份、营养琼脂20份相混合。
将所述复合微生物菌剂再进行复合发酵，发酵后的食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌数含量均达到20亿个/mL时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，电解质为硝酸钾，抗冻剂为甘油。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：
(1)制备培养基：将载体材料按照上述比例进行混合并搅拌均匀，添加蒸馏水至1000毫升，pH值调至7.2，保持温度125℃高压灭菌45分钟后，取出冷却至60℃左右；
(2)菌剂培养：在超洁净工作台上，于无菌条件下将上述营养肉汁蛋白胨培养基倒入灭过菌的培养皿中，将食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌转到上述培养皿中分别培养，于35℃培养箱中培养75小时，将两个菌株的菌液以体积比1∶1的比例混合摇匀，然后以体积比10％的比例接种到发酵罐；
(3)微生物菌剂的复合发酵：发酵罐营养液配方：蛋白胨0.5％；NaCl0.5％；牛肉膏0.3％；酵母膏0.3％；羟烯腺嘌呤0.5‰；烯酰腺嘌呤0.5‰；MgSO4.H2O0.5‰；pH值调至6.5-7.2；罐体装料后在121℃，0.12MPa下灭菌30分钟，冷却至30℃左右后按3％的比例接种，培养温度30℃，通气量开始在1∶1v.v.m，培养24小时后增至1∶1.5v.v.m，48小时后降至1∶1.2v.v.m，发酵至72小时发酵完毕，经过检测食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例在1∶1左右，发酵液中二者的菌数含量均达到20亿个/mL时为合格菌液；
(4)复合微生物菌剂的配制：随后添加30％海藻酸、3％的硝酸钾，3％的甘油，以上百分数均为重量百分数。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用。
一种降解除草剂的复合微生物菌剂在除草剂降解处理中的应用，步骤如下：
(1)将上述复合微生物菌剂进行溶解按照每kg添加35g的量添加纯净水，使含水量达到70wt％，得到除草剂降解液；
(2)将上述除草剂降解液采用均匀喷洒，喷洒到需要进行降解除草剂，喷洒密度为25ml/m
综上所述：
将上述复合菌剂再进行复合发酵，发酵后的发酵液中二者的菌数含量均达到15-20亿个/ml时为合格菌液，随后添加载体物质海藻酸、电解质和抗冻剂，所述海藻酸在水溶液中以微胶体的形式存在，所述电解质为硝酸钾，所述抗冻剂为甘油。配制好的菌剂中食苯芽孢杆菌和解几丁质芽孢杆菌的菌数比例为1∶1左右，二者在菌剂中的菌数含量均达到10亿个/ml以上，
本发明含有微生物制剂，与微生物发酵技术相结合，无化学残留，使用安全高效，不会对环境造成污染，且原料充足加工简便，成本低，持效性好，无农残，相互之间可以充分发挥协同降解与相互弥补的作用，分泌多种降解酶类，能够有效的降解除草剂，该复合菌剂在具体使用时可以稀释到1000-2000倍液，降解的效果仍非常明显。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。