拉米夫定的液体药物制剂

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种拉米夫定的液体药物制剂。

背景技术

拉米夫定(Lamivudine)是一种脱氧胞嘧啶核苷类似物，化学名称为(2R,5S)-4-氨基-1-(2-羟甲基-1,3-氧硫杂环戊烷-5-基)-(1H)-嘧啶-2-酮，分子式：C

拉米夫定是由葛兰素·史克公司研制开发的核苷类抗病毒药物，拉米夫定对体外及实验性感染动物体内的乙型肝炎病毒(HBV)有较强的抑制作用。对大多数乙型肝炎患者的血清HBV DNA检测结果表明，拉米夫定能迅速抑制HBV复制，其抑制作用持续于整个治疗过程，同时使血清氨基转移酶降至正常。长期应用可显著改善肝脏坏死炎症性改变，并减轻或阻止肝脏纤维化的进展。核苷酸是合成人体遗传物质DNA和RNA的原料。核苷类似物在结构上模拟核苷酸的结构，拉米夫定模拟的是乙型肝炎病毒的胞嘧啶，其结构与人的天然的胞嘧啶结构不同，能够作用于病毒，减少对人体产生的副作用。

拉米夫定溶解性差，其片剂溶出慢，并且片剂易吸潮，导致片剂硬度降低，表面产生吸潮斑点，最终影响疗效，即片剂稳定性差。

本领域技术人员公知药物在体内吸收速度常常由溶解的快慢而决定，固体制剂中的药物在被吸收前，必须经过崩解和溶解然后转为溶液的过程，如果药物不易从制剂中释放出来或药物的溶解速度极为缓慢，则该制剂中药物的吸收速度或程度就会受到影响，大多数口服固体制剂在给药后必须经吸收进入血液循环，达到一定血药浓度后方能奏效，因此药物从制剂内释放出并溶解于体液是被吸收的前提。溶出度测试作为在体外对体内药物生物利用度进行研究和评价的有效的替代方法，能够间接反映出体内的溶出吸收过程，初始溶出度低的药物在体内达到稳态血药浓度所需的时间较长，发挥药效的时间也相应延长，影响药物的治疗效果。

发明内容

本发明的目的在于提出一种拉米夫定的液体药物制剂，采用离子液体将其溶解，增加药用活性成分的溶解度，提高药用活性成分生物膜通过性，从而提高拉米夫定的生物利用率，加速药效发挥。

本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供一种拉米夫定的液体药物制剂，其由以下组分组成：

有效量的微粉化的拉米夫定或其药学可接受的盐；

离子液体；

吸收促进剂；

水；

以及任选的以下成分：酸碱调节剂、渗透压调节剂、增稠剂、防腐剂；

所述离子液体为烷基咪唑类离子液体，具有如式Ⅰ所示结构：

其中，R

作为本发明的进一步改进，所述吸收促进剂选自甲基-β-环糊精、二甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺甲基醚-β-环糊精、麦芽糖基-β-环糊精、月桂氮中的一种或几种混合。

作为本发明的进一步改进，所述拉米夫定或其药学可接受的盐包括拉米夫定与有机酸或无机酸所形成的盐。

作为本发明的进一步改进，所述拉米夫定或其药学可接受的盐包括拉米夫定与柠檬酸、草酸、马来酸、富马酸、酒石酸、盐酸、硫酸、氢溴酸、磷酸或硝酸形成的盐。

作为本发明的进一步改进，所述酸碱调节剂选自枸橼酸、乳酸、苹果酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、盐酸、磷酸、硫酸、硝酸、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或几种混合；所述防腐剂选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、苯甲酸钠、苯甲醇、三氯叔丁醇中的一种或几种混合；所述渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、硼酸、硼砂中的一种或几种混合；所述增稠剂选自卡波姆、交联聚丙烯酸钠、泊洛沙姆、聚乙烯醇、海藻酸钠、甘油、丙二醇中的一种或几种混合。

作为本发明的进一步改进，所述液体药物组合物包含0.1～20wt％的拉米夫定或其药学可接受的盐。

作为本发明的进一步改进，所述药物液体组合物的一次剂量在1ml至10ml的范围内。

作为本发明的进一步改进，其具有如下配方：

配方1：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物；或，

配方2：微粉化的拉米夫定500mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、尼泊金甲酯0.1g、甘油2g、苹果酸1.2g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将苹果酸、氯化钠、麦芽糖基-β-环糊精、甘油、尼泊金甲酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物；或，

配方3：微粉化的拉米夫定900mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、苯甲酸钠0.1g、卡波姆2g、富马酸1.9g、氢氧化钠0.1g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将富马酸、氢氧化钠、氯化钠、二甲基-β-环糊精、卡波姆、苯甲酸钠加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物，得到本发明的液体组合物。

作为本发明的进一步改进，其呈经鼻给药的剂型。

作为本发明的进一步改进，其是喷鼻剂、滴鼻剂。

本发明具有如下有益效果：由于拉米夫定溶解性较差，采用离子液体将其溶解，增加药用活性成分的溶解度，提高药用活性成分生物膜通过性，从而提高拉米夫定的生物利用率，加速药效发挥，采用烷基化咪唑型离子液体，其具有极好的亲水性，与水可互溶，从而不影响液体药物组合物的剂型，制得的液体药物组合物具有较好的相容性、稳定性，保质期长，可液体给药，适用于吞咽困难患者，具有广阔的应用前景；

根据本发明，喷雾泵和定量泵的选择：在鼻腔给药的剂型有滴鼻剂、气雾剂、喷雾剂、凝胶剂、微球、微粒和毫微粒、脂质体和乳剂等。根据临床用药的方便性、工业化生产可行性和上述剂型的特点综合分析，本发明优选喷雾剂和滴鼻剂。本发明优选的组合物具有良好的药物吸收特性。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明测试例2中化合物1的结构图；

图2为本发明测试例2中化合物2的结构图；

图3为本发明测试例3中均值血药浓度-时间曲线途。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1-10中离子液体均购于广州雷诺生物科技有限公司。

实施例1

原料组成：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例2

原料组成：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例3

原料组成：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例4

原料组成：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例5

原料组成：微粉化的拉米夫定300mg、乳酸0.5g、月桂氮酮0.5g、海藻酸钠1.0g、尼泊金乙酯0.1g、葡萄糖5g、离子液体7g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将乳酸、葡萄糖、月桂氮酮、海藻酸钠、尼泊金乙酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例6

原料组成：微粉化的拉米夫定500mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、尼泊金甲酯0.1g、甘油2g、苹果酸1.2g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将苹果酸、氯化钠、麦芽糖基-β-环糊精、甘油、尼泊金甲酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例7

原料组成：微粉化的拉米夫定500mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、尼泊金甲酯0.1g、甘油2g、苹果酸1.2g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将苹果酸、氯化钠、麦芽糖基-β-环糊精、甘油、尼泊金甲酯加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物。

实施例8

原料组成：微粉化的拉米夫定900mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、苯甲酸钠0.1g、卡波姆2g、富马酸1.9g、氢氧化钠0.1g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将富马酸、氢氧化钠、氯化钠、二甲基-β-环糊精、卡波姆、苯甲酸钠加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物，得到本发明的液体组合物。

实施例9

原料组成：微粉化的拉米夫定900mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、苯甲酸钠0.1g、卡波姆2g、富马酸1.9g、氢氧化钠0.1g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将富马酸、氢氧化钠、氯化钠、二甲基-β-环糊精、卡波姆、苯甲酸钠加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物，得到本发明的液体组合物。

实施例10

原料组成：微粉化的拉米夫定900mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、苯甲酸钠0.1g、卡波姆2g、富马酸1.9g、氢氧化钠0.1g、氯化钠0.9g、离子液体10g、水至100g；

所述离子液体结构式为：

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定溶于离子液体中，将富马酸、氢氧化钠、氯化钠、二甲基-β-环糊精、卡波姆、苯甲酸钠加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物，得到本发明的液体组合物。

对比例1

与实施例10相比，离子液体替换页去离子水。

原料组成：微粉化的拉米夫定900mg、麦芽糖基-β-环糊精2.5g、苯甲酸钠0.1g、卡波姆2g、富马酸1.9g、氢氧化钠0.1g、氯化钠0.9g、去离子水10g、水至100g；

该配方的组合物的制法为：将上述量微粉化的拉米夫定加入去离子水中，将富马酸、氢氧化钠、氯化钠、二甲基-β-环糊精、卡波姆、苯甲酸钠加入适量蒸馏水中充分搅匀全部溶解，将离子液体和溶液混合，最后补加蒸馏水至100ml，得到液体组合物，得到液体组合物，为悬浊液，没有完全溶解。

测试例1

将本发明实施例1-10和对比例1得到的液体组合物相对于总液体重量以5.0重量％加入作为增溶剂的聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、聚氧乙烯辛基十二烷基醚、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80中的每一种来制备液体组合物。将该液体组合物在室温条件(25℃、60％)下留置以检查是否发生沉淀，并且测量在样品容器的底部上以5.0体积％发生沉淀时的时间点(天数)。结果在以下表1中示出。

表1

如可以在表1中看到的，可以确认，作为应用增溶剂的结果形成了5.0体积％以上的沉淀，并且该增溶剂并不有助于防止沉淀，采用本发明方法制得的液体组合物在各组实验中沉淀时间均大于60天(除再实施例6添加了聚山梨醇酯80为57天以外)，可见，本发明液体组合物能够明显增加难溶物的溶解度，有效防止沉淀，明显优于对比例1。

测试例2稳定性试验

根据实施例10和对比例1制备的液体药物组合物中的拉米夫定溶液分别在+5℃、+25℃和+40℃达到稳定12个月。利用HPLC-UV检测法检测拉米夫定及其降解产物化合物1(结构如图1)和化合物2(结构如图2)的浓度。结果在下表2-5中示出，以拉米夫定的标称浓度表示(％的标示量)。

表2

根据实施例10制备液体药物组合物。

表3

根据实施例10制备液体药物组合物。

表4

根据实施例10制备液体药物组合物。

表5

根据对比例1制备液体药物组合物。

表6

根据对比例1制备液体药物组合物。

表7

根据对比例1制备液体药物组合物。

结果显示，在所有储存条件下，根据本发明的制剂(表2-4)比对比例溶液(表5-7)更稳定。在对照溶液中，拉米夫定大量降解为主要降解产物化合物1，并部分进一步降解为二级降解产物化合物2。因此对于参比溶液拉米夫定和降解产物之间不可能获得质量平衡。

测试例3药代动力学

1.试药

拉米夫定对照品，四川大学华西药学院药物化学教研室提供,批号20190102；实施例1-10和对比例1制得的液体药物组合物；贺普丁葛兰素史克制药有限公司生产,批号05070020,规格240mL/瓶。

2.材料

健康大鼠18只(四川大学基础医学院动物中心提供),体重170-230g,雌雄各半,随机分为实施例10和对比例1组和贺普丁口服溶液组,每组6只。

3.动物试验模型及给药方式的选择

理想的动物试验模型应以大鼠灌胃给药后进行药动学研究。本试验采用大鼠灌胃给药,旨在考察药物在大鼠体内的血药参数,进一步研究液体组合物与贺普丁口服溶液在大鼠体内的代谢过程有无显著性差异。本试验采用灌胃的方式。一般大鼠灌胃体积约为2mL,根据文献报道以及预试结果,给药量约为1500mL/kg(有效药量为13.5mg/kg)时可获得较好的检测灵敏度和分析结果。按此计算,一只约200g大鼠的给药量约为300mL(有效药量为2.7mg)。

4.试验方法

大鼠在试验前适应性喂养4天,全程不禁饮水；称取体重,以36mL/kg计算,分别于灌胃给药后30min、45min、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h自断尾创面处取血,血样经肝素钠抗凝后分取血浆。置-24℃冰箱中保存待测。

5.血药浓度的测定

血浆样品测定取上述采集的血浆样品，与对照品拉米夫定溶液(100μg/mL)进行液相色谱检测，判断拉米夫定的吸收峰位置，根据吸收峰面积与对照品相比，得出血浆样品中拉米夫定的含量，三组大鼠的拉米夫定经时血药浓度数据分别见表8,均值药-时曲线分别见图3。

表8

从均值血药浓度-时间曲线(图3)可知,灌胃给予实施例10液体组合物后,拉米夫定达峰时间约为45min,在约30分钟时就能达到较高血药浓度,且在10小时后血浆中的拉米夫定已几乎完全消除,由此可知,本发明实施例10制得的液体组合物经灌胃给药后,吸收快,达峰时间短。明显优于普通贺普丁口服液以及对比例1。

以N,N-二烷基咪唑为阳离子、以BF

与现有技术相比，由于拉米夫定溶解性较差，采用离子液体将其溶解，增加药用活性成分的溶解度，提高药用活性成分生物膜通过性，从而提高拉米夫定的生物利用率，加速药效发挥，采用烷基化咪唑型离子液体，其具有极好的亲水性，与水可互溶，从而不影响液体药物组合物的剂型，制得的液体药物组合物具有较好的相容性、稳定性，保质期长，可液体给药，适用于吞咽困难患者，具有广阔的应用前景；

根据本发明，喷雾泵和定量泵的选择：在鼻腔给药的剂型有滴鼻剂、气雾剂、喷雾剂、凝胶剂、微球、微粒和毫微粒、脂质体和乳剂等。根据临床用药的方便性、工业化生产可行性和上述剂型的特点综合分析，本发明优选喷雾剂和滴鼻剂。本发明优选的组合物具有良好的药物吸收特性。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。